anÁlisis de criterios y requisitos internacionales para determinar la biocomparabilidad de...

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FACULTAD DE QUÍMICA

ANÁLISIS DE CRITERIOS Y REQUISITOS

INTERNACIONALES PARA DETERMINAR LA

BIOCOMPARABILIDAD DE PRODUCTOS QUE

CONTIENEN ERITROPOYETINA

TRABAJO ESCRITO VÍA CURSOS DE EDUCACIÓN CONTINUA

QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE:

QUÍMICO FARMACÉUTICO BIÓLOGO

PRESENTA:

JOSÉ MIGUEL PADILLA VALDEZ

MÉXICO, D.F. 2015

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JURADO ASIGNADO:

PRESIDENTE: INÉS FUENTES NORIEGA.

VOCAL: HELGI HELENE JUNG COOK.

SECRETARIO: KENNETH RUBIO CARRASCO.

1er. SUPLENTE: ROBERTO CARLOS CAÑAS ALONSO.

2° SUPLENTE: JORGE RAFAEL MARTÍNEZ PENICHE.

SITIO DONDE SE DESARROLLÓ EL TEMA:

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE QUÍMICA.

EDIFICIO D, DEPARTAMENTO DE EDUCACIÓN CONTINÚA.

CIRCUITO INSTITUTOS, CIUDAD UNIVERSITARIA, CP. 04510.

ASESOR DEL TEMA:

___________________________

Dra. Helgi Helene Jung Cook.

SUSTENTANTE:

___________________________

José Miguel Padilla Valdez.

3

ÍNDICE.

ABREVIATURAS……………………………………………………….. 4

1. INTRODUCCIÓN ……………………………………………………….. 5

2. OBJETIVOS ……………………………………………………………... 6

3. GENERALIDADES ……………………………………………………… 6

3.1 Medicamentos Biotecnológicos …………………………………. 6

3.2 El Eritrocito ………………………………………………………… 9

3.3 Eritropoyetina ……………………………………………………... 10

3.4 Estructura Bioquímica de la Eritropoyetina ……………………. 11

3.5 Estructura Bioquímica del Receptor de la Eritropoyetina ……. 13

3.6 Vías de Señalización de la Eritropoyetina ……………………... 14

3.7 Eritropoyetina Recombinante Humana ………………………… 15

3.8 Tipos de rHuEPO y Agentes Estimuladores de la

Eritropoyetina ………………………………………………………

16

3.9 Medicamentos Biosimilares ……………………………………... 21

3.10 Eritropoyetina Humana Recombinante Biosimilar …………… 23

4. METODOLOGÍA ………………………………………………………… 24

5. RESULTADOS ………………………………………………………….. 28

6. DISCUSIÓN ……………………………………………………………… 49

7. CONCLUSIONES ……………………………………………………….. 54

8. BIBLIOGRAFÍA ………………………………………………………….. 55

4

ABREVIATURAS

BFU-E Unidad Eritroide Estimulante de la Eritroaceleración.

CFU-E Unidad formadora de Colonias Eritrocítica.

CFU-GEMM

Unidad formadora de colonia Granulocito, Eritrocito, Megacariocito,

Monocito.

EPO Eritropoyetina.

EPO-R Receptor de Eritropoyetina.

FLT-3L Ligando de la Tirosina Fetal 3.

GM-CSF Factor Estimulante de colonias de Granulocitos y Monocitos.

Hb Hemoglobina.

IL-3 Interleucina 3.

IL-4 Interleucina 4.

JAK2 Proteína Janus Kinase 2.

rHuEPO Eritropoyetina Recombinante Humana.

SAT

Proteínas Transductoras y Activadoras de las señales de

Transducción.

SCF Factor de Células seminales.

TPO Trombopoyetina.

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1. INTRODUCCIÓN.

Los medicamentos obtenidos por biotecnología constituyen una nueva perspectiva

y representan el futuro de la terapéutica médica en el tratamiento de

enfermedades crónicas. Entre los productos desarrollados mediante biotecnología

se encuentran los fármacos constituidos por proteínas expresadas y producidas

con métodos de ingeniería genética y tecnología de recombinación de ADN, pero

también anticuerpos monoclonales producidos por tecnología de hibridación,

vectores (virus, moléculas lipídicas) para la transferencia genética, fragmentos de

anticuerpos, moléculas antisentido y vectores lipídicos para la formulación de

fármacos. Los medicamentos biotecnológicos reducen la mortalidad prematura,

disminuyen la morbilidad y, mejoran la calidad de vida de los pacientes.

El primer fármaco biotecnológico que salió al mercado fue la insulina humana

recombinante en el año de 1982. A principios del 2004, las patentes de la primera

generación de medicamentos biotecnológicos comenzaron a expirar, dejando las

puertas abiertas a otros fabricantes para producirlos. Actualmente se

comercializan en nuestro país, una serie de medicamentos biotecnológicos cuya

patente ha vencido, entre los cuales se encuentran: somatropina, interferón alfa-

2b, interferón beta-1a, interferón beta-1b, filgrastim, eritropoyetina, y antígeno

VHB. Debido a los altos costos de los innovadores, estos son intercambiados en la

práctica clínica (por las copias), sin embargo, no se conoce con certeza si estos

productos cumplen con las características que avalen su comparabilidad. A la

fecha, se han publicado diferentes guías y procedimientos para llevar a cabo las

pruebas que garanticen la similitud entre el producto innovador y los productos de

entrada subsecuente.

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2. OBJETIVO.

El objetivo del presente trabajo fue realizar una revisión de los criterios y requisitos

para evaluar la Biocomparabilidad de productos conteniendo eritropoyetina.

3. GENERALIDADES.

3.1 MEDICAMENTOS BIOTECNOLÓGICOS.

En la actualidad, la industria Farmacéutica es uno de los sectores empresariales

más influyentes del mundo. Se encuentra conformada por numerosas

organizaciones públicas y privadas enfocadas a realizar la investigación, el

desarrollo, fabricación y comercialización de medicamentos para la prevención o

tratamiento de las enfermedades humanas y animales. Existen diferentes

definiciones que se pueden utilizar para un medicamento, en nuestro país la

definición que se encuentra dentro del marco regulatorio de la Ley General de

Salud en su artículo 221 se refiere a un medicamento como:

“Toda sustancia o mezcla de substancias de origen natural o sintético que tenga

efecto terapéutico, preventivo o rehabilitatorio, que se presente en forma

farmacéutica y se identifique como tal por su actividad farmacológica,

características físicas, químicas y biológicas”. Cuando un producto contenga

nutrimentos, será considerado como medicamento, siempre que se trate de un

preparado que contenga de manera individual o asociada: vitaminas, minerales,

electrólitos, aminoácidos o ácidos grasos, en concentraciones superiores a las de

los alimentos naturales y además se presente en alguna forma farmacéutica

definida y la indicación de uso contemple efectos terapéuticos, preventivos

o rehabilitatorios” (Ley General de Salud, 2013).

En base a lo establecido previamente se puede definir de forma general que un

medicamento es una sustancia terapéutica que se utiliza para prevenir o tratar

7

enfermedades. Gracias a los avances realizados en las últimas décadas en el

campo de la biotecnología hoy en día se cuenta con un nuevo tipo de

medicamentos, los medicamentos biotecnológicos, a partir de los cuales se han

desarrollado nuevos tratamientos seguros y eficaces que han revolucionado el

campo de la medicina (Mikhail, A. 2013). En la actualidad ya se encuentran en el

mercado una gran variedad de medicamentos biotecnológicos entre los cuales se

encuentran: las proteínas recombinantes, los anticuerpos monoclonales, los

péptidos sintéticos y los plásmidos, entre otros. Entre los ejemplos más

destacados de medicamentos biotecnológicos que se utilizan actualmente se

pueden mencionar son: la eritropoyetina, indicada en el tratamiento de cuadros

anémicos, la insulina, indicada en el tratamiento de pacientes que padecen algún

tipo de diabetes y los interferones, empleados en el tratamiento de enfermedades

inflamatorias (Mikhail, A. 2013).

En nuestro país dentro del marco regulatorio del Reglamento de Insumos para la

Salud (RIS) en su artículo 81 define a un medicamento Biotecnológico como:

“Toda substancia que haya sido producida por biotecnología molecular, que tenga

efecto terapéutico, preventivo o rehabilitatorio, que se presente en forma

farmacéutica, que se identifique como tal por su actividad farmacológica y

propiedades físicas, químicas y biológicas” (Reglamento de Insumos para la

Salud, 2012).

Los medicamentos biotecnológicos se caracterizan por ser moléculas grandes y

complejas que se obtienen por elaborados procesos de producción en los cuales

el producto final es totalmente dependiente de cada una de las etapas del proceso

de fabricación. Los medicamentos biotecnológicos se obtienen empleando “células

vivas”, es decir, microorganismos o líneas celulares que han sido modificadas

genéticamente para la producción de una molécula deseada (Mikhail, A. 2013).

Como consecuencia, una de las características que resaltan en este tipo de

medicamentos es la gran variabilidad que puede existir en el medicamento al

finalizar el proceso de fabricación. Dicha variabilidad puede ocasionar alteraciones

clínicamente significativas en términos de seguridad y eficacia del producto final, o

bien provocar una respuesta inmunitaria no deseada en el paciente.

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Otra de las principales diferencias de estos nuevos medicamentos está

relacionada con el tamaño de la molécula, la cual generalmente es mucho mayor

en los medicamentos biotecnológicos (de 100 a 1000 veces mayor en algunos

casos). Sin embargo, la diferencia más significativa de este tipo de

medicamentos y que es causa de múltiples debates por los investigadores radica

en la estructura de la molécula. Debido a que de forma general estos

medicamentos son clasificados bioquímicamente como proteínas (en algunos

casos péptidos), las características particulares de cada tipo de proteína se

encuentran determinadas principalmente por dos factores de variación, el primer

factor radica en la secuencia de aminoácidos propia de la proteína y el segundo

se atribuye a los diferentes plegamientos así como las configuraciones espaciales

que puede adquirir la molécula. Al combinar estos factores se puede obtener una

explicación de la variabilidad y la dificultad que pueden presentar estos

medicamentos al tratar de obtener las versiones genéricas de los mismos.

La fabricación de los medicamentos biotecnológicos es un proceso muy exigente.

A continuación se describen las etapas generales del proceso:

1. Producción de la línea celular maestra que contiene el gen que permite

fabricar la proteína deseada.

2. Cultivo de grandes cantidades de células que producirán posteriormente la

proteína deseada.

3. Aislamiento y purificación de la proteína.

4. Preparación del tratamiento biológico para su uso en paciente.

En cada paso de este proceso, es fundamental mantener el entorno específico

que las células necesitan para seguir creciendo. Incluso los cambios sutiles

pueden afectar a las células y alterar las proteínas que producen (Amgen, 2014).

Por este motivo, se necesitan controles estrictos para garantizar la calidad y la

reproducibilidad del producto final.

9

3.2 EL ERITROCITO.

El término “anemia” se refiere por lo general a un estado en el cual la sangre tiene

un número menor de glóbulos rojos y hemoglobina de lo normal. Debido a lo

anterior, la sangre no tiene la capacidad de transportar la suficiente cantidad de

oxígeno a las células. En la actualidad se han descrito diversos tipos de anemias,

sin embargo las causas principales que provocan este padecimiento son: la falta

de producción de glóbulos rojos, un aumento en la velocidad de destrucción de

los glóbulos rojos y un aumento en la pérdida de glóbulos rojos por algún tipo de

sangrado (Guía Breve Sobre la Anemia, 2011).

Los glóbulos rojos o eritrocitos tienen como función principal transportar el oxígeno

desde los pulmones a los tejidos y eliminar el dióxido de carbono como desecho

del metabolismo de las células (Alegre, A. 2005). Para lograrlo, los glóbulos rojos

utilizan la proteína hemoglobina (Hb), la cual ocupa una tercera parte del volumen

total de los mismos. Dicho de otra manera la misión de los hematíes es proteger y

transportar la Hb para que ésta pueda realizar su función respiratoria. Para ello,

tanto el núcleo como las estructuras citoplasmáticas han sido reemplazadas por

una solución concentrada de Hb, en la que también se encuentran enzimas,

encargadas de mantener un reducido metabolismo celular (Palomo, I. 2009). Al no

tener núcleo, el eritrocito no puede replicarse ni sintetizar nuevas proteínas por lo

que los sistemas metabólicos de los hematíes se hacen progresivamente menos

activos con el tiempo, y las células se hacen más frágiles, debido a lo anterior el

tiempo de vida de un eritrocito en circulación sistémica es de aproximadamente

120 días (Palomo, I. 2009).

La eritropoyesis (formación de eritrocitos), es el proceso que se lleva a cabo en la

médula ósea mediante el cual se generan los eritrocitos a partir de una célula

madre pluripotente o progenitora. Durante este proceso, los eritrocitos pasan a

través de diferentes estadios de maduración transformándose en células cada vez

más especializadas, hasta alcanzar la circulación sanguínea (Palomo, I. 2009).

