l AÑO; 12018

1- Datos de la as i natura Nombre Inmu nolo ia

1 Código 1 D21

Nivel (MarQ ue con una Xl Grado X

o tativa Post-Grado

Area curri cular a la lIC rtencce Si uímica Licenciatura en C iencias Bio ló leas

I Departamento I Química

I Carrerals I Bioquímica (obl igatoria) y Licenciatura en Ciencias Biológicas (optat iva)

Ciclo o año de ubicac ión en 4° Año de Bioquímica, 5° Año de Licenciatura en Ciencias Biológicas la carrera/s

Car a horaria as í nada en el Plan de Estudios: Total 120 Semanal 8

Distribución de la carga horaria semanal) presencial de los a lumnos: Teóricas Practicas I Teórico - prácticas I

4 No ob li.gatorias 4 I 4 I

Relación docente - alu mnos: Cantidad estimada de

alumnos inscri tos Cantidad de docentes Cantidad de comisiones

(

Profesores Auxiliares Teóricas Práct icas Teórico-Prá ticas 40-55 alumnos 2 2 2

2- Composición del equipo docente (Ver instructivo):

N° Nombre y Apellido Título/s

lo ClImino Andrea Carina - Profesor Adjunto dedicación simple Bioquímica - Dr. Ciencias Biológicas -Especial ista Clínico en Virol<?gía

2. Foresi Noelia Jefe de Trabajos Prácticos Licenciado en Ciencias Biológicas - Dr. Ciencias Biológicas - Técnico con Hemoterapia.

J. Silva Andrea Ayudante de 10 Bioquímica - Licenciada en Química -Ma ·ister en EpidemioloJ,!,ía

N° Cargo Dedicación Carácter Cantidad de horas semanales dedicadas a: (.)

T As Adj JTP Al A2 Ad Bec E P S Reg. Int. Otros Docencia Investig. Ext. Gest.

Frente a alumnos Totales

lo , X , 8 10 25 5 2. , X , 8 10 30 J. , X , 8 10

(. ) la suma de las horas Tolate + In vestig. + Exl. + Gest. no puede s uperar ta asignació n horaria del cargodocen lc.

(

1)la n d e trabajo d el equipo d ocen te

1. Objetivos de la as ignatu ra.

l. O bjetivos Genera les • Conocer los mecanismos que controlan la respuesta inmune innata y adaptativa y sus mecanismos de inmunomodulación. • Conocer y describir los procesos fi siológicos que controlan el procesamiento y presentación antigénica. • Describir y comprender cI papel del com plejo mayor de histocompatibil idad en la discriminación entre lo prop io y lo extraño, así como también el

papel fu ndamental de este sistema en el control de la respuesta inmune adaptativa. • Describir los fenómenos mo lecu lares y ce lulares que regulan la respuesta inmune. Adquirir conoc imiento teórico respecto de los mecanismos de la

respuesta inmune normal, ontogenia del sistema inm une, tolerancia inmunológica, regulación de la respuesta inm une. • Adquirir información básica respecto de las principales enfennedades inmu nológicas de la infancia, la aduhez y vejez en el hombre. • Lograr un conocimiento actualizado de los diferentes mecanismos inm unes, operativos en inm unidad ant i·infecciosa, anti·tumoral )' en

autoinrn unidad. Ana lizar las nuevas estrategias profi lácticas y terapéuticas asociadas a esta ciencia. • Adqu irir conocimiento de las bases teóricas de las técnicas que se ut ilizan en el laboratorio de in munología. • Fomen tar e l desarrollo de l pensamiento científico, sent ido crítico y riguros idad. Capac itación para la realizac ión de trabajos de investigación.

2. Objeth'os en Doccnci'l • Permitir e l intercambio de conoc imientos Iluevos y recientemente adquiridos por el estudiante durante e l desarrollo de las clases teóricas rec ibiendo

por parte del docente sólo un el 50% informac ión formal. El docen te y los alum nos plantearán interrogan tes que los alumnos responderán en fonna virtual con la ayuda de l profesor.

• Esti mu lar a l estudian te a aprender por propia iniciativa. La filosof1a de la asignatura será: estudiantes que vienen "a aprender" más que "a ser enseñados". El compromiso permanente de l docente estará en la estimu lación continua de l estudiante y que éste apliq ue los conocimientos adqui ridos en la maleria en e l transcurso de su desarrollo.

• Preservar la operatividad durante el desarrollo de los ｴｲ｡｢ｾ ｯｳ＠ prácticos de laboratorio contando corno máximo con 20 estudiantes por aul a. • Estimular al estudiante para desarrollar en fonna mediara investigación clínica utilizando herramientas que deberá adq uiri r en la asignatura.

3. O bjctivos cn Doccncia- In vestigación • Estim ular a los estudiantes para que se relacionen con proyectos de investi gac ión pertinentes a la asignatura, tanto de l ámbito académico como de l

asistencial , para promover el desarrollo del pensamiento autónomo y objetivo en los bioqu ímicos en fonnación. • Formal izar clases COIl docentes externos a la Universidad para que el estudian te se vi ncule con referentes locales, nacionales e internacionales de la

inmu nología, a tra vés de semi narios in teracti vos o clases teóricas.

• Estimular la participación e incorporación a equipos transdisciplinarios haciendo investigación promovidas desde las pasantías del a lunmo. • Vincular continuamente la invest igac ión con casos prácticos y clínicos.

4. Objetivos de Vincu lación La Facultad de Bioquímica de la UNMdP formará profesionales que se comprometan con la sociedad, dedicándose al diagnóstico, seguimiento,

tratamiento de inmunodeficiencias primarias, secundarias y enfermedades autoinmunes y autoinnamatorias sistémicas. En lo que com pete al área de inmunología implicará contar con conocimientos en fi siopato logía de las enfermedades humanas con especia l interés en aquellos procesos que definan su diagnóstico o tratam iento a través de esta gran área del conocimiento. Para abordar estos objetivos se deberá: • Organizar la actividad asistencial en Hospitales Escuela de esta ciudad (I-Iospitallnterzona l de Agudos HI GA y Hospital de Niños IEMI). • Promover la vi sita y contacto con las empresas de la región que desarrollan productos diagnósticos con bases inmunológicas (B ioSidus, Biodynamics,

Roche -CA SA-, Wicner Lab -Rosario- Hernoderivados -Córdoba- entre otras). • Proyecto de 1+0 que permitan financiar la contratación de pasantes y recientes graduados con buen desempeño académico.

