francois p. monnet et al- neurosteroids, via sigma receptors, modulate the [^3-h]norepinephrine...

8/3/2019 Francois P. Monnet et al- Neurosteroids, via sigma receptors, modulate the [^3-H]norepinephrine release evoked by N-methyl-D-aspartate in the rat hippocampus

1/5

P r o c . N a t l . A c a d . S c i . USAV o l . 9 2 , p p . 3 7 7 4 - 3 7 7 8 , A p r i l 1 9 9 5N e u r o b i o l o g y

N e u r o s t e r o i d s , v i a c r r e c e p t o r s , modulate t h e [ 3 l H l n o r e p i n e p h r i n er e l e a s e evoked by N - m e t h y l - D - a s p a r t a t e i n t h e r a t hippocampusF R A N C o I s P . M O N N E T * t # , V I N C E N T M A H E i * , PAUL R O B E L t , A ND E T I E N N E - E M I L E B A U L I E U t* S e r v i c e d e P s y c h i a t r i e , H o p i t a l d e B i c e t r e , 7 8 , r u e d u G e n e r a l L e c l e r c , 9 4 2 7 5 L e K r e m l i n - B i c e t r e , F r a n c e ; a n d t I n s t i t u t N a t i o n a l d e l a S a n t e e t d e l a R e c h e r c h eM e d i c a l e , U n i t e 3 3 , 8 0 r u e d u G e n e r a l L e c l e r c , 9 4 2 7 6 L e K r e m l i n - B i c e t r e , F r a n c eC o n t r i b u t e d b y E t i e n n e - E m i l e B a u l i e u , D e c e m b e r 2 7 , 1 9 9 4ABSTRACT N - M e t h y l - D - a s p a r t a t e (NMDA, 2 0 0 p z M )e v o k e s t h e r e l e a s e o f [ 3 H ] n o r e p i n e p h r i n e ( [ 3 H ] N E ) f r o mp r e l o a d e d h i p p o c a m p a l s l i c e s . T h i s e f f e c t i s p o t e n t i a t e d b yd e h y d r o e p i a n d r o s t e r o n e s u l f a t e (DHEA S ) , w h e r e a s i t i si n h i b i t e d b y p r e g n e n o l o n e s u l f a t e (PREG S ) a n d t h e h i g h -a f f i n i t y r i n v e r s e a g o n i s t 1 , 3 - d i ( 2 - t o l y l ) g u a n i d i n e , a t c o n c e n -t r a t i o n s o f . 1 0 0 nM. N e i t h e r 3 a - h y d r o x y - 5 a - p r e g n a n - 2 0 - o n en o r i t s s u l f a t e e s t e r m o d i f i e d N M D A - e v o k e d [ 3 H ] NE o v e r f l o w .T h e o r a n t a g o n i s t s h a l o pe r i d ol a n d 1 - [ 2 - ( 3 , 4 - d i c h l o r o p h e n y l ) -e t h y l ] - 4 - m e t h y l p i p e r a z i n e , a l t h o u g h i n a c t i v e b y t h e m s e l v e s ,c o mp l et e l y p r e v e n t e d t h e e f f e c t s o f DH E A S , PREG S , a n d1 , 3 - d i ( 2 - t o l y l ) g u a n i d i n e o n NMDA-evoked [ 3 H ] N E r e l e a s e .P r o g e s t e r o n e ( 1 0 0 nM) m i m i c k e d t h e a n t a g o n i s t i c e f f e c t o fh a l o p e r i d o l a n d 1 - [ 2 - ( 3 , 4 - d i c h l o r o p h e n y l ) e t h y l ] - 4 - m e t h y l -p i p e r a z i n e . T h e s e r e s u l t s i n d i c a t e t h a t t h e t e s t e d s t e r o i ds u l f a t e e s t e r s d i f f e r e n t i a l l y a f f e c t e d t h e NMDA r e s p o n s e i nv i t r o a n d s u g g e s t t h a t DH E A S a c t s a s a a a g o n i s t , t h a t PREGS a c t s a s a o r i n v e r s e a g o n i s t , a n d t h a t p r o g e s t e r o n e may a c t a sa o f a n t a g o n i s t . P e r t u s s i s t o x i n , w h i c h i n a c t i v a t e s t h e G I / . t y p e so f g u a n i n e n u c l e o t i d e - b i n d i n g p r o t e i n ( G i / . p r o t e i n ) f u n c t i o n ,s u p p r e s s e s b o t h e f f e c t s o f DHE A S a n d PREG S . S i n c e a l b u t n o to , 2 r e c e p t o r s a r e c o u p l e d t o G i / . p r o t e i n s , t h e p r e s e n t r e s u l t ss u g g e s t t h a t DHE A S a n d PREG S c o n t r o l t h e NMDA r e s p o n s ev i a o r , r e c e p t o r s .O v e r l o o k e d f o r a l o n g t i m e , t h e p h y s i o l o g i c a l r e l e v a n c e o f o -r e c e p t o r s h a s r e c e n t l y a t t r a c t e d a t t e n t i o n s i n c e s e l e c t i v e a -l i g a n d s h a v e b e e n d o c u m e n t e d a s n e u r o m o d u l a t o r s i n t h em a m m a l i a n c e n t r a l n e r v o u s s y s t e m ( C N S ; r e f . 1 ) . T h e i r c a -p a c i t y t o m o d u l a t e N - m e t h y l - D - a s p a r t a t e ( N M D A ) - m e d i a t e dg l u t a m a t e r g i c n e u r o t r a n s m i s s i o n ( 2 - 1 3 ) h a s b e e n e m p h a s i z e da n d p r o p o s e d t o p l a y a c r u c i a l r o l e i n m a j o r n e u r o a d a p t a t i v ep h e n o m e n a , s u c h a s l o n g - t e r m p o t e n t i a t i o n , l e a r n i n g a n dm e m o r y , s e i z u r e s , a c u t e n e u r o n a l d e a t h , a n d n e u r o d e g e n e r a -t i o n ( 1 4 ) . U s i n g t h e i n v i t r o m o d e l o f NMDA-evoked [ 3 H ] n o r -e p i n e p h r i n e ( [ 3 H ] N E ) r e l e a s e f r o m p r e l o a d e d r a t h i p p o c a m -p a l s l i c e s ( 1 5 , 1 6 ) , we h a v e s h o w n t h a t t h e s e l e c t i v e c r l i g a n d s( + ) - N - c y c l o p r o p y l m e t h y l - N - m e t h y l - 1 , 4 - d i p h e n y l - 1 - e t h y l b u t -3 - e n - 1 - y l a m i n e h y d r o c h l o r i d e ( J O - 1 7 8 4 ; r e f . 1 7 ) a n d 1 , 3 - d i ( 2 -t o l y l ) g u a n i d i n e ( D T G ; r e f . 1 8 ) p o t e n t i a t e d a n d i n h i b i t e d ,r e s p e c t i v e l y , t h e NMDA r e s p o n s e i n a c o n c e n t r a t i o n - d e p e n -d e n t m a n n e r ( 3 ) . H a l o p e r i d o l , w h i c h a l s o d i s p l a y s h i g h a f f i n i t yf o r a b i n d i n g s i t e s ( 1 9 , 2 0 ) b u t n o t s p i p e r o n e , a n o t h e r b u t y r o -p h e n o n e d e v o i d o f s u c h a f f i n i t y ( 2 1 , 2 2 ) , p r e v e n t e d t h e e f f e c t so f J O - 1 7 8 4 a n d DTG ( 3 ) .P r e g n e n o l o n e ( P R E G ) , i t s s u l f a t e e s t e r PR E G S , a n dp r o g e s t e r o n e ( P R O G ) , t e s t o s t e r o n e , a n d e s t r a d i o l - 1 7 , B h a v eb e e n r e p o r t e d t o d i s p l a c e , u n d e r e q u i l i b r i u m b i n d i n g c o n d i -t i o n s , b o t h [ 3 H ] ( + ) N - a l l y l n o r m e t a z o c i n e { [ 3 H ] ( + ) S K F -1 0 , 0 4 7 } a n d [ 3 H ] h a l o p e r i d o l f r o m t h e a f s i t e s o n r a t b r a i n ( 2 3 )a n d s p l e n o c y t e p l a s m a m e m b r a n e s ( 2 4 ) . H o w e v e r , t h e s e o b -s e r v a t i o n s h a v e n o t b e e n f u r t h e r s u b s t a n t i a t e d b y f u n c t i o n a lT h e p u b l i c a t i o n c o s t s o f t h i s a r t i c l e w e r e d e f r a y e d i n p a r t b y p a g e c h a r g ep a y m e n t . T h i s a r t i c l e m u s t t h e r e f o r e b e h e r e b y m a r k e d " a d v e r t i s e m e n t " i na c c o r d a n c e w i t h 1 8 U . S . C . 1 7 3 4 s o l e l y t o i n d i c a t e t h i s f a c t .

