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동위원소검사학 강의12

체내, 체외검사(in vivo, in vitro test)

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체내, 체외검사(in vivo, in vitro test)

1. 혈장량 ( Plasma Volume )측정 1). purpose 2). 측정원리 3). 시약 및 기기 4). Procedure 5). Calculation 2. 적혈구량(Red Blood cell volume)측정 1). purpose 2). 원리 3). 시약 및 기기 4). Procedure 5). Calculation 6). Normal value 3. 적혈구 수명 측정(RBC Survival Time) 1). purpose 2). Anemia 3). 원리 4). Reagent 5). procedure 6). Calculation 7). Normal value 4. 철대사 측정(Ferrokinetics Stduy) 1). 검사원리 2). 시약 및 기기 3). Procedure 4). Calculation 5) Normal value 5. 실링검사(Schilling Test) 1). purpose 2). 원리 3). Reagent

4). procedure 5). calculation 6). normal value 6. 지방흡수검사(Triolein-olein Absorption test) 1). 검사원리 2). 시약 3). procedure 4). Calculation 5) 정상범위 및 해석 7. 장단백소실률 측정(Albumin Excretion Test) 1). 검사원리 2). 시약 3). procedure. 4). 검체 채취 5). 검체의 계측 6). 계산 7). 정상범위 8. 담즙산(14C-glycocholic acid), 지방산대사측정(14C-triolein acid) 1). 원리 2). 기구 및 시약 3). Procedure 4). 표준액의 제조 9. 혈소판 수명 검사(Platelet survival ) 10. 신사구체 여과울(51Cr - EDTA GFR) 11. H-pyroli 요소 호기 검사 (비방사성 동위원소) 1). H-pyroli 2). 요소호기검사법(UBT) 원리 3). Reagent 4). procedure 5). Result

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체내, 체외 검사(in vivo, in vitro test)

방사성동위원소를 체내 투여 검체(blood, urine, stool etc.)를 취하여

검체에 포함된 방사능을 측정, 임상적 의의 평가

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체내, 체외 검사(in vivo, in vitro test)

검사명 핵종 사용량 (uCi)

임상적 활용

지방질흡수시험 (Triolein absorption)

131I Triolein 100 지방질대사, 만성췌장염 췌장 및 소장질환으로 흡수 불량

장단백소실률 (Albumin excretion)

131I HAS 20 단백질 대사, 저단백질 단백누출성 위장증

철대사(동태)측정 (Ferrokinetics)

59Fe citrate 10 철대사, 각종 빈혈의 구분 혈성빈혈, IDA, 불량성 빈혈

혈액량측정 (Blood volume)

51Cr Na2O4 50 혈액질환, 심장질환 진성 다혈증

적혈구수명측정 (RBC survival time)

51Cr Na2O4 100 적혈구 수명, 혈액질환 용혈성 빈혈, 유전성구상적혈구증

실링검사 (Schilling test)

57Co Vitamin B12 0.5 악성 빈혈, 장흡수 부전증 내인자결핍증, 장관흡수기능장애

혈소판수명측정 (Platelet survival Time)

51Cr Na2O4 500 특발성 혈소판감소성 자반병

신사구체 여과율 (51Cr-EDTA GFR)

51Cr-EDTA 신장 손상 정도 파악

Helicobacter pyroli 13C과 14C Helicobacter pyroli

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1. 혈장량 ( Plasma Volume )측정

구성성분 수분 91％ , protein 6%, lipid 1%, 당질 0.1%, 기타 무기질이온 0.9%, 기타 전해질과 단백질을 주로 한 유기성분

혈장단백의 역할 영양원, 삼투압 조절, 물질운반, 산,염기평형, 면역, 응고 효소

혈장(plasma, serum) 혈구를 제외한 혈액의 액체 성분. 혈액의 약 55%차지

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1. 혈장량 ( Plasma Volume )측정

1). purpose 진성다혈증(polycythemia vera), shock의 감별진단, 수액, 수혈 치료 진성다혈증 : 골수의 적혈구 생성조직이 무제한으로 증식

Red blood cell count

Sex Normal range (cells per microliter or mcL)

Men 4.7-6.1 million cells/mcL

Women

4.2-5.4 million cells/mcL

Hb; 혈액 100ml 중 16g(Sahli法에서는 이것을 100%로 친다) Hb가 male 120%↑이상, female 110%↑ 경우

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※. 다혈증(polycythemia vera)

erythrocytosis, erythremia(적혈병) 혈액내 적혈구의 증가를 의미하는 erythrocytosis가 더욱 정확한 표현 이지만 흔히 polycythemia 용어를 많이 사용 erythremia는 적혈구 뿐만 아니라 백혈구와 혈소판이 동반되어 증가 될 때에 사용하는 경우가 많다. 다혈증은 환자의 성별과 연령에 대한 RBC, Hb과 Hct의 참고범위 이상 으로 증가됨을 의미한다. 다혈증은 전통적으로는 Hct을 기준으로 참고범위보다 높을 때로 정의 하지만 Hb의 증가가 다혈증의 진단에 더욱 중요하다.