2. Enunciación de ha ｴ ｯ ｴ｡ｬｩ､ ｾ ｬ､＠ de los contenidos a desarrolhu en la as ignatura.

PI·ograma ana lítico teórico

Provecto Educat ivo Lo ngitudinal

Unidad 1. Genera lidades e Introdu cción. Sistema inmunológico: estructura anatómica e hi stológica de los órganos y tejidos linfoides. On togenia de las cé lul as pertenecientes al sistema

inmunológico. Microambientes de producción y maduración. Mecanismos de se lección. Tolerancia inmunológica. Inmunogellicidad y estructura antigénica. Características bioquímicas y biológicas de los antígenos. Fenómeno hapteno acarreador. Manejo )' procesamiento de antígenos. Cél ulas presentadoras de antígenos: ontogenia, mecanismos de activación, los superantígenos. Estructura de los anticuerpos. Fisiología de la respuesta inmunológica. Conceptos de especificidad inmunológica. Memoria inmunológica . Mecanismos de la respuesta inmunológica innata)' adaptativa. Mecanismos de amp lificación de la respuesta inmunológica.

Unidad 2: Inmunidad Innata Barreras naturales y vías frecuentes de infección. Piel. Estructum. Queratinocitos: su participación en la respuesta inmune. Cé lulas de Langerhans:

c iclo de vida. Mucosas. Estructura básica de los epitelios que recubren los traclos. Moco: loca lización, estructura y propiedades. Lactoferrina, lisozima, defe nsinas, aglutininas e histatinas. Enterocitos: su participación en la respucsta inmunc. Papel de la nora microbiana en los mecanismos de defensa frente a mi croorgan ismos patógenos. Mecanismos de reconocimiento propios de la inmunidad innata. Patrones molecu lares asociados a patógenos (PAMP):

prop iedades distintivas. Receptores de reconocimiento de patrones (RRP). Propiedades di stinti vas. Receptores de tipo Toll (TLR), receptores lectina tipo e ( RLC), receptores Scavenger (SR), Helicasas: propiedades y ligandos reconocidos. Receptores para péptidos fonnilados (RFP). Receptores para el fragmento Fc de las inmunoglobulinas (RFc): receptores activadores e inhibitorios. Expresión en difcrentes tipos celulares. Funciones acti vadas a través de los RFc. Receptores para componentes deri vados de la activación del sistema complemento (CR). Expresión en diferentes tipos celulares. Funciones activadas a través de los CR. Concepto de Innamación. Signos cardinales y fenómenos subyacentes. Sistema Complemento. Vías de acti vación: clásica, ahemativa y de las Icct inas. Cascadas de acti' ación. Funciones. Mecan ismos que regulan su acti vidad. Defic iencias del sistema del complemcnto. Extravasación leucoc itaria. Moléculas de adhes ión: selectinas, integrinas, moléculas de la superfamilia de las Ig, cadherinas. Propiedades. Ligandos reconocidos. Su papel en la extravasación leucocitaria . Quimiocinas. Familias. Su papel cn la extravasación ICllcoci taria. Cascada dc adhes ión y extravasac ión leucocitaria: rolling, adherencia estable, diapédesis y migración. Granulocitos neutrófilos. Su participac ión en la inmun idad ant iinfecciosa. Ciclo de vida. Receptores de reconocimiento expresados por los neutrófi los. Fagoc itosis. Mecanismos microbicidas oxígeno-dependientes y oxígeno- independientes. Producción de mediadores lipídicos innamatorios y c itocinas por los neutrófilos. Apoptosis del neutrófilo: su impacto en la resolución de la respuesta innamatoria aguda. Macrófagos. Su partic ipación en la inmunidad anti -infecciosa. Ciclo de vida. Receptores de reconocimiento expresados por los macrófagos. Mecanismos microbicidas ox ígeno-dependientcs y oxígeno- independientes . Citocinas producidas por los macrófagos activados . Quimiocinas . Respuesta innmnatoria aguda local y sistémica inducida por IL- I, TNF- e IL-6 . Acti vación de los diferentes tipos celulares presentes en el entorno del foco infecc ioso. Producción de proteínas de fase aguda, hipertermia y neutrofilia . Mecanismos in vo lucrados. Imp..1cto sobre e l proceso infecc ioso. Papel de las c itocinas en el control de la acti vidad ¡nnamatori a dcl macrófago. Cé lulas NK. Su participación e la inmunidad ant iinfecciosa. Subpoblaciones de cé lulas NK . Mecani smos citotóx icos: sistema FaslFasL y sistema de granzimas/perforinas. Citolox icidad celular dependiente de anticuerpos (CCDA). Receptores expresados por las células NK a lravés de los cua les se regul a su actividad . Receptores estimulatorios e inhibitorios. Complejo de receptores leucoc itarios (LRC): KIR, L/R, LA IR Y NKp46. Complej o de receptores de células NK (NKC): sistema NKG2/CD94. Ligandos reconoc idos y función. Linfoc itos T. Distribución. Función. Diferencias con los L T. Diferenc ias entre inmunidad innata y adaptat iva. Relevancia de la respuesta inlllune innata en la inmu nidad antimicrobiana. Integración funcional de la inmunidad innata. Eventos molec ulares de la Respuesta Inmune Innata : Receptores ti po To lI (TLR) y coordinación de la respuesta inmune adaptativa. Activación del complemento y regulación. Complemento y co lectinas en la respuesta inmune innata. Complemento en la inducción de la respuesta inmune adaptati va. Interacc iones entre huéspedes y parás itos. Efecto Antitumoral de Imnunoestimul antes no Específicos . Células dendríticas en inducción inmune y regulación.

