identification of halophile bacteria from salt deserts...

14
4 Biological Journal of Microorganism, 6 th Year, No. 22, Summer 2017 Identification of halophile bacteria from salt deserts of Iran and study some of their physiological traits Maryam Safdarian * PhD student of Molecular physiology, Genetics and Agricultural Biotechnology Institute of Tabarestan, Sari Agricultural Sciences and Natural Resources University, Sari, Iran, [email protected] Hossein Askari Associate Professor of Molecular physiology, Shahid Beheshti University, Tehran, Iran, [email protected] Masoud Soltani Najafabadi Associate Professor of Plant breeding, Seed and Plant improvement institute, Karaj, Iran, [email protected] Ghorbanali Nematzadeh Professor of Molecular genetics, Genetics and Agricultural Biotechnology Institute of Tabarestan, Sari Agricultural Sciences and Natural Resources University, Sari, Iran, [email protected] Abstract Introduction: Halophiles and halotolerant microorganisms are some of the extremophiles that are able to grow in medium containing sodium chloride and have adapted to life in salinity environments. Halophiles bacteria in saline soils by maintaining the food chain, decomposition of organic matter and improvement of soil structure and fertility improve soil conditions. Materials and methods: In order to isolate the halotoletant bacteria, from the halophyte rhizosphere, four desert areas in Golestan province were sampled. To check the Extremophile of isolates, their resistance was tested for resistant to salinity, drought, temperature and PH. Also, plant growth promoting traits were measured. Results: From forty-five strains which were isolated, three strains (G3, G6 and G14) have demonstrated the ability of resistance to 35% salt. Isolates G6 and G3 phosphate solubiliziation power of 301 and 201 ppm, respectively. Isolated G6 micrograms produced auxin 20/7 Mg/ ml. G14 and G6 grow at 50 °C, pH = 10 and osmotic potential -0 /7MPa. While G3 strain grows at 50 °C, pH = 7/ 5 and osmotic potential -0/49. The three strains of the bacterial genera Bacillus and Pseudomonas, respectively. Discussion and conclusion: In this study, isolates due to the growth in concentrations of salt and saturated salt tolerance of extreme environmental conditions and are likely halotolerant or halophile bacteria and its potential for use in various fields of biotechnology including biotech, industrial enzyme production and biological fertilizers for saline soil improvement. Key words: Auxin, Bacillus, Halotoerant, Halophile, Pseudomonas, Phosphate solubility, Salt * Corresponding author Received: March 1, 2016/ Accepted: July 3, 2016

Upload: others

Post on 31-Jan-2020

1 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 22, Summer 2017

Identification of halophile bacteria from salt deserts of Iran and study some

of their physiological traits

Maryam Safdarian*

PhD student of Molecular physiology, Genetics and Agricultural Biotechnology Institute of Tabarestan, Sari Agricultural Sciences and Natural Resources University, Sari, Iran, [email protected]

Hossein Askari Associate Professor of Molecular physiology, Shahid Beheshti University, Tehran, Iran, [email protected]

Masoud Soltani Najafabadi Associate Professor of Plant breeding, Seed and Plant improvement institute, Karaj, Iran, [email protected]

Ghorbanali Nematzadeh Professor of Molecular genetics, Genetics and Agricultural Biotechnology Institute of Tabarestan, Sari Agricultural Sciences and Natural Resources

University, Sari, Iran, [email protected]

Abstract

Introduction: Halophiles and halotolerant microorganisms are some of the extremophiles that

are able to grow in medium containing sodium chloride and have adapted to life in salinity

environments. Halophiles bacteria in saline soils by maintaining the food chain, decomposition

of organic matter and improvement of soil structure and fertility improve soil conditions.

Materials and methods: In order to isolate the halotoletant bacteria, from the halophyte

rhizosphere, four desert areas in Golestan province were sampled. To check the Extremophile of

isolates, their resistance was tested for resistant to salinity, drought, temperature and PH. Also,

plant growth promoting traits were measured.

Results: From forty-five strains which were isolated, three strains (G3, G6 and G14) have

demonstrated the ability of resistance to 35% salt. Isolates G6 and G3 phosphate solubiliziation

power of 301 and 201 ppm, respectively. Isolated G6 micrograms produced auxin 20/7 Mg/ ml.

G14 and G6 grow at 50 °C, pH = 10 and osmotic potential -0 /7MPa. While G3 strain grows at

50 °C, pH = 7/ 5 and osmotic potential -0/49. The three strains of the bacterial genera Bacillus

and Pseudomonas, respectively.

Discussion and conclusion: In this study, isolates due to the growth in concentrations of salt

and saturated salt tolerance of extreme environmental conditions and are likely halotolerant or

halophile bacteria and its potential for use in various fields of biotechnology including biotech,

industrial enzyme production and biological fertilizers for saline soil improvement.

Key words: Auxin, Bacillus, Halotoerant, Halophile, Pseudomonas, Phosphate solubility, Salt

* Corresponding author

Received: March 1, 2016/ Accepted: July 3, 2016

Page 2: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

لهللهلشمهسلل ل رواوگانهسر لل لپژوهشلل لست لل ل-فصللامه علما لل

ل45ل-54صلللل علللل،ل6931لتهب لللل ه للل،ل22شلللل ها لللل،لششلللل سلللله لل

69/45/6934تللهاتدلپلل:تا للل–ل66/62/6935تللهاتدلیاتهفلل لل

لطباس ه ،لکشهواسیلفمهوایلست لولژس رکلپژوهشود لسهای،لطبرع لول مهبعلکشهواسیلماومل،لیگسشگه وهتبهتو لئ لۀسوت مد *لگتاگ لسهای،

لگتاگ لسهای،لطباس ه ،لکشهواسیلفمهوایلست لولژس رکلپژوهشود لسهای،لطبرع لول مهبعلکشهواسیلماوملیگسشگه ل**Copyright©2017, University of Isfahan. This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/BY-NC-ND/4.0/), which permits others to download this work and share it with others as long as they credit it, but they cannot change it in any way or use it commercially.

های شور گلستان کنندۀ شوری از خاک های تحمل شناسایی باکتری

و بررسی برخی صفات فیزیولوژیک آنها ل

ل:*مررررررریی صررررررفدریان

ل:حسررررررری سررررررر ری

ل:آبرادی مسعود سلطانی نجف

ل **قربرررانعلی نعمررر زاد

ل

[email protected]، فرزتوللوژیل ولولول ،لیگسشلگه لمالوملکشلهواسیلول ملهبعلطبرعل لسلهای،لگتلاگ لللللللللیگسشجویلیک لاگیلل

[email protected] گسلللللل هیتهالفرزتولللللللوژیل ولوللللللول ،لیگسشللللللگه لشلللللل ردلب شلللللل لت للللللاگ ،لگتللللللاگ ،لللل

ل[email protected]،لبللل:ا،لکلللاا،لگتلللاگ لولس للله لت رللل لولگصلللتالت قرقلللهتلگسللل هیتهالگصلللتالسبهتلللهتل س لللعل

[email protected]ل،گتللللاگ لسللللهای،لطبرعلللل لول مللللهبعلکشللللهواسیلماللللوملگسلللل هیلژس رللللکل ولوللللول لیگسشللللگه للل

ید چ

گفاگط لپ مدههلکلعللکممدۀلس ک(لناوه لگسللیوس (لولههلوتولاگس ل)ت للههیلههلوفرلل)س کل رواوگانهسر لمقدمه:

گسلد لوجلویللللهلهیلشلوالتبلهبالتهف لعلللللکااگتدله ل مدلولبلاگیلسسلدن لیال لرطلللللقهیالبعلاشدلیال رطلوگجدلس کلسدت

هلهیلشلوالگسطاتلال لخل اخل ل،ل:گت ،لتجزتل ل لوگیلبلل لولب بلویلسلهخ ه لولللللللللللللیوس لیالخهکلههیلس کلبهک ای

بخشد ل هصاخرزیلخهکلشاگتطلخهکلاگلب بویل

کممدۀلشوای،لگسلاتزوسل النرههله لشواپ لمد،ل لهال مبقل لللللللههیلت لل مظوالجدگسهسیلبهک ایلبعلها: روشمواد و

