XI REUNION INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

Eleven (11) samples were tested through hibridization with the N probe and RT-PCR and in 100 of samples the results were positive for boths techniques Only 2 samples from the 11 tested were positive through hibridization with G probe and RT-PCR Results obtained through hibridization had absolutelly concordance The plasmid pSH-G had shown been a reliable positive control compared to another molecular weight Thus this technique will be able to be used in the future by rabies diagnostic laboratories because of its sensitivity and specifically besides of being executable and with financial cost compared to the traditional diagnostic techniques

DESARROLLO DE UNA VACUNA ANTIRRABICA EXPRESADA EN MAIZ TRANSGENICO Y SU EVALUACION EN BOVINOS (39)

Elizabeth Loza-Rubio 1

Gomez-Lim MA Esquivel GF 3 Oliveira FMT 4 De Paz VO 1

1 Centro Naciimal de Investigaciones en Microbiologia Veterinaria-INIFAP 2 Centro de Investigacion y Estudios Avanzados del Instituto Politecnico Nacional Unidad Irapuato 3 Universidad Autonoma del Estado de Morelos

4 Universidad Nacional Autonoma de Mexico

Uno de los principales metodos de control y erradicacion de la rabia es la vacunacion En Mexico existen vacunas de virus vivo modificado y muerto sin embargo aunque en general las vacunas antirrabicas son de buena calidad al salir de los laboratorios productores su conservacion resulta diffcil especialmente por la perdida de la cadena fria ya qu esta no siempre es facil de lIevar a cabo en los diferentes territorios que componen el pafs Actualmente con el empleo de herramientas moleculares es posible transformar geneticamente un gran numero de especies vegetales de manera facil y rapida Aunado a ello las plantas transgenicas han demostrado ser un sistema de expresion factible y muchas veces preferible para la produccion de productos farmaceuticos asf mismo al servir como sistemas de expresion de protefnas tienen un alto valor potencial para la produccion de inmunogenos Elias representan un medio muy economico de producir y aplicar vacunas el cual seria especialmente apropiado para parses en desarrollo Se estima que el costa de produccion de un sistema de este tipo seria extremadamente bajo sobre todo en comparacion con los costos actuales Como es sabido la proteina G del virus de la rabia es la responsable de la induccion de los anticuerpos neutralizantes y la estimulacion de linfocitos T cooperadores y citotoxicos del huesped por 10 que expresada en una planta de mafz transgenica resultara una vacuna oral muy apreciada ademas de todas las ventajas que puede ofrecer la inmunizacion oral empleando este tipo de plantas que son entre otras menores costos de produccion facilidad de aplicacion de las vacunas mayor estabilidad facilidad de distribucion sin requerir refrigeracion y la modificacion post-traduccional de protefnas eucariontes La protefna G del virus de la rabia ha sido expresada en plantas tanto de jitomate como de tabaco y adem as el antfgeno producido por las plantas ha sido utilizado como inmunogeno en animales de laboratorio Es por ello de suma importancia lIevar a cabo la expresion de la proteina encargada de la proteccion contra un virus de desaffo en plantas de maiz transgenico pues ello permitira una adecuada inmunizacion por vfa oral en la especie bovina Este proyecto busca combinar dos tecnologfas para obtener beneficios concretos para la produccion y aplicacion de vacunas 1) Por un lado se busca aprovechar el hecho de que muchos genes de antigenos de importantes enfermedades han sido clonados y expresados en diversos sistemas 2) Por otro lado tambien se busca aprovechar la facilidad para transformar geneticamente y regenerar diversos tipos de plantas Creemos que el mafz representa la mejor opcion para producir vacunas para ganado ya que este cereal es usado en las dietas cotidianas no solamente de la especie bovina sino tambien de otros animales domesticos silvestres e incluso de humanos Las ventajas que puede ofrecer la inmunizacion oral empleando plantas que expresen el gen de interes son entre otras (Mor et ai 1998) Menores costos de produccion facilidad de aplicacion de las vacunas mayor estabilidad de los biologicos facilidad de distribucion sin requerir refrigeracion la relativamente facil manipulacion genetica y la modificacion post-traduccional de protefnas eucariontes Ademas de que los antfgenos expresados en plantas se encuentran protegidos a su paso por el tracto gastrointestinal Todas estas caracteristicas siempre son bien requeridas en la busqueda de nuevos biologicos Esta nueva tecnologia puede contribuir a programas de vacunacion global y tener un impacto dramatico en la salud publica y veterinaria no solo en nuestro pais sino tambien en otros con problemas similares Agradecimientos Proyecto apoyado por el consejo Nacional de Ciencia y Tecnologia referencia G34635-8

45

CDMA1n MlETING ON RESEARCH AND RABIES CONTROL

IN THE AMERICAS

Mesa Redonda Producci6n y Control de Vacunas humanas y Veterinarias

THE PRODUCTION OF PCECV - A MODERN CELL CULTURE RABIES VACCINE FOR HUMAN USE (43)

Wolfgang Haupt PhD Chiron VaccinesChiron Behring - Marburg Germany

Before Wiktor and Koprowski developed the first cell culture rabies vaccines propagated on human diploid cells in the 1960s mature nerve tissue from infected rabbits sheep goats or mice was used to manufacture most rabies vaccines The myelin components of these mature nerve tissue vaccines (NTVs) occasionally caused neurologic reactions including acute disseminated encephalomyelitis In most areas of the world the complication rate of these NTVs exceeds the risk of rabies and the use of NTVs is strongly recommended to be discontinued Unfortunately substandard NTVs are still used in some parts of the world For example Semple vaccines (inactivated virus grown on sheep brain) are used in Asia and Africa and Fuenzalida vaccines (inactivated virus grown on suckling mouse brain) are used in South America and Africa The first human diploid cell rabies vaccines (HDCVs) were studied in humans in the early 1970s and were introduced for human use in the mid-1970s and early 1980s Human diploid cell vaccines are more effective than NTVs and serious postvaccination complications ) are uncommon However adverse reactions following booster doses with a HDCV which is not highly purified have limited the use of tl1is HDCV Although HDCVs quickly became the new world standard their production remained complicated and expensive with low yields Consequently they proved not to be the solution for rabies in Asian Latin American and African countries where the disease is endemic Although HDCVs remain in production their use is limited to only a few wealthy countries and is declining Besides these HDCVs locally produced cell culture vaccines with questionable potency and efficacy resulting in inconsistent and unreliable protection are currently used in China and Russia More efficient methods of producing rabies vaccines have led to the development of state-of-the-art second-generation cell culture rabies vaccines - purified chick embryo cell culture (PCEC) vaccine and purified Vero cell derived rabies vaccine (PVRV) In addition a rabies vaccine was developed on avian substrate purified duck embryo vaccine (PDEV) All three vaccines were introduced in the mid-1980s VACCINE PRODUCTION The rabies virus strain used to produce PCEC vaccine was isolated from a girl named Flury who was bitten by a dog in Georgia in 1939 This so-called Flury strain was adapted to chick brain the same year to chick embryos in 1945 and to chick fibroblast cell cultures in 1971 resulting in the Flury LEP-C25 virus strain After cell propagation (3 days) and virus harvesting (10 days) the virus is inactivated with p-propiolactone and then purified and concentrated by continuous density gradient ultracentrifugation (7 days) Antibody binding and safety testing (20 days) and batch completion (50 days) conclude the manufacturing process which takes a total of 90 days compared with 150 days to manufacture HDCV The standardized PCEC vaccine contains gt25 IU of viral antigen per dose For the final potency each lot is tested by the NIH mouse inoculation test a time-consuming test (gt 4 weeks) with a high variability In-process potency control is done by validated ABT and ELISA tests Shelf-life of the vaccine is 4 years The vaccine is to be stored at 2-8 degC

VACUNA CONTRA LA RABIA PARA USO EN ANIMALES (41) Eduardo Aycardi

Adriana Sierra Oscar Robin Edgar Arias Guillermo Restrepo Empresa Colombiana de Productos Veterinarios SAvECOL

Avenida EI Dorado No 82-93 Bogota DC Colombia

RESUMEN La linea celular BHK21 C13 de crecimiento y metabolismo lento para cultivo en monocepas obtenida de la Universidad de Wisconsin Las celulas son conservadas en nitrogeno Ifquido en el Banco de Celulas Se inicia con una botella de 150 cc se abre a un rotante y despues a 5 volumen suficiente para el cultivo de microportadores en bioreactor4L) con flujo continuo suministro de O2 ycontrol automatico de oxigeno disuelto (DO) y pH EI proceso tiene duraci6n de 10 dfas Este sistema de cultivo permite altas concentraciones celulares en nuestro caso 10 a 12 millonesml para producir cosechas con alto contenido de virus La cosecha (70L) se recibe en un soporte para su preservac6n Se clarifica por filtraci6n para eliminar resfdudos celulares y se inactiva con BEl 3mM a 25degC por 24 horas Se determina la inocuidad mediante la inoculaci6n de ratones para descartar la presencia de virus vivo La glicoproteina del virus se cuantifica con anticuerpos monoclonales por ELISA

46

XI REUNION INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMERICAS IN n-tE AMERICAS

INVESTIGACION Estamos trabajando en la produccion de vacuna para uso en animales con el virus de la rabia multiplicado en celulas VERO en microportadores inactivado con BEl 3mm purificado por filtracion y concentrado p~r cormatograffa para la presentacion en las formas Ifquida y liofilizada La vacuna para caninos ya se encuentra en la fase de registro ante la autoridad sanitaria LA VACUNA Es una vacuna Hquida eleborada con el virus de la cepa Pasteur (VP) propagado en celulas BHK inactivado con BEl purificado p~r filtracion molecular absorbido en gel de hidroxido de alurninio Cada dosis de vacuna contiene 10(66) DLR 50 de virus de la rabia antes de inactivacion con una potencia mfnima relativa no menor de una unidad internacional (10U1 Indicada para la inmunizacion activa contra la rabia en perros gatos mascotas y ganado bovino desde los tres meses de edad en adelante Revacunacion cada ano La vacuna debe mantenerse en refrigeracion entre 3 0 y 7degC Debe agitarse antes de su uso No se debe dar rnasaje despues de la aplicacion En perros gatos y masfotas de 5 10 Y 50 dosis y cajas multiples de 6 frascos p~r 5 y 10 dosis

VACUNA ANTIRRAslCA HUMANA EN CELULAS VERO - INACTIVADA PURIFICADA POR CROMATOGRAFIA (42)

Dr Eduardo Aycardi Gerente de Investigacion y Desarrollo - VECOL Ora Adriana Sierra Profesional Responsable Unidad de Rabia VECOL

Empresa Colombiana de Productos Veterinarios SAVECOL

La linea celular Vero desde su inicio en 1962 a partir de un cultivo primario y despues de muchos pasajes ha sido caracterizada de acuerdo a los requerimientos para una Ifnea celular contfnua empleada en la produccion de virus inactivadosVecol obtuvo la primera ampolleta de celulas Vero en 1992 del banco American Type Culture Collection a partir de la cual se prepar~ el banco de celulas que fue sometido a pruebas de identidad de la linea celular por caracterizacion citogenetica y enzimatica y pruebas de ausencia de bacterias hongos rnicoplasrnas y virus EI virus empleado en la produccion de la vacuna es virus fijo de rabia cepa LPasteur aislada en 1882 y adaptada a celulas Vero despues de pasajes seriados en cerebro de conejo hasta el pasaje 2061 en 1983 en el Instituto Pasteur EI virus fue caracterizado con anticuerpos monoclonales neutralizantes anti-glicoprotefna La cepa fue obtenida por el laboratorio a traves del Centro Colaborativo de Referencia OMS - Unidad de Rabia-Instituto PasteurAI igual que el banco de celulas el banco de virus se sometio a pruebas de titulo infectante en ratones identidad e integridad y pruebas de ausencia de bacteriasy hongosLa preparacion de la vacuna se basa en la tecnica desarrollada por van Wezel que consiste en realizar el cultivo celular sobre microportadores el desarrollo de medios de cultivo de caracterfsticas especiales y el sistema de perfusion implementado p~r Vecol dan como resultado cultivos celulares de hasta 10 a 12 millones de celulas p~r mililitro en biorreactores de 4L que al ser infectados con esta concentracion celular producen cosechas de un alto contenido viral que se determina cuantHicando la glicoprotefna G por la prueba de Elisa EI cultivo despues de la infeccion tiene una duracion de 20 a 24 dfas durante los cuales se recolecta la cosecha viral en recipientes con el soporte indicado para su adecuada preservacion Una vez finalizado el cultivo la cosecha de aproximadamente 70L es clarificada p~r filtracion con el fin de eliminar restos celulares y algunos microportadores que pueden estar presentes La cosecha clarificada se concentra a un volumen de 4L paso necesario para la posterior purificacion p~r cromatograffa Para la concentracion se emplea un sistema de ultrafiltracion contfnua de flujo tangencial a traves de modulos de poliolefina excluyendo por este medio agua sales y compuestos de tamano rnolecular pequeno mientras el virus rabico es retenidoLa suspension de virus se inactiva con fS-propilactona luego de 10 cual se realizan las pruebas de inocuidad para descartar la presencia de virus vivo EI paso siguiente es la purificacion por cromatograffa de exclusi6n molecular proceso durante el cual se remueven entre otros las protefnas sericas otras protefnas exogenas rojo fenol y sales presentes en los medios de cultivo a la vez que reduce la cantidad de DNA residual de las celulas Vero obteniendo al final una vacuna altamente purificada que cumple con los requerimientos de la Pharmacopea Americana y Europea para productos derivados de Ifneas celulares contfnuas de lt 100 pg de DNA celular residual por dosis recientemente aumentado a lt10 ng p~r la OMS EI virus purificado es formulado envasado en viales de 05 ml y desecado al vacfo para aumentar su estabilidadUna vez definidos los procediemientos de produccion y control de la vacuna se inicio la elaboraci6n industrial de cuatro lotes piloto entre 1994 y 1995 que han sido analizados p~r los laboratorios de control de calidad del Instituto Nacional de Salud de Colombia (INS) y el Instituto de Proteccion de Alimentos y Zoonosis de la Oficina Sanitaria Panamericana (INPPAZ) cumpliendo con las especificaclones de potencia (gt 25 UI) esterilidad e inocuidad exigidos par la OMS En julio de

47

CDMA1n MlETING ON RESEARCH AND RABIES CONTROL

IN THE AMERICAS

Mesa Redonda Producci6n y Control de Vacunas humanas y Veterinarias

THE PRODUCTION OF PCECV - A MODERN CELL CULTURE RABIES VACCINE FOR HUMAN USE (43)

Wolfgang Haupt PhD Chiron VaccinesChiron Behring - Marburg Germany

Before Wiktor and Koprowski developed the first cell culture rabies vaccines propagated on human diploid cells in the 1960s mature nerve tissue from infected rabbits sheep goats or mice was used to manufacture most rabies vaccines The myelin components of these mature nerve tissue vaccines (NTVs) occasionally caused neurologic reactions including acute disseminated encephalomyelitis In most areas of the world the complication rate of these NTVs exceeds the risk of rabies and the use of NTVs is strongly recommended to be discontinued Unfortunately substandard NTVs are still used in some parts of the world For example Semple vaccines (inactivated virus grown on sheep brain) are used in Asia and Africa and Fuenzalida vaccines (inactivated virus grown on suckling mouse brain) are used in South America and Africa The first human diploid cell rabies vaccines (HDCVs) were studied in humans in the early 1970s and were introduced for human use in the mid-1970s and early 1980s Human diploid cell vaccines are more effective than NTVs and serious postvaccination complications ) are uncommon However adverse reactions following booster doses with a HDCV which is not highly purified have limited the use of tl1is HDCV Although HDCVs quickly became the new world standard their production remained complicated and expensive with low yields Consequently they proved not to be the solution for rabies in Asian Latin American and African countries where the disease is endemic Although HDCVs remain in production their use is limited to only a few wealthy countries and is declining Besides these HDCVs locally produced cell culture vaccines with questionable potency and efficacy resulting in inconsistent and unreliable protection are currently used in China and Russia More efficient methods of producing rabies vaccines have led to the development of state-of-the-art second-generation cell culture rabies vaccines - purified chick embryo cell culture (PCEC) vaccine and purified Vero cell derived rabies vaccine (PVRV) In addition a rabies vaccine was developed on avian substrate purified duck embryo vaccine (PDEV) All three vaccines were introduced in the mid-1980s VACCINE PRODUCTION The rabies virus strain used to produce PCEC vaccine was isolated from a girl named Flury who was bitten by a dog in Georgia in 1939 This so-called Flury strain was adapted to chick brain the same year to chick embryos in 1945 and to chick fibroblast cell cultures in 1971 resulting in the Flury LEP-C25 virus strain After cell propagation (3 days) and virus harvesting (10 days) the virus is inactivated with p-propiolactone and then purified and concentrated by continuous density gradient ultracentrifugation (7 days) Antibody binding and safety testing (20 days) and batch completion (50 days) conclude the manufacturing process which takes a total of 90 days compared with 150 days to manufacture HDCV The standardized PCEC vaccine contains gt25 IU of viral antigen per dose For the final potency each lot is tested by the NIH mouse inoculation test a time-consuming test (gt 4 weeks) with a high variability In-process potency control is done by validated ABT and ELISA tests Shelf-life of the vaccine is 4 years The vaccine is to be stored at 2-8 degC

VACUNA CONTRA LA RABIA PARA USO EN ANIMALES (41) Eduardo Aycardi

Adriana Sierra Oscar Robin Edgar Arias Guillermo Restrepo Empresa Colombiana de Productos Veterinarios SAvECOL

Avenida EI Dorado No 82-93 Bogota DC Colombia

RESUMEN La linea celular BHK21 C13 de crecimiento y metabolismo lento para cultivo en monocepas obtenida de la Universidad de Wisconsin Las celulas son conservadas en nitrogeno Ifquido en el Banco de Celulas Se inicia con una botella de 150 cc se abre a un rotante y despues a 5 volumen suficiente para el cultivo de microportadores en bioreactor4L) con flujo continuo suministro de O2 ycontrol automatico de oxigeno disuelto (DO) y pH EI proceso tiene duraci6n de 10 dfas Este sistema de cultivo permite altas concentraciones celulares en nuestro caso 10 a 12 millonesml para producir cosechas con alto contenido de virus La cosecha (70L) se recibe en un soporte para su preservac6n Se clarifica por filtraci6n para eliminar resfdudos celulares y se inactiva con BEl 3mM a 25degC por 24 horas Se determina la inocuidad mediante la inoculaci6n de ratones para descartar la presencia de virus vivo La glicoproteina del virus se cuantifica con anticuerpos monoclonales por ELISA

46

XI REUNION INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMERICAS IN n-tE AMERICAS

INVESTIGACION Estamos trabajando en la produccion de vacuna para uso en animales con el virus de la rabia multiplicado en celulas VERO en microportadores inactivado con BEl 3mm purificado por filtracion y concentrado p~r cormatograffa para la presentacion en las formas Ifquida y liofilizada La vacuna para caninos ya se encuentra en la fase de registro ante la autoridad sanitaria LA VACUNA Es una vacuna Hquida eleborada con el virus de la cepa Pasteur (VP) propagado en celulas BHK inactivado con BEl purificado p~r filtracion molecular absorbido en gel de hidroxido de alurninio Cada dosis de vacuna contiene 10(66) DLR 50 de virus de la rabia antes de inactivacion con una potencia mfnima relativa no menor de una unidad internacional (10U1 Indicada para la inmunizacion activa contra la rabia en perros gatos mascotas y ganado bovino desde los tres meses de edad en adelante Revacunacion cada ano La vacuna debe mantenerse en refrigeracion entre 3 0 y 7degC Debe agitarse antes de su uso No se debe dar rnasaje despues de la aplicacion En perros gatos y masfotas de 5 10 Y 50 dosis y cajas multiples de 6 frascos p~r 5 y 10 dosis

VACUNA ANTIRRAslCA HUMANA EN CELULAS VERO - INACTIVADA PURIFICADA POR CROMATOGRAFIA (42)

Dr Eduardo Aycardi Gerente de Investigacion y Desarrollo - VECOL Ora Adriana Sierra Profesional Responsable Unidad de Rabia VECOL

Empresa Colombiana de Productos Veterinarios SAVECOL

La linea celular Vero desde su inicio en 1962 a partir de un cultivo primario y despues de muchos pasajes ha sido caracterizada de acuerdo a los requerimientos para una Ifnea celular contfnua empleada en la produccion de virus inactivadosVecol obtuvo la primera ampolleta de celulas Vero en 1992 del banco American Type Culture Collection a partir de la cual se prepar~ el banco de celulas que fue sometido a pruebas de identidad de la linea celular por caracterizacion citogenetica y enzimatica y pruebas de ausencia de bacterias hongos rnicoplasrnas y virus EI virus empleado en la produccion de la vacuna es virus fijo de rabia cepa LPasteur aislada en 1882 y adaptada a celulas Vero despues de pasajes seriados en cerebro de conejo hasta el pasaje 2061 en 1983 en el Instituto Pasteur EI virus fue caracterizado con anticuerpos monoclonales neutralizantes anti-glicoprotefna La cepa fue obtenida por el laboratorio a traves del Centro Colaborativo de Referencia OMS - Unidad de Rabia-Instituto PasteurAI igual que el banco de celulas el banco de virus se sometio a pruebas de titulo infectante en ratones identidad e integridad y pruebas de ausencia de bacteriasy hongosLa preparacion de la vacuna se basa en la tecnica desarrollada por van Wezel que consiste en realizar el cultivo celular sobre microportadores el desarrollo de medios de cultivo de caracterfsticas especiales y el sistema de perfusion implementado p~r Vecol dan como resultado cultivos celulares de hasta 10 a 12 millones de celulas p~r mililitro en biorreactores de 4L que al ser infectados con esta concentracion celular producen cosechas de un alto contenido viral que se determina cuantHicando la glicoprotefna G por la prueba de Elisa EI cultivo despues de la infeccion tiene una duracion de 20 a 24 dfas durante los cuales se recolecta la cosecha viral en recipientes con el soporte indicado para su adecuada preservacion Una vez finalizado el cultivo la cosecha de aproximadamente 70L es clarificada p~r filtracion con el fin de eliminar restos celulares y algunos microportadores que pueden estar presentes La cosecha clarificada se concentra a un volumen de 4L paso necesario para la posterior purificacion p~r cromatograffa Para la concentracion se emplea un sistema de ultrafiltracion contfnua de flujo tangencial a traves de modulos de poliolefina excluyendo por este medio agua sales y compuestos de tamano rnolecular pequeno mientras el virus rabico es retenidoLa suspension de virus se inactiva con fS-propilactona luego de 10 cual se realizan las pruebas de inocuidad para descartar la presencia de virus vivo EI paso siguiente es la purificacion por cromatograffa de exclusi6n molecular proceso durante el cual se remueven entre otros las protefnas sericas otras protefnas exogenas rojo fenol y sales presentes en los medios de cultivo a la vez que reduce la cantidad de DNA residual de las celulas Vero obteniendo al final una vacuna altamente purificada que cumple con los requerimientos de la Pharmacopea Americana y Europea para productos derivados de Ifneas celulares contfnuas de lt 100 pg de DNA celular residual por dosis recientemente aumentado a lt10 ng p~r la OMS EI virus purificado es formulado envasado en viales de 05 ml y desecado al vacfo para aumentar su estabilidadUna vez definidos los procediemientos de produccion y control de la vacuna se inicio la elaboraci6n industrial de cuatro lotes piloto entre 1994 y 1995 que han sido analizados p~r los laboratorios de control de calidad del Instituto Nacional de Salud de Colombia (INS) y el Instituto de Proteccion de Alimentos y Zoonosis de la Oficina Sanitaria Panamericana (INPPAZ) cumpliendo con las especificaclones de potencia (gt 25 UI) esterilidad e inocuidad exigidos par la OMS En julio de

47

XI REUNION INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMERICAS IN n-tE AMERICAS

INVESTIGACION Estamos trabajando en la produccion de vacuna para uso en animales con el virus de la rabia multiplicado en celulas VERO en microportadores inactivado con BEl 3mm purificado por filtracion y concentrado p~r cormatograffa para la presentacion en las formas Ifquida y liofilizada La vacuna para caninos ya se encuentra en la fase de registro ante la autoridad sanitaria LA VACUNA Es una vacuna Hquida eleborada con el virus de la cepa Pasteur (VP) propagado en celulas BHK inactivado con BEl purificado p~r filtracion molecular absorbido en gel de hidroxido de alurninio Cada dosis de vacuna contiene 10(66) DLR 50 de virus de la rabia antes de inactivacion con una potencia mfnima relativa no menor de una unidad internacional (10U1 Indicada para la inmunizacion activa contra la rabia en perros gatos mascotas y ganado bovino desde los tres meses de edad en adelante Revacunacion cada ano La vacuna debe mantenerse en refrigeracion entre 3 0 y 7degC Debe agitarse antes de su uso No se debe dar rnasaje despues de la aplicacion En perros gatos y masfotas de 5 10 Y 50 dosis y cajas multiples de 6 frascos p~r 5 y 10 dosis

VACUNA ANTIRRAslCA HUMANA EN CELULAS VERO - INACTIVADA PURIFICADA POR CROMATOGRAFIA (42)

Dr Eduardo Aycardi Gerente de Investigacion y Desarrollo - VECOL Ora Adriana Sierra Profesional Responsable Unidad de Rabia VECOL

