¿cómo presentar un artículo original de investigación? unidad mixta csic/uah alfredo prieto...

47
¿Cómo presentar un artículo ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá Professor in Immunology at Alcalá University University Coordinator of Post grade program in Coordinator of Post grade program in Immunology Immunology Consultant in the field of Problem Based Consultant in the field of Problem Based Learning Learning Administrator of: Administrator of: Web site on PBL Web site on PBL http://www2.uah.es/problembasedlearning http://www2.uah.es/problembasedlearning WebBlog site on PBL: WebBlog site on PBL: http http :// :// www.e www.e - - pbl pbl - - es.tk es.tk

Upload: adelita-mattos

Post on 22-Jan-2016

221 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

¿Cómo presentar un artículo original de ¿Cómo presentar un artículo original de investigación?investigación?

Unidad mixta

CSIC/UAH

Alfredo Prieto MartínAlfredo Prieto MartínProfessor in Immunology at Alcalá University Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator of Post grade program in ImmunologyCoordinator of Post grade program in ImmunologyConsultant in the field of Problem Based LearningConsultant in the field of Problem Based LearningAdministrator of: Administrator of: Web site on PBL Web site on PBL http://www2.uah.es/problembasedlearninghttp://www2.uah.es/problembasedlearningWebBlog site on PBL: WebBlog site on PBL: httphttp://://www.ewww.e--pblpbl--es.tkes.tkContact me at : Contact me at : [email protected]@uah.es or or http://www.alfredoprieto.tkhttp://www.alfredoprieto.tk

Page 2: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Meta mensaje= lo que tienes que contarMeta mensaje= lo que tienes que contar

Cómo lo muestras

Presentado por Alfredo PrietoPresentado por Alfredo Prieto

Un ejemplo con metodología al Un ejemplo con metodología al descubiertodescubierto

Page 3: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

El tema de la presentación El tema de la presentación

Empieza contándoles Empieza contándoles de que vas a hablarde que vas a hablar

Presentado por Alfredo PrietoPresentado por Alfredo Prieto

Page 4: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Resume el trabajo: ¿Qué hicieron? Resume el trabajo: ¿Qué hicieron?

• A pacientes con melanoma A pacientes con melanoma metastásicometastásico, se les extraen , se les extraen

linfocitos T, se seleccionan los antitumorales, se linfocitos T, se seleccionan los antitumorales, se

expanden y se reinfunden al paciente tras la expanden y se reinfunden al paciente tras la

quimioterapia. quimioterapia.

• Los tumores regresan Los tumores regresan

Pacientes con melanoma Linfodeplección

del paciente con quimioterapia

Linfocitos antitumorales Reinfusión en

Individuolinfopénico

Exp

ansi

ónRepoblación y Agresión al tumor

ResumenResumen

Page 5: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

¿Qué han encontrado¿Qué han encontrado?? • Las células T reinfundidas Las células T reinfundidas proliferanproliferan in vivo y in vivo y

repueblan repueblan persistentemente a los pacientes, persistentemente a los pacientes,

infiltinfilttran los tejidos tran los tejidos tumorales y provocan su tumorales y provocan su

regresión asi como la destrucción regresión asi como la destrucción

autoimmune de melanocitosautoimmune de melanocitos. .

Proliferación e infiltración del tumor

Auto- inmunidad

Inmunidad antitumoral

Reinfusión 1 $

ResumenResumen

Page 6: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

¿Qué significa?¿Qué significa?

• Esta aproximación permite tratar a pacientes Esta aproximación permite tratar a pacientes

cuyo SI no es capaz de eliminar un cáncer o cuyo SI no es capaz de eliminar un cáncer o

una infección incurable como el HIVuna infección incurable como el HIV

Reprogramación inmune Inmunidad

antiinfecciosa

Inmunidad antitumoral

HIV Infection

Cáncer

ResumenResumen

Page 7: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Aporta background a tu audiencia Aporta background a tu audiencia Introducción a la Introducción:Introducción a la Introducción:

