gaceta de ciencias veterinarias recibido el 11 de abril de ... · situación de la enfermedad en...

7
Gaceta de Ciencias Veterinarias Vol 15 N° 2 pp 42-48 2010 42 Seropositividad de Babesiosis Canina en las Parroquias Catedral, Concepción, Juan de Villegas, Santa Rosa y Unión del Municipio Iribarren Estado Lara Seropositivity to canine babesiosis in the Catedral, Concepción, Juan de Villegas, Santa Rosa and Unión counties, at Iribarren municipality, Lara state 1 Mujica F F.*, 2 Orellana N , 1 Forlano M, 3 Barrios N, 4 Puzzar S, 1 Granda F 1 Unidad de Investigación en Parasitología Veterinaria, Departamento de Salud Pública. 2 Departamento de Medicina y Cirugía, Edo. Lara. Venezuela. 3 Postgrado de Producción Animal, 4 Departamento de Ciencias Sociales y Económica, Bioestadística. Decanato de Ciencias Veterinarias, Universidad Centroccidental Lisandro Alvarado (UCLA), Barquisimeto, Edo. Lara. Venezuela. * Autor para correspondencia Tel.: 58 251 2592437; fax 58 251 2592440 E-mail address: [email protected] (F. Mujica). RESUMEN Babesiosis canina es una enfermedad transmitida por garrapatas a los caninos domésticos y silvestres que afecta la salud de los mismos y es causada por parásito intraeritrocítico, Babesia canis vogeli (B. c. vogeli) y puede infectar a perros de todas las edades, la transmisión puede ocurrir por la picadura de garrapatas portadoras, también ocurrir de perros portadores a perros sanos mediante transfusiones sanguíneas y manipulación de instrumentos contaminados. Esta enfermedad está ganando interés como zoonosis emergente en los humanos. El objetivo de este estudio fue evaluar la seropositividad de B. c. vogeli en caninos de las parroquias Catedral, Concepción, Juan de Villegas, Santa Rosa y Unión del municipio Iribarren del estado Lara y relacionarla con el sexo, edad y raza, con el propósito de conocer la situación de la enfermedad en las parroquias más pobladas del municipio Iribarren. Se evaluaron al azar un total de 300 caninos. Se obtuvo como resultado a través de la técnica de IFI una seropositividad de 22,66% (68/300) para B. c. vogeli con títulos 1:40, no se observó diferencia significativa entre el sexo, edad y raza al correlacionarla con la seropositividad a B. c. vogeli, determinándose que al evaluar los factores de riesgo se presentan las mismas probabilidades a sufrir la enfermedad. Se concluye que B. c. vogeli se encuentra presente en las parroquias del municipio Iribarren del estado Lara y que la babesiosis canina afecta sin distinción de sexo, edad y raza. Palabras clave: Babesia canis vogeli, IFI, Parroquias, Municipio Iribarren ABSTRACT Canine babesiosis is a tick-borne disease of domestic and wild dogs, it is caused by an intra erythrocitic parasite, Babesia canis vogeli (B. c. vogeli) which affects the canine health. B. c. vogeli is able to infect dogs at age, and its transmission is able to occur not only by a tick bite, but also by blood transfusions or using blood contaminated needles or surgical instruments. Canine babesiosis is lately becoming an important zoonotic emergent disease. The main objective of this study was to test the seropositivity to B. c. vogeli in 300 dogs (n= 300) from the Catedral, Concepción, Juan de Villegas, Santa Rosa and Unión Counties, at Iribarren Municipality, Lara State, which was correlated with the dogs race, ages and sex, all this with the aim of knowing the general situation of this disease in the Iribarren Municipality. The test used for carrying out the main objective was the indirect immune fluorescent assay (IFA), and the results accomplished were as follows: 68 positive dogs out of 300 with a mean seropositivity of 22,66% for B. c. vogeli and titres of 1:40. There were not significant differences among the seropositivity values for B. c. vogeli and the variables race, age and sex; consequently, these risk factors are unimportant in this disease. It is concluded that B. c. vogeli is present in dogs in the counties surveyed at Lara State, and that canine babesiosis is able to cause disease independently of the race, age and sex of dogs. Key Words: Babesia canis vogeli, IFA, Counties, Irribaren Municipality. Recibido el 11 de abril de 2011 - Publicado el 21 de junio de 2011

