ESTUDIO DE LIQUIDOS

BIOLOGICOS

LIC. TM DAVID G. QUISPE ARANDA

2008

ESPERMATOGRAMA ( ESPERMIOGRAMA)

I. EXAMEN MACROSCOPICO ( Características Físicas )

VOLUMEN Normal 2 – 6 ml ( 3 – 5 días de abstinencia ) Polisemia > 8 ml Oligosemia < 2 ml

LICUEFACCION Normal 15 minutos tras emisión Aumentada > 15 minutos tras emisión

COLOR Normal blanquecino – opalescente Amarillento Proceso supurativo ( piosperma ) Prolongada abstinencia sexual Rosado-Rojizo Sangre

PH Normal 7.3 – 7.4 Variación Fisiológica 7- 8.1 prostatitis

> 8 infl. de glándulas sex. vesiculitis epididimitis

Pat

< 8 oclusión de conductos eyac ( patol. crónicas )

VISCOCIDAD Se observa el deslizamiento del semen desde la punta de unapipeta pasteur de forma que si su viscosidad es normal cuandocae gota a gotaDisminución - ausencia de coagulación espontáneadel liquido seminal ( disminución de espermatozoides oausencia de espermatozoides )Aumentada - anulación total de progresiónespermática en el moco cervical

FILANCIA

El semen forma un filamento de hasta 1 cm al introducir unavarilla fina o una asa de siembra y retíralo suavemente.Aumentada - filamento > 1 cm ( semen nolicuado o viscosidad aumentada

Recuento VASECTOMIAII. EXAMEN MICROSCOPICO Movilidad Índice de vitalidad Estudio morfológico

1. EXAMEN DIRECTO Observación en fresco en lamina P-O Presencia y ausencia de esper. y cls espermáticas Concentración aproximada de esp.

MovilidadObservar Aglutinación de espermatozoides Formas anormales de esp. Leucocitos, hematíes Cristales de fosfato de espermita ( agujas)

2. ESTUDIO DE MOTILIDAD

Se valora observando varios campos ( 40 x), contando por lo menos200 espermatozoidesSe registrar el porcentaje total de espermatozoides que presentanmovilidad y el porcentaje de inmóvilesSe debe hacer el porcentaje cualitativo ( % ) de la motilidadclasificando los espermatozoides según categoríasOtra forma de clasificarlos es según :

• Movilidad activa ------ avanzan• Movilidad pasiva------- se mueven pero no avanzan

SE REALIZA CUANDO EL SEMEN ESTA YA LICUADO

Portaobjetoscalentado a 37

º

Depositar unagota de muestra

Cubrir concubreobjetos

Observar con elobjetivo 40 x

3. INDICE DE VITALIDAD

Estudio de Necrospermia ( espermatozoides muertos )Estudio complementario de la motilidad – distingue dentro del grupo de formasmóviles las vivas de las muertas

Los resultados se expresan como % de espermatozoides teñidos

Normal ------ coloración con eosina < 40 % Patológica --- ( infertilidad ) > 40 %

4. RECUENTO

1. homogeneizar muestra2. Dilución de la muestra 1/20 ( diluyente macomber – saunders )3. Llenar cámara de Neubauer – reposar 2 minutos ( cámara húmeda)4. Observar muestra 10 x – 2 cuadrados de leucocitos5. Calculo ( espermatozoides / ml )

% de teñidos < % de inmóviles

Después de licuefacción del semen

• Movimiento rápido y rectilíneo categoría a

• Movimiento progresivo pero menor o no rectilíneo categoría b

• Movimiento sin progresión categoría c

• Inmóviles categoría d

Interpretación Clínica

NORMAL 60-50 % movilidad

ASTENOSPERMIA Menos de 50 % de formas móviles a las 2 horas

NECROSPERMIA Todas las formas carecen de motilidad

Sol. eosina

Sol. nigrosina

Depositar 1 gota demuestra y 1 gota de

sol. Eosina .Homogeneizar 20 “

Añadir una gota desol. De nigrosina

Homogeneizar

Tapar con el cubreprocurando no hacer

burbujas

Observar con elobjetivo de 40 x

Hasta 11 condiluyente 0.5 muestra

Llenado de la pipeta de thomaDilución 1/20

Llenado de la cámara de Neubauer ysedimentación de los espermatozoides encámara húmeda

Zona derecuento

Nº de espermatozoides contados = NC

Normal = 50 – 120 millones de espermatozoides / ml

5. FORMULA ESPERMATICA

Valora el potencial fecundativo junto con el numero total de espermatozoides ysu motilidad. Se valora los tipos de espermatozoides normales y anormales enextensiones teñidas también se observa células de espermiogenesis

Nº espermatozoides / ml =NC x 100 000

CLASIFICACION DEL SEMEN EN FUNCION DEL NUMERO DE ESPERMATOZIDES

HIPERESPERMIA Superior a 250 millones / ml

NORMOSPERMIA De 20 a 250 millones / ml

OLIGOSPERMIA De 1 a 20 millones / ml

AZOOSPERMIA Ausencia de espermatozoides madurosPresencia de células de espermiogenesis

