tÉcnicas de citologia -...
TRANSCRIPT
![Page 1: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/1.jpg)
TÉCNICAS DE CITOLOGIA
Silene Gomes Correa
![Page 2: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/2.jpg)
Preparo de Amostras Citológicas
![Page 3: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/3.jpg)
Descrever coloração, viscosidade e volume
12 3 4
5
![Page 4: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/4.jpg)
• Centrifugar em 2100 RPM por 10’
![Page 5: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/5.jpg)
• Decantar
• Cito-centrifugar o sedimento
• Amostras de urina utilizar lâminas silanizadas ou com carga
![Page 6: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/6.jpg)
• Citrino (transparente) 5 gotas
• Ligeiramente turvo 4 gotas
• Turvo 3 gotas
• Amarelo escuro e opaco 3 gotas
• Avermelhado e opaco diluir 3 gotas da amostra em 1 gota de água destilada
![Page 7: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/7.jpg)
Quantidade de Filtros:
5 gotas = 2 filtros
4 ou 3 gotas = 1 filtro
![Page 8: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/8.jpg)
Utilizar dois cartões citológicos
![Page 9: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/9.jpg)
Cito-centrifugar por 5’em 900 RPM
![Page 10: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/10.jpg)
Técnicas de extensão (amostras espessas)
![Page 11: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/11.jpg)
1. Técnica do esfregaço
![Page 12: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/12.jpg)
2. Técnica do deslizamento das lâminas:
![Page 13: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/13.jpg)
3. Técnica do esmagamento:
![Page 14: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/14.jpg)
Esfregaços recebidos prontos
• Espessos
– Motivo de bolhas
– Antes da coloração deslizar uma lâmina limpa sobre o esfregaço distribuindo o material em duas lâminas
![Page 15: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/15.jpg)
Técnicas de coloração para exame citológico
![Page 16: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/16.jpg)
Colorações tipo Romanowsky
• Panótico;
• May-Grumwald-Giemsa (MGG)
• baratas, fáceis de preparar, guardar e usar
• Coram bem microorganismos e o citoplasma. Coram mal os núcleos, mas o suficiente para avaliar critérios de malignidade.
![Page 17: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/17.jpg)
Panótico
PROCEDIMENTO TÉCNICO
• Preparar as extensões e deixar secar em temperatura ambiente
• Preencher 3 recipientes com assoluções no 1, 2 e 3 respectivamente;
• Submergir as lâminas nas soluções:
• 1 por 1 minuto• 2 por 1 minuto• 3 por 1 minuto
• Lavar com água deionizada, secar ao ar na posição vertical e com o final da extensão voltado para cima.
![Page 18: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/18.jpg)
DESCRIÇÃO DO PROCESSO TÉCNICO
• Colocar a lâmina no suporte de coloração
• Recobrir o esfregaço com 20 gotas do corante May-Grünwald. Deixar atuar por três minutos.
• Acrescentar 20 gotas de água de torneira. Esperar dois minutos.
• Desprezar a mistura e, sem lavar, cobri-la com 20 gotas da solução de Giemsa. Esperar de 12 a 15 minutos.
• Desprezar o corante, lavar a lâmina em água corrente.
• Deixar secar em posição vertical.
(MGG)
![Page 19: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/19.jpg)
(MGG)
![Page 20: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/20.jpg)
• Hematoxilina, cora o núcleo (DNA)
• Orange G, cora o citoplasma das células superficiais
• EA 36, cora o citoplasma das células intermediárias, parabasais e basais
Coloração de Papanicolaou
![Page 21: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/21.jpg)
Células Superficiais Células Intermediárias e Parabasais
![Page 22: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/22.jpg)
Emblocado em Agarose
![Page 23: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/23.jpg)
Centrifugar por 10’ em 2100 RPM
![Page 24: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/24.jpg)
Retirar sobrenadante
![Page 25: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/25.jpg)
![Page 26: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/26.jpg)
![Page 27: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/27.jpg)
![Page 28: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/28.jpg)
![Page 29: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/29.jpg)
![Page 30: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/30.jpg)
![Page 31: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/31.jpg)
![Page 32: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/32.jpg)
![Page 33: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/33.jpg)
Citologia Convencional
Amostra cervical
Esfregaço não representativosobre a lâmina
Mais de 80% da amostracoletada é descartada
Fixador
Perda de células importantesSobreposição, etc.
Amostra não-representativa
O PROBLEMAO PROBLEMA
![Page 34: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/34.jpg)
Citologia em Meio LíquidoA SOLUA SOLUÇÃÇÃOO
Sistema de Coleta BD SurePath™
![Page 35: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/35.jpg)
BD SurePath™ Enriquecimento Celular
Os possíveis interferentes são retirados da amostra e um pellet de células de interesse diagnóstico éformado
![Page 36: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/36.jpg)
Característica Benefício
“Artefatos por dessecamento, sangue, células inflamatórias,
sobreposição celular, muco, etc... são eliminados. O número de
leucócitos é significativamente reduzido”
Redução significativa de casos insatisfatórios.
Melhor visualização das células de relevância diagnostica e dos
microorganismos.
Aumento de 64.4% na detecção de HSIL em lâminas BD SurePath™.
![Page 37: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/37.jpg)
BD SurePath™ Citologia em Meio Líquido
TransferTransfer êência da ncia da amostraamostra
A tampa do frasco é
perfurada e a amostra
homogeneizada 8 vezes
8 ml da amostra e transferido para um tubo de centrifugação contendo 4 ml de gradiente de densidade
Transferência da amostra concluída
Gradiente de Densidade
PrepMate TM
12 amostras - 3 min48 amostras – 12 min
Aspiração Decantar1a Centrifugação2 Minutes @ 200 x g
2a Centrifugação10 Min @ 800 x g
• Converte uma suspensão de células em meio líquido
em uma fina camada corada de células (13mm diâmetro).
• Processa 48 amostras simultaneamente
• Preparo e coloração 48 amostras aproximadamente 58
minutos.
• Somente preparo 96 amostras por hora.
![Page 38: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/38.jpg)
Citologia em Meio Líquido
![Page 39: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/39.jpg)
Vantagens
• 100% da amostra coletada é enviada para
laboratório
• Remoção de Sangue & Debris
• Redução significante de amostras insatisfatórias1
![Page 40: TÉCNICAS DE CITOLOGIA - bvsms.saude.gov.brbvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/inca/Silene_tecnicas_citologia.pdf · • Decantar • Cito-centrifugar o sedimento • Amostras de urina](https://reader031.vdocuments.us/reader031/viewer/2022031112/5bacc52809d3f23f0d8bedb4/html5/thumbnails/40.jpg)
• Possibilidade de testes adicionais a partir da mesma
coleta (biologia molecular / colorações específicas)
• Aumento na detecção de HSIL comparando com
método convencional1
1Compared to conventional Pap smear. See PrepStain® product insert. Direct-to-vial study population, Table 26; Table 15. Note: Site to site variations in performance are expected. Each laboratory must carefully monitor the quality of its work.
Vantagens