PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA FACULTAD DE CIENCIAS

CARRERA DE MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

EVALUACIN DE LA EFICACIA DE UN DESINFECTANTE DE ALTO NIVEL, A BASE DE PEROXIDO DE HIDROGENO,

EMPLEADO EN LA ESTERILIZACIN DE DISPOSITIVOS E INSTRUMENTOS HOSPITALARIOS

MEDINA CRDOBA LUZ KARIME VALENCIA MOSQUERA LIGIA LUCIA

TRABAJO DE GRADO Presentado como requisito parcial

Para optar al ttulo de MICROBILOGA INDUSTRIAL

Bogot D.C. 21 de Julio de 2008

NOTA DE ADVERTENCIA

Artculo 23 de la Resolucin N 13 de Julio de 1946 La Universidad no se hace responsable por los conceptos emitidos por sus alumnos en sus

trabajos de tesis. Solo velar por que no se publique nada contrario al dogma y a la moral catlica y por que las tesis no contengan ataques

personales contra persona alguna, antes bien se vea en ellas el anhelo de buscar la verdad y la justicia.

EVALUACIN DE LA EFICACIA DE UN DESINFECTANTE DE ALTO NIVEL, A BASE DE PEROXIDO DE HIDROGENO, EMPLEADO EN LA

ESTERILIZACIN DE DISPOSITIVOS E INSTRUMENTOS HOSPITALARIOS

MEDINA CORDOBA LUZ KARIME VALENCIA MOSQUERA LIGIA LUCIA

APROBADO

_____________________ Gretty Paola Tarazona

Bacteriloga Directora

____________________ ____________________ Janeth Arias Palcios Miguel Pinzon Bello Bacteriloga M.C Asesor Estadstico Codirectora

__________________ Zulma Valbuena Bacteriloga Jurado

__________________ Cindy Fernndez

Microbiologa Industrial Jurado

EVALUACIN DE LA EFICACIA DE UN DESINFECTANTE DE ALTO NIVEL, A BASE DE PEROXIDO DE HIDROGENO, EMPLEADO EN LA ESTERILIZACIN DE DISPOSITIVOS E

INSTRUMENTOS HOSPITALARIO

MEDINA CORDOBA LUZ KARIME VALENCIA MOSQUERA LIGIA LUCIA

APROBADO

_________________________ ____________________________ Dra. INGRID SCHULER P.h D. JANETH ARIAS PALACIOS MSc. Decana Acadmica Directora de Carrera

AGRADECIMIENTOS

A Dios gracias por darnos la vida y otorgarnos el conocimiento, la fortaleza, y salud e iluminarnos en el camino para alcanzar nuestras metas.

Dedicamos este proyecto a nuestros padres y familiares los cuales nos ayudaron con

su apoyo y amor incondicional, por que gracias a ustedes logramos alcanzar

nuestros conocimientos y estar mas cerca las metas profesionales.

A la Dra. Janeth Arias Palacios nuestras codirectora del proyecto por su

conocimiento, apoyo y confianza que siempre nos brindo.

A la Dra. Gretty Paola Tarazona nuestras directora por su colaboracin durante el

transcurso de toda la investigacin.

A la Dra. Alba Alicia Trespalacios por felicitarnos el espacio para llevar a cabo nuestra

investigacin.

A la Pontificia Universidad Javeriana nuestra institucin por facilitarnos los materiales

y medios necesarios para alcanzar nuestra metas.

A todas las personas que siempre estuvieron apoyndonos

A todos ellos muchas gracias

6

TABLA DE CONTENIDO

Paginas

1. INTRODUCCIN 9

2. MARCO TERORICO 11

2.1. DESINFECCIN 11

2.2. DEFINICIONES 13

2.3. DESINFECTANTES 15

2.3.1.Generalidades 15

2.3.2. Caractersticas de un buen desinfectantes 16

2.3.3. Factores que influyen en la eficacia de los desinfectantes 16

2.3.4. Mecanismos de accin de los desinfectantes 18

2.3.5. Resistencia de los microorganismos a los desinfectantes 21

2.3.6. Clasificacin de los desinfectantes segn su mecanismo de accin 23

2.3.6.1. Agentes que daan la membrana clula 23

2.3.6.2. Agentes que desnaturalizan protenas 23

2.3.6.3. Agentes que modifican grupos funcionales 23

2.3.7. Clasificacin de los desinfectantes segn su actividad 24

2.3.8. Clasificacin de los desinfectantes segn el mtodo de desinfeccin 25

2.3.8.1. AGENTES FSICOS DESINFECTANTES 25

2.3.9. AGENTES QUMICOS DESINFECTANTES 27

2.3.9.1. Productos reductores: Aldehidos 27

2.3.9.1.1. Formaldehdo 27

2.3.9.1.2. Glutaraldehido 28

2.3.9.2. Agentes oxidantes 29

2.3.9.2.1. cido peractico 29

2.3.9.2.2. Ozono 30

2.3.9.2.3. Perxido de Hidrogeno 30

2.3.9.2.3.1. Mecanismo de accin 31

2.3.9.2.3.2. Espectro de actividad 33

2.3.9.2.3.3. Aplicaciones 33

2.3.9.3. Fenoles y derivados 34

2.3.9.4. Alcoholes 35

2.3.9.5. Halgenos 36

2.3.9.6. Compuestos Yodados 36

2.3.9.7. Compuestos que liberan cloro 37

7

2.3.9.8. Biguanidas 39

2.3.9.9. Agentes cidos desinfectantes 39

2.3.9.10. cidos orgnicos 40

2.3.9.11. Compuestos de amonio cuaternario 40

2.3.9.12. Agentes desinfectantes tensioactivos anfotericos 41

2.3.9.13. Detergentes desinfectantes 41

2.4. Desinfectante de alto nivel de STERIS 42

3. TIPOS DE MICROORGANISMOS 43

3.1. Factores que influyen en el crecimiento de los microorganismos 45

3.3. Microorganismos Evaludos 46

3.3.1. Staphylococcus aureus 46

3.3.2. Pseudomonas aeruginosa 46

3.3.3. Salmonella choleraesuis 47

3.3.4. Bacillus subtilis 47

4. LIMPIEZA Y DESINFECCIN DEL MATERIAL HOSPITALARIO 48

4.1. Normas generales 48

4.2. Clasificacin de los materiales segn el riesgo de infeccin 49

4.2.1. Material crtico o de alto riesgo 49

4.2.2. Material semicrtico o de riesgo intermedio 49

4.2.3. Material no crtico o de bajo riesgo 50

5. METODOS DE EVALUACIN DE LOS DESINFECTANTES 51

5.1. Mtodo del coeficiente fenolico 51

5.2. Tcnica de dilucin en tubo 52

5.3. Tcnica de la placa de agar

6. JUSTIFICACIN 53

7. OBJETIVOS 54

7.1 General 54

7.2. Especficos 54

8. HIPOTESIS DE ESTUDIO 55

9. MATERIALES Y METODOS 56

9.1. Materiales 56

9.2. Diseo de la Investigacin 58

9.2.1. Variables del estudio 58

9.2. Anlisis de la Informacin 59

9.3. Mtodos y Procedimientos 60

9.3.1. Preparacin del Inoculo 60

9.3.2. Preparacin de las concentraciones del desinfectante 61

9.4. Evaluacin del desinfectante 61

9.4.1. Lectura e interpretacin 62

8

10. Resultados 63

11. Anlisis de la Informacin 71

11.1. Anlisis estadstico de los resultados 72

12. Discusin de resultados 73

13. Conclusiones 79

14. Recomendaciones 80

15. Cronograma de trabajo 81

16. Presupuesto 81

17. Bibliografa 82

18. ANEXOS

9

INDICE DE TABLAS

Paginas

Tabla N 1. Definicin de trminos 12

Tabla N 2. Agentes qumicos desinfectantes y Antispticos 15

Tabla N 3. Mecanismos de Accin de Antispticos y Desinfectantes 19

Tabla N 4. Efectividad de Desinfectantes Qumicos 42

Tabla N 5. Niveles de desinfeccin o esterilizacin 50

Tabla N 6. Materiales de laboratorio 56

Tabla N 7. Equipos de Laboratorio 56

Tabla N 8. Reactivos y medios de cultivos 57

Tabla N 9. Patrn de Mc Farland 60

Tabla N 10. Preparacin de las concentraciones del desinfectante 61

Tabla N 11. Porcentaje de Inhibicin para Staphylococcus aureus 63

Tabla N 12. Porcentaje de Inhibicin para Pseudomonas aeruginosa 65

Tabla N 13. Porcentaje de Inhibicin para Salmonella choleraesuis 66

Tabla N 14. Porcentaje de Inhibicin para Bacillus subtillis 67

Tabla N 15. Comportamiento de las cepas con la concentracin de 0.02% 68

Tabla N 16. Comportamiento de las cepas con la concentracin de 0.04% 68

Tabla N 17. Comportamiento de las cepas con la concentracin de 0.08% 69

Tabla N 18. Comportamiento de las cepas con la concentracin de 1% 69

Tabla N 19. Comportamiento de las cepas con la concentracin de 2%

INDICE DE FIGURAS

Figura 1. Comportamiento del desinfectante ante Staphylococcus aureus 64

Figura 2. Comportamiento del desinfectante ante Pseudomonas aeruginosa 65

Figura 3. Comportamiento del desinfectante ante Salmonella choleraesuis 66

Figura 4. Comportamiento del desinfectante ante Bacillus subtillis 67

10

RESUMEN En el presente estudio se evalu el desinfectante de alto nivel de STERIS a base de perxido

de hidrogeno, empleado en la desinfeccin de equipos e instrumentos hospitalarios. El mtodo

utilizado para evaluar la eficacia del desinfectante, fue la tcnica de placa en agar mediante la

siembra en estra, por medio de este procedimiento se logr determinar el porcentaje de

inhibicin del desinfectante de alto nivel de STERIS a base de perxido de hidrogeno, frente 4

microorganismos con propiedades y caractersticas diferentes: Pseudomonas aeruginosa

(ATCC 9027), Staphylococcus aureus (Beta-Hemolitico CMDM 227), Salmonella choleraesuis

(Kuznedorf CMDM 074) y Bacillus subtilis (ATCC 6633). Se determino la eficacia de cinco

concentraciones del desinfectante (0.02%, 0.04%, 0.08%, 1% y 2%) y se valoraron en tres

tiempos diferentes 5, 10 y 15 minutos, para cepas vegetativas y 3, 6 y 9 horas para la cepa

esporulada. Segn el ensayo experimental, la reduccin de la poblacin microbiana en

promedio fue del 100% para las concentraciones de 0.08%, 1% y 2%. De acuerdo a los

resultados obtenidos en este estudio se demostr que el desinfectante de alto nivel de STERIS

a base de perxido de hidrogeno es efectivo en un 100% cuando se emplea la concentracin

recomendada por la casa comercial (2%) en el menor tiempo de exposicin al desinfectante.

