1. uvod u histoloske tehnike

Uvod u osnove histoloUvod u osnove histološškihkih tehnikatehnika u biomedicini u biomedicini

Prof. Dr Gorana RančićProf. Dr Gorana Rančić

You are either healthy or ill. You are either healthy or ill. If you are healthy, there is nothing worrying If you are healthy, there is nothing worrying about.about.If you are ill, still you may not worry about. If you are ill, still you may not worry about. Whether you can recover or not recover is the Whether you can recover or not recover is the problem. problem. Recover, then nothing be worried about.Recover, then nothing be worried about.Not recover, then the problem is to come to Not recover, then the problem is to come to Heaven or Hell?Heaven or Hell? Heaven, nothing be worried Heaven, nothing be worried about.about. Even if you are coming to Hell, Even if you are coming to Hell, still don’t you don’t worry about.still don’t you don’t worry about. You will get friends there.You will get friends there. So, there is nothing worrying So, there is nothing worrying about.about.

Don’t worry about (an American Don’t worry about (an American poem)poem)

Osnovi histološke tehnikeOsnovi histološke tehnike

Ispitivanje uzoraka u svežem stanju Ispitivanje uzoraka u svežem stanju in vivoin vivo Ispitivanje prethodno obrađenog materijala Ispitivanje prethodno obrađenog materijala

(fiksiranog, brušenog, dekalcinisanog)(fiksiranog, brušenog, dekalcinisanog)

TRAJNI PREPARATITRAJNI PREPARATI

Klasična histološka tehnikaKlasična histološka tehnika

IZBOR I UZIMANJE MATERIJALAIZBOR I UZIMANJE MATERIJALA OBRADA MATERIJALAOBRADA MATERIJALA IZRADA PREPARATAIZRADA PREPARATA BOJENJE PREPARATABOJENJE PREPARATA ANALIZA PREPARATAANALIZA PREPARATA

UZIMANJE MATERIJALAUZIMANJE MATERIJALA

NEKROPSIJANEKROPSIJA BIOPSIJA, ASPIRACIJA... BIOPSIJA, ASPIRACIJA...

ĆELIJSKI I TKIVNI UZORCIĆELIJSKI I TKIVNI UZORCI

ASPIRATI, BRISEVI, PUNKTATIASPIRATI, BRISEVI, PUNKTATI

PRINT UZORCIPRINT UZORCI

KRVNI RAZMAZIKRVNI RAZMAZI

TKIVOTKIVO ĆELIJE ĆELIJE

OBRADAOBRADA

DOBRI REZULTATI BOJENJA!!DOBRI REZULTATI BOJENJA!!

РАЗЛИЧИТИ УГЛОВИПРЕСЕКА

BOJENJE HISTOLOŠKIH BOJENJE HISTOLOŠKIH PREPARATAPREPARATA

** KLASIČNA STANDARDNA METODA KLASIČNA STANDARDNA METODA

HEMATOXYLIN- EOSINHEMATOXYLIN- EOSIN ** SELEKTIVNA BOJENJASELEKTIVNA BOJENJA BOJENJA SPECIFIČNIH ĆELIJA, BOJENJA SPECIFIČNIH ĆELIJA,

NJIHOVIH DELOVA, SEKRETNIH NJIHOVIH DELOVA, SEKRETNIH PRODUKATAPRODUKATA

BOJENJE ELEMENATA ECM: VLAKANA, BOJENJE ELEMENATA ECM: VLAKANA, OSNOVNE SUPSTANCE...OSNOVNE SUPSTANCE...

HEMATOKSILIN HEMATOKSILIN H.CAMPECHIANUMH.CAMPECHIANUM

UPOTREBA PRIRODNIH UPOTREBA PRIRODNIH BOJABOJA

KARMINKARMIN(ZA BOJENJE MUCINA)(ZA BOJENJE MUCINA)

ĆELIJE / EKSTRACELULARNE

KOMPONENTEBOJENJE

Jedro Heterohromatin Euhromatin JedarceCitoplazma Ergastoplazma Opšta citoplazma Citoplazmatski filamentiEkstracelularne komponente Kolagena vlakna Elastična vlakna Retikularna vlakna

