theoretical study of formate, tartrate, intermediate in ...pubs.ccmsi.us/pubs/jmm19-25-347.pdf ·...
TRANSCRIPT
Journal of Molecular Modeling (20 19) 25 :347
https:lldoi.org/ l0.l007/s00894-019-4240-z
ORIGINAL PAPER
Theoretical study of formate, tartrate, tartronate, and glycolate production from 6-carbon trioxylate intermediate in the citric acid cycle
Check for updates
Mehedi Khan 1 • Supratik Kar 1 • Jing Wang 1 • Jerzy Leszczynski 1 e
Received: 1 August 20191 Accepted: 20 October 2019 © Springer-Verlag GmbH Germany, part of Springer Nature 2019
Abstract Reaction pathways of side products (formate, glycolate, and tartronate) from dihydroxyfumarate (DHF) were theoretically investigated as DHF is an intermediate in the process of producing tartrates and oxalate from glyoxylate of the citric acid cycle. The proposed pathways for each reaction were mapped by density functional theory (DFT) calculations. The transitions states
were confirmed by analyzing the vibrational frequency and the intrinsic reaction coordinate (IRC) theory. The corresponding reaction activation energy, enthalpy change, Gibb's free energy change, and rate of reactions were calculated to get a clear picture
of the whole reaction pathway. In the whole process, the decarboxylation reaction showed the highest energy barrier of 20-23 kcal!mol. Proton transfer and hydroxylation reactions were almost barrierless. As most ofthese reactions have very low energy
barrier, our fmdings elucidate the high probability of those reactions under experimental conditions.
Keywords Citric acid cycle· DFT . Formate· Glycolate· Tartrate· Tartronate
Introduction
Man has long been trying to unravel the mystery of how the first life was originated on this planet from non-animated simple carbon, hydrogen, and oxygen. A series of studies have
been already performed to reveal the truth, but much more
effort is required to fully understand the queries like how and what happened. The early earth condition was extreme and harsh. There is almost no geological data from before 3.8 billion years ago. The atmosphere was oxygen-free, mostly
filled with H2, CO2, H2, and CH4 [1]. Neither the chemical
This paper belongs to the Topical Collection Zdzislaw Latajka 70th Birthday F estschri ft.
This paper is dedicated to Professor Zdzislaw Latajka, on occasion of his 70th Birthday in recognition of his numerous vital research contributions.
Electronic supplementary material The online version of this article (https://doi.org/10.1007/s00894-01 9-4240-z) contains supplementary material, which is available to authorized users.
c>=<J Jerzy Leszczynski [email protected]
Interdisciplinary Center for Nanotoxicity, Department of Chemistry, Physics and Atmospheric Sciences, Jackson State University, Jackson, MS 39217, USA
Published online: 15 November 2019
condition nor the place where the first cell was formed is known to scientists [2]. The reason is simple as still, we do
not have a clear idea about the biochemical pathways for the whole process. Multiple theories [3- 8] have been proposed so far and among them, heterotrophic and autotrophic theories
are the prominent one. Russian biochemist Oparin [3, 4] and British biologist Haldane [9] gave the most influencing prebi
otic soup theory in the 1 920s. Oparin suggested that molecules aggregated in an aqueous environment followed by it
absorbed organic compounds which had undergone a series of reactions leading to more and more complex organic molecules. Haldane had pretty much same idea about the evolu
tion where he proposed that primordial sea served as a huge chemical laboratory which was powered by solar energy. In
the oxygen-free atmosphere, CO2 and NH3 under the ultraviolet (UV) radiation brought about organic monomer which in