La mnima concentracin de efectividad del desinfectante ensayado fue de 0.08%, sin

embargo, si emplean concentraciones menores no se garantiza la destruccin total de los

microorganismos.

11

1. INTRODUCIN

La limpieza y desinfeccin son las herramientas para controlar los factores relacionados con el

medio ambiente hospitalario. Los objetos, equipos, instrumentos mdicos y quirrgicos

utilizados para el cuidado del paciente pueden comportarse como vehculos de transmisin de

agentes infecciosos a huspedes susceptibles. Estos objetos primero deben limpiarse

cuidadosamente y posteriormente desinfectarse o esterilizarse para prevenir la contaminacin

cruzada y una posible transmisin de microorganismos. Una adecuada poltica de desinfeccin

y esterilizacin, junto con el lavado de manos y las precauciones de barrera, son las medidas

ms eficaces para prevenir la infeccin hospitalaria.

Un aspecto importante del control de las infecciones son los principios que rigen la limpieza,

desinfeccin y esterilizacin. Evitar la transmisin de microorganismos potencialmente

patgenos, ya sea entre enfermos, del personal sanitario a aqullos o a la inversa, debe

considerarse como una prioridad en todos los centros sanitarios. Es necesario diferenciar

claramente, segn el uso a que est destinado el mismo, el material que necesita una

esterilizacin del que necesita una desinfeccin o simplemente una limpieza adecuada. La

limpieza es obligada en cualquier caso, pudiendo despus optar por una esterilizacin o por

una desinfeccin de mayor o menor nivel.

Es cierto que en el hospital la creacin de fuentes nuevas de infeccin es permanente y que la

propagacin de la contaminacin es igualmente continua, en consecuencia, la aplicacin de las

medidas higinicas debe ser tambin metdica, programada y continua (diaria); por tal motivo

la limpieza y la desinfeccin, constituyen, junto con la esterilizacin, los elementos primarios y

ms eficaces para romper la cadena epidemiolgica de la infeccin. Teniendo en cuenta que

La infeccin hospitalaria constituye un tema de extraordinaria actualidad por su frecuencia,

gravedad y repercusin econmica.

El objetivo de este estudio es evaluar la eficacia del desinfectante de alto nivel de STERIS a

base de perxido de hidrogeno. El cual es empleado en la desinfeccin de equipos,

dispositivos e instrumentos crticos y semicrticos hospitalarios, teniendo como referencia 6

microorganismos contaminantes.

En el presente trabajo se evalu el desinfectante de alto nivel de STERIS a base de perxido

de hidrogeno, empleado en la desinfeccin de equipos e instrumentos hospitalarios.

El mtodo de evolucin de la eficacia del desinfectante fue la tcnica de placa en agar

mediante la siembra en estra, en el cual se logr, el porcentaje de inhibicin del desinfectante

de alto nivel de STERIS a base de perxido de hidrogeno, frente 4 microorganismos con

propiedades y caractersticas diferentes: Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027),

Staphylococcus aureus (Beta-Hemolitico CMDM 227), Salmonella choleraesuis (Kuznedorf

12

CMDM 074) y Bacillus subtilis (ATCC 6633). Se determino la eficacia de cinco

concentraciones del desinfectante (0.02%, 0.04%, 0.08%, 1% y 2%) y se valoraron en tres

tiempos diferentes 5, 10 y 15 minutos. Segn el ensayo experimental el desinfectante, es

efectivo contra los microorganismos estudiados a la concentracin recomendada por la casa

comercial y a un menor tiempo.

13

2. MARCO TEORICO

2.1. DESINFECCION

La desinfeccin se puede definir como el acto de eliminar todos los microorganismos sobre

objetos inanimados, pero no necesariamente toda forma de vida microbiana, por ejemplo, las

esporas bacterianas y los hongos. La desinfeccin no tiene el margen de seguridad que

proporciona la esterilizacin, adems de que la desinfeccin es afectada por muchos factores,

cada uno de los cuales tiene un efecto importante en el resultado final. (Navarrete et al, 1998).

La razn principal de la aplicacin de una efectiva etapa de desinfeccin es reducir los

contaminantes microbianos a un nivel aceptable en el equipo, utensilios y del ambiente de

produccin del alimento. Esta debe realizarse sobre superficies limpias. (GTC 85, 2003).

La desinfeccin puede ser considerada como el complemento y perfeccionamiento de las

operaciones de limpieza a las que vuelve incluso ms eficaces, ya que reduce los

inconvenientes debidos a la presencia de microorganismos. (Vlez y Cuadrado, 2005).

Otro aspecto importante es la eleccin del desinfectante, el cual debe ser eficaz en ese caso

determinado, en aquel lugar, en aquellos materiales, tener un buen espectro de accin y

carecer de toxicidad. Entre los factores que condicionan la eficacia de un desinfectante esta:

Propios del desinfectante: la concentracin a la que se utiliza, la estabilidad de las soluciones

desinfectantes y el pH de actividad optimas del mismo.

Propias de la resistencia microbiana: el tipo y ciclo vital de los microorganismos, la densidad de

la poblacin y el tiempo de contacto.

Propios del material a tratar: la naturaleza del material en especial el contenido de materia

orgnica, la constitucin del material, la compatibilidad con el desinfectante, el tipo de

tratamiento al cual est sometido al mismo tiempo que se usa el desinfectante, la cantidad de

suciedad adherida a la superficie a tratar y la calidad del agua empleada. (Vlez y Cuadrado,

2005).

14

2.2. DEFINICIONES

En la esfera de la desinfeccin y la esterilizacin se utilizan muchos trminos diferentes. En la

tabla N se encuentran los trminos ms comunes:

Tabla 1. Definicin de trminos relacionados con los procedimientos de limpieza, desinfeccin y esterilizacin.

TERMINO DEFINICION

Antimicrobiano Agente que mata los microorganismos o suprime su crecimiento

y proliferacin. (OMS, 2005)

Antisptico Sustancia que inhibe el crecimiento y el desarrollo de microorganismos

pero no necesariamente los mata. Los antispticos suelen aplicarse a

las superficies corporales. (OMS, 2005)

Antibitico Sustancia qumica natural procedente del metabolismo de los microorganismos y sus derivados sintticos que destruyen (bicida) o

inhiben el crecimiento de bacterias u otros microorganismos

Bactericida Sustancia qumica que, bajo condiciones definidas, destruye formas vegetativas bacterianas, pero no necesariamente las esporuladas.

(Forsythe y Hayes, 2002).

Bacteriosttico Sustancia qumica que previene el crecimiento de bacterias, pero no necesariamente las destruye. (Forsythe y Hayes, 2002).

Biocida Sustancia qumica que posee actividad desinfectante o antisptica, destruye los microorganismos patgenos y no patgenos. (GTC 85,

2003).

15

Desinfeccin Tratamiento fsico-qumico o biolgico aplicado a las superficies limpias, que tiene como propsito destruir las clulas vegetativas de

los microorganismos que pueden ocasionar un riesgo de salud publica

y reducir sustancialmente el nmero de otros microorganismos

indeseables. (GTC 85, 2003).

Desinfectante Definido originalmente en trminos mdicos, como toda sustancia qumica que destruye los microorganismos causantes de

enfermedades, ahora se define como las sustancias que destruyen

una gran variedad de microorganismos, pero no necesariamente las

esporas bacterianas. (Forsythe y Hayes, 2002).

Descontaminacin Cualquier proceso utilizado para eliminar o matar microorganismos.

Tambin se utiliza para referirse a la eliminacin o neutralizacin de

sustancias qumicas peligrosas y materiales radioactivos. (OMS,

2005).

Detergentes Sustancias capaces de ayudar a la limpieza, cuando se agregan al agua. Incluyen jabones, agentes tensioacivos orgnicos. (GTC 85,

2003).

Esporicida Sustancia o mezcla de sustancias qumicas utilizadas para matar

microorganismos y esporas. (OMS, 2005).

Esterilizacin Proceso que mata o elimina todas las clases de microorganismos y

esporas. (OMS, 2005).

Fungicida Agente qumico que, bajo condiciones definidas, destruye los mohos y sus esporas. (Forsythe y Hayes, 2002).

Germicida Es un producto de accin letal sobre los microorganismos,

especialmente los patgenos (grmenes). (Res.GMC N26/96).

16

Inactivacin Eliminacin de la actividad biolgica de los microorganismos por destruccin, inhibicin de la reproduccin o inhibicin de la actividad

enzimtica. (GTC 85, 2003).

Limpieza Cubre todos los procesos implicados en la eliminacin de todo tipo de suciedad de las superficies, pero no los que corresponden a la

esterilizacin. (Forsythe y Hayes, 2002).

Sanitizacion Aplicacin de cualquier mtodo o sustancia qumica sobre una superficie limpia, para la destruccin de microorganismos patgenos u

otros organismos. Tal tratamiento no afectara el equipo, ni el producto

ni la salud de las personas. (GTC 85, 2003).

Sustancia o principio activo

Componente que, en la formulacin, es responsable de por lo menos

una determinada accin del producto. (Res.GMC N26/96).

Virucida Sustancia qumica que destruye o inactiva partculas vricas. (GTC 85, 2003).

17

2.3. DESINFECTANTES

2.3.1. Generalidades Los desinfectantes y antispticos son sustancias qumicas que matan o inhiben el crecimiento

microbiano. Entre los desinfectantes esta el cloro, hipoclorito, clormidas, fenol, agentes

alquilantes, detergentes, etc. Se aplican sobre material inerte como pisos, mesas y equipos,

mientras que los antispticos como el alcohol yodado, methiolate se emplean sobre tejidos

vivos. (Escobar, 2002). El objetivo de los agentes es disminuir el nmero de microorganismos,

de forma que los que sobrevivan (algunas esporas y posiblemente unas pocas formas

vegetativas muy resistentes) no influyan en la calidad microbiolgica de las muestras y

productos que contactan con las superficies desinfectantes (Arias, 2006).

Pueden utilizarse como desinfectantes o antispticos muchos tipos de sustancias qumicas.

Dado que el nmero y la variedad de productos comerciales es cada vez mayor, deben elegirse

cuidadosamente las formulaciones que sean ms indicadas para las necesidades concretas. La

actividad germicida de muchas sustancias qumicas es ms rpida y eficaz a temperaturas ms

altas, pero las temperaturas elevadas tambin pueden acelerar su evaporacin y degradarlas.

