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Taller 8 ENTEROBACTERIAS

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Page 1: enterobacterias-2361

Taller 8ENTEROBACTERIAS

Page 2: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

40 géneros.

150 especies.

20 especies responsables de patología

humana.

Distribuidas en suelo, agua, alimentos.

Flora normal del intestino de humanos y

animales.

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TABLE 206–1 The Tribes and Genera of the Family Enterobacteriaceae That Are Associated with Human Disease

Tribe Genera

Escherichieae Escherichia

Shigella

Edwardsielleae Edwardsiella

Salmonelleae Salmonella

Citrobactereae Citrobacter

Klebsielleae Klebsiella

Enterobacter

Hafnia

Serratia

Protease Proteus

Morganella

Providencia

Yersinieae Yersinia

Erwinieae Erwinia

Miscellaneous genera (not yet assigned to a tribe) Buttiauxella

Cedecea

Ewingella

Kluyvera

Tatumella

Rahnella

Various “enteric groups” (not yet assigned to a genus)

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TABLE 206–2 Names and Synonyms of Recovered Isolates of Enterobacteriaceae (Excluding Yersinia, Shigella, and Salmonella)

Current Name Synonym

Cedecea davisae Enteric group 15

Cedecea lapagei Cedecea sp. 4

Cedecea neteri

Citrobacter amalonaticus

Citrobacter diversus Citrobacter koseri

Citrobacter freundii Colobactrum freundii

Edwardsiella tarda

Enterobacter aerogenes Aerobacter aerogenes

Enterobacter amnigenus

Enterobacter asburiae Enteric group 17

Enterobacter hormaechi Enteric group 75

Enterobacter sakazakii

Enterobacter taylorae Enteric group 19

Escherichia fergusonii Enteric group 10

Escherichia hermannii

Escherichia vulneris

Ewingella americana

Hafnia alvei

Page 5: enterobacterias-2361

Klebsiella ornithinolytica Klebsiella oxytoca ornithine positive

Klebsiella oxytoca

Klebsiella ozaenae

Klebsiella pneumoniae

Klebsiella rhinoscleromatis

Kluyvera ascorbata

Moellerella wisconsinsis Enteric group 46

Morganella morganii subsp. morganii Proteus morganii

Proteus mirabilis Proteus vulgaris indole negative

Proteus penneri

Proteus vulgaris Proteus inconstans

Providencia alcalifaciens

Providencia rettgeri Proteus rettgeri

Providencia stuartii Proteus inconstans

Serratia liquefaciens Enterobacter liquefaciens

Serratia marcescens Centers for Disease Control and Prevention group E9

Serratia plymuthica

Serratia proteamaculans subsp. quinovora

Serratia rubidaea

Tatumella ptyseos

Trabulsiella guamensis Enteric group 90

Yokenella regensburgei Koserella trabulsii enteric group 45

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ENTEROBACTERIAS

MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES Bacilos cortos gram negativos, no esporulados, mótiles

(flagelos perítricos) o no, capsulados o no, pilis.

BIOQUÍMICASAnaerobios facultativos, catalasa positiva, oxidasa negativa, fermentan la glucosa, reducen nitratros a nitritos.

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ENTEROBACTERIAS

CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

MEDIOS DE CULTIVO

1. Medios no selectivos: agar sangre

2. Medios selectivos-diferenciales: agar McConkey, agar EMB

McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).

Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).

3. Medios altamente selectivos: SS agar, agar XLD, agar Hektoen entérico.

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ENTEROBACTERIAS

CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN

1. Pruebas bioquímicas

2. Pruebas serológicas

3. Pruebas de biología molecular

Page 9: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS

Prueba TSI (triple azúcar hierro)

Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g.

Resultados: Superficie inclinada/fondo: - alcalina/alcalina: BGNF (Pseudomonas).

- ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, etc

- alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.

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TSI

Page 11: enterobacterias-2361

TSI

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ENTEROBACTERIAS

OTRAS PRUEBAS BIOQUÍMICASProducción de ureasaProducción de indolUtilización del citratoMotilidadDescarboxilación de lisina, arginina, ornitinaProducción de fenilalanina desaminasa

Producción de H2SPrueba VP

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ENTEROBACTERIAS

ESTRUCTURA ANTIGÉNICA

Antígeno O: Lipopolisácarido

Antígeno K: Cápsula

Antígeno H: Flagelina

Page 14: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias Enteropatógenas

Enterobacterias No Enteropatógenas

Page 15: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias enteropatógenas

E. coli

Salmonella

Shigella

Yersinia enterocolitica

Yersinia pseudotuberculosis

Page 16: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias no enteropatógenasEscherichia coliKlebsiella pneumoniaeProteus mirabilisProteus vulgarisEnterobacter cloacaeCitrobacter freundiiSerratia marcescensMorganella morganiiProvidencia

