pakistan journal of scientific and industrial research - pjsir

21

Upload: others

Post on 11-Feb-2022

2 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

���������� ������������������������ �������� ���� �����������������������

��������������

� ��������� !�"������������

#����$%��� ����������������������

&�&����

����� ����������' �()�������������$��*�����

�������������

������������������� ���������������������������� ������ ���������������������������������������

���������������� ��� � ��������!�!"�#�����$$���������%���&������!'()*+����� ���,�-.)!)/!012(/'0.!1+�012(/'1/!1034��-.)!)/!012(/'0*35��-��� -66777# 8 ��#��9��!���-����: 8 ��#��9

� � � �*������������������� ����������������������������� +� ����,�� &� ��-�� +��,������������ ��������������� �����������!���������� �"��������"��#��� .� ������������+������$����%������&���'���������(���������%����

� �� � &� ����&�������������������%��������!���������� ������������������� #���� &���� �������&�������)������ � / �������*�+�$�� ����$�,��������������(�����������!����������!��� 0��� ���������1�����!���������� ������������������&�-����

� 2� �������$���.��/��.���,��������������$�0��$��������1�+�� �� � �����1�����1�����*�+�$�� ����������"���������-��-���1�+�� .������0�$)� ������ ������+�������%2�����������*�����+����������*�-�����!��

���������� ������������������������ �������� ������������3456������7���7� ����������8933����:

�� �������1�������������;���3444567859:� ���;<���3444964==>:������;?�<�++����%������������ �1��������7�����������������1��������+���7���.���7��=���

�� �����������������������;���3444567845:� ���;<���3444964=7@:������;?��<�++����%������������ ��������+�����1������%������������"����7���*����7��=$

������������#�����++������������������������$

������ ���������A��B�)�� �������������%������7����������������%������7��������2�+���������������7���������)����7����������������������������������� �����������������>����%�����2���������.�����"����"�*&�������������������2�+���&�������*���7����2����#����������%�����������*�2.��������+��������$��)�� �,���� ����:���������������������� &���,������;���������2�$�8999�+�������������%���������2�$�?59@���� ���!�A�B99�+������������%���������!�A�C9$

����� ������ $���� ������'���������������7���#���:������,�D�#����� �����������0����%��?99��"�����>��7�2�����&$.$�3?BE������7��������%��B639E��!$�$�@����$"�$?3?�ECC�9396@����+:FF###$���$���$�������,�����)�������������7���7�����������%����7�������� ����+������� �������������������������������%���������+������� �2�$�85+���+�%��+�����+��<7��2�%������������=����2�$�335�+�����+��<7����������������=��#�����&�-����@�!�A�39�+���+�%��+�����+��<7��2�%�����������=����!�A85�+���+�%��+�����+��<7����������������=�� ���������������������$

+�,1 ������� ������1������������������@���#��������������+������������%��������������������� �����-�%��� �������������7������F�%����� ����7�������%���������%�+��+������������%�������������������+�������$

� ����������)������)1��+����������������� $�����+��� �C�+�����)� ��� ���+�$,��C���� ��6�6� ����$�""�$�������(��C/� ����6@=4DEC��������

���������� ������������������������ �������� ���� �����������������������

�������������� �!"� #$���!"� �%&'%

(�������)�������*���� +,,������ ��+,,����������- �.���/�������0�����1��2��3�4��������5�62���!!��7��� �+���� +���*� ���8������2���!!������!�����!*��3���2���!!��9����! '':

$� � ���1+���1�����2� ������;�����4+��� �����6(���� ���������!� �+!!������<������!������� ������ '%%

+����1�����������������������!�"��+ �����������������!+�!�� '%=

)������������ ���������� ��5����4�������� �����6��-������7 ������ �!)�� �������������� 1-������ �,������ �������5� �����*�!���+��������!!��� �> � �����!�3����������-�!�2������8������8�����7�� �+����������7 �� �*�� ��� '�?

- �.���� �� !������� �����2��������������������4*� ����6����,����!�����*���2���.�������������$�����,,��!�����.���$���� 1(����������1������� �� �����������<��@������8� �!+������7�������1��� �1�����1��+��!��+�����7�� ��� �� ��� 'A�

$���B�����������+�����B���'������� 1���*���*���"1�� ����(��!�����+��!#��#����������!C�� ����<���@��������� ��)<�3 '�A

0�������� �+�����!���������� �����*�������������� )� � ��!�����@��,�����������!�"�����������*��3��@���������"������D7��� ������!�������+���������� '�=

��� �(�!!����������

)����������!�> ��@1,���1���!��$ �����) 1�� ��1����������!���+������$�����������@1� ����$��,�� ���4)�(�'�E�A��6+��� ��1��9���� +�"�������4�������������6��!���(��!�3��>��������+�����+!�����F.��.� 'EE

)���!�������@�� 12�������2�������������������� ����@� "��2�������F�����(� ��� ������ $�������*� ��$��"������!+""���������+�!�� 'E=

+�����!�������������0�����1+�� �"�������!*� !������� �!���"�"#@��,��!* ����+�����!�>1�1����+"��1����!���+���1�>1�1�����+��.�!�7�1��>1�1��������� �������>!�.�!�8� ��! ':%

(�������������!������ ������������4���'#�6 �

+���� ����B������!������ ������������ �

��"<�������B������!������ �+���1������ �

������������� ���������� ������������������ ������������������������������������������

����!!���"��� ����#$�� ������� ����%�����������!!���&���!'�&���!��������������!!���(�#��!�)

������������ ������������������ ������������������������������������������������ ������������������������������ ����������������!�"�#�������������

$�������� ����%�&'(()���������������(%�&'(()��������*�����+�&'(&,

���-.-���-��-���-���-!/����-���-&'(&**�$0,((%1(&(

�'#� ���� ����������#�����������������������"����������������������������������������#�"��������2�����������3�$��������4-,-����������������������#�����������������&'��������������������'�'-(5�'-0'��'-65����!7"�-!���������������'-0'��7"����������"�����"���"���������������������������#���"��������������������������������������-8"���9�������������$%-(6���7"�,�����������������$5&%-6���7"�,#�����������!&#"�������������������#��������������'-0'��7"��"�#���������"����������������������������"�������-

%���� �#+���3��"�����������������������������������������

,�� ��������

������� ��� �������� �������� �� "��� ������������ :5; �� �"� ����� ��2��������- 8"����������������������������"��������"�����������"������- ������������������3������"���� � ����� �� ��� ��������� �"���- <�#���� ����������������"��������#"���������-���������������#�����9��������('(5�"�����"�������#��"����������������00(0�"��������$==��&''>,-?��3���������������������������������������������������������"��"����"�������������1����������������$!���������-�&''6,�������������������������-8"���������������������"������������������"������������)���������������������3�����������"��������������������������"��������2���������"�����-8"���������������������� �"�� ������������������������ �� ����������������#��"������������������"���������������#��" ������� �� ���������� �� ���� �����-?��������������������������������������3�����-$<��������-�&'':,-

!������������������������#����������"��"�����"���"��������������$@�������-�(+>5,-!����������������������#��"�"����#�"������������������������������������-?����������2��������������������������������������������������-�-�����������������������-8"���2���������������������������������������������������������������������������"�������#������������

$�"��������(++%,-��������������������������������������������������������������������"���"�����������#�"���"�����������������#������������� ���������������������������������-<�#�����������������������2�����"�����"�����������2�����������9���������������������������9������������#�"$������<����(++%)�"�������(+>0,-8"������������#������������������������ �"� ������� �� ������ ������� �������������������#�"������������3�"�����-