Es preciso tener particular cuidado en el uso y el almacenamiento de esas sustancias en las

regiones tropicales, donde su tiempo de conservacin puede verse reducido a causa de las

altas temperaturas del ambiente. Muchos germicidas pueden ser perjudiciales para el ser

humano o el medio ambiente. Se deben seleccionar, almacenar, manipular, utilizar y eliminar

con precaucin, siguiendo las instrucciones del fabricante. En relacin con la seguridad

personal, se recomienda utilizar guantes, delantales y proteccin ocular cuando se preparen

diluciones de germicidas qumicos. (OMS, 2005).

En la tabla N2. Se observan la clasificacin de lo diferentes agentes esterilizantes, segn al

grupo al que pertenecen, desinfectantes y antispticos:

Tabla N 2. Agentes qumicos desinfectantes y Antispticos

Antispticos Alcoholes Iodo Agentes catinicos, aninicos y anfteros

Colorantes

Desinfectantes y/o Esterilizantes Cloro y Compuestos clorados Aldehdos Compuestos Fenlicos Acidos y Alcalis

Fuente: (http://www.microbiologia.com.ar).

18

2.3.2. Caractersticas o Propiedades de un buen desinfectante

Los desinfectantes que se deben utilizar en las superficies, deben cumplir, en condiciones

ideales lo siguiente:

Su eficacia: destruir rpidamente los microorganismos, siendo igual de eficaces con las bacterias Gram positivas que con las Gram negativas; deben destruir la mayora de las

esporas fngicas, siendo tambin conveniente la destruccin de las esporas bacterianas.

Se suficientemente estable a los factores ambientales (materia orgnica, jabones y detergentes, pH, temperatura, aguas duras y humedad relativa).

Tiempo de contacto. Todos los desinfectantes requieren un tiempo mnimo de contacto para mostrar su eficacia. Ninguno acta inmediatamente.

Propiedades no toxicas y no irritantes. No debe ser corrosivo. Tener capacidad de penetracin. Tener accin detergente adems de desinfectar. Debe ser soluble en agua y no afectarle la dureza del agua. Debe ser incoloro o no teido. Debe ser inodoro o no desprender olores desagradables. Debe ser fcilmente disponible, econmico y fcil de usar. Estables durante mucho tiempo en forma concentrada y durante u tiempo mas breve en

forma diluida. (Quiles y Hevia, 2007); (Marriot, 2003).

2.3.3. Factores que influye la eficacia de los agentes qumicos desinfectantes. La eficacia de todos los agentes de desinfeccin est influenciada por la concentracin, el

tiempo de contacto, la temperatura, la materia orgnica, pH, la dureza del agua, combinacin

con detergentes y tipos de microorganismos (GTC 58, 2003).

Concentracin: La concentracin para obtener un determinado efecto, si como el rango de concentraciones en que se puede obtener un resultado esperado, depende

de la naturaleza qumica del desinfectante, de los tipos de microorganismos que se van

a eliminar y de las condiciones de aplicacin.

pH: Todos los desinfectantes se ven afectados por el pH de las soluciones de uso. (GTC 85, 2003). El pH afecta tanto a los microorganismos como a los agentes qumicos. El aumento de pH por encima de 7 incrementa la carga negativa de los

microorganismos afectando la concentracin del agente sobre la clula. El pH

determina el grado de disociacin y la efectividad del agente qumico, pues a menor

19

disociacin mayor permeabilidad y mayor efectividad.

(http://www.microbiologia.com.ar/).

Temperatura: Por lo general las temperaturas mas elevadas mejoran el poder desinfectante, por ejemplo del oxido de etileno. (Jimnez, 2000). Algunos

desinfectantes son afectados a bajas temperaturas. El cloro y los desinfectantes a base

de cido peractico o perxido de hidrogeno, mantiene eficacia en temperaturas muy

bajas. Las temperaturas demasiado altas debe ser evitadas, debido a las

caractersticas corrosivas ya la prdida posible de actividad de algunos desinfectantes.

(GTC 85, 2003)

Tiempo de contacto: El efecto de los agentes qumicos no es inmediato, los microorganismos no son susceptibles a un agente en la misma forma, por lo que no

todos los microorganismos mueren al mismo tiempo. (Jimenez, 2000). El tiempo de

contacto esta directamente relacionado con la concentracin para obtener un efecto

microbiano dado. Existe un tiempo de contacto mnimo para cada desinfectante y para

cada concentracin. Tiempos prolongados de contacto tiene efectos adversos en los

equipos de proceso. (GTC 85, 2003).

Dureza del Agua: La mayora de los desinfectantes son eficaces en una amplia gama de la dureza del agua. (GTC 85, 2003). Las aguas duras (Calcio y magnesio), afectan

negativamente al desinfectante. (Arias, 2006).

Condiciones de Crecimiento y Tipo de Microorganismos: los desinfectantes deben tener el ms amplio espectro de actividad en contra de los virus, bacterias, hongos y

esporas. Y debern tener accin bicida en contra de los microorganismos en una

variedad de condiciones y estadios de crecimientos. La cantidad de microorganismos,

influye en la accin del desinfectante, por lo que es importante recudir esta carga con el

lavado y con el uso de detergentes, antes de la desinfeccin. (Galn, 2003).

Sustancias interferentes: la eficacia de los desinfectantes se reduce con la presencia de sustancias interferentes, especialmente materia orgnica, por dos principales

causas:

a. La presencia de materia orgnica reduce y en algunos casos inactiva la accin de ciertos agentes desinfectantes. Los ms afectados son los clorados y los yodforos.

b. Algunos desinfectantes pueden ser tambin afectados por las materias orgnicas, como sales presentes en agua dura.

20

Adems, de una forma no reactiva, la metera orgnica e inorgnica forma una barrera

protectora, de tal manera, que los microorganismos son protegidos de sus efectos. (Galn,

2003).

2.3.4. Mecanismos de accin de los desinfectantes sobre los microorganismos. La accin de los desinfectantes se caracteriza por su intensidad y ausencia de especificidad.

En su actuacin se distinguen varias etapas:

a) Fijacin: Ocurre en la pared bacteriana y vara en funcin de la concentracin y movimiento.

Es un fenmeno de naturaleza qumica elctrica.

b) Penetracin: Los desinfectantes atraviesan la pared bacteriana y la membrana celular.

c) Accin: se realiza a dos niveles: uno sobre la membrana citoplasmtica, cuya alteracin

provoca una desorganizacin del metabolismo, la fuga de sustancias, la degradacin celular y,

finalmente, la muerte celular. A otro nivel oxidan sustancias y desnaturalizacin los protenas

con dao en el metabolismo celular (GTC 58, 2003).

La accin que ejercen los agentes desinfectantes para destruir los microorganismos, tales

como la oxidacin, la coagulacin de protenas y el rompimiento de la pared y membrana

celular, permiten que se lleven a cabo los mecanismos por los cuales se logra eliminar las

bacterias. Estos mecanismos son:

Desintegracin de organizacin de la clula. Interferencia con la energa (ncleo). Sntesis de protenas (interferencia con el crecimiento).

La accin oxidante del cloro al combinarse con el agua, se lleva a cabo directamente sobre el

protoplasma de la bacteria, causando desintegracin de su estructura.

As mismo, se conoce que la mayora de desinfectantes qumicos coagulan las protenas, como

otro mecanismo de accin en la destruccin de las bacterias. El rompimiento de la pared

celular se explica por el descenso de la tensin superficial causando en algunos casos que la

bacteria se disuelva. (Soto, 1995). En la Tabla N 3, se resumen los mecanismos de accin y

los blancos de los principales agentes qumicos utilizados en desinfeccin.

21

Tabla N3 Mecanismos de Accin Antibacteriana de Antispticos y Desinfectantes mas

Comunes.

Sitio Blanco Antisptico o Desinfectante

Mecanismo de Accin

Envoltura celular

(pared

celular, membrana

externa)

Glutaraldehdo

EDTA, otros permeabilizantes

Unin cruzada protenas

Bacterias Gram negativas: remocin de

Mg++, liberacin de algunos

lipopolisacaridos

Membrana interna

citoplasmtica

CAC (compuestos de amonio

cuaternario)

Clorhexidina

Diaminas

PHMB (mezcla heterodispersa

de bioguanidas de

polihexametileno), alexidina.

Fenoles

Dao generalizado de la membrana que

comprometen fosfolpidos de las dos

membranas.

Las bajas concentraciones afectan la

integridad de la membrana, las altas

concentraciones causan coagulacin del

citoplasma.

Induccin a la prdida de aminocidos.

Fase de separacin y formacin de

dominios de lpidos de membrana.

Prdida, desacople.

Desnaturalizacin de protenas por

coagulacin

Unin cruzada a

macromolculas

Formaldehdo

Glutaraldehdo

Unin cruzada de protenas, ARN y

ADN.

Unin cruzada de protenas de la

envoltura celular y en otros sitios

celulares.

Acridinas Intercalacin de una molcula de

22

Intercalacin con el

ADN

acridina entre dos capas de pares de

bases en el ADN.

Interaccin con

grupos tiol

Compuestos con plata

Enzimas que se unen a membrana

interaccin con grupos tiol.

Efectos en el ADN

Halgenos

Perxido de hidrgeno, iones

de plata

Inhibicin de la sntesis del ADN

Ruptura de la hebra de ADN

Agentes oxidantes

Halgenos

Peroxgenos

Oxidacin de los grupos tioles a

disulfitos, sulfxidos o disulfxidos.

Perxido de hidrgeno: Actividad debida

a la formacin de radicales libres OH-,

que oxida a los grupos tioles en enzimas

y protenas; cido paractico: Inhibicin

de los grupos tioles en protenas y

enzimas.

Membrana

citoplasmtica

Alcoholes Desagregacin de la membrana

citoplasmtica.

Desnaturalizacin de enzimas

intracelulares por coagulacin.

Fefectos en las

proteinas y acidos

nucleicos

Cloro y derivados Inhibe las reacciones enzimticas,

desnaturaliza protenas e inactiva cidos

nuclicos.

Fuente: (Cabrera et al, 2002). (Laveau y Buix, 2002).

23

2.3.5. RESISTENCIA DE LOS MICROORGANISMOS A LOS DESINFECTANTES. La resistencia que ejercen las bacterias a los antibiticos, antispticos y desinfectantes es un

problema de salud pblica, que se crea superado.

La resistencia bacteriana a los biocdas fue descrita en las dcadas de 1950 y 1960 y ha ido en

aumento. Ciertos biocda como alcoholes, formaldehdos, biguanidas, yodoforos, aldehdos y

agentes catinicos como los compuestos de amonio cuaternario (CUAs), la clorhexidina y el

triclosn se han comprometido como posibles causantes de la seleccin y persistencia de

cepas bacterianas con bajo nivel de resistencia a los antibiticos (Cabrera et,al, 2007).

