n, h, carboh ydrates and antioxidant enzymes in cotton seed...2012/03/31  · , a. habibi a enzymes...

8
*Correspond Email addre Received: Ju Accepted: Se Effect o _________ Abstract Pix growth of c and 40 ppm enzymes ac cv CiOcra) growth incr and 40 ppm catalase en control. Keywords: c Niakan, M. antioxidant _________ Introductio Cot subtropical, indetermina growth c developme vegetative nitrogen o negative ef crop matu harvest abi ding author ess: neda.niak ly, 2011 eptember 201 of pix on g Mar Depa __________ is a plant gro cotton. In thi m on germina ctivity (catala in Petri dis reased in co m. In additi zyme activity cotton; pix; g , A. Habibi a enzymes in __________ on tton (Gossy , perenni ate growth ontinues w nt. When growth are r low early ffects may urity, flower ility. Cotto k[email protected] 11 germinatio ryam Niaka artment of Bio __________ owth regulat is study the ation, radicle ase, peroxida shes were e ncentraon on, analysis y while it inc germination; and M. Gho cotton seed __________ ypium hirs ial plant h habit. It well into n conditio prevalent ( y fruit reten occur, inclu r abortion n plant pro m on, growt c n*, Abdolra ology, Islamic __________ tors that inte effect of dif e dry weight, ase and poly xamined. Th of 20 ppm o of data rev creased pero ; carbohydra orbanli. 2011 '. Iranian Jou __________ sutum) is with ts vegetati reproducti ons favori e.g., excessi ntion), seve uding delay and reduc oduces seve h, carboh cotton see ashid Habib Azad Universi __________ erferes with fferent conce , radicle leng y phenol oxid he results sh of pix, also r vealed that oxidase and ate; antioxida 1. 'Effect of urnal of Plan __________ a an ive ive ng ive ral ed ed ral na (G 20 re gr co ch To di am N de gi in Sy ve In vitro g ydrates a ed bi and Mahl ity, Gorgan Br __________ other hormo entrations of gth, insoluble dase) in cott howed that g radicle dry w different co poly phenol ant enzyme pix on germ t Physiology __________ atural grow Ghourab et 004; Harish egulators ar rowth and ompounds i hloride: pix), opit, and Me imethyl pip mmonia com ajma et al., 2 Plant ecrease cott bberellic aci n turn decrea ynthetic plan egetative gro growth of nd antiox lagha Ghor ranch, Gorgan __________ ones and aff f pix, namely e and soluble ton seedling germination weight reduc oncentration oxidase acti mination, gro y 1 (4), 301 – __________ wth regulato al., 2000; h et al., 2 re compoun developm s pix (N, N , commonly epichlor and peridinium c mpound (M 2000). growth re ton vegetati id, a commo ases cell elo nt growth r owth in cotto viarebaudian xidant enz banli n, Iran __________ fect the germ y, 0 (control e sugars and (Gossypium percentage ed at conce ns of pix did ivity as comp wth, carboh 307. __________ ors or plant Gopalakrish 2003). Pla nds that af ment. One Ndimethyl p referred to d consisng chloride, a uhammad e egulators su ve growth b on plant horm ngation (Hav egulators al on by reduci na Bertoni zymes in _________ mination and ), 10, 20, 30 d antioxidant m hirsutum L. and radicle ntrations 10 d not affect pared to the hydrates and _________ t hormones hnan et al., ant growth ffect cotton of these piperidinium o as Mepex, 4.2% N, Nquaternary et al., 2007; uch as pix by inhibiting mone which vargi, 2007). so suppress ing the main 301 d 0 t . e 0 t e d s , h n e m , y ; x g h . s n

Upload: others

Post on 23-Mar-2021

0 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: n, h, carboh ydrates and antioxidant enzymes in cotton seed...2012/03/31  · , A. Habibi a enzymes in _____ n ton (Gossy perenni te growth ontinues w nt. When growth are r low early

*CorrespondE‐mail addreReceived: JuAccepted: Se

Effect o

_________

Abstract  

Pix growth of cand 40 ppmenzymes accv Ci‐Ocra) growth  incrand  40  ppmcatalase encontrol.  Keywords: c Niakan, M.antioxidant