���� ��#�����������#

8"�������9�������#������������ �������A������" ��������������� ��������������������������������&''>�����������"������������������������������������������#�"������������3�$��������4-,"�����- ����������9�������#�������3���������3��������������������$A�!�,#��"���������������"������������3���:��0�-?��3�"�����?�����1:5&5#����#�&�#�����?���"�%5��������������"����0'������������������"��������������������&5��7"�-8"��������3���#������������&5'1(&51(&5��7=�B7"��������� ���������������������������"���"������������"��"�������������������#�����������"�������������#��������������������������"���"�-!���#�����������'�'-(5�'-0'��'-65��7"��������������&'���������������������-�����������#���������������#���������������"��0'������"�����"�������������-����#�����������#��"�<��%->%�����&-(:������ AC ��"�����������������)�1����/���#�����D('&>E��"��-���

((%

���������� ������� ��������������������� �� �������� � ��� ��� ����� ��� � � ������ �� ������ �

����������� ������������������������������������������������������������������ ��

!��"���� ��"��#��$�$%��&������ '�����#����$%�$&�""���� '�����#���(�$%�$)

!�����������

*���+�� �#���+�����������,�����"���!-���������)�+����������.�������������+��/�� �������������0��������� '��������,�+�����0������+������� ��������#��+�������"�����*1/�"�!������������).���+�����������!,�����"���)"����������"���� �� 0��"� ��� ��0 ���"��� ��� "�������"�������� �������"�������"����.'���"����������������0"�����������������.2/����������3*�����4����3������4�������������� 3 ��5�4����3 ��4��������� ���0��"�����#��0� ������ ����0��� !6��+�����.�$%��).*��������"��������0������ �"� ������� ��������#�� �5����#��� �+0��!��������.�$%%7&8�+�$%%(�$%%�). ��� �������0��9�������#�� ������#��� �+������+��"����+�� !-�����������.�$%%�).:�0� �������"��������0� �������� �����+�������0��� #���+����������"���;������������� ��� ����� ������.����������0��� ��� � ��� ��������� ��� �/���"��+ �����.������������������������������� ������������� �������+�����"����"�����.*��"������������#�� ������#�� ��0����� ������ �� 9�0 �#��� ��� ������"��#��0������������#��#�"�����������#������ �"� � ����������"��0��� �������������0��� �� ������� �"���������� ������+���� �������.

<��� ��/���� ��� #�� ����� #��� �����������+�"���"�����+�"���� ����"����#����+�"������������".*�������+�"��"����"�����#���=����������� =�����������������+#����� ��� ��������"�������������� "�������������������������������� ��"������� #��0�� ��������� � "��������.*�������+�"��������"�������#�������������������� ��� �� +����" ������������ ����� #��� �+���+������!>� ���+�� ��"�����7&-�/� *���������%).��������#��� �+���+������������?�������������#������"����"���� "�����������+����"�����.���������������"������������"�����0� ����"������+��0����#������������������������������������ �����+����� ���������"����#�������.'��0� ���+���"����"����������#�"��� ��� ������"����������+���������������������������������� ����������#��� �+���0������� �����������0�����"��������.2��������� �����������"�����������+��������+�"����������"���������#�����������������0����5�����0��"������ ��+��������������.,�����"��"����"����������� �����"���������+�� ������������������"����"����5���������"�������������� � ������.����������������� ��#���+���� �������"��� ����+����+����"�����#������� "���� ���#�����"�������"�������������"��������.���������#?�"������������������� �0���������5���� ����������$%"��������#���+�+���0����"�������+����!��������������� ��)� ��"�������������������"����+�����

@,����� ���"������� �"�&2�����; ��?���9����.������A+����."��

�"��� ��#-����"����5������$%�������"��������0���"����� ���+��������+�"��� ������"�����9���.�������������3*��������+�4!2B)0�����������+�����"������ 0��������+�������� ��� �"� ���+����0���0�����+�=������� =������.,������"����� ���������"������"������� ����������� #��0�����"��������� ������� ������������"������"�������0������+��� �����#� ����������"����������������� ��"��������.�����5������+�� ����� ������ ���"�"�������.C���������� �����"�"�� � �����������"������������"������������3*��������+�4������� �������������+����"��������� �����������������#�����"�� ������������+������������#�� �5�������"���������#����+�0���������� "��������.����"�"�� � ���� ����������9���������!��������+�"���� ������"��)���������������� �����������#��0�����"������������+����.

$�%����& ����+�� � �������� ������� �������� ��� ��� ��������+�"�� ������� "��������� ��������

<�9.?.�"�.� .���.'��. ;#���.�"�.$%�$''!()�$$��$�

�$$

����������� �� ������ ��� ������������������ ���������������

���������� ������������������������� ��� � �������������������

�� � �� ���� �� ��!"�"#�� ��� ��$��� �����!"�!#���� % ��$��� ��&��!"�!'

����������

�������� �����������%��������%�������� ����������� ������ �( �������� ��� ) �(���������(���� ���%������ ��� *� �������� �+���%�������%��������������� �� ������ �)(�� ������%������� ���������,�� ����� ����������������%��� ����������( �(����%(������,���-��% �������(����.&/#�0 )������1���20 )�����.33'+�4( � � �� ����� �� ���( �%� � � ����� �����5����( �������)�(���%����)(��(������ ��, � ����6 � ��������� �������� ��(���,(�( ����+�7�� �%����(�� � ���� �� �������� ����� ��(���,(�( ������ ���� �������)(��(��� ������ ��������� ����( ����%������,��)(�������������( ��( ��� �� ���%�� ��� ���� ����%��+�8������� ��%� � � ������� ����( � ������� ���� ����%������,(�����(�,(���%�������������������(���� ���,������� �� ���( �������+

���������%�������� ��������� ����( ����������( �( �������( ��%��� ������(���������������,������� ��������,���%���'����� ����� ��%����%� ����5��� �������%( �������������� �����+������������� �( ������%����,���%�����( ��������� ��(��(�� ��������2��� �� ������)�(��� ��/"""����������%����(��(�� �� ������� � ������ +������ ������(��� ����%(� �� %( ��� ��������%� �����,��( ��'��� ����������������(���� ����������������( �, ���%�����+�4( � �(�� ����� ���� �����(�)�%(������2��,������������(���� � �� ��( �,����� ��������

���( �� ���� ��������� ���8��( �������� ���.&/'+�8����� ����� ������������ � ���%����� � �9�5�� � �� �� ��� � �� 1�%(������ � �� 8����� �0����� � ����%�� ��� � ��:������� � ����7����� � �� �%��������������(������������+

�������� �����,������� ���������,���%�����( ������(���%���%���,�,�� ���� ����������(���� ����� ������ ��( ��%����������� ���,���� �+���(��,(�������( � ��( ��������� ��� �5������� ����� %�����,����� � ���,��5����( ���������(���������� +,+������ ����(��������������'+�4( ���6������������ �%�����,�������� ������% �� ��� ��,�,��( �:���� � ��8���� � �������� � +�4( �����, ��,������� ����,����������������� ����������������������� ������� �%�����,+�-�������,������� ���� ���)�����( �����2���(�(���� �� �����( �( �����) ������( ���(�,(�� � �������5����������� ��������5�����(������5,��� ������������%%+'������ �� ����� ����������0+'+�9� ��%����%� ���� � ���������� ��%� � ������ �-�������� � ������������������������ �+�)(��(�(�� ������ ������� ���� ���%��,��� �����+��( ������ ���������� ��� �������,� ������� �%( �����,���%+�4( ���� �( �����)�� ��������� ������������ �������� ����� ��)�(�� � ���(���������� � ����%������� ��� �+��������( %( ������ ���)� ��(�� ������5�����������;���������!""<'+