Empresa Colombiana de Productos Veterinarios SAVECOL

La linea celular Vero desde su inicio en 1962 a partir de un cultivo primario y despues de muchos pasajes ha sido caracterizada de acuerdo a los requerimientos para una Ifnea celular contfnua empleada en la produccion de virus inactivadosVecol obtuvo la primera ampolleta de celulas Vero en 1992 del banco American Type Culture Collection a partir de la cual se prepar~ el banco de celulas que fue sometido a pruebas de identidad de la linea celular por caracterizacion citogenetica y enzimatica y pruebas de ausencia de bacterias hongos rnicoplasrnas y virus EI virus empleado en la produccion de la vacuna es virus fijo de rabia cepa LPasteur aislada en 1882 y adaptada a celulas Vero despues de pasajes seriados en cerebro de conejo hasta el pasaje 2061 en 1983 en el Instituto Pasteur EI virus fue caracterizado con anticuerpos monoclonales neutralizantes anti-glicoprotefna La cepa fue obtenida por el laboratorio a traves del Centro Colaborativo de Referencia OMS - Unidad de Rabia-Instituto PasteurAI igual que el banco de celulas el banco de virus se sometio a pruebas de titulo infectante en ratones identidad e integridad y pruebas de ausencia de bacteriasy hongosLa preparacion de la vacuna se basa en la tecnica desarrollada por van Wezel que consiste en realizar el cultivo celular sobre microportadores el desarrollo de medios de cultivo de caracterfsticas especiales y el sistema de perfusion implementado p~r Vecol dan como resultado cultivos celulares de hasta 10 a 12 millones de celulas p~r mililitro en biorreactores de 4L que al ser infectados con esta concentracion celular producen cosechas de un alto contenido viral que se determina cuantHicando la glicoprotefna G por la prueba de Elisa EI cultivo despues de la infeccion tiene una duracion de 20 a 24 dfas durante los cuales se recolecta la cosecha viral en recipientes con el soporte indicado para su adecuada preservacion Una vez finalizado el cultivo la cosecha de aproximadamente 70L es clarificada p~r filtracion con el fin de eliminar restos celulares y algunos microportadores que pueden estar presentes La cosecha clarificada se concentra a un volumen de 4L paso necesario para la posterior purificacion p~r cromatograffa Para la concentracion se emplea un sistema de ultrafiltracion contfnua de flujo tangencial a traves de modulos de poliolefina excluyendo por este medio agua sales y compuestos de tamano rnolecular pequeno mientras el virus rabico es retenidoLa suspension de virus se inactiva con fS-propilactona luego de 10 cual se realizan las pruebas de inocuidad para descartar la presencia de virus vivo EI paso siguiente es la purificacion por cromatograffa de exclusi6n molecular proceso durante el cual se remueven entre otros las protefnas sericas otras protefnas exogenas rojo fenol y sales presentes en los medios de cultivo a la vez que reduce la cantidad de DNA residual de las celulas Vero obteniendo al final una vacuna altamente purificada que cumple con los requerimientos de la Pharmacopea Americana y Europea para productos derivados de Ifneas celulares contfnuas de lt 100 pg de DNA celular residual por dosis recientemente aumentado a lt10 ng p~r la OMS EI virus purificado es formulado envasado en viales de 05 ml y desecado al vacfo para aumentar su estabilidadUna vez definidos los procediemientos de produccion y control de la vacuna se inicio la elaboraci6n industrial de cuatro lotes piloto entre 1994 y 1995 que han sido analizados p~r los laboratorios de control de calidad del Instituto Nacional de Salud de Colombia (INS) y el Instituto de Proteccion de Alimentos y Zoonosis de la Oficina Sanitaria Panamericana (INPPAZ) cumpliendo con las especificaclones de potencia (gt 25 UI) esterilidad e inocuidad exigidos par la OMS En julio de

47

XI REUNION INTERNACIONAL SOBRE RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACION Y CONTROL CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMERICAS AMERICAS

1999 se obtuvieron los resultados por parte del INS del estudio de inmunogenicidad para evaluar la eficacia de a vacuna en celulas Vero INMUNOVACreg disenado y realizado por este instituto EI estudio realizado en 49 estudiantes de veterinaria voluntarios de una Universidad local con edades entre 22 shy26 sin previa vacunaci6n contra rabia y sin evidencia de inmunodeficiencia Los estudiantes fueron vacunados los dfas 0 7 Y 30 Y sangrados los dfas 0 15 30 Y 45 Del estudio se concluyo que la vacuna INMUNOVACreg protege satisfactoriamente 15 dfas despues de la vacunaci6n inicial (contenido de anticuerpos de 25 U1 por ml en promedio comparado con un requerimieto de 05 Ullml) La protecci6n a los 30 dras fue de 33 Ullml en promedio Tambien se evaluaron los efectos secundarios de la vacuna en los estudiantes siendo estos indetectables En conclusion los parses de America cuentan hoy con un nuevo producto de altfsima pureza y eficacia que se constituye en el sustituto de la vacuna de CRL por los beneficios que ofrece tales como la ausencia de efectos post-vacunales el reducido numero de dosis a aplicar com parada con la CRL y un costo moderado comparada con vacunas de las mismas caracterfsticas producidas en Europa

PRODUCCION DE VACUNAS ANTIRRABICAS EN EL PERU (40) Ana Maria Espinoza MV MSc

Directora General Centro Nacional de Producci6n de Biol6gicos

Instituto Nacional de Salud Lima - Peru

La vacunaci6n constituye la medida sanitaria mas efectiva y asociada a programas debidamente ejecutados han significado una notable reduccion en el impacto de las enfermedades particularmente en el caso de la rabia por el curso fatal de la infecci6n En el Peru las primeras vacunas se elaboraron a partir de 1938 en el Instituto Nacional de Higiene siguiendo la tecnica de Fermi y luego la vacuna Semple Conforme se hadan avances tecnol6gicos en la producci6n de vacunas el Instituto fue adaptando estas tecnicas como la inactivacion de la vacuna la vacuna a virus vivo modificado cepa Flury y la vacuna tipo Fuenzalida elaborada en cerebro de ratones lactantes A partir de 1985 se inicia la produccion de la vacuna antirrabica de uso veterinario en cultivos celulares que ha significado para el pars contar con suficiente cantidad de dosis para atender oportunamente la demanda nacional de los programas de control de los Ministerios de Salud y Agricultura Asimismo en los ultimos dos anos se han producido lotes pilotos de vacuna de uso humano producida en cultivos celulares y cuya validacion se encuentra en ejecucion La capacidad de producci6n de las vacunas antirrabicas en el Centro Nacional de Produccion de Biologicos se ha ido incrementando con las mejoras de infraestructura y equipamiento y a la fecha se ha adquirido un equipo fermentador que va a permitir la producci6n en sistema de microportadores que tiene alto rendimiento y con ello disminuir los costos del producto Los cuadros adjuntos muestran la produccion de las vacunas antirrabicas de uso humano y veterinario en los ultimos anos Toda la producci6n del CNPB cum pie con las Normas de la Organizaci6n Mundial de la Salud en cuanto a los controles de calidad de proceso y producto final y las Normas de Buenas Practicas de Manufactura

Sesi6n 6 Vacunaci6n Animal - trabajos de investigaci6n

ORAL VACCINATION WITH SAG2 BAITS AND INTERNATIONAL RABIES CONTROL (44) Olivier Segal

Address (including country) Virbac Laboratories - BP 27 - CARROS- FRANCE

The situation of rabies in the world is constantly evolving It differs greatly from one continent to another In North America the incriminated species are the raccoon skunk fox and coyote populations In Latin America Asia and Africa dogs are an important reservoir for rabies transmitting the disease by bite to humans and farm animals mainly cattle In Europe adaptation of rabies to the fox allowed the virus to invade many countries The development of an oral rabies vaccine for dogs was encouraged by the success obtained with oral vaccination of foxes in Europe with Virbac vaccine The vaccine strain called SAG2 has successfully passed the efficacy and safety requirements recommended by WHO It is efficacious and safe for foxes jackals dogs coyotes skunks and raccoons It is safe for more than thirty non-target species1 This led to the signature of a Memorandum of Understanding between WHO and Virbac aimed at the development of oral vaccination of dogs in needing countries RABIDOG the dog-specific bait was developed in collaboration with the French National Center for Scientific Research the Centers for Disease Control the AFSSA the IRVT and the Allerton Provincial Veterinary

48 I I

t

XI REUNION INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RAIltlIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

Laboratory The liver flavor of the bait is very attractive The vaccine is lyophilized allowing conservation in hot climates The coating is very thin thus allowing the dogs saliva to reconstitute the liquid vaccine within seconds to put it in contact with oral mucosa and tonsils The shape of the bait allows excellent prehension by dogs of all breeds and sizes The first oral vaccination of dogs started in Eastern South Africa southwest of Durban and close to the border of KwaZuluNatal and the Eastern Cape Province No deaths or illnesses in dogs or in non-target species could be attributed to the use of the vaccine 86 of the dog owners preferred oral vaccination to the parenteral route 95 thought that using baits to inoculate dogs was a good idea that would work well 75 maintained they would allow the Veterinary Department to offer baits to their dogs while they were absent A 1 year-monitoring of rabies outbreaks show no rabies cases in the areas of the field trial As an adjunct to parenteral vaccination SAG2 vaccines successfully used in Europe (France Switzerland) and South Africa increase vaccination coverage by reaching otherwise inaccessible animals

USE AND EFFICACY OF THE SAG2 RABIES VACCINE BAIT IN FRANCE (45) Cliquet F1

Bruyere V1 Rosenthal F1 Aubert MFA1 1 AFSSA Nancy

1 BP 9 54220 Malzeville (France)

From Spring 1994 until now (October 2000) the SAG2 rabies vaccine bait has been used in France for vaccinating foxes by oral route One month after the end of vaccine distribution and during the five following months foxes were sampled in vaccinated areas for evaluating bait consumption by the examination of tetracycline deposits in teeth - in adult foxes from 1994 to 1997 the percentage of foxes marked with tetracycline after spring and autumn campaigns significantly increased from 69 to 92 and from 73 to 92 respectively - in fox cubs during the same periods the percentage after spring and autumn campaigns the percentage significantly increased from 44 to 80 and from 37 to 84 respectively This increase of the proportion of foxes that have eaten at least one meal of baits was obtained by increasing the number of baits distributed per square km 13 from 1986 to 1995 15 in 1995 and 20 since 1996 This increase in bait density has been decided for balancing the highly significant increase in fox population density During the same period the percentage of adult foxes with rabies ELISA antibodies increased from a range of 56-70 to 72-85 In fox cubs following spring campaigns this percentage remained within the range 31-38 and following autumn campaigns increased from 56 to 76 The vaccinated area varied from 3866 to 32709 square km Therefore for a consistent analysis of the effect of vaccination it was necessary to evaluate the variation of rabies incidence (rabies case density) before and after vaccination separately for every campaign If we exclude three rabies cases that occurred at the extreme margin of the vaccinated area (at less than 1 km inside the national border) a total of 13 campaigns during spring and autumn were followed by - no variation in rabies incidence 1 time (1 case before and 1 case after the campaign of autumn 1996) - a decrease in rabies incidence (6 times) - the maintenance of the rabies free status despite the infection of neighbouring countries at close contact of the area (7 times) The area has been maintained rabies free since the campaign of spring 1997_When distributed in the fields the SAG2 rabies vaccine bait has been readily taken by free ranging foxes As a result rabies decreased significantly in the vaccinated areas until its complete elimination and the re-infection from still contaminated neighbouring areas was successfully prevented France is free from fox mediated rabies since 22 months (or 48 months if we except the 3 above mentioned cases) However vaccination will be pursued until the risk of entry of rabies from neighbouring countries can be excluded

ORAL RABIES VACCINATION OF RACCOONS WITH SAG-2 (46) First Author Cathleen A Hanlon

Michael Niezgoda Patricia Morrill Charles E Rupprecht Centers for Disease Control and Prevention - Atlanta GA USA

In the USA raccoon rabies occurs throughout one million square kilometers of the east coast with a human population of over 90 million residents Only one orally efficacious vaccine is currently available for field trials targeting free-ranging raccoons In this study a novel alternative SAG-2 a highly attenuated escape mutant rabies virus vaccine was evaluated orally in raccoons A total of ten raccoons were sedated five raccoons received 1 ml of vaccine virus (1 x1 0(9fICID(50)) instilled orally

49

XI REUNI6N INTERNACIONAL SaBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMtRICAS IN THE AMERICAS

and five raccoons received 1 ml of diluent In addition to baseline samples blood samples were collected at two weeks post-vaccination on the day of rabies virus inoculation and seven days after challenge One month after oral instillation of vaccine or placebo raccoons were sedated and inoculated in the right masseter with 05 ml of a pooled homogenate of raccoon salivary glands from naturally-infected raccoons At the first definitive signs of rabies raccoons were sedated and euthanized Rabies was confirmed by the fluorescent antibody test on brain material All five controls succumbed to rabies on days 15 through 18 following challenge All vaccinated raccoons remained clinically-normal and survived lethal rabies virus challenge In addition to the previously reported oral efficacy of SAG-2 in captive skunks this study demonstrates the potential of SAG-2 rabies vaccine for oral immunization of free-ranging raccooons

KINETICS OF RABIES IMMUNE RESPONSE OF YOUNG FOXES (vulpes vulpes) ORALLY VACCINATED WITH VRG VACCINE (48)

Blasco E 1

Cliquet F Barrat J Brochier B2 Pastoret pp3 Aubert MFA1 1 AFSSA Nancy 2 Institut Pasteur 3 Fac Med Vet 1 Malzeville (France)

3 20 bd de Colonster Sart Tilman 4000 Liege (Belgium)

The only way to break the sylvatic rabies cycle in Western Europe is to immunise red fox (Vupes vupes) populations that maintain the disease From 1989 to the end of 1998 fox oral vaccination has allowed a 99 decrease of rabies cases in Europe However the high increase in fox population densities renders a complete eradication of rabies more difficult particularly in residual foci Moreover the key of a successful oral vaccination in spring is to give to fox cubs access to the baits and to immunise them We have conducted an experimental study on captive foxes (21 litters 95 fox cubs) to evaluate the duration of passive immunity acquired by fox cubs to follow up the development of their active immunity and to study the interference between passive immunity and protection conferred by oral vaccination The trial included twelve vixens vaccinated at 30 days of pregnancy with the VRG vaccine and nine gravid vixens remained unvaccinated (control group) In both groups litters were divided in 3 other groups receiving the vaccine at different times (30 days old 90 days old and a control unvaccinated group) All young foxes were first bled at 30 days then at 2 weeks intervals until 5 months of age Our study shows that rabies antibodies neutralising rabies virus can be transferred to their cubs by vixens orally vaccinated with VRG during pregnancy Maternally derived antibody titres in fox cubs declined regularly and were not detected 45 to 75 days after birth Our data demonstrate the very early ability of fox cubs to respond to oral vaccination with VRG (~ 30 days old) Moreover vaccinated fox cubs challenged at 5 months of age resisted to an intramuscular challenge with an homologous fox rabies strain whatever the immunological status of the vixens (vaccinated or not) Therefore fox cubs immunisation against rabies with VRG per os is possible at an early age whatever the immune status of their mothers Nevertheless the age at which young foxes are able to consume available baits should be established

DYNAMICS OF SAD B19 DERIVED MATERNAL IMMUNITY AGAINST RABIES IN FOX CUBS (vulpes vulpes) (49)

Thomas MOiler (1) Ad Vos (2) Peter Schuster (2) Thomas Selhorst (1) Uwe Wenzel (3) Andreas Neubert (2)

(1) Federal Research Center for Virus Diseases of Animals - Wusterhausen Germany (2) Impfstoffwerk Dessau Tornau GmbH (IDT) Rosslau Germany

(3) private veterinary clinic Leipzig Germany Institute for epidemiological Diagnostics Federal Research Center for Virus Diseases of Animals

Wusterhausen Germany

Even after 20 years of oral vaccination of foxes against rabies in Europe there was a lack of information concerning maternally immunity in fox cubs until our experiments conducted in 1998 and 1999 have shown that maternally transferred immunity does occur And this immunity was shown to influence the development of an immune response after active immunization of fox cubs Because these data were based on blood samples taken from foxes aged 23 to 73 days the dynamic of maternal antibodies (maAb) could not be exactly assessed Therefore in 2000 we conducted a new experiment including 64 cubs born of 19 vixens orally vaccinated with SAD 819 In this experiment blood samples (n 281) were taken up to six times per fox ranging from day 3 to 43 days post partum to follow maternal immunity immediately after girth of the cubs Serum neutralizing antibodies (nAb) were analyzed by a

50

INTERNACIONAl SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

EN LA RABIA

fluorescence focus-inhibition technique (RFFIT) and in immunoblot (IB) and nAb-titers were expressed in International Units (IUml) We were interested to answer the following questions (1) How does the nAb-titer of the vixen influence the magnitude of the nAb-titer of the cubs (2) What is the shape of the age dependent nAb-titers decline in fox cubs and what is their half-life

time (3) What is the critical age of fox cubs at which maternal antibodies can no longer be distinguished from

unspecific reactions In order to answer these questions we combined the serological data (n =570) obtained in 1998 1999 and 2000 comprising 249 and 55 cubs born of vaccinated and naive vixens respectively A non-linear regression model was fitted to the data This model is capable to simultaneously predict (i) the age dependency of maternally derived nAb in fox cubs (ii) the dependency of this time course upon the nAb-titer of the mother animal and (3) the half-life time of maAb in cubs The results clearly indicate that increasingnAb-titer of the vixens also increases the nAb-titer of the offspring The nAb-titer of the cubs exponentially decreases with age At an critical age of about 30 to 35 days post partum the nAb-titers of fox cubs is below a threshold (05 IUml) beyond which maAb can no longer distinguished from unspecific reactions in RFFIT This critical age does depend on the initial nAb-titer of the vixen at the time of birth However maAb can still be detected after that time using IB technique giving evidence that maAb outlast the time during whicrl they can be detected by RFFIT The half-life time of maAb in cubs could be estimated to be about 10 days

FEASIBILITY OF CANINE ORAL RABIES VACCINATION IN SRI LANKA-A PRELIMINARY REPORT (50)

DrMALR Perera DrPALHarischandra DrMrsOmala Wimalaratne DrMrsSNDamboragama

Public Health Veterinary Services

Objective To test the feasibility of introducing oral rabies vaccine ( vaCCinia recombinant rabies glycoprotein) To improve domestic dog immunisation coverage in a selected area Design A prospective field trial Setting Panadura an area relatively isolated by waterways making it a suitable field laboratory Methods A routine parenteral vaccination program was carried out A house of house survey identified the Re-sidual non-vaccinated dogs in the selected area Oral vaccine was offered to the non-vaccinated domestic dogs Results Of 4322 dogs in the households 1242 dogs (287

) were eligible for oral vaccine 659 (53) were Considered to have accepted the oral vaccine with release of the vaccine in the oral cavity Conclusion It is feasible to use oral rabies vaccine to enhance immunisation coverage

ESTUDIO PRELIMINAR PARA LA DETERMINACION DE LA EDAD DE PRIMOVACUNACION ANTIRRABICA CANINA (51)

Ricardo Leon Vega Amanda Liliana Diaz Rodriguez y Claudia Patricia Giraldo Giraldo

Ministerio de Salud de Colombia y Universidad del Tolima (Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia)

Ministerio de Salud Carrera 13 NQ 32-76 Piso 14 Santa Fe de Bogota Colombia EI presente trabajo se realizo en la ciudad de Ibague ubicada a 1285 metros sobre el nivel del mar con temperatura promedio de 21 grados centfgrados Las pruebas se realizaron en el Laboratorio de la Empresa Colombiana de Productos Veterinarios - VECOL entidad que patrocino la investigacion Se utilizo la prueba de inmunofluorescencia previo traslado de los sueros congelados Se trabajo con 12 hembras caninas en edad adulta las cuales se aparearon por raza edad y caracterfsticas de peso y talla Antes de dividirlas en grupo experimental y en el control se les determino los niveles de anticuerpos y se establecieron los grupos a estudiar de acuerdo a la proteccion 0 no proteccion que posefan sus madres Las hembras caninas se estudiaron en sus respectivos hogares Las crfas presentaron diferencias en cuanto a su estado nutricional estado fisiologico y sexo Las madres permanecieron con sus crfas durante un mes a partir del cual se separaron y fueron ubicadas en otras residencias familiares Se utilizo estrogen os para inducirles el celo (cuando se requirio) y se utilizo el producto RABICAN de VECOL Las hembras se dividieron en dos(2) grupos seis presentaron anticuerpos contra la rabia (Grupo I) y seis no presentaban (Grupo II) Cada~rupo se dividio en siete

1~i

51

INTERNATIONAL MEETING ON ADVANCES AND RABIES

IN THE

(7) subgrupos La diferencia de estos subgrupos estaba dada por la edad de primovacunacion de los cachorros CONCLUSIONES 1 Los cachorros de madres protegidas poseen inmunidad proferida por la madre especialmente por

la vra calostral ya que la trasplacentaria encuentra barreras para su transmisiOn 2 La vacunacion previa a la gestacion es un procedente importante en la inmunidad desarrollada por

los caninos en las primeras semanas de vida Esto es especialmente importante en areas con circulacion del virus rabico esta inmunidad transferida confiere anticuerpos protectores hasta los 21 dfas de edad

3 La vacunacion antirrabica a partir de la cuarta semana de edad estimula la produccion de anticuerpos protectores (mayor de 1 125 pero menor de 1 625) Los cachorros vacunados a partir de la octava y doceava semana de edad mostraron proteccion similar con los vacunados a la cuarta semana de edad (mayor de 1 125 pero menor de 1 625)

4 La vacunacion a partir de la cuarta semana no demostro neutralizacion de los anticuerpos maternos la vacunacion antes de esta semana si Razon por la cual no deben vacunarse cachorros especialmente hijos de madres vacunadas antes de la cuarta semana de edad

5 Se sugiere que la OPS coordine a nivel de America Latina estudios colaborativos que permitan intercambiar experiencias entre los parses

6 Basados en estos estudios que mejoren la operatividad de las actividades de prevencion y control de rabia se deben establecer las normas Se sugiere adem as crear una red de investigacion y un banco de investigaciones en Zoonosis y otros aspectos que permitan el intercambio arriba propuesto no solo en rabia sino en otros aspectos relacionados con la Salud Publica Veterinaria

DETERMINACION DE NIVELES DE ANTICUERPOS CONTRA EL VIRUS DE LA RABIA EN CANINOS Y EVALUACION DE ALGUNOS FACTORES DE RIESGO EN CIUDAD

BOLIVAR - SANTA FE BOGOTA 1997 - 1998 (51-A) Ricardo Leon Vega Aragon

Jesus Antonio Moreno Rodriguez Juan Manuel Rodriguez Navarrete Universidad de La Salle (Facultad de Veterinaria) y Ministerio de Salud Santa Fe de Bogota Colombia

La Ciudad de Santa Fe de Bogota por su ubicacion geografica su poblacion canina vfas de acceso y otros condicionantes es catalog ada como de alto riesgo para Rabia en caninos Dentro de esta Ciudad ciudad Bolivar por su ubicacion y niveles de pobreza constituye la localidad de mayor riesgo EI trabajo se hizo con el fin de evaluar los niveles de anticuerpos antirrabicos seroprotectivos como repuesta a la vacunacion can ina al igual que ponderar algunas variables relacionadas con la posibilidad de re-introduccion y diseminacion del virus rabico Antes de hacer la serodeterminacion y para calcular el tamano de la muestra se hizo una encuesta previa por muestreo estratificado al azar La relacion perro hombre encontrada fue 14 bastante distinta a los estimados que tenia la localidad EI 426 de los animales en estudio procedfan de fuera de Santa Fe de Bogota 10 cual es indicador de alta migracion un 32 de estos animales presentaban una edad inferior a seis (6) meses y no han recibido vacuna antirrabica EI 385 de los animales son menores de un (1) ano 10 cual se relaciona con una alta tasa de renovacion canina EI 723 corresponde a machos Un 507 mostraba signos de desnutricion estres y ectoparasitos Un 331 permanecen la mayor parte del d~ en la calle buscando alimento En la titulacion de anticuerpos un 215 fue negativo a la presencia de anticuerpos protectivos un 148 de los que presentaban anticuerpos no registraban antecedentes de vacunacion antirrabica y correspondfan a animales menores de un ano 10 cual puede ser indicador de transmision por-Ia madre en la gestacion y lactancia Un 385 de los animales con antecedentes de vacunacion vigente presentaron titulacion negativa esto puede ser consecuencia a fallas en la inoculacion y conservacion de la vacuna problemas de inmunodeficiencia 0 presencia de anticuerpos maternos en el momenta de la vacunacion Se encontro que las autoridades sanitarias no hacen un control eficaz sobre los animales que migran ni tampoco hay criterios para exigir requisitos a estos animales La mayorfa de los propietarios de perros que permanecen en la calle son personas que han migrado a la ciudad Se hace necesario 1 Realizar estudios sobre dinamica poblacional canina estimativos de tasas de renovacion canina

52

XI REUNI6N INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RAaJES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMrRICAS IN THE AMERICAS