Mecanismos de resistencia a los antispticos y desinfectantes En la actualidad se ha obtenido un avance considerable en la comprensin de la respuesta de

las bacterias a los bactericidas. La resistencia puede ser una propiedad natural de un

organismo (intrnseca) o conseguida por mutacin o adquisicin de plsmidos (autorreplicacin,

ADN extracromosmico) o transposones (cromosomal o integrado en plsmidos, cassettes de

ADN transmisibles). Los genes de resistencia naturales en plsmidos, se originan como

mutaciones puntuales en los genes blanco (sitios de insercin de los genes de resistencia) de

bacterias susceptibles y tambin de genes que les proveen proteccin contra otras bacterias.

La resistencia intrnseca se ha demostrado para bacterias Gram negativas, esporas

bacterianas, micobacterias y bajo ciertas condiciones en especies del gnero Staphylococcus.

(Cabrera et,al, 2007; Cash, 2002).

Resistencia intrnseca de las bacterias Gram negativas. Las bacterias Gram negativas por lo general son ms resistentes a los antispticos y

desinfectantes que las Gram positivas. La membrana externa de las bacterias Gram negativas

acta como una barrera que limita la entrada de varios tipos de agentes antibacterianos sin

relacin qumica. Las molculas hidroflicas de bajo peso molecular pasan fcilmente a travs

de las porinas, en cambio las molculas hidrofbicas se difunden a travs de la bicapa de la

membrana. Adems de las vas antes descritas se ha propuesto una tercera va para agentes

catinicos como los Compuestos de amonio cuaternario, biguanidas y diamidinas, los cuales

daan la membrana y facilitan su autocaptacin. Un ejemplo claro de resistencia mediada por

la membrana externa es el de P. aeruginosa que presenta diferencias en la composicin del

lipopolisacrido (LPS) y el contenido de cationes como el magnesio, que produce enlaces

estables entre molculas de LPS y como complemento a este mecanismo, esta bacteria

presenta porinas pequeas que impiden el paso por difusin de ciertas sustancias. Algunas

cepas que son muy resistentes a clorhexidina, CAC, EDTA y diamidinas se han aislado de

24

muestras clnicas. La presencia de un LPS menos cido en la membrana externa puede ser un

factor que contribuye a la resistencia intrnseca. (Cabrera et,al, 2007).

La presencia de lpidos en la membrana externa de los bacilos Gram negativos se relaciona

con el hecho de que estas bacterias son mucho ms resistentes que los Gram positivos a los

agentes antibacterianos, incluyendo los desinfectantes. En los estafilococos, por ejemplo, los

lpidos estn presentes en pequeas cantidades; si se incrementa (por ejemplo hacindoles

crecer en presencia de glicerol), los microorganismos se vuelven ms resistentes a ciertos

fenoles y penicilinas. En las micobacterias, el contenido en lpidos se asocia con su gran

resistencia a los desinfectantes. Se han llevado a cabo estudios con mutantes rugosos,

defectivos en la regin interna del ncleo, que resulta sensibles a una amplia variedad de

desinfectantes y detergentes, relacionndose lo uno con lo otro. Se ha visto tambin, que la

reorganizacin de los fosfolpidos de la membrana externa puede permitir la penetracin de

molculas hidrofbicas por disolucin y difusin en los lpidos. (Camargo, Torres, 2003).

La superficie de los Gram negativos lisos es hidroflica; en el caso de los mutantes rugosos, sin

embargo, tienden a ser mucho ms hidrofbica En las cepas salvajes, las molculas del LPS

intactos se oponen al acceso rpido de los biocidas hidrofbicos o de los antibiticos, al interior

de la clula probablemente mediante un sistema de blindaje protector conferido por los

fosfolpidos, mucho de los cuales no estn presentes en la estructura de la membrana clsica.

En el caso de los bactericidas cationicos, como es el caso de las biguanidas y los derivados

de amonio cuaternario, ambos interactan con fosfolpidos y LPS, produciendo dao en la

membrana celular. (Camargo, Torres, 2003).

Mecanismos de Resistencia Bacteriana Adquirida Como se ha visto en los antibiticos y en los agentes quimioteraputicos, la resistencia

adquirida a los antispticos y desinfectantes surge por mutacin o por la adquisicin de

material gentico en forma de plsmidos o transposones; estas configuraciones permiten

grandes arreglos de genes de resistencia para la mayora de los antibiticos y desinfectantes al

ser transferidos juntos en un solo evento de conjugacin (Cash, 2002); (Cabrera et,al, 2007).

25

2.3.6. CLASIFICACION DE LOS DESINFECTANTES SEGN SU MECANISMO DE ACCION. 2.3.6.1. Agentes que daan la membrana celular Los solventes orgnicos (fenoles, alcoholes) y los desinfectantes tensioactivos (detergentes)

daan la integridad estructural de la membrana, es decir desorganizan la disposicin ordenada

de lpidos y protenas, de modo que interfieren con su funcin, ejerciendo un efecto neto de:

Interferencia con la funcin normal de permeabilidad selectiva. Interferencia con procesos de transporte y metabolismo energtico. Salida de pequeas molculas de la clula. (Jimnez, 2000). 2.3.6.2. Agentes que Desnaturalizan protenas Las protenas en su estado natural poseen una forma caracterstica de la que dependen su

funcin. Los agentes cidos o bases cambian el pH del medio, modificando las cargas de los

grupos R (Restos de los aminocidos) de las protenas y las interacciones intramoleculares;

desnaturalizndolas y perdiendo su funcionalidad. (Jimnez, 2000).

2.3.6.3. Agentes que modifican los grupos funcionales cidos Nucleicos y Protenas Se caracterizan por los siguientes efectos:

Alteran grupos funcionales que forman parte de los centros activos de enzimas y otras protenas.

Alteran grupos funcionales de cidos nucleicos, componentes de la pared y de la membrana.

Al modificarse los grupos funcionales, ya sea por cambio en estado de oxidacin (agentes

oxidantes), por bloqueo (metales pesados) o por incorporacin de pequeos restos carbonados

(agentes alquilantes) se afecta:

La interaccin intramolecular de las protenas alterando su forma. La interaccin intermolecular, por ejemplo de las enzimas y proteinas con el sustrato, o de

los cidos nucleicos durante su lectura ya sea en la duplicacin, trascripcin o traduccin.

(Jimnez, 2000).

26

2.3.7. CALSIFICACION DE LOS DESINFECTANTES DEACUERDO A SU ACTIVIDAD Los desinfectantes qumicos, de acuerdo a su actividad, se dividen en cuatro niveles:

Desinfectantes de Nivel ms Alto (IV): Proceso mediante el cual se destruyen o eliminan todos los microorganismos, con excepcin de alto nmero de esporas

bacterianas (NTC 4850,2000). En condiciones estrictamente controladas, este

procedimiento eliminas virus, hongos, formas vegetativas bacterinas, includas

micobacterias, y solo admiten la presencia de algunas esporas bacterias

convencionalmente consideradas no patgenas. (Navarrete, 1998). En este grupo se

puede incluir el oxido de etileno y el glutaraldehido, (Galan, 2003).

Desinfectante de Nivel Alto (III): con un amplio espectro incluso con cierta actividad esporicida. En este grupo se podran incluir los siguientes productos:

Glutaraldehido: agente de actividad alta en contra de bacterias, hongos, virus y

esporas. Pudiendo ser fungicida tras una aplicacin de 15-30 minutos al 40%.

Hipoclorito sdico.

Perxido de Hidrogeno, es mas efectivo como esporicida que como bactericida. (Galan,

2003).

Desinfectante de nivel intermedio (II): Proceso mediante el cual se inactivan microorganismos como Mycobacterium tuberculosis, las bacterias vegetativas, la

mayora de los virus y hongos, pero no destruyen las esporas bacterianas. (NTC 4850, 2000).

Exige adems del nivel I, la eliminacin de las micobacterias, pero no asegura la

destruccin de las esporas bacterianas. (Mignard, 2006). En este grupo habra que

incluir el etanol y el isopropanol. (Galn, 2003).

Desinfectante de nivel bajo (l): Este procedimiento puede inhibir o destruir a la mayor parte de las bacterias en estado vegetativo, algunos hongos y virus; pero no puede

dependerse de ella para eliminar microorganismos resistentes, tales como los bacilos

de la tuberculosis o las esporas bacterianas. (NTC 4850, 2000). Este procedimiento es

poco confiable si se desconoce la biocarga o el riesgo es de consideracin. (Navarrete,

1998). Los agentes qumicos como los compuestos de amonio cuaternario (cloruro de

benzalconio) son considerados como desinfectantes de baja actividad. (Galn, 2003).

27

2.3.8. CLASIFICACIN DE LOS DESINFECTANTES SEGN EL METODO DE DESINFECCION

2.3.8.1. AGENTES FISICOS DESINFECTANTES Los microorganismos tienen una temperatura mnima, ptima y mxima de crecimiento. Las

temperaturas por debajo de la mnima usualmente tiene una accin de stasis o sea detienen

el crecimiento microbiano, pero no provocan la muerte celular. Las temperaturas por encima de

la mxima usualmente tienen una accin cida o sea provocan la muerte de los

microorganismos por desnaturalizacin de enzimas y otras protenas. El uso de altas y bajas

temperaturas esta muy difundida y resulta muy efectivo para controlar el crecimiento

microbiano. La sensibilidad de los microorganismos a las temperaturas varia con las especie y

con el estado en que se encuentren. Las esporas bacterianas son estructuras vivas mas

termorresistentes. Resisten tratamientos trmicos ms drsticos que las formas vegetativas.

Por ejemplo esporas de microorganismos mesfilos en suspensin son capaces de resistir 30

minutos a 80C, lo cual es letal para las formas vegetativas. Existen tambin ascosporas de

hongos filamentosos que son mas termorresistentes que la correspondientes forma micelial.

(Jimnez, 2000).

El Calor La eficacia de los procesos de desinfeccin por calor depende de la temperatura alcanzada, del

tiempo y de la humedad. El grado de destruccin microbiana requerido se alcanza siempre y

cuando el mtodo de aplicacin y el diseo del equipo permitan la penetracin adecuada de

calor en todas partes del equipo. (GTC 85, 2003).

Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la accin del calor. El calor

provoca desnaturalizacin de protenas, fusin y desorganizacin de las membranas y/o

procesos oxidativas irreversibles en los microorganismos. La efectividad del calor como mtodo

de esterilizacin depende de: Temperatura y Tiempo de exposicin.