Unidad 3: Complejo Mayor de J-lis tocolll llalibilidad (CMH) Propiedades generales de las moléculas de clase I y 11 del CMI-I . Ligandos. Propiedades del CMI·I: poligeni smo, polimorfi smo y codominancia.

Función de las moléculas del CMH : presentación antigénica a células T. Moléculas de clase I del CMH: estmctura, bios íntcsis, distribución tisular, polimorfi smo. Moléculas de clase 11 del CMH : estructura, biosíntesis, di stribución tisular, polimorfismo. Organización genética del CMH. Loc; de clase 1. HLA- E. I·ILA-H. I-ILA-G. HLA-F. Familia de genes MIC. Genes homólogos al CMH : COI y FcRn. Organización genética del CMH. Loci de clase 11. Loei de clase 111. Regulación de la expresión de los genes dc clase 1 y 11 del CMI-I . Función de las moléculas de clase I y 11 del CMH. Evolución del CMH y polimorfismo. CMH : genética poblacional y enfermedad. Aloreconoc;miento y respuesta inmune contra moléculas del CMI-I . Tipos de transplantes y

(

mecanismos responsab les de l rechazo. Transplantcs de méd ula ósea. Enfennedad de injerto contra huésped (GV IiD). Transplantes de órganos sólidos vasculari zados.

Unidad 4. Reco nocimiento a ntigénico po r Li nfoci tos T y B Estructura de los anticuerpos. Dominios. Isotipos de la inmunoglobulinas. Funciones biológicas de los diferentes isotipos. Afinidad y avidez.

Paratope. Regiones determinantes de complementariedad o hipervariab les. Interacc ión Antígeno-anticuerpo. Funciones de los anticuerpos: neutralización. opsonización. activación de la vía clásica del complemen to, funciones efectoras mediadas a tra vés de los receptores para el fragmento Fc de los anticuerpos IgG, IgA e IgE. Fagocitosis. Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (CCOA). Liberación de mediadores inOamatorios. IgA secretoria : transporte de IgA a través de epitelio. Función de la IgA secretoria. Antígeno y epi tope antigénico. Epitopes linea les, conformaciones, expuestos y crípticos. 3 Estructura del receptor antigén ico B (BC R). Correceptor de célu las 8: complejo CD21 /CD 19/C081. Reconocimiento antigénico por el SCR. Transduceión de señales a través del BCR. Estructura de l receptor antigénico T (TCR). Sitio de reconocimiento antigénico del TCR. Heterodimeros y. Reconocim iento antigénico por el TCR. Transducción de señales a través del TCR. Repertorio B y T; mecanismos responsables de la ge neración de diversidad .

Unid:uI 5. l>roCCS:tmiento y Presentació n nntigénica Patógenos y sitios dc multipl icac ión. Células presentadoras profesionales de ant ígeno: linfoc itos B, macrófagos y cé lulas dendríticas. Células

dendríticas: prop iedades de las cé lulas dendríticas mieloides inmaduras y maduras. Receptores expresados por las células dendríticas. Endoc itosis mediada a través de receptores y macropinoc itosis. Maduración de las células dendríticas. Células dendríti cas plasmacitoides: su papel en la inmunidad antiviral . Vía endógena de procesamiento antigénico. Proteosoma, proteínas TAP, calnex ina, calreticulina y tapasina. Vía exógena de procesamiento ant igénico. Cadena invariante, péptido CLIP, moléculas I-ILA-DM . Presentación de antígenos extracelulares a través de moléculas de clase I (presentación cru:znda). Presentac ión antigénica por CO l.

Unidad 6. O ntogenia B y T. Médula ósea y Timo. Estructura básica. Su papel en la producc ión y madurac ión de linfoc itos B y T. Ontogenia B. Estadios pro-B, pre-B y B

inmaduro. Inducción de tolerancia central en los lin foc itos 8. Maduración de linfoc itos B en periferia. Onlogenia T. Estadios doble negati vo y doble positivo. Inducción dc tolerancia central T. Se lecc ión positiva. Selección negati va.

Unidad 7. Regulación de la expres ión génica en el sistema inmune Regulación de la expresión génica en células eucariotas. Factores de transcripción. Factores de transcripción invo lucrados en el desarrollo y

diferenciación de células mieloides, células NK, linfocitos 8 , linfocitos T, células Th 1, Th2 Y cé lulas T CD8+.

Un idad 8. Respuesta inmunc mcdiada por células T. Interacción de los linfocitos T con células dendríticas: papel de las moléculas LF A-I , rCAM-1 e ICAM-2. Sinapsis inmune. Señales I y 2 en la

activac ión de los linfocitos T nai ve. Moléculas coest imulatorias y sus receptores en el linfocito T. Pape l de la IL-2 en la activación T. Modulación de la

activación T por CTLA-4. Rol de las interacciones C040/C0 40L y FaslFasL en el control de la actividad T. Células Th I Y Th2. Funciones mediadas por las célu las Th I Y Th2. Migración de las células Th I Y Th2. Activac ión de cél ulas T efectoras. Mecanismos que detemlinan la diferenciac ión de las cé lulas T C0 4+ en un perfil Thl o Th2. Papel de las citocina5 IL-12, IL-18. IL-23 e IL-27 producidas por las cé lulas dendríticas y macrófagos. Papel de las células NKT en la diferenciación de las cé lulas T CD4+ en un perfil Th 1. Relevancia de las células Th I Y Th2 en la in mun idad alui-infecciosa y en enfermedades alérgicas y alltoinmunes. Acti vación de células T C08+ naive. Señales I y 2 de activación. Colaboración de las células T C04+ en la activación de las células T CD8+: su papel en el desarrollo de la memoria T C0 8+. Relevanc ia de las células T CD8+ en la respuesta inmune ami-infecciosa. Mecanismos citotóxicos med iados por cé lulas T CD8+: sistema de granzirnas/perforinas y sistema FaslFasL. Producc ión de citocinas por cé lulas T CD8+.