Upload: vudien

Post on 20-Sep-2018

212 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Gaceta de Ciencias Veterinarias Vol 15 N° 2 pp 42-48 2010

42

Seropositividad de Babesiosis Canina en las Parroquias

Catedral, Concepción, Juan de Villegas, Santa Rosa y Unión

del Municipio Iribarren Estado Lara

Seropositivity to canine babesiosis in the Catedral, Concepción, Juan de Villegas, Santa Rosa and Unión

counties, at Iribarren municipality, Lara state

1Mujica F F.*, 2Orellana N , 1Forlano M, 3Barrios N, 4 Puzzar S, 1Granda F1Unidad de Investigación en Parasitología Veterinaria, Departamento de Salud Pública. 2Departamento de

Medicina y Cirugía, Edo. Lara. Venezuela. 3Postgrado de Producción Animal, 4Departamento de Ciencias

Sociales y Económica, Bioestadística. Decanato de Ciencias Veterinarias, Universidad Centroccidental

Lisandro Alvarado (UCLA), Barquisimeto, Edo. Lara. Venezuela.

* Autor para correspondencia Tel.: 58 251 2592437; fax 58 251 2592440

E-mail address: [email protected] (F. Mujica).

RESUMEN

Babesiosis canina es una enfermedad transmitida por garrapatas a los caninos domésticos y silvestresque afecta la salud de los mismos y es causada por parásito intraeritrocítico, Babesia canis vogeli (B. c.vogeli) y puede infectar a perros de todas las edades, la transmisión puede ocurrir por la picadura degarrapatas portadoras, también ocurrir de perros portadores a perros sanos mediante transfusionessanguíneas y manipulación de instrumentos contaminados. Esta enfermedad está ganando interés comozoonosis emergente en los humanos. El objetivo de este estudio fue evaluar la seropositividad de B. c.vogeli en caninos de las parroquias Catedral, Concepción, Juan de Villegas, Santa Rosa y Unión delmunicipio Iribarren del estado Lara y relacionarla con el sexo, edad y raza, con el propósito de conocer lasituación de la enfermedad en las parroquias más pobladas del municipio Iribarren. Se evaluaron al azarun total de 300 caninos. Se obtuvo como resultado a través de la técnica de IFI una seropositividad de22,66% (68/300) para B. c. vogeli con títulos 1:40, no se observó diferencia significativa entre el sexo, edady raza al correlacionarla con la seropositividad a B. c. vogeli, determinándose que al evaluar los factores deriesgo se presentan las mismas probabilidades a sufrir la enfermedad. Se concluye que B. c. vogeli seencuentra presente en las parroquias del municipio Iribarren del estado Lara y que la babesiosis caninaafecta sin distinción de sexo, edad y raza.

Palabras clave: Babesia canis vogeli, IFI, Parroquias, Municipio Iribarren

ABSTRACT

Canine babesiosis is a tick-borne disease of domestic and wild dogs, it is caused by an intra erythrociticparasite, Babesia canis vogeli (B. c. vogeli) which affects the canine health. B. c. vogeli is able to infect dogsat age, and its transmission is able to occur not only by a tick bite, but also by blood transfusions or usingblood contaminated needles or surgical instruments. Canine babesiosis is lately becoming an importantzoonotic emergent disease. The main objective of this study was to test the seropositivity to B. c. vogeli in300 dogs (n= 300) from the Catedral, Concepción, Juan de Villegas, Santa Rosa and Unión Counties, atIribarren Municipality, Lara State, which was correlated with the dogs race, ages and sex, all this with the aimof knowing the general situation of this disease in the Iribarren Municipality. The test used for carrying outthe main objective was the indirect immune fluorescent assay (IFA), and the results accomplished were asfollows: 68 positive dogs out of 300 with a mean seropositivity of 22,66% for B. c. vogeli and titres of 1:40.There were not significant differences among the seropositivity values for B. c. vogeli and the variables race,age and sex; consequently, these risk factors are unimportant in this disease. It is concluded that B. c.vogeli is present in dogs in the counties surveyed at Lara State, and that canine babesiosis is able to causedisease independently of the race, age and sex of dogs.