b i o a s s a y s . T h e p r e s e n t s t u d y w a s t h e r e f o r e c a r r i e d o u t t oe v a l u a t e w h e t h e r n e u r o s t e r o i d s m o d u l a t e NMDA-evoked[ 3 H ] N E o v e r f l o w v i a a c t i o n o n c r r e c e p t o r s .MATERIA LS AND METHODS

T h e f o l l o w i n g d r u g s w e r e u s e d : NMDA ( S i g m a ) , DTG ( A l -d r i c h ) , h a l o p e r i d o l ( M c N e i l L a b o r a t o r i e s ) , s p i p e r o n e ( R e -s e a r c h B i o c h e m i c a l s , N a t i c k , M A ) , a n d p e r t u s s i s t o x i n ( P T X ;S i g m a ) . 1 - [ 2 - ( 3 , 4 - D i c h l o r o p h e n y l ) e t h y l ] - 4 - m e t h y l p i p e r a z i n e( B D - 1 0 6 3 ) w a s k i n d l y p r o v i d e d b y W. D . Bowen ( L a b o r a t o r yo f M e d i c i n a l C h e m i s t r y , N a t i o n a l I n s t i t u t e s o f D i a b e t e s a n dD i g e s t i v e a n d K i d n e y D i s e a s e s , B e t h e s d a , M D ) . T h e s t e r o i d sw e r e k i n d l y p r o v i d e d b y D . P h i l i b e r t ( R o u s s e l - U C L A F ) .[ 3 H ] N E ( 3 , 4 - [ 7 - 3 H ] N E ; s p e c i f i c a c t i v i t y , 5 4 0 . 2 G B q / m m o l /l i t e r ) w a s p u r c h a s e d f r o m I s o t o p c h i m ( G a n a g o b i e - P e y r u i s ,F r a n c e ) .E i g h t y - f o u r f e m a l e S p r a g u e - D a w l e y r a t s ( 1 8 0 - 2 2 5 g ) , p u r -c h a s e d f r o m I f f a C r e d o , w e r e k e p t a t 2 1 C o n a 1 2 h r : 1 2 h rl i g h t / d a r k c y c l e w i t h f r e e a c c e s s t o w a t e r a n d P u r i n a c h o w . A tl e a s t 4 w e e k s p r i o r t o t h e r e l e a s e e x p e r i m e n t s , r a t s w e r ea n e s t h e t i z e d u n d e r e t h e r a n d b i l a t e r a l o v a r i e c t o m y w a s c a r r i e do u t b y l a t e r a l a c c e s s . I n a s u b g r o u p o f 1 6 r a t s , a n e s t h e t i z e d w i t hc h l o r a l h y d r a t e ( 4 0 0 m g / k g , i . p . ) 3 - 1 1 d a y s p r i o r t o t h ee x p e r i m e n t s , P TX ( 1 , g / 2 , u l o f p h y s i o l o g i c a l s a l i n e ) w a si n j e c t e d ( u s i n g a 1 0 - u A l H a m i l t o n s y r i n g e ) b i l a t e r a l l y i n t o t h ed o r s a l h i p p o c a m p u s a t A : 4 . 5 , L : 4 , a n d D : 4 , a c c o r d i n g t o t h ea t l a s o f P a x i n o s a n d W a t s o n ( 2 5 ) a s d e s c r i b e d ( 3 ) . T w e l v ec o n t r o l r a t s r e c e i v e d a n e q u a l v o l u m e o f t h e v e h i c l e . Whena p p r o p r i a t e , t h e r a t s w e r e k i l l e d b y d e c a p i t a t i o n a n d t h e i rb r a i n s w e r e r a p i d l y d i s s e c t e d . C o r o n a l s l i c e s ( 0 . 4 - m m t h i c k ) o ft h e h i p p o c a m p u s w e r e p r e p a r e d w i t h a M c I l w a i n t i s s u e c h o p -p e r . T h e s l i c e s w e r e i n c u b a t e d i n K r e b s ' s o l u t i o n c o n t a i n i n g[ 3 H ] N E ( 0 . 1 , u M ) a n d b u b b l e d w i t h a m i x t u r e o f 95% 0 2 / 5 %CO 2 a t 3 7 C f o r 3 0 m i n . T h e c o m p o s i t i o n o f t h e K r e b s ' s o l u t i o n( i n m M ) w a s N a C l 1 1 8 , K C l 4 . 7 , C a C l 2 1 . 3 , M g C l 2 1 . 2 ,NaH2PO4 1 , NaHCO3 2 5 , g l u c o s e 1 1 . 1 , Na2EDTA 0 . 0 4 , a n da s c o r b i c a c i d 0 . 0 6 . A t t h e e n d o f t h e i n c u b a t i o n p e r i o d , e a c hg l a s s c h a m b e r r e c e i v e d t w o s l i c e s t h a t w e r e s u p e r f u s e d c o n -t i n u o u s l y a t a r a t e o f 0 . 5 m l / m i n w i t h o x y g e n a t e d M g 2 + - f r e eK r e b s ' s o l u t i o n a t 3 7 C f o r 6 8 m i n . As i n d i c a t e d i n R e s u l t s , o n es t e r o i d a n d / o r o n e o f t h e c r l i g a n d s DTG, h a l o p e r i d o l , BD-1 0 6 3 , o r s p i p e r o n e w e r e a d d e d i n M g 2 + - f r e e K r e b s ' s o l u t i o nt h r o u g h o u t t h e s u p e r f u s i o n p e r i o d . T h e p r o t o t y p i c a - l i g a n dDTG w a s c h o s e n s i n c e i t a c t s o n b o t h a - i a n d o ' 2 r e c e p t o r s ( 3 ,2 6 ) . T h e u n i v e r s a l o - a n t a g o n i s t h a l o p e r i d o l a l s o b i n d s t od o p a m i n e r g i c , s e r o t o n i n e r g i c , a d r e n e r g i c , a n d c h o l i n e r g i c s i t e sA b b r e v i a t i o n s : 3 a , 5 a - T H P , 3 a - h y d r o x y - S a - p r e g n a n - 2 0 - o n e ; C N S ,c e n t r a l n e r v o u s s y s t e m ; DHEA, d e h y d r o e p i a n d r o s t e r o n e ; DTG, 1 , 3 -d i ( 2 - t o l y l ) g u a n i d i n e ; G i / o p r o t e i n , g u a n i n e n u c l e o t i d e - b i n d i n g p r o -t e i n ; ( + ) S K F - 1 0 , 0 4 7 , ( + ) - N - a l l y l n o r m e t a z o c i n e ; J O - 1 7 8 4 , ( + ) - N -c y c l o p r o p y l m e t h y l - N - m e t h y l - 1 , 4 - d i p h e n y l - 1 - e t h y l b u t - 3 - e n - 1 - y l a m i n eh y d r o c h l o r i d e ; NMDA, N - m e t h y l - D - a s p a r t a t e ; B D - 1 0 6 3 , 1 - [ 2 - ( 3 , 4 -d i c h l o r o p h e n y l ) e t h y l ] - 4 - m e t h y l p i p e r a z i n e ; [ 3 H ] N E , [ 3 H ] n o r e p i n e p h -r i n e ; P T X , p e r t u s s i s t o x i n ; PREG, p r e g n e n o l o n e ; PROG, p r o g e s t e r -o n e ; S , s u l f a t e e s t e r .* T o w h o m r e p r i n t r e q u e s t s s h o u l d b e s e n t a t t h e t a d d r e s s .