_________

Introductio 

Cotsubtropical,indeterminagrowth cdevelopmevegetative nitrogen  onegative  efcrop  matuharvest  abi

ding author ess: neda.niakly, 2011  eptember 201

of pix on g

Mar

Depa

__________

is a plant grocotton. In thim on germinactivity (catala  in Petri disreased  in com.  In  additizyme activity

cotton; pix; g

, A. Habibi a enzymes in 

__________

on 

tton  (Gossy,  perenniate  growthontinues  wnt.  Whengrowth  are r  low  earlyffects  may urity,  flowerility.  Cotto

[email protected]

11 

germinatio

ryam Niaka

artment of Bio

__________

owth regulatis study the ation, radiclease, peroxidashes were encentration on,  analysisy while it inc

germination;

and M. Ghocotton seed

__________

ypium  hirsial  plant h  habit.  Itwell  into n  conditioprevalent  (

y  fruit  retenoccur,  inclur  abortion n  plant  pro

on, growtc

n*, Abdolra

ology, Islamic A

__________

tors that inteeffect of dife dry weight,ase and polyxamined. Thof 20 ppm o  of  data  revcreased pero

; carbohydra

orbanli. 2011'. Iranian Jou

__________

sutum)  is with 

ts  vegetatireproducti

ons  favorie.g.,  excessintion),  seveuding  delayand  reduc

oduces  seve

h, carbohcotton see

ashid Habib

Azad Universi

__________

erferes withfferent conce, radicle lengy phenol oxidhe  results  shof pix, also rvealed  thatoxidase and 

ate; antioxida

1.  'Effect of urnal of Plan

__________

a an ive ive ng ive ral ed ed ral 

na(G20regrcochTodiamN

degiinSyve

In vitro g

 

ydrates aed 

bi and Mahl

ity, Gorgan Br

__________

other hormoentrations ofgth, insolubledase) in cotthowed  that gradicle dry wdifferent  copoly phenol 

ant enzyme

pix on germt Physiology

__________

atural  growGhourab  et 004;  Harishegulators  arrowth  and ompounds  ihloride:  pix),opit, and Meimethyl pipmmonia  comajma et al., 2

Plant ecrease  cottbberellic acin turn decreaynthetic  planegetative gro

growth of Ste

nd antiox

lagha Ghor

ranch, Gorgan

__________

ones and afff pix, namelye and solubleton seedling germination weight reduconcentrationoxidase acti

mination, groy 1 (4), 301 – 

__________

wth  regulatoal.,  2000; 

h  et  al.,  2re  compoun

developms  pix  (N,  N,  commonlyepichlor andperidinium  cmpound  (M2000). growth  re

ton  vegetatiid, a commoases cell elont  growth  rowth in cotto

viarebaudian

xidant enz

banli 

n, Iran

__________

fect the germy, 0 (controle sugars and(Gossypiumpercentageed at concens  of  pix  didivity as comp

wth, carboh307. 

__________

ors  or  plantGopalakrish2003).    Plands  that  afment.  One N‐dimethyl  p  referred  tod  consisting chloride,  a uhammad  e

egulators  suve  growth  bon plant hormngation (Havegulators  alon by reduci

na Bertoni

zymes in 

_________

mination and), 10, 20, 30d antioxidantm hirsutum L. and  radiclentrations 10d  not  affectpared to the

hydrates and

_________

t  hormoneshnan  et  al.,ant  growthffect  cotton

of  thesepiperidiniumo  as Mepex,4.2%  N, N‐quaternary

et  al.,  2007;

uch  as  pixby  inhibitingmone whichvargi, 2007).so  suppressing the main

301

d 0 t . e 0 t e 

s , h n e m , ‐y ; 

x g h . s n 

Page 2: n, h, carboh ydrates and antioxidant enzymes in cotton seed...2012/03/31  · , A. Habibi a enzymes in _____ n ton (Gossy perenni te growth ontinues w nt. When growth are r low early

302  Iranian Journal of Plant Physiology, Vol (2), No (1)   

stem  and  fruiting  branch  internodes  length  and leaf area  (Jonathan and Alexander, 2006;  Joseph and  Johnson, 2006). Reduced  leaf area  is caused by suppressed cell enlargement. Lower  leaf area also  improves  pesticide distribution  into  the lower canopy. More importantly, lower Leaf Area Index  allows more  light  to  penetrate  the  lower canopy  for  boll  development  as  most photosynthetic  energy  for  boll development originates  from  adjacent  or  subtending  leaves. Thus, boll development in a shaded environment may result in reduced maturity, yield, and quality (Prasad and Ram, 2000; Ram, 2001).  