1.1. MelanomaMelanoma– Estadiaje Estadiaje

– Terapia e inmunoterapiaTerapia e inmunoterapia

2.2. Inmunoterapia adoptivaInmunoterapia adoptiva

3.3. Reordenamientos TCR y Pruebas de clonalidad Reordenamientos TCR y Pruebas de clonalidad

4.4. Crecimiento homeostásicoCrecimiento homeostásico

5.5. 5. Mecanismos de la inmunidad antitumoral5. Mecanismos de la inmunidad antitumoral

Page 8: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

1.1. MelanomaMelanomaconceptoconcepto

• Tumor de melanocitos Tumor de melanocitos

• Tumores altamente metastásicos, primero a ganglios Tumores altamente metastásicos, primero a ganglios después a vísceras y tejido nerviosodespués a vísceras y tejido nervioso

• Causa: exposición intermitente al sol en gente con Causa: exposición intermitente al sol en gente con piel clarapiel clara

• 1 de cada 74 WASP los desarrollan en USA1 de cada 74 WASP los desarrollan en USA

Introducción a la IntroducciónIntroducción a la Introducción

Imagen de InternetImagen de Internet

Page 9: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Melanoma-vitíligoMelanoma-vitíligoIntroducción a la IntroducciónIntroducción a la Introducción

La Inmunidad AntitumoralLa Inmunidad AntitumoralEs un tipo benéfico de autoinmunidadEs un tipo benéfico de autoinmunidad

Imagen de InternetImagen de Internet

Page 10: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Tratamiento del melanoma:Tratamiento del melanoma:

•Quimioterapia no funcionaQuimioterapia no funciona

•InmunoterapíaInmunoterapía–IFNIFN–IL-2IL-2

–Terapia celular adoptivaTerapia celular adoptiva

Introducción a la IntroducciónIntroducción a la Introducción

Page 11: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

2. Inmunoterapia celular adoptiva 2. Inmunoterapia celular adoptiva (ACT)(ACT)

• Se lleva intentando desde los 80 sin resultados Se lleva intentando desde los 80 sin resultados clínicos espectaculares.clínicos espectaculares.

• Funciona Funciona in vitroin vitro y en ratones pero hay pocos y en ratones pero hay pocos resultados clínicos en humanos.resultados clínicos en humanos.– Vida corta de las células T infundidas.Vida corta de las células T infundidas.– Baja tasa respuestas parciales en melanoma metastático Baja tasa respuestas parciales en melanoma metastático

estadio 4 (5-15%). estadio 4 (5-15%).

Introducción a la IntroducciónIntroducción a la Introducción

Page 12: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

4. 4. Crecimiento homeostásicoCrecimiento homeostásico

• Proliferación de linfocitos Proliferación de linfocitos T maduros sin necesidad T maduros sin necesidad de estimulación de estimulación antigénica.antigénica.

• Se estimula en situación Se estimula en situación de linfodepleción.de linfodepleción.

• Il-7, IL-15 e IL-21 son Il-7, IL-15 e IL-21 son factores de crecimiento factores de crecimiento homeostásico muy homeostásico muy importantes.importantes.

Page 13: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

INMUNOTERAPIAS CELULARES INMUNOTERAPIAS CELULARES ADOPTIVAS: TIL, LAKADOPTIVAS: TIL, LAK

• SA Rosenberg pionero e impulsorSA Rosenberg pionero e impulsor• Extracción TIL PBL, selección y Extracción TIL PBL, selección y

expansión expansión in vitroin vitro de células de células antitumorales antitumorales

• Se han abandonado tras décadas de Se han abandonado tras décadas de esfuerzos infructuosos (Sanchez-esfuerzos infructuosos (Sanchez-Mateos P. SEI 2002)Mateos P. SEI 2002)

• Science Octubre 2002Science Octubre 2002

Introducción a la IntroducciónIntroducción a la Introducción

Page 14: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Introducción IIntroducción I::¿por qué y qué?¿por qué y qué?

• ¿Por qué?¿Por qué?

• ExpExplica las razones por las que el estudio lica las razones por las que el estudio

fue realizadofue realizado

• ¿Qué?¿Qué?

