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Lic. Maciel López de Forino
LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO
Análisis Clínico del
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LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO
Liquido incoloro
Rodea al cerebro y la medula
espinal
Medio Nutritivo
Vehículo Excretor
Infecciones agudas y crónicas
del SNC,
Enfermedades inflamatorias y
degenerativas del SNC
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CONSIDERACIONES INICIALES
La muestra de LCR es debe ser considerada de EMERGENCIA.
Las patologías asociadas son de una
elevada morbilidad y mortalidad. Según
datos de la Organización Mundial de la
Salud, sólo la meningitis genera cerca de
500.000 casos y 50.000 muertes cada
año.
Su procesamiento debe ser
rápido, completo, meticuloso y de
calidad.
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OBTENCIÓN DE LA
MUESTRA
TIPOS DE PUNCIÓN
• LUMBAR (PL)
• CISTERNAL
•VENTRICULAR
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CONTRAINDICACIONES
DE LA PL:
1 - Síndrome de hipertensión
endocraneana (SHE)
2 - Hemorragia
subaracnoidea (HSA) no
traumática
3 - Infección local
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OBTENCIÓN DE LA
MUESTRA
OBTENCIÓN TRAUMATICA
• Distribución no uniforme de la sangre
•Formación de coagulo•"signo de la escarapela“
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DIFERENCIAS ENTRE HSA Y
PUNCIÓN TRAUMÁTICA
DETERMINACIONES Puncióntraumática
Hemorragiasubaracnoidea
Aspecto tubo Desigual Igual
Coágulos A menudo No se observa
Sobrenadante Incoloro Xantocromico
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EXAMEN DE LCR
1
MICROBIOLOGIA
CultivosPhadebact
2
CITOQUÍMICA
3
OTROSPCR
VDRLINV. HONGOS
TOXICOLOGICOAG. VIRALES
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ANÁLISIS
MICROBIOLOGICO
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ANÁLISIS
MICROBIOLOGICO
PATÓGENOS BACTERIANOS MÁS COMUNES
Streptococcus pneumoniae (30-50%)
Neisseria meningitidis (10-30%)
Listeria monocytogenes (10%)
Haemophilus influenzae (5%)
Gram negativos, Streptococcus,
Staphylococcus menos de 1% (1, 2, 5).Neisseria meningitidis
TINCIÓN CON GRAM60 – 80% DE SENCIBILIDAD
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PHADEBACT
TÉCNICA DE AGLUTINACIÓN EN LATEX
Streptococcus pneumoniae
Haemophilus influenzae tipo b
Neisseria meningitidis grupos A, B,
C, Y, W135
Streptococcus agalactiae (Strep B)
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CITOQUÍMICA
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CITOQUÍMICA
¿Es útil el estudio aisladodel líquido cefalorraquídeo?Siempre es necesario comparar los valores del líquido cefalorraquídeo con los de una muestra de sangre, y ambas muestras han de obtenersea la vez
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CITOQUÍMICA
CITOQUÍMICA EXAMEN FISICO•Aspecto•Color
•Formación de coagulo
CENTRIFUGAR
SEDIMENTO
•Recuento diferencial
• Gram
SOBRENADANTE•ASPECTO• COLOR• PRUEBAS BIOQUIMICAS
1. Esenciales• PANDY• NONNE APELT• PROTEINAS
TOTALES• GLUCOSA• CLORUROS
2. Complementarias• Albuminas
• Globulinas
• IgG, IgM, IgA
3. Especiales• Isoenzimas de LDH
• Lactato, Glutamina
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EXAMEN FÍSICO DE
RUTINA
ASPECTOCRISTALINO (NORMAL)ANORMALTURBIO (opalescente)
FORMACIÓN DEL COÁGULONEGATIVO (NORMAL)ANORMALPOSITIVO