turn led to the creation of the first living cell in that hot dilute prebiotic soup. Their theory was strengthened by Miller and Urey [5, 6, 10] experiments where they mimic the atmospheric
condition using NH3 and CH4 along with water to create the environment in the lab like early cell forming time and passed
continuous electric sparks through the reaction mixture. Most of the ammonia and methane was consumed, and a large number of organic materials was produced at the process but was not identified at that time. After 53 years, Parker [11 ] analyzed
~ Springer
������������������� ���� ������ ��� ������������� ��� ��������� ��� ���� ������ ������������� ���� ����������� ��������������������������������������������������������� ������������������������������� � ������!��� �������"������� �������������#������������������������� ������������ �������������������� $���%�������&��'�(������� ������������� � �������������������� ������ ��������)���� ��������� ��������*+���������������������������,���� -��������*����.�����-��� ���� ��������������.������ �������������.���������%/0('�������� ��������� �����������������������������!��������������!���������������������������������������� �����!���������������%������1��� ������������������ � ���������������������'�0�������������/0(� ������������� ������.������ ��������������������� �!��������������� �1�#��������������������������0�����������!��� ������!�2���������3������������/0(����� �������.���������������������� �������������������������������������� ��� ���������������������1�#������ ����������� ������#�/0(�������������.��������0��"���� �������.������ �� ��� ������ ������4� �����!� �����!�.����� ������������5�����6�����������7���� ������ ������������ ����������#!����������.�����������������!� ������� �!���� ��� �� �������� ��.������� ������������� ��� ��������.������������ �����������"�������8���� ����� ��������������������9������� ���������������������������0���� �� �� ��������� ��/0(������.������ ������������������+������������������0"��������.������ �/0(�������������.������ �� ��� ������ ����������������������.��������0:���2�������/0(� ���������������������0����������������.������ �� ������������������������������ ��.������������������������0�;������������#������������������������������)���� �����,��������*������������.�������� ���-����������������.���������� ����������%��!���� ���� �� �'�����������������1�#�������� ���������/0( ����������0����������� �������!�6�����������7������������������� �/5����������%���������������� ���������/0('����������� ����������� ����.����������������� �+����� ����������������� ����������������������� ���������.����� ���������������������� �� �������������������������� ������������������������������������������� ������� �������4���!� �����!�.����� ����������� ������ � ���������������6����������.����� ���7��+���������������� � ���������������.������!������� ���� �������� � ���� ��� ������%+2'������� �� �������� ����� ����% <&'�������=����������������������.������ ������������������� ���������6�����������7����� ������������!���>?@ABCDCE?FDG@HCI?JK �������� �������; ������� ����� ��� ����;74��L�������������� �!������4����MN%���'�������������������������� �����O��+�������$�!���� � ��������%P&;'��4��������������������������� � ��������� ��Q�������������� ������ � � ������������ �����������R�M���� ������������������������������������$��� ���.����� �������������� ������� ������������ ���!���������!���+���� ��������������� � � �������������������������������$���������� ������������ ����� S����+������� ��!����� �����S�� ���������� ��� ������������������������ ����������� ��� �����������������.���Q���+2������ ����������������� ��� ���� ������S�� ������#� ���� ������� �(�������� �������������� ������������!���� �� ��������������������� ��� ���������!����������!� �!