هله،ل قهو ل لبس لهلبلعلشلوای،لللللللبلوی لجدگتلعلللنرایلشد لباگیلبااسل ل رلزگ لگک ل ا وفرلللللبرهبهس لیالگس ه لنا ه لس وسع

لللنرایلنایتد ل بااس لشدلو ه چمرنلص هتل اکلاشدلبس هلسرزلگسدگسلpHخشو ،لی هلول

یاصدیلبعلشوایلاگلسشه لیگیسلد للل54 قهو لل(G14وللG6،لG3)ب د ،لسعلجدگتعللیس لگسل للولپمجلجدگت لبع: نتایج

لG6ناملباللر البویسد لجدگت لل را ل246ولل946 رزگ للکممدن لف هتلبعلتاتربلیگاگیلقداتل للبعلG3لولG6ههیللجدگتع

ولپ هس لرلللل=pH 64 یاجلعلسا لرو ،للل44یالی لهیلللG6ولG14لر الگک رنلتولردلکلای لجدگتل لللل رواوناملبال را ل5/24

ل-53/4ولپ هس رللگس زیلل=4/5pHیاجع،لیال44یالی هیللG3کعلجدگت لل گهپهسوه لاشدلیگش مد؛لیا هل ل-5/4گس زیل

لبویسد لPseudomonasلولBacillusههیلبهک اتهت للاشدلیگش مد لگتنلسعلسوتعل ابوطلبعلجمس

لشلاگتطللت للولس کلگشبهعلههیل،اظ لیالاشدلیلرللبعلجدگشد لههیلجدگتعل هضال بهلع لیالگیری: بحث و نتیجه

ل خ افلههیلس رمعلیالگس هی لولپ هس رللیوس لگس لکممدۀلشوایلولتهلگ هالًلس کلههیلت للبهک ایل رب ،لسخ

ل یگایلههیلشوالاگلولکویههیلبرولوژتو لباگیلگصتالخهک صمع لههت لگسج اعلتولردلبسزت لبروتومولوژتو

کممدن لف هتل ل ،لشوای،سویو وسه ،لبهسراو کممدۀلشوای،للگک رن،لبهک ایلت للهای کلیدی: واژ ل

Page 3: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

6931لتهب ه ،ل22 ش ها للل،لشش سه للللهه،للشمهس ل رواوگانهسر لپژوهش لست ل-فصامه علما لل51

ل مقدمه

هلهیل،هللبلیاللللههل رواوگانهسر ل للباک ههلولبهک ای

توگسللدللسللهسنهایلبس للهل لل ( ل2ولل6ه لل مدل)ل6سگاهللهلشلوا ل

یلرللللبللهالبوی لفشللهالگسلل زی،لتج للعلگ للتالبللل لیاللبللع

هلهیلللسر وپتس لبس هلولگتجهیلتعهی لگس زیلبهشد لیاته ع

هللهلوللهللهیلگسلل خاگالس للک،لشللواگبعلللس للک،ل وضللچعل

هللهیلب للرهالشللوالولخشللک،لست لل گه لطبرعلل للللللخللهک

( ل9ولل6یوسل له ل مدل)لللهلهیلس لکلللهلهلولباکل لللبهک ای

هللهلیال مللرنلشللاگتطلسللخ لللواوگانهسر لل نوسللعل رلگتللن

هلهیلبلهالیللللهلهیلفلاگوگ لگسج العل،اظل لللللطبرع لبلهلتلم لل

س لک،لخشلو لشللدتدلولتلهب لسللوالفلاگبم لخواشللردللللل

کمملدلولبلهلتمظلر لفشلهالگسل زیلبقلهیلخلویلاگللللللللل قهباعل

هللهیلگخرللا،لپ هس للرللل( لیالسلله 4ولل5کممللدل)لتضلل رنل لل

خ اللفللهللهیلهللهلیالس رمللعللگسلل هی لگسلگتللنلگانهسر لل لل

پهالت ،لکویهلهیلست ل لوللللبروتومولوژیلیگاوت ،لست

شدتل وایلتوجعلقاگالناف علگس لپ هس رللبلهالیللل،را لبع

فللای،للیلرللللخصوصللرهتل م صللابعلهللهلبللعلگتللنلگانهسر لل

هبولر ل هوتلولسهسنهایلبس هلبعلشلوایلبلهاللگسل لللل

کللعلسللببلت لل رللیالگسلل هی لگسلبس للهلبللاگیلب للرهایلگسلل

شوی؛لباگیل ثه لهمگهملکهالبلهلبس لهللللیلصمع ل فاگتمدهه

هلهیلگک ل ا وفرلللللبعلگس اتارزگسرو لسرهسیلسر لبهک ای

هلللهت لاگلکلللعلقلللهیالبلللعلسسلللدن لیاللل) رواوگانهسر للل

قارلهت لولگسلردی،للللpHههت لبهلی هیلبهاللولپهترن،للست گه

فشهالهرداوس هترکلبهاللول،اظل لبلهالیلس لکله ل مد(للللل

مملوگ ل ملهبعللللشاگتطلسخ لست لبعج لسهسنهایلبهللبع

هلللهیللگاسشللل مدیلبلللاگیلشمهسلللهت لولتخالللر لبسلللزت

وایگس هی لیالصلمهتعل خ الفل هسملدلب لرتس،لپاوتئلهس،لللللل

سوکائهس،للرپهس،لگتزو اگسههلولهرداوالسههیلجدتلدلکلعلیاللل

کمملدلللههیلس و لبهاللپهتلدگایلخلویلاگل لخل ل للللل،اظ

( ل4ول2،ل6 بااله مدل)

یلرللل قلدگالبلهالیلللللیوس لبلعللههیلس کل رواوگانهسر

کممد،لنلهه لللس کلیالیاو لساو ،لتعهی لگس زیلگتجهیل

کااتلد(لیالیاو لسلاو للللخصلو لپ هسلر للل،اظ لس کل)بلعل

هلهلللهلهیلههلوفرللللل والاله لباسلد لپلاوتئرنللل4 ونلگس لبعل

گسدلکعلباگیلپهتدگایلولفعهلر ل مهسلبلللس ویلسهسنهالشد لبع

هلهلطرلفلللل( لههلوتولاگسل ل9یگاسلدل)لبعلگتنل رلزگ لس لکلسرلهسلللل

یهملدلکلعلیالباگبلالس لکللللللههلاگلتشورلل لوسرع لگسلبهک ای

قهومله مد؛لبدتنل عم لکعلیال ضوالس کلولتهل،رله لب لل

هلهلللتوگسمدلاشدلولتوثرالیگش علبهشمد ل ع لوالًلگتلنلبلهک ایلللل

یاصللدلتللهلبرشلل الس للکلل4کللعلاویل للوگیل،لل:گت ل للهویلل

،لBacillusگسللوگعللتوگسمللدلاشللدلکممللد،لشلله للبعضلل لگسلل لل Microcucusل ،Corynebacteriumل ،Streptococcusولل

Clostridiumل( 4ه مدل)ل

گسلاگهوهاهللهیلسللوتنلبللاگیل قهباللعلبللهلتللم لشللوایلیالل

بللللهالب ل عافلللل لللنرههلللله لولکللللهه لب للللهالستلللله للل

کممللدۀلشللوایلگسلل لکللعلللللهللهیلت للللل رواوگانهسر لل

هی لگسلپلهالت ل)گسل لللب بوییهمدۀلاشدلنرله لسرلزله ل مد لنرله لللل

کممدۀلشوای(لولتهلگصتالست ل)بلهلگسل هی للللنرههه لت ل

کمملدۀلشلوای(لبلاگیلگصلتاللللللههیلت للگسل رواوگانهسر

هلهلگسل للللههیلشوالیال قره لوسرعلگسج ا لگتنلاو لخهک

شد لگسل مهطالشلوالللههیلجدگسهسیل( لباخ لگسلبهک ای5ولل1)

,Flavobacterium, Azospirillum, Alcaligensشله للل

Acetobacteriumول Pseudomonasهلهیلللگسل لبلهک ایللل

کممدۀلشوایلیالگطاگفلاتش لنرههله لللیوس لولت للس ک

توگسمدلب هالتم لشلوایلاگلکلهه لیهملدلول هصلاخرزیلللللل

هللهیل للاکلاشللدلل( لبللهک ای2خللهکلاگلب بللویلببخشللمدل)