3 7 7 4


2/5

P r o c . N a t i Acad S c i USA 9 2 ( 1 9 9 5 ) 3 7 7 5( 2 1 , 2 2 ) . T h e r e f o r e , s p i p e r o n e , a n o t h e r b u t y r o p h e n o n e t h a td i s p l a y s h i g h e r a f f i n i t i e s f o r t h e s e f o r m e r s i t e s t h a n h a l o p e r -i d o l b u t h a s v e r y l o w a f f i n i t y f o r a b i n d i n g s i t e s ( 1 , 1 8 , 2 0 - 2 2 ) ,a n d B D - 1 0 6 3 , a v e r y p o t e n t a n d s e l e c t i v e o a a n t a g o n i s t ( 2 7 ) ,w e r e u s e d t o a s s e s s t h e s p e c i f i c i t y o f t h e r e s u l t s o b t a i n e d w i thh a l o p e r i d o l . S t o c k s o l u t i o n s o f s t e r o i d s w e r e p r e p a r e d i ne t h a n o l a n d d i l u t e d w i t h M g 2 + - f r e e K r e b s ' s o l u t i o n s o a s t o g e tt h e a p p r o p r i a t e s t e r o i d c o n c e n t r a t i o n w i t h a f i n a l e t h a n o lc o n c e n t r a t i o n o f < 0 . 0 5 % . S t o c k s o l u t i o n s o f DTG, h a l o p e r i -d o l , B D - 1 0 6 3 , a n d s p i p e r o n e w e r e p r e p a r e d i n HCl a n d d i l u t e dw i t h M g 2 + - f r e e K r e b s ' s o l u t i o n t o t h e f i n a l c r c o n c e n t r a t i o nn e e d e d , w h e r e a s t h e HCl c o n c e n t r a t i o n w a s k e p t < 0 . 0 1 % .F o r t y m i n u t e s a f t e r t h e b e g i n n i n g o f t h e e x p e r i m e n t s , t h es u p e r f u s i o n medium w a s s w i t c h e d f o r 4 m i n t o medium a l s oc o n t a i n i n g NMDA ( 2 0 0 , u M ) t o e v o k e [ 3 H ] N E e f f l u x . T e ns u c c e s s i v e 4 - m i n f r a c t i o n s o f t h e s u p e r f u s a t e w e r e c o l l e c t e ds t a r t i n g 1 2 m i n b e f o r e t h e NMDA s u p e r f u s i o n . A t t h e e n d o fa l l e x p e r i m e n t s , t h e h i p p o c a m p a l s l i c e s w e r e d i s s o l v e d i n 0 . 5 m lo f S o l u e n e 3 5 0 ( P a c k a r d I n s t r u m e n t s , R u n g i s , F r a n c e ) a n d t h er a d i o a c t i v i t y i n t h e s l i c e s a n d s u p e r f u s a t e s a m p l e s w a s d e t e r -m i n e d b y l i q u i d s c i n t i l l a t i o n s p e c t r o m e t r y ( P a c k a r d T r i - C a r b4 6 6 0 ) . T h e e x p r e s s i o n " N M D A - e v o k e d r e l e a s e o f [ 3 H ] N E " w i l lb e u s e d t h ro u g ho u t i n s t e a d o f "NMDA ( 2 0 0 , u M ) - e v o k e d o v e r -f l o w o f 3 H f r o m h i p p o c a m p a l s l i c e s p r e l o a d e d w i t h [ 3 H ] N E . " T h eNMDA-evoked [ 3 H ] N E o v e r f l o w w a s e x p r e s s e d a s t h e i n c r e a s ei n 3 H r e l e a s e o v e r s p o n t a n e o u s o u t f l o w , d e t e r m i n e d i m m e d i a t e l yp r e c e d i n g NMDA s u p e r f u s i o n , a n d e x p r e s s e d a s p e r c e n t o fr e s i d u a l t i s s u e 3 H c o n t e n t a t t h e e n d o f t h e s u p e r f u s i o n . T h i sm e t h o d o f c a l c u l a t i o n r e n d e r s t h e a m o u n t o f e n d o g e n o u s NEu n i n f l u e n t i a l ( 2 8 ) . R e s u l t s a r e e x p r e s s e d a s mean SEM. T h em e a n s w e r e c o m p a r e d u s i n g t h e S t u d e n t ' s t t e s t a n d t h e D u n n e t t ' sc o r r e c t i o n f o r m u l t i p l e c o m p a r i s o n s w i t h a s i n g l e c o n t r o l g r o u p .P r o b a b i l i t y v a l u e s o f < 0 . 0 5 w e r e c o n s i d e r e d s i g n i f i c a n t .