���# �� �������� �Q����������������� �� �������� ����� ���% <&'�����"����������� ����������� ����� ������� ��������� ���+2�� ��������� �������0���� �+���������������������� � ����� ���� ��������%;)P'������ ���������� ��+2�� ���������������� ������������������$����� ������������ �������� �������������������N����� ���������3������������������� ��;��� 9���7����������������� ����� ����������� ���� ��O������%���������������������������'����� �������+�������� ���������������#� �� ������������������������� ��;�T������S���� �4����!�� ���������������� ������� ����U%V'�����������!������� �������� ������������� �UVWXY#6��Z�[\]NZVY�_�"7744� �7[��ab[��3"_�Ob4_4�4��4 �7[��ac d ef]gZhijklj[�`�777�_3"�hijklj[�b[��3"_�Obm nW�XQ�����U%V'������� �����������������+%�3"��Oo�������� ���������� '�.������� �[�� ��Up�6���$�� �� ���� �%���"744�q�7[��rso'�t�P�� #u��� ��� �%4�4�4��4q�7[��r�'��v��� �� ����� %�� ������������� ����������� '�\]Nv�N!!������ ������������� �#���s����� �<������ ��� �%��3"����s���'wwxyzw{|}~����� �������~�wwwwwwwww������w���xyzw
������������������ �������������������������������� �!�����"#$�����%�������#��&�����'���$�!�&!�������#$ "���������#�"������ �!������� #�'�����'�����"�#�'�"������ ����( ����)"� ��� �!�&�������������������"�#�����#"����'��������"�#�'$�!�&!�����#��"�!���&!' ������������������"$�%!"������������ ����'��������� #����"''���#��*��%� �"�#� "���� �#��$!+���"���,�����!�� �����#-./���0���1��-��2�������#�������"��#�&��#����������"����� �!������� ������������ �!��'����"������ ���,'��%����3������#���3�#�$�!������1�#��� ����"����' ��3���%�����#�")����� �!�������'$�!�&!�����#��"�!���&!' �����������"�#�2�������"�#���� �!�"#��������#��� �!��)�+��#"�� �������"#4"$�-����"#�� ���5���"���'�����"�#��6#���'"������"���'�����"�#3���7%���+�#��"�&!����,-1���� ���'������,81�#���������,.1���� $����'�����"�#�'� �"#������"�������� #��,�1�#�,51�6#�������#����"���'�����"�#3���7%���+�#��"�&!����,-1���� ���������#���,913'������,813�#�$�!������,-�1)"�5"#������"%����,713,:13�#�,;1�2��"#������"���,:1"�������� ���'"#������<=$�!�&!����>< �"��"���������"#$�����"���'��� ���������"�#�������������/����"�$�!�&!�������#��"�)"�+��'����������� �������"������!�2���������� +���/�� #�'��������"�#������������#���"#4"$�-������)"���"#? �����"#$"#'�����"�#�6#��"������!3��������"#$�����"��"����� ����$�"#"#����"�����'�����"�#��%@ �#���3�#�����������"�#��� �!���#�"# ��6#����������"���'�����"�#�3�#�@ ����� #��'��������,.1�#�������#���,91������� ���'���,-1���� $��# �+���'"#%������"����,--3-�3-53�#�-81�A��#���#���3����������%�"�#��������'��������������� #�,-13�."��������� �%� ��� ���"��#�"'"��"#� ����� ���"�#�3�#������ ����#��$!"������'-B�?%�5 ��������������"#"�"��������#��,2����������#�"#$��� �� ����#��#��$"���'������"����������"����"#2�+��?-"#���? �����"#$"#'�����"�#1�CDEFGFHEDHFEHIJGDKLFM�����������)���������'�������'��������"�#� #����"$��*��#�"�"�#���&���"��#��� $$����������2����/��"��#�"%�"�#���)"����!���&!��#"�#� �"����!�����!N��������%�"�#��2��'"��������"�#,'���������#�-��"#������"����34"$��1"�������+�&!���"�#�����"�# �"��"#)��)������������O�����+�&!���"�#3�����#���#�'��3�#������#��"�#�4"���3���7%���+�#��"�&!����,������#�-1 �������+�&!�������'���"#���%���"���-�#�P(� �"������#���")��"�#�#��$!�'���;/���0���3�#�����������#"��#��$!���#$�'����"�����"�QRSTUB����"�#�����������"#$������!#����"��''������3��������3������#���3�#�$�!������'���7%���+�#��"�&!����VWXYWXZ[Y\\\\\\\\\]_ab\cdefg\ hij[kXlmn\\efg\
