Download - In Vitro Testiranje Alergijskih Bolesti
Alergijske bolesti-bolesti modernog doba Alergija vodi poreklo od gr ke re i Alos-drugi i Ergon-dejstvo Alergije predstavljaju promenjenu i prekomernu reakciju organizma na ina e ne tetne materije iz na e okoline-alergene Sve je ve i broj obolelih kako me u decom tako i me u odraslima Atopija predstavlja genetsku predispoziciju da se na alergene iz na eg okru enja odreaguje stvaranjem IgE antitela
Klini ke manifestacije alergijskih bolesti: Astma Alergijski rinitis Atopijski dermatitis Anafilaksa Alergije na hranu Druge manifestacije
Alergijske reakcije na hranu naj e e se vi aju kod dece uzrasta ispod 2 godine. Najzastupljeniji alergeni su: kravlje mleko, belance, kikiriki, p enica, riba.
Neka deca sa senzibilizacijom na alergene hrane, kasnije u detinjstvu, razviju alergiju na inhalatorne alergene : ku na pra ina, grinje, polen trave, drve a i korova.
Tipovi alergijskih reakcija
Prema glavnim imunskim mehanizmima reakcije preosetljivosti dele se na: Tip I: rane reakcije posredovane IgE antitelima Tip II: citotoksi ne reakcije posredovane IgG i IgM antitelima Tip III: reakcije posredovane imunim kompleksima Tip IV: kasne reakcije posredovane T limfocitima
Prva tri tipa preosetljivosti posredovana su antitelima, dok je etvrti tip posredovan elijama.
Tip I alergijskih reakcijaOp te karakteristike Posredovane specifi nim IgE antitelima Mora postojati prethodna senzibilizacija-organizam je ve bio u kontaktu sa odre enim antigenom (alergenom) Specifi nost IgE antitela odre ena je veznim mestom za alergen Vezno mesto ine varijabilni delovi lakih i te kih lanaca imunoglobulina E
IgE posredovane hipersenzitivne reakcije
Specifi ni IgE se vezuje za povr inu mastocita Ponovni kontakt sa alergenom dovodi do premo avanja dva susedna IgE antitela to za posledicu ima degranulaciju mastocita Mastociti su medijatorske elije, njihovom degranulacijom osloba a se histamin koji je odgovoran za ve inu klini kih manifestacija alergije (svrab, crvenilo...)
Nutritivni alergeni Me unarodna oznaka F (Food), i brojevima od 1- 409 prema vrsti namirnice Preovladavaju u de jem dobu
Veliki broj razli itih alergena: jaje, mleko, bra no, kikiriki, soja, jagode i drugo vo e, riba, meso, za ini, okolada, povr e
Inhalacioni alergeni Polen drve a, oznaka T (Tree) Drve e: breza, lipa, topola, leska, hrast i drugi Polen trava, oznaka G (Grass) Trave : je evica, popino prase, lisi ji repak i druge Polen korova, oznaka W (Weeds) Korov : niski korov-ambrozija, visoki korov
Alergeni ivotinjskog porekla Me unarodna oznaka E dlaka psa, ma ke, papagaj, zec
Grinje Oznaka D: Dermatofagoides pteronyssinus, Dermatofagoides farinae
Venomi insekata Oznaka I (Insects) : osa, p ela, str ljen
Profesionalni alergeni Oznaka K: latex, vuna, svila
Bu , ku na pra ina i ostali alergeni Lekovi, paraziti, enterotoksin A i B
Hrana 2 % Lekovi 1 % Bu 5 %
ivotinje 15 % i Naj e i alergeni
Grinje 25 % Inhalatorni alergeni: 95 %
}Insekti 2 %
Drve e + Korov + Trava = 50 %
Dijagnostika alergijskih bolestiIn vivo dijagnostika podrazumeva: Ko ne testove (prick, patch) Provokacioni testovi (oralni provokacioni test hranom, konjuktivalni, inhalacioni testovi)
In vitro dijagnostika podrazumeva: Odre ivanje koncentracije ukupnih IgE antitela u serumu (u na oj laboratoriji odre uje se metodom nefelometrije na aparatu BN II) Odre ivanje specifi nih IgE antitela na veliki broj pojedina nih alergena
Prednosti in vitro dijagnostikeKomfornost za pacijenta Antihistaminici se ne moraju obustaviti Ne postoji rizik od ne eljenih reakcija Manje invazivno za pacijenta Jedan uzorak, vi estruko odre ivanje Jedan ubod iglom u pore enju sa vi e uboda kod prik testiranja
Indikacije za odre ivanje specifi nog IgE
