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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
TRABAJO DE TITULACIÓN SOMETIDA A CONSIDERACIÓN DEL
HONORABLE CONSEJO DIRECTIVO DE LA FACULTAD DE
CIENCIAS AGROPECUARIAS PARA OPTAR POR EL TÍTULO DE:
MÉDICA VETERINARIA ZOOTECNISTA
DIAGNÓSTICO DE Coronavirus Canino MEDIANTE LA TÉCNICA DE
ELISA EN EL CIUDAD DE SANTA ROSA
AUTORA
Diana Carolina Tituana Tibanta
DIRECTOR
DR. FAVIAN MAZA VALLE, Mg. Sc.
2014
ii
Este trabajo de titulación ha sido aceptado en forma presente por el tribunal de grado
dominado por el H. Consejo Directivo de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la
Universidad Técnica De Machala, como requisito para optar el título de:
MÉDICA VETERINARIA ZOOTECNISTA
Dr. W. Favián Maza V. MG. SC., Director
Dr. Luis Hurtado Flores MG. SC., Miembro
Dr. Segundo Martínez Salinas MG. SC., Miembro
iii
La responsabilidad por las investigaciones,
resultados y discusión del presente trabajo,
pertenecen exclusivamente a la autora:
Diana Carolina Tituana Tibanta
iv
DEDICATORIA
Primeramente a Dios por guiar mis pasos y darme fuerzas para culminar esta etapa de mi vida.
A mi mami Herlinda por su amor, comprensión y apoyo incondicional, a mi hermana Paulina
y a mis sobrinos Dainary y David por estar siempre a mi lado.
A mi querido y fiel amigo Muñeco, quien ha sido mi inspiración para mantenerme en esta
profesión y a mis pequeñas mascotas Romeo y Lucas.
Diana Tituana
v
AGRADECIMIENTO
Primero a Dios por mantenerme fuerte y guiar mis pasos. A mi familia por el amor y
comprensión que me han brindado en cada etapa de mi vida.
A mi querido Jandry por su apoyo y comprensión, a pesar de nuestros altibajos siempre ha
estado a mi lado.
A mi mejor amiga de infancia María del Carmen, a mis amigos y compañeros.
A todos los profesores que con su paciencia y enseñanzas me inculcaron no solo en la
profesional sino también en lo moral.
Al Dr. Favián Maza, Dr. Luis Hurtados, Dr. Segundo Martínez Salinas, quienes a pesar de sus
ocupaciones me brindaron su tiempo para culminar este trabajo.
A los doctores de las clínicas veterinaria que colaboraron para realizar esta investigación, de
manera especial a la Dr. Janeth Rodríguez en quien además encontré una linda amistad.
vi
ÍNDICE
Tema Página
1. INTRODUCCIÓN 1
2. REVISIÓN DE LITERATURA 2
2.1. Definición 2
2.2. Etiología 2
2.3. Hospedadores 2
2.4. Formas De Transmisión 3
2.5. Epizootiología 3
2.6. Periodo De Incubación 4
2.7. Patogenia 4
2.8. Signos Clínicos 5
2.9. Diagnostico 6
2.10. Diagnostico diferencial 8
2.11. Tratamiento 9
2.12. Prevención 9
3. MATERIALES Y MÉTODOS 11
3.1. Materiales 11
3.1.1. Ubicación 11
3.1.2. Población y muestra 12
3.1.3. Tipo de investigación 12
3.1.4. Técnica de observación 13
3.1.5. Equipos y materiales 13
3.1.5.1. Muestra 13
vii
3.1.6. Variables 13
3.1.7. Medición de variables 13
3.2. Métodos 15
3.2.1. Método de campo 15
3.2.2. Método de laboratorio 15
3.2.3. Materiales de la prueba 15
3.2.4. Procedimiento para el test 16
3.2.5. Interpretación de los resultados del test 16
3.2.6. Análisis estadístico 17
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 18
4.1. Porcentaje de Coronavirus Canino 18
4.2. Relación de la Enfermedad de Acuerdo a La Edad 18
4.3. Relación de la Enfermedad de Acuerdo al Sexo 19
4.4. Relación de la Enfermedad de Acuerdo a la Raza
20
4.5. Relación de la Enfermedad con el lugar de procedencia 21
5. CONCLUSIONES 23
6. RESUMEN 24
7. SUMMARY 25
7. BIBLIOGRAFÍA 26
8. WEBGRAFIA 27
9. ANEXOS 28
viii
ÍNDICE DE FIGURAS
Tema Página
FIGURA 1. 18
Porcentaje de Coronavirus Canino en la ciudad de Santa Rosa, durante el año 2014.
FIGURA 2. 19
Casos positivos y porcentaje de Coronavirus Canino de acuerdo a la edad en los animales
investigados.