������������ ���� ����� ������������������������������������� ������������������������������� ��������������� � !�"#$�#�% �� ��������%�&��� � �� ��������������� ����%������%�����������������%����%'������ �������������������������������������������������������(������������������������������������������'� ������������ ��������)����#������������ ����� �����*�� �������� �� ����������������������#$������� �� �����������������#����������+������������������������&������� ��� ������������&��������%�� ��������������� !�"���#��� ���������������� ���������������������% �� %�������������������&����� ����������'� ������,���� �����#������������ ����� ����������������,��&�����������&���# ����������������������� � ����%�� �����������������!�" �#��� ����������������� �������������������� ��������������������� ������#����������� �������������-�����&�������&��$�*���$.�������������'���������������������������'���������������� �������'���������������������� ������������������������$�����&���� ����� ����,����)�����/�$��������� ����� ������ ��������������������&���������"���������� ����� �����,����������������� ���������%�� � ����������������!�"#$�#��� ���'��������������������� ��������������������% �� ���%��������������- ��������.��������� ��,���������-�������������� ����� ����.������������,��������� �������� �������� ��������������������������� !�"��#��� ����������������'�������������012345��������������6���&������������������&������������� ���������� ���*����012375��������������6���&��������&�������&��$���������� ���������� ���*����889:;8<=>?@ABCD EFAGFAH?G888888888IJKLMN8JOP9:;8
������������������� ����������������������� ���� ������������ ��������� ���� ��������������������� ������ ������ ������ ���� ����� !�"#����$�� �������������������%���� ������ �������� ����������������������� ������$�� ���� ������������������������ ������� ����������������� ��&�������'( ��� ��� ��&��������()�������� ���� ���� ����� ����������������&*���'(�*����� ����������� ���� ����������� �� �� �������� �)����������������� �������������) ������������� ������*���������� ���������%�� ������ ������ �����������������&�'�+�� �����(�$�� ������ ���������#!�"+����$����������������� ����� ��������������� ����������������'���������� �� �� ��������������� ����� ����� ����������������$���������������� �������������������� �������) ��������+�� ������, �������� ���������"���� ����������� �����-�)).�������������� ���� ������$��� ������ ��������������)���#!�""������������� �� �� ������ �����������������&� ��� ��(�$���������� �����) ���������&"��'�� �����(�, ���������������� �������"�'�� ������ ������ �����������������&��+�� �����(�$��� ������ ����/ �+!�"������$������������� ���������� � � ����������� ������$������ )��������������� ��������������� ��&�������'( ��� ��� ��&��������( �������������� � �)��������� ��&�(�$�� �������������������) ������ �� ��������� �����&������� �������������( ������������ ���� ���������������������������� �����&*����(� 0123456178163971:2;8346$�������������� ������������� ���������� ��&'( �������� ��&�"(���� <� �)��������� ��&�(������������������ ������������� ������ �)���� �������� �)���� ����� ���� ����� �����$�������� ������ ��&*��� (��������'<� �)�������� ��& ( ��������� ��&+(������ �� ��&�(�=� �� ��� ��������� ������������������ ��+ ����������� ���� ���������������$���� ) �����������������&����"�'%�� ������� ���� ����������( ������ ������ ���� �� �� � �+!�"��������������� ��+�������� �� ����� �������������������������� ��% ���������+�$�������) �������� ���� �����)��"���� ������$���� ������ ���� )����!�"�������� �)��������� ��������&+(��������� ��������� ������������ �������� �������$������� ��� ���� ������������������������� ���� ���������������� ��% ������� ���������������� )� ��������$>���$������ � �������) ��������+���� ��������� ������ ���������?����� �������@�������� ��������� �������������%����������� �� �� �� ��������� ������&*���+(�$������������ ��� ��)���� ������ ������������������� ��# �� ,A������������ &���� �����) ����������� �����(����� ������������� �����&� �������� ��������%�� �����(� ������������������� ������ �������!�"�'����$������� ������������������������ �������@������B�������� �)���� ����� ����� �������� �����)�������� �)�������������� ��#�� ���������� ��������������� ���"&�� �������) ���������� �����(����� ������������ �������� ���� ������ �������� ��� ��� ���� ������ ����������������$��� ������ �������!�"�"���CDEFG��������� �� ��$>������������������������������'&���� ��( ���&� ��� ��( �������������� ������������*����HIJKIJLMKNNNNNNNNNOPQRSTNPUVWXYN Z[\M]J_NNWXYN