(http://www.microbiologia.com.ar/).

El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos efectos se deben

principalmente a dos razones:

El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras biolgicas (DNA, RNA, protenas, etc) son producidas por reacciones que eliminan agua. Por lo tanto,

reacciones inversas podran daar a la clula a causa de la produccin de productos

txicos. Adems, las estructuras secundarias y terciarias de las protenas se estabilizan

28

mediante uniones puente de hidrgeno intramoleculares que pueden ser reemplazadas

y rotos por el agua a altas temperaturas.

El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho ms elevado que el aire. Por lo que, los materiales hmedos conducen el calor mucho ms

rpidamente que los materiales secos debido a la energa liberada durante la

condensacin. (GTC 85, 2003).

El autoclave es el aparato ms comnmente utilizado en los laboratorios para esterilizar cultivos y soluciones que no formen emulsiones con el agua y que no se

desnaturalicen a temperaturas mayores a 100 C. Una temperatura de 121 C (una

atmsfera de sobrepresin) con un tiempo de exposicin mayor a 15 minutos sirve para

destruir organismos formadores de esporas. (http://www.microbiologia.com.ar/).

Calor seco

El calor seco produce desecacin de la clula, efectos txicos por niveles elevados de

electrolitos, procesos oxidativos y fusin de membranas. Estos efectos se deben a la

transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que estn en contacto con

stos. El aire es mal conductor del calor, y el aire caliente penetra ms lentamente que el vapor

de agua en materiales porosos. La accin destructiva del calor sobre protenas y lpidos

requiere mayor temperatura cuando el material est seco o la actividad de agua del medio es

baja. Esto se debe a que las protenas se estabilizan mediante uniones puente de hidrgeno

intramoleculares que son ms difciles de romper por el calor seco.

(http://www.microbiologia.com.ar/).

Tratamiento con aire caliente

Para este tipo de tratamientos se emplean hornos que alcancen temperaturas mayores de

150C. Estos tratamientos pueden ser esterilizantes. Las condiciones de esterilizacin de

material con baja carga puede ser: a) 180C una hora b) 160c durante dos horas . Si se

empleara calor seco al 121C se debera realizar un tratamiento de 16 horas. (Jimnez,

2000). Este tipo de tratamientos se usa para esterilizar material de vidrio, instrumentos de

metal o aceites y polvos que soporten esas altas temperaturas

Otros Agentes Fsicos desinfectantes

Desinfeccin mediante radiacin

Su accin depende de: Tipo de radiacin, tiempo de exposicin y la dosis. Ionizantes:

Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los cidos nuclecos, estructuras

proteicas y lipdicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos.

29

Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolbiles

(termosensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. No se utilizan para medios de cultivo

o soluciones proteicas porque producen alteraciones de los componentes.

a) Ultravioletas: Afectan a las molculas de DNA de los microorganismos debido a que forman

dmeros de pirimidinas adyacentes que inducen errores en la duplicacin y por lo tanto la

prdida de la viabilidad de las clulas. Son escasamente penetrantes y se utilizan para

superficies. (http://www.microbiologia.com.ar/).

Filtracin

Los filtros retienen los microorganismos impidiendo el pasaje a travs de los mismos. Los filtros

de membrana retiene a los microorganismos en la superficie por poseer poros de tamao

pequeo (0.2 micras) a travs de los cuales los microorganismos no pueden pasar. Los filtros

de profundidad retienen a los microorganismos atrapndolos en su matriz. Un ejemplo de

filtracin de profundidad es el tapn de algodn que se utiliza para tapar los tubos de medio de

cultivo. (Jimnez, 2000).

2.3.9. AGENTES QUIMICOS DESINFECTANTES

Los agentes qumicos (AQ) son compuestos que matan o inhiben el crecimiento de los

microorganismos. Incluyen sustancias usadas como conservadores y antispticos as como

drogas usadas para el tratamiento de enfermedades infecciosas de plantas y animales.

(Jimnez, 2000). La eficacia de los desinfectantes qumicos se debilita por la presencia de

suciedad y cuanto mas limpia esta la superficie a desinfectar ms eficaz resultara el

desinfectante utilizado. (Forsythe y Hayes, 2002).

Tipos de Agentes Qumicos Desinfectantes

2.3.9.1 Productos reductores. Aldehdos 2.3.9.1.1. Formaldehdo

Conocidos comnmente como formol, formalina y aldehdo frmico. El formaldehido es un gas

incoloro, de olor irritante y lacrimgeno, soluble en agua y tiene un pH dbilmente cido.

Adems es un agente corrosivo y potencialmente carcingeno. (Leveau y Bouix, 2002).

Se utiliza como desinfectante de alto nivel en estado lquido y gaseoso. Principalmente se

utiliza en solucin acuosa (formaldehdo al 37%); en estas condiciones posee actividad

bactericida, fungicida, virucida, tuberculicida y esporicda. (Leveau y Bouix, 2002).

30

El formaldehdo reacciona con las protenas y los cidos nucleicos dando lugar a una

desnaturalizacin irreversible debido a la formacin de puentes intra e intermoleculares. El

formaldehdo es muy utilizado para la desinfeccin de superficies, de equipos y de los circuitos

de tuberas, en asociacin con otros aldehdos amonios cuaternarios. El uso principal es la

desinfeccin por va area. (Leveau y Bouix, 2002)

Ventajas

Bactericida-fungicida No corrosivo Buena enjuagabilidad Bajo costo. Activo en presencia de materia orgnica

Desventajas:

Olor desagradable lacrimgeno Posibles riesgos toxicos por inhalacin. Irritante y cancergeno en forma de gas (Leveau y Bouix, 2002)

2.3.9.1.2. Glutaraldehido Conocido comnmente como aldehdo glutrico. La estabilidad del glutaraldehido depende del

pH y la temperatura. La prdida de actividad se acelera a partir de pH 8,8 y una temperatura

superior a 50C. La zona de pH compatible con una estabilidad satisfactoria va de pH 3,5 a 6,5.

El gluataraldehido no es un agente qumico agresivo frente a los materiales utilizados (acero

inoxidable, aluminio, materias plsticas, caucho). (Leveau y Bouix, 2002)

El glutaraldehido es el agente antimicrobino mas utilizado en el sector hospitalario para la

desinfeccin del materila de endoscopia. (Leveau y Bouix, 2002)

Su actividad biocida se debe a la desnaturalizacin de las protenas y aniquilacin de los

cidos nucleicos (RNA y DNA). El glutaraldehido posee un espectro muy amplio que abarca

las bacterias, levaduras, mohos, y formas esporuladas. Se distingue sobre todo por su

actividad virucda frente a los virus encapsulados y virus desnudos. Esta propiedad es

aprovechada en el sector hospitalario (activiadad anti-hepatitis B) o agroalimentario (actividad

antifungico). (Leveau y Bouix, 2002)

Ventajas

31

Bactericida-fungicida-virucida-esporicda Accin rpida No corrosivo Costo moderado Efectivo en presencia de materia orgnica Efectivo en presencia de materia orgnica

Desventaja:

Olor caracterstico Sensible a las variaciones de pH.

(Leveau y Bouix, 2002)

2.3.9.2. Agentes Oxidantes 2.3.9.2.1. cido peractico (cido peroxiactico). Este cido fuertemente oxidante es activo en forma de cido peroxiactico. Las soluciones de este cido constituyen sistemas bactericidas, fungicidas, virucicas y esporicidas eficaces. (GTC

85, 2003).

Las soluciones de cido peractico son incoloras, de olor picante y lacrimgeno; es un oxidante

potente, muy reactivo y causa quemaduras. El pH del cido peractico es generalmente

cercano a 1, por lo tanto es muy cido; la estabilidad se mantiene respetando las reglas

estrictas (temperatura de almacenamiento baja y ausencia de metales pesados en los

compuestos base durante la fabricacin). (Leveau y Bouix, 2002)

Su accin bicida se debe a la desnaturalizacin de protenas, rompe los enlaces

intramoleculares de los enzimas y compuestos de la membrana por ruptura oxidativa y

provoca cambios de permeabilidad de la pared celular. (Leveau y Bouix, 2002).

Ventajas

Bactericida-fungicida-virucida-esporicida Activo a bajas temperaturas Accin rpida Buena enjuagabilidad Poco costoso.

Desventajas

Riesgos de corrosin Inestabilidad debido a la temperatura Vapores irritantes.

32

2.3.9.2.2. Ozono El ozono es una molcula compuesta por tres tomos de oxigeno que se presenta

naturalmente en la parte superior de la atmosfera que envuelve la tierra. Acta como oxidante y

desinfectante y puede utilizarse como medio de control de amenazas qumicas y microbianas.

El ozono esta siendo considerado como sustituto del cloro. Como el dixido de cloro, el ozono

es inestable, debiendo generase a medida que se va consumiendo en el punto de aplicacin.

Como oxida rpidamente, ejerce menos impacto ambiental. (Marriot, 2003)

2.3.9.2.3 Perxido de hidrgeno.

El perxido de hidrgeno pertenece al grupo de los desinfectantes oxidantes, conocido

comnmente como agua oxigenada, dixido de hidrgeno o hidroperxido, su frmula qumica

es (H2O2). Este producto se puede considerar como el desinfectante ms natural. Se le

encuentra espontneamente en productos como la leche y la miel e igualmente en los tejidos

vivos donde es el resultado del metabolismo celular. (Leveau y Bouix, 2002).

El perxido de hidrogeno es un biocida ampliamente empleado para de desinfeccin,

esterilizacin y antisepsia. Comercialmente se encuentra en concentraciones comprendidas

entre el 3% y 90%. Considerado biodegradable, ya que se degrada rpidamente en dos

productos inocuos agua y oxigeno. Posee un amplio rango de actividad y eficacia. (Galn,

2003).

Esta eficacia disminuye cuando lo que se necesita es una eliminacin de esporas. En estos

casos, la actividad esporicida se verifica cuando la concentracin mnima de uso se encuentra

comprendida entre el 10% y 30%, siendo generalmente necesario un incremento en el tiempo

de contacto, superior siempre a 5 minutos. (Galn, 2003).

En cuanto a la toxicidad del oxigeno para los microorganismos, es sabido que durante la

respiracin se forman cantidades pequeas de radicales libres superxido (O2). Estos

radicales libres son txicos para los componentes celulares, de tal suerte que los

microorganismos que crecen en presencia de oxigeno, como aceptor final de electrones, deben

sintetizar un enzima la superxido dimutasa, para neutralizarlos. Gracias a esta enzima, los

radicales superxido se transforman en oxigeno molecular (O-2) y perxido de hidrogeno

(H2O2). (Cuesta y Castillo, 2004).