Key Words: Babesia canis vogeli, IFA, Counties, Irribaren Municipality.

Recibido el 11 de abril de 2011 - Publicado el 21 de junio de 2011

43

Seropositividad de babesiosis canina, municipio Iribarren estado Lara

INTRODUCCION

Babesiosis canina es una enfermedad transmitidapor garrapatas a los caninos domésticos y silvestres,que afecta la salud de los mismos y es causada por lainfección de un parásito intraeritrocítico del géneroBabesia. Esta enfermedad está ganando interés comozoonosis emergente en los humanos [1]. Presentandouna distribución mundial más prevalente en regionestropicales [2].

La transmisión de Babesia canis se realiza por lasfases evolutivas de la garrapata Rhipicephalus

sanguineus (larvas, ninfas y adultos), la transmisiónpuede llevarse a cabo por la vía transovariana ytrasestadial y de esta forma trasmitida a las próximasgeneraciones de la garrapata incluso en ausencia deperros infectados [3]. La babesiosis puede infectar aperros de todas las edades y la transmisión de lainfección además de ocurrir por la picadura degarrapatas portadoras, también puede ocurrir deperros portadores a perros sanos mediantetransfusiones sanguíneas y manipulación deinstrumentos contaminados [4].

Las manifestaciones clínicas de la enfermedadestán caracterizadas por síndrome febril y hemolítico,lo que origina cuadros importantes de anemia y he-moglobinuria; así como palidez en las mucosas,ictericia, pérdida de peso, depresión, espleno-hepatomegalia, vómitos, diarrea, síntomasrespiratorios, dificultades locomotoras, mialgias,parálisis e incoordinación [4].

Teniendo en cuenta los estudios serológicos y deinmunidad cruzada, su localización geográfica y lasdiferencias observadas en la patogenicidad y losvectores que la transmiten, se ha propuesto un sistemade nomenclatura trinomial para Babesia canis,fijándose tres subespecies genéticamente distintas:B. canis canis, B. canis vogeli y B. canis rossi teniendocomo sus vectores a las garrapatas Dermacentor

reticulatus, Rhipicephalus sanguineus y Haemaphysa-

lis leachi respectivamente [5]

En Brasil, a través de la caracterización molecularhan confirmado que la babesiosis canina es causadapor B. c. vogeli, [6] y Babesia gibsoni, [7]. En Ven-ezuela se confirmó a través de la caracterizaciónmolecular que la babesiosis canina es causada por B.

c. vogeli [8].

El alcance de los daños ocasionados por la babe-siosis canina es importante en la actualidad, por loque se hace necesario obtener resultados confiablesde las muestras procesadas en el laboratorio, de allí,

que se busca la implementación de métodosdiagnóstico más sensibles y específicos como la pruebade Inmunofluorescencia Indirecta (IFI), a fin dedeterminar la prevalencia y distribución geográfica debabesiosis canina para su posterior control [9].

En Venezuela pocas investigaciones se han llevadoa cabo sobre esta parasitosis que afecta a los caninos,así, en cinco localidades del estado Falcón se reportóuna prevalencia de (5,3%) para B. canis en caninosestudio llevado a cabo a través de frotis sanguíneos[10]. Posteriormente, utilizando la técnica de frotissanguíneo, se obtuvo una prevalencia de 1,6%, en laUnidad de Diagnóstico de la Universidad Francisco deMiranda, ciudad de Coro Estado Falcón, entre los años2000 y 2004 [11].

Se evidencia que existen pocos estudios sobreseropositividad de babesiosis canina en el país, porende, se requiere llevar a cabo trabajos másespecíficos con la finalidad de determinar laprevalencia, el comportamiento de la enfermedad ylos factores predisponentes, para de esta forma poderinstaurar mecanismos de control. Los caninos se hanconstituido en un integrante más de la familia lo queha dado más relevancia al estatus de zoonosisemergente.

