universidad nacional federico villarreal … · alto poder acidogénico y acidúrico. ... 10, 24,...
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UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL
FACULTAD DE ODONTOLOGIA
ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA Y CONCENTRACION MINIMA INHIBITORIA DEL
ACEITE ESENCIAL DEL CYMBOPOGON CITRATUS FRENTE AL
STREPTOCOCCCUS MUTANS IN VITRO
PRESENTADO POR LA BACHILLER
FADIATH TALITHA BORJA SIHUINTA
PARA OPTAR EL TITULO PROFESIONAL
LIMA-PERÚ
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RESUMEN
El aceite de Cymbopogon citratos ha demostrado tener efectividad
antimicrobiana frente a diferentes bacterias patógenas debido a que su
composición química se encuentra el citral. Por este motivo el presente
estudio tuvo como objetivo evaluar la actividad antibacteriana de este
aceite esencial a través del método de difusión en agar a las 24 y 48
horas y a su vez hallar la Concentración Mínima Inhibitoria mediante el
método de micro dilución frente al Streptococccus mutans.
Se encontró que la CMI del aceite esencial del Cymbopogon citratos
frente al Streptococcus mutans fue de 0.4%.Al evaluar la actividad
antibacteriana en 80 uL/mL y 160 uL/mL del aceite esencial del
cymbopogon citratos se encontró una media de los halos de inhibición de
21.8mm y 23 mm respectivamente (p<0.05). En cuanto al tiempo no hubo
significancia estadística (p>0.05)
De acuerdo a los resultados del estudio se puede concluir que el aceite
esencial del Cymbopogon citratos es un buen agente antibacteriano
frente al Streptococcus mutans y su acción es mas efectiva que el
control positivo (Clorhexidina 0.12%).
Palabras claves: Aceite esencial, Cymbopogon citratos, Actividad
antibacterial , Streptococcus mutans
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ABSTRACT
The essential oil of Cymbopogon citratus has shown to have antimicrobial
activity forehead to different pathogenic bacteria beacuse it has within of it
is composition the citral.For this reason the present study had like
objective to evaluate the antibacterial activity of this essential oil through a
difusión method in Agar from 24 to 48 hours and as well to find the
concentration inhibition minimun by the method microdilution as opposed
to streptococcus mutans.
It was found that the CIM of the essential oil of Cymbopogon citratos as
opposed to Streptoccocus mutans was of 0.4 % to evalúate the
antibacterial activity in 80 uL/mL and 160 uL/ml of essential oil found an
average halos of inhibition of 21.8 and 23mm respectively. As far as time
there was not statistical significance.
According to the results of the study it is posible to concluded that
Cymbopogon Citratus is a good bacteriological agent from to
Streptococcus mutans and that the essentail oil´s action is more effective
that the positive control.
Keywords: essential oil, Cymbopogon citratus, Antimicrobial activity,
Streptococcus mutans.
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I.- Introducción
En la cavidad oral podemos encontrar diversos tipos de microorganismos
los cuales se encuentran distribuidos en diferentes proporciones según la
zona donde se ubique.
Entre los microorganismos que encontramos en la cavidad oral podemos
mencionar a las bacterias, virus, hongos, entre otros. Dentro de las
bacterias podemos mencionar al Streptococcus mutans que se encuentra
presente en diferentes enfermedades odontológicas y sistémicas para lo
cual se emplean fármacos específicos para cada tipo de enfermedad.
En ocasiones, algunos de estos microorganismos producen resistencia
por lo cual se hace mas prolongado su tratamiento.
Actualmente se esta enfatizando en las propiedades medicinales de las
plantas debido a que poseen un mayor potencial farmacológico y además
mayores cualidades terapéuticas.
Una de estas plantas es el Cymbopogon citratos el cual posee
propiedades antibacterianas, antimicóticos, antiprotozoaria, antitumoral,
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antiinflamatoria. El potencial antibacteriano se debe porque posee dentro
de su composición al Citral.
Es por esto que es utilizado como medicina popular en muchos lugares de
nuestro país y alrededor del mundo.
Debido a que presenta un levado potencial antibacteriano seria importante
evaluar la actividad antibacteriana del aceite esencial del Cymbopogon
citratus frente al Streptococcus mutans, como una nueva alternativa de
solución en su tratamiento.
¿Cuál será la actividad antibacteriana y la concentración mínima
inhibitoria del aceite esencial del Cymbopogon citratus frente al
Streptococcus mutans in Vitro?
La boca alberga innumerables microorganismos en un ecosistema de
complejidad considerable, ya que cada zona contiene un hábitat para una
población con diferentes características a menudo con muchas especies
microbianas distintas, las cuales pueden complementarse o competir con
otras en la misma población. (4, 9,15)
Uno de estos, es un microorganismo de gran importancia estomatológica
son los STREPTOCOCCUS que habitan en un gran porcentaje la
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cavidad oral, Su importancia radica en el hecho de que son uno de los
principales agentes de la formación del proceso cariogénico. (4, 23,24)
Los estreptococos son cocos grampositivos que se asocian en parejas y
cadenas cortas o largas, dependiendo del producto patológico y del
medio de cultivo. Carecen de catalasa y son anaerobios facultativos,
cuando se desarrollan en presencia de aire. (27,28)
La temperatura optima de crecimiento es de 36 ºC .Su metabolismo es
fermentativo , produciendo abundantes ácidos que descienden mucho el
pH lo que obliga mucho a utilizar medios de cultivo amortiguados para
evitar su muerte .El crecimiento en caldo es variable ,desde turbidez
homogénea a granular.(34,36,55)
Los estreptococos representan un amplio grupo de microorganismos:
algunos forman parte de la microbiota normal, sin que se haya mostrado
su patogenicidad; otros, por el contrario, se comportan como saprofititos,
comensales e incluso como patógenos, produciendo diversas infecciones
en el hombre y los animales. (4,24)
Desde el punto de vista estructural, y dependiendo de las especies
pueden distinguirse, además del núcleo, el citoplasma, la membrana
citoplasmática y la mureina, otros elementos de gran interés como son:
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Los ácidos teicoicos, que están relacionados a la mureina .Tienen un
carácter antígeno y a los segundos, ya sea de forma individual o
formando un entramado fibrilar asociándose a proteínas parietales
superficiales, intervienen en procesos de adhesión. Esta estructura fibrilar
se produce por interacciones iónicas entre los ácidos lipoteicoicos y las
moléculas proteicas. (27, 28, 34,36)
Los carbohidratos parietales están situados por fuera de la mureina.
También tienen carácter antígeno, e intervienen en proceso de adhesión,
agresión y coagregación bacteriana. (39, 54,55)
Las proteínas parietales están localizadas por fuera de la cubierta
anterior, aunque también pueden encontrarse intercaladas en las mismas
o en la mureina. Tiene diferentes funciones: poseen carácter antígeno y
también acción enzimática. (27, 28, 54,55)
La clasificación de los estreptococos se ha realizado basándose en
diversos criterios como lo que ha motivado que exista una importante
confusión en cuanto a su taxonomía y su nomenclatura. (24, 27, 28,39)
La clasificación para diferenciar este grupo heterogéneo no es única .Esto
depende de una combinación de características que incluyen los patrones
de hemólisis observados en las placas agar sangre, la composición
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antigénica, las características de las colonias, las reacciones bioquímicas.
