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DIPLOMADO MEDICINA TRANSFUSIONAL E INMUNOHEMATOLOGIA
Sistema Rh Discrepancias y Fenotipo
Dr. Baldo Castro C. Bacteriólogo P.U.J.
Msc. en Medicina Transfusional
DISCREPANCIAS RH D
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2 Dr. Baldo Castro C.
HEMOCLASIFICACION EN MICROCOLUMNA (Gel)
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3 Dr. Baldo Castro C.
HEMOCLASIFICACION EN MICROCOLUMNA (Gel)
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HEMOCLASIFICACION EN MICROCOLUMNA (Gel)
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• Anti-D (DVI-)
• Anti-D:
• Clon: P3x61 (IgM)
• Detecta la mayoría de los de hematíes D débiles y algunos D parciales, aunque no detecta la categoría de DVI.
• Anti-D (DVI+) • Anti-D¨: • Clones: (igG+ IgM) • P3x290 • P3x35 • P3x61 • P3x21223B10 • Este reactivo anti-D
detecta D débiles y Variantes parciales incluyendo el DVI
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DIPLOMADO MEDICINA TRANSFUSIONAL E INMUNOHEMATOLOGIA HEMOCLASIFICACION EN MP.
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• D(VI-): TH-28 (IgM)
• D(VI+): MS201/MS-26(IgM/IgG)
Rh(D) – Normal Rh(D) – Débil Rh(D) – Parcial Rh(D) –
Parcial Débil Normal Normal Variante Variante
Normal Reducido Normal Reducido
Epítopo Antígeno
ANTIGENOS D
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Reactivos anti-D monoclonales Línea Celular Ig (Origen)
DVI Neg (No detecta DVI)
175-2 IgM
HM 10 IgM
HM16 IgG
LDG169 IgG
LDG59 IgG
LDG70 IgG
LDMI IgG
LHM 50/3 (LDM1) IgG
LHM 59/19 IgG
LHM 59/20 (LDM3) IgG
MS-201 IgM
P3x 61 IgM
RS-1126 IgM
TH-28 IgM
DVI Pos (Detecta DVI)
ESD1 IgG
ESD-1M IgG
LDG76 IgG
LDG77 IgG
MS-26 IgG 8
Protocolo de Estudio de Ag. RhD
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FENOTIPO DE Rh
Ags. C, c, E, e.
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Fenotipo de Rh
• Los antígenos (D, C, E, c y e) y sus anticuerpos correspondientes son los responsables de más del 99% de los eventos clínicos que involucran el sistema Rh.
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Fenotipo de Rh
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Fenotipo de Rh
• El genotipo es designado por los dos cromosomas que lo componen, separados por una barra: Cde/cde
• En el laboratorio se determina el fenotipo, usando antisueros específicos.
• Podemos designarlo de las siguientes maneras: C+ c+ D+ E- e+ o CcDee
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FRECUENCIA DE FENOTIPOS Rh Y KELL (K1) EN DONANTES ALTRUISTAS CON ANTIGENO D POSITIVO DEL HEMOCENTRO
DISTRITAL
Camacho BA, D’anetra LV, Castro B, Mier JF. Hemocentro Distrital. Bogotá, Colombia.