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※. 다혈증의 분류와 원인

Polycythemia vera RBC증가, Hb 지연증가, Hypochromic RBC Reticulocytosis

Secondary polycythemia (erythrocytosis)

내인, 외인에 의한 산소의 결핍 고지대, 생리적인 원인 산소결합능 저하,

Simptomatic polycythemia 종양에 의한 증가

Relative polycythemia (hemoconcentration)

수분의 결핍, 수분공급의 부족이 원인 혈장량 감소

Lack of oxygen, which can occur from living at a high altitude Dehydration, such as from frequent diarrhea, excessive sweating or severe burns Smoking Exposure to carbon monoxide Certain forms of heart disease Scarring of the lung tissue (pulmonary fibrosis) A rare disorder of the bone marrow (polycythemia vera)

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※. Erythropoietin의 생성 증가 유전적 요인 (Inherited) 획득성 요인 (Acquired) 신장질환(양성 및 악성) 뇌질환(cerebellum) 간질환 ; Hepatoma, hepatic hamatoma, hepatic angiosarcoma, 산부인과 질환 ; Uterine fibroids, leiomyoma, leiomyosarcoma 기타 종양 ; Adrenal gland, ovary, lung, thymus의 종양 , androgen 분비 종양 기타 질환; Cushing's syndrome 약물 투여 ; Androgen Testosterone, Growth hormone

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※. 신생아의 다혈증 자궁내 저산소증 저체중아(Small for gestational age) , 과성숙아(Postmaturity), 임신부 고혈압, 임신부 흡연 , 임신부 청색증심장질환(maternal cyanotic

heart disease) 과다수혈 자궁내 쌍둥이간의 수혈(Intrauterine twin to twin transfusion) 자궁내 임신부와 태아의 과다 수혈(Intrauterine maternal to fetal

transfusion) 내분비계 요인 임신부 당뇨병 선천성 부신피질비대증(Congenital adrenal hyperplasia) 신생아 감상선기능증가증(Neonatal thyrotoxicosis) 선천성 갑상선기능저하증(Congenital hypothyroidism) 염색체 질환 Down's syndrome, Trisomy 13 syndrome, Trisomy 18 syndrome

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기타 원인 Beckwith-Weidemann syndrome (hyperplastic visceromegaly) 다형성 복강 장기의 비대(visceromegaly),

양수과소증(Oligohydramnios): 임신말기에 양수가 300 mL이하 임신부의 propranolol 투여: β-adrenergic blocker(심장박동수,박출량감소) 고지대 거주 임신부 산소와의 결합력이 높은 Hb이 많을 때, 산소운반기능의 저하 NAD-/NADH methemoglobbin reductase 결핍 Hb에서 산소 배출(release)의 결함 산소와의 결합력이 높은 Hb이 있을 경우 Methemoglibin , Fetal hemoglobin 2,3-DPG 감소에 의한 Hb과 산소의 결합력 증가 Diphosphoglycerate mutase 결핍 Phosphofructokinase 결핍

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2). 원리 방사성동위원소 125I이용 ①. 방사성 옥소표지사람혈청알부민(125I-human serumalbumin :HSA)사

용 ②. 125I는 반감기가 60일. 보관이 가능하고 특이의 장기조직에 섭취되지 않아 주사후 10-20분에는 거의 소실없이 혈액중에 존재 한다. ③. 희석법(dilution method)을 이용. 희석체적(volume of dilution)을 계산 3). 시약 및 기기 ①. 방사성동위원소 : 125I-HSA : 18.5×104Bq (5μCi) ②. Anticoagulant : 헤파린 (2000 unit/ml) ③. 감마선계측기 ④. 무균시험관 ⑤. 원심분리기

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4). Procedure ①. 헤파린이 든 syringe로 blood 12ml collection (조금은 Hct측정) ②. blood를 무균 bottle에 넣고 1000g에서 10min centrifuge ③. 혈장을 무균 처리 된 tube에 옮기고, 남은 1ml는 control로 사용 ④. ③의 tube에 125I-human serum albumin 5μCi를 넣고 mix ⑤. ④의 5.0ml을 정확하게 취하여 환자에게 정맥 주사한다. ⑥. injection후 반대쪽의 팔에서 각각 10분과 20분에 헤파린이 든 syringe 로blood 5ml 채혈 ⑦. 1000g에서 10min centrifuge, plasma를 1.0ml 씩 각각의 tube에 취함 ⑧. 표준용액은 무균 시험관에 남아있는 125I혈장을 100배 희석한다 ⑨. 희석한 표준액을 1.0ml씩 두개의 tube에 취한다. ⑩. 대조혈장, 표준혈장, 10min과 20min에 검체 혈장의 방사능량을 감마카운터에서 cpm(count per minute)을 측정한다.