2 Las vacunaciones masivas se deben realizar en areas con circulacion de virus cada ano 0 por 10

menos programar vacunaciones para poblacion nueva anualmente y ejecutar vacunacion de mantenimiento para evitar la ruptura de las coberturas utiles de vacunacion

3 Es necesario vigilar la red de frio y el manejo del biologico al igual que las tecnicas de aplicacion de la vacuna

4 Se requiere hacer periodicamente estudios inmunologicos para determinar la proporcion real de perros protegidos

5 Ademas de 10 anterior es indispensable que se ejecuten actividades de caracter educativo a la comunidad con el objeto de crear conciencia en los duenos y tenedores de perros sobre la necesidad de mantenerlos vacunados no permitir su permanencia en la calle sin la supervision de duenos y tenedores

6 Se reqvfere hacer campanas para controlar la natalidad canina y ejercer vigilancia en los animales que ingresan de otras localidades especial mente si proceden de areas con Rabia

Con el objeto de cooperar con la actividad de prevencion y Control de Rabia la OPSOMS debe propiciar mas la investigacion de trabajos que sean soporte para estos programas y no para favorecer la curiosidad cientffica

Sesi6n 7 Rabia Transmitida par Especies Silvestres

MOLECULAR CHARACTERIZATION OF VAMPIRE BAT RABIES ISOLATES FROM MEXICO (57) Carlos A de Mattos

Guillermo Benitez George M Baer Cecilia C de Mattos Centers for Disease Control and Prevention Atlanta Georgia USA

Several rabies outbreaks of bovine paralytic rabies have occurred in the States of Sinaloa Michoacan Puebla Guerrero and Veracruz between 1992 and 1996 causing serious economic losses in the local livestock industry Despite the public health and economic significance of vampire bat (Desmodus rotundus) transmitted rabies in Latin America very few primary viral isolates from these animals have been crlaracterized antigenically and genetically limiting knowledge of the intra- and inter-species rabies transmission cycles in this species The objective of this investigation was to obtain primary rabies isolates from vampire bats and to compare their antigenic and genetic characteristics with other rabies isolates collected from domestic and wildlife obtained in the Americas One hundred vampire bats were captured during these Mexican outbreaks They were sent to the laboratory for rabies diagnosis by the direct immunofluorescence technique on brain impressions Thirteen positive rabies samples were obtained The virus was isolated by intra cerebral inoculation of 4-weeks old mice The molecular characterization of the isolates was carried out using a panel of 8 monoclonal antibodies directed against the viral nucleoprotein and by the genetic analyses of a 320 base pair portion of the nucleoprotein gene Three antigenic variants (AgV) 3 5 and 11 previously described in Latin America and 1 new variant were found In the genetic characterization 10 isolates from Puebla Veracruz and Guerrero antigenically characterized as AgV 3 and 11 segregated together forming a monophyletic group These viruses showed a genetic distance between 0 to 06 Two samples one from Michoacan and another from Guerrero antigenically typified as a new AgV formed an independent clade These isolates presented a genetic distance ranging from 9 to 10 witrl all the other isolates The only virus obtained in Sinaloa characterized as AgV 5 segregated in an independent branch Its genetic distance with the other viruses ranged from 5 to 9 The phylogenetic comparison of these Mexican viruses with isolates obtained from different species of Chiroptera and from vampire bat-related cases throughout Latin America revealed the presence of a genetic diversity previously not detected in isolates from hematophagous bats This genetic diversity was not associated with the geographical origin or the temporal isolation of the samples The use of molecular techniques in conjunction with the current national sylvatic rabies surveillance programs and the development of international collaborative programs for rabies surveillance and control will allow a better understanding of the ecology of the disease in vampire bats Trlis reservoir has increased in population density and its geographical distribution has been highly modified during the last two decades as consequence of drastic changes in its environment

53

INTERNATIONAL ADVANCES

PROPOSAL FOR ACTION IN AREAS PRESENTING CANINE AND FELINE DESMODUS ROTUNDUS TRANSMITTED RABIES CASES (52)

Carrieri ML Harmani NMS Peres NF Kotait I

Instituto Pasteur Sao PauloSP

Canine and feline rabies has significantly decreased since 1995 in the State of Sao Paulo due to measures implemented by the Sao Paulo State Rabies Control Program Coordination In 1995 169 cases of rabies occurred in 1996 104 cases in 1997 11 cases in 1998 7 cases in 1999 5 cases and up to August 2000 2 cases Instituto Pasteur the headquarters of the Program Coordination and Reference Laboratory for Brazil uses a panel of 8 monoclonal antibodies and the indirect immunofluorescence test for identifying the transmitter species of rabies cases We used the monoclonal antibody immunofluorescence test in 9 of the last 14 canine and feline rabies cases making it possible to recognize variant 3 (Desmodus rotundus - hematophagous bat) in 8 of these samples of which 7 in dogs and 1 in a cat This investigation aims to propose actions for controlling canine and feline rabies transmitted by hemathophagous bats The first step to be taken is to describe the region urban suburban or borderline and rural When a case is described in an urban area epidemiological investigation should be immediately initiated for detecting human and animal contacts identifying possible shelters and colonies of Desmodus rotundus and identifying other animal species aiming to control the canine and feline reservoirs If the identified region is suburban it should be described from the epidemiological point of view (controed non-controlled or silent) If it is a controlled area the recommended actions are identical to those for urban areas For non-controlled and silent areas epidemiological investigation and the control of dog cat and herbivorous reservoirs is recommended Rural areas should also be described epidemiologically (sporadic alert endemic or epidemic areas)

In sporadic and alert areas the recommended actions are identical to those of urban areas In endemic and epidemic areas epidemiological investigation reservoir control description of the distribution of herbivorous recording of Desmodus rotundus shelters and systematic herbivorous vaccination should be carried out

ESTUDIO SOBRE FACTORES DE RIESGO DE MORDEDURAS POR MURCIELAGOS HEMATOFAGOS EN LOCALIDADES DE LOS DISTRITOS DE AYNA Y SANTA ROSA DE LA

PROVINCIA DE LA MAR DEPARTAMENTO DE AYACUCHO - PERU 1999 (53) Dr Jorge Gomez Benavides (1) - Lie Melvy Ormaeehe Maeassi (2)

Ministerio de Salud - Ofieina General de Epidemiologra Lima - Peru

INTRODUCCION En el valle del rro Apurfmac desde 1982 se notificaron casos de rabia bovina transmitida por murcielagos hematofagos en las localidades de Pichari (provincia de La Convencion departamento de Cuzco ubicada al margen derecho del rro Apurfmac) y en Sivia (distrito del mismo nombre provincia de Huanta departamento de Ayacucho ubicada en el margen izquierdo del mismo rfo) Los servicios de salud de Ayacucho informaron la presentacion de 24 casos de rabia humana transmitida por vampiros en el valle del rro Apurfmac entre los arios 1883-85 Solo 4 casos fueron confirmados por ellaboratorio En el Peru se ha informado la presencia de mordeduras por murch~lagos hematofagos en comunidades nativas siendo consideradas como un hecho habitual De la misma manera en comunidades mineras que ingresan al habitat natural de los vampiros En otros lugares este hecho es accidental por la presencia de ganado que es la fuente principal de alimentaciqJ EI reporte de mordeduras por vampiros en forma frecuente en comunidades de este valle motivo la ejecucion de est a investigacion METODOLOGfA EI presente es un estudio de casos y controles no pareado Se realizo estratificacion por grupos de edad Se selecciono aquellas comunidades que presentaban mayor incidencia de mordeduras

~ En el distrito de Ayna comunidad de Ccenta y Nueva Union ~ En el distrito de Santa Rosa comunidad de Comunpiari

Definicion de caso persona con antecedente de mordedura de vampiro en los ultimos 12 meses Definicion de control persona que vive en el mismo domicilio 0 en la vecindad sin antecedente de mordedura de vampiro RESULTADOS Las comunidades contaban con muy escasa cantidad de ganado Se realizaron 106 entrevistas siendo 39 casos y 67 controles Los ninos menores de 15 anos fueron la poblacion mas afectada Por mordeduras Casi el 70 de los entrevistados eran del sexo femenino EI 100 de las

54

INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

mordeduras fueron intradomiciliarias Solo el 14 de los entrevistados (jefe de familia) conoc[a que la enfermedad era incurable y el 36 respondio que el perro y 0 murcielago transmitfa la enfermedad Casi el 60 de la poblacion refiere lavarse la rnordedura con agua y jabon EI 63 de los entrevistados referfan dormir con mosquitero Analisis de casos y controles en las localidades encuestadas

Variable Grupo etareo menor de 15 anos OR =848 (IC 95 =179 - 401) y Variable No usar mosquitero OR = 185 (IC 95 = 41 - 831)

Conclusion Se considera que el pertenecer al grupo etareo menor de 15 como un factor de riesgo yel uso de mosquiteros como un factor protector La rabia transmitida por murcielagos vampiro es un riesgo latente para el valle del rio Apurlmac teniendo en cuenta sus antecedentes y porque rio arriba en el valle del rio Pampas se mantiene la rabia silvestre en forma endemica desde 1995

DETERMINACION DE HABITOS PRACTICAS Y ACTITUDES QUE FAVORECEN LA PRESENTACION DE MORDEDURAS DE MURCIELAGOS EN COMUNIDADES NATIVAS

AGUAFllJNAS DE LA PROVINCIA DE SAN IGNACIO - DEPARTAMENTO DE CAJAMARCA (54) Dr Manuel Antonio Arana Arana

Ora Ana Marfa Navarro Vela Oireccion Sub Regional de Salud - Jaen

INTRODUCCION La Rabia silvestre transmitida por rnurcielagos constituye el cicio de transmision en zonas de selva del Peru Desde 1975 las Provincias de Huanta Condorcanqui y EI Manu han sido afectadas por brotes de Rabia causando defunciones en la poblacion y al mismo tiempo cuantiosas perdidas economicas a la ganaderfa En los brotes ocurridos se observa que la poblacion mas afectada es la poblacion nativa sobre todo de la Etnia Aguaruna-Huambisa localizada en la Provincia de Condorcanqui AI igual que en Condorcanqui en la Provincia de San Ignacio existen comunidades nativas Aguarunas con notificacion de mordeduras por murcielagos siendo materia de investigacion los factores de riesgo de Rabia silvestre causados por la carencia de medidas de proteccion contra las mordeduras de quiropteros En el brote de Rabia bovina silvestre reportado en Enero de 1998 en la localidad de Burgos-Distrito de Huarango de la Provincia de San Ignacio la poblacion humana en riesgo estuvo circunscrita a las personas que habfan manipulado animales enfermos y a la poblacion nativa Aguaruna pertenecientes a las comunidades de Naranjos y Yamakey sin embargo en estas no ocurrieron accidentes de mordeduras motivando este hallazgo la aplicacion de encuestas CAP OBJETIVOS Determinar los habitos actitudes y practicas que condicionan la presencia de mordeduras en la poblacion MATERIAL Y METODOS

Encuestas CAP mapas croquis Se encuesto al 92 del total de viviendas (115) de 08 comunidades nativas Aguarunas Naranjos (16) Alto Naranjos (07) Yamakey (17) Supayacu (38) Nva Kucha (07) Alto Kunchin (09) Santa Agueda (08) y Valencia (13) Consolidacion y procesamiento de datos en Epi Info version 6

RESULTADOS Y CONCLUSIONES Del total de 115 viviendas encuestadas el 5131 son de tipo A(Cana-guayaquil-chonta-broza-palmiche) existiendo el mayor porcentaje(305) de estas viviendas en la localidad de Supayacu EI tipo B(Cana-guayaquil-madera-calamina) alcanzo un 3565 en el contexto total predominando dicho tipo de viviendas en Supayacu(4634) EI 1304 de viviendas son de adobe la comunidad de Naranjos (60) registra el porcentaje mas alto EI mayor numero de mordeduras se produjo en las viviendas de tipo A y tipo B siendo este porcentaje de 4717 y 4528 respectivamente Menos accidentes ocurren en viviendas de tipo C(Adobe)con 755 EI 60 de hogares visitados refirieron utilizar mosquiteros De las 69 viviendas que refieren contar con mosquiteros presentaron mordeduras el 4783 mientras que en el 5217 de elias no ocurrieron Supayacu es la comunidad que registra mayor porcentaje de mordeduras siendo aste de 3478 y las comunidades que tienen menor porcentaje son Santa Agueda y Naranjos con 377 cada una elias EI 6086 de encuestados relaciona a la Rabia como una enfermedad propia de los anirnales el 1130 afirma que es una enfermedad del hombre mientras que el 2784 de encuestados no contesto Con relacion al grupo etareo el mas vulnerable es el grupo comprendido entre 0-12 anos(8072) produciandose el mayor numero de mordeduras en ninos de 06-12 anos(5522) Las mordeduras en el cuerpo se ubicaron con mayor frecuencia en la cabeza(9020) La zooprofilaxis se pudo observar en la piblacion de la comunidad de Naranjos que se dedican al alquiler de pastizales a comunidades ganaderas mestizas como una de sus principales actividades economicas al igual que el

55

XI REUNION INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RAIltlIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

Laboratory The liver flavor of the bait is very attractive The vaccine is lyophilized allowing conservation in hot climates The coating is very thin thus allowing the dogs saliva to reconstitute the liquid vaccine within seconds to put it in contact with oral mucosa and tonsils The shape of the bait allows excellent prehension by dogs of all breeds and sizes The first oral vaccination of dogs started in Eastern South Africa southwest of Durban and close to the border of KwaZuluNatal and the Eastern Cape Province No deaths or illnesses in dogs or in non-target species could be attributed to the use of the vaccine 86 of the dog owners preferred oral vaccination to the parenteral route 95 thought that using baits to inoculate dogs was a good idea that would work well 75 maintained they would allow the Veterinary Department to offer baits to their dogs while they were absent A 1 year-monitoring of rabies outbreaks show no rabies cases in the areas of the field trial As an adjunct to parenteral vaccination SAG2 vaccines successfully used in Europe (France Switzerland) and South Africa increase vaccination coverage by reaching otherwise inaccessible animals

USE AND EFFICACY OF THE SAG2 RABIES VACCINE BAIT IN FRANCE (45) Cliquet F1

Bruyere V1 Rosenthal F1 Aubert MFA1 1 AFSSA Nancy

1 BP 9 54220 Malzeville (France)

From Spring 1994 until now (October 2000) the SAG2 rabies vaccine bait has been used in France for vaccinating foxes by oral route One month after the end of vaccine distribution and during the five following months foxes were sampled in vaccinated areas for evaluating bait consumption by the examination of tetracycline deposits in teeth - in adult foxes from 1994 to 1997 the percentage of foxes marked with tetracycline after spring and autumn campaigns significantly increased from 69 to 92 and from 73 to 92 respectively - in fox cubs during the same periods the percentage after spring and autumn campaigns the percentage significantly increased from 44 to 80 and from 37 to 84 respectively This increase of the proportion of foxes that have eaten at least one meal of baits was obtained by increasing the number of baits distributed per square km 13 from 1986 to 1995 15 in 1995 and 20 since 1996 This increase in bait density has been decided for balancing the highly significant increase in fox population density During the same period the percentage of adult foxes with rabies ELISA antibodies increased from a range of 56-70 to 72-85 In fox cubs following spring campaigns this percentage remained within the range 31-38 and following autumn campaigns increased from 56 to 76 The vaccinated area varied from 3866 to 32709 square km Therefore for a consistent analysis of the effect of vaccination it was necessary to evaluate the variation of rabies incidence (rabies case density) before and after vaccination separately for every campaign If we exclude three rabies cases that occurred at the extreme margin of the vaccinated area (at less than 1 km inside the national border) a total of 13 campaigns during spring and autumn were followed by - no variation in rabies incidence 1 time (1 case before and 1 case after the campaign of autumn 1996) - a decrease in rabies incidence (6 times) - the maintenance of the rabies free status despite the infection of neighbouring countries at close contact of the area (7 times) The area has been maintained rabies free since the campaign of spring 1997_When distributed in the fields the SAG2 rabies vaccine bait has been readily taken by free ranging foxes As a result rabies decreased significantly in the vaccinated areas until its complete elimination and the re-infection from still contaminated neighbouring areas was successfully prevented France is free from fox mediated rabies since 22 months (or 48 months if we except the 3 above mentioned cases) However vaccination will be pursued until the risk of entry of rabies from neighbouring countries can be excluded

ORAL RABIES VACCINATION OF RACCOONS WITH SAG-2 (46) First Author Cathleen A Hanlon

Michael Niezgoda Patricia Morrill Charles E Rupprecht Centers for Disease Control and Prevention - Atlanta GA USA

In the USA raccoon rabies occurs throughout one million square kilometers of the east coast with a human population of over 90 million residents Only one orally efficacious vaccine is currently available for field trials targeting free-ranging raccoons In this study a novel alternative SAG-2 a highly attenuated escape mutant rabies virus vaccine was evaluated orally in raccoons A total of ten raccoons were sedated five raccoons received 1 ml of vaccine virus (1 x1 0(9fICID(50)) instilled orally

49

XI REUNI6N INTERNACIONAL SaBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMtRICAS IN THE AMERICAS

and five raccoons received 1 ml of diluent In addition to baseline samples blood samples were collected at two weeks post-vaccination on the day of rabies virus inoculation and seven days after challenge One month after oral instillation of vaccine or placebo raccoons were sedated and inoculated in the right masseter with 05 ml of a pooled homogenate of raccoon salivary glands from naturally-infected raccoons At the first definitive signs of rabies raccoons were sedated and euthanized Rabies was confirmed by the fluorescent antibody test on brain material All five controls succumbed to rabies on days 15 through 18 following challenge All vaccinated raccoons remained clinically-normal and survived lethal rabies virus challenge In addition to the previously reported oral efficacy of SAG-2 in captive skunks this study demonstrates the potential of SAG-2 rabies vaccine for oral immunization of free-ranging raccooons

KINETICS OF RABIES IMMUNE RESPONSE OF YOUNG FOXES (vulpes vulpes) ORALLY VACCINATED WITH VRG VACCINE (48)

Blasco E 1

Cliquet F Barrat J Brochier B2 Pastoret pp3 Aubert MFA1 1 AFSSA Nancy 2 Institut Pasteur 3 Fac Med Vet 1 Malzeville (France)

3 20 bd de Colonster Sart Tilman 4000 Liege (Belgium)

The only way to break the sylvatic rabies cycle in Western Europe is to immunise red fox (Vupes vupes) populations that maintain the disease From 1989 to the end of 1998 fox oral vaccination has allowed a 99 decrease of rabies cases in Europe However the high increase in fox population densities renders a complete eradication of rabies more difficult particularly in residual foci Moreover the key of a successful oral vaccination in spring is to give to fox cubs access to the baits and to immunise them We have conducted an experimental study on captive foxes (21 litters 95 fox cubs) to evaluate the duration of passive immunity acquired by fox cubs to follow up the development of their active immunity and to study the interference between passive immunity and protection conferred by oral vaccination The trial included twelve vixens vaccinated at 30 days of pregnancy with the VRG vaccine and nine gravid vixens remained unvaccinated (control group) In both groups litters were divided in 3 other groups receiving the vaccine at different times (30 days old 90 days old and a control unvaccinated group) All young foxes were first bled at 30 days then at 2 weeks intervals until 5 months of age Our study shows that rabies antibodies neutralising rabies virus can be transferred to their cubs by vixens orally vaccinated with VRG during pregnancy Maternally derived antibody titres in fox cubs declined regularly and were not detected 45 to 75 days after birth Our data demonstrate the very early ability of fox cubs to respond to oral vaccination with VRG (~ 30 days old) Moreover vaccinated fox cubs challenged at 5 months of age resisted to an intramuscular challenge with an homologous fox rabies strain whatever the immunological status of the vixens (vaccinated or not) Therefore fox cubs immunisation against rabies with VRG per os is possible at an early age whatever the immune status of their mothers Nevertheless the age at which young foxes are able to consume available baits should be established

DYNAMICS OF SAD B19 DERIVED MATERNAL IMMUNITY AGAINST RABIES IN FOX CUBS (vulpes vulpes) (49)

Thomas MOiler (1) Ad Vos (2) Peter Schuster (2) Thomas Selhorst (1) Uwe Wenzel (3) Andreas Neubert (2)

(1) Federal Research Center for Virus Diseases of Animals - Wusterhausen Germany (2) Impfstoffwerk Dessau Tornau GmbH (IDT) Rosslau Germany

(3) private veterinary clinic Leipzig Germany Institute for epidemiological Diagnostics Federal Research Center for Virus Diseases of Animals

Wusterhausen Germany

Even after 20 years of oral vaccination of foxes against rabies in Europe there was a lack of information concerning maternally immunity in fox cubs until our experiments conducted in 1998 and 1999 have shown that maternally transferred immunity does occur And this immunity was shown to influence the development of an immune response after active immunization of fox cubs Because these data were based on blood samples taken from foxes aged 23 to 73 days the dynamic of maternal antibodies (maAb) could not be exactly assessed Therefore in 2000 we conducted a new experiment including 64 cubs born of 19 vixens orally vaccinated with SAD 819 In this experiment blood samples (n 281) were taken up to six times per fox ranging from day 3 to 43 days post partum to follow maternal immunity immediately after girth of the cubs Serum neutralizing antibodies (nAb) were analyzed by a

50

INTERNACIONAl SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

EN LA RABIA

fluorescence focus-inhibition technique (RFFIT) and in immunoblot (IB) and nAb-titers were expressed in International Units (IUml) We were interested to answer the following questions (1) How does the nAb-titer of the vixen influence the magnitude of the nAb-titer of the cubs (2) What is the shape of the age dependent nAb-titers decline in fox cubs and what is their half-life

time (3) What is the critical age of fox cubs at which maternal antibodies can no longer be distinguished from

unspecific reactions In order to answer these questions we combined the serological data (n =570) obtained in 1998 1999 and 2000 comprising 249 and 55 cubs born of vaccinated and naive vixens respectively A non-linear regression model was fitted to the data This model is capable to simultaneously predict (i) the age dependency of maternally derived nAb in fox cubs (ii) the dependency of this time course upon the nAb-titer of the mother animal and (3) the half-life time of maAb in cubs The results clearly indicate that increasingnAb-titer of the vixens also increases the nAb-titer of the offspring The nAb-titer of the cubs exponentially decreases with age At an critical age of about 30 to 35 days post partum the nAb-titers of fox cubs is below a threshold (05 IUml) beyond which maAb can no longer distinguished from unspecific reactions in RFFIT This critical age does depend on the initial nAb-titer of the vixen at the time of birth However maAb can still be detected after that time using IB technique giving evidence that maAb outlast the time during whicrl they can be detected by RFFIT The half-life time of maAb in cubs could be estimated to be about 10 days

FEASIBILITY OF CANINE ORAL RABIES VACCINATION IN SRI LANKA-A PRELIMINARY REPORT (50)

DrMALR Perera DrPALHarischandra DrMrsOmala Wimalaratne DrMrsSNDamboragama

Public Health Veterinary Services

Objective To test the feasibility of introducing oral rabies vaccine ( vaCCinia recombinant rabies glycoprotein) To improve domestic dog immunisation coverage in a selected area Design A prospective field trial Setting Panadura an area relatively isolated by waterways making it a suitable field laboratory Methods A routine parenteral vaccination program was carried out A house of house survey identified the Re-sidual non-vaccinated dogs in the selected area Oral vaccine was offered to the non-vaccinated domestic dogs Results Of 4322 dogs in the households 1242 dogs (287

) were eligible for oral vaccine 659 (53) were Considered to have accepted the oral vaccine with release of the vaccine in the oral cavity Conclusion It is feasible to use oral rabies vaccine to enhance immunisation coverage

ESTUDIO PRELIMINAR PARA LA DETERMINACION DE LA EDAD DE PRIMOVACUNACION ANTIRRABICA CANINA (51)

Ricardo Leon Vega Amanda Liliana Diaz Rodriguez y Claudia Patricia Giraldo Giraldo

Ministerio de Salud de Colombia y Universidad del Tolima (Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia)

Ministerio de Salud Carrera 13 NQ 32-76 Piso 14 Santa Fe de Bogota Colombia EI presente trabajo se realizo en la ciudad de Ibague ubicada a 1285 metros sobre el nivel del mar con temperatura promedio de 21 grados centfgrados Las pruebas se realizaron en el Laboratorio de la Empresa Colombiana de Productos Veterinarios - VECOL entidad que patrocino la investigacion Se utilizo la prueba de inmunofluorescencia previo traslado de los sueros congelados Se trabajo con 12 hembras caninas en edad adulta las cuales se aparearon por raza edad y caracterfsticas de peso y talla Antes de dividirlas en grupo experimental y en el control se les determino los niveles de anticuerpos y se establecieron los grupos a estudiar de acuerdo a la proteccion 0 no proteccion que posefan sus madres Las hembras caninas se estudiaron en sus respectivos hogares Las crfas presentaron diferencias en cuanto a su estado nutricional estado fisiologico y sexo Las madres permanecieron con sus crfas durante un mes a partir del cual se separaron y fueron ubicadas en otras residencias familiares Se utilizo estrogen os para inducirles el celo (cuando se requirio) y se utilizo el producto RABICAN de VECOL Las hembras se dividieron en dos(2) grupos seis presentaron anticuerpos contra la rabia (Grupo I) y seis no presentaban (Grupo II) Cada~rupo se dividio en siete