شد لگسل مهطالشوال قهو لبعل قهیتالبهالیلس لکلللجدگسهسی

بهمثلگفزگت ل قهو لنره لیاباگبالتلم لللیهمدلولاگلسشه ل

بلای لللشوایلگطاتالهدگت لهرداولرو ،لتجعلگس زی،لگسبرن

ب للهالسلل لتللو لسللدت ،ل للخلهللدگت لگسلل زیلبللهالتالوللل

هللهیلاتزوسلل ایللل( لبللهک ای8شللویل)لف وسللم زلبرشلل ال لل لل

توگسمدلگسلگفزگت ل،اظ لگترانلیالنرههه لیالهمگلهملبلاوسلللل

Page 4: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

ل55لولبااس لباخ لص هتلفرزتولوژتکلبس هلههیلشوالنا ه لکممدۀلشوایلگسلخهکلههیلت للشمهسهت لبهک ای

ه لب هال م لگتنلهوا لو للتم لجاونرایلکمدلولسببلکه

یالاشللدلولتوسللععلگسللدگ هیلنرللهه لبللعلوتللژ لاتشللعلشللوسد ل

گسطاتلالتولرلدلبسلزت لللل توگسملدلل اکلاشدل ل لههیللبهک ای

ACCکابوک لللرتت(ل-6ب رموسلللرواوپاوپه لل-6)لیب رملللهس

صللواتللکممللد لگتللنلبسللزت لبللع رلزگ لتولرللدلگتللرانلاگلتمظللر ل

گتلرانلیالنرله للل،را قر لولم لدتهًلگسطاتلالکلهه لسلب للللل

هلهیللبلهک ایل( له چملرنلل3شلویل)للبهمثلتدگوملاشدلنره ل

تثبرل ل ه چلو ل خ ا ل ل هلهیلل وهسر ل لل لاکلاشلدلبلهللل

سلرداوفوال تولرد سه او ، ف ا گس ت لوول ،و سر اوژ

هله،للگک لرنل قبرلللسگ نرلهه للهلهیللهوا لو ل تولرلدل رواوب ،

توگسملدلل ل ل گتلرانل ،اظل ل کهه و ههلجربالرن هه،لسر وکرمرن

( لبللاگیلشمهسللهت لول64ولل2)شللوسدل اشللد گفللزگت بهمللث

هللهلگسلتجزتللعلولت ارللللژ للتوصللرفلتوه للللسللژگییلبللهک ای

16SrRNA16لهللهیلشللوی لژ لگسلل هی ل لل لSrRNA بللاگیل

هسللد له لل ل وجللویگتلضللاوایله لل مدلوله چمللرنلللسسللد

شلوی لللشدتل هفظ ل لههلبعلایتفلبهسههیلبل لیالگتنلژ

ل16SrRNAرنلایتللفلبهسهللهیلبللل لژ لبلعله للرنلیلرللللتعرللل

هلله،للممللوگ لتللکلاو لگسلل هسدگایلبللاگیلشمهسللهت لنوسللعللبللع

اوی لگخرلاگًلایتلفلبهسهلهیلللللههلبعلکلهال ل لللههلولبهک ایلجمس

بللاگیللل16SrRNAبللل لفقللطلیالبخلل لکللو و لگسلژ لللل

هللهیلیالسللب لجللمسلتللهلسللبوالبللهالتاللتشللخر لبللهک ای

پر پژوه یا وایسظا گهدگف ج اع شوی لگسلگس هی ل

هللهیل للاکلاشللدلللولشمهسللهت لبللهک ای جدگسللهسی او

کممدۀلشوای،لولبااس ل قهو لبعلخشو ،ل لاگاتلللت ل

لههلگس لولگسردت ل رطلیالگتنلبهک ای

للل ها مواد و روشلل

نرلللایلگسلم لللاللس وسلللع: بررررداری خررراک نمونررره

هلهیللل ایلخهکل لهال مبقل لبرهبلهس لگسلبرهبله لللللسهس 94

)گتمچللعلبللاو ،لب،لقللت،لن رشلله لولشللوالگسلل ه لنا لل ه ل

هلهیلللصواتلناف لس وسعل6932سر رنلش ا(لیال ا ه ل

ههیلسلهتاوس لقلاگالناف ملدلولبلاگیللللللخهکلیالیگخللکر ع

اسللرد لتبخرللالبللعلبس هتشللگه ل رواوبرولللوژیلل للدگقللبللع

فمهوایلکشلهواسیلطباسل ه للللپژوهشود لژس رکلولست

یل)تخچله (للیاجعلسلهس رگاگلل5 م قللنایتدسدلولیالی هیل

لسگ دگایلشدسد

ههلتکللباگیلجدگسهسیلبهک ای: ها جداسازی باکتری

لر للالگسل اللو لس ولل لل رالل ل3نللاملگسلس وسلل لخللهکلیال

لدتلللیاصدلس کلطعهم(ل لللشلدلولبلعللل84/4گس هسدگایل)

یوالیالل644تللکلسللهم لاویلشللرواگسووبهتوالبللهلیواللل

رواولر لاللل14اقرالشد ل64-66یقرقعلقاگالناف لولتهلاق

پخل لوللل لرطلکشل لل سلسوسپهس رو لخهکلاویل مدگ

سللهم لل25 للدتللیاجللعلسا للرو لبللعل94ل±ل2یالی للهیل

ههت لکعل وافولوژیل هوت لیگشل مد،لللگسووبعلشد لکاوس

سلهسیلولبلاگیللللگس خه لشدسدلولبهلکشل ل لوگل لخلهل للل

یاجلعلسلهس رگاگیلسگ لدگایلللل 5 بهلعلهتلبرشل الیالی لهیللل

(ل6هلهیلکشل ل)جلدو لللللشدسد لیالگتنلبس هت لگسل رط

کمملدۀلشلوایلبلاگیلجدگسلهسیللللللههیلت للللباگیلبهک ای

لههلگس هی لشد للبهک ای

لسهمل رطلکش لولتاکربهتلبس هل-6جدو ل

سهمل رطلکش تاکربهتل)ناملباللر ا(

Nutrient Brouth: 8, Agar: 15 NA

Tryptone: 15, Soytone: 5, Sodioum Chloride: 5, Agar: 15 TSA

LB: 25, Agar: 15 LBA

Glycerol: 5, Yeast Extract: 2, Dipotassium phosphate: 1, Agar: 15 GYA

NaCl: 174, MgSO4.7H2O: 0.1, (NH4)2SO4: 2, K2HPO4: 3.12, NH4CL: 2, Glucose: 10 A

ل

Page 5: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

6931لتهب ه ،ل22 ش ها للل،لشش سه للللهه،للشمهس ل رواوگانهسر لپژوهش لست ل-فصامه علما لل58

بلاگیلبااسل ل رلزگ ل قهو ل لبلعلللللل: مقاوم به شوری

هله،لبس لهلیال لرطلکشل ل لهتعلسوتاتمل للللللللشوایلجدگتع

،ل64،ل64،ل4هلهیلبلدو لشلوایل)شلههد(،للللللباگثلبهل،اظل ل

یاصدلکااتدسدت لکشل لیگی لشلدسد للل54ولل94،ل24،ل24

گلهل لسلوایلیالللنرلایلللههل)بلهلگسلدگس للل رزگ لاشدلجدگتع

لنرایلشدسد لسهسو ا(لگسدگس ل114

هلهیللل رطلکش ل هتعلبهلپ هس لرلل: مقاوم به خش ی

ل-59/4،لول-53/4،ل-49/4،ل-64/4،لل40/4 خ اللللللللفل)

