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Taller 8ENTEROBACTERIAS
ENTEROBACTERIAS
40 géneros.
150 especies.
20 especies responsables de patología
humana.
Distribuidas en suelo, agua, alimentos.
Flora normal del intestino de humanos y
animales.
TABLE 206–1 The Tribes and Genera of the Family Enterobacteriaceae That Are Associated with Human Disease
Tribe Genera
Escherichieae Escherichia
Shigella
Edwardsielleae Edwardsiella
Salmonelleae Salmonella
Citrobactereae Citrobacter
Klebsielleae Klebsiella
Enterobacter
Hafnia
Serratia
Protease Proteus
Morganella
Providencia
Yersinieae Yersinia
Erwinieae Erwinia
Miscellaneous genera (not yet assigned to a tribe) Buttiauxella
Cedecea
Ewingella
Kluyvera
Tatumella
Rahnella
Various “enteric groups” (not yet assigned to a genus)
TABLE 206–2 Names and Synonyms of Recovered Isolates of Enterobacteriaceae (Excluding Yersinia, Shigella, and Salmonella)
Current Name Synonym
Cedecea davisae Enteric group 15
Cedecea lapagei Cedecea sp. 4
Cedecea neteri
Citrobacter amalonaticus
Citrobacter diversus Citrobacter koseri
Citrobacter freundii Colobactrum freundii
Edwardsiella tarda
Enterobacter aerogenes Aerobacter aerogenes
Enterobacter amnigenus
Enterobacter asburiae Enteric group 17
Enterobacter hormaechi Enteric group 75
Enterobacter sakazakii
Enterobacter taylorae Enteric group 19
Escherichia fergusonii Enteric group 10
Escherichia hermannii
Escherichia vulneris
Ewingella americana
Hafnia alvei
Klebsiella ornithinolytica Klebsiella oxytoca ornithine positive
Klebsiella oxytoca
Klebsiella ozaenae
Klebsiella pneumoniae
Klebsiella rhinoscleromatis
Kluyvera ascorbata
Moellerella wisconsinsis Enteric group 46
Morganella morganii subsp. morganii Proteus morganii
Proteus mirabilis Proteus vulgaris indole negative
Proteus penneri
Proteus vulgaris Proteus inconstans
Providencia alcalifaciens
Providencia rettgeri Proteus rettgeri
Providencia stuartii Proteus inconstans
Serratia liquefaciens Enterobacter liquefaciens
Serratia marcescens Centers for Disease Control and Prevention group E9
Serratia plymuthica
Serratia proteamaculans subsp. quinovora
Serratia rubidaea
Tatumella ptyseos
Trabulsiella guamensis Enteric group 90
Yokenella regensburgei Koserella trabulsii enteric group 45
ENTEROBACTERIAS
MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES Bacilos cortos gram negativos, no esporulados, mótiles
(flagelos perítricos) o no, capsulados o no, pilis.
BIOQUÍMICASAnaerobios facultativos, catalasa positiva, oxidasa negativa, fermentan la glucosa, reducen nitratros a nitritos.
ENTEROBACTERIAS
CULTIVO E IDENTIFICACIÓN
MEDIOS DE CULTIVO
1. Medios no selectivos: agar sangre
2. Medios selectivos-diferenciales: agar McConkey, agar EMB
McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).
Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).
3. Medios altamente selectivos: SS agar, agar XLD, agar Hektoen entérico.
ENTEROBACTERIAS
CULTIVO E IDENTIFICACIÓN
PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN
1. Pruebas bioquímicas
2. Pruebas serológicas
3. Pruebas de biología molecular
ENTEROBACTERIAS
CULTIVO E IDENTIFICACIÓN
PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS
Prueba TSI (triple azúcar hierro)
Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g.
Resultados: Superficie inclinada/fondo: - alcalina/alcalina: BGNF (Pseudomonas).
- ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, etc
- alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.