Pix  is  used  in  two methods.  In  the  first method,  cotton  seed  is  soaked  into pix whereas in the second method, pix  is sprayed on shoot at the  beginning  of  flowering  (Thandapani,  and Subharayalu, 2000). 

There  are many  research  studies on  the way  pix  affects  cotton  plant  growth  and development but  its  effects on  germination  and molecular  behaviors  such  as  activities  of antioxidant  enzymes  have  not  been  much studied.  Various  plant  growth  regulators  have also  been  used  in  pre‐treating  the  seeds  to induce  drought  resistance.  Plant  growth regulators  have  been  viewed  as  chemical messengers regulating the normal progression of developmental  changes  as well  as  responses  to environmental signals  (Muhammad et al., 2007). Germination and seedling development  is one of the  important  factors  in  determining  final  yield (Derrick,  2000).  Seed  treatment  by  pix  before planting  can  be  a  successful  tool  in  cotton production.  Interfering  with  hormones,  pix influences  germination  and  growth  of  cotton seedling  (Thandapani,  and  Subharayalu,  2000). The aim of  this  research was  to study  the effect of  different  values  of  pix  on  germination, catalase,  peroxidase,  ascorbate  peroxidase  and poly phenol oxidase activity of cotton seedlings.   Materials and Methods  

Cotton  seeds  (Gossypium  hirsutum  L.  cv Ci‐Ocra)  were  sterilized  with  Carboxyl  Tiraman (vitax)  for  a  rate  of  4  g  per  kg  seeds.  Then  15 seeds were  placed  in  Petri  dishes  and  separately soaked  in  different  solutions  of  pix  including  0 (control)  10,  20,  30  and  40  ppm  and  lined with 

Whatman Filter Paper (No2). Petri dishes were then kept in germinator (25 ± 1 °C and 60% humidity) for 7 days.  Seed  germination was  recorded  at 24,  36 and  48  h.  Seeds with  root  length  ≥  2 mm  were considered  as  germinated  seeds.  Germination percentage was calculated with GP=100n/N where GP was germination percentage, n represented the number  of  germinated  seeds  and  N  was  total number of seeds (Weston, 2003). Root length was also measured with a ruler (mm) on the seventh day.  

Enzyme extraction   

The  cotton  seedling  samples  weighting about  1  g were  homogenized with  4 ml  extract solution containing 1.2 g Tris, 2 g ascorbate, 3.8 g borax (Di ‐sodium tetra borate), 2 g EDTANa2, 50 g  polyethylene  glycol  2000  in  100  ml  distilled water. The  solution was placed  at 4  °C  for 24 h and  then was  centrifuged  for 30 min  at 4000  g. The  clear  supernatant  was  taken  as  enzyme source  and  used  for  catalase  and  peroxidase activity assay. 

 Catalase activity assay    

The  catalase  activity  was  assayed  by Chance  and  Maehli  (1995)  method  with  the following modification:  5 ml  of  assay mixture  for catalase  activity  contained  300  µM  of  phosphate buffer,  (pH  6.8)  100 µM of H2O2  and  1 ml of  the twice  diluted  enzyme  was  extracted.  After incubation  at  25  °C  for  1 min,  the  reaction  was stopped by adding 10 ml of 2% (v/v) H2SO4 and the residual H2O2 was titrated against 0.01 N of KMnO4 until  a  faint purple  color persisted  for  at  least  15 sec.   One unit of catalase activity  is defined as the amount  of  enzyme which  breaks  down  1  µ M  of H2O2/min under the described assay condition.  