Unidad 9. Resp uesta inmune mediada po r células B.

Linfocitos 81 y li nfocitos 8 de la zona marginal del bazo. Localiz.1ción y propiedades. An tígenos T independientes de tipo 2. Anticuerpos naturales. Linfocitos 82. Señales I y 2 en la activación de los linfocitos B. Colaborac ión TI12-B. Reconoci miento ligado. Formación del centro germ inal. Hipennutación somática. Células foli culares dendríticas y cooperación Th2-B en el centro germinal. Cam bio de isot ipo. Diferenciación de los cent rocitos en linfoci tos B de memoria y plasmocitos. Funciones y propiedades de los di ferentes isolipos de anticuerpos. Interacc ión de los anticuerpos con los antígenos. Anticuerpos monoc lonales.

Unid:HI 10. Tnífico linfocitario. Pape l de las moléculas de adhes ión y quimiocinas en el tráfico linfoci tario. Transporte de ant ígenos a los órganos lin fá ticos secundarios. Migración de

las cé lulas dendríticas a los gangli os linfáticos. Extravasación de los lin foci tos vírgenes en los órganos linfáticos secundarios. Cascada de extravasación linfocitaria. Migración de células T efectoras y de memoria. "Homing" y activac ión de linfocitos B en los órganos linfáticos secundarios. Migración de plasllloblastos. Médula ósea y cé lulas plasmáticas de vida media larga.

Unidad 11 . Rcguhlción dc la I'CS llUest:l inmune: Uomcostnsis y Tolerancia. Eventos homeostáticos del sistema inmune innato y adaptativo. Tolerancia centra l B y T. Tolerancia peri férica T. Células T regu latorias: T

regulatorias natu ra les e inducibles. Propiedades. Mecanismos a través de los cuales las células T regu latorias suprimen la respuesta inmune. Células dendríticas tolerogénicas. Ind ucc ión y propiedades func ionales. Tolerancia perifér ica B. Homeostasis de la respuesta inmune: a) células T regulatorias, b) muerte de lin foc itos T efectores por negligencia, c) inhibición por CTLA·4, d) muerte celular por el sistema FaslFasL. Sitios privi legiados. Tolerancia oral y

células Th3. Tolerancia matemo--fetal.

Un idad 12. Mcmorin Inmunológica. Memoria de cé lulas B. Células plasmáticas de vida med ia corta y larga. Memoria de cé lulas T. Células T de memoria efectoras y centrales. Tráfico y

func iones. Colaboración de las cé lulas T CD4+ en el establecimiento de la memoria T CD8+.

Un idad 13. Inmunidad Ant iinrecciosa y AntituHlornl.

Inmunidad antiviral. Inmunidad antiparasitaria. Inmunidad antibacteriana. Reconocimiento de los diferentes patógenos por las células de la inmun idad innata)' adaptativa . Mecanismos efectores propios a la inmunidad innata y adaptativa operativos frente a los diferentes tipos de agentes infecciosos. Diferentes estrategias desalTo lladas por los patógenos a efectos de evadir la respuesta inmune innata y adaptativa. Inmunidad Anti-tumoral. Mecanismos efectores en la inmunidad anti-tumora l. Mecanismos de escape empleados por las células tumorales. Profilaxis e inmunotcrapia: perspectivas.

Ullid:td ]4. Lnmunodcfic icllcias, Hipersensibilidad y Autoinmunidad. In munodeficiencias primarias (IOP). Características clínicas genera les. Clasificación de las IDP. El laboratorio en el diagnóstico inm uno lógico de las

IOP. Tratamiento. Inmunodeficiencias secundarias o adquiridas (lOS). Virus de la inmunodeficiencia humana (HIV). SIDA. Reacciones de hipersensibilidad tipo 1, 11 , III Y IV. Mecanismos involucrados en su inducción. Mecanismos que modulan su desarro llo. Diagnóstico. Manifestaciones clínicas. Fundamentos de su trata miento. Eva luac iones de las reacciones de hipersensibilidad. Tolerancia Inmu nológica. Tolerancia cen tral y periférica. Ruptura de la Tolerancia: mecanismos invo lucrados. Clasificación de las enfennedades autoinmunes. Lupus Eritematoso Sistémico, Artritis Reumatoidea, Tiroiditis de Hashimoto, Enfermedades neurológicas imnu nomediadas: etiopatogénesis, característ icas clínicas y fu ndamentos de su tratamiento.

Unid ad 15. Vncumts e Inmunote rnJlia. Nociones de Neuroi nmull oe ndocrinología. Inmunización act iva y pasiva. Vacunas existentes frente a enfermedades infecciosas de etiología viral, bacteriana y parasitaria . Respuesta primario y

secunda ria . Calendario oficial para nuestro país. Diferentes tipos de vacunas: a microorganismos inactivados o al'enuados, a subcomponentes, vacunas conjugadas. Vacunas polivalentes. Nuevas estrategias para el desarrollo de vacu nas. Los dcsafios planteados. Drogas inmunosupresoras. Sus blancos de acción. Inmunoterapia basada en e l empIco de anticuerpos no cOltiugados y conjugados a toxinas y radioisótopos. Empleo de citocinas en inmuTlOlerapia. Empleo de proteínas recombinaTltcs. Neuroinmllnocndocri nología: Neuropéptidos, citocinas, honnonas y sistema inmune. Comunicaciones entre los sistemas: inmune. nervioso central y endocrino. Alteraciones del eje neuroinmunoendocrino y enfermedad: La psico-neuro-inmuno·cndocrinología.