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Los eritrocitos se desarrollan a partir de la célula madre mieloide multipotencial

(CFU-GEMM) bajo la influencia de distintas citocinas como: la hormona

eritropoyetina (EPO), el factor estimulante de colonias de granulocitos y

monocitos (GM-CSF), la interleucina 3 (IL-3) y la interleucina 4 (IL-4). La célula

progenitora eritrocítica sensible a la eritropoyetina (CFU-E), da origen al primer

precursor eritrocítico reconocible el proeritroblasto (Palomo, I. 2009). El proceso

de maduración y diferenciación se encuentra caracterizado por: la síntesis

progresiva de hemoglobina, la reducción del tamaño nuclear y posteriormente la

expulsión del núcleo (como se observa en la figura 1) (Palomo, I. 2009). Es

importante mencionar que durante este proceso, la eritropoyetina (EPO) actúa

como una de las principales citocinas reguladoras en el proceso de maduración y

diferenciación del eritrocito (Jelkmann, W. 2003).

FIGURA 1. Etapas de la Eritropoyesis. (Tomado de Cummings, Benjamin. 2001).

3.3 LA ERITROPOYETINA

La eritropoyetina (EPO) es una hormona glucoproteica de 30.4 kDa compuesta

por 165 aminoácidos, la cual es secretada en respuesta a la hipoxia celular

(Jelkmann, W. 2011). Esta molécula es producida principalmente por las células

renales y en menor proporción por células hepáticas y actúa como una de las

principales citocinas reguladoras de la eritropoyesis (Palomo, I. 2009). Como se ha

mencionado, la hipoxia es el principal estímulo para su producción, sin embargo

algunas otras condiciones que desencadenan la producción de la EPO son: la

disminución de la hemoglobina en la sangre, la hipoglucemia, la disminución de la

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presión arterial, el aumento del calcio intracelular, la liberación de insulina y las

altas temperaturas (Jelkmann, W. 2003).

La actividad principal de la EPO es controlar la producción de células eritroides a

través de la promoción de la sobrevivencia, proliferación y diferenciación de

progenitores eritroides en la médula ósea. En las células progenitoras eritroides

tempranas (BFU-E), la EPO actúa como agente mitogénico y promueve su

proliferación, mientras que en progenitores eritroides tardíos (CFU-E), actúa como

agente de sobrevivencia (Miyajima, A. 1999). Es importante destacar que además

de la EPO, existen otras citocinas como: interleucina 3 (IL-3), trombopoyetina

(TPO), ligando de la tirosina fetal 3 (FLT-3L) y el factor de células seminales (SCF)

que también participan en la eritropoyesis. Estas citocinas son capaces de actuar

de forma sinérgica con la EPO y regular la proliferación, diferenciación y

sobrevivencia de células progenitoras y precursores eritroides (Oppenheim, J.

2001).

3.4 ESTRUCTURA BIOQUÍMICA DE LA EPO.

La EPO humana es una hormona que se encuentra conformada por dos partes. La

primera parte de esta hormona consta de 165 aminoácidos, la cual es la

responsable de la unión al receptor de EPO (EPO-R) (Jelkmann, W. 2005). La

segunda corresponde a la parte glicosilada y constituye el 35 – 40 % de la

molécula. La función que desempeñan estos carbohidratos es de resaltar, ya que

mejoran la estabilidad y prolongan el tiempo de vida media de la EPO en la

circulación sistémica (Alegre, A. 2005). La EPO es una Glicoproteína compuesta

por cuatro cadenas helicoidales unidas de forma antiparalela. Los carbohidratos

de esta molécula impiden la unión al EPO-R a través de fuerzas electrostáticas.

Además, la abundancia en residuos de ácido siálico disminuye la afinidad por el

receptor, pero aumenta la actividad de la EPO al prolongar el tiempo de vida

media debido a que disminuye su degradación.

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Señala las N- Glicosilaciones.

Señala las O-Glicosilaciones.

La estructura terciaria de la proteína se compone de 4 hélices-α antiparalelas, con

dos puentes disulfuro que se establecen entre cuatro cisteínas (Alegre, A. 2005).

La EPO humana se encuentra glicosilada en cuatro lugares distintos a lo largo

de la secuencia de aminoácidos. Como se observa en la figura 2, existen tres N-

Glicosilaciones en Asp24, 38, 83 y una O-Glicosilación en Ser126 de la cadena

de aminoácidos (Jelkmann, W. 2005). Es importante destacar que el número de

glicosilaciones y la cantidad de carbohidratos afectan las propiedades

farmacocinéticas de la misma en condiciones fisiológicas.

FIGURA 2. Patrón de Glicosilación de la EPO. Se muestran los sitios de glicosilación en la

cadena de aminoácidos de la EPO (Danishefsky, Samuel. 2013).

El contenido de carbohidratos de la molécula de EPO es del 35%. Los

carbohidratos de la glicoproteína son principalmente ácido siálico (11 %), hexosas,

N-Acetilglucosamina, N-acetilgalactosamina y ácido N-acetilneuramínico.

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La estructura y composición de los carbohidratos de la molécula de EPO son

importantes para el mantenimiento de la hormona en circulación. El ácido siálico

es necesario para el mantenimiento de la actividad biológica “in vivo”. La remoción

química o enzimática del ácido siálico, “desialación”, expone un residuo

galactosílico en la molécula que puede entonces ligarse rápidamente a receptores

de galactosa en los hepatocitos, lo que determina su metabolismo casi inmediato

en el hígado.

La glicosilación de la EPO también es necesaria para el transporte plasmático de

la hormona y para el paso de la misma desde la sangre a la médula ósea a través

de las células endoteliales de la barrera sangre-médula ósea.

La molécula de EPO humana posee 4 cisteínas ligadas por puentes internos de

disulfuro entre las cisteínas 29-33 y 7-161, cuya conservación es necesaria para el

mantenimiento de la actividad biológica. En tal sentido, la alquilación de los grupos

sulfhidrilos produce una pérdida irreversible de la actividad eritropoyética.

3.5 ESTRUCTURA BIOQUÍMICA DEL RECEPTOR DE EPO.

El receptor de la eritropoyetina (EPO-R) es un homodímero, por lo que se

encuentra conformado por dos cadenas de glicoproteínas de 484 aminoácidos

cada una de ellas, las dos sub-unidades del EPO-R se unen a una sola molécula

de EPO para poder ser activados (Alegre, A. 2005). El EPO-R se expresa

principalmente en las membranas de células inmaduras, se encuentra en mayor

proporción en las células progenitoras eritroides como CFU-E y BFU-E. Este

receptor pertenece a la familia de receptores de citocinas tipo 1, los receptores de

dicha familia se caracterizan por estar conformados por tres secciones bien

diferenciadas: una porción extracelular, una región transmembranal y finalmente

una porción intracelular (Jelkmann, W. 2005), las partes del receptor se muestran

en la figura 3. La región extracelular es la responsable de la dimerización de las

dos moléculas del receptor tras activarse con la unión de la EPO. La región

transmembranal se encuentra involucrada en la formación de dímeros y

multímeros constitutivamente activos. Finalmente la región intracelular se

encuentra involucrada en las distintas vías de señalización (Alegre, A. 2005).

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FIGURA 3. Estructura del EPO-R. Se muestran la región extracelular en color verde, la región

transmembranal en color morado y la región intracelular en color violeta

(Tomado de Brines & Cerami, 2005).

3.6 VIAS DE SEÑALIZACIÓN DE LA EPO.

Para que la EPO pueda llevar a cabo sus funciones en la maduración de las

células progenitoras eritroides, es necesario que se una a su receptor específico

(EPO-R). Como consecuencia de la unión de la EPO a su receptor se

desencadenarán una serie de cambios a nivel molecular. En primer lugar el

EPO-R sufre un cambio conformacional y la formación de un dímero estable en la

superficie de la célula (Alegre, A. 2005). Posteriormente, las proteínas cinasas

JAK2 (Janus kinase 2) que se encuentran asociadas a cada unidad del receptor

en la región citoplasmática se activan por transfosforilación. La fosforilación de las

proteínas JAK2 les permite fosforilar posteriormente a los residuos de tirosina

presentes en la región citoplasmática del EPO-R (Jelkmann, W. 2003). En estos

residuos fosforilados se crean sitios de unión a los cuales se les pueden unir

distintas moléculas que desencadenarán las distintas vías de señalización (como

se observa en la figura 4), una de las vías que se activa tras la unión de la EPO a

su receptor específico es la vía JACK/STAT (Alegre, A. 2005).

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FIGURA 4. Principales vías de la señalización activadas por la unión de la EPO a su receptor.

Se muestran las vías JACK/STAT, MAPK y PI3K/AKT (Tomado de Jelkmann, W. 2005).

En la activación de la vía JACK/STAT las proteínas STAT (proteínas

Transductoras y Activadoras de las señales de Transcripción) se unen a los

residuos de tirosina fosforilada, para que posteriormente estas proteínas STAT

sean fosforiladas por las proteínas JACK, tras esta fosforilación las proteínas

STAT se dimerizan para que posteriormente se puedan translocar al núcleo de la

célula en donde activan la transcripción de los genes relacionados con la

proliferación y la diferenciación eritroide (Valle Mendiola & Soto Cruz, 2005).

3.7 ERITROPOYETINA RECOMBINANTE HUMANA.

Hoy en día gracias a los distintos avances en al campo de la biología molecular

y otras disciplinas de la ciencia, el ser humano cuenta con una gran variedad de

medicamentos biotecnológicos que han revolucionado las opciones terapéuticas

para un gran número de padecimientos que no contaban con opciones de

tratamiento en el pasado. Entre los medicamentos biotecnológicos más

destacados de los últimos 25 años figura la eritropoyetina recombinante

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humana (rHuEPO), la cual es ampliamente utilizada en el mundo (García, F.

2011).

En 1977 Miyake y colaboradores purificaron a partir de orina humana a la

molécula de la EPO (Miyake, K, Kung, & Goldwasser, 1977), lo que permitió

dilucidar la secuencia de aminoácidos y la clonación del gen que posteriormente

fue expresado en células CHO (del inglés Chinese Hamster Ovary cells) dando

como resultado la rHuEPO (Fu Ken, Siddney, Chi Hweling, & Jeffrey, 1985).

Posteriormente, Eschbach y col. publicaron el primer ensayo clínico, demostrando

una corrección en la anemia causada por la insuficiencia renal terminal (IRT)

mediante la utilización de EPO humana recombinante (rHuEPO). Desde entonces,

se estableció la utilidad de la terapia con rHuEPO para mejorar otras anemias

asociadas diversos padecimientos como: La falla renal crónica, distintos tipos de

cáncer, enfermedades autoinmunes, VIH, Hepatitis C, entre otras (Jelkmann, W.

2003). Es importante señalar que hoy en día en los casos de anemias severas la

rHuEPO es utilizada para incrementar los niveles de eritrocitos y evitar de esta

forma el riesgo de contraer posibles infecciones post- transfusionales y mejorar la

calidad de vida del paciente (Jelkmann, W. 2003).

3.8 TIPOS DE rHuEPO Y AGENTES ESTIMULADORES DE LA ERITOPOYETINA.

De acuerdo a la Organización Mundial de la Salud (OMS) es necesario asignar

una Denominación Común Internacional (DCI, también llamado INN por sus siglas

en Ingles) para nombrar a las sustancias biológicas o biotecnológicas (World

Health Organization, 2008). La raíz utilizada para designar a los factores

biológicos tipo eritropoyetina es: “poetin”. Esta raíz debe ser designada a todas las

Eritropoyetinas que tengan la misma secuencia de aminoácidos que la

Eritropoyetina Humana. Además, se debe designar una letra griega para denotar

una diferencia en el patrón de glicosilación entre las eritropoyetinas (ej. Epoetin

alfa, Epoetin beta). Finalmente, si existe una diferencia en la secuencia de

aminoácidos en comparación con la Eritropoyetina Humana se debe utilizar un

prefijo distinto en la raíz del nombre principal (ej. Darbepoetina) (WHO, 2008).

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Desde su aprobación por la FDA en 1989 la rHuEPO y los agentes estimuladores

de eritropoyetina (ESA, Erythropoietin Stimulating Agents) se han convertido en

un estándar en el tratamiento de la anemia causada por la deficiencia en la

producción de la EPO (Hayat, Dhiren , & Moro O , 2008) como es el caso de los

pacientes que sufren una enfermedad renal crónica.

Las primeras eritropoyetinas recombinantes humanas que estuvieron disponibles

en el mercado fueron la Epoetin-alfa y la Epoetin-beta hace ya aproximadamente

25 años. En ambos casos la secuencia de aminoácidos es exactamente igual, sin

embargo la diferencia principal entre ellas radica en el patrón de glicosilación

(Casadevall, N. 2009), debido a esta diferencia los tiempos de vida media entre la

Epoetin-alfa y la Epoetin-beta mostraron ser distintos en cada caso.

