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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
CARRERA DE ODONTOLOGÍA
Eficacia antibacteriana de agua ozonizada e hipoclorito de sodio en la eliminación
del Enterococcus Faecalis
Trabajo de titulación previo a la obtención del Título de Odontóloga
AUTOR: Escobar Carrillo Maryuri Viviana
TUTOR: Dra. Gabriela Nataly Tapia Tapia
Quito, noviembre 2020
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II
DERECHOS DE AUTOR
Yo, Maryuri Viviana Escobar Carrillo en calidad de autor y titular de los derechos morales
y patrimoniales del trabajo de titulación EFICACIA ANTIBACTERIANA DE AGUA
OZONIZADA E HIPOCLORITO DE SODIO EN LA ELIMINACIÓN DEL
ENTEROCOCCUS FAECALIS, modalidad Proyecto de Investigación, de conformidad
con el Art. 114 del CÓDIGO ORGÁNICO DE LA ECONOMÍA SOCIAL DE LOS
CONOCIMIENTOS, CREATIVIDAD E INNOVACIÓN, concedo a favor de la
Universidad Central del Ecuador una licencia gratuita, intransferible y no exclusiva para el
uso no comercial de la obra, con fines estrictamente académicos. Conservo a mi favor todos
los derechos de autor sobre la obra, establecidos en la normativa citada.
Así mismo, autorizo a la Universidad Central del Ecuador para que realice la digitalización
y publicación de este trabajo de titulación en el repositorio virtual, de conformidad a lo
dispuesto en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior.
La autora declara que la obra objeto de la presente autorización es original en su forma de
expresión y no infringe el derecho de autor de terceros, asumiendo la responsabilidad por
cualquier reclamación que pudiera presentarse por esta causa y liberando a la Universidad
de toda responsabilidad.
Firma:
Maryuri Viviana Escobar Carrillo
C.C. 060494615-2
Dirección electrónica: [email protected]
mailto:[email protected]
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III
APROBACIÓN DEL TUTOR
Yo, Dra. Gabriela Nataly Tapia Tapia, en mi calidad de Tutora del Trabajo de Titulación,
presentado por MARYURI VIVIANA ESCOBAR CARRILLO, para optar por el Grado
de Odontóloga; cuyo título es: EFICACIA ANTIBACTERIANA DE AGUA
OZONIZADA E HIPOCLORITO DE SODIO EN LA ELIMINACIÓN DEL
ENTEROCOCCUS FAECALIS, considero que el mismo reúne los requisitos y méritos
suficientes para ser sometido a la presentación pública y evaluación por parte del tribunal
examinador que se designe.
Además, CERTIFICO que existe coincidencia de la metodología presentada en el Proyecto
y Trabajo Final.
En la Ciudad de Quito, el 2 de octubre del 2020
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Dra. Gabriela Nataly Tapia Tapia
DOCENTE-TUTORA
CC. 0503046773
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IV
APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN ORAL/TRIBUNAL
El Tribunal constituido por: Dra. Daniela Hidalgo y Dra. Silvana Terán.
Luego de receptar la presentación oral del trabajo de titulación previo a la obtención del
título de Odontóloga presentado por la señorita ESCOBAR CARRILLO MARYURI
VIVIANA. Con el título: “EFICACIA ANTIBACTERIANA DE AGUA OZONIZADA
E HIPOCLORITO DE SODIO EN LA ELIMINACIÓN DEL ENTEROCOCCUS
FAECALIS”.
Emite el siguiente veredicto:
Fecha:
Para constancia de lo actuado firman.
Nombre Apellido Calificación Firma
Presidente. ______________ _______________
Vocal. _______________ _______________
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V
DEDICATORIA
Mi trabajo se lo dedico: A ti Marianita
por ser mi apoyo y guía constante,
por ser luz brillante en mis días grises,
por ser mi abrazo cálido y fresco todos los días,
por enseñarme a luchar por lo que uno quiere en la vida, gracias Mamá.
A mis dos hermanos Johanna y Marcelo por ser mi pacto
de amor para toda la vida.
A mi cuñado David por ser apoyo y amigo.
A mi sobrino Toñito por ser el terremoto
que me sacude todos los días.
A ti Leonardo por ser, estar y caminar junto a mí.
Maryuri Viviana
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VI
AGRADECIMIENTOS
Gracias a DIOS por permitirme crecer,
formarme y valorar el tiempo que tenemos con nuestra familia.
Quiero agradecer a la Doctora Gabriela Tapia
por el tiempo dedicado a la culminación
de esta etapa de mi vida.
A los amigos que formaron parte
fundamental en este proceso
de crecimiento tanto personal como
profesional.
Maryuri Viviana
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VII
ÍNDICE DE CONTENIDOS
DERECHOS DE AUTOR ................................................................................................. ii
APROBACIÓN DEL TUTOR ......................................................................................... iii
APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN ORAL/TRIBUNAL ..................................... iv
DEDICATORIA ................................................................................................................v
AGRADECIMIENTOS ................................................................................................... vi
ÍNDICE DE CONTENIDOS ........................................................................................... vii
LISTA DE TABLAS ....................................................................................................... ix
LISTA DE GRÁFICOS O FIGURAS ................................................................................x
LISTA DE ANEXOS ....................................................................................................... xi
RESUMEN ..................................................................................................................... xii
ABSTRACT .................................................................................................................. xiii
CAPÍTULO 1 ....................................................................................................................1
1.1. INTRODUCCIÓN ...................................................................................................1
1.2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .................................................................2
1.3. OBJETIVOS............................................................................................................2
1.3.1 Objetivo General...........................................................................................2
1.3.2 Objetivos Específicos....................................................................................2
1.4. JUSTIFICACIÓN ....................................................................................................3
1.5 HIPÓTESIS ..............................................................................................................4
1.5.1 Hipótesis de la Investigación (H1) ......................................................................4
1.5.2 Hipótesis Nula (H0) ...........................................................................................4
CAPÍTULO II ....................................................................................................................4
2. REVISIÓN DE LA LITERATURA (MARCO TEÓRICO) ........................................4
2.1 Biofilm .................................................................................................................4
2.1.1 Formación del Biofilm ...................................................................................4
2.1.2 Mecanismo de defensa de los biofilm.............................................................5
2.1.3 Biofilm de los conductos radiculares ..............................................................5
2.2. Enterococcus Faecalis ..........................................................................................6
2.2.1. Generalidades de los Enterococcus ...............................................................6
2.2.2 Definición ......................................................................................................6
2.2.3 Virulencia ......................................................................................................7
2.2.4 Implicación en Endodoncia ............................................................................7
2.3 Irrigantes en Endodoncia .......................................................................................8
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VIII
2.3.1 Tipos de irrigantes más usados en Endodoncia ...............................................8
2.3.1.1 Hipoclorito de Sodio ...............................................................................8
2.3.1.2 Gluconato de Clorhexidina .................................................................... 10
2.3.1.3 Ácido Etilendiaminotetracético (EDTA) ............................................... 10
2.4 Ozono ................................................................................................................. 11
2.4.1 Propiedades físicas y químicas ..................................................................... 11
2.4.2 Mecanismo de acción ................................................................................... 12
2.4.3 Asociaciones ................................................................................................ 12
2.4.3.1 Agua ozonizada..................................................................................... 12
2.4.3.2 Ozono Gaseoso ..................................................................................... 13
2.4.3.3 Aceite Ozonizado .................................................................................. 13
2.4.4 Ozono en Endodoncia .................................................................................. 13
CAPITULO III ................................................................................................................ 14
3. METODOLOGÍA..................................................................................................... 14
3.1. Diseño de la investigación .................................................................................. 14
3.2. Población de estudio y muestra .......................................................................... 14
3.3. Criterios de inclusión y exclusión ....................................................................... 15
3.4. Definición operacional de las variables .............................................................. 16
3.5. Estandarización .................................................................................................. 17
3.6. Manejo de métodos y recolección de datos ......................................................... 17
3.7. Análisis Estadístico ............................................................................................ 23
3.8. Aspectos Bioéticos ............................................................................................. 23
CAPÍTULO IV ................................................................................................................ 25
4. RESULTADOS ........................................................................................................ 25
4.1. Análisis de Resultados .................................................................................... 25