  Peroxidase activity assay   

The  peroxidase  activity  was  determined by  Koroi  (1989) method.  Accordingly,  0.1 Ml  of enzyme  extract  was  added  to  assay  mixture containing 2 ml 0.2 M acetate buffer (pH 5.0), 0.4 ml  of  3%  H2O2  and  0.2 ml  of  0.01 M  benzidin solution  in 50% alcohol. The enzyme activity was 

Page 3: n, h, carboh ydrates and antioxidant enzymes in cotton seed...2012/03/31  · , A. Habibi a enzymes in _____ n ton (Gossy perenni te growth ontinues w nt. When growth are r low early

            

               

 

determinedIn order to were done 

 Ascorbate      In peroxidase (pH 6.5) waascorbate 5extract waswas determnm accordin Poly pheno 

Theassayed  by(1976) withassay mixtuincluding  17.6), 0.4 mlextract. Thimin.  Tspectrophoabsorbance Soluble su 

In seventh dayfor 48 h. Th10  ml  ethaethylene dicontents determinedthrough  thstandard  cusugars conc Statistical a 

Thebetween  paDuncan‐testwere selecteresults  wereprobability vof significan

d by taking tprotect enzin ice dishes

peroxidase

order  toactivity, 2 mas mixed wit50 µM in ice s added  to  tmined by takng to Arrigon

ol activity a

e  activity  of y  Manoranjah  the  followiure  for  catal.5 ml  of  0.2 pyrogallol 0s mixture wahe  enzytometrically e at 430 nm. 

gars assay 

order  to  dy cotton seedhey were  thanol  70%  ashes for 7 d

were d by  taking  the  Kochert urve  was  uscentration.  

analysis 

e statistical siarameters wt  on  SPSS  1ed for each te  given  in  tvalues p≤0.01ce. 

he absorbanyme activity. 

e activity as

o  determinml phosphateth 0.2 ml H2Odishes and 0them. The eing the absonia (1994). 

assay 

poly  phenoan  and  Mising  specificaase activity 2 M  phospha0.02 M and 0as incubatedyme  actdetermined

etermine  sodlings were den weighed and  were  pays at 4 °C. 

spectropthe absorban(1978)  metsed  to  dete

gnificance ofwas  evaluated11.5  and  fotreatment anthe  text  as m1 were adopt

nce at 530 ny, upper stag

ssay 

ne  ascorbae buffer 0.05 O2 3 %, 0.2 0.1 ml enzymnzyme activorbance at 2

ol  oxidase whram  methations: 2 ml was preparate  buffer  (p0.1 ml enzymd at 28 °C fortivity  wd by measuri

oluble  sugadried in 110 and added 

placed  in  poSoluble sugahotometricance at 485 nthod.  Glucoermine  solub

f the differend  by means ur  replicationd control. Tmean  ±SE,  tted as criteri

m. ges 

ate M ml me ity 65 

was od of ed pH me r 3 was ng 

rs, °C to oly ars ally nm ose ble 

nce of 

ons The the on 

R

Pi

Fisegeppin  

Fig40dif

Pi

coincodrcopicow 

Fig40Th

Pi

co

Effect of p

esults 

ix effect on

g.  I  shows eedling  duriermination  rpm of pix. Gn control and                  

g.  I. Effect of d0  ppm)  on  cofferent charact

ix effect on

The reotton  seedlinncreased  anomparison wry  weight  oontrol and  inix  and  boncentrationwere significa

g.  II. Effect of d0 ppm) on radiche different cha

ix effect on

The  rontent  in 

pix on some pa

n germinatio

germinationng  48  h.  Arate  was  seGermination d at concentr

different pix cootton  seed  geter = significant

n radicle len

esults showeng  in  20  ppd  this  increwith other  trf  cotton  seen concentratietween  thns  of  10  annt (Fig. III).  

different pix cocle length of searacter = signifi

n soluble an

results  show10  ppm 

arameters of 

on 

n  percentagAfter  48  h en  in  concewas the  leasration of 30 p

oncentrations  (ermination  aftly different (P≤

ngth and dry

ed that radicpm  concentrease  was  sireatments  (Fedling  was tions 20 andhese  treatmnd  40  ppm 

oncentrations  (even day old cocantly different

nd insoluble

wed  that  solof  pix  co

cotton seeds

e  of  cottonthe  highestentration  20st after 48 hppm.  

