tutorial zeiss 04 1 tutorial de uso básico zeiss 04

Tutorial Zeiss 04 1

Tutorial de Uso BásicoTutorial de Uso Básico

Zeiss 04Zeiss 04

Tutorial Zeiss 04 2

Características Zeiss 04……………………..……....pag.3-4Características Zeiss 04……………………..……....pag.3-4

Pasos iniciales Uso Zeiss 04………………………….pag. 5Pasos iniciales Uso Zeiss 04………………………….pag. 5

Luz TransmitidaLuz Transmitida

Trabajo con luz transmitida Campo Trabajo con luz transmitida Campo Claro…………………………………………………..…pag. 6Claro…………………………………………………..…pag. 6

Trabajo con luz transmitida Contraste de Trabajo con luz transmitida Contraste de Fases/Ph………….……………….………………...…pag.7-8Fases/Ph………….……………….………………...…pag.7-8

Trabajo con luz transmitida Contraste Interdiferencial Trabajo con luz transmitida Contraste Interdiferencial DIC……………….………………………………...…pag.9-10DIC……………….………………………………...…pag.9-10

FluorescenciaFluorescencia

Trabajo con luz reflejada (fluorescencia)Trabajo con luz reflejada (fluorescencia)………………………………….…..pag.11-12………………………………….…..pag.11-12

Utilidades de Interés ……………………………....pag.13-15Utilidades de Interés ……………………………....pag.13-15

Zeiss 04Zeiss 04 “ “Tutorial de Uso”Tutorial de Uso”

Tutorial Zeiss 04 3

Zeiss 04 Zeiss 04 APLICACIONESAPLICACIONES..

Microscopio de FluorescenciaMicroscopio de Fluorescencia

Filtros :Filtros :

1-Rojo1-Rojo

9-Verde 9-Verde

15-Triple15-Triple

Cyan CFPCyan CFP

Microscopio de Luz TransmitidaMicroscopio de Luz Transmitida

-Campo Claro-Campo Claro

-Contraste Interdiferencial (DIC)-Contraste Interdiferencial (DIC)

-Contraste de Fases (PH)-Contraste de Fases (PH)

Localización : Microscopía Planta – 0 Localización : Microscopía Planta – 0

4Tutorial Zeiss 04

Zeiss 04 Zeiss 04 CARACTERISTICAS.CARACTERISTICAS.

Filtros Fluorescencia:Filtros Fluorescencia:

-Rojo-Rojo

-Verde -Verde

-Triple-Triple

-Azul Cyan-Azul Cyan

Condensador : 0´9Condensador : 0´9

Filtros/Anillos DICFiltros/Anillos DIC-DIC I-DIC I-DIC II-DIC II-DIC III-DIC III

Filtros/Anillos FasesFiltros/Anillos Fases-Fase I-Fase I-Fase II-Fase II

Objetivos :Objetivos :

x 10 (Fase 1) (DIC)x 10 (Fase 1) (DIC)x 20 (Fase 1) (DIC)x 20 (Fase 1) (DIC)x 40 (Fase 2) (DIC)x 40 (Fase 2) (DIC)x 40 oil (Fase 3) (DIC)x 40 oil (Fase 3) (DIC)x 63 oil (Fase 3) (DIC)x 63 oil (Fase 3) (DIC)x 100 oil (Fase 3) (DIC)x 100 oil (Fase 3) (DIC)

Equipo conectado :Equipo conectado :

-Cámara Hamamatsu (ORCA-Er-c4742-95)-Cámara Hamamatsu (ORCA-Er-c4742-95)

-AttoArc 100W-AttoArc 100W

-Mac Power G4-Mac Power G4

Programa OPENLAB asociadoPrograma OPENLAB asociado

5Tutorial Zeiss 04

1-Encendemos el microscopio 1-Encendemos el microscopio Zeiss 04 (botón lateral derecho).Zeiss 04 (botón lateral derecho).

2-Encendemos el Ordenador 2-Encendemos el Ordenador asociado ( MAC) para acceder asociado ( MAC) para acceder al programa de captura de al programa de captura de imágenes “Openlab”.imágenes “Openlab”.

3-Encendemos la cámara 3-Encendemos la cámara asociada al equipo para la asociada al equipo para la captura de imágenes captura de imágenes (cámara Hamamatsu).(cámara Hamamatsu).

Pasos Iniciales Uso Zeiss 04Pasos Iniciales Uso Zeiss 04

6Tutorial Zeiss 04

Trabajar en Luz Transmitida (Campo Claro)(BF)Trabajar en Luz Transmitida (Campo Claro)(BF)

1-Colocamos la Rueda en posición D 1-Colocamos la Rueda en posición D ( Campo Claro, luz transmitida Normal).( Campo Claro, luz transmitida Normal).

2-Retiramos de la vía de luz (desplazar a 2-Retiramos de la vía de luz (desplazar a la izquierda) el polarizador DIC.la izquierda) el polarizador DIC.