• Establece la cuestión respondida por el Establece la cuestión respondida por el

trabajotrabajo

Introducción Introducción

¿Por qué hacerlo?¿Por qué hacerlo?Porque actualmente Porque actualmente no hay ningún no hay ningún tratamiento eficaztratamiento eficaz contra el contra el melanoma metastásicomelanoma metastásico ¿Qué prueban? ¿Qué prueban? ¿Contribuirá la Quimioterapia al ¿Contribuirá la Quimioterapia al eliminar a los linfocitos a crear un eliminar a los linfocitos a crear un mejor ambiente para la expansiónmejor ambiente para la expansión in vivoin vivo de células antitumorales? de células antitumorales?

Page 15: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Establece la aproximación Establece la aproximación experimentalexperimental

¿Qué se hace y qué se mide?¿Qué se hace y qué se mide?

• Linfodepleción del paciente por quimoterapiaLinfodepleción del paciente por quimoterapia• Activación de linfocitos antitumorales Activación de linfocitos antitumorales in vitroin vitro

– Demostración de su capacidad antitumoralDemostración de su capacidad antitumoral– Expansión Expansión in vitroin vitro

• Expansión in vivo de los linfocitos antitumorales en el huéspedExpansión in vivo de los linfocitos antitumorales en el huésped– Deplecionado de células T madurasDeplecionado de células T maduras– El injerto T se expande el numero de células T efectoras El injerto T se expande el numero de células T efectoras

antitumorales se amplifica in vivo antitumorales se amplifica in vivo

• El efecto antitumoral es muy intenso y efectivoEl efecto antitumoral es muy intenso y efectivo

Materiales y métodosMateriales y métodos

Page 16: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

MaterialMateriales y es y MMéétodtodooss:: Background e ilustraciones didácticas Background e ilustraciones didácticas

detalladas sobre cómo lo hicierondetalladas sobre cómo lo hicieron

1.1. ProtocoloProtocolo

2.2. Métodos de selección y expansiónMétodos de selección y expansión

3.3. Estudio de efectos terapéuticos y Estudio de efectos terapéuticos y secundariossecundarios

Page 17: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

25% mixed responses

50% Objective Responses

11.5% complete responses

Linfodepletion followed by adoptive cell Linfodepletion followed by adoptive cell transfer (L+ACT)transfer (L+ACT) and IL-2 treatmentand IL-2 treatment

3.3. T Cell AdministrationT Cell Administration (heterogeneous populations)(heterogeneous populations)

1. TIL Extraction Cell ActivationClone expansion and demonstration of antileukemic activity

2. LymphodepletionCiclophosphamide + Fludarabine

Clinical response

TC

E

T CellCélula TCél

ula T

T Cell

T Cell

Célula T

T Cell

+IL-2 high dose+IL-2 high dose

Page 18: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

2. Selección y expansión de 2. Selección y expansión de linfocitos T antitumoraleslinfocitos T antitumorales

Cytokine release assay induced by autologous tumor cells

Expansion withOKT-3 allogeneic feeder + IL-2 6000 UI/ml

----+--

Reinfusión

In vivoIL-2

Materiales y métodosMateriales y métodos

Page 19: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

3. Estudio de efectos: caracterización de los 3. Estudio de efectos: caracterización de los linfocitos expandidos e infundidoslinfocitos expandidos e infundidos

1.1. Correceptores CD4/CD8Correceptores CD4/CD8

2.2. Actividad citotóxicaActividad citotóxica

3.3. Especificidad antigénica, reactividadEspecificidad antigénica, reactividad• Capacidad de unión a tetrámeros con ag de melanomaCapacidad de unión a tetrámeros con ag de melanoma• Actividad lítica específicaActividad lítica específica• Producción citocinasProducción citocinas

4.4. Región variable de la cadena Región variable de la cadena (V (V

Materiales y métodosMateriales y métodos

Page 20: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Estudio de efectos terapéuticos y Estudio de efectos terapéuticos y secundarios secundarios

• Efecto terapéuticoEfecto terapéutico– Respuesta completa desaparición completa del tumorRespuesta completa desaparición completa del tumor– Respuesta parcial (PR) Reducción >50% diámetros de todas Respuesta parcial (PR) Reducción >50% diámetros de todas

las metastasis observables6/13las metastasis observables6/13– Respuesta mixta (MR) Regresión de algunas metástasis Respuesta mixta (MR) Regresión de algunas metástasis