RESULTST h e f r a c t i o n a l r e l e a s e e v o k e d b y NMDA ( 2 0 0 , u M ) f r o mh i p p o c a m p a l s l i c e s l a b e l e d w i t h [ 3 H ] N E v a r i e d b e t w e e n 1 . 2 9 %+ 0 . 1 4 % ( n = 8 ) a n d 1 . 7 1 % 0 . 4 0 % ( n = 9 ) a c c o r d i n g t oe x p e r i m e n t s ( s e e F i g s . 1 - 3 ) . T h e s e v a l u e s a r e c o n s i s t e n t w i t hr e s u l t s o b t a i n e d w i t h h i p p o c a m p a l ( 3 , 6 , 2 9 ) o r c o r t i c a l s l i c e s( 3 0 , 3 1 ) . I n t h e p r e s e n t w o r k , n o n e o f t h e s t e r o i d s , a d d e d t o t h eM g 2 + - f r e e K r e b s ' s o l u t i o n f r o m t h e b e g i n n i n g o f t h e s u p e r -f u s i o n i n t h e 1 0 n M t o 3 , u M c o n c e n t r a t i o n r a n g e , a f f e c t e d t h es p o n t a n e o u s e f f l u x o f 3 H .M o d u l a t i o n o f t h e NMDA-Evoked O v e r f l o w o f [ 3 H ] N E b yD e h y d r o e p i a n d r o s t e r o n e S u l f a t e (DHEA S ) a n d PREG S .DHEA S p o t e n t i a t e d , i n a c o n c e n t r a t i o n - d e p e n d e n t m a n n e r ,t h e r e l e a s e o f [ 3 H ] N E i n d u c e d b y NMDA ( F i g . 1 A ) . T h e l o w e s te f f e c t i v e c o n c e n t r a t i o n o f DHEA S ( 3 0 n M ) e n h a n c e d t h er e s p o n s e t o NMDA b y 3 7 % . C o n v e r s e l y , P R E G S i n h i b i t e d t h er e l e a s e o f [ 3 H ] N E i n d u c e d b y NMDA i n a c o n c e n t r a t i o n -d e p e n d e n t manner ( F i g . 1 B ) . T h e l o w e s t e f f e c t i v e c o n c e n t r a -t i o n o f PR E G S ( 1 0 0 n M ) i n d u c e d a 60% i n h i b i t i o n o f t h eNMDA r e s p o n s e .E f f e c t o f H a l o p e r i d o l , B D - 1 0 6 3 , a n d S p i p e r o n e o n t h eM o d u l a t o r y E f f e c t o f DHEA S a n d PREG S . H a l o p e r i d o l ( 1 0 0n M ) , i n a c t i v e b y i t s e l f o n t h e NMDA r e s p o n s e , c o m p l e t e l yp r e v e n t e d t h e p o t e n t i a t i n g e f f e c t o f DHEA S a n d t h e i n h i b -i t o r y e f f e c t o f PR E G S o n NMDA-evoked [ 3 H ] N E r e l e a s e( F i g . 1 ) . I n c o n t r a s t , s p i p e r o n e ( 1 0 0 n M ) w a s i n a c t i v e i ns u p p r e s s i n g b o t h e f f e c t s o f DHEA S a n d P R E G S ( d a t a n o ts h o w n ) . S i m i l a r l y t o h a l o p e r i d o l , B D - 1 0 6 3 c o n c e n t r a t i o n -d e p e n d e n t l y p r e v e n t e d t h e e n h a n c i n g e f f e c t o f DHEA S ( 3 0 0n M ) a s w e l l a s t h e i n h i b i t o r y e f f e c t o f P R E G S ( 3 0 0 n M ) ( F i g .2 I n s e t ) .

E f f e c t o f P R O G o n t h e M o d u l a t o r y E f f e c t o f DHE A S , PREGS , a n d t h e o r L i g a n d DTG. PROG, DH EA , P RE G, 3 a -h y d r o x y - 5 a - p r e g n a n - 2 0 - o n e ( 3 a , 5 a - T H P ) , a n d 3 a , 5 a - T H P Sd i d n o t a f f e c t NMDA-evoked [ 3 H ] N E r e l e a s e i n t h e 1 0 nM t o

A4 -

I0D 2 -

. U )01 -

00I0o2-

0I

O J r fl0

o DHEA S* DHEA S + h a l o p e r i d o l*

B

o PREG S* PREG S + h a l o p e r i d o l *1 0 1 0 0

D r u g , n M1 0 o o

F I G . 1 . E f f e c t s o f DHEA S ( A ) a n d o f P R E G S ( B ) w i t h o u t a n dw i t h h a l o p e r i d o l ( 1 0 0 n M ) o n NMDA-evoked r e l e a s e o f [ 3 H ] N E .H i p p o c a m p a l s l i c e s o f s p a y e d r a t s w e r e p r e i n c u b a t e d w i t h [ 3 H ] N Ew i t h c a r b o x y g e n e r a t e d M g 2 + - f r e e K r e b s ' m e d i u m m a i n t a i n e d a t 3 7 C .NMDA ( 2 0 0 , u M ) w a s a d d e d t o t h e s u p e r f u s a t e f o r 4 m i n a f t e r 4 0 m i n .E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean S E M o f s i x t o n i n e e x p e r i m e n t s . * ,P < 0 . 0 1 ; S t u d e n t ' s t t e s t v s . b a s a l v a l u e s .1 , u M c o n c e n t r a t i o n r a n g e . Among t h e s e f i v e i n a c t i v e s t e r o i d st e s t e d , P R O G w a s t h e o n l y o n e r e p o r t e d t o d i s p l a c e o f l i g a n d sf r o m t h e i r b i n d i n g s i t e s ( 2 3 , 2 4 , 3 2 ) . T h i s p r o m p t e d u s t oi n v e s t i g a t e w h e t h e r PROG m i g h t c o u n t e r a c t t h e DHEAS - i n d u c e d p o t e n t i a t i o n a n d t h e P R E G S - i n d u c e d i n h i b i t i o n o fNMDA-evoked [ 3 H ] N E o v e r f l o w . I n d e e d , P R O G c o n c e n t r a -t i o n - d e p e n d e n t l y i n h i b i t e d ( i n t h e 1 0 nM t o 1 , u M r a n g e ) t h ep o t e n t i a t i o n a n d t h e i n h i b i t i o n o f NMDA-evoked [ 3 H ] N Er e l e a s e i n d u c e d b y DHEA S ( 3 0 0 n M ) a n d PR E G S ( 3 0 0 n M ) ,r e s p e c t i v e l y ( F i g . 2 ) . A t 1 0 0 n M , P R O G d e c r e a s e d t h e e n -h a n c i n g e f f e c t o f DHEA S b y 69% a n d a b o l i s h e d t h e r e d u c i n ge f f e c t o f P R E G S .DTG h a s p r e v i o u s l y b e e n r e p o r t e d t o d e c r e a s e N MD A -e v o k e d [ 3 H ] N E r e l e a s e ( 3 ) . PROG c o n c e n t r a t i o n - d e p e n d e n t l yr e v e r s e d ( i n t h e 3 0 n M t o 1 , u M c o n c e n t r a t i o n r a n g e ) DTG( 3 0 0 n M ) - i n d u c e d i n h i b i t i o n o f NMDA-evoked [ 3 H ] N E r e -l e a s e ( F i g . 2 ) .E f f e c t o f P TX o n DH E A S - a n d P R E G S - I n d u c e d M o d u l a -t i o n o f t h e NMDA-Evoked R e l e a s e o f [ 3 H ] N E . T h e p r e t r e a t -m e n t w i t h P T X , i n j e c t e d i n t h e d o r s a l h i p p o c a m p u s 3 - 1 1 d a y sp r i o r t o s a c r i f i c e , a c c o r d i n g t o a p r e v i o u s l y p u b l i s h e d p r o t o c o l( 3 ) , a f f e c t e d n e i t h e r t h e b a s a l [ 3 H ] N E o u t f l o w n o r t h e N MD A -e v o k e d r e l e a s e o f [ 3 H ] N E ( F i g . 3 ) . H o w e v e r , P TX t o t a l l ya b o l i s h e d t h e e f f e c t s o f DHEA S a n d P R E G S on N MD A -e v o k e d r e l e a s e o f [ 3 H ] N E ( F i g . 3 ) .