3- Con esta configuración ya es posible 3- Con esta configuración ya es posible observar y capturar imágenes en observar y capturar imágenes en condiciones de luz transmitida normal.condiciones de luz transmitida normal.

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7Tutorial Zeiss 04

Trabajar en Luz Transmitida (Contraste de Fases)(Ph)Trabajar en Luz Transmitida (Contraste de Fases)(Ph)

1-Observamos las características de 1-Observamos las características de Fases que posee el objetivo con el que Fases que posee el objetivo con el que estamos trabajando (no todos los estamos trabajando (no todos los objetivos presentan Fases/Ph) .objetivos presentan Fases/Ph) .

Las características de Fase del Objetivo vienen Las características de Fase del Objetivo vienen marcadas en el mismo Objetivo (Ph1=fase 1; Ph2=Fase marcadas en el mismo Objetivo (Ph1=fase 1; Ph2=Fase 2; Ph3=Fase 3) ó se pueden consultar en la guía del 2; Ph3=Fase 3) ó se pueden consultar en la guía del equipo disponible en la web. equipo disponible en la web.

2-Colocamos la rueda en la misma 2-Colocamos la rueda en la misma posición de Fases/Ph que el anillo de posición de Fases/Ph que el anillo de Fases marcado en el Objetivo con el que Fases marcado en el Objetivo con el que se está trabajando.se está trabajando.

3-Retiramos de la vía de luz el 3-Retiramos de la vía de luz el polarizador DIC. polarizador DIC.

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Tutorial Zeiss 04 8

Trabajar en Luz Transmitida (Contraste de Fases)(Ph)Trabajar en Luz Transmitida (Contraste de Fases)(Ph)

4-Sacamos la Barra DIC/Fases hasta su 4-Sacamos la Barra DIC/Fases hasta su posición más externa . posición más externa .

La barra tiene 2 posiciones:La barra tiene 2 posiciones:

-Interna (para ver en DIC).-Interna (para ver en DIC).

-Externa (para ver en Contraste -Externa (para ver en Contraste de Fases y Fluorescencia).de Fases y Fluorescencia).

5-El equipo queda configurado para 5-El equipo queda configurado para capturar imágenes en Contraste de Fases.capturar imágenes en Contraste de Fases.

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9Tutorial Zeiss 04

Trabajar en Luz Transmitida (Contraste Interdiferencial )(DIC)Trabajar en Luz Transmitida (Contraste Interdiferencial )(DIC)

1-Observamos las características DIC que 1-Observamos las características DIC que posee el objetivo con el que estamos trabajando posee el objetivo con el que estamos trabajando (no todos los objetivos presentan DIC) .(no todos los objetivos presentan DIC) .

Las características de DIC del Objetivo vienen marcadas Las características de DIC del Objetivo vienen marcadas en la cuña DIC integrada sobre cada Objetivo (I= DIC I; en la cuña DIC integrada sobre cada Objetivo (I= DIC I; II=DIC II; III=DIC III) ó se pueden consultar en la guía II=DIC II; III=DIC III) ó se pueden consultar en la guía del equipo disponible en la web. del equipo disponible en la web.

2-Para consultar el DIC del objetivo se puede 2-Para consultar el DIC del objetivo se puede retirar con CUIDADO la cuña y observar el retirar con CUIDADO la cuña y observar el número del DIC grabada en la misma.número del DIC grabada en la misma.

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Tutorial Zeiss 04 10

Trabajar en Luz Transmitida (Contraste Interdiferencial )(DIC)Trabajar en Luz Transmitida (Contraste Interdiferencial )(DIC)

3-Colocamos la rueda en el nº DIC marcado 3-Colocamos la rueda en el nº DIC marcado en el objetivo con que trabajamos.en el objetivo con que trabajamos.

4-Introducimos en la vía de luz el Polarizador 4-Introducimos en la vía de luz el Polarizador DIC ( hacia la derecha).DIC ( hacia la derecha).

5-Insertamos la Barra DIC/Fases hasta su 5-Insertamos la Barra DIC/Fases hasta su posición interna . posición interna . La barra tiene 2 posiciones:La barra tiene 2 posiciones:

-Interna (para ver en DIC)-Interna (para ver en DIC)-Externa (para ver en Contraste de -Externa (para ver en Contraste de Fases) Fases)

6-El equipo queda configurado para ver y 6-El equipo queda configurado para ver y capturar en DIC.capturar en DIC.

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11Tutorial Zeiss 04

Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia)Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia)

1-Encender la lámpara de 1-Encender la lámpara de Fluorescencia .Fluorescencia .

Antes de encender la Antes de encender la lámpara de fluorescencia lámpara de fluorescencia es necesario verificar en es necesario verificar en el el Registro de Uso del Registro de Uso del equipoequipo que han que han transcurrido un mínimo de transcurrido un mínimo de 30 minutos desde la 30 minutos desde la sesión previa ( recordar sesión previa ( recordar que existe riesgo de que existe riesgo de explosión de la lámpara explosión de la lámpara de mercurio (vapores de mercurio (vapores tóxicos) si se enciende en tóxicos) si se enciende en caliente).caliente).