���������������� ����������������� ������������������� �� �������� ����������������������� ������ ����������!���������"����������#�#���� ����� ��"���$���%���������"����#���� ����������������������������������&'���(�������������)�������� ����������� ����������������������*'+����������*,+����� ��������*�+!�� �����-�����������"������������������������*.�"��+�/ ����������������� �������������������������������0 �������������"����"������������������������ ����0 ���������������������,��&'������������������� �� �����"�����������������������������������,*���-����+�0 �����"������������!���1���� �������� �����-����������,�#&�%'���� ����2���!������ � ����������������� �� ������������� �����"�������������"��������������������'���� �������� ���������������������������#�,&,���0 ����������������������� � ���������-��"��������������������������'*����������+��� ������������ ������������)�������� ����������!���������"�����,���� ������ �����������������#&����0 �������������������� ��������������������� ������������"��������*+��������������*'+*.�"�'�+�34567���������������08������������������������������9���1��������"��� ����������� �����.�"�3456:�!�����������������"��� ������� ��������������� ����������*� ����������������� �����"������������� �������������"�����+;;<=>;?@ABCDEFG HIDJIDKBJ;;;;;;;;;LMNOPQ;MRS<=>;
����������������������� ��� ���� ������� ��� ���������������������������������������������� ��� ����� ��!���!"���������������������� �� ��������������������#����������� �����!$����������������������������������� ���� ��#����������������������������%����������� ��!��!&�� ��#� ������'�������� �������'��� ���� '����������� ����(����������������� �)�!*�������!+������ ����������������������%�������')�������!"�������������������,-��.��.�!+������ ����(������'������ ������� ��'������������ �������������������������/������� �������!"�����������#��������.�)!(�������������������������'��!�������!"������'���������!�-����.������������'��������������'.��!,������!"�����%���������������01234+������ ���� "5��� ���'������ ��,����� �����'������� ������������� ��������������������' ��!�01236+������ ���� "5��� ���'������ ��7����� ��,�� ��������������������' ��!�89:;9:<=;>>>>>>>>>?@ABCD>@EFGHI> JKL=M:NOP>>GHI>
��������������������������� ���������������������������������������������������������� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ������ ���� ��� ������������������������!����"#����������� ��������� ��� ��������������������������������������������������������������������������������������������$%&�� '�� ���$(&�� '�� ������� � ��)*+,-./0��������������1�������������������������������2 ��� �����������������������������������34����������������������������������5�6���� ��*+,-785 ��� ��������������������������������������������������������������������������������������������������99:;<9=>?@ABCDE FGBHGBI@H999999999JKLMNO9KPQ:;<9
�������������������� ������������������������������������������������������������ ��!�"�#$��������%�����&�����������'�('������)��*+(����������������������+���*+(��������� ��&!����)����#$�� ����%�����!���������%���,��""�%���,��"-����%���,��"� ��!��������"�.�&#""�#/�!�(������� ���� ��������%�������� ����������������������������"0���������*+(������ ��!%���,��""���12-0���������'���������&+� -3#45��(6!�(#$���,&������!�(��,(��%����������) ��������!������-0�� ��!�� ��!%���,��""# ����!������-������0���%���,��7�� ��!%���,��"-��������'���������&+� 8#95��(6!�(�#$����������������-#7:"38�;"#$���,&���������(������������3#95��(6!�(� ����&+���������<=>?@@ ����!���������$/%���,��� ��!��������"��%���,���""�"-����"���������&�����������������!�� .�&#"<=>?@A ����!���������$/%���,��� ��!%���,��"-��%���,��"9����%���,��"���%���,��"9��������&�����������������!�� .�&#"BCDECDFGEHHHHHHHHHIJKLMNHJOPQRSH TUVGWDXYZHHQRSH
