Download - רקומביננטי DNA
![Page 1: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/1.jpg)
DNAרקומביננטי
![Page 2: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/2.jpg)
ושיבוט רקומביננטי DNAהכנה
![Page 3: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/3.jpg)
ברירה בסמני שימוש
![Page 4: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/4.jpg)
בפלסמיד הברירה .pBR322סימניהמקנים • גנים שני זה לפלסמיד
סוגי לשני לעמידותו ampicillinאנטיביוטיקה tetracyclin .
באתר DNAה • הוחדר הזר. Sallהחיתוך
לחיידקים • הוחדר הפלסמיד.) טרנפורמציה)
הפלסמיד • את שקיבלו חיידקיםה עמידים DNAללא היו הזר
. האנטיביוטיקה סוגי לשניהפלסמיד • את שקיבלו חיידקים
ה עמידים DNAעם היו הזרנגד ampicillinכנגד ולא
tetracyclin.
![Page 5: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/5.jpg)
המכילה בצלחת הזריעה X-galוסובסטרט ampicillinתוצאות(bromo-chloro-indolyl-galactopyranoside).
מקנה צבע כחול מקנה צבע כחול lacZlacZ פרוק סובסטרט זה ע"י האנזים פרוק סובסטרט זה ע"י האנזים •למושבה.למושבה.
חיידקים עם פלסמיד רקומביננטי
חיידקים ללא פלסמיד רקומביננטי
![Page 6: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/6.jpg)
DNAבקטריופאג'ים משמשים כנשאים של
![Page 7: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/7.jpg)
גלאי בעזרת המושבה probeזיהוי
גידול חיידקים
הרקומביננטיים בצלחת
פטרי.
יצירת הדפס של המושבות
ע"ג נייר
ליזיס של החיידקים ודנטורציה של ה
DNA.
הוספת הגלאי
אינקובציה של הגלאי
ושטיפה.
חשיפה לנייר צילום.
מקום מושבות שפלטו קרינה
הדפס של המושבות
המכילות את הפלסמיד עם הרצף המבוקש
![Page 8: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/8.jpg)
תוצר בעזרת גן זיהוי גם לאחר שמוצאים את החיידקים שקיבלו את הפלסמיד •
הרקומביננטי, יש עוד מקום לבדוק האם הגן מתבטא בחיידק? תהליך זה יכול להיעשות ע"י זיהוי התוצרים.•
תיאור השיטה: יוצרים הדפס של המושבות •
ע"ג נייר ניטורצולוז. החלבונים נספחים לנייר.
מדגירים את הנייר עם נוגדן •כנגד החלבון.
שטיפה.• מדגירים עם נוגדן שניוני •
מסומן רדיואקטיבית. שטיפה.• בדיקה באוטורדיוגרפיה.•
![Page 9: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/9.jpg)
רנטורציה – דנטורציה של תהליךDNAשל
![Page 10: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/10.jpg)
בגלאי לזיהוי ProbeשימושDNA
Radioactiveprobe (DNA)
Mix with single-stranded DNA fromvarious bacterial(or phage) clones
Base pairingindicates thegene of interest
Single-strandedDNA
![Page 11: רקומביננטי DNA](https://reader035.vdocuments.us/reader035/viewer/2022081418/56812f48550346895d94d789/html5/thumbnails/11.jpg)
של הכלאהגרעין חומצות