FIGURA 3. 20
Casos positivos y porcentaje de Coronavirus Canino de acuerdo al sexo en los animales
investigados.
FIGURA 4. 21
Casos positivos y porcentaje de Coronavirus Canino de acuerdo a la raza de los animales
investigados.
FIGURA 5. 22
Casos positivos y porcentaje de Coronavirus Canino de acuerdo a la procedencia en los
animales investigados
ix
1. INTRODUCCIÓN
La enfermedad infecciosa producida por el Coronavirus Canino es altamente contagiosa viral
que afecta a toda especie canina de todas las edades, especialmente a los cachorros. Es una
enfermedad que muchas de las veces no presentan síntomas y solo se presentan con cuadros de
diarreas que se terminan de dos a tres días volviendo el animal en un estado normal, esto se
presenta principalmente en animales adultos, en cachorros o en neonatos los cuales pueden
sufrir severas infecciones provocándoles la muerte siendo la deshidratación su causa principal.
Estos animales infectados y previamente ya recuperándose, todavía siguen excretando el virus,
contagiándose de manera oro nasal con heces que contienes el Coronavirus Canino, por dos
semanas o más haciendo vulnerable a muchos animales sobretodo callejeros.
Este virus se puede asociar con agentes oportunistas como es el Parvovirus Canino, el más
frecuente de los patógenos entéricos.
La presente investigación se realizará en la ciudad de Santa Rosa, en el sector no hay
antecedentes de coronavirus canino. El diagnóstico a elaborar será por medio del kit de prueba
rápido del test de Elisa. Con el test tendremos un resultado de un número de animales enfermos
sobre 100, por lo que se determinaría un resultado porcentual.
El diagnóstico presuntivo solo se da a través de la exploración clínica y la presencia de signos
clínicos.
Los objetivos planteados para esta investigación son los siguientes:
1. Determinar la presencia de coronavirus canino en la ciudad de Santa Rosa mediante la
prueba de Elisa.
2. Determinar el porcentaje de coronavirus canino según la edad, sexo, raza y procedencia
de animales infectados.
3. Elaborar un mapa epidemiológico de coronavirus canino de acuerdo al lugar de
procedencia de los animales positivos.
2
2. REVISIÓN DE LITERATURA
2.1. DEFINICIÓN
Domínguez (2004), manifiesta que la enteritis causada por el Coronavirus Canino (CVC) es
una enfermedad altamente contagiosa, de diseminación rápida, más severa en cachorros
jóvenes, sin embargo los perros de cualquier edad, sexo y raza son susceptibles.
El Coronavirus canino (CCV) es un virus de tropismo intestinal aislado frecuentemente de las
perreras. Es enzoótico en todo el mundo ya que ha sido demostrada la infección por este virus
en Europa, USA, Tailandia y Australia. (Negro, 2009)
La gastroenteritis canina causada por Coronavirus Canino (CCV) es una enfermedad infecciosa,
relativamente común, de rápida diseminación, que se contagia por contacto oronasal con heces
que contienen CCV sirviendo como fuente principal de infección. (Pardo y Mackowiak, 2003)
2.2. ETIOLOGÍA
Alvarado (2005), manifiesta que el Coronavirus Canino es un virus RNA de cadena helicoidal
sencilla que pertenece a la familia Coronaviridae, misma a la cual pertenecen el virus de la
gastroenteritis transmisible del cerdo, los Coronavirus entéricos de felinos y de otras especies,
incluyendo al del hombre.
Su tamaño varía entre 60 y 220 nm.
La enteritis por Coronavirus Canino es una enfermedad contagiosa aguda de los perros causada
por un virus que tiene epitiliotropismio y que invade preferentemente los eritrocitos de las
puntas de las vellosidades, eso da como resultado la destrucción, la atrofia y la fusión de las
vellosidades causando diarrea. (Birchard y Sherding, 2002)
2.3. HOSPEDADORES
Este virus es específico solamente afecta a cánidos domésticos y silvestres.
3
Es posible que todos los miembros salvajes de la familia Canidae sean susceptibles a la
infección con coronavirus canino, aunque sólo se han aislado desde coyotes con diarrea.
(Berríos y Durán, 2005)
2.4. FORMAS DE TRANSMISIÓN
Los coronavirus se diseminan rápidamente a través de heces y vómitos contaminados. Los
perros afectados eliminan el virus por lo menos 2 semanas luego de la infección. (Greene, 2008)
La ruta natural de transmisión es fecal-oral. Las heces son la mayor fuente de infección ya que
los perros infectados excretan el virus a través de la materia por 6 a 9 días pudiendo llegar a
hacerlo por tiempos aún más prolongados. (Negro, 2009)
Los perros afectados eliminan el virus por lo menos 2 semanas luego de la infección. (Alvarado,
2005)
2.5. EPIZOOTIOLOGÍA
Pratelli A. (2005), mencionó que el coronavirus canino está asociado a enfermedad leve o
subclínica con bajo índice de mortalidad.