$5��� ���������( ����������5���������������������� �������������%�������( ��������� ����� �12����=��������>,����+���

�� ����������������%����,��)�,�)������������� ���������������� ��) � ����� �+����������/ �5��� ��,�,���?"������� ���� �� %�� ��( � ������( �������� �+�4( � ������ �<�� ����!��(�������!3�( ���+�4) ���% �� ���� ������)������( ��� �����( ��!"��% �� ���� ������� ���)(�� � �% �� ���� ��������(������� ��������������������,+�9 ��� ���5������� ������%��������%�����( ����������� ��� �%����� �����%�����,�����( �(�����% ������%(������,����� �� ������%�����,��� ������� ��(�%����� �%� � ������������������+�4( �(�������� �����( � �%��������%�������� ���� �������������%���������� ���� ����,����� ��������������������� ��������� �� �� ���(����������� +���) � ���( � �(�� �� ���� ������ �(�� ����,������( ������%������%������(�,(���%��������%������( ��� �+

������ ��%��������%������ , �����5������ ����� �����������

���+�6+����+���+�� �+�7 �+�9=�����+����+�!"�!�����?'��!.2�?3

�!.

������������������������ ����� ��������������������������������������������������������������������������������������

�������������������� ��������!���������"���#���$��������%��&��'���(��)��(���*�����������������������������������

��������������� ������� ����������� ��� ��������� ���� ������������ ������������ !���� ����������"����#$�� ��

�������������� ���������%���&�� �������'����� ������������ ��� ��������� ���� ������������ ������������ !���� ����������"����#$�� ��

�( � � �����������)������������������������������*���� ����+�� � ���,��-�(�.�� ����� ���������/0�� ����� ������"����#$�� ��

,���� �����&�&����0���/112���� �����&�&���0���/1�2�����%����3�%�������4���/1�.

��56��6��� 6� ��6����6�3��6��7�� ��6��� 6��/1��++�,8.�18!)144

�*������ �9����������������:����������������������� ������������ ��������������&�������� ����% �& ������������% ��,�;������3;.�����%������ ��<������&� ��� ����������&��� ,1�/)14/��.����� ����&������ ����� =���,8/)4/��.�����6����&�������<�������������>&��&���:������ ���������� �� �����������������������&���&��<� ����<�������������:�����:������ �������������<� ������������������������������������:������ �������������<� ������&���&�����6�; ������ �����:�� ��� ������������������ �� �����������6������ ���������������<���� �������&�����%�������&��%�����������������&������6�9���������������� ����<���������������&���;�<���� �� ������ �����������1?�������� ��������������������:�������������%�������� �� ����&������� ����� =�������6�+��������������>&��&���:������ ���������� �� ���������&������� �������% �& �������������% �������%������ �� ����&����������� ����� =�������6

(��,���-��������������� ���������&���&��������� �������������% ����%������ �

���������

������ ����������@�����;������A���� =�� ����!/B������%�%&��� ��� ���� �����%������������ � �������� � �������� ��������)�����������,@;A���//�.6�9� ������ ���� ������<���< ������ ���� �� ���� ����� ���������&�4/�///�%������%�� ���,+��&�������//�.��������������4///��%�� �������&������� � �����,���������6���//�.6$���� � �� �������������������&� ����������%�������<� ��������������� �������� �������� � �������� � ��69� ����%���&�� ���%���������&����� �������� ����� � �����%������ �������� � ���<����������<�������� ������������� �������� �� ������ �������,��%��������6���///2��� �����1CCC.6�;������������������&����� � ����%�������������������� ����&�� ��,D���&)D�����&��1CC/.��&�����%�����6��������������� �� ������ � ����%�����&������%�%&��� ��� ��������&������"���#$�� �������&��� ���� � �� ��<�����,-#E&��������//!21CC .6��&����������� ������������������������� �������&���������5�� ������% ��%���������������,-#E&�������//!2�1CC 2���������&�������5F)��� ��1C?C.6�$�� �&���� ���� ������ �����������������&�������������������������� � �&������������ ���� �� �����������������,(��<�������6���//4.6�9���������%������� ��������� )

�&��������� ��%��������������� ��������� �����%����� ����%�&��������������� ���������5��� ���,����������6��/112�$����������; ��������/1/2�'������� �����6���//12���� �� ��������� 1CC4.6�9� �� ��&��<��� � ���� ������&������������������������������ ������������������ ������������������������% �& ������������������� �������< ���������6

%�������������%��&��

�������������� �9������������������� �<�������������������������������������&������� ���������������� ���% ����� �����"����#$�� ��������&����� ������ ��������������� �� ������ ,���� � ��� �����.� �� ����� ���� ������������� ����6�����&������%�� ���<�����%�� ���� ����������� ��������������� ���� ���� �&����������&�����?40�6

��������������&���.������ �9�������������%���������� ��<����� ������������ �������%����&���,8/G��H�.�< ���&��:%��&�������&��� ����������&������������ ����%�<���<� ���<���� � ���� ����������%������ /����������<���������������%�����������4��� ��<�����,1 //���.���:����,? /���.��������������C H�,? /���.�� ������&� ���@������� �����%�%����&�����1����������������� ������ ��� ��&��� ����������� /�H��&�� ��������������6I�&��������������%�������2�')�� �7����&����=J����6�

18!

������������ ����������������������������������������� �������� �������������� �������� ���� ������� ��������

�������� �!�"����������!� ��������������� � # ��$ �� � %&�' ����(�� ���)&�*����� �! � � ! � �&� !��(� ���(���� ���*����� �� � �������������� �������������������������������������� !��������" � #���� ������!� ���!���$%����

��������!��&�����"�������'()***)�%����$+�� ����,�����������������!����������������� �������������������-�������� �.�/ ������0#���������1�

�����'2***(3������.����4�����������������5������������,�������������� ��"��� ������.�/��� �'((**6(�4����� ������4����������!���7�� /����#8���������04����� ��������#������������������ 1�9:�

"��� ����� ����� �����'2***6;������.����4����

0��������%������6<�6*(6=�������#�����6)�6*(6=��������"��������62�6*(61

+�����������

5��������������� ����������������������� ���8������������������>?����� ��������������� ������� ������@�����������������������������������������������������������0"/��7�())3=�������������())*1>

� ���A��������������������������8�������������������� ������������������������������������������>����������������������������� �������������� ���������� ������������>� �������������������������������������������������������������������� �������������������� ���������������>��������������� ����� ���������������������������>�/���������������������������������������������������������� ����������������������������������� �����������&����� �����>"�� ���������������������������

������� �� ��������������� �� �������� �����������������05��� ��&���7��������6**(=.������������6***1>#�������������������� ���� �������@������������������������������������������������� �������������>���� ������ ���������������������������������� ��������������������� ����������������� ����/�� �����������/���������������������������������� ������������������8���������>"���������������������������������������������������������������������������������� �� ��������������0����7�����������6***1>�/�����������/�'� ������ ��� �������������������������� �����0�������� �@�� ��� ���1�/ �� ���������������������&����� ���� 0.� �())<1>� �� ����� �� ����������� ������������������ ��������7��������������� ������������������ ����� ���������0�� �����"������());=���������������� �())9=������())91>� ���� �� � ������ �� ��&��� � �������� 7��/� ��B#�� �������������������=�'����C� ��7 ��A��;D�����>���

()��� ��,�������������������������A����������7��� /�� ��������������� ������������������������������������������������������������/�� ��� �������������>.����� ����������������������������������/�� ��������������������������� �������������� �����������������������/� ������������ ��� �����������������/�� ��������������������� �����>� ������������������������������ �����7��� /�������� �/���������/� /�� ��������������/�� ���� ��������������������>#����� �� ����������������������������� ���������� ������������� ����������������(***��,E7����������������/�� ����������������������������������������� ����/� ����������������7��� >� �����������������������������������/��� ���������������������������������/� ��������������������������������������������(***��,E7���� ���������������������������������� �/������������������/�� � ���������������>� ����� ����������������� ���� ����������������� ��������@� �����/����������������������� ���� �������� ����� ��������� �����>4������������� ������������������������7��� ��������������/�� ����������������/�� ���������� ��������������������>

'!�����-��� �������������������������������� ��������� ������ ��������� �����

��7>A>���>���>���>"��>!C����>���>6*(6..�0<1(3:'(:<

(3:

Detoxification of Aflatoxin B1 in Poultry and Fish Feedby Various Chemicals

Alim-un-Nisaa*, Naseem Zahrab, Sajila Hinaa and Nusrat Ejaza

aFood and Biotechnology Research Centre, PCSIR, Laboratories Complex, Ferozepur Road,Lahore-54600, Pakistan

bPakistan Institute of Technology for Minerals & Advanced Engineering Materials,PCSIR, Laboratories Complex, Ferozepur Road, Lahore-54600, Pakistan

(received February 22, 2012; revised June 20, 2012; accepted July 13, 2012)

IntroductionAflatoxins are harmful substances that can cause severehealth hazards to human and animals due to whichmany economical problems originate. The contaminationof animal feed with mycotoxins represents a worldwideproblem for farmers. These toxins originate from moldswhose growth on living and stored plants is almostunavoidable particularly under moist conditions(Alexander et al., 2001). The fungal species Aspergillusflavus and Aspergillus parasiticus are very harmful forfood and feed stuff, therefore the removal of theseaflatoxins is extremely necessary. A close relationshipexists between the quality of feed and the quality ofanimal products offered for human consumption.However, feeds can also be contaminated with a widevariety of compounds (Frank, 2011). Various chemicalshave been used to kill pathogens in feed and feedingredients. The detoxification effect of citric acid wasinvestigated in rice samples and the results revealed theeffectiveness of 1N citric acid in reducing aflatoxinslevels in rice samples (Safara et al., 2010). Somecountries adjust aflatoxin levels in their foods e.g. USAand EU (Europe Union) permit level lower than 20 ppband Korea and Japan 10 ppb (Chiavaro et al., 2001).The alkali treatment using inorganic or organic basesis an effective and economically feasible method ofdegrading aflatoxins. Treatment of corn with less than

0.5% calcium hydroxide decreased aflatoxin levels by43% and boiling 1600-ppb naturally contaminated cornwith 3% sodium hydroxide at 100 °C for 4 min decreasedtotal aflatoxins levels by 93% (Hamed, 2005).Detoxification of aflatoxins in the poultry mixed feednaturally contaminated at the level of 775.25 ppb wasdone using chemicals, viz. sodium bisulphite and sodiumhydroxide (Singh et al., 2003). Aflatoxins can bedestroyed with calcium hydroxide (Bauer, 1994).Reduction to less than 10% of the original AFB1 contentwithin 2 h was recorded when the medium contained1.5% potassium permanganate, 2.5 and 5% chloraminB (lachema) or soda, and when there was 5% ammoniaheated to 60 °C, 5% sodium hydroxide, potassiumhydroxide or calcium hydroxide, or 50% chromo-sulphuric acid (Dvorak, 1990). Several compounds suchas activated charcoal, aluminosilicates and processedcell wall of Saccharomyces sp. (esterified glucomannan)have shown to be effective as mycotoxin adsorbents inpoultry feeds (Vieira, 2003). Chemical detoxificationmethods such as use of hydrogen peroxide (Sreenivasaet al., 1967) and calcium hydroxide (Coker et al., 1984),sodium hydroxide and ammonification have beeninvestigated. Ammonia treatment was found to be themost effective and practical method for use in largescale feed processing plants with 95% of successfuldetoxification. Aflatoxin-contaminated commoditiescan be detoxified by a variety of methods based to someextent on economics and the physical and chemical*Author for correspondence; E-mail: [email protected]

Abstract. In this study various poultry and fish feed samples were initially analyzed for presence ofaflatoxin. All the samples were found contaminated with aflatoxin B1 only. Contaminated samples weretreated with different organic and inorganic chemicals to detoxify aflatoxin B1 in poultry and fish feedsamples. The maximum reduction in the aflatoxin B1 concentration was observed with 0.5% HCl as 14.20ppb to 2.09 ppb (86.50%) in the poultry and 69.26 ppb to 10.46 ppb (84.89%) in fish feed samples.

Keywords: aflatoxin, detoxification, chemicals, thin layer chromatography

Pak. j. sci. ind. res. Ser. B: biol. sci. 2012 55 (3) 154-158

154

Qualitative Assessment of Bacteria and Fungi in the IndoorEnvironment of Hospitals of Islamabad, Pakistan

Fouzia Hussain*, Subhe Sadiq Tahir, Naseem Rauf and Afifa BatoolEnvironmental Analytical Laboratory, PCSIR, 16, H-9, Islamabad, Pakistan

(received October 31, 2011; revised June 29, 2012; accepted August 10, 2012)

Pak. j. sci. ind. res. Ser. B: biol. sci. 2012 55 (3) 159-165

Abstract. This study was conducted to determine the health risks in the indoor air of the four governmenthospitals of the Islamabad city, Pakistan. Four different main wards, i.e., general male/female surgical wards,children’s ward and microbiology laboratory were included. The sampling was done in the summer seasondue to the possibility of maximum recovery of microorganisms. Results showed presence of bacterial andfungal pathogens in the air of hospitals especially in surgical wards of all hospitals. Lowest bacterial countswere recorded in microbiology laboratory. Among bacterial isolates Micrococcus and Staphylococcus aureuswere abundantly found in all hospitals as 22.09 % & 21.2 %, respectively followed by gram negative groupof bacteria i.e, Enterobacteriaceae spp. (Escherichia coli), Pseudomonas spp. were found to be lowest as6.5 % of the total bacterial load in all hospitals. Among the fungi Aspergillus (fumigatus, niger, flavus)recovery was the most in the environment of all hospitals with the value of 27.7 % and Tricosporon wasobserved lowest with the value of 1.15 %. p- value for total microbial load among the hospitals sampled wasnot significant.

Keywords: bacteria, fungi, hospitals, indoor air.

IntroductionHospital plays significant role in the spread of commonnosocomial infections. Bioaerosols are complex mixtureof microorganisms, microorganism fragments, andby-products such as molds bacteria, endotoxins,mycotoxins, and volatile microbial organic compounds.Exposure to these microbial fragments and metabolitesmay result in adverse health effects (Kalogerakis et al.,2005; Nilsson et al., 2004).

Bacteria, fungi and yeast are frequently found in indoorenvironment and air and act as a medium for theirtransmission or dispersal. Inhalation, ingestion anddermal contact are the routes of human exposure toairborne microorganisms (Halide et al., 2010; Ki et al.,2010; Fleischera et al., 2006; Marta and Jacek, 2006).Immunocompromised patients may develop pneumonia,asthma and bronchitis by inhaling spores of Aspergillus(Denning, 1998). Up to 80 % of the nosocomial infec-tions are caused by microbes brought with the patientat the time of admission in the hospitals. Remaining20 % of nosocomial infections result from contact withmicrobes within the hospital or health care facility(Jeffrey, 2004). The number of airborne microbialorganisms increases due to contamination of air ductsfor heating, ventilation, and air conditioning systemwithout its regular replace-ment (Anderson et al.,1996).Microbial population level can be influenced by

many other factors and it increases by organic materialssuch as food, flowers and fruits brought from outdoorenvironment by visitors for patients (Schabrun andChipchase, 2006). Symptoms of dizziness, headache,nausea, irritation of eyes, nose, and throat are due toexposure to unhygienic indoor air quality (Fischeret al., 2008).