DISCUSSIONT h e p r e s e n t r e s u l t s i n d i c a t e t h a t n o n e o f t h e s t e r o i d s t e s t e da f f e c t e d t h e s p o n t a n e o u s [ 3 H ] N E e f f l u x . H o w e v e r , a t n a n o -m o l a r c o n c e n t r a t i o n s , DHEA S i n c r e a s e d , w h e r e a s PR E G Sr e d u c e d , t h e r e s p o n s e t o NMDA, w h i l e 3 a , 5 a - T H P S r e -m a i n e d i n a c t i v e o n t h e NMDA r e s p o n s e a s w e l l a s t h e o t h e r

l-

N e u r o b i o l o g y : M o n n e t e t a L

I


3/5

3 7 7 6 N e u r o b i o l o g y : M o n n e t e t a t

I0)4 I ). e( 1P -*

4 -* * * *

3 - * *2 -1 - * *0 - -l

o l o 1 0 0 1 0 0 0B D - 1 0 6 3 , n M

0 1 0 1 0 0 1 0 0 0P R O G , n M

F I G . 2 . PROG c o u n t e r a c t s PREG S ( 3 0 0 n M ) - a n d DTG ( 3 0 0 n M ) - i n d u c e d i n h i b i t i o n a n d DHEA S ( 3 0 0 n M ) - i n d u c e d p o t e n t i a t i o n o f NMDA( 2 0 0 , u M ) - e v o k e d [ 3 H ] N E o v e r f l o w . T r i a n g l e s , PROG a l o n e ; squares, DHEA S p l u s c o m p e t i t o r ; c i r c l e s , PREG S p l u s c o m p e t i t o r ; d i a m o n d s , DTGp l u s PROG. S o l i d s y m b o l s , b a s a l v a lu e s o f NMDA ( 2 0 0 , u M ) - e v o k e d [ 3 H ] N E o v e r f l o w i n t h e a b s e n c e o f a n y n e u r o s t e r o i d a n d DTG; open s y m b o l s ,v a l u e s o f NMDA-evoked [ 3 H ] N E o v e r f l o w i n t h e pr es e n c e o f v a r i o u s c o n c e n tr a t io n s o f PROG a l o n e o r i n c o m b i n a t i o n w i t h DHEA S , PREG S ,o r DTG. ( I n s e t ) B D - 1 0 6 3 c o u n t e r a c t s DHEA S ( 3 0 0 n M ) - a n d PREG S ( 3 0 0 n M ) - i n d u c e d p o t e n t i a t i o n a n d i n h i b i t i o n o f NMDA-evoked r e l e a s eo f [ 3 H ] N E . Open s y m b o l s , b a s a l v a l u e s o f NMDA-evoked [ 3 H ] N E o v e r f l o w i n t h e a b s e n c e o f a n y n e u r o s t e r o i d a n d B D - 1 0 6 3 ; s o l i d s y m b o l s , v a l u e so f NMDA-evoked [ 3 H ] N E o v e r f l o w i n t h e presence o f v a ri o us c o n c e n t r a t i o n s o f B D - 1 0 6 3 i n c o m b i n a t i o n w i t h DHEA S or PREG S . S e e t h e l e g e n dt o F i g . 1 f o r e x p e r i m e n t a l d e t a i l s . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean SEM o f s e v e n t o n i n e e x p e r i m e n t s . * , P < 0 . 0 5 , a n d * * , P < 0 . 0 1 ; S t u d e n t ' st t e s t v s . b a s a l v a l u e s .n o n s u l f a t e d s t e r o i d s t e s t e d . Th e m o d u l a t o r y e f f e c t s o f b o t hs t e r o i d s were s u p p r e s s e d b y t h e h i g h - a f f i n i t y l i g a n d s h a l o -p e r i d o l a n d B D - 1 0 6 3 as w e l l as b y PR OG. F i n a l l y , PTXp r e t r e a t m e n t , w h i c h i n a c t i v a t e s t h e G i / o t y p e s o f g u a n i n en u c l e o t i d e - b i n d i n g p r o t e i n s ( G i / . p r o t e i n s ) , p r e v e n t e d b o t hDHEA S - a n d PREG S - i n d u c e d e f f e c t s .F a r b ( 3 3 ) , u s i n g w h o l e c e l l r e c o r d i n g s f r o m v o l t a g e - c l a m p e ds p i n a l c h o r d n e u r o n s , o b s e r v e d no e n h a n c i n g e f f e c t o f DHEAS ( a t c o n c e n t r a t i o n s u p t o 1 0 , t M ) o n t h e b a s a l t r a n s m e m b r a n ep o t e n t i a l a n d s p o n t a n e o u s f i r i n g a c t i v i t y . T h i s i s c o n s i s t e n tw i t h t h e p r e s e n t o b s e r v a t i o n s . H e a l s o o b s e r v e d no m o d u l a -t o r y e f f e c t o f DHEA S on t h e n e u r o n a l response t o NMDA.H o w e v e r , M e y e r a n d G r u o l ( 3 4 ) s h o w e d t h a t DHEA S , i n t h e1 0 - 1 0 0 , u M c o n c e n t r a t i o n range, w e a k l y f a c i l i t a t e d t h e a c t i -v a t i o n o f CA 1 n e u r o n s i n h i p p o c a m p a l s l i c e s a f t e r s t i m u l a t i o no f t h e S c h a f f e r c o l l a t e r a l s . Th e i n c r e a s e o f NMDA-evoked[ 3 H ] N E o v e r f l o w b y DHEA S i n t h e p r e s e n t i n v i t r o p a r a d i g mw o u l d seem c o n s i s t e n t w i t h t h e l a t t e r f i n d i n g s . I n t h e l i g h t o ft h e d a t a o f F a r b ( 3 3 ) on i s o l a t e d n e u r o n s , t h e p r e s e n t d a t ao b t a i n e d w i t h h i p p o c a m p a l s l i c e s p o i n t t o a n i n d i r e c t e f f e c t o fDHEA S on t h e NMDA respon se. A l t h o u g h , t o o u r k n o w l -e d g e , t h e a f f i n i t y o f DHEA S f o r a- b i n d i n g s i t e s h a s n o t b e e na s s e s s e d , t h e e f f e c t o f BD-1063 a n d h a l o p e r i d o l , w h i c h i n t e r a c tw i t h t h e a c b i n d i n g s i t e s b u t n o t w i t h t h e NMDA r e c e p t o r ( 2 ,2 6 , 3 5 , 3 6 ) on DHEA S - i n d u c e d p o t e n t i a t i o n o f NMDA-e v o k e d [ 3 H ] N E o v e r f l o w , i n d i ca t es t ha t DHEA S most l i k e l ya c t e d on a- r e c e p t o r s ( F i g s . 1 a n d 2 ) . S p i p e r o n e , w h i c h s h a r e st h e w i d e s p r e a d b i n d i n g p r o p e r t i e s o f h a l o p e r i d o l b u t d i s p l a y sv e r y l o w a f f i n i t y f o r b i n d i n g s i t e s ( 1 , 1 8 , 2 0 - 2 2 ) , f a i l e d t osuppress t h e p o t e n t i a t i o n o f t h e NMDA-e v o k e d [ 3 H ] N E over-f l o w b y DHEA S , t h u s s u p p o r t i n g t h e c o n t e n t i o n t h a t DHEAS m o d u l a t e d t h e NMDA response v i a a- r e c e p t o r s .