Osnovna supstanca Dekalcinisani koštani matriks Bazalna membrana

PlavoNegativnoPlavo

PlavoCrveno/rozeCrveno/roze

Crveno/rozeCrveno/roze (zahtevaju specijalno bojenje)Crveno/roze (zahtevaju specijalno bojenje)Svetlo ljubi~astoCrveno/roze Crveno/roze (zahtevaju specijalno bojenje)

BOJENJE JEDRABOJENJE JEDRA

JEDRO-KISELI KARAKTER-KATJONSKE JEDRO-KISELI KARAKTER-KATJONSKE BOJEBOJE

Za bojenje jedra najbolji je hematoksilin Za bojenje jedra najbolji je hematoksilin hematein sa metalima- Fe,K, Al se vezuje za hematein sa metalima- Fe,K, Al se vezuje za hromatin zbog el.negativnog nabojahromatin zbog el.negativnog naboja

Jedro i ribozomi se boje bazofilno Jedro i ribozomi se boje bazofilno PLAVOPLAVO

BOJENJE CITOPLAZMEBOJENJE CITOPLAZME

CITOPLAZMA-ALKALNI KARAKTER-CITOPLAZMA-ALKALNI KARAKTER-

ANJONSKE BOJE - KISELE BOJEANJONSKE BOJE - KISELE BOJE Citoplazma se najbolje boji eozinom Citoplazma se najbolje boji eozinom CRVENOCRVENO Acidofilija zbog prisustva mitohondrija može Acidofilija zbog prisustva mitohondrija može

se pokazati Masonovim trihromnim bojenjem, se pokazati Masonovim trihromnim bojenjem, PTAH (fosfotungstični kiseli hematoksilin) PTAH (fosfotungstični kiseli hematoksilin) metodom ili PAS-PTAH kombinovanom metodom ili PAS-PTAH kombinovanom metodommetodom

HEMATOKSILIN EOZIN HEMATOKSILIN EOZIN METODAMETODA

HEMATOKSILIN EOZIN HEMATOKSILIN EOZIN METODAMETODA

GOMORI AF GRIMELIUSGOMORI AF GRIMELIUS

VIKTORIJA BLU-IVIĆ AZANVIKTORIJA BLU-IVIĆ AZAN

ORCEINORCEIN REZORCIN REZORCIN FUKSIN FUKSIN

BOJA za krvne razmaze BOJA za krvne razmaze

MAY GRMAY GRÜÜNWALD GIMSA sadrži jednu NWALD GIMSA sadrži jednu alkalnu boju(Azur II) i jednu kiselu (eozin)alkalnu boju(Azur II) i jednu kiselu (eozin)

Mehanizam bojenja nerazjašnjen u potpunostiMehanizam bojenja nerazjašnjen u potpunosti Boji:Boji: ACIDOFILNO- CRVENOACIDOFILNO- CRVENO BAZOFILNO- PLAVOBAZOFILNO- PLAVO AZUROFILNO- LJUBIČASTOAZUROFILNO- LJUBIČASTO NEUTROFILNO – OKER NARANDŽASTONEUTROFILNO – OKER NARANDŽASTO

RAZLIČITA BOJENJA KRVNIH RAZLIČITA BOJENJA KRVNIH RAZMAZARAZMAZA

WRIGHT

MGG

MIKROSKOPIRANJEMIKROSKOPIRANJE

MIKROSKOP ROBERTA HUKAMIKROSKOP ROBERTA HUKA

COOLSCOPECOOLSCOPE

МУЛТИМЕДИЈАЛНЕ ТЕХНОЛОГИЈЕ МУЛТИМЕДИЈАЛНЕ ТЕХНОЛОГИЈЕ

СПЕРМАТОЗОИД (КОМПЈУТЕРСКА АНИМАЦИЈА)СПЕРМАТОЗОИД (КОМПЈУТЕРСКА АНИМАЦИЈА)

СЛУШНЕ ЋЕЛИЈЕ У УНУТРАШЊЕМ УВУ

Obrisati preparate!!!!!!!Obrisati preparate!!!!!!!

ОСВЕТЉЕЊЕ И ОШТРИНА ОБЈЕКТА

Pokrovno staklo- sa gornje strane!!!Pokrovno staklo- sa gornje strane!!!

БОЈЕ И ОБЛИЦИБОЈЕ И ОБЛИЦИ

СУСУ ОНООНО ШТОШТО

OKOOKO

НАЈБОЉЕНАЈБОЉЕ ВИДИВИДИ