4.2. Discusión ....................................................................................................... 34
CAPÍTULO V.................................................................................................................. 37
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ......................................................... 37
5.1. Conclusiones ...................................................................................................... 37
5.2. Recomendaciones............................................................................................... 38
6. BIBLIOGRAFÍA ...................................................................................................... 39
7. ANEXOS ................................................................................................................. 45
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IX
LISTA DE TABLAS
Tabla 1: Operacionalización de las variables ................................................................... 16
Tabla 2: Identificación de muestras ................................................................................. 25
Tabla 3: Resultados de halos de inhibición de Agua Ozonizada e Hipoclorito de Sodio y
sustancias control pasadas 24 horas .................................................................................. 25
Tabla 4: Estadística descriptiva de los resultados de cada GRUPO A-B-C-D .................. 27
Tabla 5: Cuadro de elección estadística GRUPO A-B-C-D ............................................. 29
Tabla 6: Prueba de normalidad ........................................................................................ 30
Tabla 7: Prueba de normalidad ........................................................................................ 30
Tabla 8: Prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis .......................................................... 31
Tabla 9: Prueba de significancia de Kruskal-Wallis. ........................................................ 32
Tabla 10: Resultados de la comparación dos a dos........................................................... 32
Tabla 11: Prueba de significancia de Kruskal-Wallis – Comparación entre parejas .......... 33
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X
LISTA DE GRÁFICOS O FIGURAS
Figura 1. Agua Ozonizada e Hipoclorito de Sodio ........................................................... 17
Figura 2. Activación de la cepa de Enterococcus Faecalis ............................................... 18
Figura 3. Hisopado e Incubación de la cepa de Enterococcus Faecalis ............................. 18
Figura 4. Elaboración del caldo nutritivo ......................................................................... 19
Figura 5. Grado de Turbidez de 0.5 en la escala de McFarland ........................................ 19
Figura 6. Hisopado en el medio de cultivo agar Mueller Hinton ...................................... 20
Figura 7. Medios de cultivo rotulados ........................................................................... 20
Figura 8. Discos de papel impregnados con las sustancias .............................................. 21
Figura 9. Cajas petri en campana de anaerobiosis ........................................................... 21
Figura 10. Medición de halos de inhibición .................................................................... 22
Figura 11. Histograma de datos Grupo A-B-C-D ............................................................. 27
Figura 12. Promedio Grupo A-B-C-D ............................................................................. 28
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XI
LISTA DE ANEXOS
Anexo A: Carta de aceptación y responsabilidad del tutor ................................................ 45
Anexo B. Inscripción del tema en la unidad de Titulación ................................................ 46
Anexo C: Oficio de Ajuste de Metodología ..................................................................... 48
Anexo D. Oficio de no reflejar coincidencia de tema en biblioteca ................................... 50
Anexo E. Carta de idoneidad del investigador .................................................................. 51
Anexo F. Carta de idoneidad del tutor .............................................................................. 52
Anexo G. Carta de conflicto de intereses del investigador ................................................ 53
Anexo H. Carta de conflicto de intereses del tutor............................................................ 54
Anexo I. Carta de confidencialidad .................................................................................. 55
Anexo J. Oficio de la autorización de la institución donde se realiza el estudio ............... 58
Anexo K. Hoja de recolección de datos ........................................................................... 59
Anexo L. Certificado de Autenticidad de la cepa de Enterococcus Faecalis..................... 61
Anexo M. Certificado de elaboración de agua ozonizada ................................................ 63
Anexo N. Certificado de manejo de desechos................................................................... 64
Anexo O. Protocolo de manejo de desechos ..................................................................... 65
Anexo P. Certificado de renuncia a la autoría del laboratorio. .......................................... 66
Anexo Q. Certificado de resultados obtenidos en el análisis microbiológico .................... 67
Anexo R. Certificado de viabilidad ética, otorgado por el Subcomité de ética en seres
humanos de la UCE. ........................................................................................................ 68
Anexo S. Certificado de renuncia de derechos de autor y propiedad intelectual del trabajo
estadístico ........................................................................................................................ 69
Anexo T. Certificado de Antiplagio ................................................................................. 70
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XII
TÍTULO: Eficacia antibacteriana de Agua Ozonizada e Hipoclorito de Sodio en la
eliminación del Enterococcus Faecalis
Autor: Maryuri Viviana Escobar Carrillo
Tutor: Gabriela Nataly Tapia Tapia
RESUMEN
El objetivo del presente estudio fue comprobar la eficacia antibacteriana de agua ozonizada
al 5% e Hipoclorito de sodio al 5,25%, en la eliminación del Enterococcus faecalis.
Materiales y Métodos: Estudio experimental, in vitro, aplicado sobre una muestra no
probabilística conformada por 40 cajas petri con agar sangre Mueller Hinton con cultivos de
Enterococcus Faecalis, divididos en 4 grupos, que se analizaron a las 24 horas después de la
inoculación, colocando 4 discos de papel impregnados: Grupo A con Agua Ozonizada al
5%, Grupo B con Hipoclorito de Sodio al 5.25%, Grupo C con Hipoclorito de Sodio al 2.5%
(control positivo) y Grupo D con Suero Fisiológico (control negativo), luego se midió el halo
de inhibición con una regla milimetrada. Resultados: A los datos obtenidos se les aplicó la
prueba de normalidad Kolmogórov-Smirnov, además se aplicó la prueba Kruskal-Wallis,
donde se obtuvo p< 0.05 lo que indica que no tienen diferencias significativas en los grupos
A y B. Conclusiones: Al comparar el Agua Ozonizada y el Hipoclorito de Sodio se puede
concluir que ambas sustancias resultan eficaces en la reducción de carga bacteriana de
conductos radiculares humanos, pudiendo ser usadas como irrigantes en los protocolos
endodónticos.
PALABRAS CLAVES: AGUA OZONIZADA, EFICACIA ANTIBACTERIANA,
ENTEROCOCCUS FAECALIS, HIPOCLORITO DE SODIO.
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XIII
TITLE: Antibacterial efficacy of Ozonated Water and Sodium Hypochlorite in the
elimination of Enterococcus Faecalis
Autor: Maryuri Viviana Escobar Carrillo
Tutor: Gabriela Nataly Tapia Tapia
ABSTRACT
The objective of the present study was to verify the antibacterial efficacy of 5% ozonated
water and 5.25% sodium hypochlorite, in the elimination of Enterococcus faecalis.
Materials y Methods: Experimental in vitro study applied to a non-probabilistic sample
made up of 40 petri dishes with Mueller Hinton blood agar with Enterococcus Faecalis
cultures, divided into 4 groups, which were analyzed 24 hours after inoculation, placing 4
paper discs impregnated: Group A with Ozonated Water at the 5%, Group B 5.25% Sodium
Hypochlorite, Group C 2.5% Sodium Hypochlorite (positive control) and Group D
Physiological Serum (negative control), then the inhibition halo was measured with a
millimeter rule. Results: The results were entered into a database in the SPSS 24 version
program. The Kolmogórov-Smirnov normality test was applied as well as the Kruskal-
Wallis test. Conclusions: When comparing Ozonated Water and Sodium Hypochlorite, it
can be concluded that both substances are effective in reducing the bacterial load of human
root canals, and can be used as irrigants in endodontic protocols.
KEYWORDS: OZONATED WATER, ANTIBACTERIAL EFFICACY,
ENTEROCOCCUS FAECALIS, SODIUM HYPOCHLORITE.
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CAPÍTULO 1
1.1. INTRODUCCIÓN
Uno de los objetivos de la Endodoncia es mantener el órgano dentario en su posición a largo
plazo, el éxito de los tratamientos de conductos está íntimamente asociado con la reducción
de la carga microbiana endodóntica, estudios in vitro y la práctica clínica diaria han
considero, que por sí sola la instrumentación mecánica sea cual fuera la técnica, no es
suficiente para la eliminación de los microorganismos que están presentes en el conducto,
por lo tanto, es necesario la presencia de un irrigante químico. (1) (2)
Se ha utilizado con irrigante de elección al Hipoclorito de sodio, ya que cumple con la
mayoría de requisitos de un irrigante ideal, portando confiables resultados en la eliminación
de los microorganismos, sin embargo, la efectividad que posee esta sustancia puede verse
afectada por diferentes factores como lo son: su concentración, el tiempo de exposición o la
temperatura. (3)
Un mal uso de este irrigante podría provocar desde un hematoma hasta una quemadura, en
caso de que se produzca un contacto por vía radicular el daño en el tejido periapical podría
llegar hasta una necrosis ósea. (1)
El causante principal de un fracaso endodóntico es atribuido al Enterococcus faecalis. (4) La
prevalencia de encontrarlo en un conducto radicular infectado es de aproximadamente un
90%. (5)
Por lo tanto, el campo endodóntico se ha concentrado en la búsqueda de nuevos métodos de
desinfección e irrigantes que ayuden a la instrumentación y tengan compatibilidad con el ser
humano. (6)
Actualmente se considera que el ozono produce alteraciones en la membrana por ozonólisis
de los ácidos grasos insaturados de la pared bacteriana y que actúa como bactericida,
virucida, microbicida, parasiticida y fungicida. (7)
Dentro de este contexto se realizó el estudio con el fin de comprobar la eficacia que tiene el
agua ozonizada sobre el Enterococcus Faecalis.