1~i

51

INTERNATIONAL MEETING ON ADVANCES AND RABIES

IN THE

(7) subgrupos La diferencia de estos subgrupos estaba dada por la edad de primovacunacion de los cachorros CONCLUSIONES 1 Los cachorros de madres protegidas poseen inmunidad proferida por la madre especialmente por

la vra calostral ya que la trasplacentaria encuentra barreras para su transmisiOn 2 La vacunacion previa a la gestacion es un procedente importante en la inmunidad desarrollada por

los caninos en las primeras semanas de vida Esto es especialmente importante en areas con circulacion del virus rabico esta inmunidad transferida confiere anticuerpos protectores hasta los 21 dfas de edad

3 La vacunacion antirrabica a partir de la cuarta semana de edad estimula la produccion de anticuerpos protectores (mayor de 1 125 pero menor de 1 625) Los cachorros vacunados a partir de la octava y doceava semana de edad mostraron proteccion similar con los vacunados a la cuarta semana de edad (mayor de 1 125 pero menor de 1 625)

4 La vacunacion a partir de la cuarta semana no demostro neutralizacion de los anticuerpos maternos la vacunacion antes de esta semana si Razon por la cual no deben vacunarse cachorros especialmente hijos de madres vacunadas antes de la cuarta semana de edad

5 Se sugiere que la OPS coordine a nivel de America Latina estudios colaborativos que permitan intercambiar experiencias entre los parses

6 Basados en estos estudios que mejoren la operatividad de las actividades de prevencion y control de rabia se deben establecer las normas Se sugiere adem as crear una red de investigacion y un banco de investigaciones en Zoonosis y otros aspectos que permitan el intercambio arriba propuesto no solo en rabia sino en otros aspectos relacionados con la Salud Publica Veterinaria

DETERMINACION DE NIVELES DE ANTICUERPOS CONTRA EL VIRUS DE LA RABIA EN CANINOS Y EVALUACION DE ALGUNOS FACTORES DE RIESGO EN CIUDAD

BOLIVAR - SANTA FE BOGOTA 1997 - 1998 (51-A) Ricardo Leon Vega Aragon

Jesus Antonio Moreno Rodriguez Juan Manuel Rodriguez Navarrete Universidad de La Salle (Facultad de Veterinaria) y Ministerio de Salud Santa Fe de Bogota Colombia

La Ciudad de Santa Fe de Bogota por su ubicacion geografica su poblacion canina vfas de acceso y otros condicionantes es catalog ada como de alto riesgo para Rabia en caninos Dentro de esta Ciudad ciudad Bolivar por su ubicacion y niveles de pobreza constituye la localidad de mayor riesgo EI trabajo se hizo con el fin de evaluar los niveles de anticuerpos antirrabicos seroprotectivos como repuesta a la vacunacion can ina al igual que ponderar algunas variables relacionadas con la posibilidad de re-introduccion y diseminacion del virus rabico Antes de hacer la serodeterminacion y para calcular el tamano de la muestra se hizo una encuesta previa por muestreo estratificado al azar La relacion perro hombre encontrada fue 14 bastante distinta a los estimados que tenia la localidad EI 426 de los animales en estudio procedfan de fuera de Santa Fe de Bogota 10 cual es indicador de alta migracion un 32 de estos animales presentaban una edad inferior a seis (6) meses y no han recibido vacuna antirrabica EI 385 de los animales son menores de un (1) ano 10 cual se relaciona con una alta tasa de renovacion canina EI 723 corresponde a machos Un 507 mostraba signos de desnutricion estres y ectoparasitos Un 331 permanecen la mayor parte del d~ en la calle buscando alimento En la titulacion de anticuerpos un 215 fue negativo a la presencia de anticuerpos protectivos un 148 de los que presentaban anticuerpos no registraban antecedentes de vacunacion antirrabica y correspondfan a animales menores de un ano 10 cual puede ser indicador de transmision por-Ia madre en la gestacion y lactancia Un 385 de los animales con antecedentes de vacunacion vigente presentaron titulacion negativa esto puede ser consecuencia a fallas en la inoculacion y conservacion de la vacuna problemas de inmunodeficiencia 0 presencia de anticuerpos maternos en el momenta de la vacunacion Se encontro que las autoridades sanitarias no hacen un control eficaz sobre los animales que migran ni tampoco hay criterios para exigir requisitos a estos animales La mayorfa de los propietarios de perros que permanecen en la calle son personas que han migrado a la ciudad Se hace necesario 1 Realizar estudios sobre dinamica poblacional canina estimativos de tasas de renovacion canina

52

XI REUNI6N INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RAaJES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMrRICAS IN THE AMERICAS

2 Las vacunaciones masivas se deben realizar en areas con circulacion de virus cada ano 0 por 10

menos programar vacunaciones para poblacion nueva anualmente y ejecutar vacunacion de mantenimiento para evitar la ruptura de las coberturas utiles de vacunacion

3 Es necesario vigilar la red de frio y el manejo del biologico al igual que las tecnicas de aplicacion de la vacuna

4 Se requiere hacer periodicamente estudios inmunologicos para determinar la proporcion real de perros protegidos

5 Ademas de 10 anterior es indispensable que se ejecuten actividades de caracter educativo a la comunidad con el objeto de crear conciencia en los duenos y tenedores de perros sobre la necesidad de mantenerlos vacunados no permitir su permanencia en la calle sin la supervision de duenos y tenedores

6 Se reqvfere hacer campanas para controlar la natalidad canina y ejercer vigilancia en los animales que ingresan de otras localidades especial mente si proceden de areas con Rabia

Con el objeto de cooperar con la actividad de prevencion y Control de Rabia la OPSOMS debe propiciar mas la investigacion de trabajos que sean soporte para estos programas y no para favorecer la curiosidad cientffica

Sesi6n 7 Rabia Transmitida par Especies Silvestres

MOLECULAR CHARACTERIZATION OF VAMPIRE BAT RABIES ISOLATES FROM MEXICO (57) Carlos A de Mattos

Guillermo Benitez George M Baer Cecilia C de Mattos Centers for Disease Control and Prevention Atlanta Georgia USA

Several rabies outbreaks of bovine paralytic rabies have occurred in the States of Sinaloa Michoacan Puebla Guerrero and Veracruz between 1992 and 1996 causing serious economic losses in the local livestock industry Despite the public health and economic significance of vampire bat (Desmodus rotundus) transmitted rabies in Latin America very few primary viral isolates from these animals have been crlaracterized antigenically and genetically limiting knowledge of the intra- and inter-species rabies transmission cycles in this species The objective of this investigation was to obtain primary rabies isolates from vampire bats and to compare their antigenic and genetic characteristics with other rabies isolates collected from domestic and wildlife obtained in the Americas One hundred vampire bats were captured during these Mexican outbreaks They were sent to the laboratory for rabies diagnosis by the direct immunofluorescence technique on brain impressions Thirteen positive rabies samples were obtained The virus was isolated by intra cerebral inoculation of 4-weeks old mice The molecular characterization of the isolates was carried out using a panel of 8 monoclonal antibodies directed against the viral nucleoprotein and by the genetic analyses of a 320 base pair portion of the nucleoprotein gene Three antigenic variants (AgV) 3 5 and 11 previously described in Latin America and 1 new variant were found In the genetic characterization 10 isolates from Puebla Veracruz and Guerrero antigenically characterized as AgV 3 and 11 segregated together forming a monophyletic group These viruses showed a genetic distance between 0 to 06 Two samples one from Michoacan and another from Guerrero antigenically typified as a new AgV formed an independent clade These isolates presented a genetic distance ranging from 9 to 10 witrl all the other isolates The only virus obtained in Sinaloa characterized as AgV 5 segregated in an independent branch Its genetic distance with the other viruses ranged from 5 to 9 The phylogenetic comparison of these Mexican viruses with isolates obtained from different species of Chiroptera and from vampire bat-related cases throughout Latin America revealed the presence of a genetic diversity previously not detected in isolates from hematophagous bats This genetic diversity was not associated with the geographical origin or the temporal isolation of the samples The use of molecular techniques in conjunction with the current national sylvatic rabies surveillance programs and the development of international collaborative programs for rabies surveillance and control will allow a better understanding of the ecology of the disease in vampire bats Trlis reservoir has increased in population density and its geographical distribution has been highly modified during the last two decades as consequence of drastic changes in its environment

53

INTERNATIONAL ADVANCES

PROPOSAL FOR ACTION IN AREAS PRESENTING CANINE AND FELINE DESMODUS ROTUNDUS TRANSMITTED RABIES CASES (52)

Carrieri ML Harmani NMS Peres NF Kotait I

Instituto Pasteur Sao PauloSP

Canine and feline rabies has significantly decreased since 1995 in the State of Sao Paulo due to measures implemented by the Sao Paulo State Rabies Control Program Coordination In 1995 169 cases of rabies occurred in 1996 104 cases in 1997 11 cases in 1998 7 cases in 1999 5 cases and up to August 2000 2 cases Instituto Pasteur the headquarters of the Program Coordination and Reference Laboratory for Brazil uses a panel of 8 monoclonal antibodies and the indirect immunofluorescence test for identifying the transmitter species of rabies cases We used the monoclonal antibody immunofluorescence test in 9 of the last 14 canine and feline rabies cases making it possible to recognize variant 3 (Desmodus rotundus - hematophagous bat) in 8 of these samples of which 7 in dogs and 1 in a cat This investigation aims to propose actions for controlling canine and feline rabies transmitted by hemathophagous bats The first step to be taken is to describe the region urban suburban or borderline and rural When a case is described in an urban area epidemiological investigation should be immediately initiated for detecting human and animal contacts identifying possible shelters and colonies of Desmodus rotundus and identifying other animal species aiming to control the canine and feline reservoirs If the identified region is suburban it should be described from the epidemiological point of view (controed non-controlled or silent) If it is a controlled area the recommended actions are identical to those for urban areas For non-controlled and silent areas epidemiological investigation and the control of dog cat and herbivorous reservoirs is recommended Rural areas should also be described epidemiologically (sporadic alert endemic or epidemic areas)

In sporadic and alert areas the recommended actions are identical to those of urban areas In endemic and epidemic areas epidemiological investigation reservoir control description of the distribution of herbivorous recording of Desmodus rotundus shelters and systematic herbivorous vaccination should be carried out

ESTUDIO SOBRE FACTORES DE RIESGO DE MORDEDURAS POR MURCIELAGOS HEMATOFAGOS EN LOCALIDADES DE LOS DISTRITOS DE AYNA Y SANTA ROSA DE LA

PROVINCIA DE LA MAR DEPARTAMENTO DE AYACUCHO - PERU 1999 (53) Dr Jorge Gomez Benavides (1) - Lie Melvy Ormaeehe Maeassi (2)

Ministerio de Salud - Ofieina General de Epidemiologra Lima - Peru

INTRODUCCION En el valle del rro Apurfmac desde 1982 se notificaron casos de rabia bovina transmitida por murcielagos hematofagos en las localidades de Pichari (provincia de La Convencion departamento de Cuzco ubicada al margen derecho del rro Apurfmac) y en Sivia (distrito del mismo nombre provincia de Huanta departamento de Ayacucho ubicada en el margen izquierdo del mismo rfo) Los servicios de salud de Ayacucho informaron la presentacion de 24 casos de rabia humana transmitida por vampiros en el valle del rro Apurfmac entre los arios 1883-85 Solo 4 casos fueron confirmados por ellaboratorio En el Peru se ha informado la presencia de mordeduras por murch~lagos hematofagos en comunidades nativas siendo consideradas como un hecho habitual De la misma manera en comunidades mineras que ingresan al habitat natural de los vampiros En otros lugares este hecho es accidental por la presencia de ganado que es la fuente principal de alimentaciqJ EI reporte de mordeduras por vampiros en forma frecuente en comunidades de este valle motivo la ejecucion de est a investigacion METODOLOGfA EI presente es un estudio de casos y controles no pareado Se realizo estratificacion por grupos de edad Se selecciono aquellas comunidades que presentaban mayor incidencia de mordeduras

~ En el distrito de Ayna comunidad de Ccenta y Nueva Union ~ En el distrito de Santa Rosa comunidad de Comunpiari

Definicion de caso persona con antecedente de mordedura de vampiro en los ultimos 12 meses Definicion de control persona que vive en el mismo domicilio 0 en la vecindad sin antecedente de mordedura de vampiro RESULTADOS Las comunidades contaban con muy escasa cantidad de ganado Se realizaron 106 entrevistas siendo 39 casos y 67 controles Los ninos menores de 15 anos fueron la poblacion mas afectada Por mordeduras Casi el 70 de los entrevistados eran del sexo femenino EI 100 de las

54

INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

mordeduras fueron intradomiciliarias Solo el 14 de los entrevistados (jefe de familia) conoc[a que la enfermedad era incurable y el 36 respondio que el perro y 0 murcielago transmitfa la enfermedad Casi el 60 de la poblacion refiere lavarse la rnordedura con agua y jabon EI 63 de los entrevistados referfan dormir con mosquitero Analisis de casos y controles en las localidades encuestadas

Variable Grupo etareo menor de 15 anos OR =848 (IC 95 =179 - 401) y Variable No usar mosquitero OR = 185 (IC 95 = 41 - 831)

Conclusion Se considera que el pertenecer al grupo etareo menor de 15 como un factor de riesgo yel uso de mosquiteros como un factor protector La rabia transmitida por murcielagos vampiro es un riesgo latente para el valle del rio Apurlmac teniendo en cuenta sus antecedentes y porque rio arriba en el valle del rio Pampas se mantiene la rabia silvestre en forma endemica desde 1995

DETERMINACION DE HABITOS PRACTICAS Y ACTITUDES QUE FAVORECEN LA PRESENTACION DE MORDEDURAS DE MURCIELAGOS EN COMUNIDADES NATIVAS

AGUAFllJNAS DE LA PROVINCIA DE SAN IGNACIO - DEPARTAMENTO DE CAJAMARCA (54) Dr Manuel Antonio Arana Arana

Ora Ana Marfa Navarro Vela Oireccion Sub Regional de Salud - Jaen

INTRODUCCION La Rabia silvestre transmitida por rnurcielagos constituye el cicio de transmision en zonas de selva del Peru Desde 1975 las Provincias de Huanta Condorcanqui y EI Manu han sido afectadas por brotes de Rabia causando defunciones en la poblacion y al mismo tiempo cuantiosas perdidas economicas a la ganaderfa En los brotes ocurridos se observa que la poblacion mas afectada es la poblacion nativa sobre todo de la Etnia Aguaruna-Huambisa localizada en la Provincia de Condorcanqui AI igual que en Condorcanqui en la Provincia de San Ignacio existen comunidades nativas Aguarunas con notificacion de mordeduras por murcielagos siendo materia de investigacion los factores de riesgo de Rabia silvestre causados por la carencia de medidas de proteccion contra las mordeduras de quiropteros En el brote de Rabia bovina silvestre reportado en Enero de 1998 en la localidad de Burgos-Distrito de Huarango de la Provincia de San Ignacio la poblacion humana en riesgo estuvo circunscrita a las personas que habfan manipulado animales enfermos y a la poblacion nativa Aguaruna pertenecientes a las comunidades de Naranjos y Yamakey sin embargo en estas no ocurrieron accidentes de mordeduras motivando este hallazgo la aplicacion de encuestas CAP OBJETIVOS Determinar los habitos actitudes y practicas que condicionan la presencia de mordeduras en la poblacion MATERIAL Y METODOS

Encuestas CAP mapas croquis Se encuesto al 92 del total de viviendas (115) de 08 comunidades nativas Aguarunas Naranjos (16) Alto Naranjos (07) Yamakey (17) Supayacu (38) Nva Kucha (07) Alto Kunchin (09) Santa Agueda (08) y Valencia (13) Consolidacion y procesamiento de datos en Epi Info version 6

RESULTADOS Y CONCLUSIONES Del total de 115 viviendas encuestadas el 5131 son de tipo A(Cana-guayaquil-chonta-broza-palmiche) existiendo el mayor porcentaje(305) de estas viviendas en la localidad de Supayacu EI tipo B(Cana-guayaquil-madera-calamina) alcanzo un 3565 en el contexto total predominando dicho tipo de viviendas en Supayacu(4634) EI 1304 de viviendas son de adobe la comunidad de Naranjos (60) registra el porcentaje mas alto EI mayor numero de mordeduras se produjo en las viviendas de tipo A y tipo B siendo este porcentaje de 4717 y 4528 respectivamente Menos accidentes ocurren en viviendas de tipo C(Adobe)con 755 EI 60 de hogares visitados refirieron utilizar mosquiteros De las 69 viviendas que refieren contar con mosquiteros presentaron mordeduras el 4783 mientras que en el 5217 de elias no ocurrieron Supayacu es la comunidad que registra mayor porcentaje de mordeduras siendo aste de 3478 y las comunidades que tienen menor porcentaje son Santa Agueda y Naranjos con 377 cada una elias EI 6086 de encuestados relaciona a la Rabia como una enfermedad propia de los anirnales el 1130 afirma que es una enfermedad del hombre mientras que el 2784 de encuestados no contesto Con relacion al grupo etareo el mas vulnerable es el grupo comprendido entre 0-12 anos(8072) produciandose el mayor numero de mordeduras en ninos de 06-12 anos(5522) Las mordeduras en el cuerpo se ubicaron con mayor frecuencia en la cabeza(9020) La zooprofilaxis se pudo observar en la piblacion de la comunidad de Naranjos que se dedican al alquiler de pastizales a comunidades ganaderas mestizas como una de sus principales actividades economicas al igual que el

55

XI REUNI6N INTERNACIONAL SaBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMtRICAS IN THE AMERICAS

and five raccoons received 1 ml of diluent In addition to baseline samples blood samples were collected at two weeks post-vaccination on the day of rabies virus inoculation and seven days after challenge One month after oral instillation of vaccine or placebo raccoons were sedated and inoculated in the right masseter with 05 ml of a pooled homogenate of raccoon salivary glands from naturally-infected raccoons At the first definitive signs of rabies raccoons were sedated and euthanized Rabies was confirmed by the fluorescent antibody test on brain material All five controls succumbed to rabies on days 15 through 18 following challenge All vaccinated raccoons remained clinically-normal and survived lethal rabies virus challenge In addition to the previously reported oral efficacy of SAG-2 in captive skunks this study demonstrates the potential of SAG-2 rabies vaccine for oral immunization of free-ranging raccooons

KINETICS OF RABIES IMMUNE RESPONSE OF YOUNG FOXES (vulpes vulpes) ORALLY VACCINATED WITH VRG VACCINE (48)

Blasco E 1

Cliquet F Barrat J Brochier B2 Pastoret pp3 Aubert MFA1 1 AFSSA Nancy 2 Institut Pasteur 3 Fac Med Vet 1 Malzeville (France)

3 20 bd de Colonster Sart Tilman 4000 Liege (Belgium)

The only way to break the sylvatic rabies cycle in Western Europe is to immunise red fox (Vupes vupes) populations that maintain the disease From 1989 to the end of 1998 fox oral vaccination has allowed a 99 decrease of rabies cases in Europe However the high increase in fox population densities renders a complete eradication of rabies more difficult particularly in residual foci Moreover the key of a successful oral vaccination in spring is to give to fox cubs access to the baits and to immunise them We have conducted an experimental study on captive foxes (21 litters 95 fox cubs) to evaluate the duration of passive immunity acquired by fox cubs to follow up the development of their active immunity and to study the interference between passive immunity and protection conferred by oral vaccination The trial included twelve vixens vaccinated at 30 days of pregnancy with the VRG vaccine and nine gravid vixens remained unvaccinated (control group) In both groups litters were divided in 3 other groups receiving the vaccine at different times (30 days old 90 days old and a control unvaccinated group) All young foxes were first bled at 30 days then at 2 weeks intervals until 5 months of age Our study shows that rabies antibodies neutralising rabies virus can be transferred to their cubs by vixens orally vaccinated with VRG during pregnancy Maternally derived antibody titres in fox cubs declined regularly and were not detected 45 to 75 days after birth Our data demonstrate the very early ability of fox cubs to respond to oral vaccination with VRG (~ 30 days old) Moreover vaccinated fox cubs challenged at 5 months of age resisted to an intramuscular challenge with an homologous fox rabies strain whatever the immunological status of the vixens (vaccinated or not) Therefore fox cubs immunisation against rabies with VRG per os is possible at an early age whatever the immune status of their mothers Nevertheless the age at which young foxes are able to consume available baits should be established

DYNAMICS OF SAD B19 DERIVED MATERNAL IMMUNITY AGAINST RABIES IN FOX CUBS (vulpes vulpes) (49)

Thomas MOiler (1) Ad Vos (2) Peter Schuster (2) Thomas Selhorst (1) Uwe Wenzel (3) Andreas Neubert (2)

(1) Federal Research Center for Virus Diseases of Animals - Wusterhausen Germany (2) Impfstoffwerk Dessau Tornau GmbH (IDT) Rosslau Germany

(3) private veterinary clinic Leipzig Germany Institute for epidemiological Diagnostics Federal Research Center for Virus Diseases of Animals

Wusterhausen Germany

Even after 20 years of oral vaccination of foxes against rabies in Europe there was a lack of information concerning maternally immunity in fox cubs until our experiments conducted in 1998 and 1999 have shown that maternally transferred immunity does occur And this immunity was shown to influence the development of an immune response after active immunization of fox cubs Because these data were based on blood samples taken from foxes aged 23 to 73 days the dynamic of maternal antibodies (maAb) could not be exactly assessed Therefore in 2000 we conducted a new experiment including 64 cubs born of 19 vixens orally vaccinated with SAD 819 In this experiment blood samples (n 281) were taken up to six times per fox ranging from day 3 to 43 days post partum to follow maternal immunity immediately after girth of the cubs Serum neutralizing antibodies (nAb) were analyzed by a

50

INTERNACIONAl SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

EN LA RABIA

fluorescence focus-inhibition technique (RFFIT) and in immunoblot (IB) and nAb-titers were expressed in International Units (IUml) We were interested to answer the following questions (1) How does the nAb-titer of the vixen influence the magnitude of the nAb-titer of the cubs (2) What is the shape of the age dependent nAb-titers decline in fox cubs and what is their half-life

time (3) What is the critical age of fox cubs at which maternal antibodies can no longer be distinguished from

unspecific reactions In order to answer these questions we combined the serological data (n =570) obtained in 1998 1999 and 2000 comprising 249 and 55 cubs born of vaccinated and naive vixens respectively A non-linear regression model was fitted to the data This model is capable to simultaneously predict (i) the age dependency of maternally derived nAb in fox cubs (ii) the dependency of this time course upon the nAb-titer of the mother animal and (3) the half-life time of maAb in cubs The results clearly indicate that increasingnAb-titer of the vixens also increases the nAb-titer of the offspring The nAb-titer of the cubs exponentially decreases with age At an critical age of about 30 to 35 days post partum the nAb-titers of fox cubs is below a threshold (05 IUml) beyond which maAb can no longer distinguished from unspecific reactions in RFFIT This critical age does depend on the initial nAb-titer of the vixen at the time of birth However maAb can still be detected after that time using IB technique giving evidence that maAb outlast the time during whicrl they can be detected by RFFIT The half-life time of maAb in cubs could be estimated to be about 10 days

FEASIBILITY OF CANINE ORAL RABIES VACCINATION IN SRI LANKA-A PRELIMINARY REPORT (50)

DrMALR Perera DrPALHarischandra DrMrsOmala Wimalaratne DrMrsSNDamboragama

Public Health Veterinary Services

Objective To test the feasibility of introducing oral rabies vaccine ( vaCCinia recombinant rabies glycoprotein) To improve domestic dog immunisation coverage in a selected area Design A prospective field trial Setting Panadura an area relatively isolated by waterways making it a suitable field laboratory Methods A routine parenteral vaccination program was carried out A house of house survey identified the Re-sidual non-vaccinated dogs in the selected area Oral vaccine was offered to the non-vaccinated domestic dogs Results Of 4322 dogs in the households 1242 dogs (287

) were eligible for oral vaccine 659 (53) were Considered to have accepted the oral vaccine with release of the vaccine in the oral cavity Conclusion It is feasible to use oral rabies vaccine to enhance immunisation coverage

ESTUDIO PRELIMINAR PARA LA DETERMINACION DE LA EDAD DE PRIMOVACUNACION ANTIRRABICA CANINA (51)

Ricardo Leon Vega Amanda Liliana Diaz Rodriguez y Claudia Patricia Giraldo Giraldo

Ministerio de Salud de Colombia y Universidad del Tolima (Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia)

Ministerio de Salud Carrera 13 NQ 32-76 Piso 14 Santa Fe de Bogota Colombia EI presente trabajo se realizo en la ciudad de Ibague ubicada a 1285 metros sobre el nivel del mar con temperatura promedio de 21 grados centfgrados Las pruebas se realizaron en el Laboratorio de la Empresa Colombiana de Productos Veterinarios - VECOL entidad que patrocino la investigacion Se utilizo la prueba de inmunofluorescencia previo traslado de los sueros congelados Se trabajo con 12 hembras caninas en edad adulta las cuales se aparearon por raza edad y caracterfsticas de peso y talla Antes de dividirlas en grupo experimental y en el control se les determino los niveles de anticuerpos y se establecieron los grupos a estudiar de acuerdo a la proteccion 0 no proteccion que posefan sus madres Las hembras caninas se estudiaron en sus respectivos hogares Las crfas presentaron diferencias en cuanto a su estado nutricional estado fisiologico y sexo Las madres permanecieron con sus crfas durante un mes a partir del cual se separaron y fueron ubicadas en otras residencias familiares Se utilizo estrogen os para inducirles el celo (cuando se requirio) y se utilizo el producto RABICAN de VECOL Las hembras se dividieron en dos(2) grupos seis presentaron anticuerpos contra la rabia (Grupo I) y seis no presentaban (Grupo II) Cada~rupo se dividio en siete

