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HORAS A LA SEMANA: 20
TITULO DEL TRABAJO: /f67lLEAUON Y EVALUACION DE DIICERENTE8 FRACCIONES DE LA SEMILLA DE A#W"TO
PARA EL CULTlVO DE NONOOS COMO FUENI% DE NITROO~ISO Y CARBONO
// NOMBRE DEL ASESOR: DR. JORGE SORIANO SANTOS
PROFESOR TITULAR A. TIEMPO COMPLETO,
M. en C. MA. DE LOS ANGELES AQUWUATL R. PROFESOR ASOCIADO D. TIEMPO COMPLETO.
LUGAR DE REALIZACION: DEPARTAMENTO DE 8lOTECNOLOGIA UAM - IZTAPUA
FECHA DE INICIO: 3 DE NOVIEMBRE DE 1992
FECHA DE TERMINACION: 8 DE MAYO DE 1992 Y
l
. - . CLAVE:
153932
INDICE GENERAL.
I. INTRODUCCION
l. Productos comerciales de las diferentes fracciones de la semilla de
amaranto 1
2. Composición qulmica y nutritiva de la semilla de Amarauto 4
3. DesMipci6n, morfologfa, fisiologfa e identlficacibn de los hongos 5
4. Composicidn de medios de cultivo para hongos 9
5. Necesidades nutricionales 11
I I . OSJETiVO GENE.RAL
I l l . OBJETIVOS ESPEClFlCOS
IV. METODOLOGIA
13
13
l. Primera Etapa. AnSlisis qufmico proximal de las fracciones de amaranto 14
2. Segunda Etapa. Siembra y cultivo de diferentes especies de hongos so-
bre los medios 1 base de Amaranto y convencionales 17
V. ACTIVIDADES REALIZADAS
Vi. RESULTADOS
l . Tablas de resultados
2. Fotogralias
22
Vli. DISCUSION DE RESULTADOS
VIII. ESTUDIO DE MERCADO DEL MEDIO DE CULTIVO A BASE
DE SEMILLA DE AMARANTO
1.i Entorno Social
1.2 Entorno Polltico
1.3 Entorno Econ6mico
1.4 Entorno Ambiental
1.5 Entorno Juridic0
2. PRODUCTO
2.1 Caracterfsticas y Aplicaciones
2.2 Subproductos
2.3 Normatividad
2.4 Uso y dasificaa6n
2.5 Marca y Patente
2.6 Descripción del envase
2.7 Descripci6n de la etiqueta
3 Anhllsis de la demanda . '
3.1 ldentificacidn del mercado potencial
3.2 Estratificación del mercado
3.3 Mercado meta
35
4c1
40
40
41
41
4 2
42
43
4 3
43
44
45
4 G
4c
da
51
51
51
. 3.4 DiseAo do encuestas
3.5 Ravisidn estadlstica de la poblacibn potenaalmente consumidora 54
3.5.1 Sector Salud 54
3.5.2 Institutos de Investigaci6n ' 58
3.5.3 Industria Alimentaria 50
3.6 TamaAo de muestra 60
3.7 CaracterlstiEas 88 los consumidores 63
3.7.1 Comportamiento de Compra 63
3.7.2 Rarbn da Compra
3.7.3 Cantidad de Compra
3.7.4 Frecuencia de Compra
. I
65
65
GB
"
4 Planteamiento del escanarlo pan la camemlallzacl6n del rnedlo de
cuttlvo 6B
4.1 Econdmico 69
4.2 Social 69
4.3 Politico 70
6 Demanda del produeto
5.1 Demanda Actual . I
5.2 Demanda Potencial
5.3 Determinacich de la tasa de consumo
5.4 Proyecci6n de la demanda
71
71
72
72
73
76 5.5 Tipo de demanda
6 Oferta
6.1 ldentificacidn de los competidores
6.2 Rdgirnen del mercado
6.3 Capacidad hstaleda
6.4 Altearnebhres reale8 para desplazar 8 la compelerlcla
6.5 Proyecci6n de la oferta
6.6 Balance O&rt& Demanda
IX. CONCLUSIONES GENERALES
X. ANEXOS
Xi. 6lBLIOGRAFlA
INDICE DE ANEXOS.
l. Pressntacidn de la etiqueta que llevar4 el producto
2. Hoja membretada representativa de la empresa
77
77
79
so 81
52
83
84
88
95
Pag . 8.7
86 . I
3. Cuestionario X l. Dirigido a los sectores que constituyen la población potencial-
mente consumidora 89
4. Cuestionario At 2. Dirigido a los principales proveedores de rrledios de cultivo
cn el D.F G2
I. INTRODUCCION
l. PRODUCTOS COMERCIALES DE LAS DIFERENTES FRACCIONES DE LA SEMILLA DE AMARANTO.
El amaranto se reconoce como uno de los alimentos de mayor potencialidad hoy
en dla, debido al exce l~n t~8 lor nubicional de 6u proteha, las propiedades únicas de su
slmid6n y otros atributos adicionales.
Actualmente el Amaranto se cWva en los pedos de Morelos, Tlaxcala, Puebla
y en Santiago Tulyehualco ubicado en le dslagacfdn de Xochimilco, esta Clltitlio se
encarga de producir el Amaranto que se consume en el Distrito Federal, en general se
han encontrado rendimientos de 1 O 0 a 2500 Kg / ha, en todo al pals. .. -
Por lo general el Amaranto se consume en gran parte en forma de "alegrla", y
en menor proporcidn en productos como pastas, harinas, cereales, galletas, tortillas, hot
cake, atole, pastel y en forma de cereal. Hey que mencionar que la producci6n de todqs
estes presentaciones son a nivel microindustria ( Tehutli), o cooperativas conformadas por-
mZixitno 6 familias (Amantul). J
. .
Existen ahora varias microernpresas de tipo artesanal que elaboran productss
ancestrales comunes en M616c0, Guatamala, Petú y la India, principalmente, a base de la
semilla expandide y de la harina integral. Estas rnicroempresas producen ccrcitl d.:!
amaranto, " alegrfa,", harina integral, galletas y diversos tipos de pan y pastas. (SAnchni,
1991 )
1
A continuacidn se describen algunos productos elaborados a base de las difercr1tr;lC;
fracciones de la semilla de amaranto.
Exlstan concentrrdor de protelna da amaranto obtmldo rrlodlarrte 8Cpm w:i61\
fracciona1 neumhtica de la harina integral. Estos concenbados se etrrpleatl ell I3
elaboraah de productos *les como bebidas proteinadas y alimentos infantiles. Ln .
extraordinaria calidad nubicional de estos concentrados, ha dado. origen a un produclo
nuevo que hace mds costeable 8u aprovechamiento industrial, por los 8kOS precios q r r ?
tionen actualmente diversos productos similares .de, importadh. Es adernas un w C ' J ! >
concentrado de proteína de alta calidad que viene 8 complementar la lista de productos
comerciales modernos para mejorar la dieta humana, auxiliando las carencias de soya y
leche - en polvo que sufren algunos paises. ( SBnchez, 1091 )
Otros productos son utilizados como aditivos pera mejorar las propiedades
alimenticias de varios productos de panilicacidn y reposterra, tortillas de malz y de trigo,
pastas y en confiterle. Este' tipo de productos son un concentrado amiloproteico dcl
amaranto que modifica notablemente~bl perfil de amino4ddos de los productos a los
cuales se adiciona, adem4s de aproximar los factores nublcionales estbndares a los
valores ideales recomendados por la FAO.
Estos productos se han incorporado 8 las formulaciones para la elaboraci6n de
galletas, bollos, bolillo, pohrordn, colchbn, mantecada, pastas, donas, y otros con
resultados muy satisfactorios. (SBnchez, 1091)
2
Existen otras productos que se basan en una mezds especial elaborada cot]
concentrado amiloproteico de amaranto y hojuelas de avena integral que equivalen 'a un
excelente complemento alimenticio. Es. ademds, un magnifico agente para enriquecer
licuados, etola8, rguar kerrerrs, wpm, hojuela8 de ceroeles y otros allmentos .
Estos produds recomiendan para personas altirgicas a estos y a aquellas
que deseen prevenir enfermedades cardiacas o diabetes.
Hey otros productos que han sido elaborados para usarse en forma de chocolate
dtamente nutritivo. Le celided excepcional de la protelna de amaranto es aprovechada
en la forrnulad6n para dar como resuttado un alimento con muy buen valor alimenticio
de estos productos.
Otro tipo de productos son disefiados especialmente para mejorar la dieta .de
personas que desarrollen actividades intensas Celes como: niAos en edad escolar, atletas
diversos, mujeres embaraurdas, deportistas, profesionistas que requieran un aporte
nutritivo adicional, y en general, paia todas aquellas personas cuya dieta normal sea
pobre en proteínas, vitaminas y aminoticidos esenciales y para quienes padecen estados
de angusba o estres o esCBn en la tercera edad. ( SBnchez, 1991 )
Leche de amaranto. Sa obtiene de la harina de granos seleccionados de
amaranto, tiene los mismos usos que las leches de vaca, c'abra en la ali~rnentacir)rr
infantil y de aduttos, y en la obtencidn de productos lttcteos como queso, yoghurt, helador,
3
y sustitutos de crema pera mM. Esta leche puede emplearse en la elaboracidn de atolcs
de malz. (SBnchez, W9l)
2. COMPOSICION QUlMlCA Y NUTRITIVA DE LA SEMILLA DE AMARANTO.
La composiadn de la semilla de amaranto varia principalmente a causa de las
practicas agronbmicas. La meyorla de los hvestigadores (Becker, et al, 1081: SAncl~ez-
Mamquln, 1983; NRC, 1084; Teutbnico y Knorr, 1885 ) han reportado la siguiento
composicibn.
Proteína 12 - 18 %
Lipidos 6 - 7.5 %
Almiddn 82 - 69 %
Azúcares totales 2 - 3 %
Cenizas 3 - 3.5 %
Fibra 4 - 7.2 %
Vitaminas 1 4 . 5 %
Siendo el almid6n al carbohidrato mas abundante de la .semilla de atnaranto
constituido principalmenta por arnilopectina, con solo un 5 6 7 940 de emilosa.
Los Bcidos grasos del amaranto estan costituidos en un 76 % por los &idos
oleic0 ( C18 : 1 ), linoleico ( C18 : 2 ), y palmitico ( C16:O ); 20 % de Bcido este&rico (
C18 : O ) con trazas de iinoldinico ( C18:3 ) y 4 % de escusleno; contiene adstllh
cantidades traza de esteroles y 6steres de esterol. ( Soriano, 19.57 )
4
El contenido mineral de amaranto generalmente es mas alto, que el de Ius
cereales de consumo tradicional, con prevalecencia de fbsforo, magnesio, potasio, calcio
y hierro.
La semilla de amaranto ea rica en vltamina C, nlacinrr y vitaminas E1 y 82 adotililfi
de B-caroteno.
. ;I 9
El amaranto contiene factores antinutricionales, corno inhibidores de tripsirla,
polifenoles y saponinas ( actividad hemollbica ) que aunque su concentraciGn BF;
relativamente baja y similar 8 las presentes en leguminosas, si no son eliminadas arks
del consumo, el valor nutritivo disminuye considerablemente. ( Soriano, 1887 )
La semilla de amaranto contiene un nivel promedio mas alto de proteina que la
mayoria de los granos de uso convencional. Su contenido de lisina ( 5.5 - 6.21 % ), es
casi tres vecds mayor que el del mak, y casi al doble del qua contiene el trigo, de hecho
el contenido de aminodddo en ai amaranto es similar al de la leche. ( Soriano, 1907 ).
3. DESCRIPCION, . MORFOLOGIA, FlSlOLOGlA ,. E IDENTIFICACION DE LOS HONGOS.
a Los hongos, son organismos eucariotes que crecen como celutas individuales en
el caw de levaduras a como filamentos conocidos como hifas. Son heterbtrofos,
absorben sus nutnmentos a travds de su pared celular y secretan una gran variedad de
enzimas extracelulares pera degradar sustancias complejas que pueden asl metabolizar.