Furthermore, controlling microbial load in air of hospitalsmay play a role in the prevention of cross infections.The aim of present work was to study the indoor air forairborne bacteria and fungi of government and privatehospitals in Islamabad in areas such as male and femalesurgical wards, children’s ward and microbiologicallaboratory and their identification at their genus level.

Materials and MethodsThe present study was carried out in different hospitalsof Islamabad city, Pakistan. The samples were collectedfrom four different units of four hospitals. These includesthe male ward (surgical), female ward (surgical), childrenward and microbiology laboratory.

The sampling was carried out in summer season in themorning between 10-11 am because high level of activityduring these hours in the hospital. Nutrient agar plateswere used for the isolation of bacteria while potatodextrose agar (chloramphenicol 100 mg added in PDAto suppress the bacterial growth) was used for the*Author for correspondence; E-mail: [email protected]

159

�������������� ����������������� ������� ��� ��������������������������������������� ��������� ���������� �!�"#�����$������%���� ���&���'������������������#

�����������(��������)�����������������*��+,�*,������������ ������������������������������������

�� ������������ ����

!�������"#���$%��&''(������"#���$����&'�(�������"������&'�)

��*+,+���+�"+���+-��+ .���$+���+�&'�--�!�)'//0'/1

2����"��$$��������"��"���"���$����"���"�� �!�#��) "���"�� �������� $��� ��"������ ��"���������3�4���! ���*� ���������'%�'(5�����"�������� '%67)� �������� ��� ����������� ���� �������$�������������� $���+�������� $���������� $����8������� ����!���33)���9�"�4�"�����333!-������&&1)+-��$$���������������� $���������"���"��������$����������������������$����� $��� ���� �� ������ ���������� $��� ���������"�� �����':�� ���������� ��#��"���"���������� $�����"������(�$����$$�"�#��"���������33!���8����"��*��'%77)�"�#����������"���"������! ���"�'%1')�"�#������������/���"������+

#�������� $��� ��"������ ���������� ���� �� ���������':������������������������� $����������� �9���"� ��� ���� �� ��"�����+ #$���������� $�������,���������$�����"� �9� ������9�"�������������������������������������������"���������������������������!#,������������&'�(�����"���������&&�)+#������$�����

������ �0�9�"�4�"�������0������"�9� ����"$��"�$����$������$�����������$�+

2��"�����������#���������� $�����"�������� ������$$����������"�����������$����������������������� ���������� !;����� '%�%)+ #$������������$��������������4����������������"!<����������'%/7)+

=��$���� $�������"�� �������������"����9�������""�������������+��$����������"�!"�������)��������$����$� �"���$� ���$������"�������"������>8�� �������!?�$�"-���������'%%�)+2���� ���"��������$���� $�������"�� ��"����������������$��"������"��9�"��������������$����!@$$�����" ����$��9�'%%6)+

2�����$���� $�������"�� ��"��������"���$�" $������ ����" � ���� ���"�8���������" ������ ����05����"�� ���$�!A� ����� ����)+=�����������$����"���������� ��$����8������� ��!���$���������+?)�"-� ���������$������!-�+A���������������-#)+

<������$��������!�������������)'�0'68��*��8�� �� B#����������������"���(@0���$.����������C�����+���

�&�� �����2����� �����������������$���� $�������"�� ��"���$!� $����$��"�)�"������!���$����$����)�" $������ �!���������)��������������������"��"���"���$����"���"�� �!�#��)����������<������$���������������������)8����������"��"�� �������������&+&&�&+&'�&+&��"&+&�� >�&& ��"�8�� ��+2��������������"�� �8����������"�����1+&�"�7D����'6"�����������$���'���/�"'6"��!�)��$$�8� �"����������������"�� +2��������8������"�������"�� �����������������������$!"���)+����$�� ������$�!�E&+&�)��������"�#��0"�����������������������������"���"������8����������$���������!''+66F&+1�)������"���������������&+&�� >�&& ��"�8�� ���"������9��"����"�� �"����������+2�����������4�������������$$�8� "�� �"����������8����� �������8�������"������!"���)(��9����������8��������"����/��"��8����"��$������'6��"��+#�&+&�� >�&& ��"�8�� ����#������������!��>A)���&+��F&+�78���������"����/��"��8��� $������ �+�����������$�������������������������������4��������"�� !����/��"�����"����������)8��������"��.5$������ �G����$G��������+����������"��� ������������+

.��, ��/�"���$�"�������� $������ ���������������#������� $�������

� �������������

'//

���������������� �����������������������������������������������������������

������������������������� ���������������������� ����!����"������������

����������������!����#������

������������ ���������������������������������������������������������������������� ��������������������� !���� !�����������

������������ ������������������������������������������"�����

#����������������$%�&%$$'�������(��$)�&%$&'��������*�����$+�&%$&,

-�./0/���/��/���/���/12���!/���/&%$&$$�#3,$4&5$46

������ �% �����������������!�������.��0�������7��������!�8��������#������������!��������,.�7��������������������7�������������/9���7�!!��������������������������������������������!�������0����������!�7�!!���7���������������������/1�����������!��������7����!������������7���������������!��7����:�������������������������/ ����!����7�������������������������#$%%2%�%2$%%�4%23%�3%24%���+%2+%,��������������/�����!�����������������������#!���,7���������������:��������������)%;<���!������/����!��7����������������������������!!��!����/9��0������!��7�����!�8������������!��!��!���!���#;1��:,���������!��������#99*,���������������5����������������������#(<,/�������������������������!��7�����������7�������������!0��#�������0��#*-=,/

#��!���&����������������!���������������������0��������������

9�����������!���������1�����#�����������������/,���7���!����!�8��������������������������.����������!������#��������>�!!�����&%%&,/ ���������������������������������������������������!��������������������������7������!��!���������!���������#>�!.�������!!�&%%4,/���������!��!�������������������!�������7����������:��!!������������������!����������<�����#>�!.�������!!�&%%4'*0������ /�&%%3'(���������� /�&%%&'��������>�!!�����&%%&,/ ��!������������������������!�������!���!���������������������������8���������!.����������7�����.���7����#*0������ /�&%%3,/����!��#���������������/,�������.�7���������!������!!��!���=������#*����0��&%%?,/

=�������������������!���������������������������6%@������!��!��!���!���������6+;1��:/��������������������������������!!������� ������� ���� ����� #A���B�5(���B�8��� /�&%%&,/9����0������������7��.����������������!�������C��!�����0��������������������#�����������������/,����!�(�!������������!�������#���������������/,/����!�������������)&/3@���������&/D@�������&/%@!�����6/&@������$@���4/?@ ����! ������������� ��6/4@ ����!