هللهیل مهسللبلگسلللکللای ل،اظلل لل گهپهسللوه (لبللهلگضللهفعل

لر لالگسللل را ل6/4ت رعلولبهل(لPEG 6000)ناروو للگترانلپا

کش ل لهتعلبهک اتلهت لتاقلر لشلدسد لگسلهلال،اظل لسلعلللللللل

یاجلعلسا لرو لللل94ل±ل2تواگالت رعلشد؛لسپسلیالی هیل

سلهم لگسووبلعلشلدسد للللل25 دتللیوالیالیقرقعلبعل624ولبهل

ل144نرلایل گلهل لسلوایلیالللللهلهلبلهلگسلدگس للللاشدلبهک ای

ل( 66نرایلشدل)لسهسو البهلیس گه لگسپو وف و الگسدگس

ههلیال لرطلکشل ل لهتعلللللبهک ای: باال pHوم به مقا

،ل5،ل4/1،ل1،ل4/4،ل4هلهیل خ الفلللpHسوتاتم لبلاگثلبلهللل

ل25 لدتلللهلهلبلعلللکش لیگی لشلدسد لبلهک ایللل64ولل3،ل4/5

یاجللعلسا للرو لقللاگالیگی لللل94ل±ل2سللهم لیالی للهیلل

هلهلیالللشدسد؛لسپسلج: لسلوایل لرطل لهویلبلهک ایلللل

ل( 62خوگسد لشدل)لسهسو ال144 واللطو

مظوالبااس لگ لالتلم للللبع: مقاوم به درجه حرارت

هلهیللل اگات لتکللوپلگسلکشل لتلهس لبلهک ایلیاللوللعلللل

لر السوتاتم لبلاگثلتاقلر لولللل را ل64لر ایل هویلل را 94

سلهم لیالشلروالگسووبلهتوالقلاگالیگی لشلدلتلهلللللللل8 دتللبع

لcfu/ml648 بلعلل ج عر لبهک اتلهت لهلهیلللباسلد للوللعللل2×

یاجللعلل44سللهم لیالی للهیلل25ل للدتلشللد لاگلبللعلکشلل

ل144سا رو لقاگالیگی لولسلپسلجل: لسلوایلبس لهلیاللللل

ل( 9سهسو الخوگسد لشدل)

بلابوایلل: (IAA)اسید استیک -3تخمی کمی ایندول

(لولبللهل6336 رلزگ لگک لرنلبللهلاو لباتلکلوله ولهاگ ل)لللل

ههیلبلهک ایلللس وسع گس هی لگسلگسپو اوف و ایلگسجهملشد

لرطلکشل لسوتاتمل لبلاگتلللللسهم لیالل52 دتللکعلبع

لر لا(لوللل رواونلاملیال رال للل444تاتپ وفله ل)ل-ه اگ لبهلگ

یاجعلسهس رگاگیلاشدلکایلولبهلل94یاصدلس کلطعهملیا2

یاصلللدلگسل94 راللل للر لللا،لل44)ل2 علللافلسهلووسلللو

(لبلعللFeCl3 والال او لل4/4لر الل را ل6گسردپاکااتک،ل

صللواتلل خاللوطلشللدسد لتولرللدلگک للرنلبللعللل6 6س للب ل

شلویلول گلهل للللیاجهت لگسلاسگلصوات لسشله لیگی ل ل لل

سلهسو الخوگسلد لشلد ل،اظل لگک لرنللللللل494سوایلب ،لیال

تولردشد لبهلت ر ل م م لگس هسدگایلگسلگک لرنلیال لدویۀللل

ل( 69لر البابوایلشدل)ل رواوناملیال را ل644تهل64

کمملدن لللباگیلشمهسهت لقلداتل لللل: فسفات حاللی

طوالجدگنهسعلاویل لرطلللعلبعهه،لهالجدگتلف هتلبهک ای

ناملناونز،لل64 هویلل(PKV)کش لجه دلپرووف و ل

ل4/4ناملمصلهاۀل خ لا،لللل4/4ف هت،للکا ر لناملتایل4

ناملل2/4ناملکااتدلپ هسر ،لل2/4ناملسول هتلب وسروم،ل

نلاملل4449/4نلاملسلول هتل مرلزت ،لللل6/4کااتدلسلدت ،لل

نلامللل64نلاملسلول هتل مگملزلولللل4449/4سول هتلبهن،ل

) لرطلکشل لجه لد(للللل5بنهالیاللر البلهلگسلردت ل هبل لللل

یاجلعلسلهس رگاگیلللل94±2هلهلیالی لهیللللکش لشدلولپ لایل

اوسلسگ لدگایلشلدسد لبلاگیلشمهسلهت لقلداتللللللل4 دتللبع

سلهسیل لرطللللکممدن لف هتلگسلخصوصر لشل هفلل ل

صواتلل(؛لسپسلهالجدگتعلبع9پراگ و لکام لگس هی لشدل)

ل644 لدتلللوف و لبلعلجدگنهسعلیال رطلکش ل هتعلپرو

ل94±2یوالیالیقرقلع(لولیالی لهیلللل644سهم ل)بهلسام ل

لر لاللل رال لل2یاجعلسهس رگاگیلکشل لیگی لشلد لیالپهتله ،لللل

هللهیلل للرطلکشلل لگسلهللالفللهلوو لبایگشلل علولبللعلوتلله ل

لر ایلگس قه لیگی لشد لسپسلباگیل :فلبلهک ایلوللل را 2

ل64 لدتلللههلبلعلل وگیلجه دل وجویلیال رطلکش ،لوته

Page 6: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

ل53لولبااس لباخ لص هتلفرزتولوژتکلبس هلههیلشوالنا ه لکممدۀلشوایلگسلخهکلههیلت للشمهسهت لبهک ای

یاجللعلل24یوالیالیقرقللعلولیالی للهیللل62444قرقللعلیالی

سهس رگاگیلسهس ات روژلشدلول او لاوت لش هفلهالوتله لل

( لیاس هتل لل64ول65هلهیلجدتلدل م قلللنایتلدل)لللللبعلوته

گس هی لبهلاو لپرشم هیشلد لتوسلطلوگتهسلهب لولللللف القهبل

لنرایلشد لل(لگسدگس 65)ل9گل ن

تولردشلد لتوسلطلللنرایلسرداوفواللگسدگس لسیدروفور

(لصلواتلل61)ل5ههلبهلگس هی لگسلاو لکه لشلهتلللبهک ای

شد لیال رطل دگقللبهلنلولللههیلکش لبهک ایل.ناف

(لیاجعلسا رو لکشل لشلدسد؛لسلپسلللل94±2یالی هیل)

یوالیالیقرقللعلسللهس ات روژلل25444یقرقللعلیالل64 للدتللبللع

شدسد ل او لکه لبعل هتعلاوت لکش لبعلس ب ل هویل

یقرقعلگسووبعلشلد لیالصلواتلوجلویللللل24دتل لگضهفعلولبع

سرداوفوا،لبهنلگسلتاکربلاسگ ل :فلولبهمثلکلهه لل

شوی لشدتلاسگلتوسطلیس گه للیالشدتلاسگلبب ل

شللوی لبللاگیللسللهسو الخوگسللد ل لل ل194گسللپو اوف و الیال

مملوگ لللنرایل رلزگ لسلرداوفوا،ل لرطل لدگقللبلعللللللگسدگس

س هی لگسلفا و لشههدلگس هی لشدلولیاصدلسرداوفوالبهلگ

[(Ar–As)٫Ar] × 100هسبعلشدلکعلیالب ،لبلعللل Arل=ل

او للج: ل اجعل) رطل دگقلل+ل او لتولردشد لبلعل

ل( 61ج: لس وسعلگس ل)=لAsکه (،ل

بااسل لل: (HCN)گیری میزان اسیدسیانیدریک انداز

او لس کلگل لتهل علدس لگسلردپرواتکللللبعل،HCNتولردل

یال لرطلکشل لسوتاتملل لللهللهللبلهک ایلل سجلهملشلدللگ(ل64)

یاصدلناملنار رنلکشل لیگی لشلدسد؛للل5/5باگثل هویل

(لب،شل علبلعل الو لللل6سپسلکه،:لصهف ل)وگت نلشل ها لل

یاصدلگسلردپرواتکلاویلل4/4ول یاصدلکابمهتلسدت 2

ل±2 رطلکش لقاگالیگی لشلدلولیالگسووبلهتوالبلهلی لهیللللل

سلهم لقلاگالناف ملد للللل31 لدتلللیاجلعلسلهس رگاگیلبلعللل 28

توسطلتغررلالاسلگلکه،ل:لصلهف لگسلسایلتلهلللللللHCNتولردل

( 65شویل)لگیلسشه لیگی ل لسهاسج لق و

-او لفمللللبللعلDNAگسلل خاگال: بررسرری مول ررولی

وللPCR مظوالگسجهملوگکم لل(لبع9کااوفاملگسجهملناف ل)