La seroprevalencia es entre 0 y 80%, describiéndose una seroprevalencia de 45% en perros
normales y de un 61% en perros con diarrea. El coronavirus canino está asociado a enfermedad
leve o subclínica con bajo índice de mortalidad.
Alvarado, (2005) manifestó que la morbilidad es alta, pero la mortalidad es baja. El virus puede
estar diseminado hasta en el 70% de la población canina, incluso en mayores proporciones en
criaderos de perros, albergues o en poblaciones en donde existen cantidades importantes de
perros vagabundos, que según las pruebas serológicas para detección de anticuerpos en sangre,
se han expuesto a la infección y se recuperaron.
En 1971 se aisló de perros del ejercicito de los Estados Unidos un Coronavirus Canino (cepa 1-
71) durante una epizootia de enfermedad diarreica. La infección experimental de crías recién
nacidas produjo gastroenteritis con diarrea, y se encontró el virus en las heces durante seis y
nueve días. Este virus, muy exigente, muestra susceptibilidad variable a células primarias de
4
riñón, pero crece bien en una línea celular canina, sus propiedades, patogenicidad, diagnostico
e inmunidad, son similares a los de otros coronavirus. (Mohanty y Dutta, 1988)
2.6. PERIODO DE INCUBACIÓN
Domínguez, (2004) manifiesta que el período de incubación es corto: 1 a 4 días en el campo y
24 a 48 horas en condiciones experimentales. Se observan vómitos y diarrea de 1 a 3 días pos-
infección.
Su aislamiento a partir de las heces de perros infectados suele hacerse entre los 3 y 14 días
aproximadamente después de la infección. Poseen un marcado tropismo por las células
epiteliales del tracto respiratorio y entérico.
Durante la enteritis, el virus ataca a las células maduras del epitelio causando que las mismas
se fusionen y se atrofien.
2.7. PATOGENIA
Domínguez (2004), manifiesta que la forma clínica como en la asintomática de enteritis por
coronavirus, la patogénesis es la misma. El virus ataca a las células maduras del epitelio de los
micros vellosidades que cubren las paredes del intestino delgado, causando que se atrofien y
fusionen. Conforme se erosiona la punta de las vellosidades, la capacidad de absorción y
digestión disminuye resultando en diarrea.
El virus se mueve hacia el intestino grueso y se excreta en las heces. Las células del epitelio
basal en las criptas de las vellosidades del intestino delgado comienzan a dividirse rápidamente,
para remplazar a las células dañadas por el coronavirus. Si no hay factores que lo compliquen,
el intestino sanará, las vellosidades se regeneran, y el perro solamente experimentará una
diarrea leve y transitoria del coronavirus clínico, o inclusive puede parecer completamente
asintomático.
Un estudio reciente demostró que Corona-VVM protegió contra el daño intestinal y previno la
excreción viral en el 88% de los vacunados, a diferencia de las vacunas muertas disponibles
que permiten la excreción continua de virus virulento. Además, no pudo ser recuperado el virus
virulento del intestino de más del 90% de los vacunados tratado con Corona-VVM
Durante la enteritis, el virus ataca a las células maduras del epitelio causando que las mismas
se fusionen y se atrofien. (Negro, 2009)
5
Alvarado (2005), manifiesta, que el virus ingresa a la célula mediante pinocitosis y después se
replica en el citoplasma mediante gemación dentro de las vesículas citoplasmáticas y finalmente
ocasiona la muerte celular.
2.8. SIGNOS CLÍNICOS
Domínguez (2004), expreso que hay una forma asintomática de la enfermedad en la que los
perros parecen clínicamente normales, aunque ocurre daño al intestino delgado y excreción del
virus en las heces, diseminando la enfermedad a cualquier cachorro o perro adulto susceptible.
Pardo y Mackowiak, (2003), manifestaron que los signos clínicos aparentes de la enfermedad
por Coronavirus incluyen vómito, diarrea, depresión, deshidratación, y ocasionalmente,
síntomas respiratorios asociados.
Alvarado (2005), expreso que los signos más comunes en perros menores de un año,
presentándose una diarrea acuosa leve, generalmente auto limitante; en ocasiones llega a ser
hemorrágica pero si no existe una complicación por otros patógenos, no se presenta ni fiebre ni
leucopenia. Los signos clínicos duran de 1 a 12 días, pero la diarrea puede ser intermitente
durante 3 0 4 semanas.
Berríos y Durán (2005), expresan que la recuperación ocurre entre 7 y 10 días de iniciado el
cuadro. Los perros que se recuperan parecen ser inmunes a la reinfección.