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2
1.2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
La preparación químico – mecánica ha demostrado que no produce una desinfección
completa del conducto radicular debido a varios factores, el Enterococcus faecalis tiene la
capacidad de sobrevivir y crecer a temperaturas elevadas, resistir a cambios de pH
persistiendo a la acción de diversos irrigantes y medicación intraconducto empleados para
la desinfección del conducto radicular. (8)
Las sustancias que cumplen el papel de irrigantes sean estas solas o en combinación son
efectivas para la eliminación de bacterias, disolución de tejidos, lubricación de conductos,
así como la eliminación del barrillo dentinario (9) pero estas sustancias irrigadoras
desinfectantes no eliminan en totalidad la carga bacteriana presente en los conductos
radiculares. (10)
Por esto el presente estudio se enfoca en determinar si el agua ozonizada al actuar como
irrigante endodóntico tiene mayor o igual efectividad de desinfección que el hipoclorito de
sodio.
Entonces se plantea la siguiente pregunta:
¿Será que el agua ozonizada tiene mayor o igual eficacia antibacteriana que el hipoclorito
de sodio frente al Enterococcus Faecalis?
1.3. OBJETIVOS
1.3.1 Objetivo General
Comprobar la eficacia antibacteriana de agua ozonizada al 5% e Hipoclorito de sodio al
5,25%, en la eliminación del Enterococcus faecalis.
1.3.2 Objetivos Específicos
Identificar la eficacia antibacteriana mediante halos de inhibición producidos por el
contacto de agua ozonizada al 5% sobre el Enterococcus faecalis.
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3
Identificar la eficacia antibacteriana mediante halos de inhibición producidos por el
contacto del Hipoclorito de Sodio al 5,25% sobre el Enterococcus Faecalis.
Comparar la eficacia antibacteriana de Agua Ozonizada al 5% con relación al
Hipoclorito de Sodio al 5,25% sobre el Enterococcus faecalis.
1.4. JUSTIFICACIÓN
El tratamiento endodóntico hace énfasis en la instrumentación y desinfección con agentes
irrigantes que se realiza en los conductos radiculares de las piezas dentales, su objetivo es
eliminar el tejido orgánico e inorgánico, además de eliminar los microorganismos presentes.
(11)
De esta manera el tratamiento endodóntico busca la obtención de un conducto radicular
limpio, que posteriormente pueda ser sellado tridimensionalmente, previniendo así una
reinfección. (12)
Se ha utilizado el Hipoclorito de Sodio como un irrigante ideal debido a su amplio espectro
antimicrobiano que posee la capacidad de disolver el tejido necrótico pese a poseer un olor
fuerte mientras que la clorhexidina es también utilizada como irrigante debido a su amplia
actividad microbiana, sustantividad y baja toxicidad. (13) (14)
El Enterococcus faecalis en ocasiones puede ser altamente resistente a medicamentos e
irrigantes antimicrobianos durante el tratamiento endodóntico, siendo una bacteria gram
positiva, facultativa, anaerobia, está bacteria está asociada comúnmente con periodontitis
crónica. (15) (16)
El ozono se adhiere a los tejidos orales por diferentes vehículos como agua y aceite, tiene
niveles bajos de toxicidad siendo un desinfectante compatible con el organismo. (17)
El ozono posee un alto potencial de oxidación y es 1.5 veces más poderoso que el cloruro
cuando se usa como agente antimicrobiano contra los microorganismos. (18)
La supervivencia de los microorganismos entre ellos el Enterococcus faecalis en la región
apical de los dientes juega un papel importante en el fracaso de los tratamientos endodónticos
(19).
Esta investigación aportará relevancia científica comprobando la utilización de nuevos
irrigantes de conductos radiculares que brindarán un beneficio compartido para el
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profesional endodoncista y para el paciente endodóntico, buscando así hacer la sugerencia a
la clínica de la facultad de Odontología adquirir un Ozonificador.
1.5 HIPÓTESIS
1.5.1 Hipótesis de la Investigación (H1)
El agua ozonizada al 5% va a tener mayor o igual eficacia antibacteriana comparado
con el Hipoclorito de Sodio al 5.25% frente al Enterococcus Faecalis.
1.5.2 Hipótesis Nula (H0)
El agua ozonizada al 5% va a tener menor eficacia antibacteriana comparado con el
Hipoclorito de Sodio al 5,25% frente al Enterococcus Faecalis.
CAPÍTULO II
2. REVISIÓN DE LA LITERATURA (MARCO TEÓRICO)
2.1 Biofilm
La OMS, nos indica que el biofilm es un ecosistema bacteriano proliferante y
enzimáticamente activo. (15)
Se los considera como una estructura en la cual se asocia una o varias estirpes bacterianas
concentrado en una matriz extracelular de polisacáridos que ellas mismo producen y que se
encuentra adherida a una superficie o al sustrato. (15)
El Biofilm que se localiza en la región apical es clínicamente importante, ya que estos son
altamente resistentes a los agentes antimicrobianos, por sí solos no pueden ser removidos
con la ayuda de la preparación biomecánica y podrían conducir directamente a fracasos
endodónticos como consecuencia de infecciones persistentes. (20)
2.1.1 Formación del Biofilm
La formación del biofilm se produce en cuatro fases:
I. Se forma una especie de película adhesiva encima de la dentina promovida por el
depósito de proteínas y otros compuestos derivados de las bacterias en suspensión,
del proceso de necrosis y de la inflamación. (15)
-
5
II. Sobre esta película que es bastante viscosa, se fijan algunas bacterias específicas que
tienen la capacidad de adhesión, de todas las demás bacterias que están en
suspensión. (15)
III. La primera capa de bacterias ya adherida, empieza a segregar mediadores que, por
un lado, van fijando más y más bacterias, de la misma estirpe o de otras, y por otro,
va formando la matriz extracelular de polisacárido, que va a consistir en la primera
barrera defensiva característica del biofilm. (15)
IV. En la última etapa el biofilm va ya madurando y creando un sistema de defensa más
complejo, arrojando las bacterias al exterior que cronifican la respuesta inflamatoria
del huésped. (15)
2.1.2 Mecanismo de defensa de los biofilm
Los ecosistemas bacterianos se caracterizan por su alta resistencia que se ve aumentada en
su interior, es decir en el sistema de conductos ya que son zonas de difícil acceso para los
agentes desinfectantes debido a la anatomía, la matriz de polisacáridos proporciona una
barrera física y química evitando así que penetren sustancias nocivas para el complejo
bacteriano manteniendo de esta manera un ambiente interior adecuado para la supervivencia.
(15) (21)
Los biofilms bacterianos pueden ir desprendiendo las bacterias que quedan desde su interior
de forma progresiva para “desviar la atención” de los mecanismos de defensa del huésped,
lo que ocasiona en el paciente signos y síntomas, desde esta manera no permite que se cure
el origen de la infección. (15) (21)
2.1.3 Biofilm de los conductos radiculares
Según Narayanan (22) en 2010, la microflora endodóntica se establece para ser menos
diversa en comparación con la microbiota oral.
Los estudios en microbiología molecular y de cultivo independientes han identificado más
de 1.000 especies – filotipos bacterianos diferentes en la cavidad oral, específicamente, la
diversidad de la microbiota endodóntica también ha sido descifrada por numerosos estudios
de cultivo y moleculares. Colectivamente, se han identificado más de 400 especies – filotipos
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microbianos en diferentes muestras endodónticas de dientes con diferentes patologías
pulpares. (10)
Las especies bacterianas que se han encontrado en los biofilms endodónticos son cocos,
bacilos, filamentos y espiroquetas, el género Prevotella se observa muy frecuentemente ya
que posee la capacidad de coagregarse y autoagregarse, el Enterococcus Faecalis se observa
en los conductos y tiene una gran resistencia debido a que posee la capacidad de asociarse
en forma de biofilm, siendo esta bacteria el principal causante de los fracasos endodónticos.