(Aquiahuatl, 1992) . ?
5
Existen dos formas generales del crecimiento de los hongos : los mohos y las
levaduras. Los hongos se clasifican en cuatro grupos diferentes: Phycomycetes,
Basicliornycetes, Ascomycetes y Deuteromycetes (tambien denominadas hongos
inrpertactos o fungi Imparbd).
La clasificecidn se bash e& divemas CaraCferlGficas, siendo le mas importante el tipo de
reproduccibn asexual como sexual. Los hongos son microorganistnos
quirnioorgenotr6ficos. Se reproducen de manera natural por medio de esporas. ( Pelczar,
1984). . .
a .
CRITERIOS DE IDENTIFICACION.
. -
La idenlificacidn de hongos se realiza prinupalnmte por la determinacidn de
caracteres microscdpicos del cultivo y morfolbgicos de las coIoni86, raramente se
determinan sus propiedades bioqulmicas, por lo que generalmente se preparan cultivos
en medios estsndar incubadas en condiciones que favorezcan tanto su crecirnierlto cotno
la axpresidn correcta de sus características morfoldgicas tlpicas sobre todo en las estruc-
turas de reproduccibn. ( Aquiahuatl, 1992 )
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS.
La determinacidn de estas caracterlsticas se lleva a cabo en cultivos frescos
obtenidos en cajas Petri con medios de cultivo de uso común para este objetivo, tales
como Ager extracto de matta, Agar de papa y dextrosa y Czapeh-Dox entre otros. ,Se
considera que entre las caracterlsticas m& importantes que pueden determinarse para
lograr la identificacidn adecuada de estos microorgenismos son:
- twctura del talo ( aterdopeledo, lenow, polvoso, etc. )
- color del talo ( pigmenbd6n del micelio y conidios )
- color al revem cfeAasbolonias y presencia de pigmentos difusibles.
- olor
- presencia de exudado8 en la superficie de las colonias
- velocidad de crecimienb
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
-
La observacidn de estas caracterlsticas se Ueva a cabo en preparaciones en
poftaobjetos, obtenidas directamente. de muestras de mlcelio de las colonias con
liquidos de montaje como lacbfenol o solucidn de KOH.
Tambien se pueden hacer preparaciones con colorantes especiales corno azul do
algoddn que fadlitan la localkaadn y reconocimiento de estructtras. Las principales
caracterlsticas que se deben determinar en le identificacidn de hongos $on: - Camcterizaa6n del micelio, para e6to 88 examina la presencia o ausencia de
divisiones o septos, color, omamentaadn de paredes, tarnafio y modo de ramificaci6n.
- Locelizacidn de estructuras diferenciadas tales como : cigosporas, opetecios,
cleistotecios, peritecios, esporocistos, achulos, picnidios, esporodoquios, corernios,
conidos y esclerocios entre otros.
7
- Caractsritacibn 'de esbu&s diferendadas en cuanto a la forma, color,
dimensiones, textura de las paredes y omamentaci6n.
- Estudio biom6trico, en particular de valores extremos y medios de rnicelio y
estructuras diferenciadas.
Una vez que w recopilan todos l o s datos, se comparan con la literatura . especialired8 para IC%&& la identificaden y de s e r posible 88 comparan con
miaoorganisrnos de ,referencia provenientes da colecciones internacionales. (
Aquiehuatl, 1992 )
. .
Cos hongos pueden soportar un ambiente desfavorable, mejor que la mayorla do
los otros microorganismos. Los .hongos filamentos08 y las levaduras pueden crecer en IJII
sustrato " o medio con concentraciones de azúcares, que inhiben a la mayorla de las
bacterias, así como toleran condiciones m& Budas que la nrayarla de los
microorganismos restantes.
Las levaduras son facultativas, e8 decir pueden crecer tanto en condiciones
aert5bicas como anaarbbicas, no as1 los hongos filamentosos que son estrictamente
aerbbios. El rango de temperatura para su crecimiento es muy amplio, siendo el Qptirno
de 22 a 30 'C y pare las espeaes patbgenas entre 30 y 37 'C . Al~unos hongos pueden
crecer a temperaturas apmJtimadas a O "C. ( Palczar, 1984 )
Desde la antigUedad, el hombre ha obtenido grandes beneficios mediante la
utiIizaci6n de estos microorganismos,.sobre todo en el Oriente donde la produccidn de
alimentos fermentados 88 una pr4ctice ancestral. ( Aquiahuatf, 1882 )
8
I
Tambidn son importantes en las fermentaciones industriales, vgr. la cerveza, del vino y la produddn de antibibticos tales como la penicilina
febricacidn do Is
' .
4. COMPOSICION DE MEDIOS DE CULTIVO PARA HONGOS.
Los mediodde h v o son mezdas de sustandas nutritivas, formulados para
favorecer el crecimiento, que permiten la propagaddn o identificacidn de los
microorganisrnos. Ye que l e s nacesidedes nutricionales de 106 microorganismos puederl
sor. elementales, energ4bicas o específicac. Ademe8 de los nutrienhs, los medias de
cuttivo deben reunir condidones fisico-qulmicas específicas de actividad de agua (aw),
pH y potencial de bxido-rsduccibn (Eh) (Pelczar, 1984).
_"
La concentraci6n de enScar en medios de laborebrio debe ser de un 4 8 5 %. El rango de pH promedio es de 2 a 8 y el pH dptirno de 5.6 ( Pelczar, 1 @ 8 4 ).
Hay ires tipos de medios de cuftivos para mohos.
1 .- Medios naturales: Constibuidos por pedazos o hfusiones de fruta, vegeteles, gano&
da cereales o tejidos animales. Eaos medios varian mucho en su compocsicir5n qulmica y
no son fdúlmente reproducibles. Tampoco son de amplio uso.
2.- Medios Artificiales: Medios de cultivo preparados con peptonas, extractos de planta,
sgar y otros compuestos de composicidn desconocida o variable.
3.- Medios de cultivo sintdticos : Medios de cultivo de composici6n química definida.
. I
Muchas #mules de los medios de cultivo para los mohos y leV8dUraS conlienerl
peptona, algún carbohidrato y agar; en cambio, los medios para los hongos patdgcnos
necesitan ser enriquecidos con otras sustancias.
8
Uno de los medios. de cultivo m48 conocido y antiguo pare cuJtjvar hongos lo
p r a W Sabouraud, y contiene rnatbosa y peptone como ingredientes prinapaies, pero rU6
modificado, y ahora se usa uno que solo contiene glucosa. ( Pelczsr, 1990 ) *
* I
Su fdnnula aproximada en gramos es la siguiente. 3 g
Mezcla de peptonas 10
Dextrosa 40
Agar 15
pH final 6.5 f 0.2
"
Puede emplearse para el aislamiento, identificecidn y conservaadn de hongos
pat6ganos y saprbfitos. Su accidn selective parcial se debe 8 su a b concentrad6n de
azúcar y bajo pH.
Otros medios muy empleados en cultivos e identificacidn de hongos y levaduras
es el PDA ( Agar de Dextrosa y papa ). Recomendado por la Asosiiaci6n Americana de
Salud Públic8.
Fdnnule aproximada en gramos por litro:
' lnfusidn de papa 200.0
Dextrosa 20 .o Agar 15.0
pH final 5.6 f 0.2
Se us8 ampliamente en la identificacidn de hongos y levaduras de acuerdo con su
morfologle celular o en mdtodos de microcultivo en portaobjetos.
Este medio 80 utillra mucho para rrlslar mohos y clertes levaduras; aderrl66, es
muy útil pare el crecimiento de hongos pattlgenos a partir de llquidos del cuerpo y
exudados. Su accidn bjeledtfva parcial se debe 8 8u alta concentraadn de azúcar y bajo
5. NECESIDADES NUTRICIONALES.
No pueden utilizar compuestos de carbono inorgdnicos, tales como el CO,; el
carbono debe proceder de una fuente orgdnica. Las Mentes de carbono son de gar )
importancia pera los hongos desde que ellos proveen 6us necesidades de carbono para la
biosintasis de varios constituyentes celuleree, t a l e s como, carbohidratos, protefnas,
Ilpidos, dddos nuclaicos, ab. y su oxidedih proporciona energla para las cl5lulas.
Muchos y vanos compuestos pueden ser utilizados como fuente y energfa para hongos,
le glucosa representa lo m48 HUI y lo m6s extensivamente usado como fuente de
carbono ueguido estrechamente por la fructose, man- y despues galactosa. ( Berry,
1988 ). Algunes especies pueden utilizar compuestos de nitrbgeno inorganico, tales corno sales
de emonio. Todos l o s hongos pueden ubilizar el nitrbgeno org4nico.
CONTENIDO DE CARBONO Y NITROGEN0 : Compuestos orgiinicos tales como pro - tofnas y aminoscidos pueden ser& como' fuentes de carbono y nitrdgano.
, 11
. .
Les proteeasas rompen las protelnas dentro de su constihrci6n de amino4cidos los cuales
pueden ser tomados por el hongo. ( Berry, 1888 )
Se piensa que la semille de amaranto es otra posible fuente de nitrbgeno y
carbono, y en este trrllbap se propondran 8 las diferentes fracdones de esta semilla I
- para ser utilizadas en la elaboraci6n de medios de GUMVO de hongos y levaduras.
' 12
II. OBJETIVO GENERAL.
Conocer el efecto de la utilizacidn de harina contpleta, concentrado amilaceo y concentrado proteínico de la semilla de
I .amaranto como 2 fwnte 5 , viable de Nitrdgeno y Carbono en la fomulaclOn 'de medios .de cultivo para hongos con características similares o mejoradas con respecto a los medios PDA (papa dextrosa agar) y EMA (extracto de malta agar).
111. OBJETIVOS ESPECIFICOS.
* Utilizacith y evaluacidn de diferentes fracciones de aroarar'W como fuente de Nilrdgeno y Carbono para el cultivo de Aspergillus n@er y Penici\liium mquefo~tii.
,* Disefiar medios de cultivo de características similares u mejoradas respecto a los medios convencionales a base de las diferentes fracciones de amaranto.
. 3
* Evaluaci6n de la aceptabilidad de medios de cultivo a base de Amaranto para hongos a partir de la realizaci6n de un estudio d~ mercado preliminar.
13
IV. METODOLOGIA.
De la semilla de A. hypochondriacus (SA) M) o b h o un concentrado amilaceo (CA) y'un
concentrado protelnicd (&) por al dstema de dadficaddn neumatica SAncher * -
Marroquln (1985) y se determind el an4lids qulmico proximal de l o s tres materiales por
los metodos ofidales de la A0A.C. (1 975).
t
DETERMlNAClON DE HUMEDAD.
1) Poner a peso constante cajas petri en un homo a 70-130 OC.
2) Pesar aproximadamente 3 g de muestra y colocarlos en las cajas petri y secar en
un horno a 100 O C , hasta que se tenga peso constante.
3) Calcule el contenido de humedad por diferenda en el peso de la muestra y se reporta
en %.
DETEMNACION DE C E N W .
I) En un c r i s o l de porcelana previamente puesto a peso constante colocar de 3-5 g de
muestra.
2) Carbonizar la muestra en una campana de extracdbn, bajo la flama de un mechero,
hasta que no haya desprendimientos de humos.
3) Calcine en una mufla a 500 OC hasta que las cenizas sean blancas o ligeramente
grises y, la di fe~mi8 en dos pesadas sucesivas no se8 mayor de 1-5 mg.
4) Calcule la cantidad de cenizas en 1 O 0 g de muestra.
. t
. .
OETERMlNAClON DE PROTEINAS.
1) DIGESTION. ',
-Colocar en un matra2 Kjddahl de 800 ml, 0.51 .O g de muestra seca.
dnadr 6 g de mezcla digestora de mlenio, 25 ml de Addo sulfúrico concentrado y
piedras de ebullid6n.