Para evitar la pérdida/quemado de la Para evitar la pérdida/quemado de la fluorescencia de nuestra muestra cada vez que fluorescencia de nuestra muestra cada vez que no estemos capturando la imagen es no estemos capturando la imagen es recomendable USAR la “barra/obturador de recomendable USAR la “barra/obturador de Fluorescencia”: Fluorescencia”:

Introducimos la barra hacia el interior para cerrar Introducimos la barra hacia el interior para cerrar la fluorescencia de forma temporal.la fluorescencia de forma temporal.

Todos los microscopios de Todos los microscopios de fluorescencia Zeiss presentan fluorescencia Zeiss presentan asociado un protector móvil de asociado un protector móvil de fluorescencia para el usuario que fluorescencia para el usuario que puede aplicarse/bajarse para puede aplicarse/bajarse para evitar la visión directa de la evitar la visión directa de la fluorescencia (perjudicial)fluorescencia (perjudicial)

NORMAS BÁSICAS


Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia)Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia)

1-A diferencia de otros Zeiss(15,16) la 1-A diferencia de otros Zeiss(15,16) la rueda de cambio manual de filtros no rueda de cambio manual de filtros no está accesible está accesible (figura 1)(figura 1) y para cambiar y para cambiar los filtros es necesario usar la botonera los filtros es necesario usar la botonera situada en el lateral derecho.situada en el lateral derecho.

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2-Para cambiar al filtro de fluorescencia deseado 2-Para cambiar al filtro de fluorescencia deseado Usamos la botonera inferior lateral derecha :Usamos la botonera inferior lateral derecha :

Presenta 3 posiciones/filtrosPresenta 3 posiciones/filtros : :

-Rojo-Rojo-Verde -Verde -Triple-Triple-Cyan CFP-Cyan CFP

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UTILIDADES DE INTERES UTILIDADES DE INTERES

Zeiss 04 presenta un Obturador (lateral derecho) Zeiss 04 presenta un Obturador (lateral derecho) que controla la imagen que llega al programa que controla la imagen que llega al programa asociado OPENLAB para la captura de imágenes. asociado OPENLAB para la captura de imágenes.

Tiene 2 posiciones:Tiene 2 posiciones:

1-Hacia afuera la imagen sólo se ve en 1-Hacia afuera la imagen sólo se ve en el programa de captura de imágenes.el programa de captura de imágenes.

2-Hacia adentro permite ver al 2-Hacia adentro permite ver al observador.observador.


UTILIDADES DE INTERESUTILIDADES DE INTERES

Zeiss 04 está ajustado y automatizado en relación a la posición Zeiss 04 está ajustado y automatizado en relación a la posición de la platina para el enfoque de las muestras.de la platina para el enfoque de las muestras.

MUY IMPORTANTEMUY IMPORTANTE : :antes de apagar el microscopio volver a antes de apagar el microscopio volver a SUBIR la platina (usando la botonera ) SUBIR la platina (usando la botonera ) (1)(1) si hemos estado si hemos estado cambiando muestras .cambiando muestras .

NO DEJAR LA PLATINA BAJADA AL APAGAR NO DEJAR LA PLATINA BAJADA AL APAGAR o se pierde el o se pierde el punto de enfoque y se desconfigura el equipo.punto de enfoque y se desconfigura el equipo.

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UTILIDADES DE INTERESUTILIDADES DE INTERESIMPORTANTE : Zeiss 04 presenta un IMPORTANTE : Zeiss 04 presenta un sistema automatizadosistema automatizado de: de: -Cambio de Objetivos. -Cambio de Objetivos. -Cambio de filtros de fluorescencia. -Cambio de filtros de fluorescencia.

Para Para CAMBIAR FILTROS FLUORESCENCIACAMBIAR FILTROS FLUORESCENCIA es necesario es necesario usar la botonera situada en cualquiera de los laterales usar la botonera situada en cualquiera de los laterales (2)(2)

Para Para CAMBIAR OBJETIVOSCAMBIAR OBJETIVOS es necesario usar la es necesario usar la botonera situada en el lateral IZQUIERDO botonera situada en el lateral IZQUIERDO (1)(1)

112222

Para Para SUBIR Y BAJAR la platinaSUBIR Y BAJAR la platina usamos la botonera situada en el lateral ANTERIOR IZQUIERDO usamos la botonera situada en el lateral ANTERIOR IZQUIERDO (3).(3).

Siempre subir al platina antes de apagar Zeiss 04 para que no se desconfigure el equipo.Siempre subir al platina antes de apagar Zeiss 04 para que no se desconfigure el equipo.

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16Tutorial Zeiss 04

Unidad de MicroscopíaUnidad de Microscopía

Centro de Investigación del Cáncer Centro de Investigación del Cáncer

Campus Miguel de Unamuno 37007 Salamanca (Spain).Campus Miguel de Unamuno 37007 Salamanca (Spain).

tutorial zeiss 04 1 tutorial de uso básico zeiss 04

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