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ENTEROBACTERIASNO ENTEROPATÓGENAS

Page 18: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias no enteropatógenas

Factores de patogenicidad generales

Endotoxina

Cápsula

Variación antigénica de fase (ag K y ag H)

Sideróforos

Pilis de adherencia o fimbrias

Page 19: enterobacterias-2361

Enterobacterias no enteropatógenas

Page 20: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias no enteropatógenasPatologías

Infección urinariaMeningitisNeumonía Abscesos intraabdominalesAbscesos cerebralesSepticemia

Page 21: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

Pilis 1: manosaPilis P: gal-gal (uroepitelio)Pilis de adherencia agregativa (AAF) (uroepitelio e intestinal)Pilis AFC (factor de colonización) (epitelio intestinal)Pilis formadores de poros o haces (BFP) (epitelio intestinal)Polisacárido capsular K1 (Ácido siálico): antifagocíticoHemolisina alfa: formadora de poros

E. coli

Page 22: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Patologías Infecciones urinariasMeningitis en RNSepticemiaNeumoníaInfección de heridasInfecciones intraabdominales

E. coli

Page 23: enterobacterias-2361

E. coli

Page 24: enterobacterias-2361

E. coli

Page 25: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

Pilis: adherencia a epitelios respiratorio y urinarioCápsula antifagocítica

PatologíasK. pneumoniae y K. oxytoca: infecciones urinarias, neumonía y otras infecciones nosocomialesK. rhinocleromatis: rinoescleromaK. ozaenae: ozena

Klebsiella

Page 26: enterobacterias-2361

Klebsiella pneumoniae

Page 27: enterobacterias-2361

Klebsiella pneumoniaeCápsula

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Klebsiella pneumoniae

Page 29: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

PilisUreasa

PatologíasInfecciones urinarias, bacteremia, neumonía: En pacientes debilitados.

Proteus

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Proteus

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Proteus

Page 32: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

Pilis

PatologíasInfecciones urinarias, septicemia.

Enterobacter

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Enterobacter

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Enterobacter

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ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

PilisS. marcescens: pigmentos rojos

PatologíasInfecciones urinarias, bacteremia, neumonía. En pacientes debilitados.

Serratia

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Serratia

Page 37: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias no enteropatógenasDiagnóstico

- Muestras- Frotis- Cultivo e identificación: Cultivo: ASH, MacConkey o agar EMB (Lactosa positiva) Identificación: Prueba TSI: ácida/ácida Otras pruebas bioquímicas: Urea, citrato, indol, motilidad, descarboxilación de lisina, arginina, ornitina, VP.

Page 38: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias no enteropatógenas

Tratamiento

Antibiótico según antibiograma

Resistencia a antibióticos: cromosómica o

plasmidial.

Page 39: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS ENTEROPATÓGENAS

Page 40: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias enteropatógenas

Escherichia coli

Antígenos O: 150 diferentes

Antígenos K

Antígenos H

Ej: E. coli O111:K76:H7

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ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias enteropatógenas

Escherichia coli

Clasificación de las cepas productoras de diarrea

E. coli enterotoxigénica

E. coli enteropatógena

E. coli enterohemorrágica

E. coli enteroinvasiva

E. coli enteroagregante

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ENTEROBACTERIAS

E. COLI ENTEROTOXIGÉNICAEpidemiología:Diarrea infantil en países subdesarrolladosDiarrea del viajeroTransmisión oral-fecalSerotipos O: 6, 8, 25, 78,115, 128Patogénesis:Colonización del intestino delgado (pilis AFC)Enterotoxina LT y enterotoxina ETAumento del AMPc y GMPcSalida de agua y electrolitosDiarrea acuosa

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ENTEROBACTERIAS

E. COLI ENTEROTOXIGÉNICAInmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración

Tratamiento:Hidratación Oral o ParenteralMuchas veces no requiere antibióticos

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ENTEROBACTERIAS

E. COLI ENTEROPATÓGENA

Epidemiología:Diarrea infantil en países subdesarrolladosDiarrea en menores de 1 año (20 %)Transmisión oral-fecalSerotipos O: 26, 111, 55, 119, 128

Patogénesis:Colonización del intestino delgado Lesión de fijación/borramiento: pilis BFP, proteína intimina, proteínasde secreción.Modificaciones del citoesqueleto: destrucción de actina de las microvellosidades. Alteración de la absorciónDiarrea acuosa