ASPERMIA Ausencia de espermatozoidesAusencia de células de espermiogenesis

NORMAL

ANOMALIASDE LA

CABEZA

• Cabezas duplicadas• Cabezas gigantes• Cabezas pequeñas• Cabezas redondas• Cabezas alargadas• Cabezas amorfas• Cabezas encogidas

ANOMALIASDEL

CUELLO

• Engrosado• Largado• Inmaduro• Ausente

ANOMALIASDE LA COLA

• Bifida• Mal implantada• Enrollada• Ausente

Depositar 1gota de muestraen un extremo

Hacer unaextensión

Cubrir conalcohol metilico 5minutos y dejar

secar

Cubrir conwrigth durante

4 minutos

7.2

Diluir con aguade ph 7.2 , 4

minutos

Lavar conagua

destilada

Cubrir congiemsa

diluido 12minutos

*Lavar con agua

corriente

suavemente

*Secar

*observar con

objetivo 100x

Giemsa

Se registran los porcentajes de espermatozoides normales y anormales y dentrode estas ultimas el tipo de anormales encontradas y su proporción (anormalidades en cola, cabeza y cuello ) . También se informa de la presenciade células de espermiogenesis y teratogenas , células sanguíneas y cualquierotro tipo de células que se pueden observar .

Normal – índice de malformaciones < 30 %Patológica - > 40 % ( teratospermia esterilidad definitiva ) Liquido seminal hipofecundante - alteraciones morfológicas 30 – 40 % Aumento de cls. Descamación (uretra – próstata) / uretritis – prostatitis

III. EXAMEN QUIMICO

Dosificación de ciertos compuestos secretados por :

Vesículas seminales - fructosaPróstata - acido cítrico, fosfatasa acida, zinc ( act. Bacteriana)Epidídimo - carnitina

EXAMEN MICROSCOPICO RANGO NORMALNumero de espermatozoides Mayor de 25 millones / ml

Movilidad Mayor de 50 %

Vitalidad Mayor de 50 %

Espermatozoides normales Mas de 70 %

Alteraciones de cabeza 18 %

Alteraciones de cuello 5 %

Alteraciones de cola 5 %

Alteraciones mixtas 0 – 2 %

Células espermiogenicas y teratogenas 1 – 3 %

Leucocitos 1-2 / campo ( menos de 15/campo )

Eritrocitos Ausentes

Otras células 0 – 0.5 %

Hallazgos en el liquido seminal en las patologías mas frecuentes

Hallazgos en el liquido seminal PatologíasVolumen, recuento y motilidad disminuidos • Infertilidad

Licuación• Inflamación de próstata• Inflamación de vesículas seminales

Viscosidad elevada • Función prostática defectuosa BlancoColor alterado Claro Rojo

• Infección• Oligospermia• Sangre

Motilidad y recuento disminuidos ( menos del50 % de movilidad a las 2 horas )

• Lesión de los testículos• Lesión del epidídimo

AspermiaDisminución delNumero de OligospermiaEspermatozoides con motilidad y morfología normal

• Insuficiencia testicular de excreción• Oclusión de conductos deferentes

• Lesión en los testículos• Trastorno en el mecanismo eyaculat• Estenosis de los conductos deferentes• Periodo corto de abstinencia sexual

Morfología alterada

Infertilidad debida a :• Orquitis por parotiditis• Mala nutrición• Medicamentos• Radiaciones• Exceso de calor local ( rop apretad)• Cirugía• Infección de conductos deferentes• Criptorquidia• Aplasia germinal• Defectos hormonales (hipofisiarios, tiroideos)

Aumento de leucocitos

• Prostatitis• Uretritis• Epididimitos• Orquitis

Presencia de eritrocitos o hemoglobina• Traumatismo• Tumor maligno del tracto genital• Daño renal

Acido cítrico disminuido• Inflamaciones prostáticas• Neoplasias prostáticas

Fructosa disminuida• Falta de estimulación hormonal• Trastorno funcional de las vesículas seminales

ESTUDIO DEL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO

I. TOMA DE MUESTRAEstéril ( cultivo )

VOLUMEN ( 2.5 – 5 ml ) Heparina ( citológico )

3 tubos Fluoruro de sodio ( bioquímica )

HOJA DE INFORME DE UNA ANALISIS DE LIQUIDO SEMINALCONDICIONES DEL EXAMEN

Hora de eyaculacion……………….. Método de obtención …………………….Hora de examen …………………… Abstinencia sexual ………………….........Tiempo de transporte ……………… Ultimo proceso febril …………………….

EXAMEN MACROSCOPICOVolumen………………………....... Aspecto …………………………………..Color……………………….........… Licuación………………………............….Olor………………………...……… Filancia………………………...………….Viscosidad………………………… Ph………………………...……………….