-En una campana da&ra , colocar el matraz en una pamlla de calentamiento y digerir
hasta que el líquido en el matraz este transparente. Dejar 30 min m8s.
2) DESTILACION. . . c
-Colocar el tubo terminal del refrigerante del aparato destilador dentro de un'
matraz erlenmeyer con 50 ml del Bddo receptor. ( hado dorhldrico 0.1 N con 2-3 gotas
de indicador de rojo de metilo; dado b6rico al 2 % con 2-3 gotas de indicador de rojo de
rnetilo-azul de metileno).
SVladir 300 ml de agua destilada fría al matraz con la muestra digerida.
,- -Ana& con cuidado, 60 ml de hidr6)rido de sodio al 50 % lentamente a que se
farmen dos estratos.
-Destilar aproximadamente (so ml.
3) TITULACION.
-Titular el liquido destilado con hidrbxido de sodio 0.1 N, el punto final de la titulacibn
se ten68 cuando al adidonar una gota da NaOH la soludbn pase de rosa a amarillo.
- E l Calculo de la cantidad de proteinta se realiza multiplicando la cantidad de Nitrbgeno
por un factor que varia con el tipo de muestra. (5.85 para Amaranto y derivados).
15
DETERRllNACJON DE AZUCARES REDUCTORES.
Mdbdo de Bemfald.con DNS.
1) Preparar una solucidn acuosa de la muestra, disolviendo 1 g de muestra en 50-100 ml
da agua.
I
2) Eliminar el material b b l e por f ihddn en pepel.
3) En tubos de ensaye perfectamente etiquetados colocar 1 ml de soluci6n ~ C U O S R de la
muestra. agregar 1 rnl del reactivo de coloradh. U reactivo de coloracidn 68 prepara
disolviendo 1 g de &c. 3,3-din~sal ic lco en 50 ml de agua a los que se les ha
adiao,nado 20 ml de solucidn de hidroldo de sodio 2 N. despues de que todo el
material se ha disuetto, se adicionan 30 g de tartrato doble de sodio y potado y una voz
disuettos, 68 adicionan 30 g de tartrato doble de sodio y potado y una vez disueltos, toda
la mezcla 68 Heva a 100 ml con agua desionizade. E& solud6n debe ser almacenada
en h s c o arnbar protegida del COZ.
4) Desarrolle el color 'colocando en los tubos en un ban0 de agua en ebullicidn durarlte
exactamente 5 min.
5) Enfrfe en un bafio de agua fria y adidone 10 rnl de agua destilada.
6) Determine la absorbancia del color rojo obtenido en un colorlmetro 8 540 nm contra un
blanco preparado con 1 ml de agua destilada tratada de la misma manera con el
reactivo da coloraci6n.
. \
16
7) La cantidad de azúcares reductores se calcula 8 partfr de una cwva petrdn preparada
con gh~cose en concentraciones da 0.1 a 1 .O mg/ml tratadas de la misma manera. .
2. SEGUNDA ETAPA.
OENERAUDADE8 DE LOS MICROOROANISMW UTIULADOZ) EN EL PRESENTE
ESTUDIO.
"
Los aspergilos, miembros de la familia de le dese tentativa Deuteromycetes, asMn
ampliamenbe distribuidos en la naturaleza: Frutas, vegetales u otros sustratos que les
sirven de alimento. Algunas espedes se hallan involucradss en el deterioro de alimentos.
Los erpergilos producen micelio tabicado, ramificado, en la parte vegetativa
introducida en el nubiente. Las esporas bienen colores caracterfsticos dependiendo da la
especie, siendo m6s comQn negro, cafe y verde, los aspergilos se desarrollan en
concenfmaones elevadas de azúcar y sales. (Pelczar, 1984). * I
Estos hongos tienen importancia econbmica, ya que se les usa en muchas
i n m a s de le fementacidn que incluyen la produca6n de Bcido cítrico y el gluc6nico,
que 8on elaborados en abundancia por A. n l ~ s r , especie tlpica que 88 utiliz6 para la
evaluacidn de los medios de cultivo.
Hongos verdi-azules, el micelio w desanolla sobre o penetra en el sustrato. Las
’ hifaas son libremente ramificadas, de pered gruesa, con dos o m b núdeos. Penicillurn se
reproduce asexuelrnente: es importante econdmicamente en las fermentaciones,
produoci6n de enbibibticos, manufacture de quesos, descomposici6n de alimentos y otros
procesos útiles o perjudiciales. (Pelczar, 1084).
Una espeae importante es P. roqudbrW el cual es muy utilizado en el curado
de k m quesos Roquefort, Arul y Camembert.
De igual furma, esta especie tu6 utilizada en este estudio preliminsr.para evaluar su
crecimiento y las características de los medios de cuttivo.
CONSERVACiON DE CEPAS
Las temperaturas inferiores a la dptima par8 el desarrollo de A. niuer y P. rwuelbrtii hace caer su fndice rnetabblico y si la temperatura es bastante baja, el
desarrollo y el metabolismo ceban. . 1
18
. . I .. : . .
Por . . lo que, las bajes tempenhwcu, meron Qtiles pare preserver 108 cultivos, debido a que
los microorgarrismos tienen le capacidad únice de sobrevivir al filo muy intenso.
Las capas de los dos microorgsnismos 60 culbjvaron en agar y túeron bltivades a
,. la Campsre!um dot reCHgendor que es de 4 a 7 O C. Da esta forma dlsponfemos en
cualquier momento de les cepas p m s pera le fpparecibn de l o s indculos que 60
sembraben sobre los ded& de cultivo a base de Amaranto.
Corno en todo procedimiento el enlriamiento inicial mata a cierta parte de la
pobiea6n, pero finalmenta los microorganismo8 sobrevivientes permanecen viables
dwenta varios periodos.
FORMULACION Y PREPARACION DE MEDIUS DE CULTIVO DE AMARANTO.
Los medios da cultiuo se prepareron con ConC8~adU Protelnico (CP), Concentrado
Amiltlceo (CA) y Semilla Cruda de Amaranto (SA). La semilla cruda fue sometida a una
limpieza y molienda, para posteriormente llevarse acebo una clssificscidn neurndtica para
obtener esl l o s concentrados.
De t a l forma que tanto le harina complete como los concentrados ( CP y CA ) de la
semilla da amaranto fueron utilized08 como fuente de Ntbdgeno y Carbono en fa
fonnulaadn de los medios de C U M O para hongos. Es un hecho que la formulacidn de
estos medos de culttvo fud elaboreda badndonos en la formulscidn en gramos de los
medios estBndares ( PDA y Extracto de Malta Agar ambos de BIOXON ) para así
garantizer le obtencidn de un medio de iguel o mayor calidad.
19
Pera teel efecto se dimilaron l o s medios de cultivo de Amaranto con diferentes
relaciones C I N, que 88 ajustaron con dexbosa o peptona de caselna según fuera
necesario. En la tabla 3 se presenta la formuladdn de ios medios de cultivo para hongos
elaborados con diferenta8 fredonae de la Semille de Ameranto.
Tanto los medid d@ cultivo de amaranto preparados de esta maner8,como los
estanderes se vaciaron en ajes pair¡ y en tubos Ryan.
.. INOCULACION E INCUBACION DE A. nkor .. Y p. r o c ~ u d b ~ SOBRE LOS
MEDIOS ELABORADOS A BASE DE AMARANTO Y CONVENCIONALE8.
. . Se prepararon tubos de Ryan (1043) conteniendo 25 ml de cada uno de los medias y
se solidificaron en forma indiada. Haciendo uso de una asa bacteriolbgica esteril, se
tom6 una rnueslrn de esporas de le wpeflde del cultivo puro de cada uno de los hongos
. . ., y 88 hoculd en la entreda del tubo por picadura. Posteriormente 68 incubaron a 28 O C de
48 8 72 horas.
Primeramente psra llevar a cabo la hocufadbn de las cajas; s8 tom6 una porcidn de
esporas de cada cepa pura y se .inoculb en un tubo con soluadn salina, de dicha
suspancidn se tom6 un volumen de 0.2 ml y se sembrd por difusidn en placa.
Se utilizd una varilla da c r i s t a l esteril para esparcir la muestra sobre la placa, ya que
asta operaddn hace posible adelgazar la muestra de t a l manera que en la superficie del
agar queden las colonias separadas unas de otras, estas cajas fueron incubadas a 28 "C
de 48 8 72 horas.
20
A cama d e l excesivo nomero de colonias que lograban su deserrollo en el medio de
cultivo em imposible determinar el dametro bien definido de une sola colonia, por lo que
la hculacibn de las placas se modificb. Debido a lo anterior fu6 necesario hacer
diluciones en rnds da . u n tubo pera obtener colonies bien aidadas. As1 l a s cajas se
Inocularon por trlpllcsdo con 0.2 ml de la 8~~1mdbn de le última dkrddn de las espora8
de flspemurrUa niuer y Penidl/ium mueMiL bs suspensiones contenlan de 3.8 30
' .( espOtI3s / 0.2 mi, 188 @ & h ' S O h#s;;rrOn a 28 o C de 48 8 72 h o w y 8Si h6 posible el
desarrollo de colonias completamente aidadas en el medio.
EVALUACION DE PARAMETROS.
En este estudio se .evaluaron el didmetro de les colonias, le morfologia, color,
indice .- da esponrlaci6n, velocidad de crecimiento apical y la producadn de pigmentos y
exudado$ de ambos hongos.
En los tubos Ryan se evelu6 en particular le velocidad de crecimiento apical, midiendo la
distanda reconida por el cuMo cada 24 horas por 3 dies y l o s resultados se expresaron
an rnrn / h. De las cajas se evalub el didmetro de las colonias aidadas, cada 24 hora6
hadendo uso de un vernier y reportando los resultados en rnm / h.
El fndice de espondaci6n (núm. de esporas / g de &ato carbonado) de A. n i m r Y P.
rocruetÚ@ se determind en matraces Erlenmeyer de 250 ml conteniendo 20 m1 da cada
uno da los medios descritos anteriormente, que se inocularon en masa con 3x10'
esporas / g de wtrato carbonedo, incubendose durante 5 dfas 8 28 O C, se evaluó el
número de esporas / matraz en una suspenci6n con soluci6n de Tween 80 (O. 1 YO)
utilizando camam de Neubeuer.
21
, ...
, . . . . . . .
. .
, .
Por .útlimo le morfiologfa, el color y la producddn de pigmentos y exudados fueron
unicamente eveluados visualmente.
V. ACTIVIDADES REALIZADAS
- Búsqueda bibiiomfica,
- Realizacih del reporta iniaal del servicio soaal; '
. . . .
- A n S l i qulmico proximal da la semilla de A. h y m n d r i a c u s y sus concentrados
arnil6ceo y protelnico.
- Andisis quimico proximal de l o s medios da adtivo PDA ( Papa dextrosa agar) Y
EMA (Extracto de matt8 egar).,
- Elaboracildn de la formulacildn de los medios de cultivo a base de las diferentes
fracciones de la semilla de amaranto .
- Clarificaadn de medios de cultivo a bass de la semilla de amaranto.
base de amaranto y convencionales.
22
- Determinaadn de la descripcidn rnorfolbgica de A6~ernillus niaer y Penicil!iunt
muehrtii an los medios de cultivo clarificados y no darificados utilizando harina de
amaranto y medios de cultivo comenaoneles.
1 4 .
, ,
- . Partiapaddn en las VI1 JORNADAS De BIOTECNOLOGIA UNIVERSIDAD
AUTONOMA METROPOL%ANA - IZT'AeALAPA (4 de Junio de 1893) con el terns.
INDUSTRIALIZACION DE LA SEMILLA DE AMARANTO.
" Participaadn corno cartel en el V CONGRESO. NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA Y
. . . ) . BlOlNOENlERlA . Puerto Vellerta, Jal; Septiembre de 1893. Con el tema : EFECTO DE
1 LA RELACION C/N EN EL CRECIMIENTO DE Arspergillus nigsr CULTIVADO EN
DIFERENTES FRACCIONES DE AMARANTO.