10/13 10/13

• Efectos secundarios (Autoinmunidad) Efectos secundarios (Autoinmunidad) – Vitiligo depigmentación autoinmune por destrucción de Vitiligo depigmentación autoinmune por destrucción de

melanocitosmelanocitos– Uveitis inflamación de la uveaUveitis inflamación de la uvea

Materiales y métodosMateriales y métodos

Page 21: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Resultados (y más)Resultados (y más)

1. 1. Muestra el método, diseño experimental, Muestra el método, diseño experimental,

resultado y conclusión de cada experimento resultado y conclusión de cada experimento

– en la misma diapositiva en la que se muestran los en la misma diapositiva en la que se muestran los

resultados del experimentoresultados del experimento

– No olvides el significado del resultado: la conclusión No olvides el significado del resultado: la conclusión

Page 22: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Índice ExperimentosÍndice Experimentos

1.1. Demografía población pacientesDemografía población pacientes

2.2. Repoblación linfoideRepoblación linfoide

3.3. Clonalidad de la repoblación VClonalidad de la repoblación V y CDR3 y CDR3

4.4. Persistencia de las células transferidasPersistencia de las células transferidas

5.5. Especificidad y función efectora de las células Especificidad y función efectora de las células transferidastransferidas

6.6. Efectos clínicos: manifestaciones antitumorales y Efectos clínicos: manifestaciones antitumorales y autoinmunesautoinmunes

7.7. Hallazgos anatomo-patológicos infiltración anti Hallazgos anatomo-patológicos infiltración anti tumoral de repertorio restringido tumoral de repertorio restringido

ResultadosResultados

Page 23: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Resultados Evolución temporal de las cifras de linfocitos (ALC,) y neutrofilos (ANC, Ο) cifras resurgen y se mantienen altas. Conclusión Los linfocitos reinfundidos repueblan al paciente, linfocitosis y extravasación

2. Repoblación linfoide:2. Repoblación linfoide:Método: linfodepleción, reinfusión, recuentos seriados de cifras linfocitos y neutrófilos

ResultadosResultados

Page 24: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

3. estudios de clonalidad3. estudios de clonalidad(background)(background)

–TCR es responsable de la Reactividad TCR es responsable de la Reactividad inmune de los linfocitos T. inmune de los linfocitos T.

–Región variable beta (VRegión variable beta (V expresada expresada por los linfocitos T por los linfocitos T

–Cada linfocito expresa una de 23 Cada linfocito expresa una de 23 posiblesposibles

–En un repertorio policlonal cada VEn un repertorio policlonal cada V es es expresado por un pequeño porcentaje expresado por un pequeño porcentaje de linfocitos Tde linfocitos T

–Un repertorio oligoclonal indica que Un repertorio oligoclonal indica que algunos clones están muy crecidos algunos clones están muy crecidos determinados Vdeterminados V estan muy elevados estan muy elevados

Page 25: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

3. Estudios de clonalidad3. Estudios de clonalidad• Objetivo:Objetivo:• Uso de genes Uso de genes VVTCRTCRen linfocitos CD8 + infiltrantes de en linfocitos CD8 + infiltrantes de

tumor (TIL) y linfocitos de sangre periférica tras el tumor (TIL) y linfocitos de sangre periférica tras el

tratamiento.tratamiento.

ResultadosResultados

•Método:Método:• Para investigar el destino de las células T transferidas se Para investigar el destino de las células T transferidas se

examinó la región variable delexaminó la región variable del TCR usando anticuerpos TCR usando anticuerpos

específicos frente a regiones variables de su cadena beta (específicos frente a regiones variables de su cadena beta (VV

para medir el % de linfocitos T que expresan cada una de las para medir el % de linfocitos T que expresan cada una de las

23 regiones V23 regiones V

Page 26: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

3. Estudios de clonalidad

Conclusión: Los clones derivados de los TIL injertan persistentemente. Linfocitos de sangre repoblados provienen de los clones predominantes en los TIL y persisten.