(21)
2.2. Enterococcus Faecalis
2.2.1. Generalidades de los Enterococcus
Se presentan en forma de pares o de cadenas cortas.
Las bacterias que pertenecen al género Enterococcus está conformado por más de 30
especies de las cuales muy pocas son consideradas patógenas para el ser humano, pero, hay
excepciones como lo son el E. faecalis, E. faecium, considerando estas especies las más
frecuentes en el tracto gastrointestinal, tracto genitourinario y la saliva. Estas son
consideradas bacterias oportunistas ya que pueden ser el causante de diferentes
enfermedades como son las bacteremias, endocarditis, infecciones neonatales, del tracto
genitourinario y del Sistema Nervioso Central. (23)
2.2.2 Definición
El Enterococcus Faecalis perteneciente al grupo de los Enterococcus, siendo una bacteria
que se la encuentra en el intestino y que son comensales normales de los humanos, poseen
la capacidad de adaptarse a disminuciones de oxígeno y ambientes ecológicos complejos,
sin embargo, también se puede encontrar en lengua y surco gingival, llegando a ser
considerado como el microorganismo que lidera los fracasos endodónticos localizándose en
infecciones endodónticas secundarias, biopelículas periapicales, y , lesiones infectadas
refractarias. (24) (5)
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2.2.3 Virulencia
Entre los factores de virulencia que posee el Enterococcus faecalis se incluyen enzimas
líticas, citolisina, sustancia de agregación, feromonas y ácido lipoteicoico, estas enzimas se
adhiere a las células huésped, produciendo proteínas que le permiten competir con otras
células bacterianas, alterando las respuestas del huésped (25), puede también suprimir la
acción que posee los linfocitos, y así contribuir al fracaso endodóntico. (26)
Es capaz de compartir ciertos rasgos de virulencia entre las especies, ayudando así a
incrementar la supervivencia y capacidad de causar enfermedades, contribuyendo estos
factores o no con las características innatas del microrganismo para causar las enfermedades,
debido a que depende menos de los factores de virulencia y más de la capacidad para
sobrevivir y persistir como un agente infeccioso en los conductos radiculares de los dientes.
(27)
2.2.4 Implicación en Endodoncia
La presencia común en los conductos radiculares de Enterococcus Faecalis, donde el
tratamiento endodóntico ha fracasado sugiere que este es un patógeno oportunista, cuya
persistencia en los conductos radiculares representa un importante problema terapéutico.
Una vez que el microorganismo se instala dentro del sistema de conductos enfrenta varios
desafíos para garantizar la supervivencia, incluida la capacidad de resistir la acción de los
agentes antimicrobianos utilizados durante el tratamiento endodóntico. (28)
Una de las formas que hacen que esta bacteria sobreviva aun después de finalizar el
tratamiento de conducto es que posee la capacidad de colonizar los túbulos dentinarios para
posteriormente reinfectar los conductos obturados. Tiene la capacidad de resistir largos
periodos de inanición y ha mostrado sobrevivir al hidróxido de calcio durante 10 días. (25)
(29)
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2.3 Irrigantes en Endodoncia
Miliani (30) en 2012 indicó que, se debe irrigar el sistema de conductos antes, durante y
después de la preparación biomecánica para limpiar y desinfectar, asegurando el éxito del
tratamiento endodóntico.
Balandrano (31) en 2007 aseguró que la instrumentación mecánica de los conductos por sí
sola no es capaz de eliminar adecuadamente las bacterias y los residuos pulpares por la
compleja anatomía del sistema de conducto.
Shen (32) en 2015 resaltó que la irrigación posee varias finalidades y actúa de diferentes
maneras según el tipo de irrigante que se esté utilizando: reduce la fricción entre el
instrumento y la dentina, mejora la eficacia de corte de las limas y disuelve la materia
orgánica e inorgánica; también enfría el diente y la lima, tiene un efecto de lavado, elimina
partículas sueltas y bacterias del canal y actúa contra las biopelículas del conducto radicular.
Hay que tener en cuenta que ninguno de los irrigantes puede cubrir por si solo las necesidades
del conducto radicular, es decir, ninguno va a cumplir con las características ideales. (30)
(33)
2.3.1 Tipos de irrigantes más usados en Endodoncia
Los tipos de irrigantes más usados en endodoncia son: Hipoclorito de sodio (NaOCl), Ácido
etilendiaminotetraacético (EDTA) y Clorhexidina (CHX). Como se indicó anteriormente, no
hay un irrigante que cumpla con todos los requisitos ideales que son: ser antibacteriano,
disolver tejido orgánico e inorgánico, poseer sustantividad, lubricar correctamente las
paredes dentinarias y no ser citotóxico. (30) (31)
2.3.1.1 Hipoclorito de Sodio
El hipoclorito de sodio es la sustancia irrigante más utilizada y conocida en el mundo. (30)
(34) (35)
Miliani y Balandrano, indicaron que, es un compuesto químico resultante de la mezcla de
cloro, hidróxido de sodio y agua, es decir está compuesto de cloro activo y se usa en varias
concentraciones de 0.5% a 5.25%. (30) (31)
-
9
Entre las ventajas de la acción del hipoclorito de sodio tenemos las siguientes propiedades:
Saponificación, constituye la capacidad que tiene el irrigante para disolver el tejido orgánico
y graso degradando los ácidos grasos y transformándolos en sales de ácidos grasos (jabón)
y glicerol (alcohol), reduciendo la tensión superficial de la solución restante. (31) (34) (36)
Cloraminación consiste en una reacción entre el cloro y el grupo amino formando cloraminas
que interfieren en el metabolismo celular, el cloro inhibe enzimas bacterianas por oxidación.
(31) (34)
PH elevado >11, en el que basa su efectividad antimicrobiana ya que interfiere en la
integridad de la membrana citoplasmática de las bacterias. (34) (35)
Además de ser un blanqueador y desodorizante. (36)
Las desventajas que posee el hipoclorito de sodio son:
Presenta alta toxicidad a los tejidos y no elimina la capa de barrillo dentinario, indicaron
Miliani y Castro. (30) (35)
La actividad antimicrobiana que tiene y en cuanto a la disolución de tejidos del hipoclorito
de sodio, se ve afectada por factores como: concentración, temperatura, pH, tiempo de
exposición. (31) (35)
A.- Hipoclorito de sodio al 1%
Conocido como solución de Milton, se considera como la más utilizada; Siqueira Jr. en su
estudio realizado en el 2000, encontró que la irrigación con NaOCl al 1%, de conductos
radiculares infectados con Enterococcus faecalis, se logró una reducción del 56.8%. (37)
(38)
B.- Hipoclorito de sodio al 2,5%
Denominado licor de Labarraque, en el mismo estudio citado anteriormente, se encontró una
reducción del 59.5%, con irrigación de NaOCl al 2.5% en conductos infectados con E.
faecalis. (37) (38)
-
10
C.- Hipoclorito de sodio al 5,25%
Leonardo (37) indicó que, posee un poder germicida de acción rápida; y de la misma manera
Siqueira Jr. (38) indicó la reducción significativa del 65.9%, en los conductos radiculares
infectados con E. faecalis, después de utilizar NaOCl a este porcentaje.
2.3.1.2 Gluconato de Clorhexidina
La clorhexidina absorbida gradualmente es liberada durante más de 24 horas, a esto se lo
llama efecto residual o sustantividad; además, es una sustancia biocompatible, no toxica.
(30) (31)
La concentración utilizada en endodoncia es al 2%, generalmente es preparada bajo
prescripción en farmacias en presentación líquida o gel; además, varios trabajos in vitro que
utilizan una prueba de dilución en caldo han demostrado que el 2.0% de CHX y el 5.25% de
NaOCl tienen un desempeño antimicrobiano similar contra los microorganismos mientras
que otros han demostrado la superioridad de 2% CHX sobre 5,25% de NaOCl utilizando el
método de difusión en agar. (39)
2.3.1.3 Ácido Etilendiaminotetracético (EDTA)
Es un ácido aminopolicarboxílico y un sólido incoloro soluble en agua, se sugiere como un
irrigante ya que tiene la capacidad de quelar y eliminar la porción mineralizada de smear
layer o barrillo dentinario presente en los conductos radiculares. (30) (34) (35)
Sus concentraciones más usadas en endodoncia son 17% y 18%.