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5). Calculation 10분과 20분에 검체 혈장의 계측값(cpm)을 로그그래프지에서 0시간의 cpm을 구한다.

표준액 cpm(count per minute)- 대조혈장 cpm

×주사량 ×희석배수 0 시간 cpm(count per minute)- 대조혈장 cpm ex) ①. 대조혈장 계측값 150cpm ②. 표준액 계측값 10,150cpm ③. 검체 0시간 계측값 2,150cpm ④. 정맥 주사량 5ml ⑤. 표준액 희석배수 100배 ⑥. 혈구용적치 (Hct) 40%

10,150 - 150 ×5×100= 2,500ml

2,150 - 150

(0.91: body Hct와 peripheral blood와의 Hct차이) 0.97 ; hematocrit 측정 때 불가피한 dead space를 고려한 factor 혈구량 계산 = 혈액량-혈장량 = 3,863 - 2,500 =1,363(ml)

Total plasma volume

2,500

1- (Ht ×0.97cell Hct×0.91body Hct) 1- (0.40 ×0.97×0.91)

혈액량 계산

= 3,863(ml) =

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※. 수혈에 관한 참고 적혈구는 산소운반능 부족의 증상을 보이는 만성 빈혈 환자 및 수술 또는 외상에 의해 총혈액량의 15% 이상의 출혈이 있는 환자의 치료에 이용. 신부전이나 악성종양 등 만성 빈혈 환자들은 혈액량이 정상이므로 전혈 을 수혈하면 혈액량 과부하의 위험이 있다. 헤모글로빈치가 8 g/dL 이상인 경우에는 적혈구 수혈이 불필요한 경우가 많다. 수술이나 외상에 의한 총혈액량의 15% 미만의 출혈 시에는 대부분 적혈구 수혈이 불필요하다.

총혈액량은 다음과 같이 산정할 수도 있다. * 총혈액량 산정법

총혈액량 (성인남자) = 체중(kg) x 68 mL 총혈액량 (성인여자) = 체중(kg) x 62 mL

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2. 적혈구량(Red Blood cell volume)측정

1). purpose 진성다혈증(polycythemia vera)과 출혈에 의한 혈액량의 감소의 구분 2)원리 ①. 적혈구에 방사성동위원소(51Cr)를 표지한다. ②. 크롬(51CrNa2O4)은 +6가로서 적혈구막을 통과하여 혈색소의 베타 글로불린(β-globulin)과 결합하여 +3가가 되며 이결합은 안정하여 적혈구가 수명을 다하여 파괴될 때까지 적혈구내에 존재하고 용출은 하루 1%이하이다 ③. 방사성크롬 표지적혈구를 정맥주사하고 혈액과 완전히 혼합된 후 채혈하여 희석된 표지적혈구의 방사능을 측정하여 적혈구량을 산출한

다.

51Cr 표지적혈구를 정맥주사 후에 Blood와 완전 혼합된 후 채혈하여 희석된 방사능을 측정함으로써 RBC volume을 알 수 있다.

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3) 시약 및 기기 ①. 방사성동위원소 : 크롬(51CrNa2O4) 100μCi ②. 항응고제 : ACD용액 20ml ③. 감마선계측기 . ④. 무균시험관. ⑤. 항온수조. ⑥. 원심분리기 4). Procedure ①. 항응고제(ACD용액) 4ml가 든 주사기로 정맥혈액 15ml를 무균적 채혈 ②. 준비된 무균시험관에 혈액을 넣고 100μCi의 51Cr well mix ③. 37℃ 30mins incubation 크롬이 적혈구막을 통과하여 표지 된다. ④. 500g에서 10분간 원심분리. 상층액(혈장)을 버리고 saline을 넣어 다시 원심분리하고 상층액을 버린다. 3회 반복 ⑤. 생리식염수를 첨가하여 처음과 같은 농도의 혈액을 만든다. ⑥. 표지 완료된 혈액 10ml를 정맥주사한다. ⑦. 정맥주사후 10분 반대쪽 팔의 정맥에서 헤파린 주사기로 6ml 채혈한다. ⑧. 채혈한 검체는 tube에 2ml씩 2개 준비한다. ⑨. 표준액은 환자에게 주사하고 남은 표지 혈액을 2ml씩 2개의 tube에 취

한다. ⑩. 검체혈액과 표준혈액의 방사능을 감마선계측기에서 계측한다. .

