colecta y montaje de insectos

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METODOS DE COLECTA Y MONTAJE

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UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZN HUANUCOFACULTAD DE CIENCIAS AGRARIASESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE AGRONOMA

INFORME DE PRCTICAS PREPROFESIONALESCOLECTA Y MONTAJE DE INSECTOS DE IMPORTANCIA AGRICOLA EN EL VALLE DE HUNUCO Y LA UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA UNALM

PALACIN GUERRA, Paul Simin

HUNUCO PER2012

I. INTRODUCCIONLos insectos constituyen el grupo ms diverso de los seres vivos, ya que constituyen casi el 80 % de las especies de animales conocidas, se estima que hasta ahora el nmero de especies descritas representa ms del milln, encontrndose a grandes altitudes sobre el nivel del mar, en los climas ms inhspitos (desiertos), en interior de bosques y fuera de ellos, en aguas calmadas y torrentosas. Tambin posados sobre ramas, hojas, frutos, en el interior de troncos, bajo piedras, entre la maleza, sobre y entre las hojarascas, en el interior de semillas, en deposicin de animales, bajo cortezas y otros sustratosLa colecta de insectos empleando diversos implementos, diseados de acuerdo al hbito y hbitat de los diferentes grupos de insectos, es el punto de partida de los estudios de diversidad, ecologa, sistemtica, biogeografa, comportamiento, aquellos relacionados al control de plagas Los ejemplares montados y clasificados adquieren un valor adicional, ya que al ser depositados en colecciones son un respaldo del trabajo, especialmente si corresponden a ejemplares con los cuales se han hecho descripciones taxonmicas, lo cual los convierte en referencias para investigaciones futuras. Debido a esto, un correcto montaje, una buena identificacin y buenas condiciones de almacenamiento son fundamentales para mantener a largo plazo el valor de los insectos depositados en las colecciones.En el presente informe de prcticas pre profesionales se tratan aspectos tericos de los mtodos de colecta y montaje de insectos, asimismo, se describe las actividades realizadas en la Universidad Nacional Agraria La Molina Museo de Entomologa Klaus Raven Bller, que consisti en la colecta y montaje de puparios de mosca blanca, una de las plagas ms importantes de la regin, pas y del mundo, y en el Valle de Hunuco, la de plagas y controladores biolgicos.

OBJETIVOS

Objetivo general

Obtener experiencia en la colecta y montaje de insectos de importancia agrcola en La Molina y Hunuco

Objetivos especficos Complementar la formacin acadmica aplicando los conocimientos tericos y prcticos adquiridos durante la formacin profesional en la Escuela Acadmico Profesional de Agronoma en el rea de Sanidad Vegetal. Desarrollar habilidades y destrezas en la colecta y montaje de insectos de importancia agrcola.

II. REVISION DE LITERATURA

2.1. COLECTA Mrquez (2005), indica que requiere aplicar una variedad amplia de tcnicas debido al gran nmero de especies y variedad de hbitos de vida que presentan. La mayora de las tcnicas utilizadas responden a objetivos especficos de cada tipo de estudio.Lorea (2004), seala que los insectos se deben buscar en aquellos lugares en donde se encuentran o refugian como en las flores, hojas, hojarasca, bajo troncos cados, frutos y semillas, as: a) Flores: donde se encuentran insectos pequeos, en este caso es recomendable cortar la flor o inflorescencia y meterla en un frasco con veneno.b) Hojas: se encuentran larvas de lepidpteros, himenpteros, colepteros y hompteros entre otros, que se estn alimentando de las hojas. En este caso se pueden llevar para colocarlas en frasquitos con alcohol, pues ese es el modo de conservarlas, o llevarlas vivas y criarlas.c) Hojarasca: se encuentran insectos de diversos rdenes.d) Bajo troncos cados: Se pueden encontrar hompteros, colepteros, y en los huecos se pueden encontrar mariposas nocturnas refugindose del da.e) Frutos y semilla: se encuentran insectos de pequeo tamao, tanto adultos como estados inmaduros.2.1.1. Colecta directaEs aquella en la que el colector busca de manera activa a los organismos en su hbitat, en los sitios donde stos habitan. Esta estrategia es utilizada ampliamente por la mayora de los colectores, quienes se apoyan de herramientas e instrumentos que varan segn el sustrato o sitio de bsqueda (Mrquez 2005).Zapata (2009), seala que el equipo bsico y especializado para la colecta de especmenes es:a) Bsico: pinzas largas, frascos o envases de distintos tamaos, pala de mano, bolsas plsticas, cmara letal, lupa de mano, cinta adhesiva, lpiz, libreta de campo, cmara fotogrfica y papel blanco para rotular.b) Especializado: redes de captura (de aire, vegetacin y agua) y frasco aspirador.