El objetivo central de este estudio fue evaluar laseropositividad de B. c. vogeli en cinco parroquias delmunicipio Iribarren, estado Lara y relacionarla con elsexo, edad y raza con el propósito de conocer lasituación de la babesiosis canina.

MATERIALES Y METODOS

Área de Estudio

El presente trabajo se llevo a cabo en las parroquiasCatedral, Concepción, Juan de Villegas, Santa Rosa yUnión del municipio Iribarren las cuales se localiza enel Estado Lara. En las mismas se encuentranconcentrada el 83,53 % de la población del municipioIribarren, estado Lara el cual posee una superficie de19.800 Km2 lo cual representa el 2,10 % del territorionacional de Venezuela. Sus coordenadas geográficasson: 09° 24' 02''; 10° 45' 02'' de latitud norte 68° 54'00''; 70° 51' 08'' de longitud oeste. La temperaturapromedio es de 27°C para las áreas planas y de 24°Cpara las montañosas.

Población

Se evaluaron un total 300 caninos provenientesde los 5 parroquias previamente mencionados. Loscaninos fueron seleccionados al azar y distribuidos de

44

la siguiente manera: 60 animales por parroquia (30machos) y (30 hembras) con edad mayor de 6 mesesde edad y sin distinción de la raza.

Muestras de suero

A cada canino se le extrajo muestra de sangre dela vena cefálica en un tubo estéril de 3 ml, venojectcon agujas estériles (Vacutainer Becton Dickinson),sin anticoagulante, una vez formado el coagulo seprocedió a obtener el suero por centrifugaciónutilizando una Damon lEC división (modelo HN-811) a3000 rpm, durante 5 minutos, los sueros obtenidos secolocaron en tubos estériles, identificados, sealmacenaron en un ultracongelador (Revco) a -20 °Chasta su posterior uso.

Confección de los antígenos para IFI

Los anticuerpos para B. c. vogeli presentes en lossueros, fueron evaluados utilizando la prueba de IFI[12,13]. El antígeno fue obtenido de un perroesplenectomizado e inmunosuprimido condexametasona (1 mg/kg por vía subcutánea cada 24h durante 3 días), inoculado con una cepa de B. c.

vogeli, cedida por la Dra. Rey-Valerion, Departamentode Parasitología Veterinaria Universidad Francisco deMiranda, Coro Edo. Falcón, Venezuela. Una vezpresente una parasitémia del 10% se extrajo sangredel canino inoculado, para la confección de losantígenos para IFI.

Inmunofluorescencia Indirecta

La IFI se realizó con 10 ul de suero, incubadosa 37 °C durante 30 minutos en portaobjetos portandoel antigeno (B. c. vogeli), posteriormente, se lavó 3veces cada lamina, 2 veces en tampón fosfato salino(PBS, pH 7,2) y una vez con agua destilada. Luego secolocan 10 ul del conjugado, anti-dog IgG-isotiocianatode fluoresceína (Sigma-Aldrich Corp, St. Louis, MO) auna dilución de 1:40 en PBS (pH 7,2). Las láminas seincubaron a 37 °C durante 30 min, se lavó 3 vecescada lamina, 2 veces en tampón fosfato salino (PBS,pH 7,2) y una vez con agua destilada, se dejó secar alaire y posteriormente fueron examinadas usando unmicroscopio Olympus BX51, binocular deepifluorescencia con objetivo de inmersión 100x, conluz ultravioleta. Los caninos se consideraron positivoscuando una reacción fluorescente se produjo a unadilución igual a 1:40.

Análisis estadístico

Se usó el Paquete Estadístico para las CienciasSociales (SPSS) versión 15.0, los datos fueronanalizados utilizando un análisis de la varianza. Lasfrecuencias de los parásitos se compararon mediantela prueba Chi-cuadrado (x2). Un valor de (p <0,05) fueconsiderado significativo. La asociación entre lapositividad a B. c. vogeli con la sexo, edad y raza,fue determinada mediante la razón de productoscruzados (Odds Ratio - OR) con sus respectivosintervalos de confianza ( IC 95% y una prueba de X2 )a un nivel de confianza (P) de 95 %, los cuales fueronobtenidos utilizando el programa Epi-Info 3.3.2.