(9, 10,15)
Las dos clasificaciones principales son: respecto a la hemólisis, que
pueden ser alfa hemolítico que producen en el medio del agar sangre una
pequeña zona de color verde y la beta hemólisis se caracteriza por formar
halos transparentes(23,24,27,28).
La diferenciación por antígeno de grupo fue descubierta por Lancefield
que logro identificar a los estreptococos en serogrupos por medio de
diferencia antigénicas en los hidratos de carbono de la pared celular .Los
estreptococos que carecen de un antígeno de grupo reconocible se
identifican por pruebas fisiológicas que incluyen reacciones de
fermentación, crecimiento (23,24,27,28,34,36)
Los estreptococos del grupo Viridans comprende un grupo heterogéneo
de especies que carecen de antígeno, toxinas y virulencia típica de los
anteriores grupos .Conservan las propiedades básicas de los
estreptococos .No poseen capsula y las colonias son pequeñas entre 0.5
a 1mm de diámetro, con alfa hemólisis si la presenta. (4, 10, 23, 27,
28,36)
Bajo la denominación de Viridans se agrupa un gran número de
estreptococos: Mutans, Oradis, Salivarius, Milleri. (24, 28, 39, 54,55)
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El grupo Mutans está constituido por las especies: S. mutans, S. rattus, S.
cricetus, S. sobrinus, S. ferus, S. downei y S. macacae.(24,39,54,55)
Dentro de este grupo, como ya sabemos, el de mayor importancia clínico
odontológica es el subgrupo mutans. (6, 33, 35, 39,46)
Los streptococcus mutans es una especie con polisacáridos antígenos
del grupo mutans c,e y f .Sus colonias en agar sangre son alfa y gama
hemolítico y excepcionalmente beta hemolíticos. Posee proteínas
parietales superficiales, que pueden liberarse al medio en el curso del
crecimiento bacteriano, y que se comportan como adhesinas y mediarán
la adhesión a la película adquirida en ausencia de glucanos en su
superficie y la congregación con otras bacterias, hechos que aumentarían
con saliva. (6, 15, 24, 28, 33, 39,46)
El hospedador principal es el hombre, en el cual genera procesos
caríogeno. Coloniza especialmente las superficies duras de la cavidad
oral (esmalte o cemento). Induce pues lesiones en superficies lisas, de
fosas y fisuras, como en zonas interproximales y en cemento reticular,
siendo más que posible su papel en la progresión del proceso. A nivel
extraoral S. mutans esta relacionado con endocarditis aguda y, más
raramente en otros procesos patológicos. (6, 24, 33, 39,46).
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Este microorganismo presenta un potencial de producción de caries
infinitamente superior a la de cualquier microorganismo acidogénico de la
placa. (6, 10, 24, 33,34)
Su papel preponderante en el proceso de la caries dental se debe a su
alto poder acidogénico y acidúrico. No se encuentran en la boca de
personas antes de la erupción de los dientes ni después de la extracción
completa. Colonizan preferentemente los dientes, siendo encontrados en
grandes proporciones en los surcos, fisuras, áreas de contacto y otras
zonas retentivas. (6, 10, 24, 27, 33, 34,46)
Los estreptococos del grupo mutans son los principales productores de
acido cuando el pH es taponado a nivel de la acidez necesaria para iniciar
la desmineralización del esmalte (pH critico 5.5) en el cual la bacteria
comienza a segregar los ácidos y toxinas que desmineralizan al diente.
Se verifico que en un pH de 5.0 esos estreptococos continúan,
convirtiendo la sacarosa en acido láctico, (6,10,23,24,27,28,34,35,36,39)
Para el tratamiento de las diferentes enfermedades microbiológicas
generalmente se utilizan antimicrobianos, que son sustancias químicas
producidas por microorganismos o sintetizados químicamente que a
bajas concentraciones son capaces de inhibir e incluso de destruir
microorganismos. (18, 27, 54,55)
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La actividad antimimicrobiana de estos medicamentos depende de su
mecanismo de acción; que pueden actuar inhibiendo la síntesis de
enzimas que interrumpen la pared celular bacteriana y con frecuencia la
lisis bacteriana esta incluyen a las penicilinas y las cefalosporinas o
actuando sobre la permeabilidad y llevando a la filtración de compuestos
intracelulares, como los antimicóticos, nistatina, vancomicina (58,59)
La Clorhexidina es ampliamente usada en odontología debido a su
efecto antibacteriano. Es una bisbiguanida cationica que posee actividad
antibacteriana, tiene un amplio espectro de actividad contra Gram +,
Gram -, levaduras.
La actividad antimicrobiana del gluconato de clorhexidina varía según su
concentración: en bajas concentraciones se comporta como
bacteriostatico mientras que en altas concentraciones es un bactericida
eficaz.
La Clorhexidina ha sido utilizada en muchas formas y sistemas de
liberación para el tratamiento de las denticiones infectadas `por bacterias
cariogenicas: enjuagues bucales, dentríficos, incorporados en hilos
dentales, aerosoles, goma de mascar y geles aplicados en cubetas
especialmente fabricada, son todos vehículos que han sido desarrollado
para liberar el agente antimicrobiano sobre los tejidos dentarios. Los
sistemas que han sido desarrollados últimamente, adhieren
temporalmente la clorhexidina al diente y mantienen una liberación de la
droga a niveles terapéuticos.