Th e p r o t o t y p i c n e u r o s t e r o i d s PREG a n d PREG S ( 3 7 - 3 9 )h a v e no e f f e c t on s p o n t a n e o u s f i r i n g o f h i p p o c a m p a l n e u r o n s( 4 0 - 4 3 ) , i n a c c o r d a n c e w i t h o u r p r e s e n t o b s e r v a t i o n s . How-e v e r , a t m i c r o m o l a r c o n c e n t r a t i o n s , PREG S a l l o s t e r i c a l l y

p o t e n t i a t e s NMDA-evoked c u r r e n t s i n r a t h i p p o c a m p a l n e u -r o n s i n c u l t u r e ( 4 0 , 4 1 , 4 3 , 4 4 ) . Th e l a t t e r r e p o r t s a p p a r e n t l yc o n t r a d i c t t h e p r e s e n t r e s u l t s s h o w i n g t h a t PREG S d e c r e a s e dt h e r e s p o n s e o f h i p p o c a m p a l s l i c e s t o NMDA. A c c o r d i n g l y ,M a t h i s e t a l . ( 4 5 ) h a v e r e c e n t l y shown i n a b e h a v i o r a l m o d e lt h a t PREG S ( 0 . 8 4 - 8 4 0 p m o l , i n t r a c e r e b r o v e n t r i c u l a r l y ) a l s oc o n c e n t r a t i o n - d e p e n d e n t l y b l o c k e d t h e NMDA response.H o w e v e r , i n o u r e x p e r i m e n t s , i n t h e pre s e n c e o f h a l o p e r i d o l( 1 0 0 n M ) , PREG S t e n d e d t o e n h a n c e ( i n t h e 0 . 1 - 1 , A Mc o n c e n t r a t i o n r a n g e ) t h e NMDA-evoked [ 3 H ] N E o v e r f l o w( F i g . 1 B ) a n d i n d u c e d a r o b u s t p o t e n t i a t i o n o f t h e NMDAre s p o n s e f o l l o w i n g G i / 1 , p r o t e i n i n a c t i v a t i o n ( F i g . 3 B ) . P r e v i -o u s r e p o r t s h a v e s h o w n t h a t PREG S d i s p l a c e s r a d i o l a b e l e d a-p r o b e s ( 2 3 , 2 4 , 3 2 ) . H e n c e , t h e p r e s e n t i n h i b i t o r y e f f e c t o fPREG S most l i k e l y c o r r e s p o n d s t o a n i n d i r e c t a- r e c e p t o r -m e d i a t e d m o d u l a t i o n o f t h e NMDA r e s p o n s e s i n c e h a l o p e r -i d o l a n d B D - 1 0 6 3 b l o c k e d PREG S - m e d i a t e d i n h i b i t i o n o f t h eNMDA-evoked [ 3 H ] N E o v e r f l o w . T h u s , PREG S w o u l d e x e r ttwo o p p o s i t e e f f e c t s on NMDA-i nduced n e u r o n a l a c t i v a t i o n :t h e d i r e c t p o t e n t i a t i o n o f NMDA-receptor i n t e r a c t i o n a n d a ni n d i r e c t a - m e d i a t e d i n h i b i t i o n o f t h e NMDA response, w h i c hs e e m s t o p r e d o m i n a t e u n d e r p h y s i o l o g i c a l c o n d i t i o n s .Th e i d e n t i f i c a t i o n o f a t l e a s t i n p a r t o p p o s i t e e f f e c t s o f t h es u l f a t e e s t e r s on t h e NMDA response m a r k e d l y c o n t r a s t s w i t ht h e g e n e r a l o p i n i o n t h a t DHEA S a n d PREG S e x h ib i t s i mi l a ra n t a g o n i s t i c p r o p e r t i e s on t h e - y - a m i n o b u t y r i c a c i d (GABAA)r e c e p t o r f u n c t i o n ( 4 2 ) . I n f a c t , M a j e w s k a a n d c o w o r k e r s( 4 6 - 4 9 ) h a v e p r e v i o u s l y s t a t e d t h a t DHEA S a n d PREG Sb e h a v e d i f f e r e n t l y i n t h e i r c a p a b i l i t y t o d i s p l a c e GABAAr e c e p t o r - a s s o c i a t e d [ 3 5 S ] b u t y l b i c y c l o p h o s p h o r o t h i o n a t e b i n d -i n g . N e v e r t h e l e s s , t h e p r e s e n t i n v i t r o r e l e a s e p a r a d i g m o fNMDA-e v o k e d [ 3 H ] N E o v e r f l o w f r o m p r e l o a d e d r a t h i p -p o c a m p a l s l i c e s c o n s t i t u t e s a r e l e v a n t a p p r o a c h t o d i s c r i m i n a t ee a s i l y t h e e f f e c t s o f DHEA S , PREG S , a n d 3 a , 5 a - T H P S a n da l l o w s u s t o i d e n t i f y p r e c i s e l y t h e i r p r o f i l e o f a c t i o n on t h eNMDA response.

4 -

i 3 -0I

00

> X r0 0" D 2 -o t

z 1-

0 -

P r o c N a t l . Acad S c i . USA 9 2 ( 1 9 9 5 )


4/5

P r o c . N a t l . A c a d . S c i . U S A 9 2 ( 1 9 9 5 ) 3 7 7 7

4-

3 -

A

I 2 -a )c o

0

I8-B00

) 6 -

z4.

2 -

0 i

1 F 1 0 1 6 0 1 6 o o*

oSham*Post-PTX

i*

100D r u g , n M

F I G . 3 . P TX b l o c k s t h e e f f e c t o f DHEA S ( A ) a n d reverses t h a t o fPREG S ( B ) on t h e r e l e a s e o f [ 3 H ] N E e v o k e d b y NMDA ( 2 0 0 , M ) .P TX ( 1 g g ) was s t e r e o t a x i c a l l y i n j e c t e d i n t h e h i p p o c a m p u s 3 - 1 1 d a y sp r i o r t o t h e e x p e r i m e n t s . T h e n e u r o s t e r o i d was a d d e d f r o m t h eb e g i n n i n g o f t h e s u p e r f u s i o n . S e e t h e l e g e n d t o F i g . I f o r e x p e r i m e n t a ld e t a i l s . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean S E M o f s i x t o e i g h te x p e r i m e n t s . * , P < 0 . 0 1 ; S t u d e n t ' s t t e s t v s . b a s a l v a l u e s .

P R O G , a l t h o u g h i n a c t i v e b y i t s e l f , p r e v e n t e d t h e e f f e c t s o fPREG S , DTG, a n d DHEA S on t h e NMDA r e s p o n s e ( F i g . 2 ) ,as d i d t h e o a a n t a g o n i s t s h a l o p e r i d o l a n d B D - 1 0 6 3 ( F i g s . 1 a n d2 ) . PROG h a s b e e n p r o p o s e d as a p o t e n t i a l e n d o g e n e o u sl i g a n d f o r a , s i t e s ( 2 3 , 2 4 , 3 2 ) . C o n si s te n t w i th t h e s e a n d o u rp r e v i o u s o b s e r v a t i o n s , t h e o - m e d i a t e d a n t a g o n i s t - l i k e a c t i v i t yo f PROG i s s u p p o r t e d b y i n v i v o e x p e r i m e n t s s h o w i n g t h a ts t e r e o t a x i c a l l y a d m i n i s t e r e d , PR OG, i n a c t i v e o n NMDA-i n d u c e d n e u r o n a l a c t i v a t i o n , c o u n t e r a c t s t h e D T G - i n d u c e dm o d u l a t i o n o f t h e r e s p o n s e o f CA 3 h i p p o c a m p a l p y r a m i d a lneurons t o NMDA ( 5 0 ) .PTX, a b l o c k e r o f t h e G i / o t y p e s o f G p r o t e i n s ( 5 1 ) , h a s b e e ns h o w n t o i n h i b i t t h e b i n d i n g o f s e v e r a l a f p r o b e s ( 5 2 ) as w e l l ast h e D T G - i n d u c e d d e c r e a s e o f NMDA-evoked [ 3 H ] N E o v e r -f l o w ( 3 ) . S i n c e P TX p r e t r e a t m e n t t o t a l l y a b o l i s h e d t h e DHEAS - m e d i a t e d p o t e n t i a t i o n o f t h e NMDA-evoked [ 3 H ] N E over-f l o w ( F i g . 3 ) , i t i s l i k e l y t h a t t h e m o d u l a t i o n o f t h e NMDAr e s p o n s e b y DHEA S i n v ol v e d a , r e c e p t o r s , w h i c h , u n l i k e o 2r e c e p t o r s , a re c o u p l e d t o G i / o p r o t e i n s ( 2 6 ) . A c c o r d i n g l y , wea l s o a s s u m e t h a t P R E G S i n h i b i t e d t h e NMDA-inducedn e u r o n a l a c t i v a t i o n b y a c t i n g o n Ui r e c e p t o r s .I n c o n c l u s i o n , we h a v e s h o w n t h a t DHEA S , P R E G S , a n dPROG a f f e c t t h e n e u r o n a l e x c i t a b i l i t y i n d u c e d b y NMDA v i at h r e e t y p e s o f i n t e r a c t i o n s : DHEA S a c t s a s a a a g o n i s t , P R E GS a c t s as a ( r i n v e r s e a g o n i s t , a n d PROG a c t s a s a c r a n t a g o n i s t .T h i s f u r t h e r s u p p o r t s t h e n o t i o n t h a t a n i m p o r t a n t p h y s i o l o g -i c a l r o l e o f n e u r o s t e r o i d s m i g h t b e t o m o d u l a t e t h e NMDAr e c e p t o r s .W e are g r a t e f u l t o D r . M . T h . B l u e t - P a j o t , P r o f . R . F a i n , a n d M .