2.1.2. Colecta indirectaEs aquella en la que se colectan organismos utilizando algn tipo de atrayente y que no implica bsqueda directa en los sustratos donde stos habitan. Comnmente este tipo de colecta utiliza trampas (Mrquez 2005).Insectos de Chile (2012), menciona los tipos trampas para colectar insectos a) Trampas Barber: consiste en recipientes (vasos plsticos o tarros) enterrados a nivel del suelo.b) Embudo Berlese: consiste en un embudo con un recipiente para contener la materia vegetal separada por una rejilla metlica y en extremo del embudo un recipiente con alcohol. Para acelerar este proceso se recomienda en poca de verano exponerlos a la luz solar, en caso contrario someterlos a luz artificial.c) Trampa de luz: es un buen mtodo, ya que muchos insectos son atrados por la luz durante la noche. Esta puede ser de 2 tipos; instalando lmparas de luz fluorescente, montadas sobre un embudo que conduce a una cubeta recolectora provista con agua y detergente en polvo a una concentracin del 1%, o empleando una tela blanca extendida en el suelo (tambin se puede colgar la tela entre dos rboles formando una especie de J) y en su centro una lmpara. Cuando se atrapan los insectos se pone inmediatamente una tarjeta de identificacin. Esto puede hacerse al atraparlos o al llegar al laboratorio. Las etiquetas siempre se colocan dentro del frasco o recipiente donde se guarden. Estas se hacen de papel grueso o cartulina, escribiendo con tinta indeleble y con letra legible (Medina 1977).

2.2. PRESERVACIONMrquez (2005), define la preservacin como el mantenimiento de los ejemplares colectados en las mejores condiciones posibles para su estudio.Necesariamente para poder preservar los insectos, tenemos que sacrificarlos, es decir, matarlos. Zapata (2009), manifiesta como dar muerte a los insectos: Usando frasco letal: para insectos de cuerpo duro (colepteros, hempteros, himenpteros, ortpteros, etc) y para mariposas pequeas o medianas Cuando las mariposas son grandes inyectar alcohol en el trax Las larvas de distintos rdenes se les mata con agua hirviendo para ser colocados posteriormente en alcohol de 70 % 80 %.

Mrquez (2005), seala que los insectos pueden ser preservados en tres formas, en lquido, en seco y en preparaciones.

2.2.1. Preservacin en lquidoEl lquido comnmente utilizado en la preservacin de insectos es el alcohol etlico que puede variar entre 70 % y 80 % (Merritt et al. (1996) citado por Mrquez 2005).Borror et al. (1989) y Llorente et al. (1985) citados por Mrquez (2005), manifiestan que existen algunos lquidos fijadores de tejidos internos que se usan cuando es necesario conservar esas partes para su estudio: el XA (xilol y alcohol al 95 % en partes iguales). el XAAD (4 partes de xilol, 6 partes de alcohol isoproplico, 5 partes de cido actico glacial y 4 partes de dioxano). el KAAD (1 parte de queroseno, 7-9 partes de alcohol al 95 %, una parte de cido actico glacial y una parte de dioxano). La solucin de Hood, que est formada por alcohol etlico al 70-80% (95 ml) y glicerina (5 ml). La solucin de Bouin, conformada por alcohol etlico al 80 % (150 ml), formaldehdo (60 ml), cido actico glacial (15 ml) y cido pirico (1 g).2.2.2. Preservacin en seco Es un mtodo que puede funcionar por algunos meses o aos, colocndose en el interior de los recipientes papel absorbente o aserrn rociado con acetato de etilo y sellados firmemente. El acetato de etilo repele eficientemente a los Dermstidos (escarabajos pequeos cuyas larvas se comen por dentro a los insectos de las colecciones) y posiblemente tambin a los hongos; adems los mantiene blandos y listos para el montaje. (Mrquez 2005).Los adultos de insectos de los rdenes: Plecoptera (perlidos), Dermaptera, Odonata, Neuroptera, Thysanura, Hemiptera, Homoptera, Diptera (excepto cecidomiidos, y psicodidos), Coleoptera y Lepidoptera pueden preservarse en seco. (Medina 1977).