La mayor desventaja de estas eritropoyetinas radicó en el tiempo de vida media

corto en circulación sistémica, de 6 a 8 horas, por lo que era necesario administrar

una inyección dos o tres veces por semana (Macdougall, C. 2008).

Posteriormente, se desarrollaron la Epoetin–omega y la Epoetin-delta, la

diferencia en este tipo de eritropoyetinas en comparación con la Epoetin-alfa y la

Epoetin-beta radicó en la línea celular utilizada para su producción (tabla 1). De

forma general al conjunto de estas eritropoyetinas se les denominó de primera

generación, a pesar de que se utilizaron líneas celulares distintas para su

producción, estas eritropoyetinas presentaban 2 cosas en común, la misma

secuencia de 165 aminoácidos que la eritropoyetina endógena y un tiempo de vida

media corto en circulación sistémica (Macdougall, C. 2008).

Posteriormente, las empresas farmacéuticas se enfocaron en desarrollar nuevos

tipos de eritropoyetinas que presentaran un mayor tiempo de vida media en

circulación sistémica, disminuyendo así la necesidad de varias administraciones

en los pacientes.

La siguiente generación de eritropoyetinas tuvo como objetivo el desarrollo de

eritropoyetinas con una mayor duración en circulación sistémica. Darbepoetin alfa

se catalogó como una eritropoyetina de segunda generación, ya que se

caracterizó por triplicar el tiempo de vida media en circulación sistémica. Para

lograrlo se adicionaron cinco aminoácidos a la secuencia original de la

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eritropoyetina endógena permitiendo así dos sitios de N-glicosilaciones adicionales

en la molécula lo cual dio como resultado un incremento significativo en el tiempo

de vida media (Macdougall, C. 2008).

La tercera generación de eritropoyetinas se encuentra representada por el

“Activador Continuo del Receptor de la Eritropoyetina” (CERA, Continuos

Erythropoietin Receptor Activator), cuyo nombre comercial es Mircera ®, su

característica principal radica en la adición de una cadena de metoxi-

polietilenglicol a la secuencia de aminoácidos de la Epoetin-beta (Lys 45 o Lys 52)

(Thieme & Hemmersbach, 2010). Debido a esta adición se incrementó el tamaño

de la molécula de 30 kDa a 60 kDa, además se observó un incremento

significativo en el tiempo de vida media, aproximadamente de 130 horas,

permitiendo así reducir el esquema de dosificación a una sola administración del

medicamento cada dos semanas (Thieme & Hemmersbach, 2010).

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TABLA1. Tipos de Eritropoyetinas recombinantes Humanas y Eritropoyetinas Biosimilares

( Modificado de Thieme D. 2010 ).

DENOMINACIÓN

COMÚN

INTERNACIONAL

NOMBRE

COMERCIAL

TIEMPO DE

VIDA MEDIA

t ½ ( Horas )

COMPAÑÍA

FARMACÉUTICA

LÍNEA

CELULAR

Primera Generación

Epoetin-alfa. Epogen®. Procrit®. Eprex®.

IV: 4 - 13. IV: 4 - 13. IV: 4 - 6.

Amgen. Ortho Biotech. Janssen-Ortho.

CHO

Epoetin-beta.

Recormon®. NeoRecormon®

IV: 4 - 12. SC: 13 - 28.

Boehringer Mannheim. Roche.

CHO-DN2-3α3

Epoetin-omega. EpoMax®.

Elanex®. Epomega®. Repotina®.

SC: 23 - 33

Elanex

Pharmaceuticals.

Baxter

BHK

Epoetin-delta.

Dynepo®.

IV: 7 - 20. SC: 18 - 20.

Shire Pharmaceuticals

Human Fibrosarcoma cell Line HT- 1080

Segunda Generación

Darbepoetin

Alfa.

Aranesp® IV: aprox. 25 SC: 27 - 89

Amgen

CHO

Tercera Generación

Continuous

Erythropoietin Receptor Activator (CERA)

Mircera®. IV: 134 ± 65 SC: 139 ± 69

Roche

CHO

BHK: Baby Hamster Kidney cells. CHO: Chinese Hamster Ovary cells.

IV: Administración Intravenosa. SC: Administración Sub-Cutánea.

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TABLA1. (Continuación) Tipos de Eritropoyetinas recombinantes Humanas y Eritropoyetinas

Biosimilares

( Modificado de Thieme D. 2010 ).

DENOMINACIÓN

COMÚN

INTERNACIONAL

NOMBRE

COMERCIAL

TIEMPO DE

VIDA MEDIA

t ½ ( Horas )

COMPAÑÍA

FARMACÉUTICA

LÍNEA

CELULAR

B I O S I M I L A R E S

Epoetin-alfa HX575.

Abseamed®.

Binocrit®.

Epoetin alfa Hexal®.

IV: 4 – 5 SC: aprox. 24

IV: 4 – 6

SC: aprox. 24

IV: 4 – 6 SC: aprox. 24

Medice Arzneimittel Putter. Sandoz GmbH. Hexal Biotech. CHO

Epoetin-zeta SB309

Retacrit®

Epobel®

IV: 4 – 6 SC: aprox. 24

IV: 4 – 6

SC: aprox. 24

Hospira. STADA

BHK: Baby Hamster Kidney cells. CHO: Chinese Hamster Ovary cells.

IV: Administración Intravenosa. SC: Administración Sub-Cutánea.

21

3.9 MEDICAMENTOS BIOSIMILARES.

Desde la aprobación de la insulina humana recombinante en 1982 se ha

observado un incremento en la aceptación de un número mayor de medicamentos

biológicos por parte de las distintas entidades regulatorias como los son la EMA y

la FDA ( Mikhail & Farouk, 2013). Durante los últimos años muchas de las

patentes de estos medicamentos biológicos han expirado o en su defecto están

próximas a expirar, lo que ha permitido la apertura de un nuevo mercado a

muchas industrias farmacéuticas en cuanto a la manufactura y comercialización de

las versiones “similares” de estos medicamentos biológicos ( Mikhail & Farouk,

2013).

Estos medicamentos se describen en forma general como “Medicamentos

Biosimilares” o como son llamados en nuestro país “Medicamentos

Biocomparables” (en el presente trabajo se describirán como biosimilares). De

acuerdo con la EMA se define a un medicamento biosimilar como:

“Un medicamento biosimilar es un medicamento biológico que se desarrolla para

que sea similar a un medicamento biológico ya existente (el «medicamento de

referencia»). Los biosimilares no son iguales a los genéricos, que tienen

estructuras químicas más simples y se consideran idénticos a sus medicamentos

de referencia. El principio activo de un biosimilar y su medicamento de referencia

es esencialmente la misma sustancia biológica, aunque existen ligeras diferencias

debido a la complejidad de su naturaleza y a los métodos de producción”

(European Medicines Agency, 2012).

En la práctica clínica la introducción de los medicamentos biosimilares ha

permitido a los pacientes el acceso a nuevas terapias que anteriormente tenían

un muy alto costo. Sin embargo, de acuerdo a los expertos en el tema y a la

definición previa, los medicamentos biosimilares no son exactamente iguales a los

innovadores que se han utilizado como referencia, esto debido al complejo

proceso de producción que involucra múltiples etapas y factores que hacen

imposible reproducir las moléculas con la misma exactitud ( Mikhail & Farouk,

2013), lo que ha causado gran polémica respecto al uso de los mismos.

22

Además de las múltiples etapas en los procesos de producción, se debe resaltar la

gran variabilidad que puede existir en estos medicamentos al tratarse de un

proceso llevado a cabo en un modelo biológico. Por lo anterior los expertos se

cuestionan si estas versiones de medicamentos biosimilares son capaces de

cumplir con el perfil de seguridad, eficacia y calidad que deben de cumplir los

medicamentos genéricos de síntesis tradicional para su aprobación por parte de

las Entidades Regulatorias.

Uno de los temas más debatidos por las distintas autoridades sanitarias y los

diversos investigadores a nivel mundial sobre el uso de los medicamentos

biosimilares es la inmunogenicidad. El concepto de inmunogenicidad se define

como la capacidad de un compuesto (ej. una proteína) para inducir una

respuesta inmune (ej. anticuerpos anti-medicamentos). Las consecuencias de

estas respuestas inmunológicas pueden ser variadas y a menudo impredecibles.

Se han descrito diversas reacciones que van desde la disminución en la eficacia

del medicamento, hasta la inducción del sistema inmunológico para lo formación

de anticuerpos específicos que neutralicen a la molécula terapéutica en cuestión o

en el peor de los casos que neutralicen la molécula nativa/endógena del paciente

(Schellekens, H. 2009). Un ejemplo de lo anterior fue reportado en 1998 cuando

debido a una reformulación de la Epoetin-alfa (Eprex®) se observó un incremento

en el número de pacientes con daño renal, que desarrollaron aplasia pura de la

serie roja (eritroblastopenia) debido a que desarrollaron anticuerpos anti

eritropoyetina (Bennett, C. 2005). Los cambios involucrados en la formulación

fueron dos, en primer lugar se cambió la vía de administración de intravenosa a

subcutánea y en segundo lugar se cambió a la Albúmina sérica humana por

Polisorbato 80 como estabilizador (Schellekens, H. 2006).

Los factores que pueden desencadenar inmunogenicidad en un paciente pueden

estar relacionados a: los cambios en la estructura de la molécula, cambios en la

secuencia de los aminoácidos, cambios en la secuencia de glicosilación,

impurezas y contaminantes en el medicamento, e incluso las condiciones de

transporte y almacenamiento del producto final. En cuanto a los factores

relacionados con los pacientes es importante mencionar: la vía de administración,

23

el régimen de dosificación, la duración del tratamiento, así como el padecimiento a

tratar del paciente (Schellekens, H. 2009).

3.10 ERITROPOYETINA HUMANA RECOMBINANTE BIOSIMILAR.

A finales del año 2007 las primeras eritropoyetinas biosimilares “Epoetin-alfa

(HX575)” y “Epoetin-zeta (SB309)” fueron aprobadas por la Agencia Europea de

Medicamentos (EMA). Para evaluar la comparabilidad de estas versiones

biosimilares se realizaron estudios preclínicos, farmacocinéticos,

farmacodinámicos, así como ensayos clínicos fase 3 para evaluar la seguridad y

eficacia de los mismos. Los estudios realizados le permitieron a la EMA

determinar la similitud entre las versiones biosimilares y el medicamento

innovador. Sin embargo, los investigadores señalan que los márgenes para

evaluar la equivalencia de las versiones biosimilares son muy amplios, por lo que

no sería posible discriminar las diferencias en la seguridad y la eficacia de estos

medicamentos.

Debido a que la inmunogenicidad, es un criterio muy importante para la evaluación

de la seguridad de los medicamentos biocomparables, además de los reportes de

Aplasia Pura de la Serie Roja vinculados con la reformulación de la Epoetin-alfa

(Eprex®), los investigadores se cuestionan seriamente si los requerimientos

establecidos por las distintas entidades regulatorias son los adecuados para

garantizar la seguridad, eficacia y calidad de las eritropoyetinas biosimilares.

24

4. INVESTIGACIÓN REALIZADA. METODOLOGÍA.

La metodología a seguir fue la siguiente:

Se llevó a cabo una búsqueda de las guías publicadas por la FDA,

Health Canada, OMS y México, así como las establecidas por la EMA

para determinar la biosimilitud de productos conteniendo eritropoyetina.

En caso de que no existieran guías específicas para eritropoyetina, se

revisaron las guías generales para la evaluación de productos biosimilares.

La revisión consistió en los criterios Fisicoquímicos, Estudios Preclínicos y

Estudios Clínicos requeridos para determinar la biosimilitud.

Posteriormente se llevó a cabo la comparación entre ellas.

Las guías revisadas para el presente trabajo fueron las siguientes:

1) European Medicines Agency (EMA):

Guideline on similar biological medicinal products. (CHMP/437/04 Rev 1).

Guideline on Similar Biological Medicinal Products containing Biotechnology

derived Proteins as Active Substance: Quality Issues.

(EMA/CHMP/BWP/247713/2012).

Guideline on non-clinical and clinical development of similar biological

medicinal products containing recombinant erythropoietins (Revision).

(EMEA/CHMP/BMWP/301636/2008).

Guideline on immunogenicity assessment of biotechnology-derived

therapeutic proteins. (EMEA/CHMP/BMWP/ 14327/2006).

Specifications: Test procedures and acceptance criteria for new drug

biotechnological/biological products. Q6B. (CPMP/ICH/365/96).

25

Note for guidance on toxicokinetics: A guidance for assessing systemic

exposure in toxicological studies. S3A. (CPMP/ICH/384/95).

Note for guidance on repeated dose toxicity. (CPMP/SWP/1042/99).

Note for guidance on non-clinical local tolerance testing of medicinal

products. (CPMP/SWP/2145/00).