COLORINCOLORO (NORMAL)ANORMAL1. ROJO2. XANTOCROMICO
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EXAMEN BIOQUÍMICO
CAUSAS DEL AUMENTO DE LACONCENTRACIÓN DE PROTEÍNA EN LCR 1. POR AUMENTO DEL PASO DE PROTEÍNAS DESDE EL PLASMA
2. POR AUMENTO DE SÍNTESIS INTRATECAL
3. POR COMBINACIÓN DE LAS DOS SITUACIONES ANTERIORES
Proteínas TotalesMétodo: Biuret, Ac. SulfosalicilicoVR: 20 – 45 mg/dlAumentada: Enfermedad inflamatoria aguda o crónica, enfermedad degenerativaDiferencial: electroforesis
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EXAMEN BIOQUÍMICO
Reacciones globulinicasReacción de Pandy:prueba mas sensible para detectar globulinas en LCRReacción de Nonne - Apelt:
AlbúminaBuen marcador del
intercambioentre el LCR y el plasma
Punción traumática:
Corregir concentración de
proteínas 1mg por cada 1000
hematíes
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EXAMEN BIOQUÍMICO
GLUCOSAVR: 50 – 80 mg/dl (60 – 80 % de su conc. en sangre)Aumentada: Hiperglicemia, encefalitis.Disminuida: Meningitis piógena y tuberculosa
CLORUROSVR: 121 – 128 mEq/LSirve para diferenciar entre meningitis tuberculosa y sifilíticaDisminuida: Meningitis piógena y tuberculosaEn encefalitis , tumores y abscesos No hay disminución de los cloruros
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EXAMEN QUÍMICO
DESHIDROGENASA LÁCTICA (LDH)Esta Aumentada en:• 90% de los casos de meningitis bacteriana•10% de los casos de meningitis viral•Leucemia o Linfoma•Cáncer metastasico del SNCInterferencia; contaminación con sangre debido a una punción traumática
LACTATOEs independiente de la concentración plasmática.
Refleja el metabolismo cerebral anaerobio por
hipoxia.
Aumenta: Infarto cerebral,edema, trauma o
meningitis.
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RECUENTO CELULAR
Cámara de Neubauer
Contar los 4 cuadros grandes de las esquinas (0.4 ĖL) y el
del centro (0.1 ĖL) en ambos lados del hematocitometro. El numero de células contadas se multiplican por el factor de dilución
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RECUENTO CELULAR
VR: Leucocitos: 0 – 5 x mm3 / Hematíes: 0 – 10 x mm3
1. LCR CLARO O ALGO TURBIO • Contaje directo2. LCR TURBIO O SANGUINOLENTO• Diluir con SSF o Violeta de genciana al 0.1% en SSF• Utilizar la pipeta para contaje de glóbulos blancos
Punción traumática:
Corregir en número de células restando 1 leucocito
por cada 700 hematíes.
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RECUENTO DIFERENCIAL
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PLEOCITOSIS
Por Neutrofilos•Sugiere diagnóstico de meningitis bacteriana.•Comienzo de las meningitis víricas•Hemorragia cerebral
Por Linfocitos•Se asocia a meningitis vírica•Meningitis tuberculosa o micótica•Neurosífilis•Meningitis por Listeria•Esclerosis múltiple
Por Eosinofilos•Se observa rara vez con recuentos•discretos en procesos inflamatoriossistémicos o asociados a infeccionesparasitarias, fúngicas o alergias
Por Células tumorales•Tumor primario o metástasis•Diseminación meníngea de•Leucemia o linfomas
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RELACION ENTRE PATOLOGIAS Y
HALLAZGOS BIOQUÍMICOS
PATOLOGÍA ASPECTO Y COLOR
LEUCOCITOSmm3
PROTEINASmg/dl
GLUCOSAmg/dl
NORMAL LímpidoTransparente
0 – 5 mm3 15 – 45 45 - 80
MENINGITISBACTERIANA
turbio, purulento u opalescente
muy aumentado(500 – 10000) con