��!��!� ������/9�� ����� �� �!�� ���� � �������#)+E�F$%% �,� �������� ���� #36��F$%% �, ����!�����!����!!������������#%/+E�F$%%�,�������!���#%/%4E�F$%%�,#*����0��&%%?,/

��������������% ��������!����������������������������#!���,7���������������������!����!����������������������������0���7��!���������� ���������! �������7�� ��������� ���� �!����������������!����������������������/

9�� 0��7������������������������������������.���� / #&%$$,7����!���������������/*7�������&%%�7������ �� �����!��� �������!�����������������#$%%2%�%2$%%�4%23%�3%24%���+%2+%,���������������!�������������������!�/ �����������������!�������7������������������D%@�����7�����������������������/*���������� #!���, 7�� �����7��!� ��� ����� ��!���������������������������������)%;</9��������7����������������������������!!�7����������������������������������!�������������/9��0���7������5��!!����������!�8��0�������!���������!����!����������7�����������8�������!������/9����������7����������������������������!��!����/

���������'��������%9�������!��������#99*,����������������������!��!��!���!���#1��:,���!��������

G*��������������������'�5���!2�����.�H��!���/���/�'�����&%%$H�����/���

�(���)����� ����

$4&

�������������� ���� ��� ������������������ ���������������

��� �������������� ��������������������� ���!"#$�%�&'��!"($�� ���%��&����������� ����)������� �������*���&���&� ��((���(*�����+��*����,��*�-���*������������������.������(���/� $��� ��"�0(��1(�(2(����2�*��"� �����������(��**��,3�����"� �

������4���������55� *���$����������� �*���&��� *����6����"���������7��������������� ������(�� ���������(�����������.��*��8�9�������������������� ��

�����*� �*� ������ ��*�&�3����:�3����������� ������������'�����*��!.�.�'%�1�*��5����'��'�����..�&�(��+#� ����(�� ������5��;����� ���� ��������**������5��; ��

&�*� *���5��5��*#�����������(���� �����5�"���'�������� �(������������� �<��������� ��-���(����(���*�+0�;�������0����9��� �=

��� �����#�.��( �����5�� �����5�,�6*���������� ���������<(�5�8����������������(�� �������� �1������($�������;�;�:�2�*�+�<������1�����9�������������������� ��.� �*�1��� >�

�*(���������*� � �$����������*�5(������ *�3�*����5������������ �����������*9( ���'���� ����� *����������-(�������*������������ �����6�������������������������$���(�� ������$(�����1��������(�� ������;�1��� >�

��*��.���*��*�� *�3�*��5�+#*�� *�5� �*�������������*��5�����������������' ���*���(�� ���<���������� ��"�� ������8��9(������������0���(��"�� �� ?�

+55� *�5���"��� ������,�*�9�� �*�������)�������&��*�� *�5������������(���5(��.��� ������2�����0( ������ �*�3�������������(�� ���1� �(��.��� ?@

-����� �+�* ����A�����(������5�.��� *��*��������*���B����:��2�*�'�(��)�����+2��2��� ��

���*�' (�� �*��

��*����� �� ����2����� *������.���*���;(2��" ��(���2����.5� ����*���+�6������-������ 2�.2� �(26(�+�( �������*���7�(��9�����B$��;���"� �������;��B�������������$2�����B���6� � �@

��2��*���/(�����5�� ���*�5� �����.��(�*�����"����� ��������������� ���� ��� ��

��( ����'�*��*�

�������������/(������(�(�*������

+55� *�5�A���*�"����(��.� ����*��������6�*�����*��*���&�����"� ��4������������9���*��7��������������� ���������.��*��8�9�������(�� ���������(������������������� �C

�������*�� �+55� *��5������������������������:��5�:�� ��*����*���,�6*��5A���*�����,�����,�� ������*��'�*���$��-�� �4�������(����� ��.$���� ��������;�����$� @�

&� ���*��������(*����*��"���������**����5�:��3�����*� �D����������"*��5���� *���:��( ��(���������:��( ��(������*���� ���B��������$�(�����B�(�*������$������.�6(�����(���,(�����)��������,���������� =�

+55� *��5�&�55����*��(� ���5�B����� �A��*������� �*�����*���,�6*������� �������( *���5�1���5�!�������������������:�%���������$������������������ ��)��������������� (��,��������������(�� ���. � (��9�8 E�

&�*�� ���*���5�:��������'�� �( ����9���+����$��,�����*��-��� ��+�� *�*��� ���* � ��$���*������ *� �*�������+�*� �*���5�*���&�����.�*�2�.����*(����������8(�������2������0(�������;� ���-��8��� ���1�����&(������"����9��� �7; ��"�����������������(������������������7��F���� C>

'�������������������� ���������)����� ��:�3����&(��*�9�$����;�*���5�*�)�����*������(� ��*�$������26� ���(��*���9�����������( ��+����9�������/���&������������������2����*�������� ���

���5������* ��5��,�� � �&���+#*�� *���5� ���6�����( 2���-��*�����5����� ���������������������!,����5� ��%�5��,���*� ��*(����������*�+������*�� *��������������8��������$���������� � ���(�� ������� ��6�������"��;��;�;������� ��E

���*�' (�� �*��

+������+#������������ ��������� ��!'����3��-��2��%� ��������������'���*;�7�����)�����:�3����5��� ����;�*��"�� ����2��������A���(�B��*(����1����� ��?

����������>���3� $�����&� � $��������

+55� *�5�-���������������������� �*�����,�6*���4���������F(���*��5���;��!��������:�%�(�� ���)������������������-������1��������(�� ������� ������ �-��;�����(�� ���A���� ��=

&�3����*������������5����������G�!������!��*��� ���%'��*�������*��2( ����� ������"�0���2�� ��"����2������� ���

��

������������� ����������������������������������������������

���*(���5�����(������*��5�.��� �$�����������2��*������� ��� �� ��C

+55� *��5�"����#�� �#������:�����!�����5��� ���%���,���*���)�� *�����( +�*���������*(�*����,���*������������� *���:�3�������-� ������(�*����. �*(���B3���� * �;���"�*����(�, H��� �����1(�2(�155���)(�H��������������)���H�-��3��� �>E

,�6*�����5� �� ��5�/(3���������25����$������������!-��2��%��"���� � ��*�5�-���������6�*������*�������&��*��(���� ��*���6�*��&��*����'����(������*����5�"��������������0���9�������1��� ���*�55���)(������*�������������������� �����������)���(��3(����( �?�

&�*#�5� �*���5��5��*#����������(�*�������-����-����$������(��'�� � ������ �(������������� �<��������0����9���������(���*�+0�; ��?

F(���*�*�3�������� ��*�5��� *���������-(�������*���.����+�3��� ��*�59���*����5�.��� �$������2��*��-(;���9(��������($�������8�)����������� �"�(5������5�5����*� ��C

���*�' (�� �*���

+55� *��5�� ��B����9����� �� � �&�(�����+��*�� �*���� *��� �����������&��( ��*����9�������&���������!+�'���@�?�>%�� *�3�*��5�A��*����$���"�*��!%��� ���%�� (���'�� �;���B�(��������(�*���� ���2��76�26�� �@@

+�*� �*���5�9��3����*����������� ���������*��������(� ��5�9��$������ ����7�������'����3�� (����&�������-�����&��$������� ��$$�������"�(5��� �� �@C

������ ��*�5����� *���F(���*���**��$(*���5�/� �-� (��*���5� ��$�$�9���( �-�(�*����2�� ��B�����2���$������� ���������B�����2������6( ��)����B�����2���������5������B 6( ��1���� �=�

'��*�*��5���( �������������������� ���!�����>% �

�(*���.���#�5���( �������������������� ��� �3

�($0� *�.���#�5���( �������������������� ��� 3�

���

������������� ����������������������������������������������

������� ���!����"#$�%&����'���� ����!��('�'��������"#$�)�� ��*+������ ����� �,+����"�$)�� ��'���-� �������"�$)��.!� ��/�.!�� ����"�$���.!� ������!����"#$��&�.!� ����+0����"#$�%&�����������.!������"�$��1��2����3+�����!��+�����"�$�%����������4�+�5����"#$�#6��������.� ����"�$����������.� ����"�$�&�������*.������"#$��)�����'� ��.!� ����"#$�1����.�.������.�����.�'������"�$�������00��7���!����"#$�1��!����� �������"�$#��!!����.��.������.��+!�������"#$����� ��������� ������"�$#��� ��������8�����"�$��6���.� +���.��/+.�!!� ����"�$�����.� +���.��/+.�!!� ����"�$�&�,����/+.�!!� � ���!����"�$��6�3�3��/+���.������"�$#����������0�0�����"#$��&��*+!��9������������"�$���������.�3������"�$%�:������;���.����"#$�%&:��*������.�����"�$���<=�3�� +��������"#$��1<=�3�� +��������"�$�)<���������4�� �����"�$��<�,�������0��!������'����"�$�%<�+!��.��;�� ��������.+�,+����"�$�%;��3�� ���!����"#$��);�� �+���.�!!�����"�$�);��>�����4����5����"#$�#6-�����/ �� ���!+�����"�$6�9�8��.�.�/+.�!!� ��!�!+�����"�$6�9��.!���:+� ������������"�$&#9�������<��������"�$���

9��������=� ����"#$�1�9������=�������"�$�)9������=�������"#$��19+�������;�+3������"#$��&9+������� �8�����"�$1�9' ����'� ���.���8����"�$��9' ����'� ���.���8����"�$�&����.�!����!�����"�$%�����!���+���0+�����"�$1%����!��/+.�!!� �7�!�+�����"�$1%7����!�����0� ����(!�,+!�����"#$�)�7�������?���+�(���+� �����"�$��17.��� ��;��.������"#$��)7.����;����8��.!� ����"�$&#7.����/+.�!!� ��'�3����"�$#�7.����/+.�!!� �/�.��+���.����"�$#�7.����/+.�!!� � ����!����"�$#�7.������!����!������"�$#�7�00���7�+���+����"#$�#6/�=+! ����.���������"�$1%/�.�������+�-�!5����"#$�#6/��.�������3��3�3����"�$��6/�������@+�0�8����������"�$#�/+��.����������������"�$&# ���!��/+.�!!� ����"#$��) ��������!A+�����"�$�) ��������!A+�����"#$��1 �3�!���.���.����=+ ������"�$&#(���3���9��������"�$�%(*+��� ���(�� ������ +��.�����"�$)�(�+�.����!+����.�!�3������"#$�%%(��*�������.���� *�3�����"�$�%(�.�*,�!�.���*���.�� �����"�$�%('�'������� �,+!��4�'������"#$�)�('�'�������!����� ��'�����"#$�)�B� ����.�.����AC�A����"�$&#�� .�����.�������=�����.!�����"#$�����.!������!�����"�$1���=+����+�����������!������"�$���!�����7+�+�+������������"�$������� � +*�����-�>�� �����"�$�

��2��*���/(�����5�� ���*�5� �����.��(�*�����"����� ��������������� ���� ��� ��

��( �����(*���.���#

�>

���.� ��C3!�����"�$&#��+0�� ����!����"#$��&��.!�����=� A+�A����"�$1��.����7����.�9����������"�$#���0��3�����������"�$����0��3��/+.�!!� ����"�$����'�����'�����4+�������"#$�1�.�.��,�.� ����"�$#�.�.�������/ ��.�'������"�$6�.�!�!���������"�$��6� �8+�����.���+���.����"�$&#��*.����!���>����"�$1%

�����=�������� ���������������������������������+�.����� �D

4�.����/+.�!!� ����"#$��)4�.����+�.��� �8����"#$��&4�.�����.�.��!�����"�$6�4.��+��>+����+����"#$�1�4�����-+�*���*����"�$)�C�+�*������������"�$�%C,��,����+������!� �������"#$�%%?����!��/+.�!!� ����"#$��)@�.�����/+.�!!� ����"�$1�@�.���� ����!����"�$�)@�.���� ����!����"#$��1@�.����E��.�A<A����"�$#�

>

����+ '��0�2������+��2�������0�����!��� ������������������������������������������������������������������������������������������"#$��&�0����D���������2�+���'��� �0��.�0�� ����������������������������������������������������������������������������������������������������������"#$��1�0����D��������� �.������ ���������0�������������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$�)������2��.���00�����0��������������� �����������0����.����������������������������������������������������������������������"�$%����!�.��'��� �2�'.�2.��'������� ��� �����������"��D��$�:��� �����������������������������������������������������������"�$�����*����!��!��*����������������������� ���������������������������������������������������������������������������������������������������"�$�%�����������������>��'��0��D�����0��!������������������ ����������������������������������������������������������������������������"�$1�����0+�*������>�������0����������������������+ ������������������������������������������������������������������������������������"�$#�����!���������� �����0+�*������>�������0�������������������������������������������������������������������������������������"�$#�������!�����0������� �8+����'�������+�����0�=�!����������������������������������������������������������������������������������������"#$�)����!�������2������2����!���'�0���.����**�����������������������������������������������������������������������������������������������"�$&#��������������������������������������,��!�2�2+���������������������������������������������������������������������������������"�$������������� �0+�*������.���� ������>����!�����0�.��2������������������������������������������������������������������������������"#$��&�����������������������*����!��!��*��������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$�%���*�� ��.���00����0�����>��������*����.��!�����*' ����������������������������������������������������������������������������"�$1%������A.�*2�+!�0�+�����������!�����0�������������������������������������������������������������������������������������������������������"#$�)����0��!�!� ���0�*��,�.�������������������� ������������������������������������������������������������������������������������������������"�$#��������22�����������*��,�.��'��� ��� �8+����'��0�!��3����������������������������������������������������������������������������"#$��)�������22���������2� '�'��� �����00��� ��'� ��������������������������������������������������������������������������������������������"�$���� !�+!����.����**��� ����!���������0���� ��� � ���������������������������������������������������������������������������������������"�$&#��� ��>��+���� �������������!�������0�.��>'�!�������������������������������������������������������������������������������������"#$�%&���������������*��,�.�2��0��!�����0�=+>������!���0��.�������������������������������������������������������������������������"#$�1�:��!2���������� ��+����������������2��������0� ������������������������������������������������������������������������������������������"�$)�:���������0��0����D��������� �.���� ��������������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$�):����!���������0���� ��� �� !�+!����.����**�� ����������������������������������������������������������������������������������������"�$&#:���D�0��������0��0����D��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������"#$��1:�>�����'�����'�����0�!���*�� ��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������"#$���:�+*��D�!2�������'���!�����22���.���� �>���2� ���������������������������������������������������������������������������������������"�$���������������������!2�������������������������>��'��0������������������������������������������������������������������������������"�$1�<00����0�0�������22��� ��������22��������������������������������������������������������������������������������������������������������"#$��)<00����0�����>��������*����.��!�����*'� �����������������������������������������������������������������������������������������������"�$1%<00�����0���*����,������22���������������0� ���������������������������������������������������������������������������������������������"�$6�<00�����0���������������� ��E�����"�����0�������$���� �����������������������������������������������������������������������������"#$�#6<00�����0���!�������.'2�*�'��!�� �+*������������������������������������������������������������������������������������������������"#$�%%<� �A���������������'�����0��������0���.���: �������������������������������������������������������������������������������������"�$��6<���*'��D2�� � ����2�������*������"�����>��0�����$� �����������������������������������������������������������������������������"�$��1���������������������0��!�!� ���0�*��,�.���������������������������������������������������������������������������������������������������"�$#�<���!�������0�.��>'�!���������!� ������2������ ����������������������������������������������������������������������������������������"#$�%&�������������� �����������0����.��������������2��.���00�����0� �������������������������������������������������������������"�$%�<D�����0��!��.���������2������0������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$1�;��!�'�� �!��+����������2��.���00�����0 ����������������������������������������������������������������������������������������������������"�$%�;�����������!���*'� �����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$��;+�*���8+�������>��������!�����0����������� ��������������������������������������������������������������������������������������������"#$��&-��������+ �����0�0���.�����0����������������������������� ����������������������������������������������������������������"�$��6