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De las plantas se obtienen compuestos que aventajan a los de origen
artificial debido a que poseen mayor agresidad, ya que la mayoría de los
fármacos de síntesis presentan efectos colaterales perjudiciales para la
salud. (37,36)
La medicina tradicional y natural conocida como alternativa, energética y
naturalista o complementaria, forma parte del acervo de la cultura
universal. (3, 8,11)
Las plantas dotadas de principios activos sirven para curar y aliviar males
de la humanidad. Las conocemos desde la antigüedad.; a pesar de ser
muy antigua y de trasmitirse de generación en generación en la
actualidad es objeto de numerosas investigaciones demostrándose
experimentalmente algunas acciones atribuidas a estas plantas. (1,11)
La etnofarmacología se encarga del estudio y de la investigación de la
acción terapéutica preventiva de las plantas, animales y otras sustancias
usadas en las medicinas indígenas del pasado es por esto que la
psicoterapia se abre paso de la medicina convencional. (1,41)
La fitoterapia es la rama de la denominada medicina alternativa o
complementaria. Estudia el empleo de los productos de origen vegetal
con finalidad terapéutica, ya sea para prevenir, atenuar o para curar
determinadas patologías en el ser humano. (1, 29, 37, 41, 47, 51,57)
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Entre las plantas reconocidas por sus comprobadas propiedades
medicinales se encuentra el Cymbopogon citratus. (17,53)
La hierba luisa (Cymbopogon citratus) es una especie tropical
perteneciente a la familia de las Gramineas, tiene alrededor de setenta
especies ninguna de ellas originaria del Perú. Es originaria de la región
suroriental de Asia y se encuentra ampliamente distribuida tanto en
América Central como en América del Sur .En nuestro país las principales
zonas de producción son Lima, Cajamarca y Ucayali. (3, 8, 14, 17, 26,30)
Es conocida en diferentes partes del mundo con diferentes nombres
vulgares como : caña santa ,cañita de limón ,hierba de la calentura ,
lemon grass ,limoncillo ,hierba de limón ,mantojo de limón ,malojillo
limonero , campin de cheiro , campin sir , campin limao en Brasil, paja de
la meca , junco oloroso ,citronen grass , pasto citron , te de limón
,zacate citrion , pero el nombre de hierba luisa es casi exclusivo del
Perú.(19,26,30,40,43,52)
La hierba luisa, dentro de la botánica sistemática, se encuentra clasificada
de la siguiente manera:
Reino : Cormobionta
División : Magnoliophyta
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Clase : Liliatae (Liliopsida)
Subclase : Commelinidae
Orden : Cyperales
Familia : Poaceae
Tribu : Andropogoneae Dumort
Genero : Cymbopogon
Especie : Citratus
El Cymbopogon citratus es una hierba perenne, robusta, tallos muy
ramificados de 1 a 2 m de alto con los nudos ceríferos. Hojas aromáticas,
amontonadas cerca de la base, lampiña, de 6 a 10 dm, sus ramas
alargadas y un tanto pendulazas; los racimos bifurcados, portando en la
bifurcación una espiguilla estaminada sin arista, la espiguilla sésil, del par
o los pares inferiores diferentes de las de arriba. Racimos de 1 a 1,5 cm
de largo, la espiguilla sésil línea lanceolada de 4 a 5 cm de largo
acuminada con el dorso cóncavo en la parte baja. No florece o lo hace
muy rara vez. (26, 30, 40,52)
En cuanto a su taxonomia Guenther (1950) apunta que al inicio había
mucha confusión respecto a la taxonomía de las plantas que producen los
aceites de lemon grass de las Indias Orientales y de las Indias
Occidentales. (17, 19,41)
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Stapf finalizó la larga controversia identificando a la planta productora del
aceite de las Indias Orientales como Cymbopogon flexuosus y a la que
produce el aceite de las Indias Occidentales como Cymbopogon citratus.
Las 2 plantas han sido denominadas varias veces como Andropogon
nardus var. flexuosus Hack o Andropogon flexuosus Nees y Andropogon
nardus var. ceriferus Hack o Andropogon citratus D.C. respectivamente.
Las correcciones de las clasificaciones de Stapf fueron confirmadas
experimentalmente por Jowitt y Pickles, citado por Guenther (1950),
quienes plantaron las 2 especies en Ceylan, extrajeron sus aceites
esenciales por destilación, encontrando que el aceite esencial derivado de
C. flexuosus Stapf era soluble en 2,2 volúmenes o más de alcohol al
70%, mientras que el aceite derivado de C. citratus Stapf no era
claramente soluble ni en 10 volúmenes de alcohol al 90 %. (26, 40, 49,50)
Pocas plantas de la familia poaceas presentan en sus hojas aceites
esenciales, las más importantes son precisamente las del género
Cymbopogon. (51,52)
Como toda planta ,la composición química es muy compleja y por el
momento la existencia de algunos componentes no tienen mucho valor
practico .Diversas investigaciones fotoquímicas realizadas tanto en las
hojas desecadas como en el aceite esencial han permitido identificar los
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siguientes compuestos: monoterpenos borneol ,canfeno, canfor ,car-3-
eno, cineal ,citral, citral a ,citral b ,citronelol ,acetato de citronelol
,fenchone , geranial ,geranio ,acetato de geraniol ,6-metil-hepta-5-en-2-2-
ona ,limoneno ,linaldol ,oxido de linaldol ,mentol ,a-pineno ,b-pineno
,terpineol terpinoleno triperpenos ,cymbopogenol ,cymbopogona
,cymbopogonol ,sesquiterpeno ,oxi-bisaboleno ,b-cardineno ,farnesol
,humuleno, alcanos-3-metil-hepta-2-ona, metil-heptenol ,heptenona
,hexacosan10-1 ,triacontan-1-1 ,b-sitosterol.(26,30,40,43,52)
El aceite esencial u óleo volátil es considerado como desecho del
metabolismo de la planta, ya que no se conoce el papel que desempeña
en esta. Son compuestos terpenicos, formados por sustancias orgánicas
volátiles y de consistencia oleosa. Forma parte del grupo de los
isoprenoides. (3, 13, 29,37)
Los llamados aceites esenciales son constituyentes odoríficos o esencias
de una planta, el término “aceite” probablemente se origina del hecho que
el aroma de una planta existe en las glándulas o entre las células en
forma líquida. (3, 13, 29,37)
Proceden de las flores, frutos, hojas, raíces, semillas y corteza de los
vegetales. Los aceites se forman en las partes verdes (con clorofila) del
vegetal y al crecer la planta son transportadas a otros tejidos, en concreto
a los brotes de flor. Se desconoce la función exacta de un aceite esencial
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de un vegetal, puede ser para atraer a los insectos, para la polimerización
o para repeler a los insectos nocivos o puede ser simplemente un
producto metabólico intermedio (3, 13, 29,42)
Los aceites esenciales son mezclas complejas de origen orgánico cuyos
constituyentes pertenecen, de manera casi exclusiva a dos grupos: el
grupo de los terpenoides y el grupo de los compuestos aromáticos
derivados del flenilpropano, mucho menos frecuente. Se encuentran en
mayor incidencia en las Lauráceas, Coníferas, Mirtáceas, Liliáceas,
Labeadas, Umbelíferas, Rutáceas y compuestas. Poseen propiedades
antisépticas por el coeficiente fenolito que contienen. Son productos