1~i

51

INTERNATIONAL MEETING ON ADVANCES AND RABIES

IN THE

(7) subgrupos La diferencia de estos subgrupos estaba dada por la edad de primovacunacion de los cachorros CONCLUSIONES 1 Los cachorros de madres protegidas poseen inmunidad proferida por la madre especialmente por

la vra calostral ya que la trasplacentaria encuentra barreras para su transmisiOn 2 La vacunacion previa a la gestacion es un procedente importante en la inmunidad desarrollada por

los caninos en las primeras semanas de vida Esto es especialmente importante en areas con circulacion del virus rabico esta inmunidad transferida confiere anticuerpos protectores hasta los 21 dfas de edad

3 La vacunacion antirrabica a partir de la cuarta semana de edad estimula la produccion de anticuerpos protectores (mayor de 1 125 pero menor de 1 625) Los cachorros vacunados a partir de la octava y doceava semana de edad mostraron proteccion similar con los vacunados a la cuarta semana de edad (mayor de 1 125 pero menor de 1 625)

4 La vacunacion a partir de la cuarta semana no demostro neutralizacion de los anticuerpos maternos la vacunacion antes de esta semana si Razon por la cual no deben vacunarse cachorros especialmente hijos de madres vacunadas antes de la cuarta semana de edad

5 Se sugiere que la OPS coordine a nivel de America Latina estudios colaborativos que permitan intercambiar experiencias entre los parses

6 Basados en estos estudios que mejoren la operatividad de las actividades de prevencion y control de rabia se deben establecer las normas Se sugiere adem as crear una red de investigacion y un banco de investigaciones en Zoonosis y otros aspectos que permitan el intercambio arriba propuesto no solo en rabia sino en otros aspectos relacionados con la Salud Publica Veterinaria

DETERMINACION DE NIVELES DE ANTICUERPOS CONTRA EL VIRUS DE LA RABIA EN CANINOS Y EVALUACION DE ALGUNOS FACTORES DE RIESGO EN CIUDAD

BOLIVAR - SANTA FE BOGOTA 1997 - 1998 (51-A) Ricardo Leon Vega Aragon

Jesus Antonio Moreno Rodriguez Juan Manuel Rodriguez Navarrete Universidad de La Salle (Facultad de Veterinaria) y Ministerio de Salud Santa Fe de Bogota Colombia

La Ciudad de Santa Fe de Bogota por su ubicacion geografica su poblacion canina vfas de acceso y otros condicionantes es catalog ada como de alto riesgo para Rabia en caninos Dentro de esta Ciudad ciudad Bolivar por su ubicacion y niveles de pobreza constituye la localidad de mayor riesgo EI trabajo se hizo con el fin de evaluar los niveles de anticuerpos antirrabicos seroprotectivos como repuesta a la vacunacion can ina al igual que ponderar algunas variables relacionadas con la posibilidad de re-introduccion y diseminacion del virus rabico Antes de hacer la serodeterminacion y para calcular el tamano de la muestra se hizo una encuesta previa por muestreo estratificado al azar La relacion perro hombre encontrada fue 14 bastante distinta a los estimados que tenia la localidad EI 426 de los animales en estudio procedfan de fuera de Santa Fe de Bogota 10 cual es indicador de alta migracion un 32 de estos animales presentaban una edad inferior a seis (6) meses y no han recibido vacuna antirrabica EI 385 de los animales son menores de un (1) ano 10 cual se relaciona con una alta tasa de renovacion canina EI 723 corresponde a machos Un 507 mostraba signos de desnutricion estres y ectoparasitos Un 331 permanecen la mayor parte del d~ en la calle buscando alimento En la titulacion de anticuerpos un 215 fue negativo a la presencia de anticuerpos protectivos un 148 de los que presentaban anticuerpos no registraban antecedentes de vacunacion antirrabica y correspondfan a animales menores de un ano 10 cual puede ser indicador de transmision por-Ia madre en la gestacion y lactancia Un 385 de los animales con antecedentes de vacunacion vigente presentaron titulacion negativa esto puede ser consecuencia a fallas en la inoculacion y conservacion de la vacuna problemas de inmunodeficiencia 0 presencia de anticuerpos maternos en el momenta de la vacunacion Se encontro que las autoridades sanitarias no hacen un control eficaz sobre los animales que migran ni tampoco hay criterios para exigir requisitos a estos animales La mayorfa de los propietarios de perros que permanecen en la calle son personas que han migrado a la ciudad Se hace necesario 1 Realizar estudios sobre dinamica poblacional canina estimativos de tasas de renovacion canina

52

XI REUNI6N INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RAaJES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMrRICAS IN THE AMERICAS

2 Las vacunaciones masivas se deben realizar en areas con circulacion de virus cada ano 0 por 10

menos programar vacunaciones para poblacion nueva anualmente y ejecutar vacunacion de mantenimiento para evitar la ruptura de las coberturas utiles de vacunacion

3 Es necesario vigilar la red de frio y el manejo del biologico al igual que las tecnicas de aplicacion de la vacuna

4 Se requiere hacer periodicamente estudios inmunologicos para determinar la proporcion real de perros protegidos

5 Ademas de 10 anterior es indispensable que se ejecuten actividades de caracter educativo a la comunidad con el objeto de crear conciencia en los duenos y tenedores de perros sobre la necesidad de mantenerlos vacunados no permitir su permanencia en la calle sin la supervision de duenos y tenedores

6 Se reqvfere hacer campanas para controlar la natalidad canina y ejercer vigilancia en los animales que ingresan de otras localidades especial mente si proceden de areas con Rabia

Con el objeto de cooperar con la actividad de prevencion y Control de Rabia la OPSOMS debe propiciar mas la investigacion de trabajos que sean soporte para estos programas y no para favorecer la curiosidad cientffica

Sesi6n 7 Rabia Transmitida par Especies Silvestres

MOLECULAR CHARACTERIZATION OF VAMPIRE BAT RABIES ISOLATES FROM MEXICO (57) Carlos A de Mattos

Guillermo Benitez George M Baer Cecilia C de Mattos Centers for Disease Control and Prevention Atlanta Georgia USA

Several rabies outbreaks of bovine paralytic rabies have occurred in the States of Sinaloa Michoacan Puebla Guerrero and Veracruz between 1992 and 1996 causing serious economic losses in the local livestock industry Despite the public health and economic significance of vampire bat (Desmodus rotundus) transmitted rabies in Latin America very few primary viral isolates from these animals have been crlaracterized antigenically and genetically limiting knowledge of the intra- and inter-species rabies transmission cycles in this species The objective of this investigation was to obtain primary rabies isolates from vampire bats and to compare their antigenic and genetic characteristics with other rabies isolates collected from domestic and wildlife obtained in the Americas One hundred vampire bats were captured during these Mexican outbreaks They were sent to the laboratory for rabies diagnosis by the direct immunofluorescence technique on brain impressions Thirteen positive rabies samples were obtained The virus was isolated by intra cerebral inoculation of 4-weeks old mice The molecular characterization of the isolates was carried out using a panel of 8 monoclonal antibodies directed against the viral nucleoprotein and by the genetic analyses of a 320 base pair portion of the nucleoprotein gene Three antigenic variants (AgV) 3 5 and 11 previously described in Latin America and 1 new variant were found In the genetic characterization 10 isolates from Puebla Veracruz and Guerrero antigenically characterized as AgV 3 and 11 segregated together forming a monophyletic group These viruses showed a genetic distance between 0 to 06 Two samples one from Michoacan and another from Guerrero antigenically typified as a new AgV formed an independent clade These isolates presented a genetic distance ranging from 9 to 10 witrl all the other isolates The only virus obtained in Sinaloa characterized as AgV 5 segregated in an independent branch Its genetic distance with the other viruses ranged from 5 to 9 The phylogenetic comparison of these Mexican viruses with isolates obtained from different species of Chiroptera and from vampire bat-related cases throughout Latin America revealed the presence of a genetic diversity previously not detected in isolates from hematophagous bats This genetic diversity was not associated with the geographical origin or the temporal isolation of the samples The use of molecular techniques in conjunction with the current national sylvatic rabies surveillance programs and the development of international collaborative programs for rabies surveillance and control will allow a better understanding of the ecology of the disease in vampire bats Trlis reservoir has increased in population density and its geographical distribution has been highly modified during the last two decades as consequence of drastic changes in its environment

53

INTERNATIONAL ADVANCES

PROPOSAL FOR ACTION IN AREAS PRESENTING CANINE AND FELINE DESMODUS ROTUNDUS TRANSMITTED RABIES CASES (52)

Carrieri ML Harmani NMS Peres NF Kotait I

Instituto Pasteur Sao PauloSP

Canine and feline rabies has significantly decreased since 1995 in the State of Sao Paulo due to measures implemented by the Sao Paulo State Rabies Control Program Coordination In 1995 169 cases of rabies occurred in 1996 104 cases in 1997 11 cases in 1998 7 cases in 1999 5 cases and up to August 2000 2 cases Instituto Pasteur the headquarters of the Program Coordination and Reference Laboratory for Brazil uses a panel of 8 monoclonal antibodies and the indirect immunofluorescence test for identifying the transmitter species of rabies cases We used the monoclonal antibody immunofluorescence test in 9 of the last 14 canine and feline rabies cases making it possible to recognize variant 3 (Desmodus rotundus - hematophagous bat) in 8 of these samples of which 7 in dogs and 1 in a cat This investigation aims to propose actions for controlling canine and feline rabies transmitted by hemathophagous bats The first step to be taken is to describe the region urban suburban or borderline and rural When a case is described in an urban area epidemiological investigation should be immediately initiated for detecting human and animal contacts identifying possible shelters and colonies of Desmodus rotundus and identifying other animal species aiming to control the canine and feline reservoirs If the identified region is suburban it should be described from the epidemiological point of view (controed non-controlled or silent) If it is a controlled area the recommended actions are identical to those for urban areas For non-controlled and silent areas epidemiological investigation and the control of dog cat and herbivorous reservoirs is recommended Rural areas should also be described epidemiologically (sporadic alert endemic or epidemic areas)

In sporadic and alert areas the recommended actions are identical to those of urban areas In endemic and epidemic areas epidemiological investigation reservoir control description of the distribution of herbivorous recording of Desmodus rotundus shelters and systematic herbivorous vaccination should be carried out

ESTUDIO SOBRE FACTORES DE RIESGO DE MORDEDURAS POR MURCIELAGOS HEMATOFAGOS EN LOCALIDADES DE LOS DISTRITOS DE AYNA Y SANTA ROSA DE LA

PROVINCIA DE LA MAR DEPARTAMENTO DE AYACUCHO - PERU 1999 (53) Dr Jorge Gomez Benavides (1) - Lie Melvy Ormaeehe Maeassi (2)

Ministerio de Salud - Ofieina General de Epidemiologra Lima - Peru

INTRODUCCION En el valle del rro Apurfmac desde 1982 se notificaron casos de rabia bovina transmitida por murcielagos hematofagos en las localidades de Pichari (provincia de La Convencion departamento de Cuzco ubicada al margen derecho del rro Apurfmac) y en Sivia (distrito del mismo nombre provincia de Huanta departamento de Ayacucho ubicada en el margen izquierdo del mismo rfo) Los servicios de salud de Ayacucho informaron la presentacion de 24 casos de rabia humana transmitida por vampiros en el valle del rro Apurfmac entre los arios 1883-85 Solo 4 casos fueron confirmados por ellaboratorio En el Peru se ha informado la presencia de mordeduras por murch~lagos hematofagos en comunidades nativas siendo consideradas como un hecho habitual De la misma manera en comunidades mineras que ingresan al habitat natural de los vampiros En otros lugares este hecho es accidental por la presencia de ganado que es la fuente principal de alimentaciqJ EI reporte de mordeduras por vampiros en forma frecuente en comunidades de este valle motivo la ejecucion de est a investigacion METODOLOGfA EI presente es un estudio de casos y controles no pareado Se realizo estratificacion por grupos de edad Se selecciono aquellas comunidades que presentaban mayor incidencia de mordeduras

~ En el distrito de Ayna comunidad de Ccenta y Nueva Union ~ En el distrito de Santa Rosa comunidad de Comunpiari

Definicion de caso persona con antecedente de mordedura de vampiro en los ultimos 12 meses Definicion de control persona que vive en el mismo domicilio 0 en la vecindad sin antecedente de mordedura de vampiro RESULTADOS Las comunidades contaban con muy escasa cantidad de ganado Se realizaron 106 entrevistas siendo 39 casos y 67 controles Los ninos menores de 15 anos fueron la poblacion mas afectada Por mordeduras Casi el 70 de los entrevistados eran del sexo femenino EI 100 de las

54

INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

mordeduras fueron intradomiciliarias Solo el 14 de los entrevistados (jefe de familia) conoc[a que la enfermedad era incurable y el 36 respondio que el perro y 0 murcielago transmitfa la enfermedad Casi el 60 de la poblacion refiere lavarse la rnordedura con agua y jabon EI 63 de los entrevistados referfan dormir con mosquitero Analisis de casos y controles en las localidades encuestadas

Variable Grupo etareo menor de 15 anos OR =848 (IC 95 =179 - 401) y Variable No usar mosquitero OR = 185 (IC 95 = 41 - 831)

Conclusion Se considera que el pertenecer al grupo etareo menor de 15 como un factor de riesgo yel uso de mosquiteros como un factor protector La rabia transmitida por murcielagos vampiro es un riesgo latente para el valle del rio Apurlmac teniendo en cuenta sus antecedentes y porque rio arriba en el valle del rio Pampas se mantiene la rabia silvestre en forma endemica desde 1995

DETERMINACION DE HABITOS PRACTICAS Y ACTITUDES QUE FAVORECEN LA PRESENTACION DE MORDEDURAS DE MURCIELAGOS EN COMUNIDADES NATIVAS

AGUAFllJNAS DE LA PROVINCIA DE SAN IGNACIO - DEPARTAMENTO DE CAJAMARCA (54) Dr Manuel Antonio Arana Arana

Ora Ana Marfa Navarro Vela Oireccion Sub Regional de Salud - Jaen

INTRODUCCION La Rabia silvestre transmitida por rnurcielagos constituye el cicio de transmision en zonas de selva del Peru Desde 1975 las Provincias de Huanta Condorcanqui y EI Manu han sido afectadas por brotes de Rabia causando defunciones en la poblacion y al mismo tiempo cuantiosas perdidas economicas a la ganaderfa En los brotes ocurridos se observa que la poblacion mas afectada es la poblacion nativa sobre todo de la Etnia Aguaruna-Huambisa localizada en la Provincia de Condorcanqui AI igual que en Condorcanqui en la Provincia de San Ignacio existen comunidades nativas Aguarunas con notificacion de mordeduras por murcielagos siendo materia de investigacion los factores de riesgo de Rabia silvestre causados por la carencia de medidas de proteccion contra las mordeduras de quiropteros En el brote de Rabia bovina silvestre reportado en Enero de 1998 en la localidad de Burgos-Distrito de Huarango de la Provincia de San Ignacio la poblacion humana en riesgo estuvo circunscrita a las personas que habfan manipulado animales enfermos y a la poblacion nativa Aguaruna pertenecientes a las comunidades de Naranjos y Yamakey sin embargo en estas no ocurrieron accidentes de mordeduras motivando este hallazgo la aplicacion de encuestas CAP OBJETIVOS Determinar los habitos actitudes y practicas que condicionan la presencia de mordeduras en la poblacion MATERIAL Y METODOS

Encuestas CAP mapas croquis Se encuesto al 92 del total de viviendas (115) de 08 comunidades nativas Aguarunas Naranjos (16) Alto Naranjos (07) Yamakey (17) Supayacu (38) Nva Kucha (07) Alto Kunchin (09) Santa Agueda (08) y Valencia (13) Consolidacion y procesamiento de datos en Epi Info version 6

RESULTADOS Y CONCLUSIONES Del total de 115 viviendas encuestadas el 5131 son de tipo A(Cana-guayaquil-chonta-broza-palmiche) existiendo el mayor porcentaje(305) de estas viviendas en la localidad de Supayacu EI tipo B(Cana-guayaquil-madera-calamina) alcanzo un 3565 en el contexto total predominando dicho tipo de viviendas en Supayacu(4634) EI 1304 de viviendas son de adobe la comunidad de Naranjos (60) registra el porcentaje mas alto EI mayor numero de mordeduras se produjo en las viviendas de tipo A y tipo B siendo este porcentaje de 4717 y 4528 respectivamente Menos accidentes ocurren en viviendas de tipo C(Adobe)con 755 EI 60 de hogares visitados refirieron utilizar mosquiteros De las 69 viviendas que refieren contar con mosquiteros presentaron mordeduras el 4783 mientras que en el 5217 de elias no ocurrieron Supayacu es la comunidad que registra mayor porcentaje de mordeduras siendo aste de 3478 y las comunidades que tienen menor porcentaje son Santa Agueda y Naranjos con 377 cada una elias EI 6086 de encuestados relaciona a la Rabia como una enfermedad propia de los anirnales el 1130 afirma que es una enfermedad del hombre mientras que el 2784 de encuestados no contesto Con relacion al grupo etareo el mas vulnerable es el grupo comprendido entre 0-12 anos(8072) produciandose el mayor numero de mordeduras en ninos de 06-12 anos(5522) Las mordeduras en el cuerpo se ubicaron con mayor frecuencia en la cabeza(9020) La zooprofilaxis se pudo observar en la piblacion de la comunidad de Naranjos que se dedican al alquiler de pastizales a comunidades ganaderas mestizas como una de sus principales actividades economicas al igual que el

55

INTERNACIONAl SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

EN LA RABIA

fluorescence focus-inhibition technique (RFFIT) and in immunoblot (IB) and nAb-titers were expressed in International Units (IUml) We were interested to answer the following questions (1) How does the nAb-titer of the vixen influence the magnitude of the nAb-titer of the cubs (2) What is the shape of the age dependent nAb-titers decline in fox cubs and what is their half-life

time (3) What is the critical age of fox cubs at which maternal antibodies can no longer be distinguished from

unspecific reactions In order to answer these questions we combined the serological data (n =570) obtained in 1998 1999 and 2000 comprising 249 and 55 cubs born of vaccinated and naive vixens respectively A non-linear regression model was fitted to the data This model is capable to simultaneously predict (i) the age dependency of maternally derived nAb in fox cubs (ii) the dependency of this time course upon the nAb-titer of the mother animal and (3) the half-life time of maAb in cubs The results clearly indicate that increasingnAb-titer of the vixens also increases the nAb-titer of the offspring The nAb-titer of the cubs exponentially decreases with age At an critical age of about 30 to 35 days post partum the nAb-titers of fox cubs is below a threshold (05 IUml) beyond which maAb can no longer distinguished from unspecific reactions in RFFIT This critical age does depend on the initial nAb-titer of the vixen at the time of birth However maAb can still be detected after that time using IB technique giving evidence that maAb outlast the time during whicrl they can be detected by RFFIT The half-life time of maAb in cubs could be estimated to be about 10 days

FEASIBILITY OF CANINE ORAL RABIES VACCINATION IN SRI LANKA-A PRELIMINARY REPORT (50)

DrMALR Perera DrPALHarischandra DrMrsOmala Wimalaratne DrMrsSNDamboragama

Public Health Veterinary Services

Objective To test the feasibility of introducing oral rabies vaccine ( vaCCinia recombinant rabies glycoprotein) To improve domestic dog immunisation coverage in a selected area Design A prospective field trial Setting Panadura an area relatively isolated by waterways making it a suitable field laboratory Methods A routine parenteral vaccination program was carried out A house of house survey identified the Re-sidual non-vaccinated dogs in the selected area Oral vaccine was offered to the non-vaccinated domestic dogs Results Of 4322 dogs in the households 1242 dogs (287

) were eligible for oral vaccine 659 (53) were Considered to have accepted the oral vaccine with release of the vaccine in the oral cavity Conclusion It is feasible to use oral rabies vaccine to enhance immunisation coverage

ESTUDIO PRELIMINAR PARA LA DETERMINACION DE LA EDAD DE PRIMOVACUNACION ANTIRRABICA CANINA (51)

Ricardo Leon Vega Amanda Liliana Diaz Rodriguez y Claudia Patricia Giraldo Giraldo

Ministerio de Salud de Colombia y Universidad del Tolima (Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia)

Ministerio de Salud Carrera 13 NQ 32-76 Piso 14 Santa Fe de Bogota Colombia EI presente trabajo se realizo en la ciudad de Ibague ubicada a 1285 metros sobre el nivel del mar con temperatura promedio de 21 grados centfgrados Las pruebas se realizaron en el Laboratorio de la Empresa Colombiana de Productos Veterinarios - VECOL entidad que patrocino la investigacion Se utilizo la prueba de inmunofluorescencia previo traslado de los sueros congelados Se trabajo con 12 hembras caninas en edad adulta las cuales se aparearon por raza edad y caracterfsticas de peso y talla Antes de dividirlas en grupo experimental y en el control se les determino los niveles de anticuerpos y se establecieron los grupos a estudiar de acuerdo a la proteccion 0 no proteccion que posefan sus madres Las hembras caninas se estudiaron en sus respectivos hogares Las crfas presentaron diferencias en cuanto a su estado nutricional estado fisiologico y sexo Las madres permanecieron con sus crfas durante un mes a partir del cual se separaron y fueron ubicadas en otras residencias familiares Se utilizo estrogen os para inducirles el celo (cuando se requirio) y se utilizo el producto RABICAN de VECOL Las hembras se dividieron en dos(2) grupos seis presentaron anticuerpos contra la rabia (Grupo I) y seis no presentaban (Grupo II) Cada~rupo se dividio en siete

1~i

51

INTERNATIONAL MEETING ON ADVANCES AND RABIES

IN THE

(7) subgrupos La diferencia de estos subgrupos estaba dada por la edad de primovacunacion de los cachorros CONCLUSIONES 1 Los cachorros de madres protegidas poseen inmunidad proferida por la madre especialmente por

la vra calostral ya que la trasplacentaria encuentra barreras para su transmisiOn 2 La vacunacion previa a la gestacion es un procedente importante en la inmunidad desarrollada por

los caninos en las primeras semanas de vida Esto es especialmente importante en areas con circulacion del virus rabico esta inmunidad transferida confiere anticuerpos protectores hasta los 21 dfas de edad

3 La vacunacion antirrabica a partir de la cuarta semana de edad estimula la produccion de anticuerpos protectores (mayor de 1 125 pero menor de 1 625) Los cachorros vacunados a partir de la octava y doceava semana de edad mostraron proteccion similar con los vacunados a la cuarta semana de edad (mayor de 1 125 pero menor de 1 625)

4 La vacunacion a partir de la cuarta semana no demostro neutralizacion de los anticuerpos maternos la vacunacion antes de esta semana si Razon por la cual no deben vacunarse cachorros especialmente hijos de madres vacunadas antes de la cuarta semana de edad

5 Se sugiere que la OPS coordine a nivel de America Latina estudios colaborativos que permitan intercambiar experiencias entre los parses

6 Basados en estos estudios que mejoren la operatividad de las actividades de prevencion y control de rabia se deben establecer las normas Se sugiere adem as crear una red de investigacion y un banco de investigaciones en Zoonosis y otros aspectos que permitan el intercambio arriba propuesto no solo en rabia sino en otros aspectos relacionados con la Salud Publica Veterinaria

DETERMINACION DE NIVELES DE ANTICUERPOS CONTRA EL VIRUS DE LA RABIA EN CANINOS Y EVALUACION DE ALGUNOS FACTORES DE RIESGO EN CIUDAD

BOLIVAR - SANTA FE BOGOTA 1997 - 1998 (51-A) Ricardo Leon Vega Aragon

Jesus Antonio Moreno Rodriguez Juan Manuel Rodriguez Navarrete Universidad de La Salle (Facultad de Veterinaria) y Ministerio de Salud Santa Fe de Bogota Colombia

La Ciudad de Santa Fe de Bogota por su ubicacion geografica su poblacion canina vfas de acceso y otros condicionantes es catalog ada como de alto riesgo para Rabia en caninos Dentro de esta Ciudad ciudad Bolivar por su ubicacion y niveles de pobreza constituye la localidad de mayor riesgo EI trabajo se hizo con el fin de evaluar los niveles de anticuerpos antirrabicos seroprotectivos como repuesta a la vacunacion can ina al igual que ponderar algunas variables relacionadas con la posibilidad de re-introduccion y diseminacion del virus rabico Antes de hacer la serodeterminacion y para calcular el tamano de la muestra se hizo una encuesta previa por muestreo estratificado al azar La relacion perro hombre encontrada fue 14 bastante distinta a los estimados que tenia la localidad EI 426 de los animales en estudio procedfan de fuera de Santa Fe de Bogota 10 cual es indicador de alta migracion un 32 de estos animales presentaban una edad inferior a seis (6) meses y no han recibido vacuna antirrabica EI 385 de los animales son menores de un (1) ano 10 cual se relaciona con una alta tasa de renovacion canina EI 723 corresponde a machos Un 507 mostraba signos de desnutricion estres y ectoparasitos Un 331 permanecen la mayor parte del d~ en la calle buscando alimento En la titulacion de anticuerpos un 215 fue negativo a la presencia de anticuerpos protectivos un 148 de los que presentaban anticuerpos no registraban antecedentes de vacunacion antirrabica y correspondfan a animales menores de un ano 10 cual puede ser indicador de transmision por-Ia madre en la gestacion y lactancia Un 385 de los animales con antecedentes de vacunacion vigente presentaron titulacion negativa esto puede ser consecuencia a fallas en la inoculacion y conservacion de la vacuna problemas de inmunodeficiencia 0 presencia de anticuerpos maternos en el momenta de la vacunacion Se encontro que las autoridades sanitarias no hacen un control eficaz sobre los animales que migran ni tampoco hay criterios para exigir requisitos a estos animales La mayorfa de los propietarios de perros que permanecen en la calle son personas que han migrado a la ciudad Se hace necesario 1 Realizar estudios sobre dinamica poblacional canina estimativos de tasas de renovacion canina