EXAMEN MICROSCOPICO

PREPARADO DE ORIENTACIONEspermatozoos……………………. Aglutinación………………………………Células……………………………. Cristalización……………………………...Espermiofagia…………………….. Leucocitos por campo…………………….

NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML……………………………………..MOVILIDADInmóviles…………………………%Movilidad total …………………...% Activa………….% Pasiva …………%VITALIDAD Espermatozoos teñidos ……………………………% Índice de vitalidad…………………………………%

ESPERMIOCITOGRAMA Espermatozoos normales…………….…% Espermatozoos anormales……...…….…% Alteraciones de cabeza……...………% Macros ………..% Micros ………% Alteraciones de Seg. Int……………..% Alteraciones de cola……...…………% Alteraciones mixtas……...……….…% Células de espermiogenesis …………. Leucocitos……………………………. Otras células………………………….

BIOQUIMICA

Fructosa………………………..……..mg/dl Acido cítrico………………..mg/dlFosfatasa acida……………………….UI/ml Zinc………...……………….mg/dl

DIAGNOSTICO………………………………………………………

Análisis a realizar en una muestra de LCR

ANALISIS

EXAMEN FISICO Estudio de caracteres organolépticosEXAMEN

CITOLOGICORecuento y diferenciación de célulassanguineas y tisulares

EXAMEN QUIMICO Determinaciones de metabolitos y Ph

EXAMENMICROBIOLOGICO

Demostración del germen causal o deetiología infecciosa

EXAMENINMUNOLOGICO

Detección de antigenos y anticuerpos

Bioquímica Microbiología Citología

II. EXAMEN FISICO

Normal : liquido / límpido / cristalino / transparente ASPECTO Anormal :Turbio / empañado / opalescente / sanguinolento Se expresa la turbidez en cruces ( 0-4)

Cuando hay aumento de proteínas ( exceso de fibrinogeno )pueden aparecer coágulos

COLOR Normal : incoloro Anormal : rojizo – hematíes Oxihemoglobina Amarillo (xantocromico) :pigmento Metahemoglobin Bilirrubina

III. EXAMEN CITOLOGICO Leucocitos mononuclearesMalignas

Células (escasas) Plasmáticas Macrófagos Glias . Ependimarias

1. RECUENTO CELULAR TOTAL

1. Homogenizar muestra . Diluir ( muestra ) si esta turbio2. Llenar cámara de Neubauer3. Observar muestra ( 10x ) se cuentan los 4 cuadrados grandes de las

esquinas .

4. Calcular leucocitos / ul ( si no hay dilución )Nº de células contadas = NC

Normal < 5 células / ul Monocitos Aumento PLEOCITOSIS Linfocitos de células

Enfermedades infecciosas inflamación

Características físicas del LCR normal

PARAMETRO VALORES NORMALESVolumen 90 – 200 ml (adultos)

10-60 ml (recién nacidos)Presión 70-200 mm agua( adultos )

50-100 mm agua ( niños )Color TransparentesTurbidez InexistenteViscosidad Similar a la del aguaDensidad 1,005-1,008pH 7,4 - 7,5

Procesos Infecciosos-TURBIDEZ-

Leucocitos Eritrocitos Microorganismos

Se diferencia una hemorragia traumática porpunción, cuando al centrifugar la muestra y se

observa el sobrenadante este esta claro.

Examen dentro de la primera media hora de extracciónpues las alteraciones celulares aparecen rápidamente

Nº células / ul = NC / 4 x 10

Retículo de la cámara de Neubauer.Zona de recuento

Dirección del contaje de leucocitos. Secuentan los dos leucocitos sobre las

líneas gruesas

1. RECUENTO DIFERENCIAL

Indica el porcentaje de Liquido Turbio Frotis directo del LCRmononucleares ypolimorfonucleares Liquido transparente Concentrar el LCR

1. Concentración celular ( centrifugación suave por 15 minutos2. Tinción con wrigth3. Observación al microscopia ( 100 X) se cuentan los diferentes tipos de

células y se expresa en porcentaje.

III. EXAMEN QUIMICOSangre ( difusión )

1. PROTEINAS Origen SNC ( síntesis )

METODO TURBIDIMETRICO ( precipitación de proteínas )

1. Mezclar en un tubo LCR (sobrenadante de la centrifugación ) y reactivo tricloroacetico al 3% en partes iguales

2. Reposar 10 minutos3. Leer absorbancia 500 nm frente al blanco de agua destilada4. La Absorbancia leída es proporcional a la concentración de