��2��*���/(�����5�� ���*�5� �����.��(�*�����"����� ��������������� ���� ��� ��

��( �����($0� *�.���#

>�

-��������������00�����0���������������� ��E����� ���������������������������������������������������������������������������������������"#$�#6-���!��: ���D��������0��!����������������������������� �������������������������������������������������������������"�$��6-��,�.��� ����!����2�� +������0�����0� ���������������������������������������������������������������������������������������������������"�$6�-��,�.�2��0��!�����0�=+>������!���0��.���������������������������������������������������������������������������������������"#$�1��� ����������� �����E����00�����0� �00��������+�����0 �������������������������������������������������������������������������������"�$6�9+!����������2��.�*�������+ ������� ���������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$#�9'��� �3�������0���A����������� ��+��2����������,��!�2�2+�������� ���������������������������������������������������������"�$���9'2�*�'��!�� �+*����00�����0���!��������������������������������������������������������������������������������������������������������"#$�%%���������*����0�����������!���*'���������������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$��!�"#������ �!�"#�#�������������"�����$A7���2��0��� ���������������������������������������������������������������������������������"�$��7���2��0�������������� �+*��D�!2�������'���!�����22���.� ������������������������������������������������������������������"�$��E�� ��� �� !�+!����.����**��� ����!���������0����������������������������������������������������������������������������������������"�$&#E�*+!���+���� ����A��*+!���+��2������2������ ��!2������� �����������������������������������������������������������������"�$)�/��3��"���������E�$���00����0�0�������22��� ������� ����������������������������������������������������������������������������������"#$��)$��������������������*'��D2�� � ���� ����������������������������������������������������������������������������������������������������"�$��1/���*�� �F�%������� �>�����'�����'��� �������������������������������������������������������������������������������������������������������"#$���/�.���3�����������*'��D2�� � ����2�������*��������������������������������������������������������������������������������������"�$��1/� ������2�����������!�������0�.��>'�!������ �������������������������������������������������������������������������������������������"#$�%&/� �0�� �2�������0���*���!��: ���D��������0��!� ������������������������������������������������������������������������������"�$��6 ��������� �����������'��� ���������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$�& +����������������2��������0�� ��!2���������� � �����������������������������������������������������������������������������������������"�$)�(�*����,������22������������.��*��,�.��0�����0� ��������������������������������������������������������������������������������������"�$6��� '�'��� �����00��� ��'��������22�������� ����������������������������������������������������������������������������������������������"�$����������������+ '��0�2������+��2�������0�����������������������������������������������������������������������������������������������������"#$��&�.'������0����������������0���0��.�!��� ���������������������������������������������������������������������������������������������������"#$�1�����������������*��,�.�2��0��!�����0�=+>������!���0��.������������������������������������������������������������������������"#$�1����+����'�*��� ����2����� �2����������>������0�!�����������������������������������������������������������������������������������"#$�#6�������+��2�������0�����!��� �����������+ '��0� �����������������������������������������������������������������������������������������"#$��&��+���'��� �0��.�0�� �� ���D�0��������0� �����������������������������������������������������������������������������������������������������"#$��1����>��������*����.��!�����*'���00����0� �����������������������������������������������������������������������������������������������"�$1%��'.�2.��'��� ����!�.��'������� ��� �����������"��D��$�:�� �������������������������������������������������������������"�$��+2������0����������*����0�����������!���*'����������������������������������������������������������������������������������������������"�$��B+�������>��������!�����0����������� �;+�*�� ������������������������������������������������������������������������������������������"#$��&B+����'�������+�����0�=�!�0��!+���� �0��!�������A.�*2�+!�0�+���������������������������������������������������������������"#$�)��������00�����0���������������� ��E����� ����������������������������������������������������������������������������������������������������"#$�#6�� �.������ ���������0��0����D�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$�)����'��� ��� ������.����.�+� ������������ ������ �����������������������������������������������������������������������������������������"�$�&�������� ���������00����0�,.�������� +�� ����������������������������������������������������������������������������������������������������"�$�&�������� ���������2� '�'��� �����00��� ��'� ���������������������������������������������������������������������������������������������"�$�����,��!�2�2+���������.��*������������������������������������ ����������������������������������������������������������"�$������������������������������*����!���������������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$�%2����!�D��� +������0��!�!� ���0�*��,�.�������������������� �����������������������������������������������������������������"�$#��+ �����0��������������������*������.+!���2��.�*��� ���������������������������������������������������������������������������"�$#���� ��� �����������"��D��$�:���������2���������� �����������������������������������������������������������������������������������"�$�?.������ �*�����*��!��������2��.���00�����0� ��������������������������������������������������������������������������������������������"�$%�?.�������� +������2����������00����0� ��������������������������������������������������������������������������������������������������������"�$�&?������������������"&��������$���00�����0���!�������.'2�*�'��!�� �+*�� ������������������������������������������"#$�%%

�����=�������� ��������������������������������+�=����� �D

>��

Pakistan Journal of Scientific and Industrial ResearchPCSIR - Scientific Information Centre

PCSIR Laboratories Campus, Shahrah-e-Dr. Salimuzzman Siddiqui, Karachi - 75280, PakistanPh: 92-21-34651739-43, Fax: 92-21-34651738, E-mail: [email protected] & [email protected], Website: www.pjsir.org

EXCHANGE FORMWe wish to receive Pakistan Journal of Scientific and Industrial Research Ser. A: Phys. Sci: and/or Ser. B: Biol. Sci. in exchange of :

Name of Journal: _____________________________________________________Frequency: _____________________________________________________Subjects Covered: _____________________________________________________Institution: _____________________________________________________Address: _____________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________

Signature: _____________________________________________________Name: _____________________________________________________Designation: _____________________________________________________Date: _____________________________________________________E-mail: _____________________________________________________Fax: _____________________________________________________Phone: _____________________________________________________

- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

Pakistan Journal of Scientific and Industrial ResearchPCSIR - Scientific Information Centre

PCSIR Laboratories Campus, Shahrah-e-Dr. Salimuzzman Siddiqui, Karachi - 75280, PakistanPh: 92-21-34651739-43, Fax: 92-21-34651738, E-mail: [email protected] & [email protected], Website: www.pjsir.org

SUBSCRIPTION FORMI / we wish to subscribe to ‘Pakistan Journal of Scientific and Industrial Research’ Ser. A: Phys. Sci: and/or Ser. B: Biol. Sci.

The filled in proforma is being returned for compliance.

Subscriber’s data:Name: _____________________________________________________Address: _____________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________

E-mail: _____________________________________________________Fax: _____________________________________________________Phone: _____________________________________________________

Signature: _____________________________________________________Order Membership No. (if any): ____________________________________________

Tick the relevant box: Send invoice Bill later on Cheque for ...................enclosed

Subscription Rates: Local: Rs. 350/ = per copy; Rs. 2000/ = per volumeForeign: US$ 70/ = per copy; US$ 400/ = per volume

Payment should be made through cross cheque in favour of Pakistan Journal of Scientific and Industrial Research andmailed to the Director PCSIR - Scientific Information Centre, PCSIR Laboratories Campus, Shahrah-e-Dr. SalimuzzamanSiddiqui, Karachi-75280, Pakistan.