10, 20, 30 ander  48  h.  The≤0.01). 

y weight 

cle  length ofration  of  pixignificant  inFig.  II). Mostobserved  ind 30 ppm ofments  anddifferences

10, 20, 30 andotton seedlings.t (P≤0.01). 

e sugars 

luble  sugarsoncentration

s 303

n t 0 h 

d e 

f x n t n f d s 

 d . 

s n 

Page 4: n, h, carboh ydrates and antioxidant enzymes in cotton seed...2012/03/31  · , A. Habibi a enzymes in _____ n ton (Gossy perenni te growth ontinues w nt. When growth are r low early

304  Iran 

decreased. comparison 

Fig. III. Effect 40  ppm)  on  dThe different c

 

Fig. IV. Effect 40  ppm)  on  scotton  seedlidifferent (P≤0

 

Fig. V. Effect o40  ppm)  on seedlings.  The(P≤0.01). 

 Pix effect o 

Accapplication have any sicotton  seedamounts  ofseedling  is concentratiperoxidase Fig. VII showof  40  ppm

nian Journal o

This  decrn with other 

of different pixdry weight  of  scharacter = sign

of different pixsoluble  and  insngs.  The  diffe.01). 

of different Pixcatalase  active  different  cha

on antioxid

cording  to  thof different ignificant effdling  (Fig.  Vf  pix  on  pershown  in on  30  ppmactivity in cows, applicati

m  significant

of Plant Physio

ease  was treatments (

x concentrationseven  day  old nificantly differ

x concentrationsoluble  sugars erent  characte

x concentrationvity  of  seven aracter  =  sign

dant enzyme

he results ofpix concentrfect on cataV).  The  effecroxidase  actFig.  VI.  Pix 

m  causes  aomparison wion of pix in ly  increased

ology, Vol (2),

significant (Fig. IV). 

ns (10, 20, 30 acotton  seedlinrent (P≤0.01). 

ns (10, 20, 30 aof  seven  day er  =  significan

ns  (10, 20, 30 adays  old  cottificantly  differe

e activity 

f  this researcrations did nlase activity ct  of  differeivity  in  cotttreatment 

n  increase with control.concentratid  poly  phen

, No (1) 

in 

 and ngs. 

 and old ntly 

 and ton ent 

ch, not in 

ent on in in As on nol 

oxtr 

Fig40se(P

Fig40codif

D

pecoReceetKaplhostgrreenafflein(V

w

xidase  activreatments. 

g. VI. Effect of 0  ppm)  on  peeedlings.  The  d≤0.01). 

g. VII. Effect of 0  ppm)  on  polyotton  seedlingsfferent (P≤0.01

iscussion 

The  fercentage  aoncentrationesearchers  hertain  concet  al.,  2000;akryalya,  20lant  growthormones,  intimulating  erowth  only eported  thanzymes  sucffects  the  cexibility of sen  the  germVijayakumari

Also  oweight of  cot

vity  in  co

different Pix coroxidase  actividifferent  chara

different Pix coyphenol  oxidass.  The  differe1). 

findings  shoand  radicle n  20  ppm  ohave  shown entrations  of;  Sawan  et000;  Dodds  eh  regulatorsn  this  studyeffects  on at  concen

at  through h  as  cellulacell  wall  inceed cell wall mination  ra  and Janardour  data  antton  seedling

omparison 

oncentrations (ity  of  seven  dacter  =  signific

oncentrations (se  activity  of  sent  character 

owed  that growth  in

of  pix  (Figsthat  plants 

f  hormones   al.,  2000; et  al.,  2010s  such  as  py  pix  appeagerminationtration  20 stimulating ase  and  pecreasing  relafollowed by

ate  and  rohanan, 2003nalysis  showgs decreased

with  other

(10, 20, 30 andday  old  cottonantly  different

(10, 20, 30 andseven  days  old=  significantly

germinationncreased  ins.  I  and  II).respond  to  (SativrkaurSingh  and

).  Since  thepix  act  likears  to  haven  and  rootppm.  It  isactivity  of

ectinase,  pixaxation  andy an increaseoot  growth3). wed  that  dryd only  in 10

 d n t 

d d y 

n n . o r d e e e t s f x d e h 

y 0 

Page 5: n, h, carboh ydrates and antioxidant enzymes in cotton seed...2012/03/31  · , A. Habibi a enzymes in _____ n ton (Gossy perenni te growth ontinues w nt. When growth are r low early