52

XI REUNI6N INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RAaJES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMrRICAS IN THE AMERICAS

2 Las vacunaciones masivas se deben realizar en areas con circulacion de virus cada ano 0 por 10

menos programar vacunaciones para poblacion nueva anualmente y ejecutar vacunacion de mantenimiento para evitar la ruptura de las coberturas utiles de vacunacion

3 Es necesario vigilar la red de frio y el manejo del biologico al igual que las tecnicas de aplicacion de la vacuna

4 Se requiere hacer periodicamente estudios inmunologicos para determinar la proporcion real de perros protegidos

5 Ademas de 10 anterior es indispensable que se ejecuten actividades de caracter educativo a la comunidad con el objeto de crear conciencia en los duenos y tenedores de perros sobre la necesidad de mantenerlos vacunados no permitir su permanencia en la calle sin la supervision de duenos y tenedores

6 Se reqvfere hacer campanas para controlar la natalidad canina y ejercer vigilancia en los animales que ingresan de otras localidades especial mente si proceden de areas con Rabia

Con el objeto de cooperar con la actividad de prevencion y Control de Rabia la OPSOMS debe propiciar mas la investigacion de trabajos que sean soporte para estos programas y no para favorecer la curiosidad cientffica

Sesi6n 7 Rabia Transmitida par Especies Silvestres

MOLECULAR CHARACTERIZATION OF VAMPIRE BAT RABIES ISOLATES FROM MEXICO (57) Carlos A de Mattos

Guillermo Benitez George M Baer Cecilia C de Mattos Centers for Disease Control and Prevention Atlanta Georgia USA

Several rabies outbreaks of bovine paralytic rabies have occurred in the States of Sinaloa Michoacan Puebla Guerrero and Veracruz between 1992 and 1996 causing serious economic losses in the local livestock industry Despite the public health and economic significance of vampire bat (Desmodus rotundus) transmitted rabies in Latin America very few primary viral isolates from these animals have been crlaracterized antigenically and genetically limiting knowledge of the intra- and inter-species rabies transmission cycles in this species The objective of this investigation was to obtain primary rabies isolates from vampire bats and to compare their antigenic and genetic characteristics with other rabies isolates collected from domestic and wildlife obtained in the Americas One hundred vampire bats were captured during these Mexican outbreaks They were sent to the laboratory for rabies diagnosis by the direct immunofluorescence technique on brain impressions Thirteen positive rabies samples were obtained The virus was isolated by intra cerebral inoculation of 4-weeks old mice The molecular characterization of the isolates was carried out using a panel of 8 monoclonal antibodies directed against the viral nucleoprotein and by the genetic analyses of a 320 base pair portion of the nucleoprotein gene Three antigenic variants (AgV) 3 5 and 11 previously described in Latin America and 1 new variant were found In the genetic characterization 10 isolates from Puebla Veracruz and Guerrero antigenically characterized as AgV 3 and 11 segregated together forming a monophyletic group These viruses showed a genetic distance between 0 to 06 Two samples one from Michoacan and another from Guerrero antigenically typified as a new AgV formed an independent clade These isolates presented a genetic distance ranging from 9 to 10 witrl all the other isolates The only virus obtained in Sinaloa characterized as AgV 5 segregated in an independent branch Its genetic distance with the other viruses ranged from 5 to 9 The phylogenetic comparison of these Mexican viruses with isolates obtained from different species of Chiroptera and from vampire bat-related cases throughout Latin America revealed the presence of a genetic diversity previously not detected in isolates from hematophagous bats This genetic diversity was not associated with the geographical origin or the temporal isolation of the samples The use of molecular techniques in conjunction with the current national sylvatic rabies surveillance programs and the development of international collaborative programs for rabies surveillance and control will allow a better understanding of the ecology of the disease in vampire bats Trlis reservoir has increased in population density and its geographical distribution has been highly modified during the last two decades as consequence of drastic changes in its environment

53

INTERNATIONAL ADVANCES

PROPOSAL FOR ACTION IN AREAS PRESENTING CANINE AND FELINE DESMODUS ROTUNDUS TRANSMITTED RABIES CASES (52)

Carrieri ML Harmani NMS Peres NF Kotait I

Instituto Pasteur Sao PauloSP

Canine and feline rabies has significantly decreased since 1995 in the State of Sao Paulo due to measures implemented by the Sao Paulo State Rabies Control Program Coordination In 1995 169 cases of rabies occurred in 1996 104 cases in 1997 11 cases in 1998 7 cases in 1999 5 cases and up to August 2000 2 cases Instituto Pasteur the headquarters of the Program Coordination and Reference Laboratory for Brazil uses a panel of 8 monoclonal antibodies and the indirect immunofluorescence test for identifying the transmitter species of rabies cases We used the monoclonal antibody immunofluorescence test in 9 of the last 14 canine and feline rabies cases making it possible to recognize variant 3 (Desmodus rotundus - hematophagous bat) in 8 of these samples of which 7 in dogs and 1 in a cat This investigation aims to propose actions for controlling canine and feline rabies transmitted by hemathophagous bats The first step to be taken is to describe the region urban suburban or borderline and rural When a case is described in an urban area epidemiological investigation should be immediately initiated for detecting human and animal contacts identifying possible shelters and colonies of Desmodus rotundus and identifying other animal species aiming to control the canine and feline reservoirs If the identified region is suburban it should be described from the epidemiological point of view (controed non-controlled or silent) If it is a controlled area the recommended actions are identical to those for urban areas For non-controlled and silent areas epidemiological investigation and the control of dog cat and herbivorous reservoirs is recommended Rural areas should also be described epidemiologically (sporadic alert endemic or epidemic areas)

In sporadic and alert areas the recommended actions are identical to those of urban areas In endemic and epidemic areas epidemiological investigation reservoir control description of the distribution of herbivorous recording of Desmodus rotundus shelters and systematic herbivorous vaccination should be carried out

ESTUDIO SOBRE FACTORES DE RIESGO DE MORDEDURAS POR MURCIELAGOS HEMATOFAGOS EN LOCALIDADES DE LOS DISTRITOS DE AYNA Y SANTA ROSA DE LA

PROVINCIA DE LA MAR DEPARTAMENTO DE AYACUCHO - PERU 1999 (53) Dr Jorge Gomez Benavides (1) - Lie Melvy Ormaeehe Maeassi (2)

Ministerio de Salud - Ofieina General de Epidemiologra Lima - Peru

INTRODUCCION En el valle del rro Apurfmac desde 1982 se notificaron casos de rabia bovina transmitida por murcielagos hematofagos en las localidades de Pichari (provincia de La Convencion departamento de Cuzco ubicada al margen derecho del rro Apurfmac) y en Sivia (distrito del mismo nombre provincia de Huanta departamento de Ayacucho ubicada en el margen izquierdo del mismo rfo) Los servicios de salud de Ayacucho informaron la presentacion de 24 casos de rabia humana transmitida por vampiros en el valle del rro Apurfmac entre los arios 1883-85 Solo 4 casos fueron confirmados por ellaboratorio En el Peru se ha informado la presencia de mordeduras por murch~lagos hematofagos en comunidades nativas siendo consideradas como un hecho habitual De la misma manera en comunidades mineras que ingresan al habitat natural de los vampiros En otros lugares este hecho es accidental por la presencia de ganado que es la fuente principal de alimentaciqJ EI reporte de mordeduras por vampiros en forma frecuente en comunidades de este valle motivo la ejecucion de est a investigacion METODOLOGfA EI presente es un estudio de casos y controles no pareado Se realizo estratificacion por grupos de edad Se selecciono aquellas comunidades que presentaban mayor incidencia de mordeduras

~ En el distrito de Ayna comunidad de Ccenta y Nueva Union ~ En el distrito de Santa Rosa comunidad de Comunpiari

Definicion de caso persona con antecedente de mordedura de vampiro en los ultimos 12 meses Definicion de control persona que vive en el mismo domicilio 0 en la vecindad sin antecedente de mordedura de vampiro RESULTADOS Las comunidades contaban con muy escasa cantidad de ganado Se realizaron 106 entrevistas siendo 39 casos y 67 controles Los ninos menores de 15 anos fueron la poblacion mas afectada Por mordeduras Casi el 70 de los entrevistados eran del sexo femenino EI 100 de las

54

INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

mordeduras fueron intradomiciliarias Solo el 14 de los entrevistados (jefe de familia) conoc[a que la enfermedad era incurable y el 36 respondio que el perro y 0 murcielago transmitfa la enfermedad Casi el 60 de la poblacion refiere lavarse la rnordedura con agua y jabon EI 63 de los entrevistados referfan dormir con mosquitero Analisis de casos y controles en las localidades encuestadas

Variable Grupo etareo menor de 15 anos OR =848 (IC 95 =179 - 401) y Variable No usar mosquitero OR = 185 (IC 95 = 41 - 831)

Conclusion Se considera que el pertenecer al grupo etareo menor de 15 como un factor de riesgo yel uso de mosquiteros como un factor protector La rabia transmitida por murcielagos vampiro es un riesgo latente para el valle del rio Apurlmac teniendo en cuenta sus antecedentes y porque rio arriba en el valle del rio Pampas se mantiene la rabia silvestre en forma endemica desde 1995

DETERMINACION DE HABITOS PRACTICAS Y ACTITUDES QUE FAVORECEN LA PRESENTACION DE MORDEDURAS DE MURCIELAGOS EN COMUNIDADES NATIVAS

AGUAFllJNAS DE LA PROVINCIA DE SAN IGNACIO - DEPARTAMENTO DE CAJAMARCA (54) Dr Manuel Antonio Arana Arana

Ora Ana Marfa Navarro Vela Oireccion Sub Regional de Salud - Jaen

INTRODUCCION La Rabia silvestre transmitida por rnurcielagos constituye el cicio de transmision en zonas de selva del Peru Desde 1975 las Provincias de Huanta Condorcanqui y EI Manu han sido afectadas por brotes de Rabia causando defunciones en la poblacion y al mismo tiempo cuantiosas perdidas economicas a la ganaderfa En los brotes ocurridos se observa que la poblacion mas afectada es la poblacion nativa sobre todo de la Etnia Aguaruna-Huambisa localizada en la Provincia de Condorcanqui AI igual que en Condorcanqui en la Provincia de San Ignacio existen comunidades nativas Aguarunas con notificacion de mordeduras por murcielagos siendo materia de investigacion los factores de riesgo de Rabia silvestre causados por la carencia de medidas de proteccion contra las mordeduras de quiropteros En el brote de Rabia bovina silvestre reportado en Enero de 1998 en la localidad de Burgos-Distrito de Huarango de la Provincia de San Ignacio la poblacion humana en riesgo estuvo circunscrita a las personas que habfan manipulado animales enfermos y a la poblacion nativa Aguaruna pertenecientes a las comunidades de Naranjos y Yamakey sin embargo en estas no ocurrieron accidentes de mordeduras motivando este hallazgo la aplicacion de encuestas CAP OBJETIVOS Determinar los habitos actitudes y practicas que condicionan la presencia de mordeduras en la poblacion MATERIAL Y METODOS

Encuestas CAP mapas croquis Se encuesto al 92 del total de viviendas (115) de 08 comunidades nativas Aguarunas Naranjos (16) Alto Naranjos (07) Yamakey (17) Supayacu (38) Nva Kucha (07) Alto Kunchin (09) Santa Agueda (08) y Valencia (13) Consolidacion y procesamiento de datos en Epi Info version 6

RESULTADOS Y CONCLUSIONES Del total de 115 viviendas encuestadas el 5131 son de tipo A(Cana-guayaquil-chonta-broza-palmiche) existiendo el mayor porcentaje(305) de estas viviendas en la localidad de Supayacu EI tipo B(Cana-guayaquil-madera-calamina) alcanzo un 3565 en el contexto total predominando dicho tipo de viviendas en Supayacu(4634) EI 1304 de viviendas son de adobe la comunidad de Naranjos (60) registra el porcentaje mas alto EI mayor numero de mordeduras se produjo en las viviendas de tipo A y tipo B siendo este porcentaje de 4717 y 4528 respectivamente Menos accidentes ocurren en viviendas de tipo C(Adobe)con 755 EI 60 de hogares visitados refirieron utilizar mosquiteros De las 69 viviendas que refieren contar con mosquiteros presentaron mordeduras el 4783 mientras que en el 5217 de elias no ocurrieron Supayacu es la comunidad que registra mayor porcentaje de mordeduras siendo aste de 3478 y las comunidades que tienen menor porcentaje son Santa Agueda y Naranjos con 377 cada una elias EI 6086 de encuestados relaciona a la Rabia como una enfermedad propia de los anirnales el 1130 afirma que es una enfermedad del hombre mientras que el 2784 de encuestados no contesto Con relacion al grupo etareo el mas vulnerable es el grupo comprendido entre 0-12 anos(8072) produciandose el mayor numero de mordeduras en ninos de 06-12 anos(5522) Las mordeduras en el cuerpo se ubicaron con mayor frecuencia en la cabeza(9020) La zooprofilaxis se pudo observar en la piblacion de la comunidad de Naranjos que se dedican al alquiler de pastizales a comunidades ganaderas mestizas como una de sus principales actividades economicas al igual que el

55

INTERNATIONAL MEETING ON ADVANCES AND RABIES

IN THE

(7) subgrupos La diferencia de estos subgrupos estaba dada por la edad de primovacunacion de los cachorros CONCLUSIONES 1 Los cachorros de madres protegidas poseen inmunidad proferida por la madre especialmente por

la vra calostral ya que la trasplacentaria encuentra barreras para su transmisiOn 2 La vacunacion previa a la gestacion es un procedente importante en la inmunidad desarrollada por

los caninos en las primeras semanas de vida Esto es especialmente importante en areas con circulacion del virus rabico esta inmunidad transferida confiere anticuerpos protectores hasta los 21 dfas de edad

3 La vacunacion antirrabica a partir de la cuarta semana de edad estimula la produccion de anticuerpos protectores (mayor de 1 125 pero menor de 1 625) Los cachorros vacunados a partir de la octava y doceava semana de edad mostraron proteccion similar con los vacunados a la cuarta semana de edad (mayor de 1 125 pero menor de 1 625)

4 La vacunacion a partir de la cuarta semana no demostro neutralizacion de los anticuerpos maternos la vacunacion antes de esta semana si Razon por la cual no deben vacunarse cachorros especialmente hijos de madres vacunadas antes de la cuarta semana de edad

5 Se sugiere que la OPS coordine a nivel de America Latina estudios colaborativos que permitan intercambiar experiencias entre los parses

6 Basados en estos estudios que mejoren la operatividad de las actividades de prevencion y control de rabia se deben establecer las normas Se sugiere adem as crear una red de investigacion y un banco de investigaciones en Zoonosis y otros aspectos que permitan el intercambio arriba propuesto no solo en rabia sino en otros aspectos relacionados con la Salud Publica Veterinaria

DETERMINACION DE NIVELES DE ANTICUERPOS CONTRA EL VIRUS DE LA RABIA EN CANINOS Y EVALUACION DE ALGUNOS FACTORES DE RIESGO EN CIUDAD

BOLIVAR - SANTA FE BOGOTA 1997 - 1998 (51-A) Ricardo Leon Vega Aragon

Jesus Antonio Moreno Rodriguez Juan Manuel Rodriguez Navarrete Universidad de La Salle (Facultad de Veterinaria) y Ministerio de Salud Santa Fe de Bogota Colombia

La Ciudad de Santa Fe de Bogota por su ubicacion geografica su poblacion canina vfas de acceso y otros condicionantes es catalog ada como de alto riesgo para Rabia en caninos Dentro de esta Ciudad ciudad Bolivar por su ubicacion y niveles de pobreza constituye la localidad de mayor riesgo EI trabajo se hizo con el fin de evaluar los niveles de anticuerpos antirrabicos seroprotectivos como repuesta a la vacunacion can ina al igual que ponderar algunas variables relacionadas con la posibilidad de re-introduccion y diseminacion del virus rabico Antes de hacer la serodeterminacion y para calcular el tamano de la muestra se hizo una encuesta previa por muestreo estratificado al azar La relacion perro hombre encontrada fue 14 bastante distinta a los estimados que tenia la localidad EI 426 de los animales en estudio procedfan de fuera de Santa Fe de Bogota 10 cual es indicador de alta migracion un 32 de estos animales presentaban una edad inferior a seis (6) meses y no han recibido vacuna antirrabica EI 385 de los animales son menores de un (1) ano 10 cual se relaciona con una alta tasa de renovacion canina EI 723 corresponde a machos Un 507 mostraba signos de desnutricion estres y ectoparasitos Un 331 permanecen la mayor parte del d~ en la calle buscando alimento En la titulacion de anticuerpos un 215 fue negativo a la presencia de anticuerpos protectivos un 148 de los que presentaban anticuerpos no registraban antecedentes de vacunacion antirrabica y correspondfan a animales menores de un ano 10 cual puede ser indicador de transmision por-Ia madre en la gestacion y lactancia Un 385 de los animales con antecedentes de vacunacion vigente presentaron titulacion negativa esto puede ser consecuencia a fallas en la inoculacion y conservacion de la vacuna problemas de inmunodeficiencia 0 presencia de anticuerpos maternos en el momenta de la vacunacion Se encontro que las autoridades sanitarias no hacen un control eficaz sobre los animales que migran ni tampoco hay criterios para exigir requisitos a estos animales La mayorfa de los propietarios de perros que permanecen en la calle son personas que han migrado a la ciudad Se hace necesario 1 Realizar estudios sobre dinamica poblacional canina estimativos de tasas de renovacion canina

52

XI REUNI6N INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RAaJES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMrRICAS IN THE AMERICAS

2 Las vacunaciones masivas se deben realizar en areas con circulacion de virus cada ano 0 por 10

menos programar vacunaciones para poblacion nueva anualmente y ejecutar vacunacion de mantenimiento para evitar la ruptura de las coberturas utiles de vacunacion

3 Es necesario vigilar la red de frio y el manejo del biologico al igual que las tecnicas de aplicacion de la vacuna

4 Se requiere hacer periodicamente estudios inmunologicos para determinar la proporcion real de perros protegidos

5 Ademas de 10 anterior es indispensable que se ejecuten actividades de caracter educativo a la comunidad con el objeto de crear conciencia en los duenos y tenedores de perros sobre la necesidad de mantenerlos vacunados no permitir su permanencia en la calle sin la supervision de duenos y tenedores

6 Se reqvfere hacer campanas para controlar la natalidad canina y ejercer vigilancia en los animales que ingresan de otras localidades especial mente si proceden de areas con Rabia

Con el objeto de cooperar con la actividad de prevencion y Control de Rabia la OPSOMS debe propiciar mas la investigacion de trabajos que sean soporte para estos programas y no para favorecer la curiosidad cientffica

Sesi6n 7 Rabia Transmitida par Especies Silvestres

MOLECULAR CHARACTERIZATION OF VAMPIRE BAT RABIES ISOLATES FROM MEXICO (57) Carlos A de Mattos

Guillermo Benitez George M Baer Cecilia C de Mattos Centers for Disease Control and Prevention Atlanta Georgia USA

Several rabies outbreaks of bovine paralytic rabies have occurred in the States of Sinaloa Michoacan Puebla Guerrero and Veracruz between 1992 and 1996 causing serious economic losses in the local livestock industry Despite the public health and economic significance of vampire bat (Desmodus rotundus) transmitted rabies in Latin America very few primary viral isolates from these animals have been crlaracterized antigenically and genetically limiting knowledge of the intra- and inter-species rabies transmission cycles in this species The objective of this investigation was to obtain primary rabies isolates from vampire bats and to compare their antigenic and genetic characteristics with other rabies isolates collected from domestic and wildlife obtained in the Americas One hundred vampire bats were captured during these Mexican outbreaks They were sent to the laboratory for rabies diagnosis by the direct immunofluorescence technique on brain impressions Thirteen positive rabies samples were obtained The virus was isolated by intra cerebral inoculation of 4-weeks old mice The molecular characterization of the isolates was carried out using a panel of 8 monoclonal antibodies directed against the viral nucleoprotein and by the genetic analyses of a 320 base pair portion of the nucleoprotein gene Three antigenic variants (AgV) 3 5 and 11 previously described in Latin America and 1 new variant were found In the genetic characterization 10 isolates from Puebla Veracruz and Guerrero antigenically characterized as AgV 3 and 11 segregated together forming a monophyletic group These viruses showed a genetic distance between 0 to 06 Two samples one from Michoacan and another from Guerrero antigenically typified as a new AgV formed an independent clade These isolates presented a genetic distance ranging from 9 to 10 witrl all the other isolates The only virus obtained in Sinaloa characterized as AgV 5 segregated in an independent branch Its genetic distance with the other viruses ranged from 5 to 9 The phylogenetic comparison of these Mexican viruses with isolates obtained from different species of Chiroptera and from vampire bat-related cases throughout Latin America revealed the presence of a genetic diversity previously not detected in isolates from hematophagous bats This genetic diversity was not associated with the geographical origin or the temporal isolation of the samples The use of molecular techniques in conjunction with the current national sylvatic rabies surveillance programs and the development of international collaborative programs for rabies surveillance and control will allow a better understanding of the ecology of the disease in vampire bats Trlis reservoir has increased in population density and its geographical distribution has been highly modified during the last two decades as consequence of drastic changes in its environment

53

INTERNATIONAL ADVANCES

PROPOSAL FOR ACTION IN AREAS PRESENTING CANINE AND FELINE DESMODUS ROTUNDUS TRANSMITTED RABIES CASES (52)

Carrieri ML Harmani NMS Peres NF Kotait I

Instituto Pasteur Sao PauloSP

Canine and feline rabies has significantly decreased since 1995 in the State of Sao Paulo due to measures implemented by the Sao Paulo State Rabies Control Program Coordination In 1995 169 cases of rabies occurred in 1996 104 cases in 1997 11 cases in 1998 7 cases in 1999 5 cases and up to August 2000 2 cases Instituto Pasteur the headquarters of the Program Coordination and Reference Laboratory for Brazil uses a panel of 8 monoclonal antibodies and the indirect immunofluorescence test for identifying the transmitter species of rabies cases We used the monoclonal antibody immunofluorescence test in 9 of the last 14 canine and feline rabies cases making it possible to recognize variant 3 (Desmodus rotundus - hematophagous bat) in 8 of these samples of which 7 in dogs and 1 in a cat This investigation aims to propose actions for controlling canine and feline rabies transmitted by hemathophagous bats The first step to be taken is to describe the region urban suburban or borderline and rural When a case is described in an urban area epidemiological investigation should be immediately initiated for detecting human and animal contacts identifying possible shelters and colonies of Desmodus rotundus and identifying other animal species aiming to control the canine and feline reservoirs If the identified region is suburban it should be described from the epidemiological point of view (controed non-controlled or silent) If it is a controlled area the recommended actions are identical to those for urban areas For non-controlled and silent areas epidemiological investigation and the control of dog cat and herbivorous reservoirs is recommended Rural areas should also be described epidemiologically (sporadic alert endemic or epidemic areas)

In sporadic and alert areas the recommended actions are identical to those of urban areas In endemic and epidemic areas epidemiological investigation reservoir control description of the distribution of herbivorous recording of Desmodus rotundus shelters and systematic herbivorous vaccination should be carried out

ESTUDIO SOBRE FACTORES DE RIESGO DE MORDEDURAS POR MURCIELAGOS HEMATOFAGOS EN LOCALIDADES DE LOS DISTRITOS DE AYNA Y SANTA ROSA DE LA

PROVINCIA DE LA MAR DEPARTAMENTO DE AYACUCHO - PERU 1999 (53) Dr Jorge Gomez Benavides (1) - Lie Melvy Ormaeehe Maeassi (2)

Ministerio de Salud - Ofieina General de Epidemiologra Lima - Peru

INTRODUCCION En el valle del rro Apurfmac desde 1982 se notificaron casos de rabia bovina transmitida por murcielagos hematofagos en las localidades de Pichari (provincia de La Convencion departamento de Cuzco ubicada al margen derecho del rro Apurfmac) y en Sivia (distrito del mismo nombre provincia de Huanta departamento de Ayacucho ubicada en el margen izquierdo del mismo rfo) Los servicios de salud de Ayacucho informaron la presentacion de 24 casos de rabia humana transmitida por vampiros en el valle del rro Apurfmac entre los arios 1883-85 Solo 4 casos fueron confirmados por ellaboratorio En el Peru se ha informado la presencia de mordeduras por murch~lagos hematofagos en comunidades nativas siendo consideradas como un hecho habitual De la misma manera en comunidades mineras que ingresan al habitat natural de los vampiros En otros lugares este hecho es accidental por la presencia de ganado que es la fuente principal de alimentaciqJ EI reporte de mordeduras por vampiros en forma frecuente en comunidades de este valle motivo la ejecucion de est a investigacion METODOLOGfA EI presente es un estudio de casos y controles no pareado Se realizo estratificacion por grupos de edad Se selecciono aquellas comunidades que presentaban mayor incidencia de mordeduras