P o u r p r i x f o r t h e i r h e l p i n s t e r e o t a x i c p r o c e d u r e s , t o D r . W. D . Bowenf o r B D - 1 0 6 3 , a n d t o J . C . L a m b e r t f o r t h e i l l u s t r a t i o n s . T h i s w o r k w a ss up po r t ed b y t h e F o n d a ti o n d e F r a n c e a n d t h e M i n i s te re d e l aR e c h e r c h e - D i r e c t i o n d e l a R e c h e r c h e e t d e s E t u d e s D o c t o r a l e s( P a r i s , F r a n c e ; G r a n t R I / R S 2 2 6 6 ) .1 . W a l k e r , J . M . , B o w e n , W. D . , W a l k e r , F . O . , M a t s u m o t o , R . R . ,De C o s t a , B . J . & R i c e , K . C . ( 1 9 9 0 ) P h a r m a c o l . R e v . 4 2 , 3 5 5 - 4 0 2 .2 . M o n n e t , F . P . , D e b o n n e l , G . , J u n i e n , J . L . & d e M o n t ig n y, C .

( 1 9 9 0 ) E u r . J . P h a r m a c o l . 1 7 9 , 4 4 1 - 4 4 5 .3 . M o n n e t , F . P . , B l i e r , P . , D e b o n n e l , G . & d e M o n ti g n y , C . ( 1 9 9 2 )N a u n y n S c h m i e d e b e r g s A r c h . P h a r m a c o l . 3 4 6 , 3 2 - 3 9 .4 . M o n n e t , F . P . , D e b o n n e l , G . & d e M o n t i g n y , C . ( 1 9 9 2 ) J .P h a r m a c o l . E x p . T h e r . 2 6 1 , 1 2 3 - 1 3 0 .5 . M o n n e t , F . P . , D e b o n n e l , G . & d e M o n t i g n y , C . ( 1 9 9 4 ) B r . J .P h a r m a c o l . 1 1 2 , 7 0 9 - 7 1 5 .6 . R o m a n , F . J . , P a s c a u d , X . , D u f f y , 0 . & J u n i e n , J . L . ( 1 9 9 1 ) i nNMDA R e c e p t o r s R e l a t e d A g e n t s : B i o c h e m i s t r y , P h a r m a c o l o g y ,a n d B e h a v i o r , e d . K a m e y a m a , T . , N a b e s h i m a , T . & D o m i n o , E . F .( N P P B o o k s , An n A r b o r , M I ) , p p . 2 1 1 - 2 1 8 .7 . I y e n g a r , S . , D i l w o r t h , V . M . , M i c k , S . J . , C o n t r e r a s , P . C . , M o n a -h a n , J . B . , R a o , T . S . & Wood, P . L . ( 1 9 9 0) B ra i n R e s . 5 2 4 ,3 2 2 - 3 2 6 .8 . I y e n g a r , S . , M i c k , S . , D i l w o r t h , V . , M i c h e l , J . , R a o , T . S . , F a r a h ,J . M . & W o o d , P . L . ( 1 9 9 0 ) N e u r o p h a r m a c o l o g y 2 9 , 2 9 9 - 3 0 3 .9 . I y e n g a r , S . , W o o d , P . L . , M i c k , S . J . , D i l w o r t h , V . M . , G r a y ,N . M . , F a r a h , J . M . , R a o , T . S . & C o n t r e r a s , P . C . ( 1 9 9 1 ) N e u -r o p h a r m a c o l o g y 3 0 , 9 1 5 - 9 2 2 .1 0 . R a o , T . S . , C l e r , J . A . , E m m e t t , M . R . , M i c k , S . , I y e n g a r , S . &W o o d , P . L . ( 1 9 9 0 ) M o l. P h a r m a c o l . 3 7 , 9 7 8 - 9 8 2 .1 1 . R a o , T . S . , M i c k , S . J . , C l e r , J . A . , E m m e t t , M . R . , D i l w o r t h ,V . M . , C o n t r e r a s , P . C . , G r a y , N . M . , W o o d , P . L . & I y e n g a r , S .( 1 9 9 1 ) B r a i n R e s . 5 6 1 , 4 3 - 5 0 .1 2 . M a r t i n , W. J . , R o t h , J . S . & W a l k e r , J . M . ( 1 9 9 2 ) S o c . N e u r o s c i .A b s t r . 2 2 , 1 6 . 6 , 2 2 .1 3 . C o n n i c k , J . H . , A d d a e , J . I . , N i c h o l s o n , C . D . & S t o n e , T . W.( 1 9 9 2 ) E u r . J . P h a r m a c o l . 2 1 4 , 1 6 9 - 1 7 3 .1 4 . M a y e r , M . L . & W e s t b r o o k , G . L . ( 1 9 8 7 ) P r o g . N e u r o b i o l . 2 8 ,1 9 7 - 2 7 6 .1 5 . J o n e s , S . M . , S n e l l , L . D . & J o h n s o n , K . M . ( 1 9 8 7 ) J . P h a r m a c o l .E x p . T h e r . 2 4 0 , 4 9 2 - 4 9 7 .1 6 . P i t t a l u g a , A . & R a i t e r i , M . ( 1 9 9 0 ) E u r . J . P h a r m a c o l . 1 9 1 ,2 3 1 - 2 3 4 .1 7 . R o m a n , F . J . , P a s c a u d , X . , M a r t i n , B . , V a u c h e , D . & J u n i e n , J . L .( 1 9 9 0 ) J . P h a r m . P h a r m a c o l . 4 2 , 4 3 9 - 4 4 0 .1 8 . W e b e r , E . , S on d e r s, M . , Q u a r u m , M . , M c L e a n , S . , P o u , S . &K e a n a , J . F . W. ( 1 9 8 6 ) P r o c . N a t l . A c a d . S c i . U SA 8 3 , 8 7 8 4 - 8 7 8 8 .1 9 . S u , T . P . ( 1 9 8 2 ) J . P h a r m a c o l . E x p . T h e r . 2 2 3 , 2 8 4 - 2 9 0 .2 0 . T a m , S . W . & C o o k , L . ( 1 9 8 4 ) P r o c . N a t l . A c a d . S c i . USA 8 1 ,5 6 1 8 - 5 6 2 1 .2 1 . B u r t , D . R . , C r e e s e , I . & S n y d e r , S . H . ( 1 9 7 7 ) S c i e n c e 1 9 6 ,3 2 6 - 3 2 8 .2 2 . P e r o u t k a , S . J . , U ' P r i c h a r d , D . C . , G r e e n b e r g , D . A . & S n y d e r ,S . H . ( 1 9 7 7 ) N e u r o p h a r m a c o l o g y 1 6 , 5 4 9 - 5 5 6 .2 3 . S u , T . P . , L o n d o n , E . D . & J a f f e , J . H . ( 1 9 8 8 ) S c i e n c e 2 4 0 ,2 1 0 - 2 2 1 .2 4 . S c h w a r t z , S . , P o h l , P . & Z h o u , G . Z . ( 1 9 8 9 ) S c i e n c e 2 4 6 , 1 6 3 5 -1 6 3 7 .2 5 . P a x i n o s , G . & W a t s o n , C . ( 1 9 8 6 ) T h e R a t B r a i n : I n S t e r e o t a x i sC o o r d i n a t e s ( A c a d e m i c , Ne w Y o r k ) , 2 n d E d .2 6 . Q u i r i o n , R . , B o w e n , W . D . , I t z h a k , Y . , J u n i e n , J . L . , M u s a c c h i o ,J . M . , R o t h m a n , R . B . , S u , T . P . , T a m , S . W. & T a y l o r , D . P .( 1 9 9 2 ) T r e n d s P h a r m a c o l . S c i . 1 3 , 8 5 - 8 6 .2 7 . M a t s u m o t o , R . R . , B o w e n , W . D . , T r u o n g , D . D . , T o m , M . A . ,W a l k e r , J . M . & d e C o s t a , B . R . ( 1 9 9 3 ) S o c . N e u r o s c i . A b s t r . 2 3 ,1 7 7 . 9 , 4 2 1 .2 8 . G o t h e r t , M . & F i n k , K . ( 1 9 8 9 ) N a u n y n S c h m i e d e b e r g s A r c h .P h a r m a c o l . 3 4 0 , 5 1 6 - 5 2 1 .2 9 . R a i t e r i , M . , G a r r o n e , B . & P i t t a l u g a , A . ( 1 9 9 2 ) J . P h a r m a c o l . E x p .T h e r . 2 6 0 , 2 3 8 - 2 4 2 .3 0 . F i n k , K . , B o n i s c h , H . & G o t h e r t , M . ( 1 9 9 0 ) E u r . J . P h a r m a c o l .1 8 5 , 1 1 5 - 1 1 7 .3 1 . H o e h n , K . & W h i t e , T . D . ( 1 9 9 0 ) N e u r o s c i e n c e 3 9 , 4 4 1 - 4 5 0 .3 2 . K l e i n , M . & M u s a c c h i o , J . M . ( 1 9 9 4 ) i n S i g m a R e c e p t o r s , e d .I t z h a k , Y . ( A c a d e m i c , L o n d o n ) , p p . 2 4 3 - 2 6 2 .3 3 . F a r b , D . H . ( 1 9 9 2 ) N o v e l A c t i o n s o f S t e r o i d s M e e t i n g ( C o C e n S y s ,I r v i n e , C A ) , p p . 7 - 8 .