����������������� ���������������� ���������� ��������������������������������� ����������������������������������������������������� �� �������������� ���������� ���!�"����������#��������� ���$����#���������� ����% �������������� �� �� �������&�%������������������������� ��������� ���� ������������������!�&��'�����!�( ��� ��������� ���%����������!��������������!�'�����!�)����������� ���������������� ������������������� ����������*���� ���������������� ��� �������+��������� ������ ����������� ������������ �����,�--.��/�0/��( ����������*������ �������������������������������!����� ������������������ �������������� �������� ������������������������'�����!���������� �������������,����� ��������� ������������������������� ���������������������������������� ���������������������� ���� ������� �����������*�������! ��������1������ ��!����������������������� �������������� �'�����!�234567( ��������� ��&�������������������������������*�������! �1������ ��!������ ������������ ��������'����2345689#���������� � �������������������������������������� ���� ������������� ����� ������������������������� �� ������!::;<=:>?@ABCDEBF GHDIHDJAI:::::::::KLMNOP:LQR;<=:
�������������� ��������������������������������������� ��������������� ��������������� ���������������������� �������������������������� ���!���"��������������#�$�%��� �����������������&��$'�(��#��)���� ������������� �������$��������������������������������������������������%���� ���������������������� �������������������*$+��*�+��� *�+�������������,����&�,������� ������ ��������������������������������������������������-������������������������������������������ ��*�+-������*$+-��������*�+-����������*�(+������������������.����*�+���������������������������������������*���������%(��� ��+����������������������������������������� �������������* �������������$��� ��+/%�0������ ���������������������������������������������������1�����������������������������.����� ��������������*�����2���������+�3456789:45���������������������������� ��������������������������� �������������*������������������� (�%��%�(��� ��+-���������.��������������.��������� ��� ���������������������*�����������������������������%(��� ��+�2����.���������������������������������������������)���������������������������-������$��������������������������������������������������������� ����������������������������� ;���������������������������.�������������.��� ���������������������������������������������������� ����������������������������� ��-��������-���������������������������������� ;��������������������������������������������������������(<������������������������������.���� ����/%(0��;���������������������=>?@A?BA?CDEFGHAD?��������;�����������������IJ,�����IKJKK���������������� ��������IJ,L��������L�� ���M��������-L2M�((�$N(������ ��������� ���������������M.��� �J��������M����������O��������M������ ���*PJMOM+��I�����J������,�������������� ���QL)��($&$N$��PJMOM������������ ���ORS��((���������R����������L��������J������ �����S�������TUVUWU56U9��X�����Y*���&+M���"������ ��������J������%$�Z�%(��%�%�Q����[M*����+������������������������������\Q���[���M���]�����%�Z����� &�Q����K)*��%�+����������������_���R��������S������������Q����K)*���$+Q�����������%������O��������������$�R�����J[*��$&+K������������ ����������������������� ���������������������J��������NZ%��R�����J[*��$$+�������������� ��������� ���������������������� ��������������������YK L�� J��NNZ%&$��%&��N�J����_ *���N+J����� �,�.