El perxido de hidrogeno es tambin toxico, pero se convierte inmediatamente en oxigeno

molecular y aguas mediante la enzimas catalasa. Tambin la peroxidasa destruye el peroxido

de hidrogeno. El in perxido (O-2) es otra forma txica del oxigeno, que se genera en

pequeas cantidades en la respiracin normal. El ultimo producto de la respiracin normal es

33

el radical hidroxilo libre (OH-) es muy reactivo. Se produce principalmente por las radiaciones

ionizantes, tambin en la reaccin entre radicales libres superxido y perxido. (Cuesta y

Castillo, 2004).

Mecanismos de accin El mecanismo de accin del perxido de hidrogeno todava no est definitivamente establecido.

Se han presentado no obstante varias hiptesis.

Una primera hiptesis, la formacin del hipoclorito seria el factor clave: en presencia del

enzima mieloperoxidasa, el cloruro contenido en las bacterias puede ser oxidado por el

perxido de hidrogeno en hipoclorito:

H2O2 + Cl- OCl- + H2O

Segn una segunda hiptesis el perxido de hidrogeno acta mediante la produccin del

radical hidroxilo OH.

O2 + e- O2 - ion speroxido

O2 + H2O2 OH- + O2 + OH radical hidroxilo

Este radical puede atacar a los lpidos de las membranas, al ADN, protenas, y otros

compuestos vitales de la clula. (Leveau y Bouix, 2002).

Se considera que la inhibicin de crecimiento microbiano por el perxido de hidrogeno no es

resultado directo de sus propiedades oxidativas en su estado molecular, si no por

consecuencia de la actividad de otras especies qumicas oxidantes derivadas del mismo. De

hecho el perxido es una excelente fuente de oxigeno singlete, los radicales superxido (O2 -)

y los radicales hidroxilo ( OH) que son altamente reactivos y muy txicos para los

microorganismo. Aunque el mecanismo exacto por el cual el H2O2 produce productos letales

para muchos microorganismos no ha sido completamente explicado, es bien sabido que,

debido a su capacidad para producir los derivados mencionados con fuerte propiedades

oxidativas, puede producir daos a los cidos nuclecos, enzimas y componentes de

membrana. (Labas et al, 2007).

34

Posibles mecanismos de desinfeccin H2O2

El perxido de hidrogeno funciona como un agente oxidante, produciendo radicales hidroxilos

libres que atacan los componentes esenciales de las clulas, incluyendo lpidos, protenas y

ADN, adems se degrada rpidamente produciendo agua y oxigeno. (Jang et al, 2007)

Los efectos dainos producidos a los componentes celulares de las bacterias parecen ser

producida por un fenmeno oxidativo. El estrs, derivado de las especies reactivas de oxigeno

(ROS), especialmente de los radicales OH, tienen alta capacidad para producir dao celular.

De hecho, el estrs oxidativo puede ser una consecuencia propia del metabolismo aerbico o

de la accin interna del sistema inmunolgico que acta sobre los posibles reacciones de

respuesta al ataque de agentes patgenos indeseados o del resultado de una agresin externa

por sustancias qumicas, tales como el perxido de hidrogeno. (Labas et al, 2007).

Existen varias maneras por las cuales el peroxido de hidrogeno puede ser transformado en

radicales hidroxilos (OH), entre ellas se incluyen:

La interaccin con iones metlicos de transicin que existente en el medio, por ejemplo, cobre, hierro, etc.

Cuando actan en combinacin con radiacin UV Descomposicin por una reaccin de dismutacin con un mximo ritmo de pH. (Labas

et al, 2007).

Los radicales hidroxilos constituyen una de las especies qumicas con el mayor potencial para

producir dao celular. El perxido de hidrgeno no es una molcula grande y es capaz de

difundir a travs de la membrana celular y, una vez dentro, para producir los radicales hidroxilo

(OH ) por medio de algunos de los mecanismos mencionados anteriormente. Los radicales

hidroxilos pueden repercutir en los diferentes componentes de la las clulas que producen el

estrs oxidativo y conducir a irremediable consecuencias:

Oxidacin de los diferentes aminocidos como tirosina, fenilalanina, triptfano, histidina, metionina y cistena dando lugar a una prdida de la capacidad de la

protena correspondiente y las molcula adecuadas para cumplir su funcin especfica.

Tambin pueden actuar sobre los lpidos para producir una reaccin de peroxidacin que afecta gravemente a la integridad de la membrana celular. Una de las

consecuencias de esta reaccin es el aumento de la rigidez de la membrana celular,

se produce la prdida de su permeabilidad y otro tipo cambios que producen un

deterioro en la organizacin la membrana interna.

Acta sobre la clula, el DNA, especficamente el (OH), puede producir una ruptura en la cadena o modificaciones qumicas en las bases nitrogenadas.

35

El dao mortal producido por el perxido de hidrogeno existe en el medio (efecto exgeno) o producido por la clula (efecto endgeno). Sin embargo las bacterias tienen

sus propias mecanismos enzimticos como las catalasas, que dentro de ciertos lmites

ejercen un a proteccin. (Labas et al, 2007).

Espectro de actividad El efecto bactericida del perxido de hidrogeno en los sistema biolgico ha sido reportado y

muestra una inhibicin del crecimiento e inactivacin de los microorganismos patgenos;

bacterias, hongos, virus, micobacterias y esporas bacterianas, cuando se utiliza el

desinfectante a la concentracin y bajo condiciones adecuadas. (Labas et al, 2007).

El perxido de hidrogeno tiene actividad, particularmente frene a las esporas, fuertemente

aumentada por una elevacin de la temperatura. Al pasar de 20 a 45 C, por 10 al menos el

tiempo necesario para matar las esporas. (Leveau y Bouix, 2002).

El perxido de hidrogeno es ms activo sobre la bacterias Gram negativas que sobre las Gram

positivas, lo que es normal, sobre las bacterias anaerobias, que estn provistas de catalasa,

que sobre las bacterias aerobias. Algunos mohos, como por ejemplo los Trichophyton, pobres

en catalasa, son ms sensibles. Otros como Candida albicans, que posee una actividad

catalasa ms elevada, son ms resistentes. pH optimo: ligeramente acido; incompatibilidades:

alcalinos, metales, catalasa. (Leveau y Bouix, 2002).

Cuando se utiliza el perxido de hidrogeno en medio alcalino libera de una forma violenta todo

su oxigeno. Por el contrario en medio cido, las soluciones de perxido de hidrogeno son ms

estables cuanto ms bajo es el pH. Esta molcula es utilizada a veces en los detergentes-

desinfectantes para la industria Lctea o fabricas de queso, en presencia a de cido fosfrico.

(Leveau y Bouix, 2002).

Aplicaciones como antisptico

Antisptico en el lavado de lceras y heridas: ayuda a la eliminacin de detritus titulares en

regiones inaccesibles. Se utiliza H2O2 de 10 volmenes (3%) y cremas del 1%-1.5%.

Enjuagues bucales en amigdalitis, estomatitis aguda, halitosis, extracciones dentales e

infecciones de la boca. Diluir 1 parte del perxido de hidrogeno comercial de 10 V con una

parte de agua para obtener una concentracin del

1.5%.(www.scielo.cl/pdf/infotec/v18n2/art10.pdf).

36

Aplicaciones como desinfectantes

Desinfeccin de lentes de contacto blandas, aparatos de ventilacin asistida y tonmetros oculares a concentraciones del 3% al 6%. Antes de colocar la lente de

contacto en el ojo es necesario neutralizar el perxido de hidrgeno, ya que es irrita la

crnea.

Desinfeccin de aparatos para endoscopia como alternativa a glutaraldehdo. A concentraciones del 6% ha mostrado incluso ser ms efectiva que el glutaraldehdo,

Pero no se utiliza porque su poder oxidante podra daar los aparatos (deteriora gomas y plsticos de tubos de insercin). A concentraciones del 3% es eficaz frente a quistes.

(www.scielo.cl/pdf/infotec/v18n2/art10.pdf).

El H2O2 ha sido utilizado como agente antimicrobiano desde principio del ao 1800 y es bien conocido por su uso en aplicacin tpica de la piel en concentraciones del

3%.(Labas et al, 2007).

Estabilidad y condiciones de uso

Se degrada espontneamente en reposo y por eso necesita incorporar agentes estabilizantes.

La descomposicin gradual aumenta por accin de la luz, de la agitacin y del calor. Debe

conservarse en envases aislados de la luz y del aire entre 15-30C. Si no contiene agentes

estabilizantes debe guardarse a temperatura inferior a 15C. Las soluciones ms concentradas

son ms estables que las diluidas. Las incompatibilidades tambin pueden provocar la

descomposicin. Se degrada rpidamente por la accin de lcalis y de metales finamente

divididos. (www.scielo.cl/pdf/infotec/v18n2/art10.pdf)

Efectos adversos

Irritacin de piel y mucosas con soluciones concentradas y dermatitis de contacto. Hipertrofia

de las papilas gustativas (desaparece al dejar los lavados bucales); irritacin de la mucosa

bucal por el uso repetido en enjuagues bucales. (www.scielo.cl/pdf/infotec/v18n2/art10.pdf)

2.3.9.3. Fenoles y derivados El ortofenilfenol y el ortobenzilparaclorofenol son los derivados fenlicos utilizados comnmente

en los hospitales. El poder bactericida de los compuestos fenolicos resulta de la lisis celular

por desnaturalizacin de la membrana citoplasmtica y de los enzimas o de una combinacin in

situ con los constituyentes citoplasmticos pero sin fuga celular. La actividad bactericida se

extiende generalmente a las Gram negativas y Gram positivas sin gran diferenciacin. La

actividad fungicida es pequea. Los fenoles no son considerados como virucas y esporicdas.

(Leveau y Bouix, 2002).

37

El fenol y los derivados fenlicos, en la actualidad, se reservan para la desinfeccin de

superficies (suelos, paredes) y material no poroso. Entre las desventajas de su utilizacin

destaca la irritacin de la piel y de las mucosas y el descenso de la eficacia en presencia de

materia orgnica. No se aconseja su utilizacin para la desinfeccin de superficies en las

habitaciones de pediatra, ni tampoco en la desinfeccin de cunas e incubadoras. (Quiles y

Hevia, 2007).