volátiles de naturaleza compleja, con aroma agradable en la mayoría de
ellas. (3, 13, 41, 42,47)
El aceite esencial de la hierba luisa se caracteriza por su fuerte olor a
limón es producto de un alto contenido de citral el cual es químicamente
conocido como 3,7 dimetil 2,6 octadienal. Encontraremos ademas otros
componentes como :el mirceno ,metil heptanona el limoneno ,el dipenteno
,linolol ,citronelal ,isocitral ,dacanol farnesol aldehido octolitico o caprilico,
aldehido manilico o pelargonico ,aldehido capricho, acido capricho y
acetato de geranilo en menores cantidades.(26,30,40,43,52)
Es importante su utilización ya sea para fines industriales como la
fabricación de desodorantes ,detergentes y otros productos domésticos
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que requieren una fragancia fresca además también se la utiliza como
saborizante ,en pequeñas cantidades debido a su fuerte olor a
limón.(3,37)
El aceite esencial presenta ,además propiedades medicinales
reconocidas .Tiene acción farmacológica sobre el sistema cardio-
circulatorio ,como antihipertensivo ,sobre el sistema digestivo ,como
antiespasmódico ,sobre el sistema respiratorio, como antiasmático ,sobre
la piel y mucosas ,como antibacteriano ( bacterias grampositivas como por
ejemplo Bacillus subtilis y Staphylococcus aureus ) y antimicótico. Se le
atribuyen otras propiedades medicinales, aun no probadas como la de
ser febrífugo, antitusivo, estomaquico, carminativo, diaforético y
expectorante .Estudios clínicos realizados para precisar las propiedades
terapéuticas de esta especie sugieren que el mirceno, uno de los
componentes del aceite esencial posiblemente sirva como analgésico
especifico para partes particulares del cuerpo .Su uso se realiza tanto oral
como tópicamente. (5, 12, 21, 26, 31, 38, 43,44)
Dentro de la composición del aceite esencial al que encontramos en
mayor porcentaje es al citral. (26, 30,40)
El citral se encuentra en la naturaleza de dos o probablemente cuatro
isomeros .Estos dos componentes conocidos como citral a (geranial) y
citral b (peral) son isomeros geométricos que difieren solamente en la
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posición relativa del doble enlace en el átomo de carbono terminal .En
una mezcla natural predomina ligeramente el isomero a. (26,31)
El citral es un aceite fluido ligero, débilmente coloreado de amarillo,
inactivo y de un olor a limones penetrantes. Su punto de ebullición es a
760mm de Hg. (26, 30, 40,44)
Es muy sensible a los ácidos y a los compuestos ácidos por ello puede
por ejemplo con muchos derivados formar compuestos cíclicos. (12,13)
La oxidación se produce a velocidad moderada en el aire, lo cual debe
tenerse en cuenta al almacenar el material .Desde el punto de vista
medicinal ,el citral tiene acción histaminica y es analgésico en
oftalmología.(10,26,40)
Para la obtención del aceite esencial es necesario realizar la destilación
por arrastre de vapor. La destilación se basa en la diferencia de los
puntos de ebullición mediante esta se obtiene el aceite esencial, siendo
este un compuesto volátil de bajo punto de ebullición. La destilación por
arrastre al vapor es una variación de la destilación simple, se hace pasar
una corriente de vapor a través de la mezcla de reacción y los
componentes que son solubles en vapor son separados (aceites). (7,9)
El aceite esencial actúa destruyendo la capa lipidica de la membrana de
la célula bacteriana.
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ANTECEDENTES
1. Alzadora y cols (2001) investigaron la actividad antimicrobiana de
cinco plantas Eucalyptus globulus, Cymbopogon citratus ,Tapetes
pusilla , Senecio tephrosioides y Lepechinia meyenii a las cuales se les
enfrentaron a Salmonella Typha ,S.enteritidis ,Vibrio cholerae
,Pseudomonas aeruginosa , Shigella flexneri Staphylococcus aureus y
Candida albicans.Se empleo discos de antibiótico como controles .Los
aceites esenciales mostraron efecto variado sobre Gram positivos y Gram
negativo. Siendo la hierba luisa que ejerció mayor efecto sobre las
bacterias evaluadas siendo sus halos de inhibición en un rango de 20 a
36 mm.
2. Bankole y cols (2004) mencionan que el aceite esencial del
Cymbopogon citratus fue enfrentado a cuatro bacterias: Aspergillus
flavus, A. Níger, A. tamarii and Penicillium citrinum .Se aplicaba
directamente a las bacterias en forma de aerosol por un periodo de
cuatro meses donde se observo una disminución de dichas bacterias en
especial el Penicillum citrinum.
3. Bocchi y cols (2006) Reportaron el efecto antiprotozoario del aceite
del Cymbopogon citratus frente a Crithidia deanes en diferentes
concentraciones; observándose a las 12 y 24 h. Se observo que a las
concentraciones de 841.7 ug/ml y a los 700 ug/ml hubo lisis celular.
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4. Guerra y cols (2004) Evaluaron la actividad antimicrobiana in Vitro del
aceite esencial del Cymbopogon citratus así como de una crema
elaborada a partir del mismo .Se emplearon ocho bacterias
Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Bacillus subtilis ,
Pseudomonas aeruginosa , Escherichia coli , Klebsiella pneumoniae
,Serratia sp. y Salmonella typhimurium y frente a cuatro hongos
dermatofiticos como Microsporum canis ,Trichophyton mentagrophytes
,Trichophyton rubrum y Epidermophyton floccosun y la Candida albicans.
Observándose que el aceite fue bactericida menos para el S. aureus para
el cual fue bacteriostático en cambio el grupo de los hongos mas sensible
fue Trichophyton y Epidermidis.
Concluyendo que la actividad antibacteriana desarrollada por el aceite
esencial del Cymbopogon citratus fue superior como antifungica que
como antibacteriana.
5. Hammer y cols (1999) realizaron un estudio sobre la actividad
antimicrobiana del aceite esencial de 52 plantas incluyendo el
Cymbopogon citratos frente a diez microorganismos como fueron el
Acinetobacter baumanii, Aeromonas sobria, Candida albicans,
Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella
pneumoniae,Pseudomonas aeruginosas,Salmonella typhimurium,Serratia
marcescens y Staphylococcus aureus en donde se encontró las
concentraciones mínimas inhibitoria para cada una de estas plantas
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frente a dichos microorganismos. Para el Cymbopogon citratus se
encontró que su CMI frente al Sthapylococcus aureus fue de 0.6%.
6. Hernandez y cols (2001) evaluaron la actividad antimicrobiana de
Ocimun basilicum , Ocimum tenuiflorum y Cymbopogon citratus en forma
de extracto fluido empleando el método de diluciones seriadas dobles en
medio liquido utilizando Staphylococcus aureus ,Staphylococcus
epidermidis ,Streptococcus faecalis ,Bacillus Subtilis ,Escherichia coli
,Klebsiella pneumoniae ,Serratia marcescens ,Enterobacter aerogenes
,Citrobacter freundii, Proteus vulgaris , Pseudomonas aeruginosa, Shigella
flexneri y la levadura de la Candida albicans.Se observo que todos los
aceites esenciales inhibieron a las bacterias gramnegativas.
El O.basilicum obtuvo un mayor poder antibacteriano contra las
gramnegativas asi como las grampositivas.