Proteínas

Normal : 0.2 - 0.4 gr /L Recién Nacidos : aumentan ( 5to – 6to mes ) > 40 años : aumentan mayor de 0.6 gr/L ******Procesos infecciosos que afectan al SNC aumenta la

concentración de Proteínas del LCR ******

Resultados del análisis citológico en diferentes patologías

EXAMEN CITOLOGICO PATOLOGIAS ASOCIADAS

RECUENTO

TOTAL

Pleocitosis moderada10-30celulas/mm3

Meningitis tuberculosaEncefalitis

Tumores del SNCPleocitosis acentuada

100-10,0000celulas/mm3 Meningitis purulentaPleocitosis extrema

Hasta 50,0000celulas/mm3 Roturas de abscesos cerebrales

RECUENTO

DIFERENCIAL

Predominio de neutrofilos Meningitis purulenta

Predominio de linfocitos

Meningitis tuberculosa y bacterianatratada

Meningitis víricas y sifilíticaMeningitis nicóticas

Síndrome de Guillain Barre

Presencia de eosinofilos Meningitis de origen parasitario

Presencia de célulasplasmáticas con linfocitos

Procesos inflamatorios crónicosEsclerosis múltiple

Presencia de histiocitosmalignos

Tumores cerebrales

Presencia de macrófagos Infartos cranealesSustancias extrañas en LCR

Proteinorraquia Patologías Causas

AUMENTO Siempre que haya

Sangre

Pus

HemoglobinaProteínas plasmáticas

Proteínas celularesExudado por meningesinflamadas

AUMENTO

LIGERO

Inflamación de tejidos cerebralesEsclerosis múltipleEncefalitis , polineuritisMeningitis tuberculosa y luéticaAlteraciones vascularesProcesos tumorales

Exudación por la inflamaciónAumento del contenido celularObstrucción de la circulación

AUMENTO

IMPORTANTE

Bloqueo del canal espinalMeningitis infecciosaAbscesos cerebralesSíndrome de Guillain-Barre

Estasis en la resorción del LCRMayor permeabilidad de labarrera sangre-LCRDegeneración tisular

La concentración de proteínas en el LCR son20 veces menor que las del plasma

2. GLUCOSA

Aumenta : diabetes mellitus Disminuye : uso aumentado debido a la presencia de

leucocitos o gérmenes en el LCR

Se realiza por el método enzimático de la glucosa Oxidasa de maneramanual o automatizada ( HITACHI )

difusión de sangre3. LACTATO DESHIDROGENASA gérmenes,

( LDH ) -origen- células ( leucocitos,células Tumorales )

Se utiliza para el diagnostico diferencial de una meningitisbacteriana y víricaAumenta en hemorragias subaracnoideas, leucemias y linfomas ocarcinomas metastáticos del SNC

4. ADENOSIN DESAMINASA ( ADA )

Diagnostico de meningitis tuberculosaValor > 9 U / L

5. TGO

Aumenta en meningitis , hemorragias y tumores

Variaciones de la glucorraquia en diversaspatologías

Glucorraquia Patologías

DISMINUIDA

Meningitis purulentas

Meningitis tuberculosa

Carcinomas meníngeos

Hipoglucemia

NORMAL Infecciones virales

Meningitis no infecciosa

AUMENTADA Diabetes mellitus

La concentración de glucosa es la mitad de losniveles sanguíneos ( 50 – 80 mg / dl )

Reacción de PANDY : colocar en un tubo 2 mlreactivo ( 10 gr fenol /100 ml agua destilada-estufa 37ºC 2 – dias. Tomar el sobrenadante ) , yagregar 1 gota de LCR.Normal – no hay turbidez o ligera turbidezAnormal – turbidez lechosa ( aumento deglobulinas ). Hemorragia, alteracionesinflamatorias o degenerativas, meningitis TBC osifilítica .

N = normal E = Elevado ME = Muy ElevadoMME = Muy Muy Elevado D = Disminuido MD = Muy Disminuido

Perfiles analíticos del LCR en diversas patologías del SNC

Patología Aspecto Células Proteínas Glucosa Cloruros Presión Otros

Normal Claro De 2-5 mm3.

Linfocitos

50-80mg/dl

120-130mmol/l

70-200mm

H2O

Meningitisbacteriana

Turbioamarillocoágulos

MME80-90% de

granulocitosMME MD N o D ME

Meningitisvírica

Claro o ligerocolor amarillo

MEInicialmenteGranulocitos

Despuéslinfocitos

E N N N o E

MeningitisTuberculosa

ClaroRaramente

turbio

ELinfocitos ME D MD E Bacter

+

MeningitisSifilítica

Incoloro.A vecescoágulos

10-1000cel/mm3linfocitos

E N o D N MEPbas

Serolo+

Hemorragiacerebral

SanguinolenHematíes ensedimento

Xantocromia

25-2000Predominiolinfocitos

MME N o E N o D E

Abscesocerebral

Claro o turbioPredominan

PMN alinicio.

Despuéslinfocitos

E N o E N o E E

Trombosiscerebral Claro N o E N o E N o E N o D E AST

Elev.