HEMOCENTRO
DISTRITAL
Antígeno Donantes Positivo % Negativo %
C 763 76.3 23.7
c 725 72.5 27.5
Cw 3 0.3 99.7
E 432 43.2 56.8
e 926 92.6 7.4
K1 44 4.4 95.6
Frecuencias Antigénicas Rh y K1
FENOTIPO PROBABLE % % KELL % Cw
DCcee R1r 26,9 1,3 0,2
DCCee R1R1 26,7 1,5 0,1
DCcEe R1R2 21,5 0,9
DccEe R2r 13,7 0,3
DccEE R2R2 6,8 0,2
Dccee Ror 3,2 0,1
DCCEe R1Rz 0,6 0
DCcEE R2Rz 0,6 0,1
DCCEE RzRz 0 0
TOTAL 100 4,4 0,3
FRECUENCIA DE LOS FENOTIPOS DEL Rh Y KELL EN DONANTES D-POSITIVOS . HEMOCENTRO DISTRITAL, BOGOTA, COLOMBIA
2005
Camacho BA, D’anetra LV, Castro B, Mier JF. Hemocentro Distrital. Bogotá, Colombia
HEMOCENTRO
DISTRITAL
INCIDENCIA DE LOS GENOTIPOS MAS COMUNES EN PERSONAS D-POSITIVAS
ANTIGENOS D C E BLANCOS NEGROS
D, Cc, ee DCe / ce 31.1 % 8.8 %
DCe / Dce 3.4 % 15.0 %
Ce / Dce 0.2 % 1.8 %
34.7 % 25.6 %
D, CC, ee DCe / DCe 17.6 % 2.9 %
DCe / Ce 1.7 % 0.7 %
19.3 % 3.6 %
D, cc, Ee DcE / ce 10.4 % 5.7 %
DcE / Dce 1.1 % 9.7 %
11.5 % 15.4 %
INCIDENCIA DE LOS GENOTIPOS MAS COMUNES EN PERSONAS D-POSITIVAS
ANTIGENOS D C E BLANCOS NEGROS
D, cc, EE DcE / DcE 2.0 % 1.3 %
DcE / cE 0.3 % <0.1
2.3 % 1.4 %
D, Cc, Ee Dce / DcE 11.8 % 3.7 %
Dce / cE 0.8 % <0.1 %
Ce / DcE 0.6 % 0.4 %
13.2 % 4.2 %
D, cc, ee Dce / ce 3.0% 22.9%
Dce / Dce 0.2 % 19.4 %
3.2 % 42.3 %
RECEPTOR
“Efecto Dosis”
• En algunos sistemas de grupo sanguíneo, los individuos HOMOCIGOTAS para un alelo, (Jka Jka) pueden tener una mayor expresión de un determinado antígeno en la membrana del glóbulo rojo que los HETEROCIGOTAS (Jka Jkb).
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“Efecto Dosis”
• La diferencia en la cantidad de antígenos expresados en la membrana del glóbulo rojo entre un fenotipo HOMOCIGOTA y un HETEROCIGOTA se denomina “efecto Dosis”
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Anticuerpos del sistema Rh
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• La mayoría de Ac Rh resultan de la exposición a GR humanos por gestación o transfusiones
• Los inmunógenos mas potentes son los Ag D
• La mayoría son tipo Ig G (IgG1/IgG3).
• Pueden causar Reacciones Transfusionales y EHFRN
Acs. SISTEMA Rh
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• La inmunización por transfusión es la vía más frecuente de inmunización por Ags. Rh.
• El Ag. D, se estima en un 80% la probalidad de inmunización, después de una transfusión incompatible.
• La aloinmunización contra los antígenos E, c, e, C en pacientes politransfundidos.
Acs. SISTEMA Rh
• La inmunización por gestación es debida en la mayoría de los casos de EHFRN es debida al anti-D.
• La profilaxia con Ig. Anti-D ha disminuido el número de aloinmunizaciones maternas contra el Ag. D mas no contra los Ags. E, c, e, C.
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Acs. SISTEMA Rh
• Anti-D (Rh1): Frecuente en individuos D -Negativos politransfundidos y multíparas, puede estar asociado a Antí-C y/o Anti-E.
• Anti-c y Anti-E: Se encuentran principalmente en multíparas y politransfundidos, en forma aislada o en asociación.
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Acs. SISTEMA Rh
• Anti-e: son mas raros y se pueden presentar como alo o auto anticuerpos.
• Antí-C: igualmente raro en estado puro, es frecuente en asociación con antí-D. (antí-C+D).
• Frecuencia de anticuerpos Rh:
• Antí-D, anti-E, anti-c, anti.e, anti-C.