7. Hili y cols (1997) extrajeron de ciento cincuenta plantas el aceite
esencial que fueron afrontadas a tres bacterias Pseudomona aeruginosa
,Staphylococcus aureus ,Escherichia coli y frente a cuatro hongos
Candida albicans ,Torolupsis utilis ,Saccharomyces cerevisiae y
Schizosaccharomyces pombe. Luego de observar su actividad fueron
seleccionadas trece aceites esenciales (Cymbopogon citratus, calendula,
Cinnamon, etc) luego a estas se aplico a diferentes concentraciones de
50 ug ml a 500ug ml para conocer la concentración mínima inhibitoria en
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donde a 50 ug ml tuvo un efecto nulo pero a 500 ug ml tuvo un efecto
antibacteriano.
8. Koba. Y cols (2004) Investigaron el efecto antibacteriano del
Cymbopogon en los cuales emplearon tres diferentes tipos como es el
citrates, nardus y el schoenanthus fue un ensayo por cromatografía
gaseosa .Se evaluó su poder antibacteriano y antifungico frente a
microorganismos comunes en perros y gatos (Staphylococcus intermedius
,Pseudomonas aeruginosa ,Microsporum cannis , Candida albicans
,etc).Todas las bacterias fueron inhibidas a 500 ug ml en cambio los
hongos fueron inhibidos a mínimas concentraciones de 50 ug ml.
9. Madeiros y cols (2005) Estudiaron el efecto antibacteriano de
I.sidoides, C. citratus ,C.sonderianus ,C.argyrophylloides frente a S.
aureus ,P. aeruginosa , y E. coli en diferentes concentraciones de 10 ul ,y
20 ul. Observandose que el I. sidoide presenta un alto poder
antibacteriano seguido del C. citratus. El C. citratos tiene una CMI de 5%
para las dos primeras bacterias pero para la tercera de una 15%.
10. Santos y cols (2004) demostraron que la actividad antibacterial de
los aceites esenciales extraído del Ocimum gratissimum , Cymbopogon
citratus y Salvia Officinalis fueron confrontados frente a 100 muestras
de orina de pacientes con infecciones urinarias . Encontrando que Salvia
officinalis obtuvo mejores resultados al inhibir al 100% a la klebsiella
24
,96% escherichia coli.Se observo que el Cymbopogon citratus inhibió en
un 71% a la klebsiella y en un 86% a Escherichia coli demostrando así su
actividad antibacteriana.
11. Shima y cols (2005.)Se obtuvieron el extracto de 19 plantas en
concentraciones de 100mg /ml. Baccharis trimera, Cymbopogon citratus ,
Matricaria chamonilla ,Mikania glomerata , Ocimum gratissimum ,Pipper
regnelli , Prunas domestica entre otras representando efectos
significantes contra ambos parásitos
El extracto hidroalcoholico de C .citratus, M.chamonilla, P. regnelli, T.
parthenium y T. vulgare fueron los que demostraron mayor actividad
inhibiendo desde 90 a 100% a ambos parásitos.
12. Virna Schuck y cols (2001) comprobaron la actividad antibacteriana
con el óleo volátil, extracto acuoso y extracto hidroalcoholico del
Cymbopogon citratus , frente a Candida Albicans ,Staphylococcus aureus
y Escherichia coli y utilizando como patrón farmacológico a la nistatina y
al cloranfenicol. Los resultados obtenidos demostraron que el óleo volátil
presenta una mayor actividad frente a los microorganismos utilizados.
25
II.- HIPOTESIS
El Cymbopogon citratus contiene dentro de su composición
monoterpenos, uno de ellos es el citral que presenta propiedad
antibacteriana .Entonces es probable que el aceite esencial del
Cymbopogon Citratus tenga una actividad antibacteriana frente al
Streptococcus mutans.
26
III. Objetivo
III.a.- Objetivo General
• Evaluar la actividad antibacteriana del aceite esencial del
Cymbopogon Citratus frente al Streptococcus mutans
III.b.- Objetivos Específicos
1.- Hallar la Concentración Mínima Inhibitoria del aceite esencial
Cymbopogon citratus frente al Streptococcus mutans
2.- Determinar la actividad antibacteriana del aceite esencial del
Cymbopogon citratus a 80µL / mL frente al Streptococcus mutans a las
24 y 48 horas.
3.- Evaluar la actividad antibacteriana del aceite esencial del
Cymbopogon citratus al 160 µL / mL frente al Streptococcus mutans a
las 24 y 48 horas
27
IV. Materiales y Métodos
Tipo de estudio
Experimental
Prospectivo
Longitudinal
Comparativo
Universo
Muestras obtenidas de pacientes de la Clínica dental del adulto de la
U.N.F.V
Población
Cepas de la bacteria anaerobia facultativa Streptococcus mutans
Muestra
El tamaño de la muestra se determinó aplicando la fórmula estadística de
cálculo muestral para este tipo de estudio, en donde se obtuvo como
tamaño de muestra 7 repeticiones pero se realizaron 10 repeticiones de
los halos de inhibición de cada antibacteriano.
28
( ) ( )( )221
22βα
XX
DE2ZZn
−
+=
( ) ( )( )
26.60.238.210.75820.841.96n 2
22
=−
+=
n = 7 En donde: Zα : Coeficiente de confiabilidad (95% =1.96)
Z β : Potencia de la prueba (80%= 0.84)
DE: Mayor Desviación Estándar de los halos de inhibición en el estudio
piloto (Anexo 1)
X 1: Promedio del halo inhibitorio de donde se tuvo la mayor DE en el
estudio piloto.
X2: Promedio de la medida del halo inhibitorio al azar del estudio piloto.
29
VARIABLES DE ESTUDIO
VARIABLE INDEPENDIENTE
• Aceite esencial del Cymbopogon citratus .Los aceites esenciales
son definidos como productos del metabolismo de desecho de las
plantas.
VARIABLE DEPENDIENTE
• Actividad antibacteriana: Es la capacidad de ciertos
fármacos para destruir bacterias o al menos detener su crecimiento
y multiplicación.
OPERACIONALIZACION DE LAS VARIABLES
DIMENSIÓN
INDICADOR
ESCALA
VALOR
Actividad
antimicrobiana
Presencia o
ausencia de
colonias
Nominal
Si- No
Efectividad
antimicrobiana
Halo de
inhibición
Razón
1- N mm
30
RECURSOS MATERIALES:
a) Antibacterianos:
Aceite esencial Cymbopogon citratus
Control positivo (Clorhexidina 0,12%)
b) Cepa microbiológica: Streptococcus mutans
c) Medio de cultivo: (Anexo nº4)
Agar Mueller-Hinton de la marca MERCK (Infusión de carne 200,
hidrolizado de caseína 17,5; almidón 1,5; Agar-Agar 13,0) con sangre de
carnero desfibrinada al 8% que fue obtenida del Instituto Nacional de
Salud.
d) Equipos de laboratorio:
• Autoclave
• Incubadora
• Estufa
e) Material de laboratorio
• Placas de Petri de 15x100mm
• Pipetas.
• Micropipeta y puntas para micropipeta.