Ventajas
La ventaja más importante del EDTA es su capacidad de disolver la porción inorgánica de
los residuos que deja la instrumentación. (35)
Previene el bloqueo apical y contribuye a la desinfección, dejando los túbulos dentinarios
abiertos. (30)
Desventajas
Es incapaz de disolver el tejido orgánico. (30) (34)
-
11
Existe la posibilidad de que si se excede el tiempo dentro del conducto se produzca erosión.
(35)
2.4 Ozono
El ozono es un gas natural inestable el cual se forma de manera natural en la atmósfera de
la Tierra formando una capa protectora, su molécula está formada por tres átomos de
oxígeno (O3) a diferencia del oxígeno puro que solo contiene dos átomos de oxígeno (O2).
(40)
Su olor puede ser detectado por la nariz humana a concentraciones entre 0.02 ppm a 0.05
ppm. (41) (42)
2.4.1 Propiedades físicas y químicas
El gas más importante de la estratosfera es el ozono, este alcanza su máxima concentración
por encima de los 1000 µg/m3 a una altura de 20-30 kilómetros. Es un gas por naturaleza
inestable. (42)
Este gas inestable es de color azul cielo compuesto por tres átomos de oxígeno que es
perceptible a concentraciones de 98,16 µg/m3 – 19,63 µg/m3 debido a esta inestabilidad se
descompone en oxígeno a 200 C en 40 minutos, la velocidad de descomposición se aproxima
a los 105-106 mol/s por lo que no puede almacenarse y debe ser utilizado en el momento, ya
que es muy volátil. Estas características le permiten tener mayor solubilidad en agua 12,5
veces más soluble que el oxígeno, él ozono es el tercer oxidante natural más potente después
del flúor. (42)
El ozono se puede producir por tres fuentes fundamentales de energía: electrolisis química,
descargas eléctricas y radiaciones de luz ultra violeta. De las cuales en las ciencias médicas
la más común es por medio de descargas eléctricas. (42)
-
12
2.4.2 Mecanismo de acción
Entre las características de ser bactericida y esporicida el ozono se manifiesta penetrando la
pared celular y la membrana citoplasmática de los microorganismos, debido a que los
mecanismos de resistencia bacteriana no operan ante la oxidación que el ozono produce al
penetrar la pared de la bacteria. (43)
En su acción antifúngica, este va a atacar los dobles enlaces de la membrana fosfolipídica
de los hongos, generando su destrucción. Frente a los virus, al ser menos compleja la
organización de su pared, y dependiendo en la fase extracelular o intracelular en la que se
encuentren la actividad virisida del ozono se manifiesta rompiendo su cápside, oxidando la
envoltura lipídica, y va a impedir que este se una a un receptor e ingrese a una célula huésped.
(43) (44) (45)
La principal característica del ozono es la de reaccionar con moléculas que tiene doble enlace
entre átomos de carbono (C=C), este va a romper la conexión con la introducción de un
átomo de oxígeno para cada extremo del enlace (2> C=O) y así formar dos compuestos
nuevos, por ese motivo debe ser utilizado con cuidado, ya que este gas tiene estructuras
insaturadas con moléculas de ácidos grasos y proteínas constituyentes de las membranas
biológicas presentes en los tejidos que forman el tracto respiratorio, esto explica su efecto
nocivo. (46)
2.4.3 Asociaciones
2.4.3.1 Agua ozonizada
Esta asociación está tomando importancia e indican que el ozono en agua está presente en
forma molecular presentándose como una solución física, para conseguirlo se necesita agua
destilada y un generador de ozono que este en perfectas condiciones. (43)
El estudio publicado por Tessier (45) ha evidenciado excelentes resultados en la desinfección
de los canales radiculares.
Gojanu (47) indica que el ozono acuoso posee propiedades desinfectantes y de esterilización,
presenta una acción hemostática, acelera el proceso de cicatrización de las heridas, mejora
-
13
el suministro de oxígeno de nuestro organismo y participa como un apoyo en los procesos
metabólicos del cuerpo humano.
2.4.3.2 Ozono Gaseoso
El ozono en gas por ser desodorizante y desinfectante puede ser usado en diferentes campos
de la odontología como en la eliminación de los microorganismos presentes en el ambiente
del consultorio, en periodoncia, en blanqueamiento dental, ortodoncia, etc. (48)
2.4.3.3 Aceite Ozonizado
El ozono al romper los dobles enlaces entre átomos de carbono de las moléculas de lípidos,
puede asociarse al aceite de oliva, aceite de girasol, aceite de almendras y propilenoglicol
presentando así diferentes niveles de acción antimicrobiana, estudios demostraron que
propilenoglicol presentó una mejor asociación al ozono manteniendo su acción
antimicrobiana durante toda la aplicación. (46)
2.4.4 Ozono en Endodoncia
Las propiedades metabólicas del ozono, en cualquiera de las fases gaseosa o acuosa, lo
convierten en un desinfectante útil con una amplia gama de actividades, el poder oxidativo
del ozono lo caracteriza como un antimicrobiano eficiente. (49)
El ozono es uno de los agentes antimicrobianos más potentes con grandes ventajas para
disminuir el número de microorganismos en el conducto radicular. Su acción antimicrobiana
se ha demostrado en contra de cepas bacterianas tales como micobacterias, estreptococos,
Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis y
Cándida albicans. En especial, cuando el espécimen fue irrigado con sonicación, el agua
ozonizada tenía la misma actividad antimicrobiana que 2,5% NaClO. (49)
Gojanu (47) indica que el ozono elimina E.Faecalis, Candida albicans, Peptostreptococcus y
Pseudomonas aeruginosa del interior canales radiculares; pero agrega que el ozono posee la
capacidad de poder atravesar el foramen apical, de esta manera introducirse en el tejido óseo
adyacente y ayudar a acelerar la regeneración del mismo y así disminuir el tratamiento
quirúrgico de las lesiones periapicales.
-
14
CAPITULO III
3. METODOLOGÍA
3.1. Diseño de la investigación
La investigación es de tipo experimental in vitro.
Experimental: Es un estudio en el que se maniobra procedimientos en un
laboratorio de Microbiología, siguiendo un protocolo explícito para determinar la eficacia
antibacteriana de agua ozonizada al 5% e hipoclorito de sodio al 5,25%, en cepas de
Enterococcus Faecalis.
In vitro: Debido a la realización del experimento en un medio controlado como
fue el Laboratorio BMI (Bacterial and Microbiology in Med), siguiendo las normas de
bioseguridad.
3.2. Población de estudio y muestra
La muestra utilizada en este estudio es de tipo no probabilístico por conveniencia, debido a
que los componentes seleccionados son a juicio del investigador.
La muestra y el estudio fue determinado siguiendo los lineamientos de las investigaciones
publicadas por: Barragán et al. (6), la muestra está formada por 40 cajas petri con agar
Mueller Hilton, con inoculación de Enterococcus Faecalis, a cada una de las 40 cajas petri
sembradas se le colocaron 4 discos de susceptibilidad antimicrobiana impregnados de la
siguiente manera: disco 1 con agua ozonizada al 5%, disco 2 con hipoclorito de sodio al
5,25%, disco 3 con hipoclorito de sodio al 2,5% y disco 4 con suero fisiológico, para luego
ser llevadas las 40 cajas petri a incubación en campana de anaerobiosis a 37ºC y ser valoradas
con respecto al halo de inhibición creado a las 24 horas de incubación, seleccionando las
cajas petri para valoración de acuerdo a los criterios de inclusión y exclusión.
-
15
3.3. Criterios de inclusión y exclusión
Criterios de Inclusión
Cajas Petri con cultivo de Enterococcus Faecalis no contaminadas.
Agua ozonizada al 5% de concentración verificada por el laboratorio BMI
Hipoclorito de Sodio al 5,25% de concentración verificada por el laboratorio
BMI
Criterios de exclusión
Cajas Petri defectuosas o con defectos de fabricación
Cajas Petri con cultivo de Enterococcus Faecalis que se contaminen durante el
proceso de experimentación.