Programa Analítico Práctico

A· Prácticas de Aula - Resolución de Problemas

1 ｾ＠ Aislamiento, scparación y purificación de antígenos. 1- Estudio del Anticuerpo, propiedades fi sicoqllímicas. Movilidad electroforét ica, solubilidad y termolabi lidad . 2- Reacciones de precipitación para identifi car y cuantificar antígenos y anticuerpos. 3- Reacciones de aglutinación directa, pasiva e indirecta. 4- Sistema de complemento. Determi nación de la actividad total. Detemlinación de los componentes individua les C0l110 proteínas y por su func ión

(hemoHticos, 110 hemolíticos, conglutinación, adherencia). 5- Va loración de [a función inmune. Valoración de la inmunidad in nata: medida de actividad ci totóxica; sistema de complemento; función fagocítica.

(

6- Valorac ión de la función inmune. Va lorac ión de la in munidad específica: medida de poblaciones y subpoblac iones linfocitarias. Significado funcional; proli ferac ión li nfocitaria en respuesta a mitógenos; medida de Inmunoglobulinas; antígenos del MHC.

7- CilOmetría de Flujo y sus aplicaciones. Preparación de muestras. Compensación y med ición. Análi sis de histogramas y diferentes diagramas (puntos, densidades, contornos). Mode los y configuraciones. Inmunornarcación con anticuerpos conjugados a nuorocrornos.

8- Inmull ocnsayos cuantitati vos competi tivos y en sándwich. ELl SA. ELl SPOT. PIA y quimiolumin isccncia. 9- Transferencia a membrana. Westem Blols. SDS-PAGE. Diferentes sistemas de detección. 10- lnmunoensayos especiales. Grupos sanguíneos. Tipaje I·ILA. Transformación de linfocitos. Apoptosis celular. Inmu nolocalización ;11 s;tu.

Inmullofluorescencia directa e indirecta. Inmunohistoquímica para detecc ión de antígenos celulares. 11 - Obtenc ión y producción de anticuerpos po lic1onales. 12- Obtención y producción de anticuerpos 1llonoclonales. 13- Presentac ión de perfiles bioquímicos para alergias, enfermedades auloi nmu nes. diagnóstico de enfennedades infecciosas, marcadores tumora les y

difere ntes etapas del transplante.

B- Prácticas de Laboratorio

Tr:tbajo Práctico 1: Localiz:tción)' ais lamiento de órganos Ullroides en el ratón. Obtención de células inmunitarias. Nociones de cultivo celular. Extracc ión de sangre y órganos linfoides de rata y ratón albino. Aislamiento de células inmunes med ian te centrifugación. Recuento y viabi lidad celular. Cu lti vos de li nfoc itos.

Trabajo Práctico 2: Obtención de cél ulas Ilcritoncalcs dc ratón. Aislamiento dc m:1crófagos por adhcrencia a superficies plásticlIS, lana de nylon y vidrio. Noc iones sobre los distintos métodos de aislam iento ce lular. Ensayo de fagocitosis con lIIacrófagos peritoncales de nltón y Cmulida "lbiclllIS.

Eval uar los resultados de un trabajo experimenta l y visual izar una acc ión efectora de una célula inmunitaria

Trabajo I)ráct ico 3: Reacciones de aglutinación de partículas de latex. Determinación de antígenos de eritroc itos y poblaciones de linfoc itos. Enzimoinmunoensayo mediante adherencia enziRlática. Realización de diferentes fOnTIatos de ELlSAs para diagnóstico de infecc iones virales agudas y crónicas . Comparación de sensibilidad y especificidad de diferentes métodos inmunológicos. InmunoOuorescc ncia para anticuerpos antimitocondriales y antinucleares. Observación por epinuorescencia . Observación al microscopio confoca l y di scus ión de técnicas con alcance diagnóstico debido a su resolución cuasi-h istológica (biopsias

endosc6p icas gastrointestinales --esofagiti s eosinofilica-, endomicroscopía confoca l ill vivo en ofta lmología -d iagnóstico de di strofi as coméales- y dcmmtolog ía). T rabajo Práctico 4: Rea lización de \Vesterl1 Blol artesa nal y en formato comercia l.

Trabajo Práctico S: Amílisis Bioinfonm\tico de ltlltigen icidad proteíc:. y estudio de epitopes.

Trabajo Práctico 6: Anfllisis 110r citometría de flujo de células T y B humanos.

3. Bibliografía (bás ica y complementaria). • JANE WA Y'S IMMUNOBIOLOGY. Edi tores: Murphy, Travers y Walport . 7° EDIC iÓN. Editorial : Garland Science Publish ing, 2008.

INTRODUCCiÓN A LA IN MUNO LOG íA HUMANA. Editores: Fainboim Leonardo y Geffner Jorge. 6° EDIC iÓN. Afto: 201 1. Editorial Panamericana. • CELLU LAR AND MO LECULAR IMMUNOLOGY. Editores: Abbas, Lichtman y Pilla; Ediciones 80 Editorial: Elsevier Saunders.

INMUNOLOGIA MANUAL DE TECNICAS DE INVESTIGAC ION EN EL LA BORATORIO Lunman \Y., Bratke K., KOppcr M., Mynek D. 2008. Ed itorial Acribia. ISBN: 978·84-200· 1108-0; EAN: 97884200 11080.

• INMUNOLOG IA FUN DAMENTOS. Delves P. J., Martin SJ. , Bunon D.R., Roitt 10 M. 2008. Editorial Panamericana Iled. ISBN: 978-950-06-0899-2; hnp://www. roitt .com/cls.asp

Si tios \VEB de interés de , risita obligatoria 1- hup://whfrccman.com/ irnmunology5e/ web del texto Inmunología de R.A. Goldsby 2- http://www.blink.b1z/im m unoan 1mat 1ons/ 3- http://www.immunologylink.com/ buscador general de inmunologla: revistas, links.lextos. bases de datos de secuencias genómicas. 4- http://www. ncbLnlm.nih.gov/PubMedl buscador de bibliografia de ciencias en general 5- http://www2.cbm.uam.es/confocaVProtocolos. htm protocolos de técnicas usadas en el laboratorio de inmunología 6- http://www.copewithcYlOk ines.de/cope.cgitoda la información sobre citoquinas y biología de la comunicación celular. 7· http://www.whfreeman.com/kuby 8- http://www.ncbi.nlm.nih.govlbookslbv.fcgi?cal l==bv 9- http://pathm icro.med.sc.edulbookJimm uno l-sta. htm 10- http://www.merck.com/mrksharedlmmanuallsectionI 2/secI2.jsp 11 - http://www.drscopc.comlprivados/paclgeneralesJin munopatologialindex.html 12- http ://www.citomctri adeflujo.com