Coyne (2006), manifiesta que lo signos clínicos en los cachorros infectados son variables, ya que
se han reportado casos que van desde una infección inaparente, hasta casos de enteritis y diarrea
severas. La consistencia de las heces va desde pastosa a completamente líquida.
Ocasionalmente se observa moco y sangre en las heces, y generalmente los cachorros no
presentan fiebre. La leucopenia no es un signo en la infección por CCV.
Aunque la enteritis por coronavirus es típicamente una enfermedad leve, las infecciones mixtas,
naturales o experimentales, de CPV con CCV, o de CCV con Campylobacter provocan una
enfermedad severa. Se ha estimado que las infecciones mixtas de CCV con CPV son las
causantes del 15 al 25% de los casos de diarreas severas en el perro.
Birchard y Sherding, (2002) mencionan que la mayoría de perros infectados por Coronavirus
Canino son asintomáticos, pero algunos manifiestan una anorexia y depresión de aparición
6
aguda seguidas por vómito y diarrea. La diarrea varia de blanda a acuosa y algunas veces
contiene moco y sangre roja fresca.
La mayor parte de perros infectados no tienen fiebre, los signos son leves y se confunden
fácilmente con diversas causas inespecíficas de diarrea leve o de corta duración.
2.9. DIAGNÓSTICO
Negro (2009), indica que es difícil establecer un diagnóstico definitivo de la enfermedad
causada por Coronavirus Canino. Es importante descartar otras causas de vómito y diarrea tal
como infección causada por Parvovirus Canino, entero bacterias, parásitos, venenos y causas
no infecciosas de diarrea.
El diagnóstico no siempre es fácil, ya que los síntomas del coronavirus pueden confundirse con
los de otras enfermedades, incluyendo parasitosis o el temido parvovirus, por ello se necesitan
análisis específicos como son el test de ELISA, pruebas de neutralización de virus,
visualización con microscopio electrónico y la nueva prueba de PCR transcriptasa reversa.
Birchard y Sherding (2002) mencionaron que la enteritis por Coronavirus Canino en los perros
se considera en caso de un inicio agudo de signos de gastroenteritis especialmente si otros
perros de la zona están afectados. Ya que la enteritis por Coronavirus no es mortal y el único
tratamiento es de sostén no es necesario la combinación definitiva del laboratorio para el
tratamiento eficaz del caso, excepto para documentar el brote epizoótico.
Los resultados de una hematología sistemática, la bioquímica sérica y las radiografías
abdominales generalmente son normales.
Requiere que el laboratorio detecte el Coronavirus en las heces por microscopia electrónica,
aislamiento por virus o PCR durante la enfermedad aguda. Para el examen fecal por
microscopia electrónica se necesitan heces frescas (las muestras se pueden refrigerar pero no se
pueden congelar). El aislamiento del virus y la PCR se realizan en laboratorios de investigación
y no están disponibles para las clínicas.
La Prueba ELISA
Puede detectar anticuerpos IgM específicos, que aparecen en las etapas tempranas de la
infección, desapareciendo entre las 2 y 3 semanas pos-infección.
7
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Tiene una sensibilidad aproximadamente 10 veces más alta, y se la puede utilizar para el
diagnóstico de coronavirus canino, pero esta técnica está· disponible en pocos laboratorios y ha
sido usada principalmente para investigación.
Investigaciones de Coronavirus Canino en la ciudad de Machala, Pasaje y Huaquillas.
Gonzaga, (2008), quien en su investigación realizada en la Ciudad de Machala obtuvo un
porcentaje del 13% positivo a Coronavirus Canino.
Ha registrado el origen de los casos dividiendo la ciudad en poblaciones de Centro, Urbano y
Suburbano y animales de que llegaron a consulta fuera de la Ciudad de Machala.
Aparentemente cachorros que viven en el centro de ciudad de Machala están menos afectados,
posiblemente porque gozan mejores condiciones sanitarias. El método utilizado para el
diagnóstico fue el kit de prueba rápida del test de Elisa.
Guartazaca, (2010), quien en su investigación realizada en la ciudad de Pasaje obtuvo un
porcentaje del 7% positivo a Coronavirus Canino.
Tomo las muestras en cada clínica de la ciudad de pasaje a animales que presentaban signos
característicos como: decaimiento fiebre, vómito, diarrea clásica de la enfermedad. El método
utilizado para el diagnóstico fue el kit de prueba rápida del test de Elisa.
Aguirre, (2011), realizo la investigación en la ciudad de Huaquillas en el que obtuvo un
porcentaje del 17% de animales positivos a Coronavirus Canino.
Realizo la toma de muestras en la Ciudad de Huaquillas, muestras de heces de animales que
presentan signos clínicos de problemas gastrointestinales. El método utilizado para el
diagnóstico fue el kit de prueba rápida del test de Elisa.