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Estimulan producción de Ac
GR fetales Entran en circulacion
materna
Ag no existentes en la madre
Los Ac cruzan la placenta Entran a la circulacion fetal
Destruyen GR del niño
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EHFRN
FISIOPATOLOGIA Ig M PM 890.000 d
IgG anti- D 160.000 d
Circulación materna
Atraviezan Placenta
G.R fetales RH (+)
Atacan Desarrollo de Ac anti-D
eritrofagocitosis x cell SMF
Bazo
HEMOLISIS
ANEMIA
HIPERBILIRUBINEMIA Daño hepático e hidropesía fetal x falla cardíaca anémica
↑ Eritropoyesis
↑ Prod. Bilirrubina
B. hematoencefálica SNC núcleos basales del cerebro
Kernicterus Encefalopatia RN
Ictericia
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Prevención EHFRN
Todas las gestantes Rh (-) Gamma globulina anti-D, la cual es un anticuerpo anti-D obtenido de donantes
induciendo su hemólisis e impidiendo que el SI de la madre alcance a generar la Rta inmune anti-D.
La gamma globulina anti-D se une a los GR fetales Rh (+) en la circulación materna
El paso de GR fetales a la circulación materna sucede durante el nacimiento
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OTRAS VARIANTES DEL SISTEMA RH
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Antígeno “f” RH6
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1953
• Rosenfield, Vogel, Gibbel y Sanger describieron un nuevo Ac en suero de pacientes hemolíticos
Acs.
• Reaccionaron con sangre de individuos que tenían los Ags c y e del complejo Rh
Cromosoma
• Tipo cde, cDe o cDUe
• Herencia no estaba determinada por los locus Rh
Antígeno “f” Rh6
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Richardson, Steinberg, Allen, Diamond y Kriete
(1954)
Conformaron existencia del Anti-f y su estrecha relación
con el sistema Rh
Hipótesis que el Ag se heredaba cuando los Ag c y e están en
el mismo cromosoma
Sugirieron que el Ag f es el resultado de “efecto posición”
cuando los genes c y e están en el mismo
cromosoma el Ag está presente en los
GR
Antígeno “f” Rh6
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Los Ags c y e están en cromosomas
diferentes el Ag f no se expresa
Descartan la existencia de un
alelo F-f
Hay reacción del con antisueros Anti-c y
anti-e
Producción de Acs personas con
genotipo CDe/Cde y cDE/cDE
El antígeno f es codificado por
la proteína RHCE, RHI por RHCE
Rh8 (Cw)
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Antígeno Rh de baja
frecuencia
Presente en el 2% de la
población blanca.
Colombia: 0.3%
Relativamente común en los Finlandeses
Rh8 (Cw)
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Gen RHCE
Mutación puntual en el
exon 1
Gln41Arg
Rh8 (Cw)
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Responsable de aloinmunizaciones
Recepción de sangre Cw+ en pacientes Cw-
En pocos casos ha causado reacciones hemolíticas post-
transfusionales o EHRN Diagnóstico precoz en EHRN
RH8 (Cw)
Rh 17 (Hro)
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Descrito por primera vez por Race y Sanger en 1950.
Rara condición: designada como fenotipo D--.
Ausencia completa de antígenos: C/c y E/e
Presencia de Antígeno D (Sobreexpresión en la superficie del glóbulo rojo)
Individuos D - - (Rh17)
Transfusión sanguínea
Anticuerpo anti Rh 17: (individuos que carecen de antígenos C/c y
E/e)
Reactividad contra el antígeno Rh 17(Hro)
Aloanticuerpo raro
Aloinmunización
Sensibilizados cuando expuestos a antígenos Rh de alta frecuencia
Durante la gestación
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DIPLOMADO MEDICINA TRANSFUSIONAL E INMUNOHEMATOLOGIA Importancia Clínica Rh17
Capaz de atravesar placenta
Ac IgG
Reacciones transfusionales.
