enterobacterias
TRANSCRIPT
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
ENTEROBACTERIAS
P.Q.C. MIGUEL ANGEL ORTIZ GIL.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• Las Enterobacteriaceae habitan en:
– Distribuidas en suelo, – agua,– alimentos.– Flora normal del intestino de humanos y
animales.
Características Generales:
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES– Bacilos o cocobacilos cortos gram
negativos, – no esporulados, – mótiles (flagelos perítricos) o no, – capsulados o no, – pilis.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• BIOQUÍMICAS– Anaerobios facultativos, – catalasa positiva, (excepto Shigella
dysenteriae Tipo 1)– oxidasa negativa, – fermentan la glucosa, – reducen nitratos a nitritos.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Reacción de catalasa
• Esta prueba detecta la presencia de citocromooxidasas
• La prueba se hace con peróxido de hidrógeno (H2O2) al 3% sobre un portaobjetos. La producción inmediata y abundante de burbujas indica la conversión del H202 en agua y oxígeno gaseoso.
• La prueba de la catalasa debe realizarse a
partir de un medio que no contenga sangre porque los eritrocitos pueden producir una reacción de catalasa débil.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Prueba de la catalasa
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Reacción de citocromo oxidasa• Los citocromo son
hemoproteinas que contienen hierro y actuan como último eslabón de la cadena de la respiración aerobia ; transfireren electrones de Hidrógeno al Oxígeno, con la formación de agua.
• El sistema citocromo se encuentra presente en microorganismos aerobios, microaerofílicos y en algunos anaerobios facultativos, pero nunca en anaerobios estrictos.
Dimetil-p-fenilendiamina al 1%
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• Los modos de transmisión a los seres humanos son:
– Infecciones Nosocomiales • ( E. coli)
– Ingesta de alimentos o agua.• Salmonella, • Shigella,• Yersinia enterocolitica.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Enterobacteriaceae
Patógenos oportunistas
.
Patógenos evidentes.
Citrobacter.
Enterobacter.
Klebsiella.
Proteus.
Serratia
•Salmonella tiphy – (fiebre tifoidea.)
•Shigella – (Disentería).
•Y. Pestis (peste negro).
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
MEDIOS DE CULTIVO
1. Medios no selectivos: agar sangre
2. Medios selectivos-diferenciales: agar McConkey, agar EMB, SS agar, agar XLD.
McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes
(no fermentan lactosa).
Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Mac Conkey
• Gram positivas ven inhibido - sales biliares y cristal violeta.
• Fermenten la lactosa liberarán productos ácidos que producirán un cambio de pH que se detectará gracias al rojo neutro.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Aspectos de las colonias.
• En agar sangre y agar chocolate las colonias son:– Grandes.– Gris.– Lisas.
• Klebsiella o Enterobacter.– Mucoides – (polisacáridos).
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• E. Coli – ( Beta hemolítica).
P. mirabilis.
• Motilidad. P. penneri.
P. Vulgaris.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN
1. Pruebas bioquímicas
2. Pruebas serológicas
3. Pruebas de biología molecular
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• Estudia el metabolismo de la bacteria
• Estudio basado en la determinación de la presencia o ausencia de diferentes enzimas codificadas por el material genético del cromosoma bacteriano
• Se detecta a través de medios de cultivo especiales
Pruebas bioquímicas
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Los medios de cultivo generalmente están formados por:
• El sustrato sobre los cuales actúan las enzimas
• Un indicador que puede detectar la disminución del sustrato o la presencia de un producto metabólico especifico
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
La medición de las diferentes características metabólicas de un microorganismo permiten identificar la especie
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Metabolismo fermentativo
• Mide la capacidad del microorganismo para utilizar los hidratos de carbono
• Microorganismo actúa sobre los carbohidratos y acidifica el medio
• El indicador presente vira
Pruebas bioquímicas
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS
Prueba TSI (triple azúcar hierro)
Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g.
Resultados: Superficie inclinada/fondo: - ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, etc
- alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
TSI
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
TSI
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
CITRATO DE SIMMONS
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• Mide la capacidad de un organismo para utilizar el citrato como única fuente de carbono
• Citrato compuesto orgánico constituye uno de los metabolitos del ciclo de Klebs
• Las bacterias al utilizar citrato extraen nitrógeno de la sal de amonio con producción de amoniaco que hace vire el indicador
CITRATO DE SIMMONS
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• Para esta prueba se utiliza el agar de citrato de Simmons que contiene citrato de sodio y azul de timol como indicador.
• La única fuente de carbono en este medio es el citrato.