De acuerdo con Rubio et al (1994) un estudio sobre evidencia serológica que se realizó en la
ciudad de Lima un diagnóstico para determinar la edad de inmunización al coronavirus
utilizando la prueba de Inmunofluorescencia Indirecta.
8
Los animales positivos proceden de diferentes zonas del Departamento de Lima; Los perros
reactores positivos son de distintas edades, comprendida entre 2.5 y 12 meses de edad. Sin
embargo el 72.2% (13/18) de estos positivos fueron perros mayores de 5 meses. El 27.8% de
positivos restantes (n=5) fueron menores de 4 meses.
El 75% de los perros adultos tienen evidencia serológica de una exposición previa al virus. (Coyne,
2006)
Pruebas serológicas de perros australianos que muestra signos de diarrea revelan el 85% eran
positivos para anticuerpos IgM contra CCV lo que indicaba infección reciente. Los neonatos se
ven más gravemente afectados que los que están en edad del destete y los adultos. (Greene,
2008)
2.10. DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL
Es menos frecuente y grave que la parvovirosis; en cambio, en lugares con una densidad de
población canina de hacinamiento puede convertirse en un problema muy grave. La vía de
propagación es idéntica a la del parvovirus: las heces de animales infectados; se extiende con
la misma rapidez y por los mismos sistemas; en cambio, sólo afecta a las células epiteliales
maduras del intestino.
Los síntomas son semejantes a la parvovirosis, pero la presencia de sangre en las heces es menos
frecuente y el índice de leucocitos suele mantenerse en los niveles normales.
El tratamiento es de mantenimiento y sintomático, aunque la respuesta del cachorro es mucho
más rápida que si sufriera una infección por parvovirus.
Para ambas enfermedades existe una vacuna; sin embargo, la que inmuniza frente a coronavirus
es menos efectiva que la que previene de parvovirosis.
El diagnóstico diferencial es muy importante y complicado a la vez pues la infección por CVC
se asemeja mucho a diversas causas de enteritis moderada en los cachorros asociada a heces
blandas tales como parásitos intestinales, deficiencias en la dieta e intolerancia a los alimentos.
(Negro 2009)
9
2.11. TRATAMIENTO
Los cachorros que han sido expuestos a esta infección y estén mostrando los síntomas
necesitarán un cuidado más cauteloso. Lo que parece ser una pequeña cantidad de diarrea y
vómitos pueden conducir a una condición fatal para un indefenso cachorro. La mayoría de los
perros adultos se repondrán de una infección CCV solos y sin la necesidad de medicación.
Aplicación de antibióticos
Terapia de fluidos.
Estimulantes del apetito.
Administración de vitamina B.
Antieméticos: fármacos que evitan el vómito o la náusea.
Protectores de mucosa intestinal.
Antivirales.
El primer objetivo del tratamiento es reponer fluidos y electrolitos por vía endovenosa, ya que
la deshidratación y el desequilibrio electrolítico pueden ser mortales.
En algunas ocasiones, conviene acompañar la sueroterapia con antibióticos de amplio espectro,
para evitar posibles infecciones bacterianas secundarias.
También es beneficioso el aporte de protectores de la mucosa intestinal, como los derivados de
la pectina y caolín. (Alvarado, 2005)
2.12. PREVENCIÓN
Existe una vacuna disponible para proteger a los perros de este virus. Esta normalmente
reservada para cachorros y perros de exposición, ya que tienen el sistema inmune
subdesarrollado y son más vulnerables. Ya que el Coronavirus Canino es altamente contagioso,
la mejor prevención es aislar inmediatamente a los perros que muestran síntomas comunes o
que han sido diagnosticados con este virus. También es importante mantener los caniles limpios
e higiénicos todo el tiempo, limpiar luego de que su perro defeque en lugares públicos o
privados y proteger a su perro de entrar en contacto con las heces de otros perros, tanto como
sea posible. (Pardo y Mackowiak, 2003)
10
Se administran dos dosis de la vacuna de Coronavirus Canino con intervalo de 2 a 3 semanas y
se revacuna anualmente. (Birchard y Sherding, 2002)
11
3. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1 MATERIALES
3.1.1. UBICACIÓN
La presente investigación se realizó en la Ciudad de Santa Rosa, en el sudoeste Ecuatoriano. Es
la cabecera del cantón homónimo. Situada en la margen derecha del río Santa Rosa, fue fundada
en 1600. Recibió su nombre de Santa Rosa de Jambelí.
Sus límites son:
Norte; con Océano Pacífico, Machala y Pasaje.
Sur; con Huaquillas, Arenillas y Piñas.
Este; con Pasaje, Atahualpa y Chilla.
Oeste; con el Archipiélago de Jambelí y Huaquillas.