Los compuestos fenlicos, un grupo amplio de productos, figuran entre los germicidas ms

antiguos. Sin embargo, los resultados de estudios de inocuidad ms recientes recomiendan

restringir su uso. Tienen actividad contra las formas vegetativas de las bacterias y contra los

virus con envoltura lipdica y, cuando estn debidamente formulados, tambin son activos

contra las micobacterias. No tienen actividad contra las esporas y su actividad contra los virus

sin envoltura lipdica es variable. Muchos productos fenlicos se utilizan para descontaminar

superficies ambientales, y algunos (por ejemplo, el triclosn y el cloroxilenol) se encuentran

entre los antispticos ms usados. (OMS, 2005)

El triclosn es comn en los productos para el lavado de manos. Tiene actividad principalmente

contra las formas vegetativas de las bacterias y es inocuo para la piel y las mucosas. Sin

embargo, en estudios de laboratorio se ha observado que las bacterias con resistencia inducida

a bajas concentraciones de triclosn tambin muestran resistencia a ciertos tipos de

antibiticos. Se desconoce el alcance de esta observacin sobre el terreno. Algunos

compuestos fenlicos son sensibles a la dureza del agua y pueden quedar inactivados con

aguas duras; por esa razn, deben diluirse con agua destilada o desionizada. (OMS, 2005)

2.3.9.4. Alcoholes

Dos alcoholes se utilizan principalmente: el etanol y el isopropanol. Estos dos compuestos son

elegidos por su poder disolvente y carcter voltil ms que por actividad antimicrobiana. Los

alcoholes poseen una rpida accin bactericida, actuando sobre bacterias Gram negativas y

Gram positivas, y virus con envuelta, siendo por tanto considerados como desinfectantes de

bajo nivel. La concentracin bactericida ptima se sita en el 70%. Ello se debe a que estos

compuestos acuosos penetran mejor en las clulas y bacterias, permitiendo as la

desnaturalizacin de las protenas. (Leveau y Bouix, 2002).

Los alcoholes se inactivan en presencia de materia orgnica. Se utilizan muy frecuentemente

para la desinfeccin de la piel, y resultan muy eficaces para este fin cuando a continuacin se

aplica un yodforo. Su aplicacin est tambin indicada en la desinfeccin de material no

crtico como termmetros y fonendoscopios. La toxicidad del alcohol isoproplico es dos veces

38

superior a la del etanol. Su utilizacin puede provocar irritacin y sequedad de la piel; al

volatilizarse puede producir irritacin de la mucosa nasal y lagrimal). (Leveau y Bouix, 2002).

Ventajas

Poco toxico Accin rpida Secado rpido No corrosivo.

Desventajas

Eficacia antimicrobiana pequea costo elevado. (Leveau y Bouix, 2002).

2.3.9.5. Halgenos Todos los halgenos (F, Cl, I, y Br) son desinfectantes: sus propiedades germicidas y de

penetracin en general aumentan con su peso molecular. El yodo es el halgeno de mayor

peso atmico y que por su bajo poder de oxidacin resulta ms estable.

Los productos oxidantes halogenados, bien sean el cloro y derivados, o el yodo y derivados

(yodoformos), son uno de los grupos de desinfectantes ms utilizados en la actualidad,

generalmente como desinfectantes de superficies los primeros y como antispticos de piel y

mucosas los segundos, aunque tanto unos como los otros pueden tener efectos txicos.

(Galn, 2003).

Por su capacidad como fuertes oxidantes, todos los halgenos tienen accin desinfectante,

aunque en su forma elemental solo tiene importancia el cloro y el yodo. (Galn, 2003).

2.3.9.6. Compuestos Yodados (Yodforos)

Un yodforo es una combinacin de yodo y una sustancia solubilizante, formando as un

complejo que libera lentamente yodo orgnico. El yodo se puede hacer soluble en agua

mediante formacin de complejos con agentes tensioactivos no inicos adecuados, como por

ejemplo, xidos condensados de nonifenol etileno. Estos complejos se conocen como

yodforos. Las condiciones cidas aumentan su actividad bactericida. La materia orgnica

inactiva el yodo de las soluciones yodoforas y el color mbar se desvanece (GTC 85, 2003).

El yodo liberado progresivamente, va actuar por oxidacin sobre las protenas enzimticas y

estructurales. Los yodforos son considerados como los agentes antimicrobinos eficaces. El

efecto bactericida se obtiene por una concentracin media de 30mg/l de yodo. Los mohos y

39

levaduras son bastantes sensibles a los derivados yodados. La actividad esporicda solo se

obtiene con concentraciones muy elevadas. (Leveau y Bouix, 2002).

Ventajas

Bactericida-fungicida-virucida activos a bajas temperaturas. Poco influenciado por el pH

Desventajas

riesgo de corrosin sensible a los materiales orgnicos corrosivo de metales. costo elevado. (Leveau y Bouix, 2002).

2.3.9.7. Compuestos que liberan cloro Los compuestos liberadores de cloro son desinfectantes potente espectro de actividad amplia.

Son sensibles tanto las bacterias Gram negativas como las Gram positiva, adems presentan

cierta actividad frente a esporas bacterianas. (Arias, 2006).

Los agentes qumicos orgnicos que liberan cloro, por ejemplo el diclorodimetil hidantoina y el

dicloroisocianurato de sodio, son ms comnmente formulados con detergentes y se

comercializan en polvo. (GTC 85, 2003).

El cloro disponible del hipoclorito de sodio y otros agentes qumicos que liberan cloro

reaccionan rpidamente con la materia orgnica y se inactivan por esta, pero en condiciones

de uso normal, el volumen de solucin y la concentracin son tales que la cantidad de suciedad

presente en el equipo no afectan considerablemente la eficacia de la solucin desinfectante.

Los agentes qumicos que liberan cloro son corrosivos para la mayora de los metales, incluido

el acero inoxidable. A una baja concentracin en condiciones alcalinas, a baja temperatura y

poco tiempo de contacto los peligros de corrosin se minimizan y la accin desinfectante

permanece eficaz. (GTC 85, 2003).

Los hipocloritos son los desinfectantes ms utilizados de este grupo y estn disponibles

comercialmente en forma lquida (hipoclorito sdico) o slida (hipoclorito clcico,

dicloroisocianurato sdico).

El hipoclorito de sodio es relativamente inestable a la temperatura y a luz. Los derivados

clorados, en forma de polvo, son ms estables pero sensibles a la humedad. El cloro gaseoso,

40

el hipoclorito de sodio y los derivados clorados dan cido hipocloroso (HCLO) en presencia de

agua. (Leveau y Bouix, 2002).

El mecanismo de accin sobre los microorganismos, se basa en el poder oxidante del cido

hipocloroso (forma Activa) que entraa una destruccin de las protenas estructurales y un

bloqueo de la actividad enzimtico.

Los generadores de cido hipocloroso son muy buenos bactericidas y virucidas. La actividad

fungicida es poco marcada. El potencial de actividad es muy dependiente de la proporcin de

materia orgnica. Los derivados clorados son principalmente utilizados en tratamiento de

superficies y circuitos de tuberas, despus de la limpieza. (Leveau y Bouix, 2002).

Ventajas

Son eficaces contra una amplia variedad de bacterias, hongos y virus Poco costoso Se presentan en forma liquida o granulada Se puede aadir a agua de bebida. Buena enjuagabilidad. Poco corrosivo No son afectados por las sales de las guas duras (salvo si se registran ligeras

variaciones debidas al pH)

Acta rpidamente No se origina subproductos txicos

Desventajas

Son inestables frente al calor Son muy corrosivos para el acero inoxidable y otros metales Riesgos de corrosin Sensibles a la materia orgnica Inactivado por la luz solar Inactivo en agua dura Se volatiliza rpidamente Ineficaz frente a esporas Inestabilidad ligada a la temperatura. (Leveau y Bouix, 2002).

2.3.9.8. Biguanidas Son derivados de la guanidina, una sustancia que se encuentra en forma natural en vegetales y

cereales. El grupo incluye un pequeo nmero de materiales que han sido identificados como

poseedores de propiedades bactericidas. Estos son bis-biguanidas o biguanidas polimricas.

41

Solamente las biguanidas polimricas tienen uso significativo en la desinfeccin en plantas de

alimentos. (GTC 85, 2003)

Estos materiales no son tensioactivos y son esencialmente no espumantes, no corrosivos y no

irritantes. Las biguanidas se desactivan en contacto con materiales aninicas y con el cloro.

Tienen una excelente estabilidad cuando se almacenan en sus recipientes originales. Son

efectivos a un rango amplio de pH, pero se pueden precipitar sobre pH de 10 y se puede

desactivar de modo reversible por debajo de un pH 3. (GTC 85, 2003).

Las biguanidas son absorbidas por la pared microbiana provocando lesiones irreversibles por

fenmenos de coagulacin con inhibicin enzimtico y destruccin membranar (Leveau y

Bouix, 2002).

Ventajas

Bactericida poco txicos no espumantes no corrosivos buena tolerancia cutnea.

Desventajas:

no virucda costo elevado. (Leveau y Bouix, 2002).

2.3.9.9. Agentes cidos Desinfectantes Los agentes cidos de desinfeccin son formulaciones que contiene agentes tensioactivos

aninicos y catinicos o anfteros y cidos orgnicos, usualmente cido fosfrico. Se pueden

usar como desinfectantes en presencia de un bajo nivel de suciedad. En concentraciones de

uso normal dan valores de pH aproximadamente de 2. Por ser de alta acidez, eliminaran y

evitaran la formacin de incrustaciones, pero son corrosivos para los metales diferentes a

lacero inoxidable. Forman espuma cuando se recirculan en los sistemas de tuberas. (GTC 85,

2003).

Estos desinfectantes matan los microorganismos penetrando en su interior y rompiendo la

membrana celular; disocian luego la molcula acida y, como consecuencia, acidifican el

interior. Los desinfectantes cidos son de accin rpida y eficaz contra levaduras y virus.

42

2.3.9.10. cidos Orgnicos

Una serie de cidos orgnicos cuentan con propiedades antimicrobianas, preferiblemente

microbiostaticas, por ejemplo cido frmico, cido benzoico, etc. Mediante halogenizacin

pueden aumentarse los efectos hasta alcanzar un nivel microbicida adecuado para la

desinfeccin, las propiedades desarrolladas en su empleo obedecen mayormente a su

contenido cido, aunque se ha descrito una considerable resistencia de mohos y levaduras a

los mismos. (Galn, 2003).

2.3.9.11. Compuestos de Amonio Cuaternario (QACS)

Los compuestos de amonio cuaternario, conocidos como cuaternarios, QAC son

esencialmente sales de amonio con algunos o todos los tomos del non (NH4) sustituidos por

grupos alquilo o arilo (Arias, 2006).

El anin generalmente es un cloruro o un bromuro. El catin es parte activa de la molcula,

mientras que el anin es solo importante en lo que concierne a la solubilidad de QAC. Las

sustituciones posiblemente son tericamente muchas, pero para conseguir la mxima

actividad de la cadena alquilita (catin) debe contener entre 8 y 18 tomos de carbono

mximos. (Arias, 2006).