Esclerosismúltiple

Claro EPredominan

linfocitos

ElevadasPT/IgGElevadaA/GT

Oligoclonal

N N E

TumorCerebral

Incoloro oXantocromico

N o EPredominan

linfocitosN o ME N N E Celu.

tumor

Muy hemorragicoen 3 tubos sucesivos

Muy turbio

Claro opoco turbio

PROTEINAS

Xantocromico

GLUCOSA

PROTEINAS

ESTUDIO DEL LIQUIDO SINOVIAL

1.Características Físicas 2. Bioquímica 3. Citología 4. Estudio de cristales 5.Examen bacteriológico 6. Examen inmunológico

I. EXAMEN FISICO.

1. ASPECTO Normal amarillo pálido – casi incoloro

Hoja informe de un análisis de LCRMuestra : liquido cefalorraquídeo

VOLUMEN EXTRAIDO :PRESION :ASPECTO :COLORACION :PIGMENTOS :DENSIDAD :

EXAMEN CITOLOGICO CRITERIOS DE VALORACION

LEUCOCITOS TOTALES :MononuclearesPolinucleares

Hasta 5/ ulHasta 5/ ul

Menos de 1/ulHEMATIES :OTRAS CELULAS :

AusenciaAusencia

BIOQUIMICA CRITERIOS DE VALORACION

PROTEINAS TOTALES 0,15-0,40 g/LPROTEINOGRAMA

Pre-albuminaAlbuminaGlobulinas totalesAlfa-1Alfa-2BetaGammaCociente A/GT

3-7%50-70%20-45%3-8%

4-10%7-12%4-12%Hasta 8

GLUCOSAAdultos :0.4-0.75 g/L

Niños : 0.5-0.8g/LCLORUROS 120-130mmol/LLACTATO 1.1-2.8 mmol/LTGO 7-45 mU/mLADA Hasta 5 U/L

INMUNOLOGIA CRITERIOS DE VALORACION

AntiVIH NegativoFTA-ABS No se detectanANTICUERPOSANTIMICROBIANOS

Ausentes

MICROBIOLOGIA CRITERIOS DE VALORACION

Crecimiento de microorganismosEstudio de sensibilidad

Aspecto Normal : amarillo pálido transparente

LECHOSO

Artritis tuberculosaArtritis reumatoide crónicaArtritis gotosaLupus eritematoso

PURULENTOArtritis infecciosaArtritis supurada de otro origen

VERDOSOArtritis por HemophilusSinusitis aguda por gota o pseudo gota

AMARILLO INTENSO Procesos inflamatorios

ROJO SANGUINOLENTO

Artritis traumáticaTumores sinovialesArtropatía neurogenicaDiatesis hemorrágicasPunción traumática

Fragmento

cartílagos

Cristales Fibrina

Procesos

inflamatorio

Aumento de

leucocitos

Patológico

-TURBIO-0- 4 cruces

2. VISCOCIDAD Y FILANCIA

Normal liquido viscoso , pegajoso al tacto

Patológico disminuye la viscosidad

Procedimiento

1. Dejar gotear el liquido desde una jeringa desprovista de laaguja , a un tubo de ensayo

2. Se observa si cae gota agota formando un filamento en sucaída……….VISCOCIDAD NORMAL

***FILANCIA Estudio complementario de la viscosidad

Procedimiento1. S coloca una gota de liquido sinovial entre el dedo pulgar

y el dedo índice y se presiona2. Se separan los dedos3. Se debe observar un filamento de 3 a 6 cm de longitud

PRUEBA DEL COAGULO DE MUCINA

1. Colocar en un tubo 2 ml de acido acético 10 %2. Adicionar una gota de liquido sinovial3. Normal, si se observa un coagulo o precipitado firme

Patológico , si el coagulo es blando que se fragmentafácilmente o se observa una suspensión turbia sincoagulo. ( enfermedades inflamatorias activas )

II. EXAMEN CITOLOGICO

1. RECUENTO CELULAR

Normal 10 – 200 células / ul ( casi todos leucocitos )

Patológico > 200 leucocitos / ul

Procedimiento

1. Homogeneizar muestra2. Dilución si es necesario ( 1/20 o 1/50 o 1/ 100 )

Con suero fisiológico al 0.1 % de azul demetileno

3. Reposar 10 minutos, antes de llenar la cámarade Neubauer

4. Llenar cámara de recuento5. Observar al microscopio con 10 x para

comprobar la distribución homogénea. Observarcon 40 x y se cuentan 4 cuadrados grandes delas esquinas ( leucocitos)

6. Calculo : Nº de células contadas = NCVISCOSIDAD NORMAL :Elevada aunque depende de la articulación

DISMINUIDA EdadDerrames articulares inflamatoriosInfecciones

SE MANTIENE ELEVADA Derrames traumáticosDerrames de las artrosis

Una filancia disminuida se observa cuando elfilamento formado es menor de a 3cm

Nº células(leucocitos) / ul = NC x2.5x Dilución ( inversa)

Si el liquido sinovial es hemorrágico, lisar hematíesutilizando una solución hipotónica (0.3% ),Hematíes de cuantifican de manera cualitativa , ausenciao presencia ( escasos, abundantes , muy abundantes )

2. RECUENTO DIFERENCIAL.

Polimorfonucleares 7 – 10 % ( aceptable hasta 25 % )

Mononucleares 70 % Linfocitos 15 - 35 % Monolitos 35 - 55 %

Células sinoviales 3 – 5 %

Células plasmáticas 10 %

Otras células hasta 7 %

Procedimiento

1. Tinción directa de liquido sinovial o tinción del sedimento obtenida por centrifugación2. Elaboración del frotis3. Tinción – Wrigth4. Estudio morfológico celular – 100 x

Normal < 25 % PMNPatológico Aumento de PMN ---- Inflamación e infecciones

articulares.