31
• Mechero Bunsen
• Probeta
• Tubos de ensayo
• Matraz
• Hisopos
• Regla milimetrada
• Sacabocados
• Lupa
• Gotero
• Diluyente
• Asas
RECURSOS HUMANOS
• Asesores
• Microbióloga
• Bachiller
PROCEDIMIENTO
A) Extracción del aceite esencial del Cymbopogon citratus
El aceite esencial del Cymbopogon citratus es procesado a partir de las
hojas, generalmente del tercio medio superior.(Anexo nº3)
32
La recolección de las hojas se realizó en Huanuco.
Una vez recolectado se procedió a realizar el método de arrastre con
vapor de agua el cual se realizo en la Facultad de Farmacia y bioquímica
de la UNMSM. Dicho procedimiento consistió en colocar las hojas cortadas
dentro de la maquina de decantación .Luego de un aproximado de 2 horas
la maquina extrae el aceite de las hojas combinadas con el de agua
que son recolectadas en una probeta graduada.
El contenido del probeta es colocada en una bureta para dejar reposar
por un tiempo de 5 minutos .En la cual se forman dos fases; una de agua
y otra de aceite. Se elimina el agua, el aceite esencial es colocado en un
frasco limpio, en donde se coloco sulfato de sodio para la deshidratación
ya que reacciona con los restos de molécula de agua que queda en el
aceite esencial.
B) Ensayo Microbiológico
Las cepas de Streptococcus mutans obtenidas de muestras clínicas de
pacientes que presentaron procesos cariosos.
C) Concentración Mínima Inhibitoria
Inicialmente se preparo el Agar Mueller –Hinton de la marca MERCK
pesaron 34g/ L del Agar el cual se diluyo en 500 ml de agua destilada se
llevo a ebullición hasta su disolución completa, luego se llevo a
esterilización se dejo enfriar hasta una temperatura de 45 a 50 ºC y
33
posteriormente se agrego la sangre de carnero desfibrinada, obtenida del
Instituto Nacional de Salud, a una concentración de 8%(Anexo 4).
El Agar Mueller-Hinton con sangre de carnero desfibrinada se le incorporo
el aceite esencial del Cymbopogon citratus en diferentes concentraciones (
2%, 1% , 0,8% ,0,4% y 0,2% ) distribuyendo antisépticamente en 5
placas de Petri con un espesor uniforme de 4mm.
Se preparo diez suspensiones bacteriana de Streptococcus mutans
aislados de muestras clínicas , con una turbidez 0,5 del Standard de Mac
Farland .En cada suspensión se introdujo una micropipeta del cual se
extrajo una pequeña cantidad y se colocaba dentro de cada placa ; la cual
se había confeccionado en ella una plantilla de ubicación para realizar las
inoculaciones en una distancia uniforme (Anexo nº6).
Luego fueron introducidas a una incubadora a 37 C en donde fueron
mantenidos por un tiempo de 24 horas.
D) Actividad Antibacteriana
Se preparo el Agar Mueller-Hinton con sangre de carnero desfibrinada
fue mezclada y distribuida asépticamente en 10 placas de Petri con un
espesor uniforme de 4mm.
Se preparo diez suspensiones bacterianas de Streptococcus mutans , con
una turbidez de 0,5 del Standard de Mac Farland. En cada suspensión se
introdujo un hisopo estéril y una vez embebido se procedió al sembrado
34
de una manera uniforme sobre la superficie del Agar Mueller-Hinton con
sangre en tres direcciones.
Posteriormente fueron realizadas 3 cavidad ( de 5mm de diámetro y
4mm de profundidad) en cada una de las placas petri mediante un
sacabocado estéril de 5mm de diámetro .Para hacer las perforaciones de
una distancia uniforme se confecciono una plantilla de ubicación .Cada una
de las cavidades hechas por el sacabocados fueron rellenadas con el
aceite esencial del Cymbopogon citratus y fueron rotuladas por números
como sigue (Anexo nº 5)
1.- Aceite Nº 1: aceite esencial del Cymbopogon citratus (4%)
2.- Aceite Nº2 : Aceite esencial del Cymbopogon citratus (8%)
3.- Control positivo: Clorhexidina 0,12%
Cada antibacteriano se coloco dentro de cada una de las cavidades
hechas en la palca de Petri hasta llenar completamente la cavidad .Luego
fueron llevadas a una incubadora a 37ºC en donde fueron mantenidas por
un tiempo de 24 y 48 horas .Para su validez estadística se necesitaba solo
7 placas pero se prefirió realizar diez placas para tener una mayor muestra
.Después de 24 horas se procedió a la lectura de los diámetros de los
halos de inhibición como también a las 48 horas.
Todos los datos obtenidos fueron registrados en la ficha de recolección de
datos previamente elaborada para ser sometidos a pruebas
estadísticas.(Anexo nº 1 y nº 2).
35
PROCESAMIENTO DE DATOS Y PRESENTACIÓN
DE RESULTADOS
Los datos fueron almacenados y procesados en una computadora
Pentium IV marca utilizando el programa EXCEL del sistema operativo
Windows XP. La actividad antibacteriana será evaluado mediante el
tamaño de los halos de inhibición que formen los medicamentos en
milímetros y los resultados son presentados en tablas y gráficos
estadísticos.
ANÁLISIS DE DATOS
Se realizó el análisis de las variables mediante el paquete estadístico
SPSS 12.0 del sistema operativo Microsoft Windows XP. Para hallar si
existían diferencias significativas entre los diferentes antibacterianos, se
realizó el análisis de varianza (ANOVA) y se utilizó la prueba de Tukey
para identificar que antibacteriano era la más efectivo con un nivel de
significancia del 5%. Posteriormente se utilizó la prueba de t de Student
para hallar la existencia de diferencias significativas en cuanto a la
variación del tiempo de cada uno de los medicamentos.
.
36
V. Resultados Los resultados de la tabla 1 muestran las medias de y desviación
estándar de los halos de inhibición de los antibacterianos a las 24 horas
en donde la Concentración 80µL / mL del Cymbopogon citratus mostró
una media y desviación estándar de 21.85 mm ± 0.58 mm, los halos de
inhibición de la concentración de 160µL / mL del Cymbopogon citratus
tienen una media y desviación estándar de 22.85 mm ± 0.78 mm y los
halos de inhibición de la Clorhexidina tienen una media y desviación
estándar de 15.55mm ± 2.03 mm. (Tabla 1, Figura 1).Al realizar el análisis
de varianza (ANOVA) para las 24 horas se encontró diferencias
significativas (p<0.05) entre los tres antibacterianos (Tabla 2).
Al realizar las comparaciones pareadas según la prueba de Tukey se
encontró que para la concentración de 160µL / mL del Cymbopogon
citratus presentó mayor actividad antibacteriana que para la concentración
80µL / mL del Cymbopogon citratus y este a su vez presentó mayor
actividad que la clorhexidina 0,12%(P<0.05).
