if=5.287 (2015 journal citation reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf ·...
TRANSCRIPT
![Page 1: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/1.jpg)
Журнальный клуб: 2 ОАПБ руководитель д.м.н. Тетруашвили Н.К.
ДОКЛАДЧИК: асп. БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют воспаление в плаценте и нарушают функцию трофобласта через интерлейкин-1 ассоциированный механизм: взаимосвязь с задержкой роста плода
IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)
![Page 2: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/2.jpg)
Актуальность исследования
• Доказана роль воспалительного процесса в реализации многих осложнений беременности: преждевременных родов, задержки роста плода, преэклампсии
• Описано не только воспаление, обусловленное инфекционными агентами, но и асептическое воспаление, в результате воздействия так называемых DAMPS или аларминов, одним из которых является мочевая кислота
• Мочевая кислота, накапливаясь в периферической крови беременной, является индуктором воспалительных реакций и триггером патологий гестации
![Page 3: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/3.jpg)
DAMPs – Damage Associated Molecular Patterns ПФАП – Провоспалительные Факторы, Ассоциированные с Повреждением
![Page 4: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/4.jpg)
Воспалительные ПФАП индуцируют образование инфламмасомы и секрецию IL-1β, IL-18
Shao et al. 2016/ NLRP3 inflammasome and inhibitors
![Page 5: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/5.jpg)
Воспалительные ПФАП индуцируют образование инфламмасомы и секрецию IL-1β, IL-18
Shao et al. 2016/ NLRP3 inflammasome and inhibitors
![Page 6: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/6.jpg)
Цель исследования: • Исследовать воздействие кристаллов мочевой кислоты
на воспалительный ответ в плаценте, нарушение ее функций и формирование задержки роста плода
![Page 7: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/7.jpg)
Исследование состояло из 2 этапов: I. Экспериментальная модель– введение мочевой кислоты и исследование воспалительных изменений в плаценте при ЗРП у крыс (проведено в Канаде) • Крысы линии Спрэгли Доули одного помета возраста 5 месяцев • 12 часовой день/ночь цикл при 20°С и неограниченном доступе к воде/еде • В опыт взяты 6/6 контрольных и опытных животных на 13 (из 21) день датированной
беременности • Опытным животным каждые 12 часов с 17 по 21 день беременности
интраперитонеально вводили мочевую кислоту в ФБ 100, 250 и 500 µг/кг • Контрольным животным вводили ФБ (фосфатный буфер) или оксанат калия (блокатор
уриказы) • В экстрактах плаценты определяли цитокины (IL-1β, TNFα, IL-6) (ELISA), на срезах
плаценты методом иммуногистохимии определяли IL-1β и CD68+ клетки, измеряли массу новорожденных крысят, определяли 5 процентиль.
• Для статистического анализа и выявления различий между группами применяли one-way ANOVA
![Page 8: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/8.jpg)
Повышение уровня провоспалительных цитокинов в плаценте крыс при интраперитонеальном введении
мочевой кислоты
![Page 9: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/9.jpg)
Синдром задержки развития плода у крыс при интраперитонеальном введении мочевой кислоты
Контроль Мочевая кислота
CD68+
![Page 10: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/10.jpg)
Уровень интерлейкина-1β в плаценте крыс при интраперитонеальном введении мочевой кислоты
![Page 11: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/11.jpg)
• II. Исследование плацент (n=9), полученных в результате родов путем планового кесарева сечения при неосложненной беременности (Великобритания (Манчестер), США (Йельский Университет)
• Экспланты плацент (в трех повторах) культивировали 4 дня при 37°С , 5% СО2 и обрабатывали
мочевой кислотой 100µг/мл 24-48 часов • 24 часа - 4% формалин, парафин, 5µм срезы, Гематоксилин+иммуногистохимия • Лизаты фрагментов культивированных эксплантов плаценты использовали для определения уровня цитокинов (ELISA, вестерн блот) • Методом центрифугирования в градиенте плотности выделяли клетки первичной культуры
цитотрофобласта (цитокератин7+) и анализировали прижизненно методом иммуноцитохимии после инкубации с 100µг/мл 24-48 часов
![Page 12: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/12.jpg)
Активация каспазы-1 при инкубации эксплантов плаценты с мочевой кислотой
![Page 13: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/13.jpg)
Увеличение уровней: Интерлейкина -1β в 18 раз Интерлейкина – 6 в 143 раза Интерлейкина – 10 Интерлейкина – 17 Интерферона – γ ФНО-α Уровни интерлейкина – 8, гранулоцитарно-макрофагального ксф не подверглись изменениям
Инкубация клеток плаценты с мочевой кислотой в течение 48 часов
![Page 14: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/14.jpg)
Апоптоз клеток цитотрофобласта под воздействием кристаллов мочевой кислоты и IL-1
![Page 15: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/15.jpg)
Выводы: - Кристаллы мочевой кислоты вызывают воспаление и дисфункцию плаценты, что приводит к задержке роста плода. - эффекты кристаллов мочевой кислоты реализуются через
интерлейкин-1 ассоциированный механизм и индуцируя воспаление и апоптоз.
- данная работа показывает, что введения провосполительного фактора, ассоциированного с повреждением, приводит к плацентарным нарушениям и задержке роста плода
![Page 16: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/16.jpg)
0
200000
400000
600000
800000
1000000
6 9 12 15 33
Инт
енси
внос
ть, о
тн.е
д.
Неделя гестации
норма
привычный выкидыш
угроза
VDAC1
0
200000
400000
600000
800000
1000000
1200000
1400000
1600000
6 9 12 15 33
Неделя гестации
TFAM
Содержание митохондриальных DAMPs в экзосомах из плазмы крови беременных женщин 6-33 недель
гестации
Исследование выполнено в лаборатории митохондриальной медицыны, Руководитель к.б.н. Высоких М.Ю.
![Page 17: IF=5.287 (2015 Journal Citation Reports)prof.ncagp.ru/upload/files/jc/2017/2017.11.28.pdf · БУЛАТОВА Ю.С. Кристаллы мочевой кислоты индуцируют](https://reader034.vdocuments.us/reader034/viewer/2022052000/601304244dfeee4a97376384/html5/thumbnails/17.jpg)
Благодарю за внимание