III. INVESTIGACION DE CRISTALES.

El liquido sinovial debe recogerse sin anticoagulantes o preservantes ( EDTA uOxalato de calcio ) porque pueden formar cristales que pueden dar falsosresultados .En el procedimiento para observar cristales :

1. Se utiliza un microscopio óptico convencional. Tambiénse puede utilizar un microscopio de luz polarizada,donde los cristales se observan mas brillantes ybirrefrigentes.

2. Se deposita una gota de liquido en una lamina portaobjetos limpio.

3. Se cubre con una laminilla cubre objeto, realizando unaligera presión

4. Se absorbe el liquido sobrante con papel filtro5. Se sella con barniz el borde de la laminilla para evitar la

desecación6. Observa al microscopio ( 40 x)

CELULAS AR…. Leucocitos PMN coninclusiones citoplasmáticas abundantes y oscurasque contienen IgG e IgM ( FR ).Se presentan en pacientes con Artritis reumatoide (no son especificas de esta patología ), gota, artritissepticas .

CELULAS LE ….Son neutrofilos cuyas vacuolascontienen material nuclearSe presentan en la artritis del Lupus Eritematoso.

Urato monosodico

Hidroxiapatita

Pirofosfato calcico

Colesterol

IV. EXAMEN QUIMICO

1. PROTEINAS Normal : 15 – 30 gr / L artritis reumatoide Artritis séptica Patológico : procesos articulares gota

Artritis - TBC

Se realiza de manera automatizada ( HITACHI )

2. GLUCOSAConcentración similar al plasma sanguíneo oLigeramente menorSi disminuye a la mitad sugiere infección bacteriana

Se realiza de manera automatizada ( HITACHI )

3. LDHIndica alguna inflamación

> de 30 mg/dl …inflamación

CRISTAL ESTRUCTURA PATOLOGIA

URATO

MONOSODICOAlargados con forma de agujas de tamaño variableBirrefringencia positivaAbundantes en el líquidos sinovial de las articulacionesInflamadas flotando libres o en el citoplasma de neutrofilos

GOTA

PIROFOSFATO

CALCICO

Tienen forma de barra, bastones o romboides.Localizados dentro de los leucocitos y fuera de ellosPueden ser muy escasosBirrefringencia positiva

PSEUDOGOTA

HIDROXIAPATITA

Brillantes con el contorno irregular y de muy pequeñotamaño.Forma de vara o aguja. Aislados solo visibles al microscopioelectrónico. Se ven agregados en masas brillantes nobirrefringentes en derrames

ARTRITIS

COLESTEROL La forma habitual es en placas finas. En procesos crónicos,forma de agujas o romboides.Tamaño mayor que los anteriores

ARTRITISREUMATOIDE(ocasionalmente)

MUESTRA LIQUIDO SINOVIAL

Procedencia:………………………...………………………...…………………….Presencia de derrame………………………...………………………...……….……Volumen extraído ………………………...………………………...………………Aspecto………………………...………………………...……………………….....Viscosidad /Mucina………………………...………………………..........................

EXAMEN CITOLOGICO

LEUCOCITOS TOTALES………………..neutro/mm3 hasta 200 Mononucleares ………………………...% 75 – 90 % Polinucleares ………………………...…% 10 – 25 %

FORMULA LEUCOCITARIA

Segmentados…………..…..% 5 – 10 %Cayados…………………....% 0 – 1 %Eosinofilos………………...% 0 – 1 %Linfocitos……………….…% 15 – 35 %Monolitos……………….…% 35 – 55 %Plasmocitos………………..% 8 – 10 %Fagocitos…………………..% hasta 7 %Células sinoviales………….% hasta 5 %

HEMATIES ..…………………… Ausentes

CRISTALES

Presencia de : …………………... Ausentes

EXAMEN QUIMICO

Glucosa …………………….... g/l 0.55 - 1.0 g/l

Proteínas totales …………….. g/l 5 – 30 g/l

Lactato ………………….….. mg/dl 20 – 30 mg/dl

MICROBIOLOGICO

Sedimento………………………...………………………...………………………...

Cultivo………………………...………………………...………………………........

INMUNOLOGICO

Complemento………………………...………………………...…………………….