La media y desviación estándar de los halos de inhibición de los
antibacterianos a las 48 horas, mostró para la concentración de
160µL / mL del Cymbopogon citratus una media de 22.95 mm ± 0.72 mm,
los halos de inhibición de la concentración de 80µL / mL del Cymbopogon
37
citratus tienen una media y desviación estándar de 21.90 mm ± 0.61mm y
los halos de inhibición de la Clorhexidina tiene una media y desviación
estándar de 15,5mm ± 2,03 mm. (Tabla 4 y figura 2). El análisis de
varianza (ANOVA) para las 48 horas también mostró diferencias
significativas en la efecto antibacteriano entre los tres antibacterianos
(p < 0.05). (Tabla 5).
Al realizar la prueba de Tukey para las 48 horas se encontró al igual que
a las 24 horas, que la concentración de 160µL / mL del Cymbopogon
citratus tuvo mayor actividad antibacteriana que la concentración de
80µL / mL del Cymbopogon citratus y la Clorhexidina 0,12%(P<0.05).
(Tabla 6).
La media de cada uno de los antibacterianos en cuanto al tiempo 24 y 48
horas fueron sometidos a la prueba de t de Student y se observó que
para la concentración de 80µL / mL del Cymbopogon citratus las medias
de los halos de inhibición a las 48 horas aumentan ligeramente en
comparación a la media de los halos para las 24 horas, no presentando
significancia estadística (P>0.05) (Tabla 7, Figura 3).
Para la concentración de 160µL / mL del Cympogon citratus la media de
los halos de inhibición a las 48 horas presentó leve aumento sin embargo
no presentó significancia estadística (P>0.05) (Tabla 8, Figura 4)
38
Tabla 1.- Media y Desviación Estándar de los halos de inhibicion según antibacterianos a las 24 horas frente al Streptococcus mutans
Figura 1 .-Media y Desviación Estándar de los halos de inhibición según antibacterianos a las 24 horas frente al Streptococcus mutans
Antibacteriano n Media Desviación estándar
80µL / mL del Cimbopogon citratus
10
21,85 0,58
160µL / mL del Cimpogon citratus
10
22,85 0,78
Clorhexidina 0.12%
10
15,55 2,03
21,85 22,85
15,55
0
5
10
15
20
25
Med
ia d
e lo
s ha
los
de in
hibi
ción
CMI 2 CMI Clorhexidina0,12%
39
Tabla 2.- ANOVA de los de los halos de inhibición según antibacterianos a las 24 horas frente al Streptococcus mutans
Suma de cuadrados
Grados de libertad
Cuadrado medio F P
Entre grupos 313,41 2 156,70
94.48
0,00 *
Dentro grupos 45,75 27 1,69
Total 359,16 29 P=0.00<0.05 existe diferencias significativas Tabla 3.- Comparaciones pareadas según la prueba de Tukey de los halos de inhibicion por antibacterianos a las 24 horas frente al streptococcus mutans
(I) Antibacteriano (J) Antibacteriano Diferencia de medias
Error Standard P
80 µL / mL del cymbopogon
citratus
160 µL / mLdel cymbopogon citratus - 1,00 0,58 0,22
Clorhexidina 0.12% 6,30 0,58 0,00*
160 µL / mLdel cymbopogon
citratus
80 µL / mL del Cymbopogon citratus 1,00 0,58 0,22
Clorhexidina 0.12% 7,30 0,58 0,00*
Clorhexidina 0.12%
80 µL / mLdel cymbopogon citratus - 6,30 0,58 0,00*
160 µL / mLdel cymbopogon citratus - 7,30 0,58 0,00*
P<0.05 existen diferencias significativas.
40
Tabla .-4 Media y Desviación Estándar de los halos de inhibición según antibacterianos a las 48 horas frente al Streptococcus mutans
Antibacterianos N Media Desviación estándar
80 µL / mL del Cimbopogon citratus 10 21,90 0,61
160 µL / mL del Cimpogon citratus
10
22,95 0,72
Clorhexidina 0.12%
10
15,55 2,03 Figura 2 .-Media de los halos de inhibición según antibacterianos a las 48 horas frente al Streptococcus mutans
21,90 22,95
15,55
0
5
10
15
20
25
Med
ia d
e lo
s ha
los
de in
hibi
ción
CMI 2 CMI Clorhexidina0,12%
41
Tabla 5.-ANOVA de los de los halos de inhibición según antibacterianos a las 48 horas frente al Streptococcus mutans
Suma de cuadrados
Grados de libertad
Cuadrado medio F P
Entre grupos 320,62 2 160,31
95.44
0,00 *
Dentro grupos 45,35 27 1,68
Total 365,97 29 P=0.00<0.05 existe diferencias significativas
Tabla .-6 Comparaciones pareadas según la prueba de Tukey de los halos de inhibicion por antibacterianos a las 48 horas frente al streptococcus mutans
(I) Antibacterianos (J) Antibacterianos
Diferencia de medias
Error Standard P
80 µL / mL del Cimpogon citratus
160 µL / mL del Cimpogon citratus - 1,05 0,58 0,18
Clorhexidina 0.12% 6,35 0,58 0,00*
160 µL / mL del Cimpogon citratus
80 µL / mL del Cimpogon citratus 1,05 0,58 0,18
Clorhexidina 0.12% 7,40 0,58 0,00*
Clorhexidina 0.12%
80 µL / mL del Cimpogon citratus - 6,35 0,58 0,00*
160 µL / mL del Cimpogon citratus - 7,40 0,58 0,00*
42
Tabla 7.- Comparación de medias de los halos de inhibición del aceite esencial del Cymbopogon citratus a 80 ul/mL a las 24 y 48 horas según la prueba t de student.
Tiempo N MediaDesviación estándar T P
24 horas 10 21,85 0,58
0.17
0.86* 48 horas 10 21,90 0,61
*P=0.86>0.05 no existe diferencias significativas Figura 3.- Comparación de medias de los halos de inhibición del aceite esencial del Cymbopogon citratos a 80 ul/mL del Cymbopogon citratus a las 24 y 48 horas según la prueba t de student.
21,90 21,85
0
5
10
15
20
25
24 horas 48 horasMed
ia d
e lo
s ha
los
de in
hibi
ción
43
Tabla 8.- Comparación de medias de los halos de inhibición del aceite esencial del Cymbopogon citratus a 160 ul/mL a las 24 y 48 horas según la prueba de t student.
Tiempo N Media Desviación
estándar T P
24 horas 10 22,85 0,78
0.29
0.77* 48 horas 10 22,95 0,72
*P=0.77>0.05 no existe diferencias significativas Figura 4.- Comparación de medias de los halos de inhibición del aceite esencial del Cymbopogon citratus a 160 ul/mL a las 24 y 48 horas según la prueba de t de student.
22,9522,85
0
5
10
15
20
25
24 horas 48 horasMed
ia d
e lo
s ha
los
de in
hibi
ción
44
VI.- DISCUSION
En el presente trabajo de investigación se demuestra la actividad
antibacteriana del aceite esencial del Cymbopogon citratus frente al
Streptococcus mutans, para esto utilizamos el método de difusión en agar
introducido por Kirby y Bauer en 1966.
