q-tof lo strumento piu potente per lidentificazione di incogniti –maggiore selettività e...
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Q-TOF
Lo strumento piu’ potente per l’identificazione di incogniti
– Maggiore selettività e riduzione del rumore
– Frammenti in Massa Accurata
Come funziona un QTOF?
a
Quad Mass Filter (Q1)
Collision CellLens 1 and 2
Quad Mass Filter (Q1)
Collision CellLens 1 and 2
HED Detector
Quad Mass Filter (Q3)
m3
m1
m4
m2
Primo quadrupolo in SIM!
Spettri in MSMS ACCURATA!
0 2 4 6 8 10 12 14 160
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
4000
4500
5000
550016.27
13.83
9.20 11.43
6.994.95
2.84
STD ESI: 0.25 mL/min flow Q1=256 (2.5 wide), CE=10v, 167 (0.1 wide) EIC
60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 2600
50
100
150
200
250
300
350
400
450
499 167.0805
257.1350
168.0836179.0656
71.0826 117.0875 152.0602
MS/MS spectrum at 1 pg. Background substracted
200 fg500 fg
1000 fg 2000 fg
Diphenhydramine con Q-TOF
Qualitativa Sensibilità SIM
(campione semplice)
Sensibilità in SIM
(campione complesso)
Sensibilità in SCAN
(campione semplice)
Sensibilità in SCAN
(campione complesso)
Quadrupolo 6 10 6 7 5
TOF 8 n/a (7) n/a (7) 8 7
Ion Trap 9 n/a (8) n/a (8) 10 8
Triplo Quadrupolo
7 8 10 6 8
Q-TOF 10 n/a (6) n/a (8) 7 10
Investimento: Q-TOF > QQQ ≈ TOF ≈ Ion Trap > Single quad
Tabella comparativa degli strumenti
Sequenziamento di peptidi
Il nuovo QTOF Agilent 6520 QTOF
Più informazioni dai campioni più complessi
• Sensibilità X10 (Attomoli)
• Ampio intervallo dinamico (5 decadi)
• Elevata velocità di scansione (20/sec) e fino a 18,000 di risoluzione
Identificazione semplice di composti incogniti
• Accuratezza di massa X2 (<2 ppm in MS e <5 ppm in MS/MS)
• Autotune semplice ed efficace
Sensibilità, velocità di scansione, accuratezza di massa che ridefiniscono la categoria dei QTOF
Benchmarking – Sensibilità per piccole molecole200 pg MDMA (3,4-methylenedioxymethamphetamine)
0.2 0.6 1.0 1.4 1.8Time, min
0
5.0e4
1.0e5
1.5e5
2.0e5
2.5e5
3.0e5
3.5e5
4.0e5
4.5e5
5.0e5
0.68
S/N = 230
! !
Agilent QTOF
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0Time, min
0
50
100
150
200
250
300
350
400
1.61
S/N = 10
Altri QTOF
100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 900 9501000m/z, amu
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.35
0.40
0.45
0.50
0.55
0.60
0.65
0.70
0.75
0.80
0.85
0.90
0.95
1.00 187.06339
333.19855
268.11402
175.12511 480.25381
684.35544246.16095
785.83143
231.12109
Altro QTOF
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700m/z, amu
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
2000
2200
2400
2600
2800
3000
3200
3400
3600
3800
4000
4200
4400
4600
4800
5000
5200
5400
5600
5800
6000
6200
6400
72.0791
684.3291
187.0662
813.3683
333.1794
480.2426
175.1143
240.1288120.0774
1056.4458
942.4062
230.07151285.5122
1171.468487.0529
627.3093497.1879102.0522 337.1420268.1223924.3967740.2681 1039.4248355.1508 612.2114515.1935316.1450159.0733 1268.4917 1570.63061154.4547785.8255 1296.4777853.27471022.3982409.128555.0531 303.2225 482.2451667.2974
Agilent QTOF
LOD10-20X sopra il LOD
Un paragone – Sensibilità su un peptide in MS/MS Infusione ESI, Glu-Fib, MS/MS dell’m/z 876
Metaboliti: urina maschile/femminileIdentificazione picco a 28.87
minuti
Formula bruta
C24H30O6
Error –0.9 ppm
Estriol triacetate
Ioni pseudomolecolari messi in relazione tra loro
Qualitativa Sensibilità SIM
(campione semplice)
Sensibilità in SIM
(campione complesso)
Sensibilità in SCAN
(campione semplice)
Sensibilità in SCAN
(campione complesso)
Quadrupolo 6 10 6 7 5
TOF 8 n/a (7) n/a (7) 8 7
Ion Trap 9 n/a (8) n/a (8) 10 8
Triplo Quadrupolo
7 8 10 6 8
Q-TOF 10 n/a (6) n/a (8) 7 10
Investimento: Q-TOF > QQQ ≈ TOF ≈ Ion Trap > Single quad
Tabella comparativa degli strumenti
Il primo passo dopo il DAD
QA/QC, verifica e purificazione
prodotti
Screening/ProfilingTossicologico, metabolomica,
sintesi, proteomicaStrumento universale
Tossicologico, proteomica, farmaceutico
Quantitativa di composti target
Metabolomica, farmacocinetica,
tossicologicoTriplo/TOF
Può fare tutto...
Il portafoglio completo di Agilent
• Quadrupolo: per sviluppo metodi, screening e quantitativa a basso costo
• TOF: screening e identificazione in massa accurata
• Ion Trap: identificazione e quantitativa tramite MSMS
• QQQ: analisi quantitativa in tracce su matrici complesse
• Q-TOF: identificazione, screening e quantitativa in massa accurata