Ubicación geográfica
Coordenadas Universales Transversales Mercantor (UTM) son:
Para El DatumPsad 56 y Wgs 84, Zona 17 Sur.
Superficie: 944.41 km²
Altitud: 13 msnm
Temperatura promedio: 26-30oC
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3.1.2. POBLACION Y MUESTRA
La población canina estimada en la Ciudad de Santa Rosa es aproximada de 7.000 mil perros.
La presente investigación se realizó en la ciudad de Santa Rosa; el número de animales
investigados fue de 100 perros sospechosos de Coronavirus Canino es decir que presentaron
síntomas clásicos a la enfermedad, las muestras que se utilizaron fueron las heces caninas. Estas
muestras se obtuvieron en diferentes centros veterinarias de la ciudad, considerando sexo, raza,
edad y lugar de procedencia.
El muestreo se realizó en forma no aleatorio en animales que presentaban los signos clásicos
de la enfermedad.
3.1.3. TIPO DE INVESTIGACIÓN
Se realizó el trabajo de campo de tipo descriptivo, el cual consiste en estudiar situaciones que
ocurren en condiciones naturales. Las evidencias recogidas en grupos de individuos se emplean
para identificar los signos y síntomas de enfermedades o problema en particular y así
caracterizar un cuadro clínico, conocer la historia natural de un proceso, esto es beneficio para
el paciente. En este caso se utilizó el tipo descriptivo con el Kit de Prueba Rápido Anigen
(ELISA).
13
3.1.4. TÉCNICA DE OBSERVACIÓN
Se utilizó la técnica de la observación que consiste en una actividad realizada para detectar y
asimilar los rasgos de un elemento utilizando los sentidos como instrumentos principales. Esta
técnica de investigación, consiste en analizar las características y descripciones de elementos,
hechos y fenómenos que queremos estudiar. Esta técnica se utiliza fundamentalmente para
conocer hechos, conductas y comportamiento colectivo o en algunos casos para determinar la
causa de un fenómeno.
3.1.5. EQUIPOS Y MATERIALES
Para el desarrollo de la investigación se utilizarán los siguientes materiales:
Prueba rápida de ( CPC/CCV Ag De Anigen )
Guantes
Mandil
Hojas de registro
Lápiz
Cámara fotográfica digital
3.1.5.1 MUESTRAS
Heces caninas
3.1.6. VARIABLES
Positividad a la enfermedad
Edad
Sexo
Raza
Procedencia
3.1.7. MEDICIÓN DE VARIABLES
Positividad: variable cualitativa considerando la respuesta serológica a la prueba de ELISA se
medirá como positivo o negativo.
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Edad: variable cuantitativa expresando los meses de vida del animal.
Cero a seis meses de edad
Seis a doce meses de edad
Doce meses en adelante
Sexo: variable cualitativa dependiendo del género del animal hembra y macho.
Raza: variable cualitativa se medió como mestizo u otras razas
Procedencia: variable cualitativa dependiendo del lugar de origen del animal a nivel parroquial
que son:
Parroquias Rurales
Bellavista
Bellamaría
La Avanzada
San Antonio
Torata
Jambelí
La Victoria
Parroquias Urbanas
Santa Rosa
Puerto Jelí
Nuevo Santa Rosa
Jumón
Balneario Jambelí
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3.2. MÉTODOS
3.2.1 MÉTODO DE CAMPO
Las muestras se tomaron en los centros veterinarios de la Ciudad de Santa Rosa, a animales que
presentaban signos clínicos y problemas gastrointestinales.
3.2.2 MÉTODO DE LABORATORIO
El Kit de Prueba Rápido Anigen para CCV Ag es un inmunoensayo cromatográfico para la
detección cualitativa del antígeno del Coronavirus canino en heces caninas.
Tiene las letras “T” y “C” como línea del test (prueba) y como línea de control, respectivamente,
en la superficie del dispositivo.
Tanto la línea del test como la línea de control en la ventana de resultados no son visibles antes
de aplicar las muestras.
La línea de control se utiliza para control procedimental y siempre deberá aparecer si el
procedimiento de la prueba se efectúa adecuadamente, y si los reactivos de la prueba de la línea
de control están funcionando bien.
Una línea de test de color púrpura se hará visible en la ventana de resultados si existe suficiente
antígeno de Coronavirus en la muestra.
Los anticuerpos de Coronavirus Caninos especialmente seleccionados se utilizan en las bandas
de test como materiales de captura y como materiales detectores, lo cual hace posible que el Kit
de Prueba Rápida Anigen CCV Ag identifique el antígeno de Coronavirus Canino en las heces
caninas con un alto grado de exactitud.
3.2.3 MATERIALES DE LA PRUEBA
Kits de Prueba Rápida Anigen para detección de antígno de Coronavirus Canino.