،لگسلپاگت اهلهیلل6444لbpبلهلطلو لللل16SrDNAژ ل توثرلال

27F, 5′-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3′ول 1525R, 5′-AAGGAGGTGATCCAGCC-3′

64 رواولر لایلشله لللل24( لهالوگکم ل62گس هی لشدل)

PCR Master Mixes kit (Thermo رواولر للا

Scientific, USA)سللهسوناملل44،لDNAوللpmol24گسلل

سلهسیلللشه للی هیلوگساش لPCRهالپاگت البوی لشاگتطل

بلهلللسرولل اگاتل لل94ه اگ للیقرقع،لبعل4 دتللیاجعلبعل35

ل34 لدتلللیاجعلبعل48 دتلتکلیقرقع،للیاجعلبعل35ی هیل

ل52یقرقلعلولتوثرلالس لهت لیاللللل2 لدتلللیاجعلبلعلل52 هسرعلول

سللهسیلل مظللوالخللهل لیقرقللعلبللوی لبللعل64 للدتللیاجللعلبللع

یاصلد(لباتلد لوللللگسلاویلژ لبنهاسل)تلکللPCR صو

بل له (لخلهل لشلدلولللللMNسلهسیل)للتوسطلکر لخلهل ل

کلا لجملوب لگسجلهملللللBioneerتهب لتوسلطلشلاک للللتوگل

لناف ل

ل16SrDNAتلوگل لژ ل: هرای بیوانفورمراتی ی بررسی

ل16SrDNAهلهیلللبهلتوگل ههیل وایسظالکعل شهبعلبهک ای

هلللللللهلیالبهسللللللللکلژسلللللللل لللسلللللللهتالبللللللللهک ایل

GenBank/EMBL/DDBJباسه للل ل بویسلللدلگسطاتلللالل

BLASTNگفلزگالل قهت علولبلهلسلاملللMEGA6ل4ایتلفللهل لل

فراوژس رکلباگسله لل شدسد لبسهلرزلفراوژس لولاس لیاخ

گسجللهملشللدللNeighbor-joining phylogenyگلگللوات ل

ل( 68)

لل نتایج

شلد لبلهللللنرایلگسل مهطالس وسع: ها سازی باکتری خالص

جدگتلع،لجدگسلهسیلولللل54ست مسلبلال لاللللیس ل54شوایل

جدگتعلتوگسهت لل94هه،للسهسیلشد لگسل ره لگتنلجدگتعلخهل

Page 7: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

6931لتهب ه ،ل22 ش ها للل،لشش سه للللهه،للشمهس ل رواوگانهسر لپژوهش لست ل-فصامه علما لل44

ل-5/4توگسلهت لت لللللجدگتلعلل64یاصدلشلوای،لل4ت لل

یاجلعلولل44جدگتعلتوگسهت لت للی هیلل64 گهپهسوه ،

64 pH= جدگتعله لتهل دوییل قهو لبلعللل64اگلیگش مد ل

لG3وللG6،لG14هال هالتم لاگلسشه لیگیسد لسعلجدگتل لل

ههیل،راست ل ل)شلوای،للللبهالتاتنل رزگ ل قهو لبعلتم

یاللG6ولG14(لاگلسشلله لیگیسللد لجدگتلل لللpHخشللو لول

،لپ هس للرللگسلل زیل=64pH یاجللعلسللهس رگاگی،ل44ی للهیل

یگشل مد للل قهو ل للیاصلدل54 گهپهسوه لولشلوایللل-5/4

یاللG14یاصلللدل24-64یالشلللوایللG6ب لللاتنلاشلللدل

(؛ل9ولل2یاصلللدل شلللههد لشلللدل)شلللولل94-64شلللوایل

ل44یاصلدلشلوای،لی لهیللللل94یاللG3کعلجدگتل لللیا هل

اگلت للکلایللل-53/4ولپ هس رللگس زیلل=4/5pHیاجع،ل

یاصدل شلههد لشلدللل64ولب رم لاشدلگتنلجدگتعلیالشوایل

کمملدن للل( لگاستهب لسعلجدگتلعلبلاگیل للللل9ول2،ل6)شولل

ف للل هت،لتولرلللدلگک لللرن،لگسردسلللرهسرداتکلولتولرلللدللل

سرداوفوالگسجهملشد لس هتجلسشله لیگیلگسلبلرنلسلعلجدگتلع،للللل

کممدن للتاتربلیگاگیلقداتل للبعلG3وللG6ههیللجدگتع

ناملباللر البویسد لجدگت لل را ل246ولل946 رزگ للعف هتلب

G6لر لالگک لرنلللل رواوناملبلال رال لللل5/24قهیالبعلتولردلل

هلهلللکدگملگسلجدگتعلسهم لگسووبهسرو لبوی؛لهرچل52پسلگسل

HCNل( 2ولسرداوفوالتولردلسوایسدل)جدو لل

لل

لشد لیالس ویگا( للیگی لیال رطلکش ل هتعلولسوتاتم لباگثل هویلیاصدههیل هوتلس کل)سشه لG3ول G14 ,G6 ههیلاشدلجدگتعل-6شولل

لسشه لیگی لشد لگس لOD 660 nmههلبهللاشدلبهک ای

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

0 10 20 30 40

OD

66

0n

m

(سهم )س ه ل

G14 0

10

25

40

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

0 10 20 30 40

OD

66

0n

m

(سهم )س ه ل

G6 0

10

25

40

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

0.9

0 10 20 30 40

OD

66

0n

m

ل(سهم )س ه ل

G3 0

10

25

30

Page 8: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

ل46لولبااس لباخ لص هتلفرزتولوژتکلبس هلههیلشوالنا ه لکممدۀلشوایلگسلخهکلههیلت للشمهسهت لبهک ای

ل

لولل-53/4،ل-9/4،ل-44/4ههیل)لناروو لیالپ هس رللگترانلههیل خ افلپا لیال رطلکش ل هویل،اظ لG3ول G14 ,G6 ههیلاشدلجدگتعل-2شولل

لسشه لیگی لشد لگس لOD 600 nmههلبهلل گهپهسوه ( لاشدلبهک ایل-59/4

ل

للسشه للOD 600 nmههلبهللاشدلبهک ایلG3وللG14 ,G6ههیل)س ویگالاگس (لولی هههیل خ افل)س ویگال پ(لبالاشدلبهک ای ههلpHگ الل-9شولل

لیگی لشد لگس

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

1.8

1 2 3 4 5 6 7 8

OD

60

0n

m

ل(سهم )س ه ل

G6 0.05

0.3

0.49

0.73

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

1 2 3 4 5 6 7 8

OD

60

0n

m

ل(سهم )س ه ل

G14 0.05

0.3

0.49

0.73

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

1.8

1 2 3 4 5 6 7 8

OD

60

0n

m

ل(سهم )س ه ل

G3 0.05

0.3

0.49

0.73

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

25 30 50

Op

tica

l D

ensi

ty

Temperature (̊c)

G14

G6

G3

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

5 5.5 6 6.5 7 7.5 9 10

OD

60

0n

m

pH

G14

G6

G3

Page 9: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

6931لتهب ه ،ل22 ش ها للل،لشش سه للللهه،للشمهس ل رواوگانهسر لپژوهش لست ل-فصامه علما لل42

شد لجدگسهسیههیللص هتلفرزتولوژتو لیالجدگتعل-2جدو

ت لنام جدگتعل قهو لبعلشوای

والا(ل4)

کممدن لل ل

(ppm)ف هت

تولردلگک رنل(µg/ml)