Effect of pix on some parameters of cotton seeds 305

 

ppm concentration of pix and this reduction was significant  in  comparison with  other  treatments (Fig. III). Results of this study for concentration 10 ppm  of  pix  are  consistent with  an  earlier  study reported  by  Zhao  and  Oosterhuis  (2000)  who observed that the use of pix reduced seedling dry weight. 

Figure  (IV)  shows  changes  in  soluble sugars  and  starch  content  in  cotton  seedling. According  to our results  the amount of starch  in all  treatments  decreased  compared  to  the control.  The  highest  of  starch  content  and  the lowest of soluble sugars  in cotton seedling were seen  in concentration 10 ppm pix  (Fig.  IV). Plant growth  regulators  such  as  pix  decrease  cotton vegetative  growth  by  inhibiting  gibberellic  acid (Muhammad  et  al.,  2007).  Gibberellic  acid  is  a natural  plant  hormone  that  increases  the  α‐amylase activity in seeds and plants. This enzyme breaks down  starch and  converts  it  into glucose (Isabel and Jennifer, 2001). In this experiment, all treatments  containing  concentrations  of  10,  20, 30  and  40  increased  the  amount  of  starch  as compared  to  the  control.  This  seems  to  be related to lack of amylase activity in the presence of  different  values  of  pix.  These  results  are consistent  with  results  of  other  researchers (Gopalakrishnan, et al., 2004; Muhammad, et al., 2007). 

The  results  also  showed  that  catalase enzyme  activity  was  not  affected  by  different concentrations of pix as  the difference between control  and  treatments was  not  significant  (Fig. V). It seems that catalase in cotton seedling is not sensitive to the pix values  in this experiment. On the  other  hand,  cotton  seed  treatments  with different  concentrations  of  pix  increased peroxidase activity as compared with the control (Fig. VI). Exogenous application of gibberellic acid reduced  the  peroxidase  activity  in  rice  seedling (Isabel and Jennifer, 2001). Gibberellic acid stops peroxidase  production  in  spinach  plant. Peroxidase  limits  the  growth  by  hardening  the cell  wall.  Gibberellic  acid  reduces  the  strength and  hardness  through  the  inhibition  of peroxidase production. Peroxidase  reversing the balance  between  cell  wall  phenolic  polymers, decreases  cell  wall  elasticity  (Potter  and  Fry, 2000).  In  the present study  it was observed  that the  rate  of  peroxidase  activity  in  all  pix 

treatments was  higher  than  the  control.  This  is consistent with the study reported by Nagashima et al.  (2005) which announced  that pix prevents the  synthesis  of  gibberellic  acid    and subsequently increases peroxidase activity. 

Our  results  showed  that  treatment with pix increased poly phenol oxidase activity and this increase was significant at concentration 40 ppm (Fig. VII).  It was reported when aleuron  layers of barley  were  treated  with  gibberellic  acid,  the content  of  phenolic  compounds  was  reduced (Gubler and Ashford, 2004). Poly phenol oxidase is  available  to  significant  amounts  in most plant tissues and  the ROS are converted  to mono and dihydroxy  phenolic  compounds.  Substrates  of these enzymes are phenolic compounds (Coetzer et  al.,  2001).  In  this  study,  the  activity  level  of poly  phenol  oxidase  in  all  concentrations  of  pix was  increased  and  this  increase  was  significant compared  to  the  control.  Since  phenolic compounds  are  the  substrate  of  poly  phenol oxidase  enzyme,  pix  appears  to  increase  the phenolic  compounds  and  subsequently,  enzyme activity.  Another  possibility  is  that  pix  directly affects synthesis of the enzyme and this increases its concentration and activity.  References  Arrigoni, O. 1992.  'Ascorbate   system      in     plant   

development'.  Journal  of  Bioenergy Biomember 26: 407‐419.  

