El Microscopio Óptico

Un acercamiento a los microorganismosACT 3º ESO

I.E.S. Pablo PicassoProfesores: José Luís Rodríguez y C.R. I éns

Partes del microscopio óptico y sus funciones

• Un microscopio óptico es un microscopio basado en lentes ópticos. También se le conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una única lente pequeña y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espécimen). Este uso de una única lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos ópticos.

Microscopio de Robert Hooke, 1670. Inglaterra.

Partes del microscopio óptico y sus funciones

• Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen formada en los objetivos.

Partes del microscopio óptico y sus funciones

• Objetivo: lente situada cerca del revolver. Amplía la imagen de ésta, lo que significa que es muy importante este elemento del microscopio, es un elemento vital que permite ver a través de los oculares

Partes del microscopio óptico y sus funciones

• Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.

• Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.

Partes del microscopio óptico y sus funciones

• Tubo: es una cámara oscura unida al brazo mediante una cremallera.

Partes del microscopio óptico y sus funciones

• Revólver: Es un sistema de agarre de los objetivos, y que rota para utilizar un objetivo u otro.

Partes del microscopio óptico y sus funciones

• Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la preparación de delante hacia atrás o de izquierda a derecha y viceversa.

Partes del microscopio óptico y sus funciones

Un portaobjetos es una fina placa de cristal sobre el cual se disponen objetos para su examen microscópico. Sus dimensiones típicas son de 75 mm x 25 mm. El objeto a observar suele disponerse sobre este artefacto para después situarse en el microscopio y ser observado.

En ocasiones puede cubrirse la muestra con un cubreobjetos, una hoja de cristal más fina y pequeña.

Manejo del microscopio óptico

- En los microscopios que requieren transformador, el enchufe a la red y desenchufe debe hacerse sobre el transformador, y nunca debe desenchufarse el microscopio del transformador.

- Se debe mantener apagada la luz del microscopio siempre que no se esté utilizando, ya que la vida media de la bombilla es corta.

- Siempre se debe comenzar el enfoque con el objetivo de menor aumento.

- Anotar siempre el número de aumentos con el que se observa la preparación. Para calcularlo basta multiplicar el número de aumentos del objetivo por el de los oculares. Hacer esquemas y dibujos de lo observado con cada aumento.

- Salvo que se indique lo contrario no utilizar nunca el objetivo de inmersión, ya que se requiere un aceite especial sin el que, además de no enfocar bien, existe una gran probabilidad de dañar la lente al rozar con el cubreobjetos.

Consejos prácticos

• 1.- Enchufar el microscopio a la red eléctrica (SIEMPRE QUE NO SE ESTÉ MIRANDO POR EL MICROSCOPIO HAY QUE APAGAR LA LUZ).

• 2.- Colocar la preparación sobre la platina de forma que la estructura a observar quede en el orificio central de la platina.

• 3.- Poner el objetivo de menor aumento cuyo amplio campo visual facilita el hallazgo de estructuras importantes.

• 4.- Subir la pletina accionando el tornillo macrométrico y mirando la preparación desde fuera hasta alcanzar el tope superior. En ningún caso tocar la preparación con los objetivos.

• 5.- Mirando por los oculares, bajar lentamente la platina con el tornillo macrométrico hasta conseguir ver el objeto lo más nítido posible.

• 6.- Ajustar el enfoque con el tornillo micrométrico hasta verlo claramente.

• 7.- Para observar la preparación a mayores aumentos cambiar de objetivo con un simple giro del revolver (SIN MOVER EN NINGÚN CASO EL TORNILLO MACRO). Las pequeñas variaciones que observéis en el enfoque se producen al cambiar de objetivo y se corrigen con el micro.

• 8.- Para observar otros campos, desplazar la preparación moviendo los tornillos de la platina.

• 9.- Para cambiar la preparación:

• - Bajar la platina.

• - Colocar el objetivo de menor aumento

• - Quitar la preparación y colocar la siguiente

• 10.- Para desconectar el microscopio, además de los tres pasos anteriores:

• - Apagar y desenchufar el transformador de la red

• - Tapar el microscopio con su funda

Manejo del microscopio ópticoEnfoque del microscopio

Prácticas LaboratorioACT 3º ESO

2011/12

I.E.S. Pablo Picasso

Práctica nº1.Observación de la epidermis de la cebolla

Material

• Microscopio

• Portaobjetos

• Cubreobjetos

• Pinzas y tijeras

• Lugol

• Cebolla

Técnica1. Separar una de las hojas interna de la

cebolla y desprender la tenue membrana que está adherida por su cara interior cóncava.

2. Depositar el fragmento de membrana en un porta con unas gotas de agua.

3. Añadir unas gotas de Lugol y esperar cinco minutos.

4. Colocar sobre la preparación un cubreobjetos evitando que se formen burbujas y llevarla al microscopio.

5. Observa la preparación a distintos aumentos, empezando por el más bajo. Identifica las distintas células del tejido epidérmico ayudándote de las imágenes que siguen en la siguiente diapositiva.

Imágenes práctica nº1Epidermis de la cebolla.