2) Food and Drug Administration (FDA):

Guidance for Industry, Scientific Considerations in Demonstrating

Biosimilarity to a Reference Product. U.S. Department of health and

Human Services, Food and Drug Administration, April 2015.

Guidance for Industry, Quality Considerations in Demonstrating Biosimilarity

of a Therapeutic Protein Product to a Reference Product. U.S. Department

of health and Human Services, Food and Drug Administration, April 2015.

Guidance for Industry, Immunogenicity Assessment for Therapeutic Protein

Products. U.S. Department of health and Human Services, Food and Drug

Administration, August 2014).



Preclinical safety evaluation of biotechnology-derived pharmaceuticals.

S6(R1). (CPMP/ICH/302/95).

Guidance for Industry, Statistical Approaches to Establishing

Bioequivalence. U.S. Department of health and Human Services, Food and

Drug Administration, January 2001.

26

3) Health Canada:

Guidance for Sponsors: Information and Submission Requirements for

Subsequent Entry Biologics (SEBs). Health Canada, March 2010.



Preclinical safety evaluation of biotechnology-derived pharmaceuticals. S6

(R1). (CPMP/ICH/302/95).

Pharmacovigilance planning. E2E (CPMP/ICH/5716/03).

4) Expert Committee on Biological Standardization (OMS):

Guidelines on Evaluation of similar biotherapeutic products (SBPs). WHO

Expert Committee on Biological Standardization, WHO Technical Report

Series No. 977, 2013.

Preclinical safety evaluation of biotechnology-derived pharmaceuticals. S6

(R1). (CPMP/ICH/302/95).

Choice of control group and related issues in clinical trials (E10). Geneva,

International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for

Registration of Pharmaceuticals for Human Use, 2000.

Statistical principles for clinical trials (E9). Geneva, International Conference

on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of

Pharmaceuticals for Human Use, 1998.

Pharmacovigilance planning. E2E (CPMP/ICH/5716/03).

27

5) En el caso de México se consultaron:

Ley General de Salud, publicada en el Diario Oficial de la Federación,

última reforma 04 de Diciembre de 2013.

Reglamento de Insumos para la Salud, publicado en el Diario Oficial de la

Federación, última reforma 09 de Octubre de 2012.

Reglamento de la Ley General de Salud en materia de investigación para la

Salud, publicado en el Diario Oficial de la Federación el 06 de Enero de

1987.

Reglamento Interior del Comité de Moléculas Nuevas, publicado en el

Diario Oficial de la Federación, última reforma 23 de Abril de 2012.

Norma Oficial Mexicana NOM-059-SSA1-2013, “Buenas prácticas de

fabricación de medicamentos”, publicada en el Diario Oficial de la

Federación el 22 de Julio de 2013.

Norma Oficial Mexicana NOM-177-SSA1-2013, “Que establece las pruebas

y procedimientos para demostrar que un medicamento es intercambiable.

Requisitos a que deben sujetarse los Terceros Autorizados que realicen las

pruebas de intercambiabilidad. Requisitos para realizar los estudios de

biocomparabilidad. Requisitos a que deben sujetarse los Terceros

Autorizados, Centros de Investigación o Instituciones Hospitalarias que

realicen las pruebas de biocomparabilidad”, publicada en el Diario Oficial de

la Federación el 20 de Septiembre de 2013.

Norma Oficial Mexicana NOM-220-SSA1-2012, “Instalación y operación de

la Farmacovigilancia”, publicada en el Diario Oficial de la Federación el 07

de Enero de 2013.

Norma Oficial Mexicana NOM-257-SSA1-2014, “En materia de

Medicamentos Biotecnológicos”, publicada en el Diario Oficial de la

Federación el Jueves 11 de diciembre de 2014.

28

6. RESULTADOS.

En la tabla 2 se presenta un cuadro comparativo de los criterios y requisitos para

evaluar la biocomparabilidad de los productos biotecnológicos conteniendo

eritropoyetina, los cuales se subdividieron en:

1) El análisis comparativo a través de la caracterización estructural y fisicoquímica

de los medicamentos.

2) Los estudios Pre-clínicos in vitro/ in vivo para la evaluación de los parámetros

PK, PD, toxicocinética e inmunogenicidad.

3) Los Ensayos Clínicos, en los cuales se describen las pruebas necesarias para

la evaluación de los parámetros PK, PD, y de eficacia en humanos, así como la

inmunogenicidad.

4) El plan de Farmacovigilancia para monitorear las posibles reacciones Adversas

del medicamento (RAMs).

29

Tabla 2. CUADRO COMPARATIVO DE LOS CRITERIOS Y REQUISITOS PARA EVALUAR LA BIOCOMPARABILIDAD DE LOS PRODUCTOS QUE CONTENGAN EPO.

ENTIDADES REGULATORIAS. Comunidad Europea

(EMA) Canadá (Health Canada).

Estados Unidos de América (FDA)

OMS Expert Committee on Biological Standardization

México (COFEPRIS).

NOMBRE ESTABLECIDO.

Similar Biological Medicinal Product.

(Biosimilar)

Medicamento Biológico de entrada Subsecuente.

(SEB)

Medicamento Biológico Biosimilar

(Biosimilar)

Similar Biotherapeutic Products

(SBPs)

Medicamento Biotecnológico Innovador.

(Biocomparable)

GUÍA PRINCIPAL

Guideline on Non-clinical and Clinical Development

of similar biological medicinal products

containing recombinant erythropoietins.

ESPECÍFICA

Information And

Submission Requierements for Subsequent Entry

Biologics(SEBs)

GENERAL

Scientific Considerations in Demonstrating Biosimilarity

to a Reference Product Guidance for Industry

GENERAL

Guidelines on evaluation of

similar biotherapeutic products (SBPs).

GENERAL

Norma Oficial Mexicana

NOM-177-SSA1-2013

GENERAL

a) REQUISITOS PREVIOS AL ESTUDIO DE BIOSIMILITUD.

1) CARACTERIZACIÓN FISICOQUÍMICA.

1. CARACTERIZACIÓN. Las pruebas necesarias para realizar el análisis comparativo son:

1. CARACTERIZACIÓN.

La caracterización se llevará a cabo mediante los requisitos establecidos en la guía:

1. ANÁLISIS ESTRUCTURAL/ CARACTERIZACIÓN FISICOQUÍMICA.

Los patrocinadores deben llevar a cabo una amplia caracterización estructural tanto del producto

1. CARACTERIZACIÓN.

Realizar una caracterización fisicoquímica exhaustiva del RBP (Referencia) y del SBP (Prueba)

1. CARACTERIZACIÓN

Se deberán evaluar las siguientes

características de los medicamentos

biotecnológicos, las que deberán ser

Tabla 2. CUADRO COMPARATIVO DE LOS CRITERIOS Y REQUISITOS PARA EVALUAR LA BIOCOMPARABILIDAD DE LOS PRODUCTOS QUE CONTENGAN EPO (Continuación).

30

Composición de Aminoácidos.

Secuencia Amino- y Carboxi- terminal.

Mapeo de Péptidos. (Determinación de la estructura primaria).

Determinación de Grupos SH y puentes Disulfuro.

Determinación de la estructura secundaria y terciaria.

Caracterización de hidratos de Carbono.

Análisis estructural de N-

glicanos. Análisis estructural de O-

glicanos. Ác. Siálico.

2. PROPIEDADES FÍSICAS.

Para el desarrollo del análisis comparativo se deben determinar las siguientes propiedades del principio activo de ambos medicamentos biológicos:

Peso Molecular.

Estado de agregación.

Punto de Fusión.

Patrón de Isoformas.

Patrón electroforético.

ICH Q6B Test Procedures and Acceptance Criteria for Biotechnological/biological Products La caracterización del SEB y el medicamento biológico de referencia se llevará a cabo mediante la determinación de:

La determinación de las propiedades fisicoquímicas.

La actividad biológica.

Propiedades Inmunoquímicas.

Determinación de pureza e impurezas, contaminantes.

Los criterios de aceptación deben ser establecidos y justificados.

2. PROPIEDADES FÍSICAS.

Peso o tamaño Molecular.


Coeficiente de extinción

(o absortividad molar).

Patrones electroforéticos.

Perfiles espectroscópicos.

Patrones de cromatografía

líquida.


Propiedades Inmunoquímicas

Pureza e impurezas.

propuesto y el producto de referencia en varios lotes representativos. En general, las pruebas de caracterización incluyen la determinación de:

La Estructuras primaria (la secuencia de aminoácidos).

Las estructuras de orden superior, incluidas, y la estructura cuaternaria, terciaria y secundaria (incluyendo la agregación).

Modificaciones enzimáticas postraduccionales.

Glicosilación. Fosforilación. Desamidación. Oxidación de

proteínas.

Modificaciones químicas intencionales.

Sitios de PEGilación.

Además para la caracterización se debe de tomar en cuenta: 1.1 Sistema de expresión. 1.2 Proceso De Manufactura. 1.3 Evaluación de las propiedades fisicoquímicas. La Evaluación de las propiedades Fisicoquímicas se llevará a cabo De acuerdo a la ICH Q6B.

utilizando las técnicas bioquímicas, biológicas y analíticas apropiadas. Es necesario proporcionar para el principio activo:

Estructura primaria.

Estructuras de Orden superior.

Modificaciones post-traduccionales (incluyendo, pero no limitado a, glicoformas).

Actividad biológica.

Pureza /impurezas.


Si se encuentran diferencias entre el SBP y el RBP, su impacto potencial en la seguridad y eficacia de debe ser evaluado. El conocimiento de las limitaciones de cada técnica de análisis utilizados para caracterizar el producto (por ejemplo, límites de sensibilidad, poder de resolución) debe ser valorado al determinar la similitud. La medición de atributos de calidad en los estudios de caracterización no requieren necesariamente el uso de ensayos validados, pero los ensayos deben ser científicamente sólidos y calificados. Estos deben proporcionar resultados que sean significativos y fiables.

comparables:

Identidad.

Estructura.

Contenido de ácido siálico.

Modificaciones post-

traduccionales.

Punto isoeléctrico.

Glicosilación.

Actividad biológica

2. CALIDAD.

Se deberán demostrar en el

medicamento biocomparable las

siguientes características de pureza y

estabilidad:

Ausencia de otras proteínas

además de la de interés. Será

necesario demostrar una pureza

no menor del 95 %.

Cuantificación de impurezas

relacionadas al producto.

Presencia de proteína modificada

químicamente (oxidación,

desaminación, glicación, etc.) o

variantes, como puede ser

agregados o productos de

proteólisis del producto de interés.

Cuantificación de impurezas

relacionadas al proceso. ADN

residual, proteínas de hospedero,

endotoxinas, agentes biológicos

endógenos o adventicios,

substancias utilizadas en la


31

Punto Isoeléctrico.

3. ACTIVIDAD BIOLÓGICA.

Se deben incluir una evaluación de las propiedades biológicas como un paso esencial en el perfil de caracterización por medio de:

Ensayos de unión a receptor

(in vitro / in vivo).

Ensayos de Actividad biológica.

(in vitro / in vivo).


La actividad biológica debe ser

proporcionada por el fabricante.

Los ejemplos de procedimientos

utilizados para medir la actividad

biológica incluyen:

Ensayos biológicos de origen

animal, que miden la

respuesta biológica de un

organismo para el producto.

Ensayos biológicos a nivel

celular, que determinen la

respuesta bioquímica o

fisiológica a nivel celular.

La caracterización del medicamento biosimilar el medicamento biológico de referencia se llevará a cabo mediante la determinación de:

La determinación de las propiedades fisicoquímicas.

La actividad biológica.


Determinación de pureza e impurezas, contaminantes.

Los criterios de aceptación deben ser establecidos y justificados.

1.3.1 Propiedades Físicas.

Peso o tamaño Molecular.


Coeficiente de extinción (o absortividad molar).

Patrones electroforéticos.


Patrones de cromatografía líquida.


Propiedades Inmunoquímicas

Pureza e impurezas.

1.3.2 Actividad Biológica. La actividad biológica debe ser proporcionada por el fabricante. Los ejemplos de procedimientos utilizados para medir la actividad biológica incluyen:


Es necesario realizar un ensayo biológico relevante (s) con precisión y exactitud apropiada para confirmar que no hay diferencia funcional significativa entre el SBP y el RBP.

Debido a que la potencia es la medida cuantitativa de la actividad biológica, un ensayo de potencia validado debe ser parte de la caracterización del SBP y RBP. Los resultados de la prueba de potencia deben ser proporcionados y expresados en unidades de actividad.

producción, como inductores,

inhibidores de proteasas u otros

contaminantes potenciales.

3. ESTABILIDAD.

Se realizarán estudios de estabilidad

en tiempo real, estabilidad acelerada y

pruebas de estrés. Deberán utilizarse

contenedores representativos del que

se utilizará para el almacenamiento del

biofármaco y el medicamento

biotecnológico durante su manufactura

y comercialización.