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5). Calculation

ex) 검체 cpm ; 1,650 표준액 cpm ; 6,150 대조 cpm ; 150 주사량 10ml 희석배수 100배

혈장량 = 혈액량-혈구량 Normal value blood volume 55-71ml/kg RBC volume 25-35 ml/kg plasma volume 30-45 ml/kg

혈액량= 표준액(2ml) cpm-대조cpm

×주사량 × 희석배수 검체(2ml) cpm-대조cpm

RBC VOLUME = blood volume × Hct %

100%

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3. 적혈구 수명 측정(RBC Survival Time) 1).purpose hemolytic anemia와 같은 RBC 파괴를 촉진하는 질환의 진단, 치료경과

관찰

2). Anemia 혈액중에 적혈구가 감소, 헤모글로빈이 너무 적게 생성, 많이 손실 신체의 각 장기에로의 산소운반 능력이 감소, 여러 가지 증상 ① 철결핍성 빈혈 체내의 철분이 부족 빈혈 철분 함유 음식의 섭취 부족, 철분의 위장관내 흡수 장애, 왕성한 발육으로 인한 철분 요구량의 증가, 만성 출혈로 인한 철분 손실의 증가 ② 거적아구성 빈혈 비타민 B12나 엽산의 결핍으로 일어난 빈혈 ③ 용혈성 빈혈 간장이나 비장에서 적혈구의 파괴가 지나치게 활발 ④ 재생불량성 빈혈 골수에서 적혈구 등이 충분하게 만들어지지 않아서 일어난 빈혈 ⑤ 속발성 빈혈 (증후성 빈혈): 다른 병에 수반하여 일어나는 빈혈

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3). 원리 RBC에 방사성동위원소를 표지 51CrNa2O4(크롬)은 +6가의 경우 RBC membrane을 통과하여hemoglobin

의 beta-globulin과 결합하여 +3가 로 된다. 수명이 다한 RBC 는 1일 1%파괴되고 파괴된 RBC 내의 +3가의 Cr은 배설. 정맥 주사 후 혈액 중의 방사능을 시간적으로 계측하면 표지 적혈구의 잔존률, 수명을 알 수 있다.

4).Reagent 방사성동위원소 51CrNa2O4(크롬) 100μCi Anticoagulant ; ACD 20ml

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5) procedure ①. 항응고제 (ACD용액) 4ml가 들어 있는 주사기로 20ml의 혈액을 채혈 하여 30ml의 무균시험관에 넣는다. ②. 방사성동위원소 51CrNa2O4를 100∼200μCi 넣고 혼합한다. ③. 37℃의 에서 30분간 incubation. 크롬이 적혈구막을 통과하여 표지적혈구가 된다. ④. 반응이 끝나면 아스코르빈산 50-100mg을 첨가하여 혼합 후 10분 후 정맥주사 한다. ⑤. 표지적혈구를 정맥주사 후 24시간 및 격일로 2주간 헤파린주사기로 5ml씩 채혈한다. ⑥. 채혈한 혈액 3ml를 분주하여 보관하였다가 마지막에 같은 시간에 계측한다.

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6) 계산 ① 계측치를 반대수그래프 용지에 그린다. ② 0일(zero day)의 계측치를 찾아 방사능이 반(1/2)이 되는 일자를 산출. 7) Normal value : 평균 반감기 : 25-35일 (120일)

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4. 철대사 측정(Ferrokinetics Stduy) 1). 검사원리 ① 흡수된 철은 골수에 85%, 간, 비장에 15% 축적되고 그 후에 적혈구에 이용되어 점차 혈액 중에 나타난다. ② 조혈기능이 항진 되었을때 방사성철의 소실이 빨라지고 투여한 방사성 철이 혈액 중에 빨리 나타나며 방사성철이 이용되는 비율이 높다. ③ 조혈기능이 저하되는 경우는 반대이다. ④ 방사성철(59Fe-citrate)을 이용한 검사법 혈장철소실(Plasma iron disappearance :PID) 적혈구철이용(red cell iron utilization) 혈장철교대율 (plasma iron turnover rate:PITR), 적혈구철 이용율(red cell iron utilization rate :RCIUR)이 있다.

방사성철 (59Fe citrate)을 주입, 철의 이동상황을 채혈하여 측정한다 2) 시약 및 기기 ①. 방사성동위원소 :59Fe citrate 10μCi ②. 감마선계측기 ③. 원심분리기

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※. 철의 대사 철의 흡수; 대부분 십이지장 음식물 중의 비 heme 철은 cysteine이나 비타민 C에 의해 Fe2+로 환원되어 용해성이 증가되고 peptide나 아미노산과 chelate 화합물을 만들어 흡수. 또 무기철은 위액과 함께 가용성의 착체를 만든다 Fe2+ 형으로 세포막을 통과한 철은 Fe3+ 로 산화되고 혈장 중에 있는 특정 의 철수송단백질(β-globulin)인 transferrin과 결합하여 수송되며 간, 비장, 골수,근육조직에서 철저장단백질인 apoferritin과 결합하면 ferritin을 형성 하여 저장된다. 비 heme 철은 장관에서 흡수되기 쉬워서 음식물에서 얻는 철의 주체이다.