Epidermis x100 Epidermis x400

Práctica nº2.Observación de cloroplastos (Elodea)

Material de trabajo y de estudio

• Microscopio

• Portaobjetos

• Cubreobjetos

• Hojas de Elodea

• Cuentagotas

Técnica

1. Colocar sobre el porta objetos una hoja de Elodea (elegir las pequeñas del extremo de los tallos), o un filamento de alga bien extendido.

2. Añadir una gota de aguay poner el cubreobjetos.

3. Observar al microscopio a distintos aumentos

Práctica nº2.Observación de cloroplastos (Elodea)

Cuestiones y observaciones

• Dibuja lo observado y pon nombre a las distintas estructuras.

• ¿Cuál es el pigmento que contienen? ¿Qué función tienen los cloroplastos?

Elodea, detalle microscópico

Elodea

Práctica nº3.Observación de células de la mucosa bucal

Objetivos y MaterialesObjetivo:

• Observar células animales y diferenciar en ellas algunas estructuras.

• Materiales de trabajo y de estudio:– Microscopio– Porta y cubre– Palillo de dientes– Pinzas de madera– Mechero– Colorante (azul de metileno u

orceína acética)– Vidrio de reloj– Papel de filtro– Mucosa bucal del hombre

Imagen al microscopio

Práctica nº3.Observación de células de la mucosa bucal

1. Introducir el palillo en la cavidad bucal.2. Raspar suavemente con la uña la cara interna del carrillo.3. Depositar el producto obtenido junto con una gotita de agua sobre el porta-

objetos.4. Hacer una extensión frotando con el palillo sobre el porta.5. Calentar a la llama del mechero sin que llegue a quemar el porta sobre el dorso

de la mano, para no dañar las células.6. Colocar el porta sobre el papel de filtro.7. Agregar unas gotas de azul de metileno o de orceína acética, dejando actuar el

colorante 2 ó 3 minutos.8. Verter el colorante sobrante y lavar la preparación, en el fregadero, hasta que no

suelte color. Secar con cuidado la preparación.9. Colocar una gota de agua en el porta y poner encima un cubre-objetos, de forma

que éste caiga como se cierran las tapas de un libro; dejando caer suavemente el cubre se evita todo riesgo de que queden burbujas de aire entre el porta y el cubre.

Observación al microscopio

• Empleando aumentos débiles localizar el área de la preparación más idónea, deben desestimarse las zonas poco o muy teñidas, los apelotonamientos de células unas encimas de otras, etc. Enfocar las células aisladas con mayor aumento. La preparación nos muestra una visión parecida a un mosaico formado por células planas, poligonales, más o menos irregulares; abundan las células aisladas, en cuyas caras se perciben los trazos de inserción de unas células con otras.Como el material observado procede de la capa superficial, capa de descamación, del epitelio pluriestratificado de la mucosa bucal, son en su mayoría células muertas o células que están en período de degeneración.

• El azul de metileno tiñe intensamente el núcleo y con menos color el citoplasma ; éste presenta un cierto aspecto de alteración y suele ser algo granuloso.

Práctica nº3.Observación de células de la mucosa bucal

Práctica nº3.Observación de células de la mucosa bucal

Imagen Cuestiones

– Realiza un dibujo de las células observadas con mediano aumento, indicando las estructuras celulares que se aprecian en el microscopio.

– ¿Qué es un tejido? ¿A qué tipo de tejido pertenecen las células observadas?

Práctica nº4.Observación de cilios en branquias de mejillón

Materiales

• Microscopio

• Porta y cubre objetos

• Tijeras

• Agua de mar

• Mejillón

Imagen al microscopio

Objetivos:

• El objetivo de la práctica es observar células animales vivas y el movimiento de los cilios que poseen. Los mejillones respiran por branquias, cuyos bordes contienen células ciliadas que aseguran la circulación del agua sobre la superficie de las branquias. La sangre (hemolinfa) del mejillón circula por las branquias, recoge el oxígeno disuelto en el agua del mar y libera el dióxido de carbono.

• Las branquias de los bivalvos son órganos laminares y vascularizados que permiten a esta clase de moluscos intercambiar en el agua el O2 y el CO2.

El intercambio gaseoso se ve favorecido por los cilios que recubren la superficie branquial y que además tienen la función de arrastrar las partículas en suspensión presentes en el agua hacia la cavidad bucal de estos animales.

• Observar en vivo cómo las células de la superficie branquial generan corrientes mediante los cilios y favorecen así el intercambio de gases y la toma de partículas

Práctica nº4.Observación de cilios en branquias de mejillón

Procedimiento1. Para proceder a la observación de

estas estructuras se abrirá un mejillón vivo y con las tijeras se cortará del borde externo de la branquia una pequeña porción cuadrada y de unos 3mm de lado.

2. Sobre un porta objetos se depositará una gota de solución salina en la que colocaremos extendido el tejido branquial que cubriremos seguidamente con el cubre objetos.

3. Observaremos la muestra con el objetivo de 10 y 40 aumentos. Podremos observar así, que papel desempeñan los cilios y anotaremos el resultado de las observaciones.

Cuestiones

• Realizar un dibujo y señalar la función de los cilios en las branquias del mejillón.

Práctica nº4.Observación de cilios en branquias de mejillón