. I
VI. RESULTADOS.
1. TABLAS DE RESULTADOS.
!
I
TABLA l. AnBlirh qulmico proximal da la asmllla da A. hypochondrfacus y de sus concentrados amilaceo y proteinico.
HUMEDAD 10.8 0.0 12.6 0.0 9.2 0.0 PROTEINA (%N X 5.85) 14.2 0.0 " . 14.0 . ' 0.0 24.3 0.7 EXTRACTO ETEREO 6.8 . 0.2 6,7 0.0 B 8 0.0 CENIZAS 2.8 0.0 . 2.8 0.0 7.5. 0.0 Flew CRUDA 4.5 0.0 7.3 -0.0 4.8 0.0 CARBOHIORATOS 5 60.8 , ' , ( - ( 56.6 44 .I RELACION C/N 20.2 ,, 22.7 11.7
. J
1 Semilfa de a. hypochondriacus. 2 Concentrado ernil6cao de A. hypochondriacus obtenido por clasificacibn neum5tica. 3 Concentrado protelnico de A. hypochondfiacus obtenido por dasificacibn neum4tica. 4 Los datos son de medida 3 DE de tres determinaciones. 3 Por diferencia.
T A B U 2. Andlisis qulmico proximal de los medios de cultrvo PDA ( Papa Dexbow Agar ) y EMA ( Extracto de Malta Agar ) de BIOXON.
PDA 1 ""
EMA ?
(g I 100 g)
HUMEDAD 4.55 0.24 5.66 0.74 PROTEINAS 2.64 0.30 ( /3 .e5 ' \ 5 14,' O 56 CENIZAS 3.06 0.1 1 2 7 1 Q ¡:I<;
DEXTROSA 44.50 0.90 \.29.87 0.92 CARBOHIDMTOS 45.25 RELACION C/N 4-31
* FDA ( Papa Dextrosa Agar ) 2 EMA ( Extracto de Malla Agar )
_I
24
. t
. . . ( v .
. . ~
. . , . I
TABLA 3. Medios de cultivo para hongos elaborados con diferentes fracciones de la semilla de Amaranto.
RELACJON C I N b ,
INGREDIENTES 10 15 20 10 15 20 í o 15 20 .-.
t s / l ) SA l 20.0 20.0 20.0 - 0 - - CA 2 -3 - - 20.0 20.0 20.0 - - "" CP J "- -" 20.0 20.0 2r3.0 GLUCOSA "- -" - 7 .8 192 PEPTONA 3.5 1.5 - 3.9 1.6 0.4 - - - AGAR 15.0 15.0 15.0 15.0 15.0 15.0 15.0 15.0 15.0 PROTEINAS 6.7 4.4 3.2 6.8. 4.6 ' 3.4 5.8 5.8 5 5 CARBOHIDRATOS 12.2 12.2 12.2 11.2 ' 11.2 11.2, 8.8 16.6 28 O
1 Semilla de A. hypochondriacus tipo mercado. 2 Concentrado amilbceo de A. hycochondriacus. 3 Concentrado protehico de A. hypochondriacus.
"I_
TABLA 4. FORMULACJON DE LOS MEDIOS DE CULTIVO CLARIFICADOS.
NaOH N4SOa NaCl "-
REMCION C I N
NGREDIENTES 15 25 35 40
PRECIPITADO 1..130 1.136 1.136 1.136 2.68 2.99 GLUCOSA 0.577 0.702 17.070 19.690 18.18 18.18 AGAR 15.00 15.00 15.00 15.00 15.00 15 O0 AGUA DESTILA- DA c.b.p (11) 1 .o0 1 .o0 1 .o0 1 .o0 1 .o0 1 .o0
25
TABLA 6. Velocidad de crecimiento apical de A. nlast en los medios de cultiyo utilizando harina de Amaranto o diferentes fracciones de la semilla a diferentes'relaciones CtN.
ESTANOARES 2 m m / h l ;7 9
EMA PDA
0.2 + 1.1 x 10 -3
0.3 + 1.SX10-3
MEDIOS DE CULTIVO DE PRUEBA3
SA (10 ) 4
SA (15) SA (20) CA (10) CA (15) CA (20) CP ( I O ) CP (20)
0.2 + 1.8X104 0.2 + 1.3X 103 0.2 + 1.7X-104
0.2 f 2.3 X 104 0.3 + 1.2X10-2 0.2 f 1.6X103 0.2 + 2.5 X 10
0.2 .) 1 . 7 X l 0 3
. t
1 Los resultados son la medida ? DE de tres r6plicas. 2 EMA extracto de matta agar, POA pepe dextrosa agar. 3 SA semilla de A. hypochondriacus; CA concentrado amilaceo de A. hypochondriacus y CP concentrado protelnico de A. hypochondriacus.
Retaci6n C I N. .
26
~ + -..,-
TABLA 6. Velocidad de crecimiento apical de P. roauetortll en los medios de C U R ~ ~ utilizando harina de Amaranto o diferentes fracciones de la semilla a diferentes relaciones C IN.
ESTANDARES 2 m m / h l
EMA 0.1 + 1.4 X 10 2 PDA 0.1 + 8.7X 10-3
MEDIOS DE CULTJVO DE PRUEBA3 I
SA (10 1 4 2 3 0.1 + 3.4X10-2
SA ( 2 Q ) 0.1 + 8.1 X 104 SA (15) 0.1 + 1.3X10-2
CA (10) 0.1 + 1.4X 10-2 CA (15) 0,l + 3.7XlO-2 CA (20) 0.9 + 1.ox 10-2 CP (10) 0.1' + 9.6 X 104 CP (15) 0.2 + 6.7 X 10 -2
'
CP (20) 0.1 + 3.8X10-2
I Los resuttados son la medida ? DE de tres rbplicas. 2 €MA extracto de malta agar, PDA papa dextrosa agar. 3 SA semilla de A. hypochondriacus; CA concentrado arnil6ceo de A. hypochondriacus y CP concentrado proteinico de A. hypochondriacus. 4 Reladdn C I N.
TABLA 7. Velocidad da crecimiento apical de A. nlasr en los medios de cultivo clarificados ubtizendo concentrado proteinico a diferentes relaciones C / N.
ESTANDARES 2 rnmlhl
EMA 0.2 + 1.1 x 10-3 PDA 0.3 + 1.5X10-2
MEDIOS DE CULTIVO DE PRUEBA3
CP (15 )4 0.2 + 1 . 0 ~ 10 -3
CP (25) 0.1 + 1.3 X 10 -2
CP (40) 0.2 + 1.3 X 1 0 3 CP (35) 0.1 4. 1.ox10-2
Los resultados son la medida 2 DE de tres replicas. EMA extracto de malta agar, PDA papa dextrosa agar.
3 CP concentrado proteinico de A. hypochondriacus. * Relad6n C / N.
. ' 27
TABLA 8. Veloadad de crecimiento apical deJ? mudbrtll en los medios de cultivo clarincados utilizando concenbado protelnico a diferentes relaciones C / N .
ESTANOARES 2 rnm/h1
EMA it 3 0.2 + 1.1 x 10'3 PDA 0.3 + 1.5X 10-2
MEDIOS DE CULTIVO DE PRUEBA3 I
CP (10 ) 4 CP (25) CP (35) CP (40)
. 0.2 + 1 . 2 ~ 10-3 0.1 f 1 . 0 X 1 0 ~ 0.1 + 1.ox 10" 0.1 + 1 . O X I O "
,
1 Los resultados son la medida f 06 de tres r6plicas. 2 EMA extracto de malta agar, PDA papa dextrosa agar. 3 CP concentrado protclnico de A. hypochondriacus. 4 Reladdn C / N.
28
29
., . , "
I
, .
I
CA Vs PDA
I
l VII. DISCUSION DE RESULTADOS. ,
, . . . ' , : . %
. .
. , . En base al an4lisis quimico pmximal reportado en las Tablas 1 y 2 de SA, CA,
CP y los medios esblndares ( PDA y Exbad de Malta Agar ), 68 disefirrron' diferentes
medio8 da cultivo a basa da Amaranto (Tabla 3) con diferentes reledonas C I N. Parra et
ajuste de estas reladones so utilizd dextrosa como fuente de Carbono o peptona de
casefns como fuente de ktr6geno inorg4nico, según fuera necesario considerando el
contenido inicial da C / N en cada uno de los medios.
Tanto el crecimiento de 4. niaer como el de p. muefortii en los diferentes medios
de cultivo preparados 8 base de Amaranto se compard con el obtenido en el PDA y . ,
' 4 '
Extracto de Malta.
. - Como podemos observar an las fot6grafias; no existi6 efecto inhibitorio on el
'. ' crecimiento de A. nirrer v P. muelbrtii s o b los medios que contenian Amaranto,
8demBs de que 88 puede observar que tanto el crecimiento y esporuladcSn como la
pigmantaa6n da los hongos en estos medios fu6 cualitativamente auperior a los
est4ndares.
Los medios con Amaranto presentaben una pigrnentacidn diferente de las
colonias, con colores m& intensos y una diferenciaci6n m4s dara de las zonas de
crecimiento rnicelial y de esporulad6n, ademas de le presencia de exudados en ambos
. . hongos, los cueles fueron exclusivos para estos medios ya que ninguna colonia do los
medios estdndares presentaron exudados. Lo anterior se debe en gran parte a la calidad
excepcional de la composicidn qulmica y nutritiva de le semilla de Amaranto la cual es
sprovechade en la formuled6n del rne-dio para dar como resulfado un medio de cultivo
con muy buen valor de sustancias nutritivas que favorecen el crecimiento de los hongos.
35
Por otro lado, loa hongos son capaces de catabolizar y utilizar una gran variedad de
sustrabs. Son altamente eficientes en transformar material nutritivo en sustancia celular,
por io que en los medios como el PDA y E%tracto de Malta Ager en los que 4 . el material
nutritivo est4 an cantidades moderadas, la mayor parte de los sustratos son sintetizados L ,
an sustancias celulares, pero si al madlo cuenta con un material nubttlvo abundante como
es el m80 de los medios de amarenb, se a w u l a como reserva en el micelio (
Carbohidretos y Ifpidab )'y muchos productos del catabolismo son excretados en el
medio.
' , % '
. ;.. En las Tablas 5 y 6 se reporta la velocidad de crecimiento apical de A. niaer Y P.
' , muecbrl'ii respectivamente en l o s medios dq cultivo no darificados. Este parametro nos
moslrd diferencias significstivas entro l o s medios de Amaranto y l o s medios control.
Particularmente en los medios CA (20) Y SA (1 5) cuttivados con A. niaer y en los medios
CP (15) y SA (20) cultivados con p. rooueCbrtij se obsenr6 la mayor y menor
velocidad de crecimiento apical. Lo anterior nos muestra que le velocidad de crecimiento
. . de los hongos en los medios CA (20) y CP (15) fue estadlsticamente superior a los
t . .
. .
medios controles.
AdemBs del valor nutritivo de la semilla de Amaranto, lo anterior se puede deber
' a un efecto combinado de concentraa6n y fuente de carbohidratos totales en los medios
de cultivo y a le verdadera reladdn C I N , puesto que el medio SA (20) elaborado a base
de semilla de Amaranto contenfa 5.8 g de protein8 y 8.8 g / I de carbohidratos que
principalmente fueron almiddn del SA que no fu4 tan asimilable como la glucosa y aunquo
hubo una relacidn C / N calculada de 10, la verdadera C / N asinlitable debe ser tnenor,
debido al almiddn presente. En comparacidn a los medios C P I1 5) y CP (29) dot.& . Q
36
:.' Carbohidratos mejodndose asi la velocidad de crecimiento, influenciada aparentemente
por la glucosa adicioneda, sin embargo serla necesario complementar estos resultados ,
con la determinaah de biomase. * ,
Por otro lado, en la detsnninacidn de 106 lodices de esponrlaa6n se obtuvo que
. , ' I en los medios de d v o 80 Amaranto el comportamiento fue similar a la velocidad de i
, ' ;.. crecimiento, . notandose que este fi~6 directamente proporcional tanto en la cantidad de
En las fotograflas podemos notar claramente les diferencias de esporulacidn de
una colonia de p. rrwuefbftil cuMvada en el medio de Amaranto en cornparaddn 8 la
: cuttivada an los medios ast8ndares.