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※. 철의 대사 Ferritin이 과잉으로 되면 이것이 집합하고 부분적으로 변성하여 단백질을 잃은 hemosiderin형으로 저장된다. 음식물 중의 myoglobin이나 hemoglobin에서 유래한 heme 철은 장점막세

포 중에서 파괴되고 유리된 Fe3+ 는 혈장 transferrin과 결합하거나 점막세포 내에 ferritin으로 저장되고 점막세포의 탈락으로 배설되기도 한다. 철은 폐쇄된 대사계를 가진다. 즉 체내에서 파괴된 세포에 함유된 철은 연속적으로 재활용되고 체외로 손실된 철은 음식물로부터 흡수된 철에 의해 보충되므로 균형을 유지하게 된다. 혈장 Fe3+ -transferrin은 신속하게 골수내로 들어가서 ferrireductase에 의해 Fe2+ 로 환원되어 적혈구 생성에 이용된다. 노화된 적혈구는 망상내피계(reticuloendothelial system; RES)에서 파괴 되고 철은 다시 transferrin과 결합하여 골수로 운반되어 재활용된다.

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3). Procedure (Plasma iron disappearance :PID와 red cell iron utilization RCIU) ①. 방사성 철(59Fe-citrate) 5-10μCi 를 혈장과 혼합하여 정맥주사한다. ②. 주사 반대쪽 팔에서 주사후 15, 30, 60, 120, 180분에 5ml씩 채혈 ③. 채혈된 혈액을 2500rpm에서 5분간 원심분리한다. ④. 상층액(혈장)을 2ml씩 각각 취하여 감마선계측기로 방사능을 계측한다. ⑤. 주사후 2일부터 2일 간격으로 14일까지 5ml씩 채혈하여 전혈방사능을 잰다. ⑥. 투여 방사성 철의 방사능을 측정한다. 4). Calculation ①. 반대수 그래프에 계측값을 옮긴다 ②. cpm을 연결, 0분에서의 값 ③. 0분에서 반(50%)되는 계측값을 나타내는 시간값을 기록 PID=( )분 Normal : 60-100min 재생불량성 빈혈 ; 100min이상 철결핍성 빈혈(IDA); 60min이하

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0.693 PID,T1/2(시간)

4) 계산 ①. 계측값을 반대수그래프지에 옮긴다. ②. 각 점을 연결하고 0분에서의 예상되는 계측값을 구한다. ③. 0분의 반이 되는 계측값을 나타내는 시간이 혈장철소실의 반감시간(). ④. 적혈구철이용율 (RCIUR %)=

전혈방사능(cpm/ml)×혈액량(ml)×100

투여 59Fe 방사능 (cpm)

×혈청철농도(mg/ml)×혈장량(ml)×24시간/일

⑤. 혈장철교대율 (PITR mg/일)

⑥. 적혈구철 교대율 (RCITR mg/일)= 5) 정상값 ① 혈장철소실 반감시간 : 60분 - 120분 ② 적혈구철 이용율 : 7 - 10일후 70 - 80% ③ 혈장철 교대율 : 20 - 42 mg/일

혈장철 교대율(mg/일)× 적혈구철 이용율(%)

100

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5. 실링검사(Schilling Test) Vitamin B12 흡수능력, 악성빈혈 진단

비타민B12 공급원 : 우유, 생선, 육류, 달걀 효능과 생리적 기능 : 악성빈혈예방, 철분과 엽산의 기능을 도와줌, 신경과민감소, 집중력및 기억력향상, 치매예방, 심혈관계 질환예방. 소장에서 흡수되나 Vitamin B12의 흡수 장애 : 악성빈혈(pernicious anemia) 결핍증 : 악성빈혈, 체취, 비듬, 월경불순, 신경과민 1). 원리 ①. 비타민B12의 분자중에 Co를 57Co로 표지하여 투여, 흡수, 배설률을 측정한다. ②. 비타민B12(Cyanocobalamin)는 위내의 내인자와 결합하여 회장에서 흡수된다. ③. 경구로 투여하여 소장에서 흡수된 방사성 비타민B12는 과량의 비방사성 비타민B12를 과량 근육주사하면 소변으로 배설된다. 2). Reagent 방사성표지 비타민 B12 ; 0.5μCi/0.5μg Vitamin B12 비방사성비타민 ; 1mg 비표지비타민 B12 (근육주사용)

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3). procedure (최소 8시간 이상 공복) ①. 투여 전 대조용 urine을 20-30ml 정도 모은다. ②. 0.5μCi 57Co비타민 B12를 경구 투여 ③. 2시간 후 1mg의 비타민 B12를 근육 주사한다 ④. 경구 투여 비타민이 고체인 경우 4시간 후, solution인 경우 2시간 후 부터음식 섭취, (고체인 경우는 4시간후 부터) ⑤. 24hrs urine collection (주의를 요한다.) ⑥. mix, volume측정, urine 5ml collection ⑦. 대조용 urine 5ml collectuon ⑧. 표준액은 경구 투여한 0.5μCi를 1,000ml에 녹여서 5ml collection ⑨. 대조, 표준액, 검체를 gamma counter에서 5-10min 계측한다.

