2 3 the korean...pmf 인가후ph 변화 pbs와혈장을이용하여ht 45% 혈액샘플준비...

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사전 연구 : 펄스자기장 자극 Motivation 혈장 내 적혈구의 전하분포 pH 변화가 발생하는 이유 pH 변화가 발생하면 노화로 인한 혈액의 pH 저하 암과 같은 종양 또는 염증으로 인한 감소 인체 내 CO 2 O 2 분압, HCO 3 - 변화 Negative Net : 음전하를 가진 적혈구의 막전하 Compact Layer : 적혈구 막전하 주변 양이온 Diffuse Layer : 양이온과 음이온이 존재 혈장 내 양이온 : H + , Na + , K + , Ca 2+ , Mg 2+ , 호흡성 & 대사성 산증 초래 두통, 과호흡, 혼수상태 등 심할 경우 사망에 이름 혈액 산성화 Hemoglobin → Met Hemoglobin 적혈구의 산소 운반능력 저하 pH 항상성 유지의 중요성 펄스자기장의 효과? 적혈구의 막전하 증가 혈액의 pH 개선 하지만 혈장 내에는 이온 뿐만 아니라 단백질도 존재 수용액 내 이온만 존재하는 PBS를 이용하여 실험 진행 Method 혈액 샘플준비 펄스자기장(Pulsed Magnetic Field, PMF) 장치 Phosphate Buffer Saline(PBS) 인산완충식염수(pH:7.4) 인체와 같은 이온 농도 적혈구의 변형 방지 Hematocrit(Ht) : 적혈구 용적률(%) 혈액에서 적혈구가 차지하는 비율 산화스트레스 처리된 적혈구 tBHP(tert-Butyl hydroperoxide) 적혈구에 산화스트레스 유발 산화스트레스 혈액 내 pH 불균형 초래 Hb MetHb로 변환 적혈구의 산소운반능력 저하 환원제의 효과 Verapamil → 적혈구 환원제 산화스트레스 개선 & 적혈구 용혈작용 예방 Results PMF 인가 후 pH 변화율 PBS를 이용하여 Ht 45%로 혈액 샘플 준비 펄스자기장 인가 후 pH 증가율 Control-PMF : 0.25% 증가 펄스자기장은 혈액의 pH를 변화시킴 : 적혈구의 막전하 증가 : 더 많은 양이온이 막전하에 결합됨 : 펄스자기장은 PBS 내의 양이온(H+)를 감소시킴 tBHP-PMF : 0.68% 증가 펄스자기장은 산화처리된 혈액의 pH 수치를 높임 산화된 적혈구에 대한 펄스자기장의 치료효과 규명 Control-Verapamil : 0.13% 증가 펄스자기장은 환원제와 같은 역할을함 PBS를 사용하여 Ht 10%로 혈액샘플 준비 적혈구 희석액에 자성비드 0.5 mg 주입 적혈구에 부착된 자성비드의 수 Control-PMF > Control > tBHP-PMF > tBHP Control-PMF군에서 가장 높은 결합력을 보임 표면 : 음전하로 이루어진 silica 크기 : 1 μm 자성체 종류: 초상자성체 자성비드의 Core : 산화철 입자의 개수 : 4.2 x 10 12 /g 자성비드(Magnetic Bead, MB) ddH 2 0에 희석된 MB 0.5mg 투입 PBStBHP 0.4mM 희석 펄스자기장 자극에 따른 양이온(H+)MB의 상호작용 PMF 인가 후 pH 증가 PBS 내 양이온과 MB가 결합됨 tBHP 처리 후 산화스트레스로 인한 pH 감소 tBHP는 산성을 유도함 : pH PMF 인가 후 pH 증가 산성환경 내에서 PMF가 양이온과 MB의 결합 촉진 PMF 인가 후 pH 변화 PBS와 혈장을 이용하여 Ht 45% 혈액 샘플 준비 샘플에 따른 자기장 인가 후 pH의 변화율 관찰 혈장 희석 샘플 vs PBS 희석 샘플 < < PMF 처리 후 증가율 혈장 내 이온 다양성 pH 변화율 tBHP- 혈장 vs tBHP- PBS 희석 샘플 PMF 처리 후 증가율 산화처리 후 희석액 내 H + 이온 양이온의 양 pH 변화율 펄스자기장이 산화 처리된 적혈구 개선 적혈구에 부착된 자성비드 관찰 Control Control-PMF tBHP tBHP-PMF Student’s t-test and analysis of variance (ANOVA) in SPSS 25 were used. (* P < 0.05, ** P < 0.005, *** P < 0.0005). 펄스자기장 자극은 혈액의 pH 개선 적혈구 막전하 막 주변 양이온 [H + ] 용액 내 [H + ] → pH -염기 불균형에 대한 치료법으로 쓰일 수 있음 임상을 위한 펄스자기장 세기, 자극 시간, 파형의 최적화 필요 Summary 펄스자기장 자극은 적혈구 막전하 막전하 주변 양이온의 수 적혈구에 부착되는 자성비드의 수 Conference on The Korean Magnetics Society 2020 November 25-27, The Ocean, Yeosu, Korea 자성마이크로비드를 이용한 펄스자기장 처리에 따른 혈액 - 염기 균형평가 Yukyoung Choi *, Seunghwan Bang, Hyunsook Lee Department of Oriental Biomedical Engineering, Sangji University, Wonju, 26339, Republic of Korea MB, tBHP 희석에 따른 PBSpH 변화율 그래프 PBS 혈장 vs PBS PBS MB 투입 후 ddH 2 O와의 희석으로 인한 pH 감소 PBS(pH : 7.4) + ddH 2 O(pH : 6.9) 40:1로 희석 The Korean Magnetics Society