N e u r o b i o l o g y : M o n n e t e t a t


5/5

3 7 7 8 N e u r o b i o l o g y : M o n n e t e t a l3 4 . M e y e r , J . H . & G r u o l , D . L . ( 1 9 9 4 ) B r a i n R e s . 6 3 3 , 2 5 3 - 2 6 1 .3 5 . Z u k i n , R . S . & Z u k i n , S . R . ( 1 9 8 1 ) M o l . P h a r m a c o l . 2 0 , 2 4 6 - 2 5 2 .3 6 . C h u r c h , J . & L o d g e , D . ( 1 9 9 0 ) J . P h a r m . P h a r m a c o l . 4 2 , 5 6 - 5 7 .3 7 . H u , Z . Y . , B o u r r e a u , E . , J u n g - T e s t a s , I . , R o b e l , P . & B a u l i e u ,E . E . ( 1 9 8 7 ) P r o c . N a t l . A c a d . S c i . U S A 8 4 , 8 2 1 5 - 8 2 1 9 .3 8 . J u n g - T e s t a s , I . , H u , Z . Y . , B a u l i e u , E . E . & R o b e l , P . ( 1 9 8 9 )E n d o c r i n o l o g y 1 2 5 , 2 0 8 3 - 2 0 9 1 .3 9 . B a u l i e u , E . E . ( 1 9 9 1 ) B i o . C e l l . 7 1 , 3 - 1 0 .4 0 . W u , F . S . T . , G i b b s , T . T . & F a r b , D . H . ( 1 9 9 1 ) M o l . P h a r m n a c o l .4 0 , 3 3 3 - 3 3 6 .4 1 . I r w i n , R . P . , M a r a g a k i s , N . J . , R o g a w s k i , M . A . , P ur dy , R . H . ,F a r b , D . H . & P a u l , S . M . ( 1 9 9 2 ) N e u r o s c i . L e t t . 1 4 1 , 3 0 - 3 4 .4 2 . P a u l , S . M . & P u r d y , R . H . ( 1 9 9 2 ) F A S E B J . 6 , 2 3 1 1 - 2 3 2 2 .4 3 . B o w l b y , M . R . ( 1 9 9 3 ) M o l . P h a r m a c o l . 4 3 , 8 1 3 - 8 1 9 .4 4 . W o n g , M . & M o s s , R . L . ( 1 9 9 4 ) J . N e u r o e n d o c r i n o l . 6 , 3 4 7 - 3 5 5 .

P r o c . N a t l . A c a d . S c i USA 9 2 ( 1 9 9 5 )4 5 . M a t h i s , C . , P a u l , S . M . & C r a w l e y , J . N . ( 1 9 9 4 ) P s y c h o p h a r m a -c o l o g y 1 1 6 , 2 0 1 - 2 0 6 .4 6 . M a j e w s k a , M . D . & S c h w a r t z , R . D . ( 1 9 8 7 ) B r a i n R e s . 4 0 4 ,3 5 5 - 3 6 0 .4 7 . M a j e w s k a , M . D . , M i e n v i l l e , J . M . & V i c i n i , S . ( 1 9 8 8 ) N e u r o s c i .L e t t . 9 0 , 2 7 9 - 2 8 4 .4 8 . M a j e w s k a , M . D . , D e m i r g o r e n , S . , S p i v a k , C . E . & L o n d o n , E . D .( 1 9 9 0 ) B r a i n R e s . 5 2 6 , 1 4 3 - 1 4 6 .4 9 . D e m i r g o r e n , S . & M a j e w s k a , M . D . ( 1 9 9 1 ) N e u r o s c i e n c e 4 5 ,1 2 7 - 1 3 5 .5 0 . B e r g e r o n , R . , D e b o n n e l , G . & d e M o n t i g n y , C . ( 1 9 9 4 ) S o c .N e u r o s c i . A b s t r . 2 0 , 3 1 4 . 1 1 .5 1 . G i l m a n , A . G . ( 1 9 8 7 ) A n n u . R e v . B i o c h e m . 5 6 , 6 1 5 - 6 4 9 .5 2 . I t z h a k , Y . ( 1 9 8 9 ) M o l . P h a r m a c o l . 3 6 , 5 1 2 - 5 1 7 .

francois p. monnet et al- neurosteroids, via sigma receptors, modulate the [^3-h]norepinephrine...

Documents