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ENTEROBACTERIAS

E. COLI ENTEROPATÓGENAInmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración

Tratamiento:Hidratación Oral o ParenteralAntibióticos

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ENTEROBACTERIAS

E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA

Epidemiología:

Diarrea en países desarrollados

Asociado al consumo de carne bovina

E. coli O:157 H:7

Dosis infectante baja: 100 a 200 microorganismos

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ENTEROBACTERIAS

E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA

Patogénesis:Colonización del intestino grueso Pilis AFCLesión de fijación y borramientoProducción de citotoxina tipo Shiga o VerotoxinaLesiones hemorrágicasDiarrea con sangreFijación de citotoxina al glomérulo renal y las plaquetas de la microcirculación.Síndrome Urémico-Hemolítico

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ENTEROBACTERIAS

E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA

Tratamiento:Hidratación Oral o ParenteralSíndrome urémico-hemolítico: hospitalizaciónNo dar antibióticos

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ENTEROBACTERIASE. COLI ENTEROINVASORA

EpidemiologíaDiarrea con moco y sangre en niños menores de 5 añosRelacionada con las ShigellasTransmisión oral-fecalÚnico reservorio el hombreSerotipos O: 28, 29, 112, 143, 164

Patogénesis:Colonización de la mucosa del intestino gruesoProteínas Ipa: capacidad de invadir y producir úlceras en la mucosa colónicaDosis infectante altaDiarrea con moco y sangre (Síndrome disentérico)

Tratamiento: Hidratación

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ENTEROBACTERIAS

E. COLI ENTEROAGREGANTE

Epidemiología:Diarrea con mocoDiarrea crónica + 14 díasTransmisión oral-fecalNiños y lactantes

Patogénesis:Colonización del intestino delgado (pilis adherencia agregativa o AAF)Formación de bio-película mucosaDiarrea con moco

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ENTEROBACTERIASDiagnóstico de E. coli productoras de diarrea

Pruebas de identificación

- Aglutinación en lámina con antisueros (Todas)

- ELISA y sondas de ADN para detección de toxinas (ECET)

- McConkey sorbitol: sorbitol negativa (ECEH)

- Prueba de potencial enteroinvasivo en cultivos celulares

(ECEI).

- Sondas de ADN, patrones de adherencia agregativa en

cultivos celulares (ECEAg)

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ENTEROBACTERIASTratamiento

Quinolonas Trimetropin sulfaAmpicilina

PrevenciónHervir el aguaCocinar los alimentosEliminar insectos como moscas, cucarachasQuimioprofilaxis

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ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias enteropatógenas

Shigella

S. dysenteriae

S. flexneri

S. sonnei

S. boydii

Page 54: enterobacterias-2361

Shigella

Page 55: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

ShigellaEpidemiología:Sólo infecta al hombreDosis infectante de 200 microorganismosNiños de países subdesarrolladosHacinamiento, moscas y cucarachasTransmisión oral-fecalS. dysenteriae es toxigénica (Toxina de Shiga)La especie más frecuente es S. flexneriLa especie más virulenta es S. dysenteriae

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ENTEROBACTERIAS

ShigellaPatogenia:Acido resistenciaInvasión de las células M de las placas de Peyer del colonAntígenos de invasión IpaA, IpaB, IpaC, IpaD (plasmidos)Ondulaciones en la membrana celular – englobamiento de las bacterias - ruptura de la vacuola endocítica – multiplicación en el citoplasmaPolimerización de la actinaInvasión de los enterocitos adyacentesInducción de apoptosis – liberación de IL-1B (atrae PMN)Formación de las úlceras y microabscesosToxina de Shiga: enterotóxica, citotóxica y neurotóxicaSíndrome disentérico: diarrea con moco, sangre y pus

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Shigella

Page 58: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

ShigellaDiagnóstico

Muestra

Frotis

Cultivo: MacConkey: lactosa negativo

Agar SS: Salmonella-shigella agar

Agar XLD: Xilosa-lisina-dexosicolato

Identificación:

TSI: alcalina/ácida, H2S negativo

Serología: aglutinación en lámina con antisueros específicos.