En el presente estudio se utilizo una suspensión bacteriana de Streptococcus
mutans en una concentración que se ajusto de acuerdo con el Standard de
McFarland 0,5 y esto garantizo que la cantidad de bacterias inoculadas en cada
placa sea la misma
Se hallo una CMI (Concentración Mínima Inhibitoria ) del aceite esencial del
Cymbopogon citratus frente a la bacteria Streptococcus mutans siendo de
0,4 % (4µL / mL) lo cual difiere de un estudio realizado por Medeiros y cols
donde obtuvieron aceite esencial de 6 plantas dentro de ellas estaba el
Cymbopogon citratus las cuales se enfrentaron con 3 bacterias anaerobias
facultativas donde concluyen que el CMI del aceite esencial del Cymbopogon
citratus frente a bacterias anaerobias facultativas fue de 5 % .En cambio Koba
y cols que trabajaron aceites esenciales de tres clases diferentes del
Cymbopogon (una de las cuales fue la especies citratus ) ,se las afronto
a 10 bacterias anaerobias facultativas y a 3 hongos en donde encontraron
que para cepas anaerobias facultativas su CMI es mayor de 500µL / mL
difiriendo ampliamente del presente estudio.
45
En el estudio realizado por Guerra y col (2004) se encontró que la concentración
mínima inhibitoria fue de 0.3% frente a bacterias anaerobias lo cual es un valor
cercano al valor encontrado en este estudio. En cambio Hammer y cols (1999)
encontraron para el Cymbopogon citratus una CMI frente al Staphylococcus
aureus fue de 0.06% esto es un valor relativamente cercano al presente trabajo
ya que se utilizo una bacteria anaerobia facultativa (streptococcus mutans).
Hili y cols trabajaron con 51 plantas incluyendo Cymbopogon citratus
obteniendo su aceite esencial de cada una de ellas; estos aceites se
enfrentaron a 3 bacterias anaerobias facultativas y a 5 hongos lo cual demostró
que solo 13 aceites mostraban efectos antimicrobianos siendo su CMI en un
rango de 150µL / mL lo cual difiere ampliamente del presente trabajo de
investigación ya que se encontró que la CMI fue de 4µL / mL frente a una
bacteria anaerobia facultativa (Streptococcus mutans).
En el trabajo presentado por Alzamora y cols (2001) quienes determinaron la
actividad antimicrobiana de los aceites esenciales de cinco plantas entre ellas
Cymbopogon citratus frente a bacterias aerobias y anaerobias facultativas
donde los halos de inhibición fueron entre 20 a 36mm.En cambio en nuestro
trabajo de investigación el promedios es de 23mm frente a una bacteria
anaerobia facultativa (Streptococcus mutans).
Medeiros y cols (2005) obtuvieron un promedio de halo de inhibición para el
Cymbopogon citratus desde 12 – 33 mm .Los resultados obtenidos de nuestra
investigación estarían dentro de este rango ya que es de 23 mm .
46
Para Hernandez y cols que trabajaron con tres plantas diferentes frente
a 4 bacterias Gram +, 8 Gram – y 1 levadura obteniendo halos de inhibición para
los Gram + de 15mm y para los Gram – de 15,23mm .Estos resultados no
concuerdan con los de este trabajo que fue de 23 mm.
También se evaluó al aceite esencial en diferentes concentraciones a 80µL / mL
y a 60µL / mL frente al Streptococcus mutans ( anaerobia facultativa)
encontrándose mayor efectividad a a 160µL/ mL coincidiendo con el trabajo
realizado por Virna y cols (2001) en donde trabajaron a dos concentraciones
diferentes de 20 y 5 µL siendo mas efectivo a los 20 µL .Hili y cols (1997)
trabajaron con dos cantidades diferentes de 50 y 500 µg/mL siendo mas
efectivo a 500 µg/mL y a 50 µg/mL su efecto antibacteriano frente a bacterias
anaerobias facultativas fue casi nulo .Esto demuestra que a mayor cantidad de
aceite mayor efecto antibacteriano concordando con nuestro trabajo de
investigación.
De acuerdo a los tiempos evaluados se observo para el aceite esencial del
Cymbopogon citratus que sus medias de los halos de inhibición de las 48 horas
aumenta ligeramente de las medias de los halos de las medias de los halos de
inhibición de las 24 horas en las dos concentraciones pero lo cual no presenta
significancia estadística.
Se encontró en esta investigación que el aceite esencial del Cymbopogon
citratus a 80µL / mL y 160µL / mL presento una mayor actividad
antibacteriana estadísticamente comparada con el patrón positivo
(clorhexidina 0,12%) frente al Streptococcus mutans a las 24 y 48 horas .Esto
nos indica que el aceite esencial podría ser una nueva alternativa de solución en
47
enfermedades en donde el Streptococcus mutans lo origina o simplemente
esta presente.
48
VII.- CONCLUSIONES
1.- El aceite esencial del Cymbopogon citratus presenta una notable efectividad
antibacteriana frente al Streptococcus mutans
2.- Mediante diluciones seriadas de 2%,1%, 0.8%, 0.4 % ,0.2 % se encontró la
CMI del aceite esencial del Cymbopogon citratus que fue de 0.4% frente al
Streptococcus mutans.
3.- A una concentración de 160 µL / mL del aceite esencial del Cymbopogon
citratus tiene mayor efectividad antibacteriana que la de 80µL / mL del aceite
esencial del Cymbopogon citratus a su vez que al patrón positivo
(clorhexidina 0,12%)
4.- A la concentración de 80µL / mL del aceite esencial del Cymbopogon citratus
tiene menor efectividad antibacteriana que 160µL / mL aceite esencial del
Cymbopogon citratus pero tiene mayor actividad antibacteriana que el patrón
positivo. (clorhexidina 0,12%)
5.- A las diferentes concentraciones del aceite esencial del Cymbopogon
citratos presentaron un mínimo aumento de los halos de inhibición a
las 48 horas que a las 24 horas de su inoculación frente al Streptococcus
mutans
49
VIII.-RECOMENDACIONES
1.- Realizar estudios de la actividad antibacteriana del aceite esencial del
Cymbopogon citratus frente a otras bacterias de interés odontológico.
2.-Se sugiere realizar los respectivos bioensayos en animales para determinar
si dicha CMI es citotóxica y a su vez hallar una concentración mínima inhibitoria
ideal para su aplicación clínica.
3.- Realizar estudios sobre la actividad antibacteriana del aceite esencial del
Cymbopogon citratus en diferentes concentraciones realizadas por este
estudio.
4.- Comparar la actividad antibacteriana del aceite esencial del Cymbopogon
citratus frente a diferentes fármacos utilizados en odontología.
5.- Investigar sobre estudios de la actividad antibacteriana del aceite esencial
del Cymbopogon citratus en diferentes tiempos de ensayo.
50
IX.-REFERENCIA BIBLIOGRAFIA
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