~ En el distrito de Ayna comunidad de Ccenta y Nueva Union ~ En el distrito de Santa Rosa comunidad de Comunpiari

Definicion de caso persona con antecedente de mordedura de vampiro en los ultimos 12 meses Definicion de control persona que vive en el mismo domicilio 0 en la vecindad sin antecedente de mordedura de vampiro RESULTADOS Las comunidades contaban con muy escasa cantidad de ganado Se realizaron 106 entrevistas siendo 39 casos y 67 controles Los ninos menores de 15 anos fueron la poblacion mas afectada Por mordeduras Casi el 70 de los entrevistados eran del sexo femenino EI 100 de las

54

INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

mordeduras fueron intradomiciliarias Solo el 14 de los entrevistados (jefe de familia) conoc[a que la enfermedad era incurable y el 36 respondio que el perro y 0 murcielago transmitfa la enfermedad Casi el 60 de la poblacion refiere lavarse la rnordedura con agua y jabon EI 63 de los entrevistados referfan dormir con mosquitero Analisis de casos y controles en las localidades encuestadas

Variable Grupo etareo menor de 15 anos OR =848 (IC 95 =179 - 401) y Variable No usar mosquitero OR = 185 (IC 95 = 41 - 831)

Conclusion Se considera que el pertenecer al grupo etareo menor de 15 como un factor de riesgo yel uso de mosquiteros como un factor protector La rabia transmitida por murcielagos vampiro es un riesgo latente para el valle del rio Apurlmac teniendo en cuenta sus antecedentes y porque rio arriba en el valle del rio Pampas se mantiene la rabia silvestre en forma endemica desde 1995

DETERMINACION DE HABITOS PRACTICAS Y ACTITUDES QUE FAVORECEN LA PRESENTACION DE MORDEDURAS DE MURCIELAGOS EN COMUNIDADES NATIVAS

AGUAFllJNAS DE LA PROVINCIA DE SAN IGNACIO - DEPARTAMENTO DE CAJAMARCA (54) Dr Manuel Antonio Arana Arana

Ora Ana Marfa Navarro Vela Oireccion Sub Regional de Salud - Jaen

INTRODUCCION La Rabia silvestre transmitida por rnurcielagos constituye el cicio de transmision en zonas de selva del Peru Desde 1975 las Provincias de Huanta Condorcanqui y EI Manu han sido afectadas por brotes de Rabia causando defunciones en la poblacion y al mismo tiempo cuantiosas perdidas economicas a la ganaderfa En los brotes ocurridos se observa que la poblacion mas afectada es la poblacion nativa sobre todo de la Etnia Aguaruna-Huambisa localizada en la Provincia de Condorcanqui AI igual que en Condorcanqui en la Provincia de San Ignacio existen comunidades nativas Aguarunas con notificacion de mordeduras por murcielagos siendo materia de investigacion los factores de riesgo de Rabia silvestre causados por la carencia de medidas de proteccion contra las mordeduras de quiropteros En el brote de Rabia bovina silvestre reportado en Enero de 1998 en la localidad de Burgos-Distrito de Huarango de la Provincia de San Ignacio la poblacion humana en riesgo estuvo circunscrita a las personas que habfan manipulado animales enfermos y a la poblacion nativa Aguaruna pertenecientes a las comunidades de Naranjos y Yamakey sin embargo en estas no ocurrieron accidentes de mordeduras motivando este hallazgo la aplicacion de encuestas CAP OBJETIVOS Determinar los habitos actitudes y practicas que condicionan la presencia de mordeduras en la poblacion MATERIAL Y METODOS

Encuestas CAP mapas croquis Se encuesto al 92 del total de viviendas (115) de 08 comunidades nativas Aguarunas Naranjos (16) Alto Naranjos (07) Yamakey (17) Supayacu (38) Nva Kucha (07) Alto Kunchin (09) Santa Agueda (08) y Valencia (13) Consolidacion y procesamiento de datos en Epi Info version 6

RESULTADOS Y CONCLUSIONES Del total de 115 viviendas encuestadas el 5131 son de tipo A(Cana-guayaquil-chonta-broza-palmiche) existiendo el mayor porcentaje(305) de estas viviendas en la localidad de Supayacu EI tipo B(Cana-guayaquil-madera-calamina) alcanzo un 3565 en el contexto total predominando dicho tipo de viviendas en Supayacu(4634) EI 1304 de viviendas son de adobe la comunidad de Naranjos (60) registra el porcentaje mas alto EI mayor numero de mordeduras se produjo en las viviendas de tipo A y tipo B siendo este porcentaje de 4717 y 4528 respectivamente Menos accidentes ocurren en viviendas de tipo C(Adobe)con 755 EI 60 de hogares visitados refirieron utilizar mosquiteros De las 69 viviendas que refieren contar con mosquiteros presentaron mordeduras el 4783 mientras que en el 5217 de elias no ocurrieron Supayacu es la comunidad que registra mayor porcentaje de mordeduras siendo aste de 3478 y las comunidades que tienen menor porcentaje son Santa Agueda y Naranjos con 377 cada una elias EI 6086 de encuestados relaciona a la Rabia como una enfermedad propia de los anirnales el 1130 afirma que es una enfermedad del hombre mientras que el 2784 de encuestados no contesto Con relacion al grupo etareo el mas vulnerable es el grupo comprendido entre 0-12 anos(8072) produciandose el mayor numero de mordeduras en ninos de 06-12 anos(5522) Las mordeduras en el cuerpo se ubicaron con mayor frecuencia en la cabeza(9020) La zooprofilaxis se pudo observar en la piblacion de la comunidad de Naranjos que se dedican al alquiler de pastizales a comunidades ganaderas mestizas como una de sus principales actividades economicas al igual que el

55

XI REUNI6N INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RAaJES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMrRICAS IN THE AMERICAS

2 Las vacunaciones masivas se deben realizar en areas con circulacion de virus cada ano 0 por 10

menos programar vacunaciones para poblacion nueva anualmente y ejecutar vacunacion de mantenimiento para evitar la ruptura de las coberturas utiles de vacunacion

3 Es necesario vigilar la red de frio y el manejo del biologico al igual que las tecnicas de aplicacion de la vacuna

4 Se requiere hacer periodicamente estudios inmunologicos para determinar la proporcion real de perros protegidos

5 Ademas de 10 anterior es indispensable que se ejecuten actividades de caracter educativo a la comunidad con el objeto de crear conciencia en los duenos y tenedores de perros sobre la necesidad de mantenerlos vacunados no permitir su permanencia en la calle sin la supervision de duenos y tenedores

6 Se reqvfere hacer campanas para controlar la natalidad canina y ejercer vigilancia en los animales que ingresan de otras localidades especial mente si proceden de areas con Rabia

Con el objeto de cooperar con la actividad de prevencion y Control de Rabia la OPSOMS debe propiciar mas la investigacion de trabajos que sean soporte para estos programas y no para favorecer la curiosidad cientffica

Sesi6n 7 Rabia Transmitida par Especies Silvestres

MOLECULAR CHARACTERIZATION OF VAMPIRE BAT RABIES ISOLATES FROM MEXICO (57) Carlos A de Mattos

Guillermo Benitez George M Baer Cecilia C de Mattos Centers for Disease Control and Prevention Atlanta Georgia USA

Several rabies outbreaks of bovine paralytic rabies have occurred in the States of Sinaloa Michoacan Puebla Guerrero and Veracruz between 1992 and 1996 causing serious economic losses in the local livestock industry Despite the public health and economic significance of vampire bat (Desmodus rotundus) transmitted rabies in Latin America very few primary viral isolates from these animals have been crlaracterized antigenically and genetically limiting knowledge of the intra- and inter-species rabies transmission cycles in this species The objective of this investigation was to obtain primary rabies isolates from vampire bats and to compare their antigenic and genetic characteristics with other rabies isolates collected from domestic and wildlife obtained in the Americas One hundred vampire bats were captured during these Mexican outbreaks They were sent to the laboratory for rabies diagnosis by the direct immunofluorescence technique on brain impressions Thirteen positive rabies samples were obtained The virus was isolated by intra cerebral inoculation of 4-weeks old mice The molecular characterization of the isolates was carried out using a panel of 8 monoclonal antibodies directed against the viral nucleoprotein and by the genetic analyses of a 320 base pair portion of the nucleoprotein gene Three antigenic variants (AgV) 3 5 and 11 previously described in Latin America and 1 new variant were found In the genetic characterization 10 isolates from Puebla Veracruz and Guerrero antigenically characterized as AgV 3 and 11 segregated together forming a monophyletic group These viruses showed a genetic distance between 0 to 06 Two samples one from Michoacan and another from Guerrero antigenically typified as a new AgV formed an independent clade These isolates presented a genetic distance ranging from 9 to 10 witrl all the other isolates The only virus obtained in Sinaloa characterized as AgV 5 segregated in an independent branch Its genetic distance with the other viruses ranged from 5 to 9 The phylogenetic comparison of these Mexican viruses with isolates obtained from different species of Chiroptera and from vampire bat-related cases throughout Latin America revealed the presence of a genetic diversity previously not detected in isolates from hematophagous bats This genetic diversity was not associated with the geographical origin or the temporal isolation of the samples The use of molecular techniques in conjunction with the current national sylvatic rabies surveillance programs and the development of international collaborative programs for rabies surveillance and control will allow a better understanding of the ecology of the disease in vampire bats Trlis reservoir has increased in population density and its geographical distribution has been highly modified during the last two decades as consequence of drastic changes in its environment

53

INTERNATIONAL ADVANCES

PROPOSAL FOR ACTION IN AREAS PRESENTING CANINE AND FELINE DESMODUS ROTUNDUS TRANSMITTED RABIES CASES (52)

Carrieri ML Harmani NMS Peres NF Kotait I

Instituto Pasteur Sao PauloSP

Canine and feline rabies has significantly decreased since 1995 in the State of Sao Paulo due to measures implemented by the Sao Paulo State Rabies Control Program Coordination In 1995 169 cases of rabies occurred in 1996 104 cases in 1997 11 cases in 1998 7 cases in 1999 5 cases and up to August 2000 2 cases Instituto Pasteur the headquarters of the Program Coordination and Reference Laboratory for Brazil uses a panel of 8 monoclonal antibodies and the indirect immunofluorescence test for identifying the transmitter species of rabies cases We used the monoclonal antibody immunofluorescence test in 9 of the last 14 canine and feline rabies cases making it possible to recognize variant 3 (Desmodus rotundus - hematophagous bat) in 8 of these samples of which 7 in dogs and 1 in a cat This investigation aims to propose actions for controlling canine and feline rabies transmitted by hemathophagous bats The first step to be taken is to describe the region urban suburban or borderline and rural When a case is described in an urban area epidemiological investigation should be immediately initiated for detecting human and animal contacts identifying possible shelters and colonies of Desmodus rotundus and identifying other animal species aiming to control the canine and feline reservoirs If the identified region is suburban it should be described from the epidemiological point of view (controed non-controlled or silent) If it is a controlled area the recommended actions are identical to those for urban areas For non-controlled and silent areas epidemiological investigation and the control of dog cat and herbivorous reservoirs is recommended Rural areas should also be described epidemiologically (sporadic alert endemic or epidemic areas)

In sporadic and alert areas the recommended actions are identical to those of urban areas In endemic and epidemic areas epidemiological investigation reservoir control description of the distribution of herbivorous recording of Desmodus rotundus shelters and systematic herbivorous vaccination should be carried out

ESTUDIO SOBRE FACTORES DE RIESGO DE MORDEDURAS POR MURCIELAGOS HEMATOFAGOS EN LOCALIDADES DE LOS DISTRITOS DE AYNA Y SANTA ROSA DE LA

PROVINCIA DE LA MAR DEPARTAMENTO DE AYACUCHO - PERU 1999 (53) Dr Jorge Gomez Benavides (1) - Lie Melvy Ormaeehe Maeassi (2)

Ministerio de Salud - Ofieina General de Epidemiologra Lima - Peru

INTRODUCCION En el valle del rro Apurfmac desde 1982 se notificaron casos de rabia bovina transmitida por murcielagos hematofagos en las localidades de Pichari (provincia de La Convencion departamento de Cuzco ubicada al margen derecho del rro Apurfmac) y en Sivia (distrito del mismo nombre provincia de Huanta departamento de Ayacucho ubicada en el margen izquierdo del mismo rfo) Los servicios de salud de Ayacucho informaron la presentacion de 24 casos de rabia humana transmitida por vampiros en el valle del rro Apurfmac entre los arios 1883-85 Solo 4 casos fueron confirmados por ellaboratorio En el Peru se ha informado la presencia de mordeduras por murch~lagos hematofagos en comunidades nativas siendo consideradas como un hecho habitual De la misma manera en comunidades mineras que ingresan al habitat natural de los vampiros En otros lugares este hecho es accidental por la presencia de ganado que es la fuente principal de alimentaciqJ EI reporte de mordeduras por vampiros en forma frecuente en comunidades de este valle motivo la ejecucion de est a investigacion METODOLOGfA EI presente es un estudio de casos y controles no pareado Se realizo estratificacion por grupos de edad Se selecciono aquellas comunidades que presentaban mayor incidencia de mordeduras

~ En el distrito de Ayna comunidad de Ccenta y Nueva Union ~ En el distrito de Santa Rosa comunidad de Comunpiari

Definicion de caso persona con antecedente de mordedura de vampiro en los ultimos 12 meses Definicion de control persona que vive en el mismo domicilio 0 en la vecindad sin antecedente de mordedura de vampiro RESULTADOS Las comunidades contaban con muy escasa cantidad de ganado Se realizaron 106 entrevistas siendo 39 casos y 67 controles Los ninos menores de 15 anos fueron la poblacion mas afectada Por mordeduras Casi el 70 de los entrevistados eran del sexo femenino EI 100 de las

54

INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

mordeduras fueron intradomiciliarias Solo el 14 de los entrevistados (jefe de familia) conoc[a que la enfermedad era incurable y el 36 respondio que el perro y 0 murcielago transmitfa la enfermedad Casi el 60 de la poblacion refiere lavarse la rnordedura con agua y jabon EI 63 de los entrevistados referfan dormir con mosquitero Analisis de casos y controles en las localidades encuestadas

Variable Grupo etareo menor de 15 anos OR =848 (IC 95 =179 - 401) y Variable No usar mosquitero OR = 185 (IC 95 = 41 - 831)

Conclusion Se considera que el pertenecer al grupo etareo menor de 15 como un factor de riesgo yel uso de mosquiteros como un factor protector La rabia transmitida por murcielagos vampiro es un riesgo latente para el valle del rio Apurlmac teniendo en cuenta sus antecedentes y porque rio arriba en el valle del rio Pampas se mantiene la rabia silvestre en forma endemica desde 1995

DETERMINACION DE HABITOS PRACTICAS Y ACTITUDES QUE FAVORECEN LA PRESENTACION DE MORDEDURAS DE MURCIELAGOS EN COMUNIDADES NATIVAS

AGUAFllJNAS DE LA PROVINCIA DE SAN IGNACIO - DEPARTAMENTO DE CAJAMARCA (54) Dr Manuel Antonio Arana Arana

Ora Ana Marfa Navarro Vela Oireccion Sub Regional de Salud - Jaen

INTRODUCCION La Rabia silvestre transmitida por rnurcielagos constituye el cicio de transmision en zonas de selva del Peru Desde 1975 las Provincias de Huanta Condorcanqui y EI Manu han sido afectadas por brotes de Rabia causando defunciones en la poblacion y al mismo tiempo cuantiosas perdidas economicas a la ganaderfa En los brotes ocurridos se observa que la poblacion mas afectada es la poblacion nativa sobre todo de la Etnia Aguaruna-Huambisa localizada en la Provincia de Condorcanqui AI igual que en Condorcanqui en la Provincia de San Ignacio existen comunidades nativas Aguarunas con notificacion de mordeduras por murcielagos siendo materia de investigacion los factores de riesgo de Rabia silvestre causados por la carencia de medidas de proteccion contra las mordeduras de quiropteros En el brote de Rabia bovina silvestre reportado en Enero de 1998 en la localidad de Burgos-Distrito de Huarango de la Provincia de San Ignacio la poblacion humana en riesgo estuvo circunscrita a las personas que habfan manipulado animales enfermos y a la poblacion nativa Aguaruna pertenecientes a las comunidades de Naranjos y Yamakey sin embargo en estas no ocurrieron accidentes de mordeduras motivando este hallazgo la aplicacion de encuestas CAP OBJETIVOS Determinar los habitos actitudes y practicas que condicionan la presencia de mordeduras en la poblacion MATERIAL Y METODOS

Encuestas CAP mapas croquis Se encuesto al 92 del total de viviendas (115) de 08 comunidades nativas Aguarunas Naranjos (16) Alto Naranjos (07) Yamakey (17) Supayacu (38) Nva Kucha (07) Alto Kunchin (09) Santa Agueda (08) y Valencia (13) Consolidacion y procesamiento de datos en Epi Info version 6

RESULTADOS Y CONCLUSIONES Del total de 115 viviendas encuestadas el 5131 son de tipo A(Cana-guayaquil-chonta-broza-palmiche) existiendo el mayor porcentaje(305) de estas viviendas en la localidad de Supayacu EI tipo B(Cana-guayaquil-madera-calamina) alcanzo un 3565 en el contexto total predominando dicho tipo de viviendas en Supayacu(4634) EI 1304 de viviendas son de adobe la comunidad de Naranjos (60) registra el porcentaje mas alto EI mayor numero de mordeduras se produjo en las viviendas de tipo A y tipo B siendo este porcentaje de 4717 y 4528 respectivamente Menos accidentes ocurren en viviendas de tipo C(Adobe)con 755 EI 60 de hogares visitados refirieron utilizar mosquiteros De las 69 viviendas que refieren contar con mosquiteros presentaron mordeduras el 4783 mientras que en el 5217 de elias no ocurrieron Supayacu es la comunidad que registra mayor porcentaje de mordeduras siendo aste de 3478 y las comunidades que tienen menor porcentaje son Santa Agueda y Naranjos con 377 cada una elias EI 6086 de encuestados relaciona a la Rabia como una enfermedad propia de los anirnales el 1130 afirma que es una enfermedad del hombre mientras que el 2784 de encuestados no contesto Con relacion al grupo etareo el mas vulnerable es el grupo comprendido entre 0-12 anos(8072) produciandose el mayor numero de mordeduras en ninos de 06-12 anos(5522) Las mordeduras en el cuerpo se ubicaron con mayor frecuencia en la cabeza(9020) La zooprofilaxis se pudo observar en la piblacion de la comunidad de Naranjos que se dedican al alquiler de pastizales a comunidades ganaderas mestizas como una de sus principales actividades economicas al igual que el

55

INTERNATIONAL ADVANCES

PROPOSAL FOR ACTION IN AREAS PRESENTING CANINE AND FELINE DESMODUS ROTUNDUS TRANSMITTED RABIES CASES (52)

Carrieri ML Harmani NMS Peres NF Kotait I

Instituto Pasteur Sao PauloSP

Canine and feline rabies has significantly decreased since 1995 in the State of Sao Paulo due to measures implemented by the Sao Paulo State Rabies Control Program Coordination In 1995 169 cases of rabies occurred in 1996 104 cases in 1997 11 cases in 1998 7 cases in 1999 5 cases and up to August 2000 2 cases Instituto Pasteur the headquarters of the Program Coordination and Reference Laboratory for Brazil uses a panel of 8 monoclonal antibodies and the indirect immunofluorescence test for identifying the transmitter species of rabies cases We used the monoclonal antibody immunofluorescence test in 9 of the last 14 canine and feline rabies cases making it possible to recognize variant 3 (Desmodus rotundus - hematophagous bat) in 8 of these samples of which 7 in dogs and 1 in a cat This investigation aims to propose actions for controlling canine and feline rabies transmitted by hemathophagous bats The first step to be taken is to describe the region urban suburban or borderline and rural When a case is described in an urban area epidemiological investigation should be immediately initiated for detecting human and animal contacts identifying possible shelters and colonies of Desmodus rotundus and identifying other animal species aiming to control the canine and feline reservoirs If the identified region is suburban it should be described from the epidemiological point of view (controed non-controlled or silent) If it is a controlled area the recommended actions are identical to those for urban areas For non-controlled and silent areas epidemiological investigation and the control of dog cat and herbivorous reservoirs is recommended Rural areas should also be described epidemiologically (sporadic alert endemic or epidemic areas)

In sporadic and alert areas the recommended actions are identical to those of urban areas In endemic and epidemic areas epidemiological investigation reservoir control description of the distribution of herbivorous recording of Desmodus rotundus shelters and systematic herbivorous vaccination should be carried out

ESTUDIO SOBRE FACTORES DE RIESGO DE MORDEDURAS POR MURCIELAGOS HEMATOFAGOS EN LOCALIDADES DE LOS DISTRITOS DE AYNA Y SANTA ROSA DE LA

PROVINCIA DE LA MAR DEPARTAMENTO DE AYACUCHO - PERU 1999 (53) Dr Jorge Gomez Benavides (1) - Lie Melvy Ormaeehe Maeassi (2)

Ministerio de Salud - Ofieina General de Epidemiologra Lima - Peru

INTRODUCCION En el valle del rro Apurfmac desde 1982 se notificaron casos de rabia bovina transmitida por murcielagos hematofagos en las localidades de Pichari (provincia de La Convencion departamento de Cuzco ubicada al margen derecho del rro Apurfmac) y en Sivia (distrito del mismo nombre provincia de Huanta departamento de Ayacucho ubicada en el margen izquierdo del mismo rfo) Los servicios de salud de Ayacucho informaron la presentacion de 24 casos de rabia humana transmitida por vampiros en el valle del rro Apurfmac entre los arios 1883-85 Solo 4 casos fueron confirmados por ellaboratorio En el Peru se ha informado la presencia de mordeduras por murch~lagos hematofagos en comunidades nativas siendo consideradas como un hecho habitual De la misma manera en comunidades mineras que ingresan al habitat natural de los vampiros En otros lugares este hecho es accidental por la presencia de ganado que es la fuente principal de alimentaciqJ EI reporte de mordeduras por vampiros en forma frecuente en comunidades de este valle motivo la ejecucion de est a investigacion METODOLOGfA EI presente es un estudio de casos y controles no pareado Se realizo estratificacion por grupos de edad Se selecciono aquellas comunidades que presentaban mayor incidencia de mordeduras

~ En el distrito de Ayna comunidad de Ccenta y Nueva Union ~ En el distrito de Santa Rosa comunidad de Comunpiari

Definicion de caso persona con antecedente de mordedura de vampiro en los ultimos 12 meses Definicion de control persona que vive en el mismo domicilio 0 en la vecindad sin antecedente de mordedura de vampiro RESULTADOS Las comunidades contaban con muy escasa cantidad de ganado Se realizaron 106 entrevistas siendo 39 casos y 67 controles Los ninos menores de 15 anos fueron la poblacion mas afectada Por mordeduras Casi el 70 de los entrevistados eran del sexo femenino EI 100 de las

54

INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

mordeduras fueron intradomiciliarias Solo el 14 de los entrevistados (jefe de familia) conoc[a que la enfermedad era incurable y el 36 respondio que el perro y 0 murcielago transmitfa la enfermedad Casi el 60 de la poblacion refiere lavarse la rnordedura con agua y jabon EI 63 de los entrevistados referfan dormir con mosquitero Analisis de casos y controles en las localidades encuestadas

Variable Grupo etareo menor de 15 anos OR =848 (IC 95 =179 - 401) y Variable No usar mosquitero OR = 185 (IC 95 = 41 - 831)

Conclusion Se considera que el pertenecer al grupo etareo menor de 15 como un factor de riesgo yel uso de mosquiteros como un factor protector La rabia transmitida por murcielagos vampiro es un riesgo latente para el valle del rio Apurlmac teniendo en cuenta sus antecedentes y porque rio arriba en el valle del rio Pampas se mantiene la rabia silvestre en forma endemica desde 1995

DETERMINACION DE HABITOS PRACTICAS Y ACTITUDES QUE FAVORECEN LA PRESENTACION DE MORDEDURAS DE MURCIELAGOS EN COMUNIDADES NATIVAS

AGUAFllJNAS DE LA PROVINCIA DE SAN IGNACIO - DEPARTAMENTO DE CAJAMARCA (54) Dr Manuel Antonio Arana Arana