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Crecimiento de Shigella en medio MacConkey

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Crecimiento de Shigella en SSA

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ENTEROBACTERIAS

Shigella

Tratamiento

Antibióticos

Ampicilina, Trimetropin-sulfa, Quinolonas, Cef de 3° g

No usar antiespasmódicos ni antidiarreicos

Prevención

Saneamiento ambiental

Control de insectos

Cocción de los alimentos

Page 62: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

SalmonellaClasificación

S. enterica, subespecie entericaSerotiposS. enteritidisS. typhimuriumS. typhiS. paratyphi AS. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri)S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)

Enterobacterias enteropatógenas

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Salmonella

Page 64: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Salmonella

Epidemiología:Todas los serotipos, excepto S. typhi y S. paratyphi, infectan al hombre y animales como mamíferos, aves y anfibiosDosis infectantes 1000 microorganismosProductos aviarios: huevos crudosSociedades industrializadasMás frecuente en época de calorEl uso de antiácidos aumenta la incidenciaNiños menores de 5 años y mayores de 70 años.Producen diarrea o fiebre entérica

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Salmonella

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ENTEROBACTERIAS

Salmonella enteritidis

Patogénesis de la gastroenteritis:Invade células M del intestino delgado y grueso La adherencia (fimbrias específicas para cada especie) produce ondulaciones en la superficie celularSistema de invasión PAI (invA, invB, spaP, spaQ)Formación de una vacuola endociticaTranscitosisPaso a la submucosaEnglobadas por los macrófagos intestinales – sobreviven a la fagocitocis gracias a la apoptosis de los macrófagosInflamación y ulceración de la mucosa y submucosa intestinalInvasión del torrente linfático y luego circulatorio

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ENTEROBACTERIASSalmonella typhi

Patogénesis de la Fiebre Tifoidea Factor de virulencia Vi (cápsula) inhibe la fagocitosis por los PMNInvade células M del intestino delgadoTranscitosis Fagocitosis por los macrófagos intestinalesMultiplicación dentro del macrófagoInvasión del torrente linfático: Colonización de los órganos del SER (ganglios mesentéricos, bazo, hígado y medula ósea), invade torrente circulatorio y siembra a distanciaLiberación de endotoxinasCircuito enterohepático

Epidemiología :El reservorio es el HombreSe trasmite únicamente Hombre-Hombre, vía oral-fecalPortador crónico en la vesícula biliarManipuladores de alimentosDosis infectante moderada 105 a 106

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ENTEROBACTERIAS

Salmonella

Patologías:

Gastroenteritis

Bacteriemia e infección a distancia

Fiebre tifoidea o paratifoidea

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Fiebre tifoidea

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Fiebre tifoidea

Page 71: enterobacterias-2361

Fiebre tifoidea

Page 72: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Salmonella enteritidis

DiagnósticoMuestra: heces

Frotis y Gram

Cultivo:

Agar MacConkey: lactosa negativo

SSA

Agar XLD

Identificación: TSI: alcalina/ácida y H2S +

Serología

Page 73: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

S. typhiDiagnóstico

- Cultivos:

Primera semana: hemocultivo

Segunda semana: coprocultivo

Tercera semana: urocultivo

Cuarta semana: mielocultivo

- Prueba de Widal

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SALMONELLA SSA

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Salmonella XLD

Page 76: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Salmonella

TratamientoSíndrome diarreico: uso discutido de antibióticos

Fiebre tifoidea: cloranfenicol, cefalosporinas,

quinolonas

Page 77: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIAS

Salmonella

PrevenciónHigiene ambiental

Higiene personal

Cocción de los alimentos

Vacuna de bacterias inactivadas

Vacuna de bacterias vivas atenuadas

Eliminación de los portadores sanos de S. typhi

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ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias enteropatógenas

Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis

Epidemiología:

Las infecciones por Yersinia son zoonóticas.

Alimentos o aguas contaminadas.

Frecuente causa de enterocolitis en países Escandinavos y

Europeos.

Tasa baja de aislamiento.

Page 79: enterobacterias-2361

Yersinia enterocolitica

Page 80: enterobacterias-2361

ENTEROBACTERIASYersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis

Patogenia:Invaden las células M de la placas de PeyerProteína invasina se fija a las integrinasProteínas de la membrana exterior de Yersinia (pmeY): Efectos citotóxicos: alteración de procesos bioquímicos como desfosforilización, cinasa de la serina, alt de funciones sensoras y del citoesqueleto de actinaGenes PAI: sideróforosMultiplicación en las células del SERGanglios mesentéricos Formación de microabscesosDiseminación

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ENTEROBACTERIAS

Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosisPatologías

Linfaadenitis mesentéricaEnterocolitisFiebre intestinalSíndrome poliartríticoIleitis terminal

TratamientoAmpicilina, tetraciclina, cloranfenicolY. enterocolitica resistente a penicilina y cefalosporina (betalactamasas)