Hallazgos en el LIQUIDO SINOVIAL en las patologías mas frecuentes

TIPOSValores

Normales

No

inflamatorio

InflamatorioSéptico Hemorrágico

Aspecto

Color

Viscosidad

Leucocitos

% de PMN

Proteínas g/l

Glucosa

Cristales

Gérmenes

Transparente

Claro

Elevada

Menor de 200

Menos del25%

15 – 30

Similar a

glucemia

No

No

Transparente

Amarillento

Elevada

20-2000

Menos del25%

15 – 30

Similar a

glucemia

No

No

Turbio

Amarillo

Disminuida

2000-75000

Mas del 50%

Mas de 30

Reducida

Si

No

Purulento

Amarillo7marro

Disminuida

Mayor100000

Mas del 75 %

Mas de 30

Muy reducida

No

Si

Turbio

Rojizo

Elevada

Hematíes

Según sangre

Mas de 30

Similar a glucemia

Si

No

PATOLOGIAS

*Artrosis

*Artropatías

postraumáticas

* Artropatías

nerviosas

* Artropatías

metabólicas

*Osteonecrosis

*Artritis por

cristales

*reumatismos

inflamatorios

*Artritis sépticas *Traumatismos

articulares

*Diatesis hemorrágicas

*Artropatías

neuropaticas

*Neoplásicas

ESTUDIO DEL LIQUIDO PLEURAL , PERICARDICO

Y PERITONEAL

TRASUDADO EXUDADOInsuficiencia congestiva Infección bacteriana o

nicóticaCirrosis hepática Neoplasia

HIpoproteinemia ( síndromenefrotico)

TraumatismoEnfermedad Reumatoidea

Lupus EritematosoSistémico

FISICO Observación del aspecto

ANALISIS DE

LOS

DERRAMES

SEROSOS

CITOLOGICORecuento de hematíesRecuento de leucocitosRecuento diferencial

BIOQUIMICO Proteínas totalesADA

MICROBIOLOGICO

Tinciones , cultivos.Demostración del bacilotuberculoso.Enterobacteriasy anaerobios de tubodigestivo

Las muestras de líquidos serosos se toman contubos heparinizados ( tubos con 2 – 3 gotasheparina sodica 1% con 10 ul de liquido y semezcla rápidamente )

I. EXAMEN CITOLOGICO

1. RECUENTO DE HEMATIES Y LEUCOCITOS

1) Homogenizar muestra . Diluir ( muestra ), si esta turbio2) Llenar cámara de Neubauer3) Observar muestra ( 10x ) se cuentan los 4 cuadrados grandes de las esquinas .

4) Calcular leucocitos / ul ( si no hay dilución )

Nº de células contadas = NC

2. RECUENTO DIFERENCIAL O ESTUDIO MORFLOGICO

1. concentración de células por centrifugación lenta ( 10 ‘ )2. Se resuspende el sedimento celular en 1-5 ml de tampón fosfatoisotónico ph = 7.43. Tinción con colorante wrigth4. Recuento diferencial , se distingue el porcentaje de linfocitos,neutrofilos , monolitos y eosinofilos……………..PARA REALIZAR EL ESTUDIO DE CELULASTUMORALES SE UTILIZA COLORACION PAP …………….

ASPECTO PATOLOGIAS

Liquido

Pleural

Transparente.Amarillo palido.Volumen < 20 ml Normal

Transparente.Amarillo palido.Volumen > 20 ml Insuficiencia cardiaca congesti

Turbio purulento

Aumento del numero de leucocitos

Inflamación séptica o no

Infección bacteriana

Tuberculosis

Enfermedades Reumatoideas

Lechoso

Derrame quiloso Quilotorax

Hemorrágico

*Si la sangre procede de la punción traumática ,

no esta uniformemente distribuida*

Neoplasia de pulmón

Neumonía

Traumatismo toracico

Infarto pulmonar

Pancreatitis

Liquido

Pericardico

Transparente.Amarillo palido.Volumen < 50 ml Normal

Turbio

Empañado

Peritonitis

Infección bacteriana

Traumatismo

Verdoso

Presencia de bilis

Prueba de bilirrubina para confirmar

Ulcera duodenal perforada

Intestino perforado

Colecistitis o vesícula perforada

Pancreatitis aguda

Lechoso

Derrame quiloso

Obstrucción linfática

Síndrome nefrotico

Hemorrágico

*Diferenciar de manchas de sangre * Neoplasia

Purulento Patología infecciosa

Mucinoso Seudoxantoma peritoneal

Liquido

Peritoneal

Hemorrágico

PericarditisInfección bacteriana. Tubercul.Artritis reumatoidea .LECarcinomaAneurisma hemorrágico

Lechoso

Derrame quiloso

Obstrucción del conducto torác

Purulento Infección bacteriana.