Tubos para Muestras que contienen diluyente de ensayo (1 ml/tubo)
Hisopos para recolección de muestras
Goteros desechables
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3.2.4 PROCEDIMIENTO PARA EL TEST
Recoger las muestras de heces caninas usando el hisopo.
Insertar el hisopo en el tubo para la muestra que contiene 1 ml del diluyente del ensayo.
Mezclar las muestras de los hisopos con el diluyente del ensayo para extraerlo bien.
Quitar el dispositivo de la prueba de la bolsa de papel aluminio y colóquelo sobre una
superficie plana y seca.
Usando el gotero desechable, tomar las muestras extraídas y mezcladas del tubo.
Agregar lentamente 4 gotas en la ventana del dispositivo.
Al empezar a funcionar la prueba, se podrá observar un área de color púrpura
moviéndose a través de la ventana de resultados en el centro del dispositivo de la prueba.
Si esta migración no aparece después de transcurrido 1 minuto, agregue una gota más
de la muestra.
Interprete los resultados de la prueba a los 5-10 minutos. No efectúe decisiones de
interpretación de la prueba si ya han transcurrido más de 20 minutos.
3.2.5 INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DEL TEST
En la sección izquierda de la ventana de resultados aparecerá una banda de color para indicar
que la prueba está funcionando correctamente; esta es la banda de control. La sección derecha
de la ventana de resultados indica los resultados de la prueba. Si aparece otra banda de color en
la sección derecha el resultado será positivo y en el caso de que no apareciera será negativo.
Resultado
Negativo Resultado Positivo CCV y CPV
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Resultado Positivo CPV Resultado Positivo CCV
3.2.6. ANÁLISIS ESTADÍSTICO
En la presente investigación se demostrará la prevalencia de la enfermedad mediante la
siguiente ecuación:
𝑃𝑟𝑒𝑣𝑎𝑙𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 % =números de animales positivos
números de animales investigados x 100
18
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1. PORCENTAJE DE Coronavirus Canino
En la siguiente figura se presenta el porcentaje de Coronavirus Canino en la ciudad de Santa
Rosa durante el año 2014.
FIGURA 1. Porcentaje de Coronavirus Canino en la ciudad de Santa Rosa, durante el
año 2014.
El número total de investigados es de 100 animales, del cual solo 11 resultaron positivos a
Coronavirus Canino.
Autora: Diana Tiuana
4.2. RELACIÓN DE LA ENFERMEDAD DE ACUERDO A LA EDAD
En la siguiente figura se pueden apreciar los valores correspondientes a los casos positivos y
el porcentaje de acuerdo a la edad de Coronavirus Canino.
11%
11%
Positivos
Positivos
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FIGURA 2. Casos positivos y porcentaje de Coronavirus Canino de acuerdo a la edad en
los animales investigados
Para esta variable se tomaron en cuenta tres grupos los cuales son:
De 0-6 meses se obtuvieron 78 animales investigados, de los cuales 11 resultaron positivos.
De 6-12 meses se obtuvieron 14 animales investigados, de los cuales ninguno resultó positivo.
De 12 meses en adelante se obtuvieron 8 animales investigados, de los cuales ninguno resultó
positivo.
Autora: Diana Tiuana
4.3. RELACIÓN DE LA ENFERMEDAD DE ACUERDO AL SEXO
En la siguiente figura se pueden apreciar los valores correspondientes a los casos positivos y
el porcentaje de acuerdo al sexo de Coronavirus Canino.
0-6meses 6- 12 meses 12 en adelante
14,10%
0 0
Positivos
Positivos
20
FIGURA 3. Casos positivos y porcentaje de Coronavirus Canino de acuerdo al sexo en los
animales investigados.
Para esta variable se tomaron en cuenta dos grupos los cuales son:
Se obtuvieron 58 animales hembras investigadas, de las cuales 7 resultaron positivos.
Se obtuvieron 42 animales machos investigados, de las cuales 4 resultaron positivos.
Autora: Diana Tiuana
4.4. RELACIÓN DE LA ENFERMEDAD DE ACUERDO A LA RAZA
En la siguiente figura muestra la cantidad de casos positivos y el porcentaje de Coronavirus
Canino de acuerdo a las diferentes razas.
FIGURA 4. Casos positivos y porcentaje de Coronavirus Canino de acuerdo a la raza de
los animales investigados.
Para esta variable se tomaron en cuenta dos grupos los cuales son:
Se obtuvieron 66 animales mestizos investigados, de las cuales 8 resultaron positivos.
Se obtuvieron 34 animales de razas puras investigados, de las cuales 3 resultaron positivos.