2.2.3. Preservacin en preparados2.1.1. 2.1.2. 2.1.3. a) Preparados permanentesAguilar-Morales et al. (1996) y Gavio et al. (1977) citados por Mrquez (2005), sealan que la tcnica consiste en lo siguiente: Hacer una pequea puncin en la regin ventral del abdomen del organismo. Posteriormente, colocar en un tubo de ensayo agregando hidrxido de potasio al 10 % y calentar poco a poco, luego revisar en el microscopio estereoscpico o compuesto hasta haber obtenido slo el exoesqueleto del insecto. Se puede teir con colorante (como la violeta de genciana), por cinco minutos; en caso de que el organismo sea de color muy oscuro, no es necesario teirlo. Posteriormente deshidratar con alcoholes graduales al 30, 50, 60, 70 y alcohol absoluto. permaneciendo el organismo en cada alcohol por un minuto, escurriendo el exceso entre cada cambio. Aclarar con xilol, seguido hacer el montaje con resina sinttica en un portaobjetos y cubrir con el cubre objetos, luego se deja secar, para posteriormente etiquetarlo.

b) Preparaciones temporales Aguilar-Morales et al. (1996) y Gavio et al. (1977) citados por Mrquez (2005), manifiestan que cuando se requiera hacer observaciones detalladas de estructuras especficas (las antenas, patas, alas, el aparato bucal y los genitales) el procedimiento es el siguiente: Consiste en colocar la estructura de inters sobre un portaobjetos, luego hidratar con agua, despus colocar lugol o gelatina glicerinada. Posteriormente agregar colorante, como azul de metileno, azul de lactofenol o safrina acuosa al 1%. Cuando se utiliza gelatina glicerinada es frecuente que se formen burbujas en la preparacin, stas se pueden eliminar con vapor de agua caliente, y el exceso de glicerina con un lienzo hmedo con agua.

2.2. 2.3. MONTAJEBanegas (2012), reporta que para el montaje de los insectos para una coleccin existen dos formas: montaje directo y en lminas.2.3.1. Montaje directoMedina (1977), sostiene que los insectos de ms 2 cm de largo se montan atravesndolos con alfileres apropiados para este uso insertndolos en puntos especficos del cuerpo, para cada rden.Gallo et al. (1978), indica que los alfileres entomolgicos se encuentran enumerados desde el 000, 00, 0, 1, 2 hasta el 7, estos aumentos estn de acuerdo al espesor de los insectos. Para mantener una uniformidad en el montaje se emplea una gradilla de montar. La ubicacin del pinchado de los alfileres estn determinadas dependiendo del Orden: Coleptera: en el litro derecho cerca de la base. Hemptera: en el escutelo. Dermptera: justo en el centro de los litros. Mantodea: en el metatrax. Los insectos de los dems rdenes son montados en el medio del metatrax. Banegas (2012), indica que al pincharse no se deterioren ni el dorso ni el vientre, por ser estructuras importantes para la identificacin. Adems procurarse que el alfiler mantenga una posicin perpendicular a los ejes longitudinal y transversal del insecto. Gallo et al. (1978), sostienen que para el montaje de lepidpteros se utiliza un bloque de madera, haciendo que slo los dos pares de alas se mantengan estirados, y deben encontrarse dentro del margen del ala anterior perpendicular al eje del cuerpo.Banegas (2012), menciona el procedimiento para el montaje: Colocar el insecto en el extensor, y con alfileres muy finos extender las alas anteriores, de tal forma que su margen posterior forme un ngulo de 90 con el eje longitudinal del cuerpo. Igualmente extender las alas posteriores de tal manera que el margen posterior de las alas delanteras se superponga ligeramente sobre el margen anterior de las alas posteriores. Seguidamente las alas se fijan con tiras de cartulina o papel flder y alfileres comunes. En el caso insectos pequeos se tiene dos opciones: usando alfileres minuten nadeln o minuten, previo montaje en pedacitos de corchos sobre tiras plsticas que estn montadas en alfileres; o pegando con alguna clase de goma a pequeos tringulos de cartn o cartulina que estn previamente montados en alfileres. (Medina 1977).3.2.2. Montajes en lminasBanegas (2012), reporta que en algunos casos deben realizarse montajes de partes pequeas para realizar observaciones microscpicas. En este caso se usan porta y cubre objetos.Evans (2008), sostiene que son dos los que medios en que se montan especmenes de tamao microscpico: a) El medio Hoyer's: es un medio muy rpido, compuesto a base de agua destilada, goma arbiga, hidrato de cloral y glicerina, usualmente se puede ver bien las caractersticas de espcimen (buena ndice reflectivo). Una desventaja es que no es un medio permanente y no agarra bien la tinta usada en la preparacin. b) Blsamo de Canad: es una resina fluida obtenida del abeto (Abies balsmica), considerado un medio permanente que retiene bien la tinta usada en la preparacin. Toma ms tiempo en secar, se tiene que usar varios qumicos durante la preparacin (KOH, alcohol, aceite del clavo, xileno).Malumphy (s/f) y Servn (2004), indican que para el montaje de puparios de moscas blancas se requiere el uso de sustancias especiales como el Blsamo de Canad o el medio Hoyer.Voegtlin et al. (2003), seala que existen varios mtodos para el montaje de fidos. Estos se pueden dividir en dos grupos generales: los que utilizan el Blsamo de Canad como medio, y los mtodos que utilizan gomas de base, como Hoyers o Berlese. Estos mismos insumos tambin se pueden aplicar en el montaje de queresas, a excepcin del Berlese, as como reporta Evans (2008).