En general el cultivo de p. rwuetbrfii y 4. niucr en los medios a bass de la
semilla de Amamto no presentaron ningún efecto inhibitorio con respecto al PDA y al
Extracto de Malta Ager , al contrario para el Caso particular de P. roauetbrtii se obsenrd
un mejor crecimiento y mayor fndice de esponrlscidn asl como una pigmentacidn verde - ' . and rn6s encendida que los est8nderes.
. *
El micefio da p. IwueWi em de un color verde - azul intenso con un helo bien
definido cubriendo el entorno de la colonia, ademas de existir una notoria produccidn de
exudados en los medios de CP (10 $15 ) y en CA ( 10 y 15) y en SAC ( 15 ), siendo
mayor en el medio elaborado a partir de CP en la relsci¿5n C / N 1 O y 15 ; indicando que
37
, ."
, .
, " " . asl aldde una mlaadn muy fuerte en c u a n t o , a la cantidad de carbono y nikdgeno
. . ~ .': . presente en loar medios que favorecen la producadn de emdados, los cuales no se 8 . . .
. ' . / ' , : : pmsantaron en ninguno da los dos medios esbdndares (FDA Y Extrecto de Matta Agar) . /
. . . . . I l. , . . . , : : ' . , .
Por o h ledo las colonias obtenidas de 19. nlaer sobre los medios de Amara&,
, . tambien presentaban diferencias significativas en IQs pardmetros evaluados. El micelio do , , ', . .
; p.' nicrer e18 de un cilor gegro brillante muy intenso y en algunos c8w8 la colonia se vela .'1
' ! . : '. , . . ' rodeada , de un halo muy marcado de color amarillo. . . . .
Le gran desventaja que pmentan los medios da cultivo de Ameranto es la
. . , . ' . , , . turbiedad; la cual dificulta le identificaci6n de miaoorgen&mos, en comparaddn a los
. /
: .'I ' medios est4ndares; los cuales en dicha caracterlstica e&n por endma de los m d i O S de
I . , Amaranto. Por lo que, 86 deadi6 realizar la formulaadn de los medios de cultivo de
.. .
. . . ,
. . . .. .. , Amaranto darificados (Table 4).
' . .. . , . ' I
En general, estos medios no presentaron las mismas cerecterfsticas antes
, citadas en l o s medios no darificados , es decir en el cultivo de penicillurn muefwfii no
.. j hubo presencie de ewdados ; ni pigmentacidn tan intensa en'los cuttivos de Asttemi!lus , . I
: ,: :'.'; piger y p IoQ . ' ..
' , I . u e m i , pero aún asl sus caracteristicas no fueron inferiores a las . .
' ' presentadas por l o s estandares pero si en comparacidn con los medios no clarificados .
En las tablas 7 y 8 88 reporta la velocidad de crecimiento apical de A. niaer )I P.
rrmuetbrtii en los medios de culbivo clarificados. Como se puede observar en estas tablas
la veloadad de crecimiento de los hongos fue similar a le que presentaban los medios
38
. .
est4ndares pero resulto s e r inferior a le obtenida en los medios de amaranto no
darificados. Estas diferencias se deben en gran parte al proceso al que fu8 ,sometido el $ 9
" medio .de cultivo pera wr clarificado. . .,
El proceso empleado nos Ilevd a IS obtencidn de un medio de cultivo
completamente dare: cog caractarfsticas nsicas. muy similares a 10s medios PDA y
Extracto de Matta Agar, pero diferenb en cuanto a la cantidad de material nutritivo que
, . contenfe hasta antes de ser clarificado, lo cual inlruy6 direc@mente en el crecimiento de 3
l o s hongos. . .
' En general podemos dear que las relaciones C / N que mejores resultados
dieron en este primer estudio preliminar fueron las mBs bajas ; en el caso del medio 110
, ' derificada le releadn C/N 1 O y '1 5; y en los clarificados le relacibn C / N 15 , lo cual nos
indica que esta mlaadn 88 le que mejor se adecua 8 las necesidades nutridonales de A , . oiaar Y P. roauefortll, ..
. I
, . 8 .
i
I
VIII. ESTUDIO DE MERCADO DEL MEDIO DE CULTIVO A BASE DE SEMILLA DE AMARANTO.
+ I
I ANAL1,SIS DE LOS ENTORNOS.
I .I ENTORNO SOCIAL.
' .
El estudio de mercado se dirigid al sector industrial, al sector salud y a las
Instituciones de educaa6n.
> -
Utilizando como estandar el Agar 'Papa DexImm (PDA) y el extracto de Malta Agar
(EMA), le semilla de Amaranto es une alternative ventajosa sobre los anteriores, catno se
pudo., observar en la parta experimental de este trabajo. Ademds de que es t-&s
econdmico utilizar 3 g da concentrado protelnico de amaranto que 30 o 40 g de los
medios estsndares.
. .
Por otra parte, viendo las condiciones socioecon6micas del pals y los
requerimientos actuales de crecimiento econ&rnico, 0 este le conviene m6s lo que
produce ( semilla de amaranto ) que importar medios de cultivo con un costo I H ~ S
8feVado.
40
1.2 ENTORNO POLITICO
Cada saxenio se implementan planes de apoyo, para el desarrollo de productos agrlcolas, el cuttivo de amaranto es fomentado por la SAR.H. y otras instituciones
' , gubemamenteles.:
Son varias las ferias regionales de la "alegrla" que se celebran anualmente en ' pequefias pobladones? 9 aprovecha aste hecho para promover, primero localmente y
. . . dewuh a mayor escala, mejores m@pdos de cultivo. Estas ferias cuentan con el apoyo ' ' . ,' ,. de los muniapior, o &dele~aones.quierws promueven el evento y dan facilidades en
. , ' ' '1.3 ENTORNO ECONOMICO . .
, '
1 I: Actualmente todos los medios do d v o que utilizan los diferentes sectores para la ! i
. , realizad6n da andlids rnicrobiol6gicos son produddos por empresas tramadonales con ,fuerte prestigio y & e m comercial, qua tienen 01 mercado completamente abastecido,
: estos medios ,.. son elaborados en el pals y en algunos caso6 son de importacidn, 1 I
. ' dependiendo asl el costo del medio de cultivo de estos dos factores.
El Amaranto es una planta que por sus caracterlsticas representa lo que es un cultivo potencialmente econdmico para eltplotaddn a gran escala.
En condiciones similares de inversidn en insurnos , labranza . y mano de obra , el amaranto okece mayor rendimiento econdmlco por hectarea cultiuada. El precio en el tnorcado de grano de amaranto es superior al de los demas granos ($2 500 0001 torr). Esto permite asegurarle al campesino un aumento en la rentabilidad de la tierra dr! un 100-200 % .
La cantidad de hectareas de amaranto que se siembra depende solo de las necesidades del mercado, que comercieliza la semilla para la elaboracihn de prodwfm industrialirados.
41 153332
. . 1 .... : producci6n y comercializad6n d e l producto en cuestibn, cabe sellalar que se deben
,'." '. .:' realizer Mrnites en diferentes secretarfas como son: La secretarfa de Hacienda y Crddito *.> : Público , La Seeretarla de Ab- y comerdo Exterior (SECOFI), La Secretarla 'de
; : lndusbh e Invemibn Extranjera y la Secretarla de Salubridad y Asistenda. Cada uno do lo8 trtirnitas y nomes I; cumplir eutableddas por dicha6 institudones corresponder4 a
' . ' una nueva llnea de .producto, e incluso de ser el caso, el alta de la micro o pequefia ; industria que elabora el producto. Adernas de que al efectuar los tramites se adquiere la , responsabilidad del cumplimiento de algunas normas generadas para el control de dicha
. ' ' producto.
. ! . I
. I
42
A partlr da seta mornsntu, con 01 nombre de EXTRACTO DE AMARANTO flog : . I ,
I . . . ., . referiremos a los .medios de culho, que so elaboraron en el presente trabajo. I . ., ,
. a
. , . .
., I . I . ,
. . , * _ .
; . , El medio de cu"Ex&acto da Amaranto es u1 medio elaborado a partir de la 1 semilla cruda de Amaranto la cual fu6 sometida ' a una limpieza y molienda, para
" . . . .. ' . . . , . :: posteríomenta llevar a cabo ' una dasificad6n neumdtica obtenidndose as1 un , . , . . '. :'.,concentrado . protelnica y un concentrado amikeo. .Tanto el concentrado proteinico
' ' , como al concentrado arnil4cao fueron utilizados. cpmo materia prima para elaborar los
. .
, , , , I . .
medios da Extracto de Amaranto.
, . .. Bashdonos an l o s resultados obtenidos, podemos de& que la aplicaci6n da estos . . :: medios favorecer4 la identificacibn, el desarrollo y el crecimiento de hongos .
. , , , . , .-
, . ,
2.2 SUBPRODUCTOS
Debido a que el concentrado problniw 8s sometido 8 una solubilizaci6n con sales (NaCI, Na SO 4) o con dlcaU (NaOH), se van e obtener dos fracciones, una de las
. . . ~ cuales 80 utili como materia prima (70%) para la alaborad6n del medio de cultivo y la , ' . ., ': .. ',' : o t r a fraccidn . es . considerada como subproducto (constituido principalmente por I , , , j ; . ~.elmidbn), este subproducto puede ser U t i l i z a d o ' ' como sustituto del almid6n de rnalz,
. ' para" Is elaborad6n de cosrndticos, para la producddn de almidones modificados, la
Durante el proceso industrial de elaboraddn del medio de cultivo se observ6 1-3 . obtancidn de un mlnimo de mermas, ya que al equipo y t4micas que se emplearon as¡ io
permitieron. Por lo tanto SS obtuvo el rnlnirno de residuos y por consiguiente e! aprovechamiento total de la materia prima.
. .; . I .
. . , . .
. .
produccidn de resistoles, etc.
43
, . 4
, . . I Dicha noma tiene por objeto determinar Iss,espeUfi~$ones mhimas que deben
' :' tener los medios de cur#hro$n general. ,
... , . . . I ( *
' . . , ' ! .; : .. Por otra parte, define a , los medios de cultivo como el material nutritivo en el que ' ?:'; * I '. Y. .. $ . . . . pueden H. y rnuttiplicarse los microorganismos. Sa presenta generalmente desecado ,., . , . I . :. .. -ti', en ' 1 forma de polvo fino o granular, Sa emplea en los laboratorios dlnicos y
, . . . ,
: ! ., I . , , , , : . . . . .
; 1 ' a .
. .
. . 8 ~ .
.'.' Es un hecho que un medio fabricado con el mayor cuidado y sometido a los ' . " . conboles de calidad m& extrictos, pierden su valor si el usuario no lee y sigue
cuidadosamente las instrucciones de preparacidn, o si para 6sta emplea agua de mela
. . .del medio preparado, el usuario efectúe un mlnimo de pruebas de control que
4 . . . . .
. . . ' I . calidad o material sudo; por estos mohos, es ineludible que, para asagwar la calidad ,:
I , . . . . . . ,.. : . :' influyan , . tanto en determinaciones físicas corno biol6gicas. . .
1 . . , . , . . , . . , , .
. , , L . : ' , '. 1 ' .. I
. . . .
. . / . . . . . . . . .
, . + >
. ,
"... 1
. .
, . -: '. . Los medios de dtivo Extracto de Amaranto se usaran como medios de uso general
para el cultivo da hongos. Como se mandono en la diseusiiibn de resultados estos medios presentan ,. algunas ventajas sobre los que se encuentran en el mercado; ya que son:
, .
a) Econ6micos ;t $1
, . b) Incrementa la velocidad de crecimiento de los hongos y
.:. . . . c) Modifican sus caracterfsticas mxfOl6giC88, fa,dlitando asl la caraderizad&n, lo , , . . . ' que es importante ya que otras medios no ofrecen estas caractoristicas.