Ningún otro medio que no sea Agar Mueller Hinton
-
16
3.4. Definición operacional de las variables
Tabla 1: Operacionalización de las variables
VARIABLE DEFINICIÓN OPERACIONAL TIPO CLASIFICACIÓN INDICADOR CATEGÓRICO ESCALAS
SUSTANCIAS
IRRIGADORAS
Sustancias con la capacidad de permitir
la desinfección del conducto radicular,
conformarla y facilitar el uso de
instrumentos. (30) (31)
Independien
te
Cualitativa
Nominal
Agua Ozonizada al 5% 1
2
3
4
Hipoclorito de Sodio al 5,25%
Hipoclorito de Sodio al 2,5%
control positivo
Suero fisiológico control
negativo
EFICACIA
ANTIBACTERIANA
Capacidad de ciertos agentes irrigantes y
técnicas químico - mecánicas de eliminar
microorganismos del sistema de
conductos radiculares con fines
endodónticos. (15)
Dependiente Cuantitativa
Continua
Halo de inhibición de
acuerdo a la Escala de
Mariani et al. (50)
Leve ≤ 6 mm
Moderada = 7 mm - 8 mm
Alta ˃ 8 mm
1
2
3
-
17
3.5. Estandarización
La estandarización del estudio fue realizada por la Dra. Gabriela Tapia, docente de la
Facultad de Odontología de la Universidad Central, quien acondicionó y preparó
previamente a la investigadora para la manipulación de muestras y protocolos a seguir en el
proceso experimental y por el Licenciado Jeffer Cisneros encargado del laboratorio BMI,
lugar en donde se realizó el proceso microbiológico y la recolección de resultados.
3.6. Manejo de métodos y recolección de datos
Esta investigación se realizó en el Laboratorio BMI (Bacterial and Microbiology in Med),
para lo cual se solicitaron los permisos correspondientes. (Anexo I).
Obtención de Agua Ozonizada
El agua ozonizada lo obtuvo directamente el Licenciado Giovanny Molina del laboratorio
BMI, en el cual se utilizó agua destilada y un Ozonificador calibrado al 5%. (Anexo L).
Figura 1. Agua Ozonizada e Hipoclorito de Sodio
Elaborado por: Viviana Escobar
Activación de la cepa de Enterococcus Faecalis
La etapa microbiológica se realizó en el laboratorio BMI (Bacterial and Microbiology in
Med), todo dentro de una cámara de flujo laminar. (Anexo I)
-
18
La cepa bacteriana de Enterococcus faecalis ATCC 29212 fue adquirida en el laboratorio
MEDIBAC (Anexo K), la activación se realizó siguiendo las especificaciones del fabricante,
y fue cultivada en Agar Mueller Hinton sangre durante 48 horas a 37ºC
Figura 2. Activación de la cepa de Enterococcus Faecalis
Elaborado por: Viviana Escobar
Figura 3. Hisopado e Incubación de la cepa de Enterococcus Faecalis
Elaborado por: Viviana Escobar
-
19
Luego de la incubación, se realizó la suspensión bacteriana colocando el cultivo bacteriano
en caldo nutritivo Nutrient Broth Nº 2 LAB 014, logrando un grado de turbidez de 0.5 en la
escala de McFarland utilizando un testigo visual.
Figura 4. Elaboración del caldo nutritivo
Elaborado por: Viviana Escobar
Figura 5. Grado de Turbidez de 0.5 en la escala de McFarland
Elaborado por: Viviana Escobar
Inoculación de cajas Petri con cepas de Enterococcus Faecalis
Se inoculó los 40 medios de cultivos (Agar Mueller Hinton). Se humedeció el hisopo con el
inóculo y cubrió en cada superficie y bordes con un hisopado de 4 siembras en cada medio
-
20
de cultivo con un ángulo de 60º. Cada siembra fue cubierta, girando la caja Petri para
conseguir homogeneidad.
Figura 6. Hisopado en el medio de cultivo agar Mueller Hinton
Elaborado por: Viviana Escobar
Se dejó secar 3 minutos antes de depositar los discos de papel en los medios de cultivo, los
40 medios de cultivo fueron rotulados en la base de cada caja Petri con un marcador negro,
con letras.
Figura 7. Medios de cultivo rotulados
Elaborado por: Viviana Escobar
-
21
Posterior al proceso de siembra se procedió a embeber discos de papel con una micropipeta
1 gota (20 µl = 20 microlitros), impregnándolos con las sustancias Agua Ozonizada al 5%,
Hipoclorito de sodio al 5,25%, Hipoclorito de sodio al 2,5% que fue el control positivo y
suero fisiológico como control negativo, para ser colocadas una muestra de cada disco en las
cajas Petri previamente rotuladas y numeradas.
Figura 8. Discos de papel impregnados con las sustancias
Elaborado por: Viviana Escobar
Luego de colocar los discos en las 40 cajas Petri fueron llevadas a incubación en campana
de anaerobios a una temperatura de 37ºC por 24 horas.
Figura 9. Cajas petri en campana de anaerobiosis
Elaborado por: Viviana Escobar
-
22
Medición de Halos de Inhibición
Con el fin de identificar la eficacia antibacteriana de agua ozonizada e hipoclorito de sodio
sobre la cepa de Enterococcus Faecalis se midió el halo formado alrededor del disco con una
regla milimetrada, empleando como referencia la escala establecida en la clasificación de
Mariani et al. (50)
Leve ≤ 6 mm
Moderada = 7 mm - 8 mm
Alta ˃ 8 mm
Figura 10. Medición de halos de inhibición
Elaborado por: Viviana Escobar
Los resultados obtenidos de las mediciones fueron registrados en una hoja de recolección de
datos especialmente diseñada para el presente estudio (Anexo J).
Eliminación de desechos
Los desechos infecciosos fueron eliminados según el protocolo de eliminación de desechos
del Laboratorio de Microbiología BMI (Anexo M) (Anexo N).
-
23
3.7. Análisis Estadístico
Luego de la recolección de datos, la información se registró en Hoja de Cálculo Excel.
Posteriormente los datos recolectados fueron exportados al programa estadístico SPSS de la
casa IBM versión 24. Se aplicaron pruebas de normalidad a los datos mediante la prueba de
de Kolmogorov-Smirnov ya que es efectiva cuando el tamaño de muestra es mayor a 40,
obteniendo como resultados variables no paramétricas, por lo tanto, se realizó la prueba de
Kruskal-Wallis para diferenciar entre los grupos de participantes.
3.8. Aspectos Bioéticos
La investigación contó con la aprobación del subcomité de ética de investigación en seres
humanos de la Universidad Central del Ecuador SEISH-UCE (Anexo Q).
A. Respetar a la persona y comunidad que participa en el estudio:
No aplica.
B. Valorar el beneficio que generará el estudio para la persona, la comunidad y el
país:
El presente estudio permitirá aumentar el grado de conocimientos del investigador y de la
comunidad en lo que referente a las alternativas de desinfección sobre los agentes patógenos
que habitan en los conductos radiculares, optimizando de esta manera los tratamientos
aplicados durante la práctica clínica.
C. Confidencialidad:
Señalado en el (Anexo H).
D. Riesgos potenciales del estudio:
El estudio propuesto posee características que no representan riesgo a la salud o integridad
del investigador.
E. Beneficios potenciales del estudio:
Beneficio directo:
Para los profesionales odontólogos y los estudiantes de Odontología al incrementar el
conocimiento en las técnicas de desinfección complementarias con irrigantes de los
conductos radiculares con fines endodónticos, minimizando el riesgo de fracasos o fallas
durante o después de los procedimientos clínicos.
Beneficio indirecto:
Dirigido a los pacientes que son atendidos durante la práctica clínica, debido que
incrementará el nivel de éxito de los tratamientos de endodoncia aplicados por parte del
profesional odontólogo, optimizando de esta manera la atención recibida.
-
24
F. Selección equitativa de la muestra y protección de población vulnerable:
No aplica.
G. Conflicto de intereses:
Señalado en los Anexos F y G
H. Idoneidad ética y experticia del estudio:
Señalado en los anexos D y E
-
25
CAPÍTULO IV
4. RESULTADOS
4.1.Análisis de Resultados
En función de los 160 datos medidos, divididos en cuatro grupos con un número de 40
muestras cada una de la siguiente forma:
Tabla 2: Identificación de muestras
Muestra Identificación
Agua Ozonizada al 5% Grupo A
Hipoclorito de sodio 5,25% Grupo B
Hipoclorito de sodio 2,5% control positivo Grupo C
Suero Fisiológico control negative Grupo D
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
Los resultados obtenidos que se presentarán a continuación fueron suministrados por el
Laboratorio BMI según consta en el informe, (Anexo J) y puede observarse en la tabla 3.