Resultado Vexpression was highly skewed (under-lined and bold) in 5 of the 6 administered TIL, and some of these same Vfamilies were also over represented in the PB of the patients at one week after cell transfer,

Resultados

Page 27: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Fenotipo blástico de los PBLFenotipo blástico de los PBL de pacientes reinfundidos de pacientes reinfundidos

Resultado they showed the highly activated phenotype of the lymphocytes, which contain irregular and hyperchromatic nuclei, high nuclear to cytoplasmic ratio and toxic granulation. Conclusión los linfocitos infundidos mantienen su proliferación in vivo

ResultadosResultados

Método Blood smears from pat 9 (left) and pat 10 (right) during the lymphocytic episodes

Page 28: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Mecanismos de la inmunidad Mecanismos de la inmunidad antitumoral (background)antitumoral (background)

• Los linfocitos TCD8 reconocen antígenos en Los linfocitos TCD8 reconocen antígenos en moléculas de histocompatibilidad de clase I moléculas de histocompatibilidad de clase I presentados por células de melanoma y las presentados por células de melanoma y las matan. matan.

• El tejido tumoral se inflama y atrae más El tejido tumoral se inflama y atrae más leucocitos: APCs y linfocitos T.leucocitos: APCs y linfocitos T.

• El alelo más frecuente de la molécula HLA-A El alelo más frecuente de la molécula HLA-A es el A2es el A2

• HLA-A2 presenta eficientemente antígenos HLA-A2 presenta eficientemente antígenos de melanoma bien caracterizados.de melanoma bien caracterizados.

• Tetrámeros HLA-2 pueden cargarse con Tetrámeros HLA-2 pueden cargarse con péptidos antigénicos de melanomapéptidos antigénicos de melanoma

Ag.Ag.

HLA-A2HLA-A2

Gp100Gp100MART-1MART-1

Page 29: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Diseño PBLs from patients 9 (left) or 10 (right) were analyzed by

FACS using antibodies against specific TCR Vfamilies (V7, ; V12, ; V14, ; average of other V) or HLA-A2/MART-1:26-35(27L)

tetrameric complexes (A2/MART tetramer, ). Resultado Las células VB12 son antiMART. Las células

antimelanoma dominan en los PBL tras 4 meses.

Conclusión La repoblación con células antimelanoma es persistente

por más de 4 meses

4. Persistence of the MART-1 reactive clones4. Persistence of the MART-1 reactive clones ResultadosResultados

Método Método marcaje con antiVB y tetrameros HLA-A2/MART-1

Page 30: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

5. Mecanismos de la inmunidad 5. Mecanismos de la inmunidad antitumoralantitumoral

• Linfocitos T CD4 al reconocer antígenos Linfocitos T CD4 al reconocer antígenos tumorales producen IFNtumorales producen IFN. .

• El IFNEl IFN induce sobrexpresión de moléculas de induce sobrexpresión de moléculas de histocompatibilidad de clase I y II en las células histocompatibilidad de clase I y II en las células tumorales.tumorales.

• Esto es un suicidio para las células tumorales si Esto es un suicidio para las células tumorales si el tumor esta infiltrado por linfocitos T el tumor esta infiltrado por linfocitos T antitumorales.antitumorales.

Page 31: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

5. Función de células T5. Función de células Ttransferidas: Secreción de interferón transferidas: Secreción de interferón

Resultado Responden a antígenos de melanoma presentados en HLA-A2. Conclusión secretan IFN en respuesta a melanoma, IL-2 aumenta secreción

ResultadosResultados

Método PBL collected 9 days (pat 9, left, pat 10, right) after cell transfer were cultured overnight in the absence (striped boxes) or presence (solid boxes) of 600 IU/ml IL-2, washed, and tested for cytokine release Diseño Se usan distintas APCs para estimiular la secrección

Page 32: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Resultados The infused TIL () and PBL collected 7 days after cell transfer (), but not pretreatment PBL () from patients 9 (left) and 10 (right) specifically lysed the HLA-A2 + melanoma cell line 526 (lower graphs) but not the HLA-A2 - 938 (upper graphs).Conclusión La infusión con TIL genera actividad CTLMHCI restricta por HLAA2.