. . , . i
Las caracterlsticas anteriores permite una attemativa a los principales productos productos competidores existentes en el mercado como PDA y Extracto de Malta ,
'. ademds de que estos productos hacen mas coateabla liu aprovechamiento industrial ' , por los altos prados que tienen actualmente diversos productos similares de
importad6n. Su uso es especifico como material nutritivo para al crecimiento y desarrollo de hongos.
45
, , . , , .
.. , . I
2.5 MARCA Y PATENTE. \
LOS medios de cultivo deshidratado derivado de la semilla cruda de amaranto, se ,
le conocara como EXTRACTO DE AMARANTO. Y a le industria encargada de st1
blaboraddn se le conocer& como MeCaM (Medios de Culbivo de Amaranto).
P . '
2 3 . ,
. : Para realizar el registro de marca deber6 presentarse la solicitud correspondiente en
la Secretarla de Comercio y Fomento Industrial (SECOFI) ademas la marca debar4 de
satisfacer ciertas condiciones, como son:
- Permitir que el público distinga l o s productos o servicios de obos de su dase (no se
permiten nombres gendricos o formas del dominio público).
' 0 No debe ser igual a otras registradas antes o que man notoriamente conocidasl para
los mismos o similares productos o seMdos, ni confundirse con estas. , .
l . . I ::- No debe ser igual a un nombre comeraal previamente publicado y que corresponda
a un 'establecimiento 'cuyo giro principal sea la fabricacibn o venta de los mismos . ,
. / .
productos o servicios.
- Tener novedad a nivel mundial, lo que significa que no debe estar comprendi+ et1
estado do la tecnica.
46
. .
, , (
I . . ._
* , . . . , :
' . , 8 ' . For . k que EXTRACTO DE AMARANTO es 'un producto que puede ser patentable.
Para , obtener una patoanta debar6 presentarse le solicitud correspondiente en la . , I
t i * ..
. ' ' Sacrefaria . da Comercio y Fomento Induetrial (SECOFI). I . ..., I _. .. "
~ I ' . . : , . . .
(1' 1 . ! _. .. - *
, . . . . . . . I . . . .
Une vez presentada la docurnsntacibn, la Direcd6n General le asignara el númcro
de expediente que la corresponda. Posteriormente, el Area de Examen Administrativo do
Patentes reelizara un estudio de los documentos presentados para verificar que cumplan
con los requidtos de forma establecidos por la Ley de Invenciones y Marcas y su
reglamento. . t
. ,
47
. . I ' '
.. !:, ' ' Por lo general, los medios de cultivo se ,enyasan . . en recipientes adecuados ' . do
: : ' , acuerdo a su volumen y uso, Para envasar el Extracto de Amaranto, S Q utilizaran
: . _ : redpiantes da plSstico da polietilend'harm8U~mente sellados con doble tapa, bste OS u11
, material que adem4s de sus excelentes propiedades ,diel6ctricss, tiene extrs?rdit\aria
resistencia al agua y a la panatraa6n por la humedad y a los gases, adem6s presenta
numerosas ventajas, ya que edos envases son : Irrompibles, ligeros, tienen menor costo
: comperado con otros materiales para envasar ( vidrio 1,. pueden ser fabricados en
.: : cualquier color y su excelente presenbd6n, lo hace el envase ideal para protagcr
. . 4 , ,
2 3
8 ' I
productos higrosc6picos como es el caso del Extracto de Amaranto. . .
_ .
El contenido neto para cada recipiente de plBstico, serir do 450 g. L a
I
' comerualizaci~n de este producto tendrd presentacibn de una libra y sf: distribuir3rl pcr
media de cajm de cartbn, las cuales contendrdn un total de 6 libras; por otra par19 I J
cantidad de piezas depended de las necesidados de cada laboratorio de anal¡, e¡* a clir\¡r:O,
laboratorio pare andlisis de alimentos o ckalquier otra instituci6n quo requiere 45 csk
producto.
, ,
2.7 DESCRIPCION DE LA ETIQUETA.
NOM-F-228-1972 establecen que cada envaso debe llevar una etiqueta o itriprcsidrl
pennanenta, visibla e indeleble con los siguientes datos :
- thnorninaci6n del producto.
48
' - Contenido neto. . '
, .
, ' 7 Raz6n Social. , . - Domicilio da1 fabricante.
- Leyenda "Hecho en Mbrcico".
- Lista completdde i&pdientes en orden de concenb'acidn decreciente.
- Leyenda indicando el modo de empleo. 6.
- Registro. , . - Número de catalogo
- Fecha de ceduddad
Por otra parte la Noma T6cnica número 142 para la identidad y especificidad
, . de medios de cultivo establece en su articulo Sto, fraccih 5.2 que el fabricante debe
especificar an cada medio : , . - Contenido de humedad.
- Composiabn del medio deshidratado. . .
- Pwera de los componentes del producto deshidratado.
- Pew del medio deshidratado y volumen a reconstituir.
- Condiciones de presidn y temperehwa pera la esterilizacidn del medio preparado.
- Advertencia de no ssterilizer el medio si es el ceso
- Caracteristicas de deserrollo de los microorganismos on el medio.
I
. .
_ . ,
- Advertencis si el medio preparado y envasado para su uso debe refrigerarse
o no. Pruebas de estabilidad del medio deshidratado.
- Pruebas de viabilidad del medio preparado.
49
. I
En el Anexo 1. se presenta la etiqueta que Uevarh el producto, donde se puede
observar que esta cumple con los registros exigidos por l a s normas de etiqueta. 4
El nombre del medio de cultivo, se defiv8 del hecho de que entre las
ingedientes, con los que se fabricard esta; 88 encuentran: Agar ( como medio
solidificante ) , Dex&& como fuente de carbono ) y extracto alcslino de amarmto ( 9 .
, , corno fuente de nitrbgeno ).
Por Último considerando que I8 empresa 8610 se dedicar4 a la elaboracian de
' medios de cultivo a base de semilla cruda de amaranto, surge la denorninad6n social "
MeCaM " ( Medios de Cultivo de Amaranto ) que aparece al pie de Is etiqueta.
. I
De t a l forma, que en el Anexo 2 68 presenta una alternativa de lo que sedan las hojas
membre&bas que representarfan a dicha empresa.
50
. . . . I .
l
Debido n los ceracterluticcrs qua prerentr al modio de cultivo daborado partir de semilla de amaranto, este pertenece a la industria farrnaccSutica y denh dr
. .: , esta se clasifica corno un "Agente de Diagnbstic;3", de acuerdo a lo enmarcado en e?! manual de Tdcnices 8anifhas de Agentes de Oiagndstico edrtado por la Secretarla de
. .
;. Salud en 1990. , . .
i
, ' , De acuerdo a los niveles conocidos de consumo, hasta esta etapa se puerJett . . : , . , distinguir principalmente tres consumidores (o sectores) potenciales:
i . , . , r . : , , a .
t - La lndustría Alimentaria.
Solo se concentrar4 y se considerara el mercado a nivel D.F, tontando et1 cuf;r\th que se puede ampliar a nivel nacional.
3.2 ESTFWTlFlCAClON DEL MERCADO.
. . El productrr est4 enfocado principalmente tf aquellos sectores de trabajo QLIC
' ' ' . . necesitan el medio de cultivo para efectuar diagn6sticos en estudios médicas ylo identificaddn de microorganismos (especlficamente hongos), investigaci6n en el area biotecnolbgica, asl como la presencia de estos en los alimentos para su cc?rltrot sanitario.
Se considerartin las Instituciones de Invostigacidn, Docencia, Laboratorios LIZ
Anfitisis Clinlcos, y Laboratorios - k h Control Microbioltgico en la Industria de IO:, alimentos, de el DISTRITO FEDERAL.
51
Debldo a que el uso del producto es específico no se puede realizar una estratificacibn mas detallada.
3.3 MERCADO META.
,
Por las caracterlsticas del producto no es factible el hecho de venderlo duectamenie , ' al consumidor sino que se ten&& que r e m , . inicialmente a intermediarios para la
distribucibn del producto a l o s sectoras expuestos como mercado potencial. 9
, ..,
52
3.4 DISER0 DE ENCUESTAS.
. ' Se realizardn dos tipos de encuestas : Una dirigida a los sectores que costituyen la
' , pobleddn potenciotmanta consumidora ( haciendo uso de esta para realizar el estudlo de . .
. . . ' demanda ) y otra dirigida a los principales proveedores de medios de cultivo en al Dishito
Fedemf ( se utilizaron? coi? le finalidad de obtener informeddn para realizar el estudio d6
, , ' , . . . "
, . . le 6fwtd d d producto 1 .( v ~ r Anem 3 y 4 )
Con las encuestas aplicadas 8 le pobladbn potencialrnente consumidora, se evalurj
la utilizaci6n de medios de cultivo en general para hongos y levaduras, tamhien se
conoci6 al comportarnientro, frecuencia, rezdn y cantidad de compra, adern& de conocer
, ' : ' tanto la taza de consumo, como la demanda del producto.
. ..
Pare relacionar la informacidn obtenida de las encuestas con las carecterl S t ' lC3S
socio-demogrbficas de la poblacidn potencialmente consut~lidora, nos h a s n t ~ ~ ~ ~ I :II 1.3
inlormadbn obtenida del Instituto Nacional de Estadistica Geogrsfica e infor t n 5 k * ? .
(INEGI)
. I
53
3.5 REVISION ESTADISTICA DE LA POBLACION POTENCIALMENTE I I
CONSUMIDORA.
3.5.1 SECTOR SALUD.
Los sbnrt#os de salud en M6xiw son cubiertos por las instituciones dc
seguridad social, las de asistencia social, los centros del sector privedo y los institutos
nacionales especializados. .!
Dentro del primer grupo, estsn el Instituto Mexicano del Seguro Social ( IMSS ),
el I n s t i t u t o de Seguridad y Servidos Sociales para los trabajadores del estado ( ISSSTE ),
y los cenbos de salud de la Secretaría de la Defensa Nacional ( SDN ), de la marina ( SA1
) y de Petroleos Mexicanos ( PEMEX ). Atienden a su poblacidn derechohebiente y sus
finandamientos provienen de los patrones, empleados y del gobierno según sea el CRSO
”.
El sector privado atiende 8 todo aquel que lo solicite, ya sean personas físicas,
o empresas que contraten el servicio para sus empleados.
Por último, el pals dispone de un conjunto de institutos especializados de alta
nivel, dirigidos a toda la poblad¿h, que ademds se distinguen por sus actlvidades d5
investigaa6n y ensefianza: Cancerologis, Cardologfa ” Ignacio ChSvez ”, Enfertwdadt?s
54
, I . ' Respiratorias, Newologfa y . . Neurocirugla, Nutricibn " Salvador Zubirhn *, P ediatt la, . , ,': Pennablogla, Salud Pública, Psiquiatrfa, el Hospital Infantil de MBxico Federico Gbtnez
8 , ' . . : .
, . . y el Hospital General " Dr. Manuel Gee Gonzdlez ". Estos institutos reciban'subsidio del
gobtsmo y son coordinados por la Secretarla de Salud.
. . . . . . . Tabla 9. Unidades rn6dicas del Sector Salud del D.F. , según tipo de unidad.
b i ' , I . , ' . , , .
. . , I
m0 TOTAL HOSPITAL HOSPITAL DE UNIDAD DE
GENERAL ESPECIALIDADES CONS. EXT. -
55
. . . . . . .
' , : , , t
INSTITUCION TOTAL HOSPITAL . . HOSPITAL DE ,. . UNIDAD DE . . , . 1
! , : . , .; , . , ~
. . , . . , ' . . , . , ; ; , , . . , . . GENERAL 6 ,ESPECIALIDADES CONS. EXT.
~ L . , . .
TOTAL 11,211 685 97 10,423 ~.