Tabla 3: Resultados de halos de inhibición de Agua Ozonizada e Hipoclorito de Sodio y
sustancias control pasadas 24 horas
DIÁMETRO DEL HALO DE INHIBICIÓN (mm)
# de
muestra
Halo de
inhibición
# de
muestra
Halo de
inhibición
# de
muestra
Halo de
inhibición
# de
muestra
Halo de
inhibición
Agua
Ozonizada
al 5%
Hipoclorito
de Sodio al
5,25%
Control
Positivo
Control
Negativo
A1 9 B1 7 C1 7 D1 6
A2 10 B2 10 C2 7 D2 6
A3 9 B3 7 C3 8 D3 6
A4 9 B4 11 C4 7 D4 6
A5 8 B5 10 C5 8 D5 6
A6 10 B6 9 C6 8 D6 6
A7 8 B7 9 C7 8 D7 6
-
26
A8 9 B8 7 C8 7 D8 6
A9 8 B9 8 C9 8 D9 6
A10 9 B10 8 C10 8 D10 6
A11 9 B11 13 C11 8 D11 6
A12 9 B12 10 C12 8 D12 6
A13 10 B13 9 C13 13 D13 6
A14 9 B14 12 C14 12 D14 6
A15 9 B15 10 C15 8 D15 7
A16 8 B16 10 C16 7 D16 6
A17 9 B17 10 C17 8 D17 6
A18 9 B18 9 C18 8 D18 6
A19 12 B19 12 C19 8 D19 6
A20 9 B20 8 C20 8 D20 6
A21 9 B21 10 C21 7 D21 6
A22 8 B22 9 C22 8 D22 6
A23 9 B23 8 C23 7 D23 6
A24 10 B24 9 C24 9 D24 6
A25 12 B25 11 C25 7 D25 6
A26 10 B26 12 C26 8 D26 6
A27 11 B27 10 C27 8 D27 6
A28 9 B28 8 C28 8 D28 6
A29 9 B29 8 C29 8 D29 6
A30 9 B30 12 C30 7 D30 6
A31 8 B31 10 C31 8 D31 6
A32 9 B32 9 C32 10 D32 6
A33 9 B33 9 C33 8 D33 6
A34 9 B34 8 C34 8 D34 6
A35 11 B35 10 C35 7 D35 6
A36 8 B36 10 C36 8 D36 6
A37 9 B37 9 C37 9 D37 6
A38 10 B38 9 C38 8 D38 7
A39 11 B39 8 C39 8 D39 6
A40 9 B40 10 C40 8 D40 7
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
-
27
Figura 11. Histograma de datos Grupo A-B-C-D
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
Los datos de cada grupo se introdujeron en una base de datos en los programas SPSS de la
casa IBM versión 24, con el fin de realizar los cálculos en estadísticas descriptivas e
inferencial.
Tabla 4: Estadística descriptiva de los resultados de cada GRUPO A-B-C-D
Halo de Inhibicion [mm] N Media Desviación
estándar
Error
estándar
95% del intervalo
de confianza para
la media
Mínimo Máximo
Límite
inferior
Límite
superior
A. Ozon. al
5%
40 9,28 1,012 ,160 8,95 9,60 8 12
Hipo. sod
5,25%
40 9,45 1,467 ,232 8,98 9,92 7 13
Hipo. sod.
2,5% CP
40 8,08 1,207 ,191 7,69 8,46 7 13
S. Fisio CN 40 6,05 ,221 ,035 5,98 6,12 6 7
Total 160 8,21 1,732 ,137 7,94 8,48 6 13
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
-
28
Figura 12. Promedio Grupo A-B-C-D
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
En la Tabla 4 muestra los estadísticos de resumen para Grupo A-B-C-D que incluye medidas
de tendencia central.
Grupo A (Agua Ozonizada al 5%).: La muestra tiene una media de 9,28mm, una
desviación estándar de 1,01mm.
Grupo B (Hipoclorito de sodio 5,25%).: La muestra tiene una media de 9,45mm,
una desviación estándar de 1,47mm.
Grupo C (Hipoclorito de sodio 2,5% control positivo).: La muestra tiene una
media de 8,08mm, una desviación estándar de 1,21mm.
Grupo D (Suero Fisiológico control negativo).: La muestra tiene una media de
6,05mm, una desviación estándar de 0,22mm.
De acuerdo con el análisis es un estudio transversal porque se están analizando como
variable fija cuatro grupos en un mismo momento y la variable aleatoria son valores
numéricos, por lo tanto, de acuerdo con el cuadro de pre elección se va a utilizar ANOVA
de un factor para muestras independientes.
0.001.002.003.004.005.006.007.008.009.00
10.00
Agua Ozonizadaal 5%
Hipoclorito desodio 5,25%
Hipoclorito desodio 2,5%
control positivo
SueroFisiológico
control negativo
MIL
IMET
RO
S
TIPO DE IRRIGANTE
PROMEDIO
-
29
Tabla 5: Cuadro de elección estadística GRUPO A-B-C-D
PRUEBAS NO PARAMETRICAS PRUEBAS
PARAMETRICAS
Variable Aleatoria
Variable Fija
NOMINAL
DICOTÓMICA
NOMINAL
POLITÓMICA ORDINAL NUMÉRICA
Estudio
Transversal
Muestras
Independientes
Un grupo X² Bondad de Ajuste
Binomial X² Bondad de
Ajuste
X² Bondad de
Ajuste
T de Student
(Una muestra)
Dos grupos
X² Bondad de Ajuste
Correcion de Yates
Test exacto de Fisher
X² Bondad de
Homogeneidad
U Mann-
Withney
T de Student
(muestras
independientes)
Más de dos grupos X² Bondad de Ajuste X² Bondad de
Ajuste
H Kruskal -
Wallis
ANOVA con un factor
INTERsujetos
Estudio
Longitudinal
Muestras
Relacionadas
Dos medidas Mc Nemar Q de Cochran Wilcoxon
T de Student
(muestras
relacionadas)
Más de dos Medidas Q de Cochran Q de Cochran Friedman ANOVA para medidas
repetitivas
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
Prueba de Normalidad:
Antes de realizar la prueba estadística del ANOVA se debe empezar realizando una prueba
de normalidad. Se debe comprobar si la variable aleatoria se distribuye normalmente, para
ello se escoge la prueba de KOLMOGOROV-SMIRNOV ya que es efectiva cuando el
tamaño de muestra es mayor a 40.
Ho: Las muestras provienen de poblaciones con distribución normal
Ha: Las muestras No provienen de poblaciones con distribución normal
-
30
Tabla 6: Prueba de normalidad
Tipo de Sustancia
Irrigadora
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Estadístico Gl Sig. Estadístico gl Sig.
Halo de
Inhibicion [mm]
Agua Ozonizada
al 5%
,332 40 ,000 ,816 40 ,000
Hipoclorito de
sodio 5,25%
,179 40 ,002 ,933 40 ,021
Hipoclorito de
sodio 2,5% control
positivo
,400 40 ,000 ,617 40 ,000
Suero Fisiológico
control negative
,540 40 ,000 ,229 40 ,000
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
De la prueba de normalidad se obtiene que los datos de los grupos se comportan no como
una distribución normal por lo que para la estadística inferencial se utilizarán pruebas no
paramétricas ya que NO superan el nivel de significancia impuesto del p
-
31
De acuerdo con el cuadro de elección estadística para los datos resultantes de halo de
inhibición, el no tener valores que corresponden a una distribución normal, para la
comparación con los datos del otro grupo se deben realizar pruebas no paramétricas con
Kruskal-Wallis.
Prueba no paramétrica Kruskal-Wallis:
Ho: Las medias del halo de inhibición en ambos grupos son iguales
Ha: Existe una diferencia significativa entre los valores de media de halo de inhibición entre
ambos grupos.
Tabla 8: Prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
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32
Tabla 9: Prueba de significancia de Kruskal-Wallis.
P-Valor (Sig. Asintótica bilateral) =
0,000
< α = 0,05
Conclusión: Las medias de cada grupo, estadísticamente NO son iguales
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
De acuerdo con la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis, el valor del nivel de
significación asintótica bilateral es menor al 0,05 que es el nivel de error aceptado al 95%
de nivel de confianza, con esto se acepta la hipótesis nula y concluyo que existen diferencias
significativas entre las medias de los grupos.
Para saber entre cuales grupos tienen diferencias significativas se debe realizar una
comparación entre parejas.
Tabla 10: Resultados de la comparación dos a dos.
