determination de coliformes totals y fecales

7/24/2019 Determination de Coliformes Totals y Fecales

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Determination de coliformes totals y fecales

Objetivo general: detrminar la presencia y numero de colonias de coliforms fecalesy totals mediante una serie bioquimica

Objetivo especico:

Fundamento teorico:Debido a que un gran nmero de enfermedades sontransmitidas por va fecal-oral utilizando como veculo los alimentos y el agua! es

necesario contar con microorganismos que funcionen como indicador de

contaminaci"n fecal# $stos deben de ser constantes! abundantes y e%clusivos de la

materia fecal! deben tener una sobrevivencia similar a la de los pat"genos intestinales

y deben ser capaces de desarrollarse e%traintestinalmente# $l grupo coliforme

constituyen un grupo eterog&neo con 'bitat primordialmente intestinal para la

mayora de las especies que involucra! es constante! abundante y casi e%clusivo de la

materia fecal! su capacidad de sobrevivencia y multiplicaci"n fuera del intestino

tambi&n se observan en aguas potables! por lo que este grupo se utiliza como

indicador de contaminaci"n fecal en agua( encontrandose que mientras mayor sea el

nmero de coliformes en agua! mayor ser' la probabilidad de estar frente a una

contaminaci"n reciente# )uando los coliformes llegan a los alimentos! no s"lo

sobreviven! sino que se multiplican! por lo que en los alimentos el grupo coliforme

adquiere un signicado distinto al que recibe en el agua# )uando los productos

alimenticios an recibido un tratamiento t&rmico *pasteurizaci"n! orneado! cocci"n!

etc#+! estos microorganismos se utilizan como indicadores de malas pr'cticassanitarias# ,ara su estudio! se dividen en dos grupos# $l grupo de bacterias coliformes

totales el cual comprende a todos los bacilos ram-negativos aerobios o anaerobios

facultativos! no esporulados! que fermentan la lactosa con producci"n de gas en un

lapso m'%imo de ./ # a 012) 3 45)# $ste grupo est' conformado por . g&neros

principalmente: $nterobacter! $scericia! )itrobacter y 6lebsiella# $l grupo de

coliformes fecales! est' constituido por bacterias ram-negativas capaces de

fermentar la lactosa con producci"n de gas a las ./ de incubaci"n a ..#1 3 7#42)#

$ste grupo no incluye una especie determinada! sin embargo la m's prominente es

$scericia coli# 8a demostraci"n y el recuento de organismos coliformes! puede

realizarse mediante el empleo de medios de cultivo lquidos y s"lidos concaractersticas selectivas y diferenciales# $scericia coli es un bacilo corto ram

negativo que se encuentra clasicado dentro de la familia $nterobacteriaceae

*bacterias ent&ricas+! e%iste como comensal en el intestino delgado de umanos y

animales# 9in embargo! e%isten algunas cepas de $# coli pat"genas que provocan

enfermedades diarreicas# $stas se clasican con base en las caractersticas que

presentan sus factores de virulencia nicos! cada grupo provoca enfermedad mediante

un mecanismo diferente# 9e sabe que sus propiedades de aderencia a las c&lulas


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epiteliales de los intestinos grueso y delgado son codicadas por genes situados en

pl'smidos# De manera similar las to%inas son mediadas por pl'smidos o fagos# $ste

grupo de bacterias se encuentra constituido por las siguientes cepas: $# coli

enteroto%ig&nica *$$)+! $# coli enteropat"gena *$,$)+! $# coli enteroemorr'gica

*$;$)+! $# coli enteroinvasiva *$


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enteroemorr'gica $;$) produce veroto%ina! denominada as por su efecto citot"%ico

sobre las c&lulas Eero! una lnea de c&lulas renales de mono verde africano# $%isten al

menos dos variantes antig&nicas de la to%ina# 8a $)$; se a asociado con colitis

emorr'gica! una variedad grave de diarrea( y con el sndrome ur&mico emoltico!

enfermedad capaz de producir insuciencia renal aguda! anemia emoltica

microangiop'tica y trombocitopenia# 8a veroto%ina tiene propiedades similares a lato%ina siga producida por algunas cepas de 9igella dysenteriae tippo 4( De los

serotipos de $# coli que producen la veroto%ina el m's comn y el nico que puede

identicarse en muestras clnicas es el O41:;# 8a $# coli O41:; no emplea sorbitol

y es negativa a la prueba de G?# 8a causa m's comn de esta infecci"n es el

consumo de carne sin cocinar o poco cocinada! particularmente carne picada

procesada en grandes cantidades# 8os casos de colitis emorr'gica y sus

complicaciones asociadas pueden prevenirse mediante la cocci"n completa de la

carne#

Gateriales y Getodos:

1 " 47 tubos de HH % 41 mm con 47#7 m8 de caldo lauril sulfato de sodio o caldo

lactosado concentraci"n doble o triple con campana de Durama #

1 " 47 tubos de 4B % 417 mm con 47#7 m8 de caldo bilis verde brillante con

campana de Duramb #

1 " 47 tubos de 4B % 417 mm con 47#7 m8 de caldo $) y campana de Duram o

caldo $) G? con campana de Duram b

H cajas ,etri con agar para m&todos est'ndar d

,ipetas de 4#7 m8 est&riles con tap"n de algod"na #

=sa bacteriol"gicab!c!d!

=utoclavea

O=9 a Gaterial necesario al inicio de la pr'ctica# b Gaterial necesario a las ./ #

de iniciada la pr'ctica# c Gaterial necesario a las @B # de iniciada la pr'ctica# d

Gaterial necesario a las 4H7 # de iniciada la pr'ctica# e Gaterial necesario a las 4..

# de iniciada la pr'ctica#

,rocedimiento

4 ,rueba presuntiva

=gitar la muestra y transferir volmenes de acuerdo con el cuadro 4! a cada uno

de los tubos con caldo lauril sulfato de sodio que se ayan seleccionado# =gitar los

tubos para omogeneizar la muestra#


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