RESULTADOS

De los 300 sueros de los caninos muestreados delas 5 parroquias evaluadas del municipio Iribarren delestado Lara, se observó un total de 68 caninos (22,6%) resultaron positivos por la técnica de IFI para B.

c. vogeli (Tabla I).

El estudio de seropositividad de babesiosis caninapor parroquia arrojó diferencias significativas (p<0.05)entre las mismas lo cual puede deberse a variosfactores como: manejo sanitario de los caninos, alhábito de los caninos de deambular o permanecerconfinado en casa o ambas y la condición de medioambiente en la respectiva parroquia. En la parroquiaCatedral se obtuvo una seropositividad para B. c.

vogeli de 11,7 % (7/60 caninos) destacándola como laparroquia con menor presencia del parásito, adiferencia de las parroquias Concepción y Santa Rosaen las cuales la seropositividad presentó rangos de28,3 % (17/60 caninos) y 30,0% (18/60 caninos)respectivamente. Es importante destacar la condiciónde la parroquia Santa Rosa ya que fue donde seencontró el mayor grado de seropositividad para B.

c. vogeli, con 18 caninos, lo que representa un 30,0%. Este aspecto caracteriza a esta parroquia como unárea más susceptible a babesiosis canina, (Tabla I).

En cuanto al sexo, se obtuvo como resultado 30hembras positivas y 38 machos positivos lo querepresentan 20,00 % y 25,33 % respectivamente (TablaII). No se observó diferencia significativa (p> 0.05)entre los grupos evaluados, demostrando que los ma-chos y las hembras presentan la misma posibilidad deestar infectados

En relación a la edad, el grupo con mayorseropositividad fue el comprendido entre > 96 meses

Mujica F F., Orellana N , Forlano M, Barrios Na, Puzzard S, Granda F

47

REFERENCIAS

[1]Homer, M.; Aguilar, I.; Telford, S.; Krause, P.;Persing, D. Babesiosis. Clinical Microbiology Rew. 2000;13(3): 451-469.

[2] Boozer AL, Macintire DK. Canine babesiosis.Vet. Clin. North Am. Small Anim Pract. 200; 33:885-904.

[3] Taboada, J., Merchant, S.R., Babesiosis of com-panion animals and man. Vet. Clin. North Am. SmallAnim. Pract. 1991; 21:103-123.

[4] Lobetti R.G. Canine babesiosis. Compend ContinEduc Pract Vet. 1998; 20(4):418-431.

[5] Uilenberg, G.; Franssen, F.; Perie, N.; Spanfer,A. Three groups of Babesia canis distinguished and aproposal for nomenclature. Vet. Q. 1989; 11(1):33-40.

[6] Passos, L.M.F., Geiger, S.M., Ribeiro, M.F.B.,Pfister, K., Zahler-Rinder, M., First molecular detec-tion of Babesia vogeli in dogs from Brazil. Vet.Parasitol. 2005;127:81-85.

[7] Maia, M.G.; Costa, R.T.; Haddad, J.P.A.;Passos, L.M.F.; Ribeiro, M.F.B. Epidemiological as-pects of canine babesiosis in the semiarid area of thestate of Minas Gerais, Brazil. Prev. Vet. Med.2007;79:155-162.

[8] Rey-Valeirón C., Criado-Fornelio A., Zavala E.,Granados R. Parasitological and molecular character-ization of a venezuelan isolate of Babesia canis.Revista Científica, FCV-LUZ. XVII. 2007; 1: 21 - 27.

[9] Vercammen F, De Deken R, Maes L. Clinical andSerological Observations on Experimental Infectionswith Babesia canis and Its Diagnosis using the IFAT.Parásito. 1995; 2 (4):407-10.

[10] Pérez, K.; Rey-Valeirón, C. Muestreo piloto deBabesia spp. y evaluación de sensibilidad agarrapaticidas de Rhipicephalus sanguineus en caninosdel municipio Colina, estado Falcón. Croizatia.2003;4(1-2):38-45.

