experiencias en el control de micotoxinas · reglamento ce 401/2006 criterios •requisitos del...
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EXPERIENCIAS EN
EL CONTROL DE
MICOTOXINAS
Pilar Jiménez
Laboratorio de Salud Pública de Madrid
JORNADAS AESAN, 5-7 Junio 2013
Fundado en 1877 (Lab. Municipal de Higiene)
Actualmente adscrito a Madrid Salud
51 trabajadores en plantilla
Oferta analítica
+200 ensayos acreditados por ENAC
Alimentos y bebidas
Aguas continentales
Aire: Control de calidad ambiental
Ensayos FQ, Biológicos, Parasitológicos, Micro
LABORATORIO SALUD PUBLICA
ACTUACIONES
PROGRAMADAS (PAP)
Inspección y muestreo
Controles analíticos
Evaluación de las actividades
MICOTOXINAS
Reglamento CE 1881/2006
Límites máximos (LMR s)
Reglamento CE 401/2006
Criterios
• REQUISITOS DEL MUESTREO
• REQUISITOS DE LOS METODOS DE
ANALISIS (Precisión, Recuperación)
• EXPRESION DE RESULTADOS
NOTIFICACIONES RASFF
2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011
AFLATOX 762 839 946 801 705 902 638 649 585
DON 10 4 3 2 11
FUMON 15 14 2 15 9 2 1 3 4
OTA 26 27 42 54 30 20 27 34 35
PATU 6 7 3
ZEARA 1 6 2
Total 803 880 996 878 760 933 669 688 635
RASFF-2011 Annual Report
TOMA DE MUESTRAS
Planificación anual • Revisión trimestral
Micotoxinas
Metales pesados
Nitratos
HAP s
Acrilamida
PROGRAMA 5: CONTROL DE
CONTAMINANTES EN ALIMENTOS
Ficha de producto
TOMA DE MUESTRAS
Requisitos del muestreo
Tipo de muestras
Productos preferentes
Peso o volumen
Subdivisión de muestra
OFERTA ANALITICA
PRODUCTO/MATERIAL
A ENSAYAR ENSAYO
NORMA/PROCEDIMIENTO
DE ENSAYO
Frutos secos
Cacahuetes
Especias
Aflatoxinas por ELISA
(screening)
Limites de detección:
≥ 2,0 µg/kg: Cacahuetes para consumo
directo, Frutas desecadas (excepto higos
secos)
≥ 5,0 µg/kg: Especias, Avellanas, Nuez de
Brasil, Higos secos.
≥ 8,0 µg/kg: Cacahuetes para tratamiento
posterior, Almendras, Pistachos.
MA-42-EE
Frutos secos
Cacahuetes
Cereales
Especias
Alimentos infantiles
Aflatoxinas por CL-FLD
≥ 0,50 µg/kg Frutos secos, cacahuetes,
cereales y especias
≥ 0,050 µg/kg Alimentos infantiles
MA-22-HPLC
Leche líquida y en polvo
Preparados y alimentos
para lactantes
Aflatoxina M1 por CL-FLD
≥ 0,0050 µg/kg
MA-20-HPLC
ENSAYOS
nº LE/416
PRODUCTO/MATERIAL
A ENSAYAR ENSAYO
NORMA/PROCEDIMIENTO DE ENSAYO
Alimentos a base de
maíz
Fumonisinas por CL-FLD
≥ 100 µg/Kg MA-15-HPLC
Alimentos y Bebidas a
base de manzana
Patulina por CL-DAD
≥ 5,0 µg/kg MA-19-HPLC
Vino
Café tostado y soluble
Cereales
Alimentos infantiles a
base de cereales
Ocratoxina A por CL-FLD
≥ 0,30 µg /kg Vino
≥ 1,2 µg /kg Café tostado y soluble
≥ 0,50 µg /kg Cereales
≥ 0,10 µg /kg Alimentos y leches
infantiles
MA-13-HPLC
OFERTA ANALITICA ENSAYOS
nº LE/416
PROCESO ANALITICO
PREPARACION
MOLTURACION
EXTRACCION
PURIFICACION
CALIBRACION Y DETERMINACION
PREPARACIÓN DE MUESTRAS
MOLTURACIÓN MUESTRA
C. Minorista < 1 kg
C. Mayorista (PIF) 20-30 Kg
Medios para garantizar
la homogeneización y
molturación de