4. Desc ripción de Actividades de aprendizaje.

El programa analítico cuenta con 2 clases teóricas introductorias donde se presenta de forma sintét ica y holística la estructura particu lada del sistema li nfoide en humanos. Estas clases comprenden una descripción desde el punto de vista anatómico funciona l del sistema inmune para después intemal izar al a lumno en 105 minuciosos procesos moleculares que interrelac iona n a las células y los componentes so lubles asociados al sistema inmune. El desarrollo de la as ignatu ra cuenta con quince unidades temát icas teóricas distribuidas a lo largo de un cuatrimestre académico. Los e lementos didácticos a utilizar serán piz.:1fra y proyecc ión de presentaciones, por 10 que regu lannente podrá ser utilizada una sala de bioi nfonn ática para ind icar bibl iografia vi rtual que los alumnos deberá n consultar fuera de los horarios de c lase.

Los trabajos prácticos que se realizarán en la Universidad corresponderán a metodologias de comprobación de la funcionalidad del sistema inmune en di fe rentes modelos de metazoos, orien tados princi palmente al área básica de la Inmunología. Se desarrollarán técnicas básicas como westem blots, inmunoh istoqu ímica, enzimo- inrnu no an ális is, reacc ión de la po limerasa en cadena, fraccionamientos y determinación de la funcionalidad ce lular entre ot ras. Para e llo se contará con el equipamiento, bioterio e insumas provenien tes de d iferentes proyectos de in vestigación bás icos en los que part icipa el docente a cargo de este proyecto académico. El conoc imiento y observación de técnicas de laboratorio cl ínico se organi7.ará de modo presenc ial hasta tanto esta Uni versidad cuente con la infraestructura requerida para ejecutar los mismos. Para ello se visitaran diferentes laboratorios bi oq uímicos que cuentan con desarro llo en el área de inll1unod iagnóstico organiZ<1ndo la el aprendizaje observacional en tres áreas C0l110 se descri be en e l programa práctico.

5_ Cronograma dc contenidos, :lclividades y cvaluaciones.

Cronograma de Actividades Teóricas

Unid ad Semana ACTIVIDAD TenuHica (2 clases de 2 h

cada ｾＺｾ＠ por semana

I I Genera lidades e Introducc ión. 2 2-3 Inmunidad Innata 3 4 Corl1Dlcio Illavor de hi stocOTnoatibi lidad 4 4 Reconoc imien to antiaénicoOOr Li nfoc itos TV B

S S Procesamientov Presentación aniTl!énica 6 6 ｏ ｮｴ ｾ ｮｩ｡＠ Bv T. 7 7 Rrn lación de la eXOresión(!én ica en el sistema inmune

8 8 Resouesta inmune mediadaoor células T. 9 8 Resm¡esta inmune mediadaoor cé lulas B.

- 9 Primera Evaluac ión Teórica 10 9 Tráfico linfocitario. II 10 Regulación de la rcspusta inmune: I-Iomeostasis y Toleranc ia . 12 10 Memoria Inmunológica.

- II Seminario I - Proyecto Transversal Inmunidad de la reproducción. 13 II Inmunidad Antiinfecciosa y Antitumoral. - 12 Seminario 2 - Proyecto Transversal Inmunidad frente a infecciones. 14 12 Inmunodeficiencias, Hipersensib ilidad y Autoinmunidad. - 13 Seminario 3 - Proyecto Transversal Inmunidad frente a tumores.

15 13 Vacunas e Inmunolcrapia. Neuroi nmunoendocrinología.

- 14 Segunda Eva luación Teórica

- 14 Seminario 4 - Proyecto Transversal Vacunas en Argentina

- 15 Sem inario 5 - Proyecto Transversal Transplantes

- 15 Recupcratorio de Primera y Segunda Evaluación - 16 Cierre fl nal

Cronognlm a de Actividades Prácticlls en lnmullologh¡ Celuh¡r y Molecuhlr

Prácticas Sema na ACTIVLDAD de A ul a (1 elascde4h

oor semana)

I - 2 3 Aislamiento, separación y purificación de antígenos. Estudio del Anticuerpo, propiedades fisicoquimicas. Movilidad elcctroforética. solubilidad y termolabilidad.

TP- I 3 Localización y aislamiento de órganos linfoides en el ratón. Obtención de células inmunitarias. Nociones de cultivo celular. Estudio de promoción de la inflamación y obtención de células peritoneales de ratón.

3-4 4 Reacciones de precipitación para identificar y cuantificar antígenos y anticuerpos. Reacciones de aglutinación di recta, oasiva e indirecta.

S S Sistema de complemento. Detenninación de la actividad total. Deh::nninación de los com¡KIncntes individuales como proteínas y ¡KIr su función (hcmol1ticos. no hemol1ticos. ･ｯｮｾ ｬｵｬｩｮ｡ ｣ｩｮＮ＠ adherencia).

6-7 Valoración de la función inmune. Valoración do "

inmunidad innata: medida de actividad ci totóxica: sistema de complemento; función fagochica. Valoración de la función inmune. Valoración de la inmunidad espccffica: medida de

poblaciones y subpoblaciones linrocitllfias. Significado runcional: prolireración linrocitaria en respuesta a mitógellos: medida de Inmulloglobulinas; amlgCflos del M I-IC.

TP-2 5 Aislamiento de macrMagos por adherencia a superficies plásticas. lana de nylon y vidrio. Nociones sobrc los distintos métodos de aislamiento cclulllf. Ensayo d, faRocitosis con macróralZ.OS pcritoneales de ratón . Calldida albicGII$.