Nº células / ul = NC / 4 x 10

Retículo de la cámara de Neubauer.Zona de recuento

Dirección del contaje de leucocitoscuentan los dos leucocitos sobre las

líneas gruesas

II. EXAMEN QUIMICO

LIQUIDO PLEURAL

- Proteína equipo automatizado ( HITACHI ) - ADA Pleuritis TBC > 45 U/L - Glucosa equipo automatizado ( HITACHI ) Anormal < de 60 mg/dl o 40 mg/dl menor que la

glucosa serica Disminuye exudado Normal trasudado

-Triglicéridos equipo automatizado ( HITACHI )Liquido pleural lechoso( QUILURIA )Tg ( < 50 mg/dl ) PseudoquilotoraxColesterol aumenta ( TBC o reumatoideo)

LILIQUIDO ASCITICO

- Glucosa equipo automatizado ( HITACHI )Igual concentración al del sueroDisminuye < 60 mg/dl :peritonitis, carcinomas, TBC

- Fosfatasa equipo automatizado ( HITACHI ) Alcalina Aumenta al doble en una perforación del intestino

delgado, apéndice perforado.

LILIQUIDO PERICARDICO

- Glucosa equipo automatizado ( HITACHI ) Disminuye : pericarditis bacteriana, Inflamaciones

no sépticas ( enfermedad reumatoide, tumor )

CITOLOGIA PATOLOGIAS

Liquido

Pleural

Hipercelularidad ( >1000 leucocitos/ul)

Linfocitos ( mas del 50% )

Escasez de células mesoteliales

Enfermedades de evolución crónica

Tromboembolismo pulmonar

Hipercelularidad ( >10000 leucocitos/ul)

Predominio de neutrofilos

Enfermedades inflamatorias agudas

(Pleuroneumonias)

Eosinofilia Lesión pleural inespecífica

Células malignas Derrames neoplásicos

Células LE

Raras

Lupus eritematoso sistémico

Liquido

Pericardico

Recuento > 250/uL

Trasudado

Infección o Tumor

Recuento > 500/uL

Mas del 50% neutrofilos

Peritonitis

Peritonitis infecciosa piógena

Celularidad Variable

Presencia de hematíes Tumor

Eosinofilia

Insuficiencia cardiaca congestiva

Linfoma abdominal

Quiste hidatídico desgarrado

LiquidoPeritoneal

Recuento leucocitario > 1000 /ul

Predominio de neutrofilos

Pericarditis bacteriana

Algunas pericarditis víricas

Recuento leucocitario > 1000/ul

Predominio de linfocitos

Síndrome infarto posmiocardico

REACCION DE RIVALTA : colocar en un tubo5 ml de agua destilada y 0.1 ml de acido acético glacialse mezcla bien , se deja caer una gota de liquido enexamen.TRASUDADO– no hay turbidez o ligera turbidez

EXUDADO – nube blancoazulada en la estela de lagota como humo de cigarrillo ( aumento de globulinas ).

AnálisisQuímico

CitologíaCentrifugar

Ph=7.4

1 – 5 ml

PROTEINA DE BENCE JONES

• Proteína de bajo peso molecular y de sensibilidad térmica,

• Parapoteina

• Presente en casos de mieloma múltiple( fase Terminal ) , neoplasias óseas ,

osteomalacia y leucemias linfoides y mieloides crónicas.

Procedimiento :

1. Se colocan en cada uno de tres tubos 5 ml de orina filtrada.

2. En el primer tubo se coloca una gota de acido acetico al 33 %

3. En el segundo tubo se colocan dos gotas de acido acetico al 33 %

4. El tercer tubo ( blanco ) no recibe acido

5. SE calienta gradualmente en baño maria, se agitan los tubos y se observa

la aparición de turbidez.

6. 5. La proteína de BJ aparece entre 40 y 60 ª C y desaparece a mayor

temperatura

7.

***Otras proteínas precipitan si la temperatura pasa de 65ºC. Si se

encuentran otras proteínas estas deben ser calentadas hasta ebullición

y filtradas por papel en caliente, donde quedan retenidas. La proteína

de BJ aparece nuevamente cuando el filtrado alcanza unos 50ªC

aproximadamente***

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Características

TRASUDADO EXUDADO

Inflamatorio Empiema

Aspecto Claro, trasparente Turbio Purulento

Densidad 1,003-1,019 Superior a 1,020

Proteínas Menos de 3 g/dl Mas de 3g/dl

Proteína liquido/

Proteína serica

Menor de 0.5 Mayor de 0.5

Glucosa Como la serica Menos de 60mg/dl

LDH Menos de 200UI/L Mas de 200UI/L

LDH liquido/

LDH sericaMenor de 0.6 Mayor de 0.6

pH Mayor de 7.3 Menor de7.3

Leucocitos Menor de 1.000 Mayor de

1.000

Mayor de

25.000

PATOLOGIAS Trastornos

Hemodinamicos

Enfermedades que lesionan

Directamente la serosa Se colocan 5 ml de orina en un tubo y cuidadosamente2ml de HCl concentrado por sus paredes. En la zona deseparación de ambos fluidos aparece un anillo de colorblanco. Puede diferenciarse de otras proteínas presentes,pues la proteína de BJ da positiva la prueba después dediluir la orina