• Si la reacción es positiva el indicador vira a azul.
• En la reacción negativa los microorganismos no crecen y el medio conserva su color verde
CITRATO DE SIMMONS
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• El medio también contiene sales de amonio que la bacteria usa como fuentes de nitrógeno
• Fosfato de amonio amoniaco alcalinización del medio
CITRATO DE SIMMONS
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
CITRATO DE SIMMONS
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
CITRATO DE SIMMONS
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
CITRATO DE SIMMONS
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Los medios contienen:
•Peptona•Extracto de carne•Glucosa•Aminoácido •Purpura de bromocresol
MEDIO DE LIA
Descarboxilasas de aminoácidos(arginina, lisina, ornitina
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
• Los aminóacidos al perder el grupo carboxilo se convierten en aminas lo que incrementa el pH del medio y el indicador (púrpura del bromocresol) vira a violeta
R – CH - NH2 - COOH R- CH2 - NH2 + CO2 Aminoácido Amina Dióxido de carbono
pH alcalino
Descarboxilasas de aminoácidoslisina, ornitina
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Ejemplo:
Aminoácido amina + dióxido de carbono
Lisina lisina descarboxilasa cadaverina
L- Ornitina Ornitina descarboxilasa Putrescina + CO2
Descarboxilaciòn lisina (LIA y MIO)
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Descarboxilaciòn lisina (LIA)
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Descarboxilaciòn lisina (LIA)
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Prueba que se utiliza para investigar:
Motilidad (M)
Producción de Indol (I)
Descarboxilación Ornitina.
INDOL
MEDIO DE MIO
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
INDOL
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Indol
• El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano.
• Las bacterias que poseen la triptofanasa .
• La prueba de indol está basada cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Medio de MIO
(p-dimetilaminobenzaldehído)
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
INDOL
Prueba positiva
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
INDOL
Prueba negativa
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
E. coli
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Escherichia coli.
• Mac Conkey.– Colonias Planas.– Colonias secas.– Colonias Rosadas.
(LF)
• INDOL (+)
TSI LIA
K/A k/A Ó A/A
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Escherichia coliClasificación de las cepas productoras de
diarrea1. E. coli enterotoxigénica2. E. coli enteropatógena3. E. coli enterohemorrágica4. E. coli enteroinvasiva5. E. coli enteroagregante
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
E. coli
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Klebsiella pneumoniae
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Klebsiella.
• Mac Conkey– LF.– Mucoides. (polisacáridos).
• Indicaciones de laboratorio:– Lysine +– Citrato + – Indol – – +/+ TSI (con gas) – No-motile– Ornithine –
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Klebsiella pneumoniaeCápsula
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Klebsiella pneumoniae
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Proteus
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Proteus.
• Género que contiene varias especies, de las cuales dos tienen importancia médica: – P. mirabais. INDOL (-)– P. vulgaris. INDOL (+)
• Mac Conkey.– NFL.– Swarning.– Olor a podrido.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Enterobacter
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Enterobacter.
• Mac Conkey.– LF.– Pueden ser Mucoides.MIO:*MOVILIDAD (+)*INDOL: (+) E. agglomeras.*INDOL: (-) E. aerogenas (LIA +), E. cloacae (LIA-).
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Enterobacter
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Shigella
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Shigella
S. dysenteriae
S. flexneri
S. sonnei
S. boydii
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Shigella• Mac Conkey:
– NLF.
• TSI: alcalina/ácida, H2S negativo.
• LIA: K/A o A/A.
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Crecimiento de Shigella en medio MacConkey
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Salmonella
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
SalmonellaClasificación
• S. enteritidis• S. typhimurium• S. typhi• S. paratyphi A• S. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri)• S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Salmonella enteritidis
• Mac Conkey: NFL.• TSI: alcalina/ácida y H2S +
S. typhimurium.• INDOL (-)
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
SALMONELLA SSA
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Salmonella XLD
Veracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerzaVeracruz late con fuerza
Bibliografía:
• MANUAL DE TÉCNICAS EN MICROBIOLOGÍA CLÍNICA. M. V. Álvarez, E. Boquet, I. De Fez. AEFA. 1990.
• DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO CLÍNICOS POR EL LABORATORIO. John Bernard Henry, Todd-Sanford-Davidsohn. Tomo I y II. 8ª Edición. Salvat Editores. 1988.
• DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. TEXTO Y ATLAS COLOR. Koneman, Allen, Dowell, Sommers. Editorial Médica Panamericana. 2ª Reimpresión. 1990.