predominio de PMN
80 – 500 menor de 40
MENINGITIS VIRAL Claro oligeramente
turbio, opalescente
aumentado (5 – 300) predominio de linfocitos,
primeras 24 – 36 h predominan PMN
30 – 100 normal o lig. aumentada
MENINGITISTUBERCULOSA
Claro, malla fina aumentado (100 – 600 )
50 – 300 menor de 45
MENINGITIS FUNGICA Ligeramente turbio aumentado (40 – 400 )
predominio PMN
50 – 300 menor de 45
HEMORRAGIA SUBARACNOIDEA
Xantocromico normal aumenta normal o lig. aumentada
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•PROTEINAS TOTALES: Cisternal: 15 – 25 mg/dl
Ventricular: 5 – 15 mg/dl
lumbar: 15 – 25 mg/dl
•ELECTROORESIS
(% DE LA CONC. PROTEICA TOTAL):
Prealbuminas: 2-7 %
Albuminas : 55-75%
α1 globulinas: 2-7%
α2 globulinas: 3,5 – 12%
ßGlobulinas 8-18%
γGlobulinas: 7-12%
IgM: 0 – 0.6 mg/L
IgG: 10 – 40 mg/L
IgA: 0 – 0,2 mg/L
•RECUENTO DE ERITROCITOS:
0 -1 x mm3
•RECUENTO DE LEUCOOCITOS:Menos de 1 año: 0 – 30 x mm3
1-4 años: 0 – 20 x mm3
5 años – pubertad: 0 – 10 x mm3
Adultos : 0 – 5 x mm3
COMPOSICIÓN NORMAL DEL LCR
•VOL TOTAL: 150 ml
•ASPECTO: Transparente
•OSMOLARIDAD: 281 mOsm/L
•COLOR: incoloro
•PRESION:
60- 180 mm LCR (relajado)
200 – 250 mm LCR (sentado)
•PH: 7,32
•PCO2: 47,9 mmHg
•HCO3: 22,9 mmHg
•SODIO: 2.7 – 3,9 mEq/L
•CLORUROS: 120 – 130 mEq/L
•CALCIO: 4 – 6 mg/100 ml
•MAGNESIO: 0,6 – 4,8 mg/100 ml
•NITROGENO UREICO: 5 – 20 mg/100 ml
•LACTATO: 1,1 – 2,8 mmol/L
•DHL: ~ 10% valores séricos
•GLUCOSA: 50 – 80 mg/100 ml
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OTRAS PRUEBAS
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RACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
Útil para la determinación de Antígenos
Detección de secuencias específicas de:
Enterovirus
Virus Herpes simple
Virus Herpes tipo 6
Citomegalovirus
Epstein Barr
Varicela Zoster
Virus de Inmunodeficiencia Humana
Toxoplasma gondii
Micobacterium tuberculosis
Micoplasma pneumoniae
Utilización de la Reacción en Cadena de la Polimerasa para el diagnóstico de infecciones del Sistema
Nervioso Central. Invest Clin 47(4): 337 - 347, 2006
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ANÁLISIS DE AG.VIRALES
MENINGITIS VIRAL O ASÉPTICA
Picornavirus: Enterovirus, Rinovirus,
Hepatitis A
Calicivirus
Togavirus: Pestivirus, Arturivirus,
Alfavirus, etc.
Flavivirus
Cornavirus
Rabdovirus: Lisavirus y Vesiculovirus
Paramixovirus
Retrovirus
Hepadnavirus
Virus Herpes
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ANÁLISIS DE AG.VIRALES
DETERMINACIÓN DEL COCIENTE DE ALBÚMINA
Albúmina en LCR
Albúmina en Suero
valor límite <0.0075
Laboratorio Regional de Referencia Virológica. Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Venezuela.
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ANTIVIRALES
ELISAInmunofluorescencia
Tratamiento
previo de la
muestra LCR
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CONSIDERACIONES FINALES
Entre las pruebas mas importantes que deben realizarse al LCR están el
phadebact, proteínas y antivirales.
El año pasado la Meningitis ocupo la posición 18 entre las primeras 20
enfermedades de notificación obligatoria. El estado con mayor número de casos
fue Zulia.
Bioanalistas, Agentes de cambio Social
REALICEMOS UN ESTUDIO
MAS COMPLETO Y
EXHAUSTIVO DEL LCR
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ACCESO [email protected]
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Muchas Gracias !!!