تولردل

سرداوفواHCN

G6 + + 246 5/24 - -

G14 + + - - - -

G3 - + 946 - - -

ل،لسبویِلص -،لوجویلص لول+

ل

Multiple)تبلهبال مدنهسل للل :هرا شناسرایی جدایره

alignment)16توگل للSrDNAبهک ایل وایسظالبهلسلهتاللل

لNCBI وجللویلیالبهسللکلژسلل للل16SrDNAهللهیللتللوگل

یاصلدلل3/33ولل33بلهلللG6ولG14 بلهک ایل کلعلسشله لیگیلل

بلهلللG3ولبلهک ایللBacillus subtillis بلعلشلبهه ل عالاللل

لPesudumonasلreactansیاصدلشلبهه ل عالالبلعلللل33

ل( 5)شوللل(5)گس

ل

کعللNCBIههیلیایس ا لیالبهسکلژس للولسهتالتوگل لG3وللG6, G14بهک ایل16S rDNAیاخ لفراوژس رو لباگسه لتوگل لژ ل-5شولل

لتبضالولباگسه neighbor-joining گلگوات باگسه فراوژس رکههس لاس لیاخ للههلیال ره لسهتالبهک ایلیهمدۀل وقعر لگتنلبهک ایلسشه

Boot Strapلصدل

ل

ل

ل

G14

Halotolerans strain OFC21B

Brevibacterium halotolerans strain IHB B 18094

Brevibacterium halotolerans strain OFC12A

Bacillus axarquiensis strain LNXM37

Brevibacterium sp. XJ7DNR1

Bacillus tequilensis strain km16

Bacillus subtilis strain CICC 10275

G6

Bacillus sp. LTY060901

G3

Pseudomonas sp. V6

Pseudomonas reactans strain Ph3R3

Pseudomonas sp. J-4

Pseudomonas fluorescens strain E10

65

66

20

89

52

68

95

100

75

100

100

100

Page 10: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

ل49لولبااس لباخ لص هتلفرزتولوژتکلبس هلههیلشوالنا ه لکممدۀلشوایلگسلخهکلههیلت للشمهسهت لبهک ای

ل گیری بحث و نتیجه

یوسل لس لب للللکممدۀلس کلولس کلههیلت للبهک ای

هلهیل خ الفلتشلورللللللناو ل موم لاگل شوللگسلجلمسل

هللهیلس للکللگسللدلکللعلیال للدویۀلوسللرع لگسل،اظلل لیگی

ملهطالب لرهالشلوالتلهلشلوالیاللللللتوگسمدلاشدلکممدلولیالل

کممللدۀللهللهیلت للللخللهکلولب لوجللویلیگاسللد لبللهک ای

ههیلشوالگسطاتلال لخللللیوس لیالخهکلشوایلولس ک

اخ ل وگیل،:گت ،لتجزت ل وگیلبل لولب بلویلسلهخ ه لوللل

بخشلمد للل هصاخرزیلخهک،لشاگتطلخلهکلاگلب بلویل ل للل

کممدۀلشلوایلللههیلت لل بهلع ل هضالجدگسهسیلبهک ای

قارلهت لبلهالللللpH فلایلبلهلشلوایلوللللههیل م صابعلکگسلخه

هلهلولللههلوتولاگسل ل اشلدل با خ اف رب گس لموگ ل

ملتو ل کش رطلی هی اسد ل ب رها ههلیوس لس ک

رواوگانهسر ل للیوس لس ک یا اشد، رزگ با تأ را با

یا ل للتوگسلدلل ل ل کلعل گیلنوسلعللبلعل یگای؛ یخهلل ل سرلزل

تأ رانل:گالللکممد لت ل ته یوس لس ک بع بس ه بمدیلطبقع

رطبال ی ه تغرراگت گ ا یلرل، گتن بع(؛ل64ولل5ل،1بهشدل)

ی لهلول رلزگ للل گسسظلال اشلدل شلاگتطل تلهل شلدل بااس کش

یالپژوهشل لکلعللل.شوی ت للبس هلبعلی هههیلبهاللبااس

1وس وسهت لللی لهلیالللل یگ مللگسجلهملیگی ،للل6338یالسه ل

شلد لگسلللیوسل لس لب لجدگسلهسیللللهلهیلس لکلللبرنلبهک ای

لبلرنلللست گه یاجلعلسلهس رگاگیلللل64-54ههیل ع و لگکثاگً

سرلللزلل5(؛لگسلطافللل لیالک للله ل اجلللعلبانللل ل8گسللل ل)

ت للللی للهلیالل یگ ملللۀشللد لیابللهالهللهیلگاگ للعلنللزگا

یاجلعللل64-54یوس لس ب لبرشل البلرنللللههیلس کلبهک ای

یاجعلسلهس رگاگیلسرلزلللل5سهس رگاگیلگس ؛لها مدلباخ لیال

( لیالصوات لکلعلس لهتجلگتلنلپلژوه للللل24کممدل)لاشدل

ل94-54هلهیلههلوفرلللللسشه لیگیلب اتنلی هلبلاگیلبلهک ایلل

یاجلعلاگلهل لتوگس ل مدللللل44یاجعلسهس رگاگیلگسل لکلعلتلهلللل

یاجعلبوی ل24-44ت للی هت لبرنلل کممدلولیگ ملت ل

لهوتل هلهیلل،اظل ل گس گس هی به شوای تم تأ را

هوت ههیل،اظ گس گس هی به خشو و سدت لکااتد

ها شد ههلبااس لجدگتع اشد با 1444لناروو گترانپا

تلم لل بهمثلگتجهی رط گس زی فشها گفزگت به تم یو

تمظلر لل ل ازمل خلویل کلعل شوسدل ههلجدگتع گس رکلیا

یلرللللبع ناروو گترانل پاههله مد للجدگتع توسط گس زی

لبپوپتسل ل وگای توگسلدللس ل ل(ل1444)لستهی ولوول وس

باولعل نرای؛ل فهصاع ساو گس تم ه سع ب بمهباگتن شوی؛

گ لال گتلنل و شلویلل ل ل یگش ع سگع یوا سرز ساول ۀیتوگالگس

خلهکل بلهل شلهب ل ب رها شاگتطگتنلپار ال شویل لبهمث

ۀیتلوگال وگای تلداتجللبلعل کلعل گسل زیل وگی سهتالبع س ب

لیالگتلنلبس لهت للل(8وللل1)لکملدل گتجلهیللشوسد،ل ساول

گتللرانپالل یاصللدل24 هسللد لیاللهللهلتوگسللهت لسسللد لجدگتللع

یاصدلکااتدلسدت لیتد لشلد لیالل94ولاشدلیاللناروو

(،لنللزگا لکایسللدلکللعل62)ل8نزگاشلل لا لله لولسهترلله

توگسلهت ل قهو ل لیالتلم لللللاتزوبرلوملههت لگسلجمسللسوتع

اگلیگاسلد له چملرنلاگوتللنللللنارولو لگتلرانلپال للیاصلدل54

(،لیالبس هتشلل لگمللتملکایسللدلل26وله وللهاگ ل)ل3کو للها

یاصدل4/54 هسد لیاللتوگسهت لسسد لسویو وسه ههیللسوتع

اگلیگاسلد ل قهو ل لبلعلتلم لشلوای،لللللللنارولو لگتلرانلپا

کلعلگسلللG14وللG6خشو لول لاگاتلبلهاللیالیولجدگتل لللل

کلعلگسلجلمسللللG3بویسدلبلهالتالگسلجدگتل للللبهسراو جمسل

یلرلللشلولللللتوگسلدلبلعلللبویلیتد لشدلکلعل ل لللسویو وسه

( لخلللوگ لیال69بهشلللدل)لبهسلللراو یتلللوگاۀلیگخاللل لل

بلاللبس هلاگل ل عدل قهو ل لیالباگلللبهسراو گسدوسپواههیل

شللاگتطلسللخ ل ربلل لکللای لگسلل لشللوللگسللپواههلول

هلهیلست ل لبهملثل لخللللللتوگسهت ل قهو لیالباگبالتم

ج عر لولگس هی لگسلبس هلیالفا والسلرو لپلویایلکلای لللل

( 22ولل3گس ل)

کمملد لشلوایلیاللللیوس لولت للللبهک ایلههیلس ک

Page 11: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

6931لتهب ه ،ل22 ش ها للل،لشش سه للللهه،للشمهس ل رواوگانهسر لپژوهش لست ل-فصامه علما لل45