5. Actividad Citotóxica 5. Actividad Citotóxica ResultadosResultados

Método: Método: lisis de de células de melanoma marcadas radioactivamentelisis de de células de melanoma marcadas radioactivamente

TILTIL

PBLPBLafterafter

PBL beforePBL before

Page 33: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

6. Manifestaciones Antitumorales de la 6. Manifestaciones Antitumorales de la transferencia de linfocitos T anti-MART-1transferencia de linfocitos T anti-MART-1

Conclusión los linfocitos transferidos pueden eliminar metástasis

ResultadosResultados

Método Tomografía computerizada

Page 34: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

6. Efectos secundarios: vitíligo6. Efectos secundarios: vitíligo

manifestaciones autoinmunes: As cancer regressed in the lower manifestaciones autoinmunes: As cancer regressed in the lower extremity of patient 9, patchy areas of vitiligo appeared as shown extremity of patient 9, patchy areas of vitiligo appeared as shown on the forearm. on the forearm.

Conclusión los linfocitos transferidos agreden no solo a células de los linfocitos transferidos agreden no solo a células de melanoma también a melanocitos cutáneos normales melanoma también a melanocitos cutáneos normales

ResultadosResultados

Page 35: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

7.7. Efecto del tratamiento en los nódulos tumorales:Efecto del tratamiento en los nódulos tumorales:

scant CD8 + cells

diffuse CD8 + infiltrateubiquitous expression in tumor cells

strong stromal cell staining but weak of tumor cells

sporadic staining (macrophages) but minimal of tumor cells

ResultadosResultados

Conclusión La infusión induce: 1) Infiltration by CD8+ T cells,2) Expression of MHC I y II by tumor cells

Metodo inmunohistoquímica en nodulos tumorales

Page 36: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

7. Inmunopatología en nódulos tumorales: 7. Inmunopatología en nódulos tumorales: repertorio de linfocitos infiltrantesrepertorio de linfocitos infiltrantes

Resultados A resected tumor nodule (p9 day 20) shyows infiltrating CD8 + Vb12 +, but no Vb7 + T lymphocytes. Similarly, a residual tumor nodule biopsied (p10, day 14) contained areas densely infiltrated by CD8 + Vb7 + T cells but few Vb12 +. Conclusión Los linfocitos infiltrantes en los nodulos tumorales expresan los mismos VB de los TIL originales

ResultadosResultados

Metodo Metodo inmunohistoquímica en nodulos tumoralesinmunohistoquímica en nodulos tumorales

Page 37: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

DiscusiónDiscusión1.1. Sipnosis de resultadosSipnosis de resultados lista lista

compuesta de las conclusiones principales compuesta de las conclusiones principales de los experimentos más relevantes.de los experimentos más relevantes.

2.2. Integración de resultadosIntegración de resultados3.3. AplicaAplicaccionionees s ee implica implicaccionioneses4.4. Repercusiones y recomendacionesRepercusiones y recomendaciones

Page 38: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

1. Sipnosis1. Sipnosis de los result de los resultadoadoss y y conclusionesconclusiones

1.1. Células tumorales pueden usarse para activar TIL que pueden Células tumorales pueden usarse para activar TIL que pueden

expandirse expandirse in vitroin vitro

2.2. La reinfusión en el paciente linfodeplecionado provoca repoblación La reinfusión en el paciente linfodeplecionado provoca repoblación

persistente por células eficaces en la eliminación de células persistente por células eficaces en la eliminación de células

tumorales tumorales

3.3. Las células antitumorales son capaces de detener el crecimiento del Las células antitumorales son capaces de detener el crecimiento del

tumor localmente en un 75% de los pacientes tratados y en casi un tumor localmente en un 75% de los pacientes tratados y en casi un

50% de los pacientes son capaces de detener su crecimiento en todo 50% de los pacientes son capaces de detener su crecimiento en todo

el organismo y destruir mas de un 50% de la masa tumoral el organismo y destruir mas de un 50% de la masa tumoral

DiscusiónDiscusión

Page 39: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

•Los autores demuestran que la terapia con linfocitos Los autores demuestran que la terapia con linfocitos

antitumorales en huéspedes linfodepleccionados es la mejor antitumorales en huéspedes linfodepleccionados es la mejor

terapia para el melanoma metastáticoterapia para el melanoma metastático

2. Integra2. Integra los los resultresultados de los experimentoados de los experimentos s en un mensaje más global en un mensaje más global