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4). calculation

5). normal value 7%이상 7%이하 ; 1주일 후 600mg의 내인자(intrinsic factor ;IF)투여 후 재검사 재검후 7.0%이상의 배설률 ; 내인자 부족에 의한 악성 빈혈 7.0% 이하의 배설률 ; 장내 세균 증식등으로 인한 파괴, 손실과 흡수 불량에의한 악성빈혈

urine volume × (검체 cpm - 대조 cpm) × 100 = ( )%/24hrs urine

1,000 × (표준 cpm × 대조 cpm)

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6. 지방흡수검사(Triolein-olein Absorption test) 1). 검사원리 ①. 중성지방은 장관내에서 췌장액, 담즙등의 효소에 의해 소화분해 되어야 흡수 ②. 소화액분비에 기능장애가 있을 때 방사성표지 지방(triolein)의 흡수 가 장애 ③. 장관벽의 흡수장애에 의한 것이다. ④. 방사성옥소표지 지방산(131I-oleic acid)에 의한 흡수에 이상이 있으면 이상의 유무에 대한 원인을 알 수 있다. 2). Reagent ① 지방(131I-triolein); 50μCi (18.5×105Bq) ② 지방산(131I-oleic acid); 50μCi (18.5×105Bq)

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3). procedure ①. 환자는 8시간 이상 공복상태에서 검사한다. ②. 방사성옥소 표지 지방(131I-triolein) 50μCi 를 경구 섭취 한다. ③. 투여후 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 24시간에 6ml씩 채혈한다. ④. 채혈한 혈액을 정확히 5ml씩 감마선계측기로 방사능을 계측한다. ⑤. 혈액내의 흡수율이 투여량의 1%이하이면 이어 방사성옥소표지 지방산 (131I-oleic acid) 50μCi를 투여한다. ⑥. 투여후 2시간, 4시간, 6시간, 8시간, 24시간에 6ml씩 채혈한다. ⑦. 채혈한 혈액을 정확히 5ml씩 감마선 계측기에서 방사능량을 계측한다. 4). Calculation 5) 정상범위 및 해석 ①. 정상인에서 triolein의 흡수율은 4-6시간에 최고치에 이르며 7-10%이상 흡수 ②. 지방을 투여하여 흡수가 되지 않고 지방산을 투여하여 흡수가 되면 소화기능의 장애를 의미한다. ③. 지방투여나 지방산 투여시 둘 다 흡수가 안되면 소화관 흡수 장애를 의미한다.

혈액 5ml cpm ×(혈액량 ÷ 5)

환자에게 투여한 총방사능 cpm ×100=( )%

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7. 장단백소실률 측정(Albumin Excretion Test) 1) 검사원리 ①. 방사성옥소표지 혈청 알부민 (125I-HSA)이나 125I-polyvinyl-pyrrolidone (125I-PVP)를 정맥주사후 투여한 방사성 표지물이 위액이나 장관내에서 나타나는지 본다. ②. 방사성옥소표지혈청알부민 (125I-HSA)은 소화효소에 의해 분해되어 125I가 유리되어 재흡수되는 결점이 있다. 2) 시약 방사성옥소표지 사람혈청알부민 (125I Human serum albulmin : 125I-HSA); 18.5×104Bq (5μCi) 3) procedure. ①. 헤파린 주사기로 전혈을 무균적으로 채혈한다. ②. 무균시험관에 옮겨 500g에서 10분간 원심분리한다. ③. 상층액(혈장)을 다른 무균 시험관에 옮긴다. ④. 방사성옥소표지 혈청알부민(125I-HSA) 5μCi를 넣고 잘 혼합한다. ⑤. 혼합액 5ml를 정확하게 환자에게 정맥주사한다. ⑥. 주사후 무균시험관에 남은것으로 표준액을 만든다.( 표준액 1ml 를 1000ml의 물로 희석하여 5ml를 취한다.

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4). 검체 채취 환자는 대변을 매일 분리하여 6일간 모은다. 소변이 섞이지 않도록 한다. 5). 검체의 계측 ①. 준비된 1000ml의 용기에 하루에 모은 대변을 넣고 물을 넣으면서 묽게 하여 전체량이 1000ml가 되도록 한다. ②. 잘 희석된 대변액을 5ml씩 2개의 시험관에 취한다. ③. 매일 모은 대변에서 취한 5ml의 방사능을 계측한다. 6). 계산 7). 정상범위 정상인은 4일동안에 0.1 - 0.7%의 배설률을 보인다. 단백상실장병증 (protein losing enteropathy)은 2-40%의 배설률을 보인다.