توگسمللدلب للهالتللم لشللوایلاگللگطللاگفلاتشلل لنرههلله ل لل

( ل8رزیلخهکلاگلب بلویلببخشلمدل)للکهه لیهمدلول هصاخ

(لنلزگا لکایسلدلکلعلگتزولل للللل66وله وهاگ ل)ل64اگجپوت

SAL-15قهیالبعلگفزگت ل قهو لنمدملبعلشاگتطلشوایلل

خهکلگس لگات هعلنره لولبرو ه لنره لپسلگسلتاقلر لیالل

ل رزگ لستهییلگفزگت لتهفل لگتزولل لللتاقر لبعل قهت علبهلمدمِ

SAL-15تللهب لژسلل لللباگسلله لتجزتللعلولت ارللللتللوگل للل

16SrRNAعاللالبللعلنوسللعلولجللمسلل Planococcus

rifietoensisهسلد لیالللبوی لگتلنلبلهک ایلقلهیالبلعلسسلد لللللل

گسل للل3باگبلالللpHناملباللر ا(لولل14،اظ لبهالیلس کل)

توگسدلاشدلنره لاگلسرزلیالگتنلشاگتطلب بویلببخشد للکعل

پ هس للرلللSAL-15بللهک ایللس رجلل لگتللنل بهلعللعلسشلله لیگی

ستهییلباگیلتولردلکویلبرولوژتو لباگیلگفزگت لم اوایل

ههیلشوالاگلیگای له چمرنلیگاگیلتوگسهت لتولرلدلللیالخهک

هلهیللل( لبلهک ایل64گک رنلولگس ت لف هتل عدس لگس ل)

شد لگسل ملهطالشلوال قهو ل لبلعلللللل اکلاشدلجدگسهسی

گفلزگت للیهملدلولبهملثلللل قهیتالبهالیلس لکلاگلسشله ل ل للل

قهو لل لنرلله لیالباگبللالتللم لشللوایلگسطاتللالهللدگت لل

بلای لب لهالسل لتلو للللللهرداولرو ،لتجعلگسل زی،لگسبلرنلل

بللهالتالولف وسللم زلبرشلل اللسللدت ،ل للخلهللدگت لگسلل زی

کمملدۀلللهلهیل لاکلاشلدلت للللللل( لبلهک ایل8شلویل)لل

ههیل لاکلاشلدلتوگسلهت لللللشوایلس ب لبعلسهتالبهک ای

اگلیگاسللد لگسل رلله للبرشلل ایلبللاگیلت للللشللوایل للرطل

کممللدۀللهللهلیولجدگتلل لتولردکممللدۀلگک للرنلول لللللجدگتللع

کللعلف لل الیالشللاگتطلشللوایلللف لل هتلبویسللد؛لیا للهل ل

،را اللو لتللهلبللهل تلرلل لضللعرفلگسلل لب للرهایلگسللللل

کممدۀلف هتلم اولایلنرله لاگل ل لیالللللههیل للبهک ای

یهمد ل تلر لف هتلتوسطللشاگتطلتم له لگفزگت ل

هللهیلشللوالاگلللجدگشللد لگسلخللهکللBacillus spجللمسل

ههلل( لجدگتع61ولل5گسدل)لپژوهشگاگ لیتگالسرزلنزگا لیگی

والالکااتدلسدت (لیالشاگتطلل4یال،اظ لبهالیلس کل)

کمملدن لف ل هتللللبس هتشگهه ل قهو لسشه لیگیسد ل ل

ص لب رهال ل اکلاشدلنره لگس لیالگتلنلفاگتملدللل

ف ل هتلسله او للللکممدۀلف هت،لههیل لل رواوگانهسر

یهملدلللکممدلولب لاگلیالیس ا لنرههه لقاگال لاگل لل

نلزگا لیگیسلدلکلعلت لهمللللل وله ولهاگ لل66بستل ل گ ( 29)

توگسمللدللکممللدۀلف لل هتله لل مدل لل لهللهت لکللعل للللجدگتللع

اگلیال لرطلکشل ل لهتعلوللللل(TCP)ف ل هتلللکا لر للتای

جه لللدلبلللعلگسلللردههیلبلللل لتبلللدتللکملللدلولبهملللثلللللل

( لکلهه لل21ولل24 لرطلکشل لشلویل)للللpHشد لگسردی

pHیلرللللتولرللدلگسللردههیلبللل لولقمللدلتوسللطلل للرطلبللعل

4ههلقلهیالبلعلت لللللللههلگس ؛لمتو لبالگتن،لجدگتعلجدگتع

یهملدۀلللیاصلد(له ل مدلکلعلسشله لللل94کااتدلسدت ل) والا

شلد لتلکلللل قهو لبعلشوایلگس لگسلسعلسوت لشمهسلهت ل

گب علبعل ضوالولIAAکممدۀلگک رنلبوی لتولردلسوتعلتولرد

نرلایلگسلللگ لتاتپ وفه لیال رطلگس لکعلبهک ایلبهلب لا ل

کملد لللگسلردلتولرلدل ل للللگس رکلسصفلگ لتاتپ وفه ،لگتمدو

وگب لل علبللعلگفللزگت لیال رللزگ لگ للIAAگفللزگت لیالتولرللدل

گسردلتکلصل ل ل للللگس رکلتاتپ وفه لبوی لتولردلگتمدو

گتلنللطلوایلکلعلللل اکلاشدلنره لباگیلبهک ایلگس ؛لبع

یهلد،لجل: للللفر وهوا و لسر لاتش لنره لاگلتوسععل

( لگنه بلهایتوگلل24ولل25بخشلدل)لل وگیل،:گت لاگلب بلویل ل لل

هلللهیل لللاکلاشلللدلللل(لنلللزگا لیگیلبلللهک ایل2443)

کممدۀلشوای،لیالشاگتطلتم لشوایلتولردلگک رنللت ل

تهبدلولبهمثلگفزگت لاشدلنره لیالشاگتطللبس هلگفزگت ل

ل( 24ولل64)شوسدللتم لشوایل

باگسه لس لهتجلبسلهلرزلفرالوژس لیولجدگتلعل ابلوطلبلعللللللل

لسلویو وسه لولتول لگسلبس لهلبلعلجلمسللللللبهسلراو لجمسل

طلوالللیالگاتقهیلاشدلنره لبلعللبهسراو تعاالیگش لسق ل

هللهیللب للرهایلگسلنوسللع گیلشللمهخ علشللد لگسلل لن لل ای

Page 12: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

ل44لولبااس لباخ لص هتلفرزتولوژتکلبس هلههیلشوالنا ه لکممدۀلشوایلگسلخهکلههیلت للشمهسهت لبهک ای

Bacillusل،Bacillus subtilisگسج الللعللبهسلللراو

amyloliquoefaciensل،Bacillus cereus، Bacillus

pumilusو Bacillus polymyxaگیللطللوالن لل ای لبللعل

یلرلللتولرلدل ملدتنلللللمموگ لمه للکم ا لبروللوژتو لبلعلللبع

کمملدۀلاشلدلنرله لللللگسدلول هت لبروترکلشمهخ علشد لبس

هه،للیالشاگتطلتم لشوایلتوسطلتولردکممدۀلفر وهوا و

یگاللگیلسر لاوژ لکممدۀلف هت،لتولرلدلب وسرلهکلگسل لولللل ل

(ل2443)ل62( للللر لولکللر ل28ولل69بللل لول،رللا له لل مدل)ل

Bacillus Subtilis توسلطللIBA و IAA نزگا لتولرلدل

AH18وللBacillus licheniforims K1کایسد له چمرنلل

گفزگت لیالاشلدلفا لللقا لز،لگسل مها،لنوجلعلفاسگل لوللللللل

Bacillusههیل( له چمرنلجدگتع65تابچعلاگلسشه لیگیسدل)

pumilusولBacillus licheniforimsجدگشلللللد لگسلل

بهمثلاشلدلسلهقعللللC19بهلتولردلجربالرنل اتزوس التوسوه

ل( 22شوسدل)ل

هللهیلپژوهشللگاگ لیتگللالسرللزلسشلله لیگیلکللعللنللزگا

شد لگسلخهکلشوالبعلگ ه لستلهیلللههیلجدگسهسیلبهک ای

یهملد للل قهو لیالباگبالتم لشوایلاگلگسلخویلسشله ل ل لل

ههلیگاگیلصل هتل لاکللللگنالگتنلبهک ایگسلسویلیتگال

ل8) اشدلسرزلبهشمد،لباگیلکشهواسیلپهتدگالگتلد ه له ل مدلل

ل( 66و

یلرللاشلدلیالللههیلجدگشد لبعلیال بهلع ل هضالجدگتع

ههیلگشبهعلس لکلولت لللشلاگتطلتلم ل ربل للللللل،اظ

کممللدۀلشللوایلبللویلوللهللهیلت للللگ لهالًلجللزالبللهک ایل

خ الفلبروتوموللوژتو لللهلهیل للپ هس رللگسل هی لیالس رملعلل

ههیلصلمع لولکویهلهیلبروللوژتو لللللگسج اعلتولردلبسزت

لههیلشوالاگلیگاسد لباگیلگصتالخهک

ل

ل

ل

References

(1) Abrol IP., Yadav JSP., Massoud, FI. Salt

Affected Soils and Their Management. Food

and Agriculture Organization (FAO), Soils

Bulletin, Food and Agriculture Organization

of the United Nations, Rome; 1988. vol. 39.