DiscusiónDiscusión

Page 40: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

• Esta aproximación puede ser igualmente exitosa en Esta aproximación puede ser igualmente exitosa en

otros contextosotros contextos

• Inmunoterapia de otros tumoresInmunoterapia de otros tumores

• Inmunoterapia de infección por HIV y HCV Inmunoterapia de infección por HIV y HCV

DiscusiónDiscusión

3. Discu3. Discute las te las aplicaaplicaccionionees s ee implica implicaccionioneses

Page 41: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

La repoblación linfoide con células La repoblación linfoide con células antileucémicas expandidas antileucémicas expandidas in vitroin vitro en en pacientes linfodeplecionados tiene un enorme pacientes linfodeplecionados tiene un enorme potencial como terapia antitumoral potencial como terapia antitumoral Los investigadores en el campo no debemos Los investigadores en el campo no debemos dejar escapar una oportunidad asídejar escapar una oportunidad así

DiscusiónDiscusión

4. Repercusiones4. Repercusiones

Page 42: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

CréditosCréditos

• Búsqueda bibliográfica y recursos on line Búsqueda bibliográfica y recursos on line Eduardo ReyesEduardo Reyes

• Animaciones y transiciones Animaciones y transiciones David Díaz David Díaz

• Guión y coordinaciónGuión y coordinación Alfredo PrietoAlfredo Prieto

Page 43: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Bibliografía y webgrafíaBibliografía y webgrafía

• Manuales y diccionarios que has utilizadoManuales y diccionarios que has utilizado

• Direcciones de los sitios web de los que has Direcciones de los sitios web de los que has obtenido información obtenido información

Facilitar a tu audiencia el acceso a Facilitar a tu audiencia el acceso a las fuentes de información que has utilizadolas fuentes de información que has utilizado

Page 44: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

CuestionesCuestiones

Page 45: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Hemos vistoHemos visto

1.1. Como ordenar la presentación de un artículoComo ordenar la presentación de un artículo

2.2. La introducción a la introducción es muy importanteLa introducción a la introducción es muy importante

3.3. Hay que aportar imágenes para ilustrar la introducción y Hay que aportar imágenes para ilustrar la introducción y los materiales y métodos.los materiales y métodos.

4.4. Como contar un experimento recapitulando su Como contar un experimento recapitulando su background e integrando si es posible en una background e integrando si es posible en una diapositiva: método, diseño experimental resultado y diapositiva: método, diseño experimental resultado y conclusión. conclusión.

Page 46: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

No olvidéisNo olvidéis

• Presentación del articuloPresentación del articulo

1.1. Definir la cuestión a la que responde el artículoDefinir la cuestión a la que responde el artículo

2.2. Aportar background para comprender el Aportar background para comprender el contexto de esta cuestión y por que es contexto de esta cuestión y por que es importanteimportante

3.3. Cuando sea útil mostrar los modelos y diseños Cuando sea útil mostrar los modelos y diseños experimentalesexperimentales

4.4. Presentar los datos de las figuras describir como Presentar los datos de las figuras describir como se realizan los ensayos y las conclusiones que se se realizan los ensayos y las conclusiones que se alcanzan.alcanzan.

Page 47: ¿Cómo presentar un artículo original de investigación? Unidad mixta CSIC/UAH Alfredo Prieto Martín Professor in Immunology at Alcalá University Coordinator

Ejercicios Evaluación de vuestro Ejercicios Evaluación de vuestro artículoartículo

1.1. Evaluar el artículo que presentéis:Evaluar el artículo que presentéis:2.2. Comentar los aspectos fuertes y débiles que Comentar los aspectos fuertes y débiles que

encontráis en el abordaje y el diseño encontráis en el abordaje y el diseño experimental experimental

3.3. Juzgar si están bien soportadas y justificadas las Juzgar si están bien soportadas y justificadas las conclusionesconclusiones

4.4. Describir asuntos pendientes o cuestiones o Describir asuntos pendientes o cuestiones o nuevas áreas que el artículo abre para estudios nuevas áreas que el artículo abre para estudios futuros.futuros.