환자 대변에서의 방사능 계측값

환자에게 투여한 총방사능 ×100

대변 5ml의 계측값 - 배후방사능계측값

(표준액 5ml의 계측값-배후방사능계측값)×주사량 = ( )% =

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8. 담즙산(14C-glycocholic acid), 지방산대사측정(14C-triolein acid) 1). 원리 흡수돤 표지 지방산이 탄산가스 (CO2)상태로 배출되면서 hyamin+methanol 혼합 용액에 흡수시킴으로써 무색으로 변하게된다. 이 때 혼합 용액 내에 포함되어있는 14C의 양을 측정한다.

2). 기구 및 시약 ①. 흡기 걸음병 ②. hyamin+methanol 혼합액 용기 ③. 방사성 담즙산 (14C-glycocholic acid 10μCi) ④. 방사성 지방산 (14C-triolein acid 10μCi)

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3). Procedure ①. 12시간 이상의 공복 ②. 방사성 담즙산(14C-glycocholic acid)또는 방사성 지방산 (14C-triolein

acid)5μCi를 투여하고 50ml의 옥수수 식용유를 먹인다 ③. 약을 먹는 시간을 기록한다 ⓐ. 약을 먹는다( )시 ( )분 ⓑ. After 1hr에 숨을 불어넣는다 ( )시 ( )분 ⓒ. After 2hrs에 숨을 불어넣는다 ( )시 ( )분 –밥을 먹는다- ⓐ. 약 먹은 후 4hr에 숨을 불어넣는다 ( )시 ( )분. ⓑ. 약 먹은 후 6hr에 숨을 불어넣는다 ⓒ. 약 먹은 후 8hr에 숨을 불어넣는다 ( )시 ( )분 ⓓ. 약 먹은 후 4hr에 숨을 불어넣는다 ④. 숨쉬는 방법은 ⓐ. 숨은 보통 때와 같이 쉰다. ⓑ. 밖으로 내 쉴때는 공기를 유리병에 쉰다 ⓒ. 핑크색이 무색이 될 때까지 쉰다. 변색에 걸리는 시간은 2-3분정도 ⓓ. 5분이 지나도 변색이 없으면 중단한다. ⑤. 주의사항 불기전 입안은 깨끗이. 약 먹은 후 2시간에 식사, 뚜껑을 잘 막는다. 액체섬광체 용액 15ml을 가하여 mix, 1시간 방치한다 액체 섬광계측기로 14C의 양을 5분간 계측한다.

(10) ⓓ

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4). 표준액의 제조 ①. 무색으로 만든 hyamin+methanol 혼합액에서 환자에게 먹일 50μCi/10ml

중에서 25μl, 50μl, 100μl, 200μl를 취한다 ②. 여기에 액체섬광체 용액 15ml을 가하여 표준액으로 한다.

25μl cpm+50μl cpm+100μl cpm+200μlcpm

3.75 X

10

0.1 = 환자가 먹는 전체 cpm

5). Calculation 시간 별로의 cpm을 구한 뒤 배후방사능계측값을 빼어준다

시간 별 net cpm

환자가 먹은 전체 cpm X 100=( )%

나온 ( )%에 104(X 10,000)을 곱하여 준다.

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9. 혈소판 수명 검사(Platelet survival ) 1). 원리 골수거세포에서 형성된 혈소판은 일정기간 말초 혈액에 존재한 후, 노화되어 세망내피계에서 처리되는데, 일부는 손상된 혈관벽을 회복하는 데 이용되고, 나머지는 혈액 중에서 소실된다. 혈소판 수명 측정은 생체 내에 혈소판이 관여하는 여러 가지 요인에 따라 혈소판 파괴나 소비 증가를 평가하는 방법이다. 혈소판수명 측정 시 51Cr, 111In 등을 표지하는 방사성 동위원소 방법과 혈소판 대사산물을 측정하는 방법이 있다.