8yTP6 6 Citometria de Flujo y sus aplicaciones. Preparación de muestras. Compensación y medición. Análisis d, histogramas y direrenles diagramas (puntos. densidades, conlomos). Modelos y configuraciones. En esta etapa '" desarrolla " TP correspondiente a citometria de flujo el cual consiste en organizar a los alumnos para reali7.ar la observación ylo determinación de citometría de flujo en muestras de sangres en el HOsPital Materno Inrantil de la ciudad .

9 7 Inmunocnsayos cuantitativos competitivos y en sándwich. ELlSA. ELlSPOT. PI A y I Cluimioluminiscencia.

T P-J 8 Reacciones de aglutinación de particulas dc latex. Determinación de an\lgenos de eritrocitos y poblaciones de linrocitos. Enómoinmullocnsayo mediante ｾ､ｨ･ｲ･ｬｬ｣ｩ｡＠

em:imátiea. Rcali7.ación d, diferentes formatos d, ELlSAs p'" diagnóstico de infecciones virales agudas y cTÓnicas. Comparación de sensibilidad y espeCificidad de diferentes métodos inmunológicos. Inmunofluorcsceneia para Mlicuerpos antimitocondrialcs yantinuclearcs.

- 9 Clase de eonsultll

10 10 fransfercncill , mcmbrana. Westcm Blots. SDS·PAGE. Direrentes siSemas d, detección.

TP-4 10 Realización de Westem Blot artesanal yen formato comercial.

11-12 11 lnmunocnsayos especiales. Gnlpos sanguíneos. T¡paje li LA. TmnsfOfllmción do I¡nfocitos. Inmunolocalización il1 siw . I nnlunofl uoresccncia directa , indirecta. Inmunohistoquimica para detección de antígenos celulares. Determinación de apoptosis celular.

13 12 Obtención y producción de anticuerpos policlonales.

14 13 Obtención y producción de anticuerpos monoclOllales.

TP-5 13 Am!.lisis Ilioinfonm'ltico de antigenicidnd proteica y estudio de epilopes en el aula de informática de la FCEyN.

- 14 Clase de consulta

15 15 Presentación de perfiles bioqulmicos p<1ra alergias.

15 15 Presentación de perfiles bioqurmicos para enfermedades autoinmunes.

15 16 Prcsentación de perfiles bioqulmicos para diagnóstico de enfcrmedades infccci()S8S.

15 16 Presentación de perfiles bioqufmicos para tumores.

15 16 Presentación de perfiles bioquímicos para diferentes clapas dcltransplante.

6. Procesos de intervención pedagógica.

Fundamentación del objeto de estudio del curso: Los avances en Inmunología durante los últimos años han sido extremadamente bastos, consolidando a ésta como ciencia independiente, con su

conjunto propio de paradigmas, ya relativamente escindida de su tronco origi nario microbiológico. La Inmunología como ciencia tiene injerencia en prácticamente todas las ramas de la med icina y la mayoría de las disc iplinas cienlí licas se benefician de los react ivos y técnicas relacionadas a su desarrol lo. Esta materia de grado en Bioquímica esta div idida en dos secc iones: la primera etapa de aprendizaje es en Inmu nología básica, donde se describen los conceptos y teorías básicas que constituyen los fundamentos de esta especialidad a nivel ce lular y molecu lar, detallando sus elementos participativos, interrelaciones y funci onamiento. La segunda parte comprende la Inmuno logía en acción. Trata acerca de la aplicación del conocimiento sobre el sistema inmunitario en los mecanismos normales de defensa del hospedador, práctica clín ica y estado de las enfermedades. En esta secc ión habrá temas claves utilizados como modelos clín icos complejos cuya fi siopatología, diagnóstico y/o terapéutica tengan resolución a través del conocimiento básico de in munob io logía en humanos.

Se tendrá en cuenta el reconocimiento e interacción de la Inmunología con Microbiología, Hematología y Oncología incorporando aspectos relacionados con e l reconocimiento de agentes microbianos por los receptores sensoriales tanto citoplasmáticos corno de membrana, la intrincada organ izac ión de los tej idos li nfo ides, la heterogeneidad funciona l de los grupos de célu las dendríticas y linfocilos y las vías de inh ibición que constituyen la regulación de l sistema inmu nológico, haciendo especial hincapié en la re levancia clínica de los ítems tratados.

Régimen d e cursada 1- Clases Teóricas:

Serán dictadas por el docente responsable de la asignatura dentro de un proyecto longi tudi nal que abarcará los conten idos mínimos. También se invitarán profesiona les expe rtos reconocidos local, nacional e internacionalmente para disertar sobre temas específicos propuestos dentro del proyecto educativo transversa l. Durante la primera mitad de la clase se espera que el docente haga una exposición general del problema. En la segunda parte se espera que haga una revisión actualizada del estado actual de l problema, matizada cuando sea posible, con datos generados en el laboratorio.

2- Clases Prácticas: Los trabajos prácticos constan de dos tipos de actividades:

2.1 ) Clases prácticas de resolución de problemas denominadas Tareas de Au la (total de 10 TAs) son realizadas con el fin de reafinnar los conceptos teóricos con datos obtenidos de situac iones reales o posibles, poniendo énfasis en los va lores numéricos y un idades. Los problemas se cncuentmn disponibles desde el

comienzo del curso, así como también las guías con tablas y gráficos que puedan uti lizarse a lo largo del mismo. En las clases se explican semanalmente "problemas tipo" sim ilares a los que los alumnos deberán resolver. Dichos problemas tienden a analizar casos prácticos reales. Los alumnos pueden consultar en estas clases sus dudas. 2.2) Las clases de laboratorio denominadas Trabajos Práct icos (tota l 6 TPs) introducen al alumno en el manejo de instrumental y en la realización de mediciones básicas desarrollando protocolos fi sicoquímicos, analíticos, biológicos, microbiológicos, e inmunológicos. Una clase de Explicación de TP de 2 h