Hembra Macho
12,06%
9,52%
Positivo
Positivo
21
Autora: Diana Tiuana
4.5. RELACION DE LA ENFERMEDAD CON EL LUGAR DE
PROCEDENCIA
FIGURA 5. Casos positivos y porcentaje de Coronavirus Canino de acuerdo a la
procedencia en los animales investigados
En el siguiente figura observaremos en número de casos positivos y el porcentaje de
Coronavirus Canino de acuerdo a la procedencia
Se obtuvieron 24 animales investigados de la parroquia La Avanzada, de las cuales 2 resultaron
positivos.
Se obtuvieron 49 animales investigados de la parroquia Santa Rosa, de las cuales 8 resultaron
positivos.
Se obtuvieron 8 animales investigados de la parroquia Puerto Jelí, de las cuales 1 resultó
positivo.
Mestizo Puras
12,12%
8,82%
Positivos
Positivos
22
Autora: Diana Tiuana
Mapa de la Ciudad de Santa Rosa
En el siguiente mapa de la ciudad de Santa Rosa está dividido en las parroquias urbanas y
rurales, con la distribución de epidemiologia del coronavirus canino de acuerdo al lugar de
procedencia.
La Avanzada Santa Rosa Puerto Jeli
8,33
16,32
3,5
Positivo
Positivo
23
5. CONCLUSIONES
1. El porcentaje de animales positivos a Coronavirus Canino (11%) es un índice medio
comparado con investigaciones anteriores realizados en las ciudades de Machala (13%),
Pasaje (7%) y Huaquillas con el (17%).
2. Los casos positivos a Coronavirus Canino se presentaron en animales menos de cero a
seis meses de edad.
3. Se determinó que el lugar donde hubo mayor presencia de los casos fue en la parroquia
urbana de Santa Rosa, en comparación de las demás que conforman el cantón.
24
6. RESUMEN
La presente investigación se realizó en la ciudad de Santa Rosa, provincia de El Oro.Se
plantearon los siguientes objetivos: 1. la presencia de coronavirus canino en la ciudad de Santa
Rosa mediante la prueba de Elisa. 2. Determinar el porcentaje de coronavirus canino según la
edad, sexo, raza y procedencia de animales infectados. 3. Elaborar un mapa epidemiológico de
coronavirus canino de acuerdo al lugar de procedencia de los animales positivos .Se investigó
una muestra de 100 perros sospechosos de Coronavirus canino. Las muestras que se utilizaron
son las heces caninas, las cuales se obtuvieron en las diferentes Clínicas Veterinarias de la
ciudad, considerando el sexo, raza, edad y el lugar de procedencia. El método para el
diagnóstico de Coronavirus canino fue la prueba rápida de CPC/CCV Ag de Anigen. Se obtuvo
un porcentaje de Coronavirus canino de 11 %. Los cachorros menores de 6 meses fueron más
susceptibles a la infección de Coronavirus canino.
Palabras claves:
Coronavirus Canino, Prueba de Elisa, Sexo, Edad, Raza y Lugar de Procedencia, Mapa
Epidemiológico, Ciudad de Santa Rosa.
25
7. SUMMARY
This research was conducted in the city of Santa Rosa, province of El Oro. Se they raised the
following objectives: 1 the presence of canine coronavirus in the city of Santa Rosa by Elisa
test. 2 Determine the percentage of canine coronavirus by age, sex, race and origin of infected
animals. 3 Develop an epidemiological map of canine coronavirus according to the place of
origin of the positive animal’s .It investigated a sample of 100 dogs with canine coronavirus.
The samples used are dog dregs, which were obtained in different Veterinary Clinics city,
considering sex, race, age and place of origin. The method for the diagnosis of canine
coronavirus was rapid testing of CPC / Ag Anigen CCV. Canine Coronavirus a percentage of
11% was obtained. Puppies under 6 months were more susceptible to canine coronavirus
infection.
Keywords:
Canine Coronavirus, Elisa Test, Sex, Age, Race and Hometown, Epidemiological Map, City
of Santa Rosa.
26
8. BIBLIOGRAFÍA
AGUIRRE Zahira (2011) Diagnostico de Coronavirus Canino en las Clínicas Veterinarias de
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28
29
Registros del Diagnóstico de Coronavirus canino en las Clínicas Veterinarias de
la Ciudad de Santa Rosa mediante la prueba de Elisa
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tesis
Positivo a Coronavirus Canino Positivo a Coronavirus canino y Parvovirus canino.
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Cachorro de 2 meses y medio, positivo a
Coronavirus canino.
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Cachorro de 2 meses, positivo a
Coronavirus canino y Parvovirus
canino.
Cachorro de 2 meses y medio, positivo
a Coronavirus canino.
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Cachorro de 10 meses, negativo a
Coronavirus canino.
Cachorro de 10 meses, negativo a Coronavirus canino.
Cachorro de 4 meses, positivo a Coronavirus canino.