Se deberán presentar las

especificaciones, métodos de

análisis y certificados analíticos de

manera comparativa realizados a

3 lotes del medicamento

biotecnológico no innovador

versus 3 lotes del medicamento

biotecnológico de referencia.

En el caso de que se utilicen

métodos no farmacopeicos

deberán presentar la validación

correspondiente de acuerdo a la

NOM-177-SSA1-2013.

La validación de los métodos

deberán considerar por lo menos

los siguientes parámetros:

linealidad, precisión, LOD/LOQ,

robustez, especificidad,

comparación de lote a lote y

estabilidad.


32

Ensayos biológicos de origen animal, que miden la respuesta biológica de un organismo para el producto.

Ensayos biológicos a nivel celular, que determinen la respuesta bioquímica o fisiológica a nivel celular.

1.4 Ensayos de funcionalidad. 1.5 Afinidad por el receptor / Propiedades Inmunoquímicas.

Para algunas sustancias

farmacéuticas o productos de drogas,

puede necesitar ser examinado

utilizando procedimientos

inmunoquímicos, por ejemplo ICH

Q6B.

ELISA.

Western-Blot.

1.6 Impurezas.

1.7 Producto de referencia /

Estándares de referencia. (ICH

Q6B)

Una evaluación fisicoquímica y

biológica a fondo se debe de

desarrollar del producto de

referencia que proporcione una

base de información necesaria

para justificar la dependencia


33

de ciertos conocimientos

científicos existentes sobre el

producto de referencia.

1.8 Producto Terminado ICH Q8

(R2).

1.9 Estabilidad. ICH Q5C, ICH Q1A

(R2).

b) REQUISITOS PARA EL ESTUDIO DE BIOSIMILITUD.

2) ESTUDIOS PRE-CLÍNICOS

Comunidad Europea (EMA)

Canadá (Health Canada). Estados Unidos de América

(FDA)


México (COFEPRIS).

1. ESTUDIOS FARMACOLÓGICOS.

Estudios In vitro Se deben realizar los estudios comparativos entre el medicamento biológico similar y el medicamento biológico de referencia:

Ensayos de unión a

receptor (in vitro / in vivo, Línea celular eritroleucémica humana).

Ensayos de Actividad biológica. (in vitro / in vivo).

Ensayos de Proliferación

1. GENERALIDADES.

De acuerdo a lo establecido

en la (ICH S6 R1), los estudios

pre-clínicos deben de

considerar:

Selección de una especie

relevante.

Edad.

Estado Fisiológica.

Estabilidad del material a

probar en las condiciones

normales de uso.

Se debe de establecer la dosis, vía de administración y régimen de dosificación.

1. GENERALIDADES.

De acuerdo a lo establecido en la

(ICH S6 R1), los estudios pre-clínicos

deben de considerar:

Selección de una especie

relevante.

Edad.

Estado Fisiológica.

Estabilidad del material a probar

en las condiciones normales de

uso.

Se debe de establecer la dosis, vía

de administración y régimen de

1. ESTUDIOS FARMACOLÓGICOS.

Previamente a los estudios pre-clínicos es necesario demostrar un alto grado de similitud molecular entre la SBP y el RBP debería reducir significativamente la necesidad de estudios no clínicos. En el diseño apropiado del estudio pre-clínico se debe de tomar en cuenta la guía: (ICH S6 R1).

2. Estudios in vitro.

Se deben realizar estudios de unión al

1. GENERALIDADES. El Comité de Moléculas Nuevas previa consulta al Subcomité de Evaluación de Productos Biotecnológicos evaluará los protocolos preclínicos (caso por caso) y podrá solicitar la extensión de pruebas preclínicas cuando así lo considere pertinente para productos nacionales. Los métodos y técnicas analíticas empleadas deben validarse con los parámetros de validación que demuestren que cumplen con el propósito para el cual fueron diseñados. Se deberá realizar el análisis de


34

celular. (por medio de una Línea celular eritroleucémica humana).

Estudios In vivo Los efectos eritrogénicos del medicamento biológico similar y el medicamento de referencia deben compararse cuantitativamente en un ensayo animal apropiado, como por ejemplo:

El ensayo en ratones policitémicos.

El ensayo en ratones normocitémicos.

2. ESTUDIOS

TOXICOLÓGICOS.

2.1 Estudio de toxicidad de

dosis repetida.

2.1.1 Selección de un

modelo Animal. (Estudios In

vivo).

2.1.2 Número / Género de

los Animales.

2.1.3 Administración y

selección de la dosis

2. FARMACODINAMIA /

ACTIVIDAD BIOLÓGICA.

(ESTUDIOS IN VITRO)

Se deben de utilizar líneas

celulares in vitro derivadas de

células de mamíferos para:

Predecir aspectos específicos

de la actividad in vivo.

Evaluar cuantitativamente la

sensibilidad relativa del

biofármaco en diversas

especies incluyendo a la

especie humana.

Estos estudios deben diseñarse

para evaluar:

La Afinidad por el receptor.

La ocupación por el receptor.

Evaluación de la actividad

biológica.

Proliferación Celular.

Sensibilidad en otras

especies.

dosificación.

La actividad farmacológica de los

productos de proteína debe ser

evaluados in vitro y en ensayos

funcionales in vivo.

a) En ensayos in vitro pueden incluir,

pero no se limitan a:

Ensayos biológicos.

Ensayos de unión.

Ensayos de cinética de la

enzimática.

b) Ensayos in vivo pueden incluir

El uso de modelos

animales que posean la

enfermedad para evaluar

los efectos funcionales

(Ensayos de Funcionalidad)

sobre los marcadores

farmacodinámicos.

Ensayos en animales.

1.1 Ensayos de Funcionalidad.

Se pueden utilizar ensayos

funcionales para proporcionar

evidencia adicional de que la

actividad biológica, el

mecanismo de acción y la

potencia del producto propuesto

son muy similares a las del

receptor o ensayos basados en

células (por ejemplo, células de

proliferación o ensayos de

citotoxicidad) para establecer la

comparabilidad de la actividad

biológica / farmacodinámica del SBS

y del RBP.

Estos datos son por lo general ya está

disponible a partir de los ensayos

biológicos descritos en la parte de la

calidad.

3. Estudios in vivo.

Se deben realizar estudios en una

especie animal conocida, en la que se

ha demostrado que el RBP posee una

actividad farmacodinámica y

toxicológica, además se debe

considerar evaluar:

La actividad biológica /

farmacodinámico relevante para

la aplicación clínica. Si la

actividad es factible, biológica

puede evaluarse como parte del

estudio de toxicidad por

administración de dosis

repetidas (descrito más

adelante).

estructura superior empleando métodos analíticos que permitan conocer la estructura tridimensional e integridad química, a saber:

Plegamiento.

Estabilidad termodinámica.

Tamaño.

Modificaciones postraduccionales.

Isoformas.

Variantes de carga (oxidaciones, de amidaciones, isomerizaciones, entre otras).

Masa absoluta.

2. PRUEBAS DE SEGURIDAD.

Se realizarán para definir los efectos toxicológicos y farmacológicos previos a los estudios en humanos a través del desarrollo del estudio clínico. Los estudios de seguridad preclínica deben considerar: 2.1 Elección de una especie relevante. 2.2 Estudios Toxicológicos. Se deben realizar estudios de dosis única que puedan generar datos útiles para describir la relación de dosis para toxicidad sistémica y local.


35

2.1.4 Toxicocinética

Se debe de incorporar la evaluación Toxicocinética al diseño del estudio de dosis repetidas de acuerdo con la guía: Note for guidance on toxicokinetics: A guidance for assessing systemic exposure in toxicological studies (ICH S3A).

2.1.5 Inmunogenicidad.

Se debe de realizar la medición de anticuerpos asociados con la administración de medicamentos biotecnológicos cuando se lleven a cabo estudios de toxicidad de dosis repetidas de acuerdo a la guía: Guideline on immunogenicity assessment of biotechnology-derived therapeutic proteins”, EMEA/CHMP/BMWP/14327/2006).

2.1.5.1 Monitoreo Terminal.

Se debe de realizar una autopsia

de todos los animales

involucrados en el estudio así

como el análisis histopatológico

de los distintos órganos de

3. SELECCIÓN DE UN MODELO

ANIMAL. (ESTUDIOS IN VIVO).

La cual debe expresar el

receptor específico para el

cual el material es

farmacológicamente activo. Cuando no existan especies

relevantes, el uso de animales

transgénicos pertinentes que

expresan el receptor humano

o el uso de proteínas

homólogas debe ser

considerado.

4. INMUNOGENICIDAD.

Se debe de realizar la

medición de anticuerpos

asociados con la

administración de

medicamentos biotecnológicos

cuando se lleven a cabo

estudios de toxicidad de dosis

repetidas.

Las respuestas de anticuerpos

deben caracterizarse, se debe

determinar el título de

anticuerpos, y caracterizar el

tipo de anticuerpo (como

neutralizante o no

neutralizante).

Se debe determinar los

producto de referencia.

2. FARMACODINAMIA / ACTIVIDAD

BIOLÓGICA. (Estudios In vitro)

Se deben de utilizar líneas celulares

in vitro derivadas de células de

mamíferos para predecir aspectos

específicos de la actividad in vivo y

para evaluar cuantitativamente la

sensibilidad relativa del biofármaco

en diversas especies incluyendo a la

especie humana. Estos estudios

deben diseñarse para evaluar:

La Afinidad por el receptor.

La ocupación por el receptor.

Evaluación de la actividad

biológica.

Proliferación Celular.

Sensibilidad en otras especies.

2.1 Selección de un modelo

Animal. (Estudios In vivo).

La evaluación de seguridad

deben incluir el uso de las

especies relevante. La cual debe

expresar el receptor específico

para el cual el material es

farmacológicamente activo. Las

técnicas para determinar una

especie relevante son:

4. Estudios Toxicológicos.

Los estudios de Toxicidad se

determinarán en al menos un estudio

de toxicidad de dosis repetidas en

una especie relevante. Las

determinaciones toxicocinéticas

deben incluir:

Determinación y caracterización

de anticuerpos.

Título de anticuerpos.

Reactividad Cruzada con

proteínas homólogas.

Capacidad neutralizante del

producto.

La duración de los estudios debe

de ser lo suficiente para detectar

las diferentes respuestas de

toxicidad del SBP y RBP.

Dependiendo de la vía de

administración, la tolerancia local

debe ser evaluada. Si es factible, esta

evaluación se puede realizar como

parte del estudio de toxicidad.

Los estudios correspondientes a:

toxicología reproductiva,

genotoxicidad y carcinogenicidad

no son requisitos en las pruebas

pre-clínicas para el SBP.

Cuando sea posible, los estudios de dosis única deben incluir toxicocinética.

Para los biotecnológicos que inducen efectos farmacológicos y toxicológicos prolongados, un grupo de animales debe ser monitoreado hasta que se demuestre la reversibilidad.

La duración de los estudios de dosis repetida debe basarse en la duración de la exposición clínica pretendida y la indicación para la enfermedad. La duración reportada de los estudios debe estar técnicamente justificada para permitir la detección de diferencias relevantes en la toxicidad y respuestas inmunes entre el M.B.B. y el M.B. de referencia.

Si los resultados de los estudios mencionados no son suficientes, se deben incluir observaciones relevantes en el mismo estudio toxicológico de dosis repetida, incluyendo, tolerabilidad local.

Sólo se requerirán reportes de otros estudios toxicológicos como seguridad farmacológica, toxicología reproductiva, mutagénesis y carcinogénesis para la evaluación de M.B.B., si los resultados de los estudios de dosis repetida así lo requieren.

Si los estudios preclínicos emplean OGM deben efectuarse en concordancia con las


36

acuerdo a la guía:

Note for guidance on repeated

dose toxicity. (CPMP/SWP/1042/99).

2.2 Ensayos de Tolerancia.

La evaluación de la tolerancia se

debe de desarrollar previamente

a los estudios clínicos. Estos

estudios se deben de desarrollar

de acuerdo a los establecido en

la guía:

Note for guidance on non-clinical

local tolerance testing of

medicinal products"

(CPMP/SWP/2145/00).

efectos de los anticuerpos

sobre los parámetros PK y

PD, efectos adversos,

activación del complemento, la

aparición de efectos tóxicos.

5. FARMACOCINÉTICA Y

TOXICOCINÉTICA.

Se sugiere realizar los estudios:

Farmacocinéticos de dosis

múltiples.

Toxicocinéticos.

Estudios de distribución

Tisular.

5.1 Estudio de toxicidad de dosis

repetida.

Se debe realizar al menos un

estudio de toxicidad de dosis

repetida, incluyendo la

caracterización de los parámetros

toxicocinéticos, realizados en una

especie relevante, dicho estudio

debe de contener:

Se debe seleccionar una

especie animal relevante.

El régimen de dosificación, la

ruta de administración y la

dosis deben reflejar el uso o la

exposición clínica prevista.

Cuando sea posible, los

Ensayos inmunoquímicos.