' . Sec. Saiud. 5,734 145 30 I .
, ' ' IMSS 3,840 405 23 . .
5,558
3,512 ' . . ISSSTE , 1,048 52 23 973
SM 1 42 25 - 117
PEMEX 86 24 - DDF 34 9 20
62
5
1 S88
INSTITUCION TOTAL HOSPITAL HOSPITAL DE UNIDAD DE
GENERAL ESPECIALIDAOES CONSULTA EXT.
TOTAL 2 1 li$lS 682 1 o5 11,122
Sec. Salud. . 6,267 141 39 6,087
IMSS 3,812 - - ISSSTE 1 ,134 65 11 1,050
SM 136 26 - 110
PEMEX 172 21 . 2 149
DDF 58 10 19 30
-
212
I ' .: Tabla 11. Laboratorios de An6lisis Cllnicos y estudios de diagn4stico del Sector
, .
' 1 , Salud por institucl6nlQW - 1881
TOTAL Seguridad Social Asistencia Social
IMSS ISSSTE PEMEX SDN SM SSA DDF
Lab. de Ardl. 183 85 22 2 7 1 75
Cflnlcos.
EwJdbs de 68870 5848 1843 4 5 7 8 4 9 220 8762
"
NOTA : Comprende en6lisis cllnicos, de radiodiagn6sticoI tlistopatologl;r, c i l ~ ~ ! : ~ ~ i ~ ~
exfofistiva y otros. 57
I
. . . , s . ' 3.5.2 INSTlTUCiONES DE INVESTIGACION.
Las instituciones de educaadn superior, resultan de sume importencia por EU
vinculaddn con la producdh, la avoluddn de dende y tecnología y con los problotmas
. I , . . . . EDUCACDN SUPERIOR ' , . . . . . ,
, . . > . . ,
. . r . . , . Nuevo ingreso a primar grado 253,295
UNAM
261,917
1,084,200 I ,110,000
nd nd . 324 326
11 3,341 I 17,189 *
Nuevo ingreso a primer grado 31,798
Alumnos Msbiculedos. 146,996
Egresados 15,888
33,238
153,651
16,607
58
Nuevo ingreso a primer grado 6,176 6,4%
Alumnos Matriculados. 52,129 54,488' '*
. I 1,830 1,913
IPN
Nuevo ingreso a primar $&do 10,270
Alumnos Matriculados. 55,982
Egresedos
NOTA : nd = no determinado.
7,360
20,227
50,763
7,726
3.5.3 INDUSTRIA ALIMENTARIA.
Este sector est4 formado por todas aquellas empresas que elaboran
productos para consumo humano, dichas empresas, llevan a cabo un grupo do
ectividedea sumamente importantes por su participacidn en el control sanitario de sus
productos, hadando uso de medios de cultivo.
8
TABLA 13. Encuestas Industriales mensuales según divisidn y clase de actividad.
AÑO CLASE DESCRIPCION 'NUMERO DE ESTABLECIMIENTOS 1908 2000 Fabricacidn 41 8
de slirnento
1987 2000 w 41 7
58
T A B U 14 Encuestas Industriales mensuales por divisibn. Denominaci6r-t I .
Productos alimenticios, bebidas y tabacos. L 4
ANO NUMERO bE ESTABLECIMIENTOS
1987 : 577
3.6 TAMAAO DE MUESTRA.
Para el presente estudio, se usara la fdrmula para poblaciones finitas ( la cual se
caracteriza porque est4 definida para datos menores de 500,000 elementos ) ya que se
cuenta con 1426 elementos qua componen a le poblacidn potencialmente consumidora
de medios de cultivo. Pobladdn en base 8 la cual se realizar8 el estudio.
Para determinar el tamaflo de la muestra, es necesario utilizar una dislribuci6rl
binomial ( que nos permita conocer la distribucibn esthdar ) debido a que la inforrnacidrl
que se obtuvo de las encuestas en base a la aceptaci6n del producto, se presta p a n I ?
utilizacidn de esta distribucidn.
60
Esta distribuadn 68 obtiene a partir de un proceso conocido como es el caso del
ensayo de Bernoulli, el c u a l nos indica que cuando un solo ensayo de algún proceso o
experimento puede conducir solo a uno de dos r e m d o s mutuamente exdiuyentes , o
sea, qua uolamante se pueden tomar dos variables: ei-no, bueno-malo, 14.
El tarnafio de la muestra se calcular4 con .la siguiente fdrmule : , 7 $ 3
Donde :
p = Poblacibn a favor.
q = Probabilidad en contra.
N = Tarnaflo de la poblacidn.
e = (pq/n)
Num. de respuestas favorables
P =
Totel de encuestas realizadas
n = Total de encuestas realizadas.
* 61
Para determinar la aceptablidad del EXTRACTO DE AMARANTO se plarlte6
. ' ' : le siguienhe pregunta a le pobiacidn potencialmente consumidora . 4 Utilizaría * . medios
: ' ' de cuftivo elaborados a bese de extracto de amaranto 7 Si ¿5 No. c , '
Obtanihdosa" los%iguientes, resultados : De 15 encuestas realizadas, se obtuvo
: que 11 dijeron que si y 4 dijeron no.
Da los resultados anteriores 68 obtiene que CT = 1.713 ,
p = 0.733 y por lo tanto q = 0.268 con un enor de 0.1 1 . . t
(1.7 1 3)l(1426) (0.733) (0.266)
(0.1 1)* (1426-1) + (1 .713)2 (0.733) (0.266) h=
h = 46 encuestas.
62
3.7 CARACTERISTICAS DE LOS CONSUMIDORES.
La poblacidn potendelrnente consumidora quedara determinada por ciertos , .
~ : . fectores, de los cuales los m48 importantes son:
- El poder adquisitivo de los consumidores, polRica de compra y le necesidad que se
' tenga del producto. 7 9
. . - El mayor porcentaje de la pobladdn consumidora 66 encuentra en ciudades
Industrielizadas como a5 al caso del D.F, Monterrey, Guadalajara, etc, Las cuales se
' . carecterizan por cubrir los tres sectores 8 los que va dirigido el EXTRACTO DE
' . . I . ' . I , . AMARANTO , (Sector Salud, Industria aUmenterie ,e lndftuciones de Investigaci6n), - por Io
' . ' . " que el 0.F constituye una muestra representativa de esta poblaabn. ( Ver Fig. 1
I . .
, . , ' .
\ ' ,.
. , L . . I ,
, .
._". ._ , . .
. I
. . . , , , , . 'v.,;
' * ,
.I , ... , , . . 1 , , i ' , .. . 3.7.1 Comportamiento de Compra. , I . .
o . . , . , ' , . , . . .
I , '
Los consumidores adquieren los medios de cultivo ya sea, por media de
proveedores da estos medios o bien en diversas empresas, tales colno Merck (fe
M8xk0, Biox6n y Difco; dichas empresas son reconocidas como las mds importantes R
nivel nacional.
En cualquier caso, el consumidor realiza una búsqueda del producto, @I cual
tiene bien identificado por les diferentes marcas existentes en el mercado.
Cebe destacar que estos medios de cultivo deben ser comprados en grarder,
volúmenes, de t a l manera que se comercializan por medio de intermediarios; conlo es cl
caso de los proveedores que trabajan independientemente de las grandes empresas.
83
. I
FOBLACION: POTENClALMENTE CONSUMIE EN 'EL, DISTRITO' FEDERAL .
IORA
I
NTARIA '29.3
MEDIOS DE CULTIVO
64
3.7,2 Raz6n de Compra.
Para determinar la rez6n de compra de los medios de cultivo se tom6 cornu
base el cuestionario aplicado a una muestra representativa del D.F , en dicho cuestionario
' un8 de Is8 pregunta8 86 terliz6 con el fin de obtener 08tn hformecibn y 68 obeenr6 yuu
' entre las diferentes razones por las que adquieren un medio de cultivo son: . 2 3
- Evaluar condiciones sanitarias (microbiol4gicas) de diferentes productos alin~enticios
, ' y farmac8uticos.
- Realizar anhlisis da diagn6stico de diferentes enfermedades.
- A nivel acad4mico para fomentar la investigadbn.
.'L
Los medios de cultivo ron productos de alto precio, pero a pesar de esto los
. . i j consumidoras'imriartan en la adquir;iaOn de los mismos, debido a la gran aplicaci6n que 1 !
tienen en las diversas ramas a nivel industriel y sector salud.
3.7.3 Cantidad de compra.
En este caso 88 consideraron las encuestas reelizadas a diferentes sectores
donde 88 consume el medio de cultivo, localizados en la zona de estudio, obteni6ndose
los siguientes resultados.
65
. .
, ' , , SECTOR ' TOTAL DE MARCAS QUE CANTIDAD DEaCOMPRA
ENCUESTAS UTILIZAN ( BOTES / AfiO )
,. .
SALUD. ;7 3 4 Merck, Biox6n, 66
Difco y BBL.
, , , . . ,. . . .
'. 'L'., ,INSTITUCIONES DE 8 Merck, Bioxdn, BBL, 282
:' ', .: ,INVESTIGACION. Difco, Oipco y OxoM. . , 1 :
. . , I ' , .
. (
Biox6n y Merck 34
. . ' . Es importante mencionar qua los pfOVeOdOre6 pueden considerarse como índico !
pera evaluar el comportamiento de compra de le poblacidn con sumidora.
Como se observa, de acuerdo a los resultados anteriores, la cantidad de cotupra
de la poblsa6n consumidora es de 392 ( industria alimentaria, Instituciones do
investigacidn y Sector salud ). En promedio si se considera que existen 410 Industrias
aiimentarias, 326 lnshhrcionas da investigaden y 682 Instituciones de salud
aproximadamente; el volumen de venta llega a ser considerable por lo que se considera
que nuestro producto puede entrar en este mercado. ( ver fig. 2 ).
NST.
SALUD 8
:NTARIA : "r
MEDIOS DE .CULTIVO
67 . ._.
3.7.4 Frecuencia de Compra.
Esta determmacidn se Ilevd a cabo mediante encuestas a la poblaciijn
po~ndalmente consumidora, obtenibndose 108 slgulantee resultados:
FRECUENCIA DE CONSUMO
Cada 8Ao
Ceda 6 meses
2-3 meses
Cada mes
Diario
40.0
20.0
13.3
13.3
13.3
,. ." '. -
Cabe sefielar que lo anterior, es sold una estimacibn, ya que las compras do
medios de cultivo dependen de las necesidades¿p3 se tengan del producto, asl corno e1
sector al que vaya destinado, de esta forma, las empresas que dispongsn de niayor
capital podran invertir m8s en la compra de este producto y por el contrario los de menor
capital tendran compras reducidas.
68
Por medio de las encuestas dirigidas al sector Investigad6n, se observa que asta parte de la poblad6n consumidora, no estaría de acuerdo en utilizar un nuevo medio da d v o aunque bste ofredera ventajas, esto debido a que los trabajos de Investigecidn requieren de cierto grado de confiabilidad, el cual es proporcionado por los medios. de cuftivo que utilizan (Difco y Gibco).
69
Por otro lado se observa que en los ires sectores, hay personas que por ,
costumbre al manejo y ubliaa6n de un medio de cuttivo de determinada marca, no estarbn dispuestas a cambiar, y m& aún . s i tienen el conocimiento de que el medio de cuttivo es naaonal, ya que 60 tiene al hdbito de creer, que &lo las marcas internacionales son de prestigio y calihad.
4.3 POLITICQ. 3
En los últimos dos eAos se efectuaron reuniones entre los presidentes de Estados ' UnIdos, Mhico y Canada con miras a Inicier el Tratado de Libre Cornerdo.
. Con el cual se pretende mejorar el merco regulatorio para la protecci6n y desarrollo de nuevas tecnologlas y productos, estableciendo reglas simples y ampliando la coberlua a areas antes protegidas; como las invenciones biotecnol6gicas.
