Sustained Loss of a Neoplastic Phenotype by Brief Inactivation

of MYC Meenakshi Jain,1* Constadina Arvanitis,1* Kenneth Chu,2 William Dewey,2 Edith Leonhardt,2 Maxine Trinh,2 Christopher D. Sundberg,1 J. Michael Bishop,3 Dean W. Felsher1  

Science. 2002 Jul 5;297(5578):102-4.

Aluna:Vanessa Jóia de Mello

Introdução

Ativação de oncogenese uma importante via no processo de tumorigênese

Oncogenes

Tumor

InativaçãoRegressão do Tumor

Questionamentos

Na célula normal como fica a inativação permanete do protoncogene?

E se a inativação do oncogene for efetuada por um tempo limitado?

Como fica o crescimento do tumor após o estabelecimento da função do oncogene?

Célula medula

VP16

DNAMycOT

P1 Ativa

DNA

OT

P1Myc

VP16

DOX ou TetraciclinaX

Sistema Myc + célula da medula

1% dos animais obtidos apresentavam osteosarcomaDesenvolvimento de células tumorais “in vitro”Em animais singênicos foi inoculados 1x105 células do tumor

Quimeras x QuimerasTransgênico

Modelo in vivo e in vitro

Semelhanças entre os tumores desenvolvidos em 1% dos animais e no homem

•Massa invasiva no esqueleto

•Matriz óssea desorganizada

•Metástaticos

Tratamento dos animais com DOX por 10 dias

Inativação de Myc

Diferenciação Regressão celular do tumor

A-B Osteosarcoma dentro do osteóide maduro

C-D Atividade da fosfatase alcalina antes e depois do tratamento com DOX

E-F Expressão de osteopontina antes e depois do tratamento

Avaliação da reativação de Myc

As análises foram efetuadas por CVTL (continuos video time-lapsed)

Antes do tratamento com DOX- ciclo celular 14 horas Depois de 24 h da inativação de Myc – 1\10 deste valor

Inativação seguida de reativação de Myc in vitro causa apoptose em células tumorais

5% das células diferenciaram e 1% mantiveram suas propriedades neoplasicas

In vivo a inativação de Myc seguida da reativação também causa Apoptose em células tumorais

Animais foram inoculados com as células tumorais (s.c)

Quando o tumor apresentava 0,5-1 cm diametro

Grupo 1 (controle) Animais sacrificados

Grupo 2 Tratados com DOX por 10 dias sacrificados após 5 dias do término do tratamento

Grupo 3 Tratados com DOX por 10 dias sacrificados após 14 dias do término do tratamento

MYC-reactivated for 5 dMYC-activated MYC-inactivated MYC-reactivated for 14 d

Camundongos que possuiam tumores transgênicos primários (1%) a inativação de Myc também esta associado a diferenciação celular e inativação seguida de reativação com apoptose

Taxa de Mortalidade

Animais receberam i.p células tumorais Grupo controle – Não recebeu tratamentoGrupo 1- Tratados por 10 dias com DOX Grupo 1 –Morte 5 semanasGrupo 2- Não apresentaram formação de tumor por 12 semanas. Sobreviveram 20 semanas. Readiministração de DOX diminuiu tumores

Conclusões

Myc inibe a diferenciação e proliferação

Inativação de Myc - diferenciação e diminuição do tumorInativação de Myc com seguida reativação não necessariamente restaura o fenótipo e sim dispara apoptose em células tumorais

Quando Myc causa tumorigênese por aumento de proliferação celular e bloqueio da diferenciação sua inativação resulta na interrupção da proliferação , diferenciação e perda do fenótipo das células tumorais

Quando Myc causa tumorigênese por promover uma desestabilizaação do genoma (ras, fos e outros oncogenes, inibição de checkpoints ) sua inativação poderá não resultar na regressão do tumor

Conclusões

Obrigada!!!!

Vanessa Jóia de Mello