Pruebas funcionales.

Cuando no existan especies

relevantes, el uso de animales

transgénicos pertinentes que

expresan el receptor humano o

el uso de proteínas homólogas

debe ser considerado.

2.2 Número / Género de los

Animales.

El número de animales se debe

seleccionar debe tener en

consideración:

Debe existir una relación entre el

número de animales y la

capacidad de detectar posibles

eventos tóxicos.

Ambos géneros en general

deben ser utilizados o presentar

las justificaciones por omisiones

específicas.

2.3 Administración y selección de

la dosis.

La vía y frecuencia de

administración deben estar tan

cerca como sea posible al

propuesto para uso clínico.

El uso de otras vías de

De acuerdo a lo establecido en la guía de armonización (ICH S6 R1), los estudios complementarios a la etapa pre-clínica se describen a continuación:

5. INMUNOGENICIDAD.

Se debe de realizar la medición

de anticuerpos asociados con la

administración de


cuando se lleven a cabo estudios

de toxicidad de dosis repetidas.




anticuerpos, y caracterizar el tipo

de anticuerpo (como

neutralizante o no neutralizante).

Se debe determinar los efectos

de los anticuerpos sobre los

parámetros PK y PD, efectos

adversos, activación del

complemento, la aparición de

efectos tóxicos.

La detección de anticuerpos no

debe ser el único criterio para la

terminación anticipada de un

estudio de seguridad preclínica o

modificación en la duración del

estudio de diseño a menos que

la respuesta inmune neutralice

los efectos farmacológicos y / o

toxicológicas del medicamento

disposiciones jurídicas aplicables.

2.3 Pruebas de actividad biológica.

La actividad biológica debe ser

evaluada mediante ensayos in vitro o

in vivo que puedan demostrar efectos

del producto relacionados con la

actividad biológica descrita, éstos

deben considerar:

La selección de biomarcadores de

acuerdo a su relevancia, a fin de

demostrar la eficacia terapéutica

del producto tanto en el diseño

como en el desarrollo del estudio

preclínico.

El empleo de líneas celulares,

derivadas de mamíferos, para

predecir aspectos específicos de

la actividad in vivo y para obtener

cuantitativamente la sensibilidad

relativa de varias especies

(incluyendo el humano). Estos

estudios deben determinar:

La ocupación del

receptor.

la afinidad por el

receptor y los efectos

farmacológicos.

Así como para ayudar

en la selección de una

especie animal

apropiada para más

estudios farmacológicos


37

estudios deben incluir

toxicocinética.

La duración del estudio debe

ser lo suficientemente larga

para determinar las

diferencias en la toxicidad o

en la respuesta inmunológica

entre el SEB y el fármaco

biológico de referencia.

La duración de los estudios de

dosis repetidas se debe basar

en la duración prevista de la

exposición clínica e indicación

de la enfermedad.

Otros estudios toxicológicos,

incluyendo farmacología de

seguridad, toxicología

reproductiva, mutagénesis y

estudios de carcinogenicidad

NO SE REQUIEREN al menos

que se encuentre justificado

en los resultados de los

estudios toxicológicos de dosis

repetidas.

administración puede ser

aceptable si la vía de

administración limita la

biodisponibilidad.

Se debe considerar la

Farmacocinética y la

biodisponibilidad del producto en

la especie que se utiliza.

Los niveles de dosificación

deben ser seleccionados para

proporcionar información sobre

una relación dosis-respuesta,

incluyendo una dosis tóxica y un

nivel de efecto adverso no

observado.

Para justificar la selección de

dosis alta, se debe considerar a

los efectos fisiológicos/

farmacológicos esperados, la

disponibilidad de material de

prueba adecuado, y el uso

clínico previsto.

2.4 Inmunogenicidad.

Se debe de realizar la medición

de anticuerpos asociados con la

administración de


cuando se lleven a cabo

estudios de toxicidad de dosis

repetidas.




anticuerpos, y caracterizar el

en una gran proporción de los

animales.

La inducción de la formación de

anticuerpos en animales no es

predictivo de un potencial para la

formación de anticuerpos en

seres humanos.

Las reacciones inflamatorias en

el sitio de la inyección pueden

ser indicativos de una respuesta

estimuladora.

6. Farmacocinética y

Toxicocinética.

Es difícil establecer directrices

uniformes para los estudios

farmacocinéticos de los productos

farmacéuticos derivados de la

biotecnología. Se sugiere realizar

estudios:


múltiples.

Toxicocinéticos.

Estudios de distribución Tisular.

Los estudios farmacocinéticos deben,

siempre que sea posible, utilizar los

preparados que sean representativos

para las pruebas de toxicidad y su

uso clínico, y emplear una vía de

administración que sea relevante para

los estudios clínicos previstos.

y toxicológicos in vivo.

Los efectos directos

sobre el fenotipo celular,

la proliferación,

activación celular y la

unión a moléculas

blanco.

La inmunogenicidad en animales

se realizará sólo en estudios de

toxicidad a dosis repetidas con la

finalidad de ayudar a la

interpretación de estos estudios y

sólo cuando se demuestre la

relevancia de la especie.


38

tipo de anticuerpo (como

neutralizante o no neutralizante).

Se debe determinar los efectos

de los anticuerpos sobre los

parámetros PK y PD, efectos

adversos, activación del

complemento, la aparición de

efectos tóxicos.

3. EVALUACIÓN DE LA

EXPOSICIÓN.

3.1 Farmacocinética y

Toxicocinética.

Es difícil establecer directrices

uniformes para los estudios

farmacocinéticos de los productos

farmacéuticos derivados de la

biotecnología. Se sugiere realizar

estudios:


múltiples.

Toxicocinéticos.

Estudios de distribución Tisular.

7. Estudio de toxicidad de dosis

repetida.

Se debe realizar al menos un estudio

de toxicidad de dosis repetida,

incluyendo la caracterización de los

parámetros toxicocinéticos, realizados

en una especie relevante, dicho

estudio debe de contener:




ruta de administración y la dosis

deben reflejar el uso o la


Cuando sea posible, los estudios

deben incluir toxicocinética.

La duración del estudio debe ser

lo suficientemente larga para

determinar las diferencias en la

toxicidad o en la respuesta

inmunológica entre el SEB y el

fármaco biológico de referencia.


dosis repetidas se debe basar en

la duración prevista de la

exposición clínica e indicación de

la enfermedad.





estudios de carcinogenicidad NO


39

3.2 Estudio de toxicidad de dosis

repetida.

Se debe realizar al menos un estudio

de toxicidad de dosis repetida,

incluyendo la caracterización de los

parámetros toxicocinéticos,

realizados en una especie relevante,

dicho estudio debe de contener:




ruta de administración y la dosis

deben reflejar el uso o la


Cuando sea posible, esos

estudios deben incluir

toxicocinética.

La duración del estudio debe

ser lo suficientemente larga

para determinar las diferencias

en la toxicidad o en la respuesta

inmunológica entre el

medicamento biosimilar y el



dosis repetidas se debe basar

en la duración prevista de la

exposición clínica e indicación

de la enfermedad.





estudios de carcinogenicidad

SE REQUIEREN al menos que

se encuentre justificado en los

resultados de los estudios

toxicológicos de dosis repetidas.


40

NO SE REQUIEREN al menos

que se encuentre justificado en

los resultados de los estudios

toxicológicos de dosis repetidas.

3) ESTUDIOS CLÍNICOS


Canadá (Health Canada). Estados Unidos de América

(FDA)


México (COFEPRIS).

1. ESTUDIOS FARMACOCINÉTICOS.

Se debe realizar un estudio cruzado del medicamento biológico similar y del medicamento biológico de referencia.

Se debe de administrar una sola dosis.

Se debe de evaluar la vía subcutánea (SC) y la vía intravascular (IV).

El estudio se debe realizar en voluntarios sanos.

La dosis seleccionada se debe de encontrar en la parte SENSIBLE de la curva dosis-respuesta.

Se considerará como parámetro farmacocinético primario al área bajo la curva (AUC) y como

1. ESTUDIOS

FARMACOCINÉTICOS.

Evaluación de la absorción,

distribución, metabolismo y

eliminación en una población

de pacientes/voluntarios

sanos, debidamente

justificado. El diseño de los estudios

farmacocinéticos comparativos

(por ejemplo, un estudio

cruzado frente al estudio

paralelo) debe seguir los

siguientes factores a

consideración:

Tiempo de vida media.

Linealidad de los parámetros

PK.

Condiciones y enfermedades

a tratar.

Vía de administración.

Condiciones para las cuales el

1. GENERALIDADES. El patrocinador de un producto propuesto debe presentar la información a la FDA que demuestre que :

No hay diferencias clínicamente significativas entre el producto biológico y el producto de referencia en cuanto a la seguridad, pureza y potencia del producto.

Como una cuestión científica, la FDA espera que el patrocinador lleve a cabo los estudios referentes a:

PK humana comparada. Estudios PD (si hay una

medida pertinente PD). Una evaluación de la

inmunogenicidad clínica.


Los estudios farmacocinéticos en general, se deben realizar para las vías de administración solicitadas y la dosis se debe encontrar dentro del rango de dosis terapéuticas recomendadas para el RBP. La comparación farmacocinética de la SBP y la RBP debe incluir:

Absorción / biodisponibilidad.

Eliminación (aclaramiento).

Tiempo de vida media. Para evaluar los parámetros PK es necesario realizar un estudio cruzado con los siguientes características:

Dosis única.

Población Homogénea.

Misma vía de

1. GENERALIDADES.

Para la realización de los estudios

clínicos el patrocinador debe presentar

toda la información con respecto a la

caracterización fisicoquímica, estudios

preclínicos de los productos bajo

estudio y demás documentos, así como

la información necesaria para la

elaboración del protocolo clínico.

Los Estudios clínicos deben tener

además de lo que indique la Secretaría

de Salud:

Estudios de Eficacia.

Inmunogenicidad.

Reporte de eventos

Adversos.

Reporte comparativo de

Farmacocinética, Toxicología

y Tolerabilidad.


41

parámetros secundarios a la concentración máxima (Cmax) y el tiempo de vida media (t1/2) o en su defecto al Cl / F.

Los márgenes de equivalencia deben de ser definidos a priori y estos deben de estar debidamente justificados.

Las diferencias en los t1/2 para la administración subcutánea (SC) e Intravascular (IV) y la dependencia de la dosis en cuanto a la velocidad de la eliminación de la epoetina deben tenerse en cuenta al momento de diseñar estos estudios.

2. ESTUDIOS

FARMACODINÁMICOS.

Los estudios Farmacodinámicos deben de ser evaluados preferentemente como parte del estudio farmacocinético comparativo.

La dosis seleccionada se debe de encontrar en la parte lineal ascendente de la curva dosis-respuesta.

En los estudios de una sola dosis, se considerará al recuento de reticulocitos como marcador

SEB está aplicando.

La Dosis utilizada en los estudios PK debe de estar dentro del rango de dosificación terapéutico especificado en la monografía del producto del fármaco biológico de referencia.

2. ESTUDIOS FARMACODINÁMICOS.

Los parámetros investigados en los estudios farmacodinámicos (PD) deben ser clínicamente relevantes y los marcadores indirectos deben ser validados clínicamente.

Evaluar el efecto del medicamento en un periodo de tiempo, lo cual se puede combinar con:

a) Estudios farmacocinéticos. b) Estudios de eficacia clínica que evalúen la naturaleza, la severidad y la frecuencia de los efectos adversos y deben evaluar la inmunogenicidad.

2. ESTUDIOS CLÍNICOS COMPARATIVOS.

Como una cuestión científica, será necesario un estudio clínico comparativo para apoyar la demostración de la biosimilitud si hay incertidumbre residual sobre si hay diferencias clínicamente significativas entre el producto propuesto y el producto de referencia basado en:

La caracterización estructural y funcional.

La experimentación con animales.

Datos PK y PD en humanos.

La evaluación de la inmunogenicidad clínica.

3. ESTUDIOS CLÍNICOS.

Un estudio clínico comparativo para

un programa de desarrollo biosimilar

debe de:

Tener en cuenta la naturaleza y el

grado de incertidumbre residual que

permanece sobre biosimilitud basado

en datos generados a partir de:

La caracterización

estructural y funcional de

la experimentación con

Administración.

Condiciones semejantes para las cuales el SBP está aplicando.

La Dosis utilizada en los estudios PK

debe de estar dentro del rango de

dosificación terapéutico especificado

en la monografía del producto del



Los efectos farmacodinámicos deben ser investigados en una población adecuada utilizando una dosis o dosis dentro de la parte escarpada de la curva dosis - respuesta con el fin de maximizar la probabilidad de detectar diferencias de potencial entre el SBP y el RBP.

Tales estudios deben proporcionar información útil sobre la relación entre la dosis y el efecto, sobre todo si lleva a cabo a diferentes niveles de dosis.