Novoro en ad i mala deca U slu ajevima kada ko no testiranje nije mogu e (izra ene promene na ko i kod atopijskog dermatita, urtikarije i sl.) U nedostatku alergena za ko no testiranje U slu ajevima kada bi ko no testiranje moglo provocirati anafilaksu (penicilin) Kod pacijenata koji koriste antihistaminike te ko ni testovi nisu mogu i Kada se anamnesti ki podaci ne podudaraju sa rezultatima ko nog testa
Immulite 2000 osnovni principi
Immulite 2000 pripada tzv. tre oj generaciji aparata koji omogu avaju izuzetno visoku senzitivnost i preciznost testova. Immulite 2000 radi na principu hemiluminiscence Hemiluminiscenca predstavlja emisiju svetlosti koja nastaje kao posledica hemijske reakcije. Ove reakcije odvijaju se u prisustvu katalizatora kao to su enzimi, npr. alkalna fosfataza Veliki kapacitet analiza, istovremeno je mogu e analizirati 90 uzoraka i 138 razli itih alergena Alergeni, u originalnom pakovanju stabilni 2 godine, a nakon otvaranja 90 dana
Osnovni elementi specifi nog IgE kita
Kuglica oblo ena streptavidinom (antiligand) Alergen obele en biotinom (ligand)
Specifi ni IgE (pacijentov serum)
At na IgE obele ena alkalnom fosfatazom
Prvi ciklus Kuglice oblo ene streptavidinom ubacuju se u reakcione a ice i inkubiraju se sa specifi nim alergenom i serumom pacijenta 30 min. na 37C.
Drugi ciklus Dodaju se anti IgE antitela obele ena sa alkalnom fosfatazom i zapo inje inkubacija koja traje 30 min. na 37C.
Tre i ciklus Dodaje se hemiluminiscentni substrat koji reaguje sa alkalnom fosfatazom i daje luminiscencu koja se meri luminometrom i direktno je proporcionalna sa koncentracijom alergen specifi nog IgE-a u serumu pacijenta.
Barcode reader Bead Packkuglice za 200 testova
Svaki pojedina ni alergen obele en je bar kodom Nosa i alergena u odeljku za reagense Originalno pakovanje alergena nalazi se u dva oblika: za 20 i za 40 testova
Features Allergen Antibody Detection Detected Signal Low calibrator concentration Zero calibrator Detection Limit Funtional sensitivity Results reported TTFR Automation
1st Generation (RAST) Paper solid phase Policlonal Isotopic 25 kU/L No N/A Not defined Arbitrary Units & classes 2 nights Manual
2nd Generation (ImmunoCAP) Celulosa solid phase Monoclonal Fluorescence o espectrofotometry 0,35 kU/L No 0,35 kU/L Not defined WHO standarized & classes 3,5 hours Batch
3rd Generation (3g Allergy) Liquid phase Monoclonal Quimioluminiscence 0,0 kU/L Yes 0,1 kU/L 0,2 kU/L WHO standarized & classes 65 minutes Continue Random Access
Interpretacija rezultataKlasa 0 0/I I II III IV V VI Immulite 2000 kU/l 0.0-0.10 0.11-0.24 0.25-0.39 0.40-1.29 1.30-3.89 3.90-14.9 15.0-24.9 >/=25 Standardni kU/l 0.0-0.34 0.35-0.69 0.70-3.49 3.5-17.49 17.5-52.4 52.5-99.9 >/=100 Interpretacija
Nema detektibilnih spec. IgE antitela Veoma niska koncentracija spec. IgE At Niska koncentracija spec. IgE At Umereno pove ana konc. spec. IgE At Visoka koncentracija spec. IgE At Veoma visoka koncentracija spec. IgE At Veoma visoka koncentracija spec. IgE At Veoma visoka koncentracija spec. IgE At
Spisak alergena na koje mo ete odrediti specifi ni IgE u Imunolo koj laboratoriji CZMB
Immulite 2000 pru a velike mogu nosti odre ivanja specifi nog IgE na preko 400 alergena
Mogu nost odre ivanja: ECP Specifi ni IgG Specifi ni IgG4
Kako napisati uput za Imunolo ku laboratoriju?itko popunjen uput lekara sa svim pacijentovim podacima iz zdravstvene knji ice (ime i prezime, mati ni broj, LBO osiguranika, ako je pacijent dete preko koga je osigurano) Za odre ivanje specifi nog IgE potrebno je navesti svaki pojedina ni alergen za koji se sumnja da je pacijent senzibilisan (anamneza, klini ka slika i dr.) Potrebno je ujedno tra iti i ukupni IgE
NE: polen drve a DA : polen breze, lipe, topole...
Prevencija alergija?!