[11] Rey-Valeirón, C. Babesiosis y hepatozoonosiscaninas en Venezuela: ¿Establecidas o nacientes?Memories I Internacional Symposium Hemoparasitesand their vectors. 2004, 14-16 Octubre; Caracas, Ven-ezuela.

[12] Madruga, C.; Kessler, R.; Jesus, E.; Sete, A.Imunofluorescencia indireta para diagnosticosorologico de Babesia bovis e Babesia bigemina:producao de ant?geno com cepas isoladas no Estadode Mato Grosso do Sul e avaliacao preliminar do teste.1986. 32, Embrapa-CNPGC, Campo Grande: 6p

[13] Trapp, S.; Dagnone, A.; Vidotto, O.; Freire,R.; Amude, A.; Autran de Morais, H. Seroepidemiologyof canine babesiosis and ehrlichiosis in a hospitalpopulation. Vet Parasitol. 2006;140: 223-230.

[14] Dell' Porto, A., Oliveira, M.R., Miguel, O.,Babesia canis in stray dogs from the city of São PauloComparative studies between the clinical and hema-tological aspects and the indirect fluorescence anti-body test. Rev. Bras. Parasitol. Vet.1993; 2, 37-40.

[15] Ribeiro, M., Lima, J., Passos, L., Guimarães,A. Freqüência de anticorpos fluorescentes anti-Babe-sia canis em cães de Belo Horizonte, Minas Gerais.Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 1990. 42, 511-517.

[16] Levy M.G., Breitschwerdt E.B., Moncol D.J.Antibody activity to Babesia canis in dogs in NorthCarolina. Am J Vet Res.1987; 48(3):339-41.

[17] Hornok S., Edelhofer R., Farkas. R.Seroprevalence of canine babesiosis in Hungary sug-gesting breed predisposition. Parasitol Res. 2006;99:638-642.

[18] Cabannes A, Pelse H, Lucchese F, Appriou M.Seroprévalence de la babésiose canine dans le Sud-Ouest de la France. Rev Méd Vét.2002;153: 27-28

[19] Traldi G, Ahmed MH, Mazzucchelli M.Diffusione di Babesia canis in 2 provincie del nordItalia. Parassitologia.1988;30:209-210

[20] Trotz-Williams L, Trees AJ. Distribution,prevalence and incidence of vector-borne parasiticinfections in Europe. Liverpool School of Tropical Medi-cine and Faculty of Veterinary Science, The Universityof Liverpool. 2002.

[21] Maroli, M., Khoury, C., Frusteri, L., Manilla,G., Diffusione della zecca del cane Rhipicephalussanguineus (Latreille 1806) in Italia: un problema disalute pubblica. Ann. 1st Super. Sanita.1996; 32: 387-397.

[22] Obenchan, F.D., Galun, R. (Eds.), Physiologyof Ticks. Pergamon Press. 1982; 470p

[23] Sonenshine, D.E., Biology of Ticks. OxfordUniversity Press, New York. EUA, 1993; 463p

[24] Sutherst, R.W., Bourne, A.S., The effect ofdesiccation and low temperature on the viability ofeggs and emerging larvae of the tick, Rhipicephalus(Boophilus) microplus (Murrell and Barker) (Ixodidae).Int. J Parasitol. 2006;36:193-200.

[25] Costa-Júnior L., Ribeiro M., Rembeck K.,Rabelo E., Zahler-Rinder M., Hirzmann J., Pfister K.,Passos L. Canine babesiosis caused by Babesia canisvogeli in rural areas of the State of Minas Gerais,Brazil and factors associated with its seroprevalence.Rec Veterinary Sci. 2009; 86: 257-260.

Seropositividad de babesiosis canina, municipio Iribarren estado Lara

48

Gómez-Gil M, Pérez-Quintero G, Santéliz-Vásquez P, Cortés-Kocc A y Vilanova-Fernández T

[26] Yamane I, Gardner IA, Ryan CP, Levy M, UrricoJ, Conrad PA. Serosurvey of Babesia canis, Babesia

gibsoni and Ehrlichia canis in pound dogs in Califor-nia, USA. Prev Vet Med.1994;18:293-304