En muchos casos, los parámetros farmacodinámicos se investigan en el contexto de los estudios farmacocinéticos / farmacodinámicos combinados

El diseño experimental, dependerá de

la naturaleza del biotecnológico según

aplique. En caso de requerirse un

diseño diferente a éstos, se debe

justificar científicamente:

Estudios de Biocomparabilidad

Fase IA Seguridad Clínica Dosis

única Creciente.


Fase IA Seguridad Clínica y de

PK/PD.


Fase III: Equivalencia Terapéutica

y Seguridad Clínica.

2. ELABORACIÓN DEL PROTOCOLO

CLÍNICO.

Cada protocolo de un estudio clínico,

debe cumplir con lo señalado en la Ley

General de Salud, en el Reglamento de

la Ley General de Salud en Materia de

Investigación para la Salud y debe ser

acorde al tipo de producto a evaluar y

pruebas requeridas de acuerdo a lo

señalado en el Reglamento de Insumos

para la Salud, cumpliendo con las BPC,

las BPL y demás disposiciones

jurídicas aplicables.

El Protocolo debe ser dictaminado por

el Comité de Ética en Investigación y

por el Comité de Investigación, y


42

farmacodinámico para la evaluación de la actividad de la eritropoyetina.

3. ESTUDIOS CLÍNICOS DE EFICACIA.

La similitud en la eficacia clínica entre el medicamento biológico similar y el medicamento biológico de referencia debe de ser demostrada mediante ensayos clínicos aleatorizados de grupos paralelos.

El estudio se debe realizar por ambas vías de administración (Intravascular, subcutánea), mediante alguna de las siguientes opciones:

Mediante la realización

de dos ensayos clínicos separados.

Demostrar la eficacia comparable para una vía de administración en un estudio clínico comparativo y proporcionar los datos farmacocinéticos y farmacodinámicos a una dosis única y a múltiples dosis en una población de estudio

3. ESTUDIOS DE SEGURIDAD

CLÍNICA.

3.1 Ensayos de

inmunogenicidad.

La inmunogenicidad de los SEB

debe evaluarse mediante estudios

clínicos diseñados adecuadamente,

teniendo en cuenta el impacto

potencial sobre la eficacia y la

seguridad.

Los métodos de análisis deben ser validados y deben de ser capaces de caracterizar el contenido de anticuerpos (concentración o título), así como el tipo de anticuerpos formados, tales como los anticuerpos neutralizantes y los anticuerpos con reactividad cruzada. Además se deben de evaluar el posible impacto de los anticuerpos sobre la seguridad y

eficacia del medicamento.

animales.

PK humana y estudios de

PD.

La evaluación de la

inmunogenicidad clínica.

3.1 ESTUDIOS

FARMACOCINÉTICOS.

Diseño del estudio.

El diseño del estudio debe evaluar la

similitud de los parámetros PK y PD

para el desarrollo de productos

biosimilares por lo que se proponen:

Diseño Cruzado.

Estudio en Paralelo.

Diseño Cruzado

Estudio en Paralelo.

Producto de Referencia.

Designado por la FDA.

Selección de la Dosis. La dosis seleccionada debe ser la más sensible para detectar y evaluar las diferencias en los perfiles de PK y PD entre el producto biosimilar y el producto de referencia.

Se deben seleccionar Marcadores farmacodinámicos en base a su relevancia clínica.

3. ESTUDIOS CONFIRMATORIOS

PK/PD. Por lo general se requieren ensayos clínicos para demostrar la eficacia similar entre el SBP y el RBP. En ciertos casos, sin embargo, un estudio comparativo PK/PD puede ser apropiado , siempre que:

Las propiedades farmacocinéticas y farmacodinámicas del RBP se encuentren bien caracterizadas.

Al menos un marcador farmacodinámico se encuentre como un marcador ligado a la eficacia.

La relación entre la dosis / exposición, el marcador relevante farmacodinámico y la respuesta / eficacia del RBP se encuentren bien establecidos.

La población de estudio y la dosis deben representar un sistema de prueba que sea conocido por ser sensible a las diferencias de potencial entre el SBP y el RBP.

autorizado por la Secretaría.

El Comité de Moléculas Nuevas previa

consulta al Subcomité de Evaluación

de Productos Biotecnológicos, evaluará

los protocolos clínicos de

biocomparabilidad (caso por caso) y

podrá solicitar la extensión de pruebas

clínicas cuando así lo considere

pertinente.

Para la elaboración del protocolo se

debe incluir la participación de personal

estadístico (cálculo de tamaño de

muestra, pruebas estadísticas de

biocomparabilidad, etc.).


(General)

Se podrán realizar estudios de una sola dosis o de dosis múltiple.

Los intervalos de aceptación para cualquier parámetro farmacocinético se deben basar en el criterio clínico, tomando en cuenta toda la información disponible de eficacia y seguridad en los productos de referencia y de prueba.


43

sensible a la administración de la eritropoyetina.

Se recomienda como población de estudio aquellos pacientes que padezcan anemia renal (anemia asociada a la enfermedad renal crónica) sin alguna otra complicación mayor que puedan poner en peligro relevante la respuesta al tratamiento con eritropoyetina.

Población de Estudio.

Los estudios PK y PD deben llevarse

a cabo en voluntarios sanos si el

producto se puede administrar de

forma segura a esta población.

Los estudios de farmacología clínica

deberán realizarse en los pacientes

cuando la seguridad o

consideraciones éticas impidan la

participación de voluntarios sanos en

los estudios o si los marcadores PD

sólo sería relevante en los pacientes

con la condición o enfermedad.

Vía de Administración.

Los estudios PK y PD deben llevarse

a cabo utilizando la misma vía de

administración para el producto

biológico propuesto y el producto de

referencia.

Determinaciones

Farmacocinéticas (PK).

Determinar Cmax y la exposición total

(AUC) en un fluido biológico

relevante.

4. ESTUDIOS CLÍNICOS DE EFICACIA.

La similitud de la Eficacia entre el SBP y el RBP se debe demostrar a través de un ensayo clínico aleatorizado y controlado. Los principios de tales ensayos se establecen en las directrices ICH relevantes:

Choice of control group and related issues in clinical trials (E10). Geneva, International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use, 2000.

Statistical principles for clinical trials (E9). Geneva, International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use, 1998.


(General)

Seleccionar los biomarcadores farmacodinámicos con base en la relevancia que tengan para demostrar la eficacia terapéutica del producto.

La duración y el diseño de los estudios

deben de ser justificados, los estudios

combinados de

farmacocinética/farmacodinamia

pueden dar información útil sobre la

relación entre la exposición y el efecto.

5. ESTUDIOS CLÍNICOS DE EFICACIA

Se debe de realizar un estudio administrando el medicamento biocomparable y el medicamento de referencia en pacientes con anemia renal.


44

Determinaciones Farmacodinámicas (PD).

Las Determinaciones PD se determinarán mediante una medida PD que refleje el mecanismo de acción del fármaco, siempre y cuando la medida PD tenga una amplia gama dinámica en el rango de concentraciones de fármaco obtenidos durante el estudio PK. En esos casos, será necesaria una evaluación completa de la seguridad y de la inmunogenicidad. En los casos en que exista una correlación significativa entre los resultados de los perfiles PK y PD y la eficacia clínica, los resultados del perfil PK/PD puede hacer un estudio de eficacia comparativa innecesario. Comparación estadística de

los datos PK y PD. Se debe de realizar de acuerdo a lo establecido en la guía : Guidance for Industry, Statistical Approaches to Establishing Bioequivalence.

5. SEGURIDAD. Los datos de seguridad deben ser preferiblemente comparativos. Los datos de seguridad obtenidos a partir de los ensayos clínicos se deben enfocar principalmente en detectar reacciones adversas frecuentes y a corto. Estos datos son por lo general suficientes para la pre-licencia, pero es necesario un plan de seguridad clínica del SBP para la fase de post-comercialización.


45

4) ENSAYOS CLÍNICOS DE INMUNOGENICIDAD.

La FDA recomienda el uso de un diseño paralelo comparativo en pacientes sin tratamiento previo para evaluación general de la inmunogenicidad. La evaluación general inmunogenicidad debe considerar:

La naturaleza de la respuesta inmune (por ejemplo, anafilaxis, anticuerpos neutralizantes).

La relevancia clínica y la gravedad de las consecuencias (por ejemplo, la pérdida de eficacia de los efectos adversos terapéuticos y otros para salvar vidas).

La incidencia de la respuesta inmune.

La población en estudio. Como una cuestión científica, un promotor debe evaluar los siguientes parámetros de anticuerpos en la evaluación de la inmunogenicidad clínica:

Título de anticuerpos, la especificidad, la distribución de isotipo correspondiente, curso temporal del desarrollo, la persistencia, la desaparición, el impacto en la PK, y la asociación con secuelas clínicas.


46

4) ESTUDIOS COMPLEMENTARIOS


Canadá (Health Canada). Estados Unidos de

América (FDA)


México (COFEPRIS).

1. ESTUDIOS DE SEGURIDAD

CLÍNICA.

1.1 Inmunogenicidad.

Los datos comparativos de seguridad de los ensayos de eficacia en general son suficientes para proporcionar una base de datos adecuada de seguridad antes de la comercialización del medicamento.

El solicitante deberá presentar al menos 12 meses de datos de inmunogenicidad previa autorización. Los principios de la evaluación de la inmunogenicidad se llevarán a cabo de acuerdo a la guía:

“Guideline on immunogenicity assessment of biotechnology-derived therapeutic proteins (EMEA/CHMP/BMWP/ 14327/2006)”.

Es necesario el uso de un método validado altamente sensible para la detección de anticuerpos, este método debe de ser capaz de

1. PLAN DE

FARMACOVIGILANCIA

Se debe desarrollar un Plan de Gestión de Riesgo, el cual describe la información de seguridad del medicamento, además describe el plan de farmacovigilancia. 3. REQUISITOS POSTERIORES A

LA COMERCIALIZACIÓN.

Reacción adversa al

medicamento (RAM)

Presentación de informes.

Se requieren los informes de las

RAMs posteriores a la

comercialización de acuerdo con la

sección C.01.016 del Reglamento

de Productos Alimenticios y

Farmacéuticos: cualquier RAM

grave que se informe exige al

fabricante de ese medicamento

presentar toda la información con

respecto a dicho informe dentro de

1. CONSIDERACIONES DE

MONITOREO POST-COMERCIALIZACIÓN.

El Control de la seguridad posterior a la comercialización debe primero tener en cuenta:

Las preocupaciones de seguridad y eficacia particulares asociadas con el uso del producto de referencia y su clase.

La condición específica de uso y población de pacientes.

La exposición del paciente en el programa de desarrollo de biosimilares.

2. CONSULTA CON FDA

. Formal Meetings Between the FDA and Biosimilar Biological Product Sponsors or Applicants. La FDA normalmente debe

proporcionar información sobre una base de caso por caso de los componentes de

1. ENSAYOS DE INMUNOGENICIDAD.

La respuesta inmune a un bioterapéutico está influenciada por muchos factores incluyendo la naturaleza de la sustancia farmacológica, a productos y procesos relacionados impurezas, excipientes y estabilidad del producto, vía de administración, dosificación régimen, y el paciente, factores de enfermedades y / o relacionadas con el tratamiento. La inmunogenicidad de un bioterapéutico siempre debe ser investigado en los seres humanos ya que los datos de animales son por lo general no son predictivos de la respuesta inmune en los seres humanos. En caso de una eficacia similar se demuestre en los estudios PK/PD, todavía serán necesarios datos de inmunogenicidad en la población objetivo. El fabricante tendrá que justificar su estrategia de pruebas de anticuerpos incluyendo:

La selección de las pruebas.

1. PLAN DE FARMACOVIGILANCIA.

La farmacovigilancia, debe cubrir los requisitos establecidos en la Ley General de Salud, en el Reglamento de Insumos para la Salud y en la NOM-220-SSA1-2012.

La Farmacovigilancia se llevará a cabo empleando:

Método de notificación espontánea.

Método de farmacovigilancia intensiva.

Método de notificación en investigación clínica.

La farmacovigilancia se realizará a través del análisis de la siguiente información:

Estudios clínicos fases I a IV.

Reporte periódico de seguridad.

Informe de seguridad en México.

Reportes de seguridad de estudios clínicos.

Generación de señales.

Bases de datos epidemiológicas.

Planes de manejo de riesgos.


47

detectar la respuesta inmune temprana y la respuesta inmune tardía.

Los anticuerpos detectados necesitan una caracterización adicional incluyendo su potencial de neutralización.

La base de datos referente a la

inmunogenicidad debe de incluir

un número suficiente de

pacientes con anemia renal

tratados por la vía subcutánea

(SC).

2. PLAN DE

FARMACOVIGILANCIA Dentro del procedimiento de autorización, el solicitante deberá presentar un plan de farmacovigilancia de acuerdo con la legislación de la Unión Europea actual y las Guías de Farmacovigilancia correspondientes.