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2). 51Cr 표지법 ①. CPD액을 가하고 500ml 채혈용 용기에 공혈자 혈액 450ml를 채혈 하고 230G로 10분간 원심 분리하고 혈소판 풍부 혈장(platelet rich

plasma:PRP)의 1/10양의 CPD액을 가한다

②. 이 PRP를 2600G로 30분간 원심분리하고, 혈소판이 제거된 혈장(platelet poor plasma : PPP)10ml만 남기고 상층을 별도로 옮긴다

③. 이 침전된 혈소판을 다시 부유시키고, Na251CrO4 18.5mBq(500μCi)

를 가하고 실온에서 30분간 반응시킨다음 ascorbic acid 100mg을 가한 후 5분간 2600G로 30분간 원심분리하여 상층액을 가한다

④. 표지 혈소판 침사(PPP)약 20ml를 정맥 주사한다

⑤. 정맥주사 후 반대팔 정맥에서 10, 30, 60, 120, 240분, 그 후 매일 1회 9ml씩을 채혈EDTA를 가한 생리식염수 1ml을 가한 실리콘 처리 시험관에 넣는다

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3). Calculation ①. 표지혈소판 부유액 0.5ml를 plastic tube에 넣고, 생리식염수로 1회 세척한 혈소판을 계측하고 주사한 혈소판의 총방사능을 구한다 ②. 시간이 경과한 채혈한 환자 혈액 1ml중 혈소판의 방사능을 구한다(a)

혈액 1ml 중의 혈소판 방사능 = 혈소판 침사 방사능× 혈액 1ml중 혈소판 수

PRP 1ml중 혈소판 수 × PPP양

③. 표지혈소판이 환자 혈중 100% 실현된 판정한 경우 방사능 (b) ④. a/b ×100이 혈소판 회수율이고, 최대 회수율을 나타낸 시점의 방사능 을100%로 하고, 이는 혈소판수명곡선(platelet survival curve)이 된다. ⑤. 1일 파괴되는 혈액 1μl당 혈소판 수를 표에 나타냈으며, 혈소판 교체율은 다음 Harker의 식으로 계산한다. 말초혈소판수에 큰 변동이 나타나지 않는 경우 파괴 혈소판 수는 출혈 혈소판수와 같다고 생각 된다 혈소판 교체율 = 말초혈액 혈소판 수 /1μl / 평균수명×90/ 최대회수율(%)

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4). 임상적 의의 정상인 혈소판 평균수명 : 8 ~10일 최대 회수율 : 65~ 75%

Disease 혈소판

평균수명 최대

회수율 혈소판 교체율

특발성혈소판감소성자반병 단축 저하 항진

저형성혈소판감소증 정상 정상 저하

비장기능항진증 단축 저하 항진

혈소판 교체율 : 3.2~4.2만 /1μl/day

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10. 신사구체 여과울(51Cr - EDTA GFR) 원리 신사구체여과율(Glomerular Filteration Rate)측정은 신장질환자의 신장 손상 상태를 파악하고 치료 시에 수분과 전해질의 조절 및 신장을 통해 배설되는 약제의 용량을 결정하는 매우 유용한 검사법이다. 51Cr - EDTA 주사하고 3, 5시간 지난 후에 채혈하여 신사구체여과율을 측정한다

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11. H-pyroli 요소 호기 검사

1). H-pyroli 산성 pH에 민감하지만 urease를 분비, 위 내의 urea를 탄소와 암모니아로 변화 시켜 알칼리 환경을 만들어 생존 생화학적 특성 catalase, oxidase, protease와 lipase, 고분자의 외독소 단백질을 합성, 분비하여 병원성을 나타낸다.

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2). 요소호기검사법(UBT) 원리 요소(urea)를 분해하는 특성을 이용하여 감염을 진단하는 검사법 13C 또는 14C로 표지된 요소를 물과 함께 복용하면 위 내에서 일정시간 반응 후에 H. pylori가 이를 분해하여 이산화탄소를 생성하고, 호흡 시 날숨으로 배출되는 13C과 14C을 측정한다. 요소호기검사법은 결과에 대한 정확성이 우수하고, 초기에 헬리코박터 파이로리 감염여부를 정확하게 진단하고, 제균 후에 치료효과를 정확 하게 판정할 수 있어서 침습적인 방법에 비해 편안하고 시간과 비용을 절감 할 수 있는 매우 효과적인 방법 이라 할 수 있다.

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3). Reagent ▶헬리캡

(HeliCap™) - 14C urea capsule ▶브레스카드(BreathCard™) :

브레스카드는 환자가 내뿜은 이산화탄소(CO2)를 포집하는 도구. 두개의 필터로 구성 되었으며 오렌지색 필터가 환자의 호흡으로 인하여 노란색으로 변하면 Heliprobe analyzer로 감염의 유무를 측정 할 수 있다. 오렌지색에서 노란색으로 변하는 시간은 2분 30초 정도이다.

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50ml의 물과 함께 Helicap 을 삼킨다.

10분후에 BreathCard 포장에서 BreathCard를 꺼낸다.

BreathCard의 마우스피스를 통해서 BreathCard의 포집표시자가 오랜지색에서 노란색으로 변할 때까지 호흡을 내뿜는다.

BreathCard를 Heliprobe Analyzer에 넣고 측정한다

5). Result

Heliprobe™ 0 Not infected patient D < 25 cpm

Heliprobe™ 1 Borderline case 25 < D < 50 cpm

Heliprobe™ 2 Infected patient D >50 cpm

4). procedure

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THE END