Los QAC son generalmente inodoros, incoloros, no irritantes y desodorizantes. Son

desinfectantes de amplio espectro y tiene accin detergente. Los QAC se inactivan en

presencia de jabones, en forma concentrada son muy estables y tiene una vida til larga, su

manipulacin es segura pero pueden llegar a causar irritacin en pieles sensibles en

concentraciones de uso. (GTC 85, 2003).

Los compuestos de amonio cuaternario se adsorben a nivel de los grupos cargados

negativamente de las estructuras de la superficie celular. La desorganizacin de la membrana

da lugar a una modificacin de la permeabilidad y una desnaturalizacin de las protenas de

estructura y enzimas. El espectro de actividad de estos productos es bastante elevado, son en

general buenos bactericidas, fungicidas y algicidas, pero actividad escasa frente a virus y

esporas. (Leveau y Bouix, 2002).

Ventajas

Bactericida-fungicida Poco toxico Estables (pH-temperatura) No corrosivo Costo moderado

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Desventajas

Espumante No virucidas No activo frente a esporas Inactivo en presencia de matara orgnica. Inactivo frente a aguas duras. (Leveau y Bouix, 2002).

2.3.9.12. Agentes Desinfectantes Tensioactivos Anfotricos Los agentes tensioactivos anfteros tiene propiedades detergentes y algunos tienen

propiedades bactericidas. (GTC 85, 2003). Estos compuestos se presentan como cationes o

aniones, dependiendo del pH de la solucin y en forma catinica como son bactericidas

activos. (Arias, 2006).

El mecanismo de accin de los compuestos anfteros, se basa en la alteracin rpida de la

estructura con perforaciones membrana res y fuga celular. Las actividades bactericidas y

fungicidas se obtienen con concentraciones de principios activos dbiles, la actividad virucida

es poco conocida. Los anfteros son considerados como poco txicos, son poco afectados por

la materia orgnica y no son corrosivos. (Leveau y Bouix, 2002).

2.3.9.13. Detergentes-Desinfectantes Los detergentes-desinfectantes, conocidos popularmente como detergentes antimicrobianos

son esencialmente combinaciones de ingredientes compatibles y complementarios; contiene

adems de un detergente, un desinfectantes de forma que la limpieza y desinfeccin se lleva a

cabo en una sola operacin. En la prctica, las formulaciones de detergentes/desinfectantes

suelen contener otros componentes, como agentes secuestrantes y tampones, siendo

frecuentes el incluir dos surfactantes en una sola formulacin, siempre que sean compatibles.

Cualquiera que sea su frmula, idealmente un buen detergente-desinfectante debe ser eficaz

frente a una gran variedad de suciedades y amplio espectro de microorganismos. (Forsythe y

Hayes, 2002).

En la tabla N4, se puede observar la actividad de los desinfectantes ms comunes.

4 - Excelente 3 Alta

44

2 Media 1 Baja 0 Ninguna

Tabla N4. Efectividad de Desinfectantes Qumicos

Desinfectantes

Bacteria HongosGram (+) Gram (-) Levadura Moho

Cloro Liquido 4 4 3 3

Hipoclorito Orgnico 4 4 4 3

Yodforos 4 4 4 4

Amonio Cuaternario 4 3 4 3

Desinfectantes cidos 4 4 3 1

cido Percetico 4 4 3 1

Biguanidas 4 4 3 3

Fuente: GTC 85, 2003

2.4. DESINFECTANTE DE ALTO NIVEL DE STERIS A BASDE DE PEROXIDO DE HIDROGENO El Esterilizante qumico desinfectante de alto nivel de STERIS, produce una reaccin qumica

oxidativa, que ofrece una alternativa segura a los riesgos asociados a los aldehdos. Este

desinfectante es un microbicida de amplio espectro fabricado con Perxido de hidrgeno

acelerado (AHP, Accelerated Hydrogen Peroxide), una frmula patentada, que combina una

baja concentracin de perxido de hidrgeno y otros ingredientes inertes, lo que acelera su

eficacia; est diseado para la desinfeccin de alto nivel de dispositivos mdicos de riesgo

medio sensibles al calor, incluido el procedimiento manual o automtico de los endoscopios

flexibles. (www.steris.com)

Caractersticas del desinfectante

Accin rpida desinfeccin de alto nivel Cinco minutos de tiempo de contacto a 20C (68F) para alto nivel de desinfeccin Desinfectante qumico oxidativo La concentracin de perxido de hidrogeno al 2% es reducida en comparacin con

otros qumico basados en perxido de hidrogeno al 7.5%

No requiere activacin

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Fcil enjuague de los instrumentos, no deja residuos txicos No genera carbono orgnicos voltiles (COV) (aerosoles) Es inodoro Tiene baja formacin de espuma, es tensioactivo y biodegradable No es costoso

Beneficios

Amplio espectro de actividad: capacidad tuberculicida, fungicida, bactericida y virusida Actividad microbiana ms rpida que el glutaraldehido y ortoparaldehido (OPA) Seguro para los instrumentos, mejoramiento de la compatibilidad con endoscopios

sensibles.

Seguridad para el usuario, reduce el tiempo y las posibilidades de errores en la mezcla o dilucin.

Seguro para los pacientes y el personal Seguro para el medio ambiente y para los equipos Estable en presencia de fluidos corporales del paciente

3. TIPOS DE MICROORGANISMOS Los microorganismos son la forma de vida ms difundida en la naturaleza. Su presencia tiene

efectos positivos y negativos para la vida del hombre, consecuentemente su control es

fundamental para evitar que estos efectos produzcan consecuencias indeseables, para la

salud, el medio ambiente y los bienes que hacen a la calidad de vida del ser humano. El

mencionado control se puede realizar por medios fsicos o qumicos, los cuales deben ser

especficos para la accin deseada y no deben producir efectos colaterales indeseados.

Los microorganismos se clasifican en: bacterias, mohos (hongos), levaduras, parsitos y virus.

Bacterias

Las bacterias son microorganismos unicelulares (clulas procariticas) que tienen

aproximadamente 1 m de dimetro, con variacin morfolgica desde formas de vara cortas y

estiradas (bacilos) a formas esfricas u ovoides. Algunas especies de bacterias tambin

producen esporas, algunas de las cuales son resistentes al calor, productos qumicos y otras

condiciones medioambientales. Las bacterias son clulas envueltas por una membrana

citoplasmtica y una pared externa de estructura caracterstica; poseen el citoplasma repleto

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de ribosomas y el material gentico est libre sin membrana nuclear. Algunas son mviles por

poseer flagelos. (Marriot, 2003)

Mohos

Los mohos son microorganismos pluricelulares (clulas eucariotas) con morfologa de micelio

filamentosa. Consisten en una serie de clulas tubulares que oscilan entre 30 a 100 micras de

dimetro, llamadas hifas, que forman una masa microscpica llamada micelio. Los mohos se

caracterizan por la variedad de colores en que se manifiestan y son generalmente reconocidos

por su apariencia suave o rizada, como algodn. Pueden desarrollarse numerosas y diminutas

esporas que se encuentran el aire y que pueden esparcirse con las corrientes de aire. Las

esporas producen el crecimiento de un nuevo hongo si son trasladadas a un lugar que reuna

las condiciones adecuadas para su germinacin. Los mohos generalmente resisten mayores

variaciones en el pH que las bacterias y las levaduras y pueden tolerar con frecuencia mayores

variaciones de temperatura. (Marriot, 2003).

Los mohos se reproducen sexual y asexualmente (esporas), la cual determina sus variadas

especies, obtienen su alimento de materia orgnica que proviene, en su gran mayora de los

alimentos. (GTC 85, 2003).

Virus

Los virus son microorganismos infecciosos con dimensiones que oscilan de 20 300 nm, o sea

que son alrededor de 1/100 a 1/10 menores que una bacteria. La mayora de los virus pueden

verse solo a travs del microscopio electrnico. Una partcula de virus consiste en una

molcula simple de DNA o RNA, rodeada por una capa de protena. Los virus nos se pueden

reproducir fuera de otro organismo y son parsitos obligados de todos los organismos vivos,

como bacterias, hongos, algas, protozoos, plantas superiores y animales vertebrados e

invertebrados. (Marriot, 2003).

Levaduras

Las levaduras son generalmente unicelulares. Difieren de las bacterias por el gran tamao de

sus clulas y su morfologa, y porque producen brotes durante el proceso de reproduccin por

gemacin. Las levaduras pueden diseminarse a travs del aire u otros medios y pueden

ponerse en las superficies de los alimentos. Las colonias de levaduras son generalmente de

apariencia hmeda o viscosa y de una blancura cremosa. Estos microorganismos se

desarrollan mejor en una zona de acidez media, con un pH entre 4.0 y 4.5. (Marriot, 2003).

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3.1. FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS. Las bacterias, los hongos, las levaduras, parsitos y virus, requieren de ciertos factores para su

crecimiento como son:

a. Nutrientes: todos los microorganismos requieren de nutrientes como fuentes de energa para

sobrevivir y reproducirse. La mayora de los alimentos proveen nutrientes suficientes, como

carbohidratos, lpidos, protenas, ppticos y vitaminas.

b. humedad (Aw): el agua disponible en un alimento es parte vital, influyendo selectivamente en

el crecimiento de los microorganismos. Cada microorganismo tiene su propio rango de

crecimiento respecto al AW, bajo unas condiciones ambientales dadas. Un Aw desfavorable se

traduce en una reduccin del ritmo de crecimiento y disminucin en el nmero de clulas.

c. Aire: la mayora de los microorganismos requieren oxigeno (aerobios) para su crecimiento y

supervivencia. Otros, por el contrario, no requieren de la presencia de oxigeno para sobrevivir.

En la primera clase se encuentran las bacterias del genero Bacillus; a la ultima clases

pertenecen bacterias anaerobias como las del genero Clostridium.

d. Temperatura: Todos los microorganismos tiene temperaturas ideales para su crecimiento y

reproduccin. En presencia de bajas temperaturas o temperaturas de refrigeracin pueden

sobrevivir pero, limitan su crecimiento. En algunos casos las temperaturas altas eliminaran la

mayora de los microorganismos. Se ha sealado que la temperatura mas baja a la cual crecen

los microorganismo es la de -34 C ; las mas elevada se encuentra mas o menos, por encima

de los 90C.

e. pH: como la temperatura, la mayora de los microorganismos tiene un rango ideal de pH

para su proliferacin. Algunos pueden sobrevivir en los extremos, mientras que otros no. La

resistencia de las clulas vegetativas al calor disminuye bajo condiciones cidas o alcalinas.

f. Tiempo: el propsito de la vida para todos los mi