El plan de farmacovigilancia se debe desarrollar de acuerdo a la guía: Note for Guidance on planning pharmacovigilance activities (ICH E2E).

los 15 días después de recibir la

información.

Informes Periódicos de

Seguridad (PSUR).

Se deben presentar como se discute en el PvP. La periodicidad de presentación de los PSUR debe ser coherente con las directrices ICH (ICH E2E) para nuevos productos o como lo determine el Ministro sobre la aprobación.

un programa de desarrollo de un producto propuesto.

La FDA recomienda a los patrocinadores utilizar un enfoque paso a paso para establecer la totalidad de la evidencia que soporta una demostración de biosimilitud.

La FDA también aconseja a los patrocinadores presentar sus planes de desarrollo de productos y establecer un calendario de hitos que servirán como puntos de referencia para las futuras discusiones con la Agencia.

Evaluación y caracterización de los ensayos.

La identificación de los tiempos de muestreo apropiados.

Se debe de incluyendo la línea de base.

Los volúmenes de muestra y el procesamiento de la muestra.

La selección de métodos estadísticos para el análisis.

Los Anticuerpos detectados deben de ser caracterizados y se debe de evaluar sus posibles implicaciones clínicas para la seguridad, la eficacia y la farmacocinética del medicamento.

2. PLAN DE FARMACOVIGILANCIA

El fabricante deberá presentar un pliego

de condiciones de seguridad y el plan de

farmacovigilancia en el momento de

presentación de la solicitud de

autorización de comercialización.

El plan de farmacovigilancia se debe de

realizar de acuerdo con lo establecido en

la guía de armonización ICH E2E Pharmacovigilance planning.

El plan de farmacovigilancia debe describir las actividades posteriores a la comercialización y los métodos basados en la especificación de seguridad.


48

3. AMPLIACIÓN DE LA INDICACIÓN.

Debido a que el mecanismo de acción de la eritropoyetina es el mismo para todas las indicaciones aprobadas actualmente y sólo hay un receptor conocido de la eritropoyetina, la demostración de la eficacia y la seguridad en la anemia renal permitirá la extrapolación a otras indicaciones del medicamento de referencia con la misma vía de administración.

49

6. DISCUSIÓN

Durante la revisión de los requisitos necesarios para evaluar la biocomparabilidad

de los productos que contienen EPO en las diferentes regulaciones se encontró

que la única agencia regulatoria que cuentan con una guía específica para evaluar

este producto es la EMA.

Los demás países cuentan con guías generales para la caracterización

fisicoquímica, las pruebas preclínicas y las pruebas clínicas que avalen su

biocomparabilidad.

Al revisar los requisitos necesarios en la evaluación de la biocomparabilidad de

los productos en las diferentes guías internacionales, se encontró que:

La etapa medular en la evaluación de la biocomparabilidad es la caracterización

fisicoquímica de los medicamentos biotecnológicos. Debido a la naturaleza del

proceso de fabricación de estos medicamentos, es necesario que mediante la

caracterización fisicoquímica se demuestre que el medicamento biocomparable

sea altamente comparable al medicamento biológico innovador.

La EMA, a través de la guía: “Guideline on similar biological medicinal products

containing biotechnology-derived proteins as active substance: quality issues”,

describe de una forma más específica las pruebas necesarias para evaluar la

caracterización estructural, las propiedades fisicoquímicas y la actividad biológica

de la EPO. Las pruebas requeridas por la EMA se basan específicamente en

caracterizar ampliamente la estructura primaria, secundaria y terciaria de la

proteína así como las propiedades fisicoquímicas. Además, la EMA describe las

pruebas específicas para evaluar las modificaciones post-traduccionales de la

proteína como la caracterización de carbohidratos, la determinación de puentes

disulfuro, la cantidad de ácido siálico y el patrón de glicosilación de la proteína. La

evaluación del patrón de glicosilación y la cantidad de ácido siálico es de resaltar

ya que estas propiedades afectan drásticamente las características

farmacocinéticas de la EPO.

50

En cuanto a los ensayos de actividad biológica, estos son necesarios para

complementar la caracterización, la EMA es concreta al establecer que los

ensayos de unión al receptor, proliferación celular y ensayos de actividad se

realicen en una línea celular específica, que es la línea celular eritroleucémica

humana.

Por su parte, la FDA y Canadá se basan en la guía de Armonización “ICH Q6B:

Test Procedures and Acceptance Criteria for Biotechnological/biological products”.

Aunque la guía es de carácter general para los productos biotecnológicos, en ella

se resalta la importancia de la caracterización de los mismos. De forma similar que

la EMA, en esta guía se especifica que es necesario evaluar tres aspectos

principales del medicamento biotecnológico: La caracterización estructural, las

propiedades fisicoquímicas y la actividad biológica. En esta guía se describe la

necesidad de evaluar: la secuencia de aminoácidos, modificaciones post-

traduccionales, actividad biológica, determinación de puentes disulfuro y patrón de

glicosilación. Sin embargo, debido al carácter general de la guía, será necesario

evaluar que pruebas son aplicables al medicamento biotecnológico en cuestión.

De igual forma la COFEPRIS y la OMS, se enfocan en evaluar los tres aspectos

de la caracterización, sin embargo se observa que la cantidad de pruebas a

realizar es menor en comparación con la EMA y la ICH Q6B. Esto es de resaltar,

ya que en las guías se establece la necesidad de una amplía caracterización del

medicamento biológico, entre mayor sea la caracterización, se tendrá mayor

confiabilidad en la realización y evaluación de los estudios pre-clínicos, clínicos y

de seguridad, estudios necesarios para evaluar la similitud en cuanto la seguridad

y eficacia del medicamento biosimilar.

51

Estudios Preclínicos.

En la realización de los estudios preclínicos en las guías de forma general se

establece la necesidad de evaluar in vitro / in vivo los parámetros PK, PD,

toxicocinética e inmunogenicidad.

En este aspecto, la EMA establece que la evaluación in vitro se debe de realizar

en una línea celular específica, la línea celular eritroleucémica, y los estudios in

vivo se realicen en ratones normocitémicos o policitémicos. De esta forma, se

busca evaluar de una forma más específica a la EPO y complementar el perfil de

caracterización de la misma.

En el caso de las guías ICH Q6B, WHO y la NOM-177, para la evaluación de los

estudios in vitro es necesario una línea celular derivada de mamíferos que exprese

el receptor específico, y para la evaluación de los estudios in vivo será necesario

evaluarlos en una especie relevante, la cual debe de reunir ciertas características

dependiendo de la guía consultada y del medicamento biológico a evaluar.

Todas las guías requieren que se lleven a cabo estudios de toxicidad en animales

en dosis repetidas, incluyendo la prueba de inmunogenicidad. En el caso de la

EMA, la evaluación de la inmunogenicidad se realiza a través de la guía:

“Guideline on immunogenicity assessment of biotechnology-derived therapeutic

proteins (EMEA/CHMP/BMWP/ 14327/2006)”. La FDA y Canadá requieren

también de pruebas de toxicidad a dosis repetidas así como la prueba de

inmunogenicidad, mediante la medición y caracterización de anticuerpos. En el

caso de México, se requiere llevar a cabo estudios de toxicocinética, seguridad

farmacológica e inmunogenicidad.

52

Estudios Clínicos.

a) Estudios de Farmacocinética.

Al hacer la comparación de los requisitos de los estudios clínicos, se encontró que:

Todas las guías requieren de un estudio fase 1 de farmacocinética y

farmacodinamia. En el caso de la EMA, para la eritropoyetina en particular, se

requiere que el estudio sea cruzado, dosis única, balanceado, en voluntarios

sanos, midiendo los parámetros: Área Bajo la curva (AUC) como parámetro

primario y a concentración plasmática máxima (Cmax) y vida media de eliminación

(t1/2) como parámetros secundarios. Las guías de Canadá y OMS requieren que

se determine la absorción, distribución metabolismo y eliminación del producto a

comparar vs el producto innovador, mientras que la guía de México no especifica

los parámetros a evaluar.

b) Estudios clínicos de eficacia.

Considerando que la farmacocinética no necesariamente está relacionada con la

eficacia, la mayor parte de las agencias regulatorias requieren que se lleve a cabo

un estudio clínico en el caso de productos biotecnológicos. Un caso interesante

es la FDA, ya que en su guía establece que si existe un marcador

farmacodinámico, el estudio de Farmacocinético /Farmacodinámico en pacientes

o voluntarios, sería suficiente para el registro del medicamento biocomparable

siempre y cuando haya demostrado que sus propiedades fisicoquímicas han sido

exhaustivamente evaluadas.

En el caso de la EMA, la guía requiere de un estudio en paralelo en pacientes con

anemia renal sin alguna otra complicación que pueda poner en riesgo la respuesta

al tratamiento con la eritropoyetina. La guía de Canadá establece que el estudio

clínico deberá ser un estudio de equivalencia terapéutica, mientras que la OMS

requiere de un estudio clínico aleatorizado y controlado bajo las directrices de las

guías ICH E10 e ICH E9. En el caso de México la guía establece realizar un

estudio administrando el medicamento biocomparable y el medicamento de

referencia en pacientes con anemia renal.

53

c) Inmunogenicidad.

Debido a que bioquímicamente la EPO está clasificada como una glicoproteína, el

sistema inmunitario es capaz de reconocerla como extraña y reaccionar en su

presencia, como por ejemplo el desarrollo de anticuerpos neutralizantes, etc. La

evaluación de la inmunogenicidad es un punto fundamental en el perfil de

seguridad Clínica en la evaluación de la EPO Biosimilar.

En este aspecto, al revisar las guías correspondientes de las entidades

regulatorias consultadas en este trabajo (EMA, FDA, Health Canada, OMS y

COFEPRIS) es notorio que la evaluación de la inmunogenicidad debe de

realizarse durante las diferentes etapas del estudio de biocomparabilidad, desde la

caracterización fisicoquímica, posteriormente los estudios pre-clínicos y clínicos, y

finalmente la monitorización de las posibles RAMs a través del plan de

farmacovigilancia.

Para la evaluación de la inmunogenicidad, la EMA emplea la guía: “Guideline on

immunogenicity assessment of biotechnology-derived therapeutic proteins”

(EMEA/CHMP/BMWP/ 14327/2006)”, en donde se establecen los requisitos

específicos a evaluar en este aspecto. De acuerdo con esta guía no solo es

necesario contar con un método validado capaz de detectar la respuesta

inmunológica temprana y tardía, también será necesario la caracterización y el

potencial de neutralización de los anticuerpos detectados de ser necesario. En el

caso de la FDA, esta se apoya en la guía: “Immunogenicity Assessment for

Therapeutic Protein Products”, evaluando los siguientes parámetros: título de

anticuerpos, especificidad, distribución del isotipo correspondiente, curso temporal

de desarrollo y su impacto en la farmacocinética y su asociación con secuelas

clínicas. En el caso de Canadá, esta agencia solicita la evaluación de los mismos

parámetros que la FDA. La OMS, establece que los anticuerpos detectados

deberán ser caracterizados y se debe evaluar el impacto en la seguridad, eficacia

y farmacocinética del medicamento. México no hace mención de los parámetros

para evaluar la inmunogenicidad.

54

7. CONCLUSIONES.

La Eritropoyetina es una glicoproteína ácida con una masa molecular de 30.4 kDa,

cuya estructura es compleja. Consta 165 aminoácidos residuales que forman

cuatro cadenas anti-paralelas, dos α-hélices y dos β-hojas, además cuenta con

dos intra-cadenas puentes disulfuro. La porción de carbohidratos (40% de la

molécula) comprende tres N-glicanos y un O-glicano. Los N-glicanos tienen una

variedad de funciones, incluyendo la protección de la EPO de proteasas y la

modulación de sus puentes receptores de afinidad.

Este biofármaco forma parte fundamental en la terapia de pacientes con daño

renal para tratar o prevenir la anemia, por lo que es de suma importancia

garantizar que al cambiar de una marca por otra no se ponga en riesgo al

paciente.

La revisión bibliográfica mostró que para demostrar la biocomparabilidad de los

productos conteniendo eritropoyetina, las agencias regulatorias requieren que se

realicen las siguientes pruebas para demostrar la biocomparabilidad:

a) Caracterización estructural y fisicoquímica.

b) Estudios preclínicos que incluyen: estudios de toxicología, evaluación de

unión a receptor y estudios de farmacocinética.

c) Estudios clínicos que incluyen: estudios de farmacocinética en voluntarios

sanos, estudios de farmacodinamia, estudios de eficacia en pacientes y

estudios de inmunogenicidad.

d) Estudios de farmacovigilancia.

Por la complejidad de estas moléculas, se requiere contar con equipos

especializados y personal altamente calificado para llevar a cabo las diferentes

etapas de los estudios. Este conjunto de pruebas permitirá garantizar la

seguridad, calidad y eficacia de los productos del mercado nacional conteniendo

este biofármaco.

55

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anÁlisis de criterios y requisitos internacionales para determinar la biocomparabilidad de...

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