(

será dictada entre 2-3 días antes al TP por los docentes auxi liares. El día de l TP una breve explicac ión de 15 minutos por parte del docente a cargo precederá el comienzo de la realización de las tareas operac ionales en e l laboratorio . Las actividades de TPs penniten que los alumnos visualicen y fijen los conceptos previamente adq uiridos, así como iniciarlos en el manejo de instrumental. Los alumnos rec iben previamente la guía de trabajos prácticos, donde figuran ｬｯｾ＠ fu ndamentos de l práct ico de laboratorio, los materiales a ut ilizar y la metodología o pasos a seguir para la rea li zación del mismo. Los alumnos real izan mediciones que peml iten contrastar los resultados experimentales con ecuaciones teóricas, y deben volcar dichos resu ltados en un infomle de laboratorio que deben entregar para su correcc ión, incluyendo los resultados obten idos y la d iscusión de los mi smos. Para los trabajos de laboratorio los al um nos deben cumplir con los requisilos necesarios en este tipo de prácticas: as istir con la vestimenta adecuada (guardapolvo o ambo un ifomle de la carrera), utilizar los elementos de protecc ión que correspondan a la experiencia a realizar (gafas protectoras, guantes, barbijos, etc), conocer y respetar las nonllas de bioseguridad que el profesor explica al comenzar la cursada de la materia y aprobar un interrogatorio escrito de 2-5 preguntas el mismo día del desarrollo del TP.

3- Seminarios Bibliográficos Interactivos: Presentados por los estudiantes y guiados por un académico (se solicita imperiosamente la necesidad de un jefe de trabajos prácticos que colabore con

e l dictado de los seminarios y trabajos prácticos a prever para futuros ciclos académicos). Cada seminario usará como base dos publicaciones recientes, relevante al tcma de la c lase, seleccionada por el profesor encargado. Los estudiantes deberán discutir los artículos científicos y pronunciarse sobre la cal idad científica del lrabajo. El nllmero de seminarios fluctua con los ciclos académicos entre 2-4 durante el cuatrimestre .

7. [valuac ión Los alumnos serán evaluados mediante tres mecanismos:

a) Evaluación teórica escrita. Consisti rá en 2 pruebas parciales con preguntas estructu radas, scmiestructuradas y a desarro llar del contenido teórico y práctico dcsarrol1ado en las clases teóricas y práct icas. Cada parcia l contará con un parcial recupcratorio. Los parciales y rec uperatorios se califican del 0- 10 Y su aprobación es con el 60% de respuestas acertadas (61 10).

b) E\aluac ión de los trabajos prácticos. Consistirá en 2-5 preguntas escritas el día en que se desa rrolla el Ti>, ca lificados del 0-10 y su aprobación es con el 60% de respuestas acertadas (6/ 1 O). Cada eva luac ión de TI) contará con su correspond iente recuperatori o.

c) Evaluación de los seminarios interacti vos: Se eva luará la participación en el sem inario en fo rma ora l según la ca lidad de expresión, comprensión y discusión del tema se leccionad o. Se requerirá un 50% de asistencia promedio a los seminarios.

Cond iciones d e aprobación del curso: 1) Regu larización de la cursada: La as istencia a las clases teóricas tendrá valor conceptual. La asistencia y aprobación de los TPs deberá ser 100%

(asi stencia a 516 T Ps con aprobación del 100% de las eva luaciones de los trabajos prácticos). Por lo tanto la inasi stencia a un Ti> requerirá la aprobación del recuperatorio de la evaluac ión del Ti>. También se deberá contar con la as istencia al 80% de las Tareas de Aula (asistencia a 8/10 TAs). La cursada será aprobada con el 100% de tos parciales o recuperatorios aprobados y el 100% de los TPs o sus recuperatorios aprobados, además de la asistencia exigida a las TAs y seminarios bibliográficos.

2) Aprobación de la asignatura: deberá ser aprobado con una cal ificación de 4/10 mediante un examen final oral integrador de la asignatura. En esta instancia el alumno deberá tener conocimiento del programa teórico y práctico total de la asignatura. Esta asignatura no tiene régimen de promoción ni evaluación en condición " libre".

8. Asignación y distribución de tareas de cada uno de los integran tes del equipo docente.

El profesor adjunto realiza el dictado de las clases teóricas dos veces por semana, las cuales temáticamente deben anticiparse al desarrollo de las actividades prácticas en aquellos temas que así se requiera. También organiza los seminarios teóricos, los cuales se realizan dos veces en el cuatrimestre posterior a cada parcial. y modera su presentación junto a los ayudantes docentes. El docente a cargo coordinará la asignatura realizando al menos 4 reuniones diagnósticas durante el cuatrimestre (una reunión mensual como mínimo). El JTP organiza, modifica y lleva a cabo las actividades prácticas (tareas de aula y trabajos prácticos) liderando el 7<Y'1o de las tareas de aula y trabajos prácticos dado el dominio de los temas. El ayudante de primera participará en la totalidad (16) de las actividades prácticas del cuatrimestre, pudiendo llevar a cabo el 30% de las actividades prácticas planteadas en la as ignatura en condición de líder.

Las tareas evaluativas serán planteadas conjuntamente con profesores y ayudantes desde su redacción, corrección y prese llcialidad en la toma de parciales y finales de la asignatura.

Durante el segundo cuatrimestre de cada año académico, los docentes de la asignatura dictarán cursos de ronnación superior y/o doctorado relacionado a las temáticas del área Inmunología. También se abocarán a la redacción de proyectos de investigación y/o extensión que involucren el desarrollo del área de hununología y la participación de alumnos que ya hayan aprobado la cursada de la asignatura. Este aspecto aún no ha podido ser puesto en marcha debido a que los docentes de la asignatura colaboran activamente en el dictado de las materias durante el contra-cuat rimestre debido a la planta docente incompleta de la carrera de Bioquímica en los segundos cuatrimestres del cuarto y quinto año de la carrera. Esta condición retrasa e impide el desarrollo de una futura Escuela de Postgrado en Bioquímica.

9. Just ificación - (optativo)