Ora Ana Marfa Navarro Vela Oireccion Sub Regional de Salud - Jaen

INTRODUCCION La Rabia silvestre transmitida por rnurcielagos constituye el cicio de transmision en zonas de selva del Peru Desde 1975 las Provincias de Huanta Condorcanqui y EI Manu han sido afectadas por brotes de Rabia causando defunciones en la poblacion y al mismo tiempo cuantiosas perdidas economicas a la ganaderfa En los brotes ocurridos se observa que la poblacion mas afectada es la poblacion nativa sobre todo de la Etnia Aguaruna-Huambisa localizada en la Provincia de Condorcanqui AI igual que en Condorcanqui en la Provincia de San Ignacio existen comunidades nativas Aguarunas con notificacion de mordeduras por murcielagos siendo materia de investigacion los factores de riesgo de Rabia silvestre causados por la carencia de medidas de proteccion contra las mordeduras de quiropteros En el brote de Rabia bovina silvestre reportado en Enero de 1998 en la localidad de Burgos-Distrito de Huarango de la Provincia de San Ignacio la poblacion humana en riesgo estuvo circunscrita a las personas que habfan manipulado animales enfermos y a la poblacion nativa Aguaruna pertenecientes a las comunidades de Naranjos y Yamakey sin embargo en estas no ocurrieron accidentes de mordeduras motivando este hallazgo la aplicacion de encuestas CAP OBJETIVOS Determinar los habitos actitudes y practicas que condicionan la presencia de mordeduras en la poblacion MATERIAL Y METODOS

Encuestas CAP mapas croquis Se encuesto al 92 del total de viviendas (115) de 08 comunidades nativas Aguarunas Naranjos (16) Alto Naranjos (07) Yamakey (17) Supayacu (38) Nva Kucha (07) Alto Kunchin (09) Santa Agueda (08) y Valencia (13) Consolidacion y procesamiento de datos en Epi Info version 6

RESULTADOS Y CONCLUSIONES Del total de 115 viviendas encuestadas el 5131 son de tipo A(Cana-guayaquil-chonta-broza-palmiche) existiendo el mayor porcentaje(305) de estas viviendas en la localidad de Supayacu EI tipo B(Cana-guayaquil-madera-calamina) alcanzo un 3565 en el contexto total predominando dicho tipo de viviendas en Supayacu(4634) EI 1304 de viviendas son de adobe la comunidad de Naranjos (60) registra el porcentaje mas alto EI mayor numero de mordeduras se produjo en las viviendas de tipo A y tipo B siendo este porcentaje de 4717 y 4528 respectivamente Menos accidentes ocurren en viviendas de tipo C(Adobe)con 755 EI 60 de hogares visitados refirieron utilizar mosquiteros De las 69 viviendas que refieren contar con mosquiteros presentaron mordeduras el 4783 mientras que en el 5217 de elias no ocurrieron Supayacu es la comunidad que registra mayor porcentaje de mordeduras siendo aste de 3478 y las comunidades que tienen menor porcentaje son Santa Agueda y Naranjos con 377 cada una elias EI 6086 de encuestados relaciona a la Rabia como una enfermedad propia de los anirnales el 1130 afirma que es una enfermedad del hombre mientras que el 2784 de encuestados no contesto Con relacion al grupo etareo el mas vulnerable es el grupo comprendido entre 0-12 anos(8072) produciandose el mayor numero de mordeduras en ninos de 06-12 anos(5522) Las mordeduras en el cuerpo se ubicaron con mayor frecuencia en la cabeza(9020) La zooprofilaxis se pudo observar en la piblacion de la comunidad de Naranjos que se dedican al alquiler de pastizales a comunidades ganaderas mestizas como una de sus principales actividades economicas al igual que el

55

INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH LA INVESTIGACI6N Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

mordeduras fueron intradomiciliarias Solo el 14 de los entrevistados (jefe de familia) conoc[a que la enfermedad era incurable y el 36 respondio que el perro y 0 murcielago transmitfa la enfermedad Casi el 60 de la poblacion refiere lavarse la rnordedura con agua y jabon EI 63 de los entrevistados referfan dormir con mosquitero Analisis de casos y controles en las localidades encuestadas

Variable Grupo etareo menor de 15 anos OR =848 (IC 95 =179 - 401) y Variable No usar mosquitero OR = 185 (IC 95 = 41 - 831)

Conclusion Se considera que el pertenecer al grupo etareo menor de 15 como un factor de riesgo yel uso de mosquiteros como un factor protector La rabia transmitida por murcielagos vampiro es un riesgo latente para el valle del rio Apurlmac teniendo en cuenta sus antecedentes y porque rio arriba en el valle del rio Pampas se mantiene la rabia silvestre en forma endemica desde 1995

DETERMINACION DE HABITOS PRACTICAS Y ACTITUDES QUE FAVORECEN LA PRESENTACION DE MORDEDURAS DE MURCIELAGOS EN COMUNIDADES NATIVAS

AGUAFllJNAS DE LA PROVINCIA DE SAN IGNACIO - DEPARTAMENTO DE CAJAMARCA (54) Dr Manuel Antonio Arana Arana

Ora Ana Marfa Navarro Vela Oireccion Sub Regional de Salud - Jaen

INTRODUCCION La Rabia silvestre transmitida por rnurcielagos constituye el cicio de transmision en zonas de selva del Peru Desde 1975 las Provincias de Huanta Condorcanqui y EI Manu han sido afectadas por brotes de Rabia causando defunciones en la poblacion y al mismo tiempo cuantiosas perdidas economicas a la ganaderfa En los brotes ocurridos se observa que la poblacion mas afectada es la poblacion nativa sobre todo de la Etnia Aguaruna-Huambisa localizada en la Provincia de Condorcanqui AI igual que en Condorcanqui en la Provincia de San Ignacio existen comunidades nativas Aguarunas con notificacion de mordeduras por murcielagos siendo materia de investigacion los factores de riesgo de Rabia silvestre causados por la carencia de medidas de proteccion contra las mordeduras de quiropteros En el brote de Rabia bovina silvestre reportado en Enero de 1998 en la localidad de Burgos-Distrito de Huarango de la Provincia de San Ignacio la poblacion humana en riesgo estuvo circunscrita a las personas que habfan manipulado animales enfermos y a la poblacion nativa Aguaruna pertenecientes a las comunidades de Naranjos y Yamakey sin embargo en estas no ocurrieron accidentes de mordeduras motivando este hallazgo la aplicacion de encuestas CAP OBJETIVOS Determinar los habitos actitudes y practicas que condicionan la presencia de mordeduras en la poblacion MATERIAL Y METODOS

Encuestas CAP mapas croquis Se encuesto al 92 del total de viviendas (115) de 08 comunidades nativas Aguarunas Naranjos (16) Alto Naranjos (07) Yamakey (17) Supayacu (38) Nva Kucha (07) Alto Kunchin (09) Santa Agueda (08) y Valencia (13) Consolidacion y procesamiento de datos en Epi Info version 6

RESULTADOS Y CONCLUSIONES Del total de 115 viviendas encuestadas el 5131 son de tipo A(Cana-guayaquil-chonta-broza-palmiche) existiendo el mayor porcentaje(305) de estas viviendas en la localidad de Supayacu EI tipo B(Cana-guayaquil-madera-calamina) alcanzo un 3565 en el contexto total predominando dicho tipo de viviendas en Supayacu(4634) EI 1304 de viviendas son de adobe la comunidad de Naranjos (60) registra el porcentaje mas alto EI mayor numero de mordeduras se produjo en las viviendas de tipo A y tipo B siendo este porcentaje de 4717 y 4528 respectivamente Menos accidentes ocurren en viviendas de tipo C(Adobe)con 755 EI 60 de hogares visitados refirieron utilizar mosquiteros De las 69 viviendas que refieren contar con mosquiteros presentaron mordeduras el 4783 mientras que en el 5217 de elias no ocurrieron Supayacu es la comunidad que registra mayor porcentaje de mordeduras siendo aste de 3478 y las comunidades que tienen menor porcentaje son Santa Agueda y Naranjos con 377 cada una elias EI 6086 de encuestados relaciona a la Rabia como una enfermedad propia de los anirnales el 1130 afirma que es una enfermedad del hombre mientras que el 2784 de encuestados no contesto Con relacion al grupo etareo el mas vulnerable es el grupo comprendido entre 0-12 anos(8072) produciandose el mayor numero de mordeduras en ninos de 06-12 anos(5522) Las mordeduras en el cuerpo se ubicaron con mayor frecuencia en la cabeza(9020) La zooprofilaxis se pudo observar en la piblacion de la comunidad de Naranjos que se dedican al alquiler de pastizales a comunidades ganaderas mestizas como una de sus principales actividades economicas al igual que el

55

XI REUNION INTERNACIONAL SOBRE INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH AVANCES EN LA INVESTIGACION Y CONTROL ADVANCES AND RABIES CONTROL DE LA RABIA EN LAS AMERICAS IN THE AMERICAS

r-

sembrio de cafe Los facto res de riesgos determinados a traves de la presente investigacion se circunscriben a 1 Tipo de vivienda relacionado a la proteccion de las mismas frente al ingreso de murcielagos 2 Inadecuado uso de mosquiteros 3 No-utilizacion de mosquiteros en el grupo etareo menor de 12 anos 4 Desconocimiento que la enfermedad ataca al hombre solo la relacionan como una enfermedad

propia de los animales

ESTUDIO RETROSPECTIVO Y CARACTERIZACION DE LA RABIA BOVINA EN LOS LLANOS ORIENTALES DE COLOMBIA 1982 -1999 (55)

Edilberto Brito Sierra Instituto Colombiano Agropecuario (ICA) - Villavicencio - Colombia

En el presente articulo se hace un analisis de los brotes de rabia paresiante bovina ocurridos desde 1982 hasta 1999 en los Llanos Orientales de Colombia almacenados en una base de datos del Instituto Colombiano Agropecuario (ICA) en el programa PANACEA emanados de los reportes que originariamente tomaron las diferentes oficinas locales del ICA y que permite almacenar tabular y procesar la informacion obtenida y que correspondio a 280 focos Se analizan algunos factores tales como epoca de presentacion tasas de ataque letalidad categorfa animal afectada ocurrencia por departamento municipio y ubicacion de focos en mapas para determinar zonas de riesgo De los 280 registros existentes de reportes de focos con sfndrome neurologico bovino se tuvieron en cuenta para el analisis los 81 focos cuyo resultado de laboratorio fue positivo arabia descartando los otros 199 focos ya sea porque su diagnostico solo fue clfnico 0 porque su resuftado de laboratorio fue negativo a rabia Se ubicaron todos los focos en los mapas de cuadrantes en primera instancia para deterrninar las zonas de mayor riesgo de ocurrencia de brotes y de presencia de posibles colonias de vampiros infectadas bull Se han identificado cuatro zonas de riesgo epidemiologico de presentacion de rabia paresiante

bovina y posiblemente de migracion de vampiros las cuales son 1 Frontera con Venezuela (Oriente de los Llanos Colombianos) Ingreso de vampiros por Puerto

Carreno Cravo Norte Paz de Ariporo Hato Corozal y Arauca 2 Piedemonte de la Cordillera Oriental A todo 10 largo del piedemonte de los Departamentos de

Arauca Casanare Meta y Probablemente de Caqueta y de Venezuela 3 Cuenca del RIO Meta A todo 10 largo del rfo desde Puerto Lopez hasta Puerto Carreno 4 Cuenca de los rfos Guaviare - Ariari bull Se han identificado algunas zonas y municipios de alto riesgo con presentaciones frecuentes

dentro y entre anos como son 1 Nor oriente de Casanare Arauca (Paz de Ariporo y Hato Corozal en el area comprendida entre la

inspeccion de la Colombina y la inspeccion de Puerto Brasil sobre la cuenca del rfo Ariporo) 2 Nor Oriente del Vichada (Puerto Carreno) 3 Cuenca del RIO Ariari (Granada Fuente de Oro) 4 Sectores de Pie de monte (Tame Monterrey) bull Los bovinos de menor edad (crfas) son los de mayor riesgo de presentacion de la rabia bull EI mayor riesgo de presentacion de fa rabia paresiante bovina es en el primer semestre bull La presentacion de rabia paresiante bovina tiene tendencia cfclica con niveles epictemicos cada

cuatro a cinco anos bull No hay diferencia en presentacion por sexo en bovinos En la mayorfa de los focos se observaron bovinos equinos y porcinos mordidos por vampiros

CAPTURE AND MANAGEMENT OF VAMPIRE BATS IN CAPTIVITY AS A MODEL TO STUDY SEVERAL ASPECTS OF RABIES VIRUS (56)

Elizabeth Loza Rubio Octavio De Paz Villafan Labrandero IE

Centro Nacional de Investigaciones en Microbiologfa INIFAP Mexico

In Mexico there are 137 species of bats representing eight families and approximately the fourth part of mammals Only three of them feed exclusively on blood these are Oyphyla and Ofaemus which are the less known and Oesmodus rotundas also denominated as vampfre bat Since the sole diet of

56

INTERNATIONAL MEETING ON RESEARCH ADVANCES AND RABIES CONTROL

IN THE AMERICAS

vampire bats is the blood of vertebrales disease transmission occurs during normal feeding so they are the most important transmitters of rabies virus As we know paralytic rabies (derriengue) is a disease which causes severe economicej lost in cattie not only in Mexico but in other many countries of Latin America Hematophagous bats have been reported from northern Mexico to South America on both sides of the Andes to central Chile Argentina and Uruguay Specifically in Mexico there are 23 states where paralytic rabies in cattie has been notiffed This year has had at least two severe outbreaks with more than300 dead Vampires have become the second transmitter from rabies to human being it is for these reasons that studies in a controlled environment couid heip to understand the behaviour of this species and how rabies virus interact and to bear into them So in the Centro Nacional de Investigaciones en Mfcrobfologia (INIFAP- Mexico) was created a colony of vampire bats in captivity For capturing there are two methods 1) In caves the capture can be realized during the day but it is not very sate for peopie 2) In barns when there is no moon during the night Generally this is considered more practicaj in the field During the captures it is very important to differentiate between vampires and beneficiai bats The transport is done by airplane in a special packaged conditions mortality during this period is very low whereas during adaptation period is increased until 40 In the laboratory there is a special place where parameters such as darkness temperatura and humidfty are controfied Vampires are feed with defibrinated blood of bovine approximately 20 mi contained in special watering place Reproduction in captivity has been possible into de colony Vampires have been utilized in severaj experiments such as evaluatfon of vampiricides products immunization with a recombinant vaccine evaluation of different routes of chalienge and so on This kind of findings should be consider in control programmes specially in countries where hematophagous bats represent a big problem in public and veterinary health Acknowiedgement To Raul Flores Crespo and Diodoro Batalla Campero who have been a very hard workers in this field by many years

PHYLOGENETIC EVIDENCE FOR INVOLVEMENT OF LASIONYCTERIS NOCTIVAGANS AND PIPESTRELLUS SUBFLAVUS IN RECENT HUMAN RABIES INFECTIONS (58-A)

Jean S Smith Sharon Messenger Jennifer McQuiston Lillian Orciari Pamela Yager

Centers for Disease Control and Prevention MS G33 Rabies Laboratory CDC 1600 Clifton Rd Atlanta GA USA

Because most human rabies cases lack an animal exposure history the source of a rabies infection is derived from virus typing data that matches the human case sample to virus samples representing known animal reservoirs for rabies Phylogenetic analysis of partial N gene sequence for 381 bat rabies samples representing 25 North American species matched the variant of rabies virus found in 22 (759) of 29 human case samples with 43 (878) of 49 samples from the silver-haired bat Lasionycteris noctivagans and the eastern pipestrelle bat Pipestrellus subflavus The disproportionate involvement of these two species in human rabies deaths can be explained by the small size and muted coloring of these bats which would allow an unnoticed contact to occur Their use of tree roosts and foraging areas away from human dwellings would explain their infrequent contact with humans and the rarity of human rabies infections Alternative explanations such as an increased virulence of this variant of rabies virus (termed the LNPS variant) or a greater than realized prevalence of the variant in other animals would increase the risk to humans however human rabies cases would remain rare as long as most animal contacts carrying a risk of rabies are recognized and anti-rabies prophylaxis is given We attempted to estimate this risk by testing for the LNPS variant in rabies samples from house bats and domestic animals the animals most often submitted for rabies testing in the United States The finding of the LNPS variant in only 7 (52) of 135 samples from the common house bats Eptesicus fuscus and Myotis lucifugus and 14 (18) of 783 samples from cats dogs ferrets and cattle indicates an infrequent occurrence in animals other than silver-haired or eastern pipestrelle bats These data suggest that human rabies infections are most likely acquired through infrequent unnoticed contact with bats These types of infections although difficult to prevent will remain rare if appropriate precautions are taken to avoid unnecessary contact with bats

57

ON RESEARCH RABIES CONTROL IN THE AMERICAS

RABIES IN FRUGIVOROUS BATS ( Artibeus lituratus) IN sAo PAULO CITY- BRAZIL (59) SILVA MIRIAM M S GOMES LUCIANA H MARTORELLI LUZIA F

ZOONOSIS CONTROL CENTER-MAYORALTY OF SAO PAULO-SAO PAULO- BRAZIL

Frugivorous bats pertaining to the Phyllostomidae family are found all over Brazil mainly in woods forests and big metropolitan areas as Brasilia City and the states of Rio de Janeiro Rio Grande do Sui and Sao Paulo Environmental changes and the removal of native plants used as shelter and food are likely to be factors that aid the acclimatization and subsistence of these animals in urban areas In places such as backyards and streets where there are fruitful trees bats find food and shelter In Sao Paulo City there have been no cases of rabies in canine and feline species since 1983 From 1988 to 1999 there were six cases of positive bats for rabies all of them involving insetivorous species This report aims to show the first positive case for rabies in frugivorous bats in Sao Paulo City This specimen was found dead on the floor under a mango tree (Mangifera indica) in the yard of a Health Center in Casa Verde district in the northeast area of Sao Paulo City on the 28 th of June 2000 at about 9 a m It was ringed enabling identification of the specimen as part of the fauna survey made in Nucleo da Pedra Grande Serra da Cantareira in the northeast area of Sao Paulo City According to the information granted by the researchers the specimen was ringed on 030400 apparently healthy Serra da Cantareira is approximately 12 km far from the place where the bat was found This particular specimen was identified as a female adult (Artibeus lituratus) weighing 765 grams These bats are either solitary or live in small groups of 5 or 16 individuals and use crowned tree and spanning leaves as shelters They forage by themselves or in pairs grazing past the trees when choosing and catching the fruit Under the Direct Imunofluorescence and Intracerebral Inoculation in Mice the specimen showed positive results in brain in a ten-day incubation period The virus was also isolated from the salivary glands When the animal was manipulated it was observed that the ring had caused serious inflammatory reaction making it lose its hair and skin in the cervical region In order to survey the area there was an investigation at night in different regions of the Healthy Center where two nets were set out However no animal was found or captured In an inspection around the Healthy Center 5 stray dogs were captured and all of them had negative experimental results for rabies

BROTE DE RABIA SILVESTRE BOVINA EN BETANIA Y AGUAS CALIENTES LORETO- PERU (60)

Cardenas Claudio Perc Casapfa Morales Martfn Bust mante Navarro Jose2 Valera Perez Juana3

lPrograma de Control de Zoonosis Direccion Regional de Salud Loreto2 Programa de Control de Zoonosis MINSA 3Centro de Salud de Contamana DISA-Loreto

ANTECEDENTE La Region Loreto esta ubicada en la Selva Amazonica dej Peru y es considerada zona de riesgo para transmision de rabia por rnurcielagos hematofagos Entre Julio y Agosto dei 2 000 se reportaron en el Distrito de Contamana Provincia de Ucayali 3 vacunos fallecidos 2 procedfan de Betania comunidad de 127 habitantes y 400 cabezas de ganado vacuno y el otro procedfa de Aguas Calientes comunidad de 70 habitantes y 150 cabezas de vacunos Todos con un cuadro cllnico caracterizado por sialorrea aislarniento hiporexia paralisis del tren posterior postracion y muerte La prueba de inmunofluorescencia fue positiva para rabia en 2 cerebros de bovinos estudiados Los objetivos generales del presente estudio fueron-1) Determinar la magnitud del problema de rabia silvestre en las localidades de Betania y Aguas Calientes 2) Implementar medidas de prevencion y control en las 2 comunidades Los objetivos especfficos fueron a) Estimar las muertes ~curridas por rabia en bovinos y otros animales b) Determinar el fndice de mordedura por murcielago en bovinos c)Determinar la presencia de hematofagos en la poblacion de Quiropteros d) Determinar el fndice de mordeduras en humanos e) Incorporar a la comunidad en la vigilancia y control de la enfermedad METODOLOGfA Determinacion de la Magnitud del Problema -Se determino mediante autopsia verballa causa probable de muerte en los animales y se diseiio una encuesta para recoger informacion sobre porcentaje de personas y animales mordidos Asimismo se capturaron murcielagos a campo libre con redes de nylon RESULTADOS Se estudio el 100 (550) de bovinos de las dos comunidades y se encontro que el 15 (83) del total habra sufrido mordeduras de murcielagos- el promedio de bovinos por hato fue -O

Y algunos hatos alcanzaban hasta un 50 de prevalencia de mordeduras Se capturo 30 especfmenes identificandose 3 hematofagos (Desmodus rotundos) y otras especies de frugfvoros e insectivoros No se identifico humanos mordidos por murcielagos En la autopsia verbal se encontro que desde diciembre a Junio los pobladores reportaron 1 equino 3 cerdos 3 bovinos todos con un cuadro clfnico

58

XI INTERNATIONAL MEETINGON RESEARCHREUNI6N INTERNACIONAl AVANCES EN ADVANCES AND RABIES CONTROL DE LA RABIA IN THE AMERICAS

semejante caracterizado por dificultad para la marcha sialorrea postracion y muerte La carne de los 3 bovinos fallecidos en este brote fue manipulada yo consumida por 21 personas IMPLEMENT ACION DE MEDIDAS DE CONTROL Entre julio y agosto del 2000 se implernentaron las siguientes medidas A) Inmunizacion activa mediante esquema reducido con vacuna producida en cerebro de raton lactante a todos los sujetos expuestos 0 que consumieron carne B) Reduccion de la poblacion de murcielagos mediante impregnacion con warfarina aplicada por miembros de la comunidad capacitados y vacunados previamente C) Implementacion de un sistema de vigilancia comunitaria de mordeduras en animales y humanos con los ganaderos y pobladores de las comunidades afectadas D) Vacunacion de bovinos Capacitacion de la comunidad en la forma de transmision de ja enfermedad y medidas de prevenci~9n y control RESUL TAIdOS Se vacuno 21 personas expuestas EI fndice de mordedura por murcielagos en bovinos se ha reducido a menos de 5 por eliminacion de murcielagos hematofagos Actualmente la cobertura de notificacion es 100 en los sitios centinelas implementados en Betania y Aguas Calientes y no se ha reportado ningun otro animal fallecido hasta la fecha CONCLUSION ES Las localidades de Betania y Aguas Calientes constituyen una nueva zona reportada de rabia en Loreto Hay evidencia de circulacion del virus rabico des de rneses anteriores La presencia de rabia en bovinos representa riesgo para la aparicion de rabia en humanos La participacion de la comunidad constituye un valioso apoyo en el control de la enfermedad en localidades alejadas y de diffcil acceso

USE OF VAMPIRICIDE ON POULTRY FOR HAEMATHOPHAGOUS BAT POPULATION CONTROL FEEDING ON HUMAN BEINGS (61)

Romijn P c Silva R C F Medeiros M I

PESAGRO-RIO Alameda Sao Boaventura 770 Fonseca Niteroi Rio de Janeiro BRASIL

The effect of an anticoagulant product acting as a vampiricide for sell on the market for control of the population of vampire bats was tested on poultry by applying it on their feathers and skin The results suggest that the active principle of the product Warfarin was not toxic for poultry since the birds did not present macroscopic evidence of subcutaneous haemorrages nor did they die due to the product The possibility of using the product for populational control of vampire bats that prey on domestic birds was demonstrated by applying the product topically on the birds and allowing vampire bats to feed on them The bats that where allowed to use these birds for feeding died within 10 days and showed subcutaneous haemorrages in their wings The possibility of using domestic poultry treated with the vampiricide for Oesmodus rotundus population control is discussed mainly in regions where this species uses human beings as a feeding source for lack of a better option

METODOLOGIA PARA LA IDENTIFICACION DE ZONAS DE RIESGO A RABIA SILVESTRE EN LA PROVINCIA DE ALTO AMAZONAS - LORETO (62)

Lic Melvy Ormaeche Macassi Progreso 307 - Yurimaguas

INTRODUCCION La Rabia transmitida por murcielagos se presenta solo en America Latina y el Peru es el pafs que aporta el mayor numero de casos humanos en el perfodo de 1975 a 1990 contribuyo con el 285 (94) del total de casos estudiados en 12 parses En la provincia de Alto Amazonas -Loreto en el ano 1991 se registro por vez primera casos de Rabia Humana transmitida por murcielagos en total se han presentado tres brotes epidemicos (1995 y 1997) con 24 fallecidos en los distritos de Barranca y Manserriche en la cuenca hidrografica del rfo Mararlon y desde 1994 hasta 1996 se registraron brotes sucesivos de rabia bovina transmitida por murcielagos con 48 animales muertos en el distrito de Yurimaguas en la cuenca hidrografica del rfo Huallaga JUSTIFICACION

bull ~I ecosistema predominante es el selva baja con estribaciones de pie de rnonte constituyendo estos ultimos un habitat propicio para los murcielagos hematofagos

bull En las investigaciones realizadas el fndice de exposicion a mordeduras de murcielago hallados en la poblacion fue de 65 con rangos de 43 a 100

59