Chance,  B.  and  A.  Maehley.  1995.    'Assay  of catalase and peroxidase'. Method Enz. 2: 764‐774. 

Coetzer, C., D. Corsini,  S.  Love,  J. Pavek  and N. Tumer. 2001. 'Control of enzymatic  browning in potato  (Solanum  tuberosuml) by sense and antisense  RNA  from  tomato  Polyphenol oxidase'. J. Agric. Food chem. 49: 652‐657 

Dodds, M., J. Banks, C. L. Barber, K. Randal and M.  Steven.  2010.  'Agronomy  and  soil  belt wide  evaluation  of  commercially  available plant  growth  regulators'.  J.  Cotton  Sci.  14: 119–130. 

Derrick, M., Oosterhuis and , Z. Duli. 2000. 'Field evaluation  of  plant  growth  regulators'. Proceedings  of  the  2000  Cot.  Res.  Meeting. Fayetteville, Arkansas.USA. 

Page 6: n, h, carboh ydrates and antioxidant enzymes in cotton seed...2012/03/31  · , A. Habibi a enzymes in _____ n ton (Gossy perenni te growth ontinues w nt. When growth are r low early

306  Iranian Journal of Plant Physiology, Vol (2), No (1)   

Ghourab, M. H., H. Wassel  and O. M.  El Nour. 2000.  'The  effect  of  mepiquat  chloride application  on  the  productivity  of  cotton plants'. Egypt. J. Agric. Res. 78 (3): 1207‐1218. 

Gopalakrishnan,  N.,  A.  H.  Prakash.  and  S.  E. Khader.  2004.  'In  vitro  fiber  development  in cotton  (Gossypium  hirsutum  L.)  I.  hormonal regulation'. Indian. J. Plant. Physiol. 9 (3): 255‐259. 

Gubler,  F.,  and A.  E. Ashford.  2004.  'Release of ferulic  acid  esters  from  barley  aleurone.  I. time course of gibberellic acid induced release from isolated layers'. Plant biology 12 (3): 297‐305. 

Harish,  H.,  W.  Ratnayaka,  T.  Molin  and  M.  S. Tracy.  2003.  'Physiological  and  antioxidant responses of cotton and spurred anode under interference  and mild  drought'.  J.  Expt    .Bot. 54 (391): 2293‐2305. 

Havargi,  R.  2007.  Mitigation  drought  stress through  plant  growth  regulators  in  Vesicular arbuscular mycorrhizae  (VAM) cotton. Master of  Science  (agriculture)  Thesis  in  crop physiology.  Department  of  Crop  Physiology. College of Agriculture, Dharwad. University of Agricultural Science. 

Isabel,  R.  P.  and  W.  M.  Jennifer.  2001. 'Gibberellic  acid  and dwarfism  effects on  the growth dynamics of B73 maize  (Zea   mays L.) leaf blades: a  transient  increase  in apoplastic peroxidase  activity precedes  cessation of  cell elongation'. J. Exp. Bot. 52 (361): 1673‐1682. 

Jonathan,  D.  S.  and  M.  S.  Alexander.  2006. 'Influence of plant density on cotton response to mepiquat chloride application'. Agro. J. 98: 1634‐1639. 

Joseph,  T.  J.  and  T. P.  Johnson. 2006.  'Effect of mepiquat  pentaborate  on  cotton  cultivars with different maturities'.  J. Cot. Sci. 10: 128‐135. 

Kochert, G. 1978.    'Carbohydrate   determination  by   the   phenol     sulphuric   acid     method'    in Helebust., J. A. and J. S. Craig (eds.). Handbook of Phycologia  Method. Cambridge: Cambridge University Press. 

Koroi, S. A. 1989.  'Gel electrophoresis tissue and spectrophotometrscho  unter  uchungen zomeinfiuss der  temperature auf struktur der amylase and   peroxidase    isoenzyme'. Physiol.  Rev. 20: 15‐23. 