TSI
TSI
ENTEROBACTERIAS
OTRAS PRUEBAS BIOQUÍMICASProducción de ureasaProducción de indolUtilización del citratoMotilidadDescarboxilación de lisina, arginina, ornitinaProducción de fenilalanina desaminasa
Producción de H2SPrueba VP
ENTEROBACTERIAS
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
Antígeno O: Lipopolisácarido
Antígeno K: Cápsula
Antígeno H: Flagelina
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias Enteropatógenas
Enterobacterias No Enteropatógenas
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
E. coli
Salmonella
Shigella
Yersinia enterocolitica
Yersinia pseudotuberculosis
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenasEscherichia coliKlebsiella pneumoniaeProteus mirabilisProteus vulgarisEnterobacter cloacaeCitrobacter freundiiSerratia marcescensMorganella morganiiProvidencia
ENTEROBACTERIASNO ENTEROPATÓGENAS
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenas
Factores de patogenicidad generales
Endotoxina
Cápsula
Variación antigénica de fase (ag K y ag H)
Sideróforos
Pilis de adherencia o fimbrias
Enterobacterias no enteropatógenas
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenasPatologías
Infección urinariaMeningitisNeumonía Abscesos intraabdominalesAbscesos cerebralesSepticemia
ENTEROBACTERIAS
Factores de patogenicidad específicos
Pilis 1: manosaPilis P: gal-gal (uroepitelio)Pilis de adherencia agregativa (AAF) (uroepitelio e intestinal)Pilis AFC (factor de colonización) (epitelio intestinal)Pilis formadores de poros o haces (BFP) (epitelio intestinal)Polisacárido capsular K1 (Ácido siálico): antifagocíticoHemolisina alfa: formadora de poros
E. coli
ENTEROBACTERIAS
Patologías Infecciones urinariasMeningitis en RNSepticemiaNeumoníaInfección de heridasInfecciones intraabdominales
E. coli
E. coli
E. coli
ENTEROBACTERIAS
Factores de patogenicidad específicos
Pilis: adherencia a epitelios respiratorio y urinarioCápsula antifagocítica
PatologíasK. pneumoniae y K. oxytoca: infecciones urinarias, neumonía y otras infecciones nosocomialesK. rhinocleromatis: rinoescleromaK. ozaenae: ozena
Klebsiella
Klebsiella pneumoniae
Klebsiella pneumoniaeCápsula
Klebsiella pneumoniae
ENTEROBACTERIAS
Factores de patogenicidad específicos
PilisUreasa
PatologíasInfecciones urinarias, bacteremia, neumonía: En pacientes debilitados.
Proteus
Proteus
Proteus
ENTEROBACTERIAS
Factores de patogenicidad específicos
Pilis
PatologíasInfecciones urinarias, septicemia.
Enterobacter
Enterobacter
Enterobacter
ENTEROBACTERIAS
Factores de patogenicidad específicos
PilisS. marcescens: pigmentos rojos
PatologíasInfecciones urinarias, bacteremia, neumonía. En pacientes debilitados.
Serratia
Serratia
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenasDiagnóstico
- Muestras- Frotis- Cultivo e identificación: Cultivo: ASH, MacConkey o agar EMB (Lactosa positiva) Identificación: Prueba TSI: ácida/ácida Otras pruebas bioquímicas: Urea, citrato, indol, motilidad, descarboxilación de lisina, arginina, ornitina, VP.
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenas
Tratamiento
Antibiótico según antibiograma
Resistencia a antibióticos: cromosómica o
plasmidial.
ENTEROBACTERIAS ENTEROPATÓGENAS
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
Escherichia coli
Antígenos O: 150 diferentes
Antígenos K
Antígenos H
Ej: E. coli O111:K76:H7
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
Escherichia coli
Clasificación de las cepas productoras de diarrea
E. coli enterotoxigénica
E. coli enteropatógena
E. coli enterohemorrágica
E. coli enteroinvasiva
E. coli enteroagregante
ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROTOXIGÉNICAEpidemiología:Diarrea infantil en países subdesarrolladosDiarrea del viajeroTransmisión oral-fecalSerotipos O: 6, 8, 25, 78,115, 128Patogénesis:Colonización del intestino delgado (pilis AFC)Enterotoxina LT y enterotoxina ETAumento del AMPc y GMPcSalida de agua y electrolitosDiarrea acuosa
ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROTOXIGÉNICAInmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración
Tratamiento:Hidratación Oral o ParenteralMuchas veces no requiere antibióticos
ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROPATÓGENA
Epidemiología:Diarrea infantil en países subdesarrolladosDiarrea en menores de 1 año (20 %)Transmisión oral-fecalSerotipos O: 26, 111, 55, 119, 128
Patogénesis:Colonización del intestino delgado Lesión de fijación/borramiento: pilis BFP, proteína intimina, proteínasde secreción.Modificaciones del citoesqueleto: destrucción de actina de las microvellosidades. Alteración de la absorciónDiarrea acuosa
ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROPATÓGENAInmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración
Tratamiento:Hidratación Oral o ParenteralAntibióticos
ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA
Epidemiología:
Diarrea en países desarrollados
Asociado al consumo de carne bovina
E. coli O:157 H:7
Dosis infectante baja: 100 a 200 microorganismos
ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA
Patogénesis:Colonización del intestino grueso Pilis AFCLesión de fijación y borramientoProducción de citotoxina tipo Shiga o VerotoxinaLesiones hemorrágicasDiarrea con sangreFijación de citotoxina al glomérulo renal y las plaquetas de la microcirculación.Síndrome Urémico-Hemolítico
ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA
Tratamiento:Hidratación Oral o ParenteralSíndrome urémico-hemolítico: hospitalizaciónNo dar antibióticos
ENTEROBACTERIASE. COLI ENTEROINVASORA
EpidemiologíaDiarrea con moco y sangre en niños menores de 5 añosRelacionada con las ShigellasTransmisión oral-fecalÚnico reservorio el hombreSerotipos O: 28, 29, 112, 143, 164
Patogénesis:Colonización de la mucosa del intestino gruesoProteínas Ipa: capacidad de invadir y producir úlceras en la mucosa colónicaDosis infectante altaDiarrea con moco y sangre (Síndrome disentérico)
Tratamiento: Hidratación
ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROAGREGANTE
Epidemiología:Diarrea con mocoDiarrea crónica + 14 díasTransmisión oral-fecalNiños y lactantes
Patogénesis:Colonización del intestino delgado (pilis adherencia agregativa o AAF)Formación de bio-película mucosaDiarrea con moco
ENTEROBACTERIASDiagnóstico de E. coli productoras de diarrea
Pruebas de identificación
- Aglutinación en lámina con antisueros (Todas)
- ELISA y sondas de ADN para detección de toxinas (ECET)
- McConkey sorbitol: sorbitol negativa (ECEH)
- Prueba de potencial enteroinvasivo en cultivos celulares
(ECEI).
- Sondas de ADN, patrones de adherencia agregativa en
cultivos celulares (ECEAg)
ENTEROBACTERIASTratamiento
Quinolonas Trimetropin sulfaAmpicilina
PrevenciónHervir el aguaCocinar los alimentosEliminar insectos como moscas, cucarachasQuimioprofilaxis
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
Shigella
S. dysenteriae
S. flexneri
S. sonnei
S. boydii
Shigella
ENTEROBACTERIAS
ShigellaEpidemiología:Sólo infecta al hombreDosis infectante de 200 microorganismosNiños de países subdesarrolladosHacinamiento, moscas y cucarachasTransmisión oral-fecalS. dysenteriae es toxigénica (Toxina de Shiga)La especie más frecuente es S. flexneriLa especie más virulenta es S. dysenteriae
ENTEROBACTERIAS
ShigellaPatogenia:Acido resistenciaInvasión de las células M de las placas de Peyer del colonAntígenos de invasión IpaA, IpaB, IpaC, IpaD (plasmidos)Ondulaciones en la membrana celular – englobamiento de las bacterias - ruptura de la vacuola endocítica – multiplicación en el citoplasmaPolimerización de la actinaInvasión de los enterocitos adyacentesInducción de apoptosis – liberación de IL-1B (atrae PMN)Formación de las úlceras y microabscesosToxina de Shiga: enterotóxica, citotóxica y neurotóxicaSíndrome disentérico: diarrea con moco, sangre y pus
Shigella
ENTEROBACTERIAS
ShigellaDiagnóstico
Muestra
Frotis
Cultivo: MacConkey: lactosa negativo
Agar SS: Salmonella-shigella agar
Agar XLD: Xilosa-lisina-dexosicolato
Identificación:
TSI: alcalina/ácida, H2S negativo
Serología: aglutinación en lámina con antisueros específicos.