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
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33
Tabla 11: Prueba de significancia de Kruskal-Wallis – Comparación entre parejas.
P-Valor (S. Fisio CN – Hipo. Sod. 2,5%
CP) = 0,000
< α = 0,05
P-Valor (S. Fisio CN – A. Ozon. 5%) =
0,000
< α = 0,05
P-Valor (S. Fisio CN – Hipo. Sod.
5,25%) = 0,000
< α = 0,05
P-Valor (Hipo. Sod. 2,5% CP – A.
Ozon. 5%) = 0,001
< α = 0,05
P-Valor (Hipo. Sod. 2,5% CP – Hipo.
Sod 5,25%) = 0,001
< α = 0,05
P-Valor (A. Ozon. 5% – Hipo. Sod
5,25%) = 1,000
> α = 0,05
Conclusión: Las medias de los grupos A y B no tienen diferencias significativas,
las cinco comparaciones faltantes entre los otros grupos si tienen diferencias
significativas
Fuente: Investigación de campo
Elaboración: Ing. Alexis Sola
En función de los resultados obtenidos, el objetivo general del estudio y analizando sus
medias matemáticamente se afirma que entre el Agua Ozonizada al 5% y el Hipoclorito de
sodio 5,25% su efectividad es igual.
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34
4.2.Discusión
La toxicidad y los efectos adversos que presenta el Hipoclorito de sodio, ha tomado mucha
importancia en el campo de la Endodoncia por las complicaciones que puedan
presentarse durante los tratamientos, y los protocolos de irrigación actuales se preocupan
por complementar la desinfección del sistema de conductos radiculares sumados a
irrigantes con efecto bactericida, es así que se ha buscado una sustancia noble y compatible
para nuestro organismo que al igual que el hipoclorito de sodio se acerque a las
características ideales de un buen irrigante, en este estudio se ha considerado al agua
ozonizada 5%, al que se comparó con hipoclorito de sodio 5,25%, que estadísticamente no
existen diferencias significativas entre estas dos sustancias, por tanto ambas, podrían
ser utilizadas en los protocolos de desinfección de conductos radiculares.
Un estudio realizado por Sosa, J. (2015) (51) en la Universidad de Sipán, Perú donde se
determinó el efecto antibacteriano del extracto alcohólico de Rosmarinus officinalis y del
agua ozonizada sobre Streptococcus mutans y Enterococcus faecalis, concluyó que existe
efecto bactericida sobre S. mutans y E. faecalis en condiciones de laboratorio y este efecto
se incrementa cuando se le agrega agua ozonizada, por lo que no concuerda con nuestro
estudio realizado ya que el Agua ozonizada mostro gran eficacia antibacteriana frente al
Enterococcus Faecalis y si es considera como un irrigante de elección en los tratamientos de
endodoncia.
Tuncay, O. (2015) (52) realizó un estudio de los efectos del ozono y la desinfección
fotoactivada contra las biopelículas de Enterococcus Faecalis donde concluyó que el
irrigante principal en tratamientos de endodoncia es el Hipoclorito de Sodio, que es la
principal sustancia en matar patógenos endodónticos, el propuso que el ozono y la
desinfección fotoactivada se pueden utilizar al final del tratamiento del conducto para
mejorar así el efecto de las soluciones de riego convencionales. Por lo tanto, difiere con
nosotros en la eficacia del agua ozonizada por si sola, donde podría ser utilizada como el
irrigante principal.
Noites, R. (2014) (53) en el estudio realizado “Synergistic Antimicrobial Action of
Chlorhexidine and Ozone in Endodontic Treatment, concluyó que por sí solo tanto el
hipoclorito, la clorhexidina y el ozono son ineficaces para eliminar microorganismos y que
la asociación de clorhexidina al 2% seguida de gas ozono durante 24 segundos promovió la
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eliminación completa de Candida albicans y Enterococcus faecalis. Con este articulo
podemos concordar que en los tratamientos de endodoncia podemos incrementar la eficacia
antibacteriana de las sustancias si usamos el ozono en la terapia.
El estudio que realizó Goztas, Z. (2014) (54) donde investigó el efecto antimicrobiano del
agua ozonizada, hipoclorito de sodio y gluconato de clorhexidina en conductos radiculares
de molares primarios concluyo que el ozono acuoso no demuestra citotoxicidad y es
altamente biocompatible, puede usarse como agente de irrigación del conducto radicular
primario para pacientes especialmente pediátricos comparado con nuestro estudio pese a la
diferencia de metodología concuerda con los resultados donde también se propone al agua
ozonizada como una alternativa de irrigación para los tratamientos de endodoncia.
Recai, Z. (2014) realizó una investigación entre el ozono gaseoso y el ozono acuoso en
conductos radiculares infectados con Enterococcus Faecalis, sus resultados fueron que el
ozono es útil para la desinfección de conductos radiculares, pero es inadecuado cuando se
utiliza solo, y al comparar entre ozono acuoso y ozono gaseoso quien muestra una mayor
eficacia antibacteriana fue el ozono acuoso, dejando en claro que el ozono por sí solo no
puede exhibir los mismos efectos que el hipoclorito de Sodio. Comparando con este estudio
nuestros resultados no concuerdan, ya que el agua ozonizada si presentó una eficacia
antibacteriana similar al hipoclorito de sodio frente al Enterococcus Faecalis por lo tanto
ambas sustancias podrían ser utilizadas como irrigantes de elección en los tratamientos de
endodoncia.
También podemos hacer una comparación con estudios realizados con Agua Ozonizada en
la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecuador en diferentes
microorganismos.
Cueva (2016) (17) realizó una investigación sobre la reducción bacteriana de agua ozonizada
sobre Actinomyces Israelli donde concluyó que, el agua ozonizada al 5% presentó efecto
bactericida similar al hipoclorito de sodio al 5.25%, sobre A. Israelli, por lo cual ambas
sustancias podrían ser utilizadas en los protocolos de irrigación, puesto que el agua
ozonizada al 5% presentó propiedades antimicrobianas que se acercan a las condiciones para
ser un irrigante ideal como el hipoclorito de sodio. A comparación con nuestro estudio se
afirma la gran eficacia que posee el agua Ozonizada para eliminar microorganismos.
Pillajo, C. (2017) (55) estudió el efecto antimicótico del agua ozonificada y el hipoclorito de
sodio al 2.5% frente a Cándida albicans concluyendo que el agua ozonificada a 100 ug
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tratada por 20 min presentó un efecto antimicótico similar que el hipoclorito de sodio al
2,5% frente a crecimiento de cepa Candida albicans. A comparación con nuestro estudio el
resultado no coincide ya que nosotros utilizamos hipoclorito de sodio al 5,25%, sin embargo,
se rescata el efecto antimicótico que presenta el agua ozonizada.
Para concluir tenemos el estudio realizado por Sandoval, D. (2020) (56) en donde investigó
la eficacia del agua ozonizada sobre cepas de Prevotella intermedia y cepas de pacientes con
enfermedad periodontal severa dando como conclusión que el agua ozonizada a 0,032 ppm
no es capaz de inhibir el crecimiento de cepas de Prevotella intermedia. Comparando con
nuestro estudio no concuerda la eficacia que posee el Agua Ozonizada.
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CAPÍTULO V
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Con la realización del presente estudio se concluyó que:
5.1. Conclusiones
El uso de Agua Ozonizada al 5% mostró una gran eficacia antibacteriana en la
eliminación de Enterococcus Faecalis mediante la formación de halos de inhibición.
El uso de Hipoclorito de Sodio al 5,25% frente al Enterococcus Faecalis sigue siendo
el irrigante de primera elección en tratamientos de Endodoncia.
Al comparar las dos sustancias Agua Ozonizada al 5% e Hipoclorito de Sodio al
5.25%, sobre cepas de Enterococcus Faecalis no existe una diferencia significativa,
por lo cual las dos sustancias tienen eficacia antibacteriana.
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38
5.2. Recomendaciones
Investigar la eficacia de Agua Ozonizada sobre otros tipos de microorganismos
patógenos residentes en los conductos radiculares, de esta manera ampliar los
beneficios que presenta esta sustancia.
Realizar estudios in vivo para determinar las ventajas en el uso clínico de Agua
Ozonizada, conocer el efecto en tratamientos que involucren más de una cita, y
estandarizar un protocolo de aplicación.
En base a los resultados de los estudios realizados se recomienda el uso de Agua
Ozonizada para la irrigación del tratamiento de conducto.
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39
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