*2���������+-���������������������������� ���������� ������� �������PPa��%J�-��(K���-&$��-���N�K��� ��������b�� K���R��������-I�c���-[��������$-��%�$�%�$��L�����))2Y-J����KR2,L-[��_�_�����Y-J��I-2_��S*%(�%+R������������������������������Z��������������������������������L�� J��S����Z$$(%�$$%$��2����Y]J*��%�+����������������S����K������Z��(�R�����JJd2L*��$�+Q�������� ������������������� ����������J�������&(ZN��������M�-L�����2Y-O�����Y�-!����O�-L����R-K�����K-[_���K-]�Y[*%(��+��� ���������������� ������ �����������$�R�����2%J������������������.���� ��������I��K��J��dJK�(�Z$$%��$$&��%�R�����_2Y*����+K�������������� ��������_����- �������������-������������L� ���.����Z&��$&�&�e����YS,�*��N�+M����������������������������R��������S���%Z%$��%N&���M����� ����K*%((N+����������������� �����������"�������������������&Z�%�%���%����$�`f�������f����!*���(+M������������������ ������������������I��K��J��dJK�NZ%((�%(����2�� �2*��N$+J���������������������������������� ������� �YR��M����Z&$��&N(�N�R�,����]K*��N&+K����������LQ%��� ���������������������������������������������.�����]�������S��&NZ%���&�����R�����_2Y-X��������YO-c��Y-L���!O*%(((+���������������� ����� ������� �����I��K��J��dJK�NZNN(��NN(����J��gI-����g-2�,-R����!-X����� �����S*%(�%+M.���������.���� ������������ ����������h!���.����J������iZ��� ������������������ �������.��� ����YK L�� J���&�Z&$NN�&$��%(�]����L-L���MO-�������-!���� [-X����� �����S-[����L[*%(�&+���������������������������� �������� ���_�����������.����Z��������������������������������������YK L�� J���&$Z�&��(��&��$%��]����LY- ��Y-!�Y-g����S-L���Y-�������-!���� [-[��_�_�����Y-X����� �����S-[����L[*%(��+�2������������������������������������.��������������� ���������������������������.��� ����������.��������� �������Z������������������������Y����Q��L�� %�Z&$%�&�(%%�M����� ����K*%((N+Q���������������������������������������2LI�������������������������������������������L�� ]���������Z$$��$N&%&� ��c-������O!*%((�+���R(���������������������������� ����������� ���� �����-���� ���� �����������-���������������������-�.����������-�������������� ����Z��������������������� ����������������R(��������������������%���������������������L�� K��������%(Z%�$�%��%��K���c-J�������2]*���N+K�� ����� ������������� ����������������- ��� -���J��� �������YL�� �����(NZ&N$�&��%$�,�����RY-������! -J�������2]-J������!M-S���RK-L����� �YS-J�� ��!-]����g-R�������]-���������!K-I����;�2-L�����R-[�P-2������2�-)_ ����K,-]�����Y-����!-J���������Y[-2�R-M��R-�����X-,����S-2���Y-)����R-I�;� �-2���c-X���Q-I��2-g������-R����� ���YK-�����YM-Q�����,-jklmklnompppppppppqrstuvprwxyz{p |}~o��l���ppyz{p
������������������ �������������� �������������������������������������������������������� � �!��������"������� �������������������������������#��� ������������������� ������������$����� ���� �� �������%�&��'���� ����� ������(������ �'�� ������)���� ���*�����������+���&�,����$��� �$���������(�-������������-���������-�������-�.�����/�.����������'� �&��� �����,�����.�#-�012345$�������26����������723�!��7�)������8�� "7197���������,� ����#��7123:�097;72571<7)���������������������-����� ��0123;5(��8��������8�29��29=1>����29=�.���� 8��� ������8�����8���� ������8��#��������������� ���?�298��� ���������=8����� �� ����;*%(8��������� ��,� ������������ �����������=�������� ���� ����7�(�� ����33<?31@62A31922147������ ����$� �����"��������� -012245��������� �8 �����8��������8 ���2@B1>���29B1>�#������=������� ���8��� ������8������������ �� ���� �������������=�����7� ���"���� ���� :?3669A1222167 ���������012315(�����&������� ���������7)���!� ���������� ���� ������1?;49A:2:;27.�����036435"���� ��8������������ ����= ��!� ��������7��� ������3:?;9;A;94CDEFGHIJKLHMNOJ���������� ������������� ���,� ������ �P������= ������������������������������ � � ������88���� ����7QQRSTQUVWXYZ[\YZ ] [_ [X_QQQQQQQQQabcdefQbghRSTQ