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Page 1: 2 3 The Korean...PMF 인가후pH 변화 PBS와혈장을이용하여Ht 45% 혈액샘플준비 샘플에따른자기장인가후pH의변화율관찰 혈장희석샘플vs PBS 희석샘플

사전연구 : 펄스자기장자극

Motivation

혈장내적혈구의전하분포

pH 변화가발생하는이유

pH 변화가발생하면

노화로인한혈액의 pH 저하

암과같은종양또는염증으로인한감소

인체내 CO2 및 O2 분압, HCO3- 변화

Negative Net : 음전하를가진적혈구의막전하

Compact Layer: 적혈구막전하주변양이온

Diffuse Layer: 양이온과음이온이존재

혈장내양이온: H+, Na+, K+, Ca2+, Mg2+, 등

호흡성 & 대사성산증초래

→ 두통, 과호흡, 혼수상태등

→ 심할경우사망에이름

혈액산성화

Hemoglobin → Met Hemoglobin

→ 적혈구의산소운반능력저하

pH 항상성유지의

중요성

펄스자기장의효과?

− 적혈구의막전하증가

− 혈액의 pH 개선

하지만혈장내에는이온뿐만

아니라단백질도존재

수용액내이온만존재하는

PBS를이용하여실험진행

Method 혈액샘플준비

펄스자기장(Pulsed Magnetic Field, PMF) 장치

Phosphate Buffer Saline(PBS)– 인산완충식염수(pH:7.4)– 인체와같은이온농도→ 적혈구의변형방지

Hematocrit(Ht) : 적혈구용적률(%)− 혈액에서적혈구가차지하는비율

산화스트레스처리된적혈구− tBHP(tert-Butyl hydroperoxide)→ 적혈구에산화스트레스유발− 산화스트레스→ 혈액내 pH 불균형초래− Hb 가MetHb로변환→ 적혈구의산소운반능력저하

환원제의효과− Verapamil → 적혈구환원제− 산화스트레스개선 & 적혈구용혈작용예방

Results

PMF 인가후 pH 변화율 PBS를이용하여 Ht 45%로혈액샘플준비

펄스자기장인가후 pH 증가율

Control-PMF : 0.25% 증가

펄스자기장은혈액의 pH를변화시킴

: 적혈구의막전하증가

: 더많은양이온이막전하에결합됨

: 펄스자기장은 PBS 내의양이온(H+)를감소시킴

tBHP-PMF : 0.68% 증가

펄스자기장은산화처리된혈액의 pH 수치를높임

산화된적혈구에대한펄스자기장의치료효과규명

Control-Verapamil : 0.13% 증가

펄스자기장은환원제와같은역할을함

PBS를사용하여 Ht 10%로혈액샘플준비

적혈구희석액에자성비드 0.5 mg 주입

적혈구에부착된자성비드의수

Control-PMF > Control > tBHP-PMF > tBHP

Control-PMF군에서가장높은결합력을보임

• 표면 : 음전하로이루어진 silica

• 크기 : 1 μm

• 자성체종류: 초상자성체

• 자성비드의 Core : 산화철

• 입자의개수 : 4.2 x 1012/g

자성비드(Magnetic Bead, MB)

ddH20에희석된MB 0.5mg 투입

PBS에 tBHP 0.4mM 희석

펄스자기장자극에따른양이온(H+)과 MB의상호작용

PMF 인가후 pH 증가− PBS 내양이온과MB가결합됨

tBHP 처리후산화스트레스로인한 pH 감소− tBHP는산성을유도함 : pH

PMF 인가후 pH 증가− 산성환경내에서 PMF가양이온과MB의결합촉진

PMF 인가후 pH 변화

PBS와혈장을이용하여 Ht 45% 혈액샘플준비

샘플에따른자기장인가후 pH의변화율관찰

혈장희석샘플 vs PBS 희석샘플

<

<

PMF 처리후증가율

혈장내이온다양성 pH 변화율

tBHP- 혈장 vs tBHP- PBS 희석샘플

PMF 처리후증가율

산화처리후희석액내 H+ 이온

양이온의양 pH 변화율

펄스자기장이산화처리된적혈구개선

적혈구에부착된자성비드관찰

Control Control-PMF tBHP tBHP-PMF

Student’s t-test and analysis of variance (ANOVA) in SPSS 25 were used.

(* P < 0.05, ** P < 0.005, *** P < 0.0005).

펄스자기장자극은

혈액의 pH 개선

적혈구막전하 막주변양이온 [H+] 용액내 [H+] → pH

산-염기불균형에대한치료법으로쓰일수있음

임상을위한펄스자기장세기, 자극시간, 파형의최적화필요

Summary

펄스자기장자극은적혈구막전하

막전하주변양이온의수

적혈구에부착되는자성비드의수

Conference on The Korean Magnetics Society 2020 November 25-27, The Ocean, Yeosu, Korea

자성마이크로비드를이용한펄스자기장처리에따른

혈액내산-염기균형평가Yukyoung Choi*, Seunghwan Bang, Hyunsook Lee

Department of Oriental Biomedical Engineering, Sangji University, Wonju, 26339, Republic of Korea

MB, tBHP 희석에따른 PBS의 pH 변화율그래프PBS

혈장 vs PBS

PBS 내MB 투입후 ddH2O와의희석으로인한 pH 감소− PBS(pH : 7.4) + ddH2O(pH : 6.9) 40:1로희석

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