la muestra recibida
(FVO-Oct 2012)
DETERMINACIÓN DE
AFLATOXINAS 1. METODO SCREENING (EIE)
Kit indicador de AF s totales AFLACARD TOTAL
Negativo < LD (2,5,8 µg/kg)
Positivo Confirmación HPLC
Ventajas:
Dar una respuesta rápida (15 minutos)
Sensibilidad “a medida” (nivel de screening)
Requisito: Aceptación del cliente
PRODUCTO A ENSAYAR NIVEL DE CRIBADO (LD)
Cacahuetes consumo directo
Frutas desecadas (excepto higos
secos)
Cereales y harinas
2,0 µg/kg
Especias
Avellanas y Nuez de Brasil
Higos secos
Maíz y arroz
5,0 µg/kg
Cacahuetes para tratamiento
posterior
Almendras
Pistachos
8,0 µg/kg
DETERMINACIÓN DE
AFLATOXINAS (screening)
LMR s Micotoxinas.pdf
2. METODO CONFIRMACIÓN (LC-FLD)
Columnas de inmunoafinidad (selectividad)
Derivatización postcolumna con Br2 (sensibilidad)
Mº cuantitativo LQ= 0,5 µg/kg y 0,05 µg/kg (*)
Resultado en µg/kg x U (k=2, α=0,05%)
Resultado corregido: x = x · factor recuperación
Versátil: aplicable a amplio tipo de matrices
(*) Alimentos infantiles
DETERMINACIÓN DE
AFLATOXINAS II
CONTROL DE CALIDAD INTERNO/serie
Calibración diaria (4-5 niveles)
Control de residuales relativos
Control de pendiente (x 2•SD)
Recuperación: MRC o MC reforzada
Muestra Conforme (LQ)
Muestra NO Conforme (≥ LMR)
Criterio de matriz blanca (< 1/3 LQ) (rotación)
Precisión: 1 muestra duplicada
ASEGURAMIENTO CALIDAD
CRITERIOS: RCE 401/2006
CONTROL DE CALIDAD EXTERNO
Ejercicios de intercomparación
Periodicidad Anual:
Aflatoxinas
Ocratoxina A
Periodicidad Bienal:
Patulina
Fumonisinas
Aflatoxina M1
ASEGURAMIENTO CALIDAD
CRITERIOS: Guía ENAC-14 y NT-03
2010 2011 2012
AFLATOXINAS
B1, B2, G1, G2 y
Totales
Almendra
(z= 0,5)
Polvo Curry
(z= -0,2)
Pistachos
(z=-1,0)
Maíz
(z= 0,7)
FUMONISINAS
B1 y B2
Maíz
(z= 0,6 y -0,6) Maíz
(z= -0,5 y -0,3)
PATULINA Zumo manzana
(z= -0,6) Puré manzana
(z= -0,5)
OCRATOXINA A Café tostado
(z=0,1)
Vino
(z= 0,7, 0,4, 0,7)
Vino
(z= -2,1, 0,1, -0,4)
Trigo (z= 0,3)
Paprika (z=-1,3)
AFLATOXINA M1 Leche polvo
(z= -1,6)
CONTROL DE CALIDAD
MUESTRAS MICOTOXINAS
PROGRAMADAS 2011 2012 2013
AFLATOXINAS
B1, B2, G1 y G2
58 cacahuetes y
frutos secos
68 cacahuetes,
frutos secos* y
especias
50 cacahuetes
frutos secos y
especias
FUMONISINAS B1
y B2 -
15 aperitivos maíz y
alimentos infantiles -
PATULINA 25 zumos
manzana y sidra
10 zumos de
manzana -
OCRATOXINA A 51 vino, café,
cereales,
especias
26 vino, café,
alimentos infantiles,
pimentón
30 vino, café,
especias
AFLATOXINA M1 17 leches* y
preparados para
lactantes
11 leches y
preparados para
lactantes
-
Nº TOTAL 151 132 80 *1 leche en polvo (M1) y 2 pistachos (AFLA´S) > L.Max
En 2012 se establecen los niveles de screening en 2, 5 y 8
µg/kg reducción en el nº de confirmaciones
NO PROGRAMADAS (PIF) 2011 2012
AFLATOXINAS TOTALES
(B1, B2, G1 y G2)
Cacahuetes
Almendra
Pistachos
Especias
Cacahuetes
Almendra
Pistachos
Cúrcuma
Jengibre
Nº TOTAL 219 199
CONFIRMACION (HPLC) 47 22
CONFORMES 100% 100%
MUESTRAS MICOTOXINAS
MUCHAS GRACIAS
POR
SU ATENCIÓN