Con lo mencionado anteriormente y las pollticas de Salud que 68 establecen, QII
cuanto al estado rranftatlo de diversos productos (principalmente alimenticios), resultar5 . , necesario contar con un soporte para la calidad de los productos de tipo comestible con
un control microbioldgico tanta paro importadones como exportaciones. . .
Esto representa una aparente ventaja para la entrada del medio de cultivo propuesto en este estudio, Ein embargo se debe recordar que el Tratado Trilateral dar €i pauta a la enbreda de diversos productos entre los cuales, se encontraran otras marcas de medios de cultiuo de caracteristicas similares al propuesto, esto iniplicaris una mayor compertencla en el mercado.
70
682 66
328 282
20.26
42.84
Industria 418 34 6.40
Demanda Neta = 69.5 Tonleno
Se considera que 1 bote = 450 g.
71
72
75.78
Mediante un an4lisis estadlstico de los sectores consumidores en
anos anteriores, y realizando unm extrapolaci6n simple, se puede hacer una proyecci6n
para conocer el monto de la demanda en los proximos 5 aflos, ya que se supondrd que
73
. . e :
I
Por lo que realizando el endlisis estadlstico para los aAos 1887-1989, encuentra
al dgulenta modelo: Y - 1 .S7X - 3051 .M.
1995 80.49
1996 82.06
1997 83.63
I
74 153932
1993 1994 1995
ANOS 7 5
Para al producto en cuastibn, se presenta up tipo de demanda inelilstica, ya quo
. l
76
- MERCK MEXICO, S.A.
DIRECCION: Calle 5 # 7, Fraccionamiento Alce Blanco, Naucaipan, Edo de Mbxico, C.P. 53370, TelBfono 7-26-90-1 5, 3-58-29-33, Fax: 5-76-47-95,3-59-07-59.
77
DIRECCION: St. Louis, MU USA 63178-9816 En MBxlco las ofldnes qua dlstrlbuyen estos medios se encuentran en
las siguientes direcciones. Menzanillo 3W4, Colonia Roma Sur,C.P. 06760, MBxiico D.F., Tal6fono 5-64-1 8-23, Fax: 574-2342. General Le6n # 32, Colonia San Miguel Chapultepec, MBxico D.F., Telefono: 2-7 1-30-22.
El medio de cultivo EXTRACTO DE AMARANTO se enfrenta e grand4?s industrias, dedicadas a satisfacer todas las necesidades de los profesionales del Arca
'de Microbiologla e Industrias Particulares como lo son la Farrnac6utica, Alimentaria, Laboratorios de Andidis Cllnlcos, Hospitales, etc. Dentro de &stm necesidades, se encuentran las de cubrir una gran cantidad de reactivos e instrumentsr para medicidn y diagndst'co, siendo su campo de ventas muy amplio.
Se observa, que la diferenciecidn del producto se bas8 en actitudes competitivas dirigidas en la calidad del producto y a la promoci6n de las ventas. Estas empresas manipulen tres variables que son precio, producto y publicidad.
' . De acuerdo a las encuestas realizadas a consumidores, se observa que los
, ' medios de cultivo producidos por Metck y Oifco presentan ventajas en cuanto a , , .
calidad, mientras que Bioxdn y Dibico presentan ventajas en precio. , , , . . . . 1 . , ,
. . . .
2 , ) , , , ' . , . .
, . ,: . 1
. . , ' \
' . . . . I . '
. . . 6.3 CAPACIDAD INSTALADA
Para conocer y estimar los niveles de Producci6n y Capacidad Instalada de I:.IS
empresas consideradas como competencia, era necesario entrevistarse con el personal indicado de las compaflias respectivas, para contar con datos mas real.: ,
pero por p o l k a s de la empresa no se Iogrd obtener la informaci6n, ya que 1'3
requerido era conlidendal. Por lo anterior se consider6 la informad6n que pudierarl aportar los distt'ibuidores de esbs productos, tomando en cuenta que ellos podrim tener algún panorema sobre el comportamiento de la produccidn a lo largo dtz cierto tiempo.
Por nledio de encuestas aplicadas a los distribuidores del media de ct!kiw t i a
competencia, se obtuvo que la capacidad instalada dc la empresa Becton-Dil=~.ir?r,!:1 80
1 , .. , : I ' ! < ' ! .I ;; . . ; ' Otra alternativa para la publidded de nuestro producto, 68 la impresi6n de un ., I . L : ' : ! , ' anundo en la Gaceta publicada por Canlfarma, que tiene sus oficinas en Avenida
. . " ' i ' Cuauhtiimoc 1481 Col. Sta.' Cnu Atoyac, M6xico D.F., Tel. 0 88 96 16. El costo de ,este . . j anuncio es da N $ 250.00 por media pdgine, ' pera le impresidn 8610 es necesario
I ' llevar el anundo el cual es acomodado por el impresor. Esta gaceta es de.pubIkaci6n
, . : , , ;. L
I .
' . '
. . 8 1
, . , mensual y se cuenta con la ventaja de que es distribuida a 500 sodos inscritos. . . . I
. . , .
' , . . 3 '
. . . . . . . . $ ; 1 '. , . . . . : / , + : I . ~. . , . I . ? > . , '.. Debido al nulo conocimienb de la producci6n generada por la competencia para
' !<: . I , : t . ..)( 1) . !. .'I . .
. . . . . : c a l c u l a r la oferta actual en el mercado de medios de cultivo, se tuvo que efectuar un CBculo aproximado de la Cantidad posible de producto'$ desplazar, considerando tasas de crecimiento propuestas. Dichas tasas de crecimiento en cuanto a desplazamiento de mercado competitivo fueron generadas a partir de los datos obtenidos en las encuestas 1 y 2 (ya mencionadas con anterioridad); de estas se empleo informacidn con rospeclo a posibles consumidores del medio de cultivo EXTRACTO DE AMARANTO, as1 corm la cantidad que se consumirla.
Finalmente se obtuvo lo siguiente: Considerando los tres sectores (Investigaci6n, Salud e Industrias Ahentarins) y
a2
, . , : . . - . I 6.6 BALANCE OFERTA-DEMANDA , .
. .
. . i . Coma no se cuentan con datos de la producci6n de medios de. cultivo parecidos a . . ' 1 . EXTRACTO DE AMARANTO, no se pudo obtener en número, la oferta que hay en el .. '.' . , ,. . . mercado. . . ..' . Para saber si estaba cubierta la demanda se obtuvo inforrnacibn de los
I ' . . ., . '. 1' , ?;.proveedores mediante la apllcacfdn de una encuesta. Los resultados obtenidos nos . . indican que la demanda se encuentra satisfecha, ya que las empresas que surten los
.' I ,; . . I
. . I .
: , . . . . . . 1 .
3 . I
. .
>; ,,., , , '. , ' .
. ,
. ,
medios de cultivo ,no han tenido problemas para cubrir los pedidos . , ,
. . . ' ,. ). . ,
.. " . . . , . . . , . I
" .,-., . .
' , * . , I
I ' , ' , . , .
Tambibrl se obtuvo inforrnad6n de parte de los sectores consumidores, quienes concuerdan en el hecho de que el mercado esta satisfecho, ya que no han tenido problemas para consoguir el medio e incluso los proveedores que distribuyen rnedios do cultivo diferente 8 la marca que trabajan, los visitan continuamente.
63
. ..
' , . . . . ' ; : IX.',CONCLUSIONES GENERALES..' ' ,
, I
" 8
est6ndens.
Fue clara la superioridad de los medios de Amaranto no clarificados, al
favorecer el crecimiento de los hongos con la produccidn de exudados, mayor lndice de
esporulaabn, velocidad de creamiento y pigrnenbdh.
Por ob0 ledo aunque los medios clarificados no presentaron las mismas
caracterlsticas que los' medios de wMvo anteriores, logramos que estos medio6 fuoren
,Wcernente semejantes 8 los medios est8nderes.
c
. .
84
1 , . . I .
, '
en el mercado, pero con
85
7
.I. ,
' .
, "
. .
. I
ANEXOS
I'
ANEXÜ 1 w
. -
. .
. .
. .
t
ANEXO 3 -: :
CUESTlONARlO #l. + ,
. , I . ANALISIS DE MERCADO PARA LA ELABORACION DE MEDIOS DE CULTIVO PARA
HONGOS Y LEVAOURAS A BASE DE SEMILIA*DE AMARANTO.
. .
,
Encuesta para date~ iner la aceptabilldad del medio de cultivo.
Nombre , I
" Ocupacidn
Nombre de la instituddn a la que pertenece
, . . . * .. I ,
4 ' Todos los dias 3 veces por semana
De 1 a 2 veces por semana otro 8 . .
I .
I .
. I
7 ) ¿ Que tipo de estudios realiza en su tmbajo con hongos y/o levaduras 3 . , :. , ( .
. . . . I :
I . I .
:\ ' I , , , . , 8) En su campo da trabajo con estos microorganismos, le interesarla:
a) Incrementar la velocidad de crecimiento de hongos y levaduras en cultiva
b) Mejorar la expresi6n de las caracterlsticas rnorfolfiltims de hongos y levcdw AS .
eo
I
, . . . i
c) Aumentar producci6n de metabolitos.
d) Invertir menos dinero en la compra de medios de cultivo comerciales;
9) Si un mediode 6Mtivo a base de semilla de amaranto ¡e permitiera mejorar los
G Lo utilizarla usted ?
si -
.. Si su respuesta es negetiva. G Podria explicar las razones ?
. I
Si tiene alguna sugerencia sea tan amable de indicarnosla a contirluacidn.
MUCHAS GRACIAS POR SU COLABORACION.
91
ENCUEllTA PARA
92
I
7.- ¿Que capacidad instalada cree que tenga la empresa que elabora los niedios ds
cuttivo que usted distribuye?
83
04
l. AQUIAHUATL, M. lQQ2. . . MORFOLOCIA, FlSlOLOGlA . , ~ 2,
DETOXlFlCAClON DE LA PULPA O F CAFE Y BIOQUIMICA DE HONGOS FILAMENTOSOS
. . . , 1 . '
. I 2. ANUARIO ESTADlSTlCO.DE DISTRITO FEDERAL. 1992. INEGI. . I . ., . ,.
, ., , : , , . . . .
, . . .
3. DICCIONARIO DE ESPECIALIDADES'PARA LA INDUSTRIA ALIMENTARIA , .
. , "'. EDICIONES PLM. 314,
. I . , I , ' : : . . I .
: , I , . , ( '
,: .
6. ENCUESTA INDUSTRIAL MENSUAL. RESUMEN ANUAL 1968. INECI.
7 . ENCUESTA INDUSTRIAL MENSUAL. RESUMEN ANUAL. 1988. INEGI.
8. INFORMACION BASICA SOBRE LA LEY DE FOMENTO Y PROTECCJON DE LA PROPIEDAD INDUSTRIAL. 1991. SECRETARIA DE COMERCIO Y FOhtEN- TO INDUSTWAL . MEXICO. 13,17,18.
95
E
15. PROPIEDAD INDUSTRIAL. 1991. COORDINACION DE INVESTIGACION Y POSGRADO. UAM-I. MEXICO. 8 - 3 7 , 3 8 , 9 1 ,92.
96
8 ,
: I , , .
, . , . .
. , , I . , ' .
, . . .l6. fEACTJVOS DE DIAGNOSTICO, PRODUCTOS QUIMICOS. 1992. MERCK
. t . . I ,~ '
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8 , .. I i
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, ! : , " : ' , i ' , . " ' I
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"2 . < , * > : :: ;, ";; 5: . " ' .?: PROCESADAS D E ' A. HYPOCHONDRACUS. TESIS DE MAESTRIA.
i . . I .'. . t . . i , ( '
. ,
FACULTAD DE QUIMICA. UMAN. MEXICO. 1 - 9. ;! 11 )I
i;: ? $ {
q li 21. VELAZQUEZ. G. 1983. ADMINISTRACION DE LOS SISTEMAS DE PRODUC ' r 4 i; I
CION 5 ta. ed. Ed. LIMUSA. MEXICO. 125-133. .1 ? 1
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97