(2) Margesin R., Schinner F. Potential of

halotolerant and halophilic Microorgnisms

for biotechnology. Extremophiles 2001;

5(4): 73-83.

(3) Holt JG., Krieg NR., Sneath PHA., staley

JT., Williams ST. Bergey's Manual of

Determinative Bacteriology. 9thed. Williams

and Wilrins. Maryland; 1994.

(4) Kaye JZ., Baross AJ. Synchronous effects of

temperapture, hydrostatic pressure and

salinity on growth, phospholipids profiles,

and protein patterns of four Halomonas

species isolated from deep see hydrothermal

-vent and sea surface environments. Applied

and Environmental Microbiology 2004;

56(10): 6220-6229.

(5) Larsen H. Halophilic and halotolerant

microorganisms -an overview and historical

perspective. FEMS Microbiology Reviews

1986; 39 (1): 3-7.

(6) Madigan M., Oren A. Thermophilic and

halophilic extremophils. Current Opinion in

Microbiology 1999; 2(3): 265-269.

(7) Mehrshad M., Amoozegar MA., Yakhchali

B., Shahzedeh Fazeli A. Biodiversity of

moderately halophilic and halotolerant

bacteria in the western coastal line of Urmia

lake. Biological Journal of Microorganisms

2012; 1(2): 49-70.

(8) Ventosa A., Nieto JJ., Oren A. Biology of

moderately holophilic aerobic bacteria.

Microbiologyلand Molecular Biology

Reviews 1998; 62(2): 504-544.

(9) Kiran KK., Chandra TS. Production of

surfactant and detergent-stable, halophilic,

and alkalitolerant alpha-amylase by a

moderately halophilic Bacillus sp. strain

TSCVKK. Applied Microbiology and

Biotechnology 2008; 77 (5): 1023- 31.

Page 13: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

6931لتهب ه ،ل22 ش ها للل،لشش سه للللهه،للشمهس ل رواوگانهسر لپژوهش لست ل-فصامه علما لل41

(10) Egamberdiyeva D. Alleviation of salt

stress by plant growth regulators and IAA

producing bacteria in wheat. Acta

Physiologiae Plantarum 2009; 31(4): 861-

864.

(11) Rajput L., Imran A., Mubeen F., Hafeez

FY. Salt-tolerant pgprلstrain planococcus

rifietoensis promotes the growth and yield

of wheat (triticumلaestivum l.) Cultivated in

saline soil. Pakistan journal of botany 2013;

45(6): 1955-1962.

(12) Rehman A., Nautiyal CS. Effect of

drought on the growth and survival of the

stress-tolerant bacterium Rhizobium sp.

NBRI2505 sesbania and its drought-

sensitive transposon Tn5 mutant. Current

Microbiology 2002; 45(5): 368- 377.

(13) Barazani O, Friedman J. Effect of

exogenously applied l-tryptophan on

allelochemical activity of plant growth

promoting rhizobacteria (PGPR). Journal of

Chemical Ecology. 2000; 26(2):9 -343ل.

(14) Watanabe F., Olsen S. Test of an

ascorbic acid method for determining

phosphorous in water and NaHCO3 extracts

from soil. Soil Science Society of America,

Proceedings 1965; 29(6): 677–678.

(15) Yasmin S., Hafeez F., Schmid M.,

Hartmann A. Plant beneficial rhizobacteria

for sustainable increased yield of cotton

with reduced level of chemical fertilizer.

Pakistan Journal of Botany 2013; 45(2):

655-662.

(16) Payne SM. Detection, Isolation and

characterization of siderophores. Methods in

Enzymology 1994; 235(1): 329- 44.

(17) Castric PA. Hydrogen cyanide, a

secondary metabolite of Pseudomonas

aeruginosa. Canadian Journal of

Microbiology 1974; 21 (5): 613- 8.

(18) Weisburg WG., Barns SM., Pelletier

DA., Lane DJ. 16S ribosomal DNA

amplification for phylogenetic study.

Journal of Bacteriology 1991; 173(2): 697-

703.

(19) Kunte H. Halophilic microorganisms.

Canadian Journal ofلMicrobiology 1995;

48: 185-197.

(20) Barazani O, Friedman J. Effect of

exogenously applied l-tryptophan on

allelochemical activity of plant growth

promoting rhizobacteria (PGPR). Journal of

Chemical Ecology. 2000; 26(2):9 -343ل.

(21) Praveen Kumar G., Kishore N., Leo

Daniel Amalraj E., Mir Hassan Ahmed SK.,

Rasul A., Desai S. “Evaluation of fluorescent

Pseudomonas sp. with single and multiple

PGPR traits for plant growth promotion of

sorghum in combination with AM fungi,”

Plant Growth Regulation 2012; 67(2): 133-

140.

(22) Lim JH., Kim SD. Synergistic plant

growth promotion by the indigenous auxins-

producing PGPR Bacillus subtilis AH18 and

Bacillus licheniforims K11. Journal of the

Korean Society for Applied Biological

Chemistry 2009; 52(5): 531- 8.

(23) Pikovskaya R. Mobilization of

phosphorus in soil in connection with vital

activity of some microbial species.

Microbiologyal 1948; 17(2): 362- 370.

(24) Arabi F., Nikravesh Z., Babaeezad V.,

Rezaeian V., Rahimian H. Occurrence of

bacterial leaf spot of garden beet caused by

Pseudomonas syringae pv. aptata in Iran.

Iran Journal of Plant Pathology 2006; 42 (4):

655- 671 (In Persian).

(25) El-Azeem SAMA., Mehana TA.,

Shabayek AA. Some plant growth promoting

traits of rhizobacteria isolated from Suez

Canal region, Egypt. African Crop Science

Conference Processing 2007; 8: 1517- 25.

(26) Jan AT., Azam M., Ali A., Haq Q. Novel

approaches of beneficial Pseudomonas in

mitigation of plant diseases an appraisal.

Journal of Plant Interactions 2011; 6(4):

195- 205.

(27) Klopper JW. A review of mechanisms for

plant growth promoting by PGPR. 6th

international PGPR workshop, 5-10 october

2003, calculla, India; 2003.

(28) Yildirim E., Taylor AG. Effect of

biological treatments on growth of bean

Plants under Salt Stress. Annual Report of the

Bean Improvement Cooperative 2005; 48:

176-177.

Page 14: Identification of halophile bacteria from salt deserts …bjm.ui.ac.ir/article_21568_77d373e131d8f97d5e9db...4 Biological Journal of Microorganism, 6th Year, No. 2, Summer 2017 Identification

ل45لولبااس لباخ لص هتلفرزتولوژتکلبس هلههیلشوالنا ه لکممدۀلشوایلگسلخهکلههیلت للشمهسهت لبهک ای

1- Salt Marsh 2- Salkowski 3- Watanabe and Olsen 4- CAS-Shattle 5- Blast 6- Vensota 7- Bergey 8- Rehman and Nautiyal 9- Praveen Kumar 10- Rajput 11- El-Azeem 12- Lim and Kim