Anti Rh 17
Enfermedad hemolítica leve a severa en recién nacidos
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Rh Nulo
Existen 2 clases de Rh nulo:
1. Ausencia de un gen regulador (X1r) que impide la expresión de los genes normales en el locus Rh del cromosoma 1. (F.Bombay)
2. Mutaciones en el gen RhG. O mutación doble en el gen RHCe y la delección de RHD
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41 Dr. Baldo Castro C.
FISIOPATOLOGÍA
• Glóbulos rojos con anormalidades en la membrana.
• La ausencia de Ags Rh produce estomatocitosis.
• Acortamiento de su vida media y anemia.
• Compromiso de actividad de otros grupos sanguíneos (S, s y U)
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Rh mod
• Representan una supresión incompleta de la expresión del gen Rh; se cree que es responsable un gen modificador recesivo no ligado. Este gen se identifica como XQ.
• Los individuos no presentan carencia total de los antígenos Rh, pero si una actividad muy reducida. (absorción y elución).
• El antígeno LW está presente.
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43 Dr. Baldo Castro C.
Rh mod
• A veces los antígenos Rh, tienen una expresión tan debilitada que solo demuestran la presencia, técnicas de adsorción-elusión.
• Es característica de esta condición la anemia hemolítica.
• Se piensa que estas dos anormalidades son similares y que difieren solo en grado.
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44 Dr. Baldo Castro C.
Rh Nulo Rh modificado
No se expresa ninguno de los Ag del sistema Rhesus
No se expresa Ag C,c,E,e ni D
Anomalias eritrocitarias
Estomatocitos De sobrevida
Supresión incompleta de la expresión génica Rh
Gen modificado recesivo no ligado denominado XQ
No carecen por completo de Ag Expresión de Ag Rh es muy débil
técnicas de absorción y elución los detectan
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COMPARACION DELECCION : NULO
DELECCION DE Ag Rh (-D-/-D-)
Rh NULO (----)
MORFOLOGIA DEL GLOBULO ROJO
NORMAL ESFEROCITO ESTOMATOCITO
ANTIGENOS RHESUS AUMENTO DEL No. DE Ag D / G.R.
NO EXPRESA LOS ANTIGENOS CcEe NI D
SOBREVIDA IN VIVO NORMAL REDUCIDA
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ALOINMUNIZACIÓN DE ANTÍGENOS DE GRUPO
SANGUÍNEO
• El D es el antígeno de grupo sanguíneo más inmunogénico e importante clínicamente, después de los antígenos ABO
• En estudios a voluntarios sanos, aproximadamente el 85% de individuos D-negativos transfundidos con 200 mL o más de glóbulos rojos D-positivo hicieron anti-D.
Dr. Baldo Castro C. 47
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ALOINMUNIZACIÓN DE ANTÍGENOS DE GRUPO
SANGUÍNEO
• De un análisis sobre reportes publicados, Issit y Anstee estiman que aproximadamente de 1% a 1.5% de pacientes, presentaran 1 o más anticuerpos clínicamente significativos.
• El patrón para los donantes sanos es mucho menor, alrededor de 0.2%.
Dr. Baldo Castro C. 48
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ALOINMUNIZACIÓN DE ANTÍGENOS DE GRUPO
SANGUÍNEO
• En un estudio prospectivo de la incidencia de aloinmunización de glóbulos rojos de transfusión, el 8.4% (38/452) de los pacientes desarrollaron anticuerpos dentro de las 24 semanas luego de la transfusión.
• Específicamente dentro del sistema Rh estaban presentes 76% de ellos.
• Los anticuerpos inmunes más comúnmente encontrados son D > K > E >c> Fya >Jka.
Dr. Baldo Castro C. 49
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!Muchas Gracias por su atención¡
• "El genio se compone del dos por ciento de talento y del noventa y ocho por ciento de perseverante aplicación."
BEETHOVEN, Ludwig van
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50 Dr. Baldo Castro C.