Crecimiento de Shigella en medio MacConkey
Crecimiento de Shigella en SSA
ENTEROBACTERIAS
Shigella
Tratamiento
Antibióticos
Ampicilina, Trimetropin-sulfa, Quinolonas, Cef de 3° g
No usar antiespasmódicos ni antidiarreicos
Prevención
Saneamiento ambiental
Control de insectos
Cocción de los alimentos
ENTEROBACTERIAS
SalmonellaClasificación
S. enterica, subespecie entericaSerotiposS. enteritidisS. typhimuriumS. typhiS. paratyphi AS. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri)S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)
Enterobacterias enteropatógenas
Salmonella
ENTEROBACTERIAS
Salmonella
Epidemiología:Todas los serotipos, excepto S. typhi y S. paratyphi, infectan al hombre y animales como mamíferos, aves y anfibiosDosis infectantes 1000 microorganismosProductos aviarios: huevos crudosSociedades industrializadasMás frecuente en época de calorEl uso de antiácidos aumenta la incidenciaNiños menores de 5 años y mayores de 70 años.Producen diarrea o fiebre entérica
Salmonella
ENTEROBACTERIAS
Salmonella enteritidis
Patogénesis de la gastroenteritis:Invade células M del intestino delgado y grueso La adherencia (fimbrias específicas para cada especie) produce ondulaciones en la superficie celularSistema de invasión PAI (invA, invB, spaP, spaQ)Formación de una vacuola endociticaTranscitosisPaso a la submucosaEnglobadas por los macrófagos intestinales – sobreviven a la fagocitocis gracias a la apoptosis de los macrófagosInflamación y ulceración de la mucosa y submucosa intestinalInvasión del torrente linfático y luego circulatorio
ENTEROBACTERIASSalmonella typhi
Patogénesis de la Fiebre Tifoidea Factor de virulencia Vi (cápsula) inhibe la fagocitosis por los PMNInvade células M del intestino delgadoTranscitosis Fagocitosis por los macrófagos intestinalesMultiplicación dentro del macrófagoInvasión del torrente linfático: Colonización de los órganos del SER (ganglios mesentéricos, bazo, hígado y medula ósea), invade torrente circulatorio y siembra a distanciaLiberación de endotoxinasCircuito enterohepático
Epidemiología :El reservorio es el HombreSe trasmite únicamente Hombre-Hombre, vía oral-fecalPortador crónico en la vesícula biliarManipuladores de alimentosDosis infectante moderada 105 a 106
ENTEROBACTERIAS
Salmonella
Patologías:
Gastroenteritis
Bacteriemia e infección a distancia
Fiebre tifoidea o paratifoidea
Fiebre tifoidea
Fiebre tifoidea
Fiebre tifoidea
ENTEROBACTERIAS
Salmonella enteritidis
DiagnósticoMuestra: heces
Frotis y Gram
Cultivo:
Agar MacConkey: lactosa negativo
SSA
Agar XLD
Identificación: TSI: alcalina/ácida y H2S +
Serología
ENTEROBACTERIAS
S. typhiDiagnóstico
- Cultivos:
Primera semana: hemocultivo
Segunda semana: coprocultivo
Tercera semana: urocultivo
Cuarta semana: mielocultivo
- Prueba de Widal
SALMONELLA SSA
Salmonella XLD
ENTEROBACTERIAS
Salmonella
TratamientoSíndrome diarreico: uso discutido de antibióticos
Fiebre tifoidea: cloranfenicol, cefalosporinas,
quinolonas
ENTEROBACTERIAS
Salmonella
PrevenciónHigiene ambiental
Higiene personal
Cocción de los alimentos
Vacuna de bacterias inactivadas
Vacuna de bacterias vivas atenuadas
Eliminación de los portadores sanos de S. typhi
ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis
Epidemiología:
Las infecciones por Yersinia son zoonóticas.
Alimentos o aguas contaminadas.
Frecuente causa de enterocolitis en países Escandinavos y
Europeos.
Tasa baja de aislamiento.
Yersinia enterocolitica
ENTEROBACTERIASYersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis
Patogenia:Invaden las células M de la placas de PeyerProteína invasina se fija a las integrinasProteínas de la membrana exterior de Yersinia (pmeY): Efectos citotóxicos: alteración de procesos bioquímicos como desfosforilización, cinasa de la serina, alt de funciones sensoras y del citoesqueleto de actinaGenes PAI: sideróforosMultiplicación en las células del SERGanglios mesentéricos Formación de microabscesosDiseminación
ENTEROBACTERIAS
Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosisPatologías
Linfaadenitis mesentéricaEnterocolitisFiebre intestinalSíndrome poliartríticoIleitis terminal
TratamientoAmpicilina, tetraciclina, cloranfenicolY. enterocolitica resistente a penicilina y cefalosporina (betalactamasas)