Manoranjan,  K.  and  D.  B.  Mishram.  1976. 'Catalase, peroxidase and poly phenol oxidase activities  during  rice  leaf  senescence'.  Plant Biochem. Enz. 57: 315‐319.  

Muhammad,  I.,  H.  Khezir  and  I.  Noor.  2007. 'Cotton  response  to  mepiquat  chloride  and nitrogen  under  ultra  narrow  plant  spacing'. Asian. J. Plant. Sci. 6 (1): 87‐92. 

Nagashima, G. T., C. J. Marur, R. S. Yamaoka and E. Miglioranza. 2005.  'Development of cotton plant  from  seed  soaked  with  mepiquat chloride'. Physiol.  Rev. 40: 943‐946. 

Najma, A., A., Bano, S., Ramzan and M. Usman. 2000. 'Effect of VAM on drought tolerance and growth of plant comparison with the effect of growth  regulators'. Pakistan  J. Biol. Sci. 3  (6): 957‐959. 

Potter,  I.  and  S.  Fry.  2000.  'Xyloglucan endotransglycosylase  activity  in  pea internodes'. Plant Physiol. 103: 235‐241. 

Prasad,  M.  and  P.  Ram.  2000.  'Influence  of mepiquat  chloride  on  growth,  yield  and quality of cotton'. Pesticide Res. J. 12 (2): 261‐262. 

Ram,  P.,  P.  Mangal  and  D.  K.  Pachauri.  2001. 'Effect of nitrogen,  chlormequat  chloride and FYM  on  growth  yield  and  quality  of  cotton (Gossypium  hirsutum  L.)'. Ann. Agric.  Res.  22 (1): 107‐110. 

Sativrkaur, Anil K. Gupta and K. Narinder. 2000. 'Gibberllic  acid  and  kinetin  partially  reverse the effect of water stress on germination and seedling  growth  in  chickpea'.  J.  Agro.  8  (5): 298‐300.  

Sawan, Z. M., A. A. Mohamed, R. A. Sakr and A. M.  Tarrad.  2000.  'Effect  of  kinetin concentration and methods of application on seed germination, yield components, yield and fibre  properties  of  the  Egyptian  cotton (Gossypium  barbadense)'.  Environ.  Exp.  Bot. 44 (1): 59‐68. 

Singh,  K.  and  B.  L.  Kakryalya.  2000.  'Seed germination, seedling growth and yield pigeon pea  as  influenced  by  seed  treatment  with growth regulators'. Annals Agric. Res. 13 (11): 12‐18. 

Thandapani,  V.,  and  M.  Subharayalu.  2000. 'Effect  of  pre‐sowing  seed  treatment  with chemicals  and  growth  regulators  for  drought 

Page 7: n, h, carboh ydrates and antioxidant enzymes in cotton seed...2012/03/31  · , A. Habibi a enzymes in _____ n ton (Gossy perenni te growth ontinues w nt. When growth are r low early

Effect of pix on some parameters of cotton seeds 307

 

tolerance  and  yield  of  cotton  under  rain  fed condition'. Madras‐Agri. Jr. 73 (12): 668‐675. 

Vijayakumari,  B.  and  K.  Janardhanan.  2003. 'Effect  of  biofertilizers  on  seed  germination, seedling  growth  and  biochemical  changes  in silk  cotton  [Ceiba pentandra  (Linn.) Gaertn.]'. Crop Res., Hisar. 25 (2): 328‐332. 

                                         

Weston, L. A. and S. O.   Duke. 2003.  'Weeds   and  crop    allelopathy'.    Critical  Rev.  Plant  Sci.    22: 367‐389. 

Zhao,  D.  and  D. M. Oosterhuis.  2000.  'Pix  plus and mepiquat  chloride effects on physiology, growth,  and  yield  of  field‐growth  cotton'.  J. Plant Growth Reg. 19: 415‐422. 

                                           

Page 8: n, h, carboh ydrates and antioxidant enzymes in cotton seed...2012/03/31  · , A. Habibi a enzymes in _____ n ton (Gossy perenni te growth ontinues w nt. When growth are r low early

308  Iranian Journal of Plant Physiology, Vol (2), No (1)