III. MATERIALES Y METODOS

3.1. LUGAR DE EJECUCINLa presente Prctica Pre Profesional se llev a cabo en el Museo de Entomologa Klaus Raven Bller de la Universidad Nacional Agraria La Molina UNALM desde el 17 de enero hasta el 29 de febrero del presente ao. Ubicacin PolticaPas:PerRegin:LimaProvincia:Lima Distrito:La Molina

Posicin Geogrfica Latitud sur : 1204' 58.59'' Longitud oeste:7656' 22.86'' Altitud :244 m.s.n.m.

La Prctica Pre Profesional, fue culminada en el Valle de Hunuco, en las localidades de Cayhuayna (Instituto de Investigacin Frutcola Olercola), Marabamba, Colpa Baja y Colpa Alta, desde el 14 de marzo hasta el 31 mayo del presente ao

Ubicacin Poltica del Valle de Hunuco Pas : Per Regin : Hunuco Provincia : Hunuco Distrito : Hunuco

Las Posiciones Geogrficas de los lugares de estudio fueron:

Latitud sur : 0957'07'' Longitud oeste :7614'54'' Altitud : 1 947 m.s.n.m.CAYHUAYNA

Latitud sur : 0956' 43.35'' Longitud oeste :7615'36.93'' Altitud :2 027 m.s.n.m.MARABAMBA

Latitud sur :0952' 53.33''Longitud oeste :7614' 29.13''Altitud :1 860 m.s.n.m.COLPA BAJA

Latitud sur :0958' 50.54''Longitud oeste:7610'19.87''Altitud : 1 939 m.s.n.m.COLPA ALTA

3.2. CONDICIONES AGROECOLGICAS Segn, el Mapa Ecolgico del Per actualizado por la Oficina Nacional de Evaluacin de Recursos Naturales (ONERN), los lugares donde se realizaron las practicas pre profesionales se encuentran ubicados en las siguientes zonas de vida:a) Universidad Nacional Agraria La Molina desierto desecado Subtropical (dd - S): con bio temperaturas media anual mxima de 25.2 C y la media anual mnima de 17,9 C. La relacin de evapotranspiracin potencial es de 32 64 veces la precipitacin, con una precipitacin anual de 31.25 65.5 mm.

b) Valle de Hunuco monte espinoso Premontano Tropical (mte-PT): pertenece a las localidades de Cayhuayna, Colpa baja y Colpa Alta, con bio temperatura media anual mxima de 24.5 oC y la mnima 18.8 oC. El promedio de la precipitacin total anual de 532.8 mm y el promedio mnimo 226 mm. La relacin de evapotranspiracin vara entre 2 a 4. estepa espinoso- Montano Bajo Tropical (ee- MBT): a la que pertenece Marabamba, con bio temperaturas media anual mxima de 24.5 C y la media anual mnima de 17.8 C. La relacin de evapotranspiracin potencial es de 2 4 veces la precipitacin, con una precipitacin anual de 1 414 1 600 mm.

3.3. ACTIVIDADES REALIZADAS3.3.1. Universidad Nacional Agraria la Molina (UNALM)3.3.1.1. Trabajo de campo Consisti en colectar puparios de mosca blanca dentro del campus de la UNALM, de manera diaria por 3 semanas, en los cultivos de palto, lcumo, ctricos, algodn, camote, asimismo, en pltano, eucalipto, pacae, guayabo, mango, ficus, molle costeo y granado, para lo cual se us una lupa de 10X. Se hizo un recorrido en zig zag en los cultivos de camote y algodn para tener una muestra representativa del campo, colectndose en cada punto hojas del tercio inferior. Para el caso de rboles frutales se dividi el campo en sectores, donde se colect slo las hojas del tercio inferior, debido al tamao de los rboles, asimismo en eucalipto, molle costeo, ficus y granado. Todas las muestras de hojas se colocaron en bolsas de papel ya que este material no ocupa espacio y por su bajo costo

3.3.1.1. Trabajo de laboratorio Extraccin de puparios de mosca blancaLas muestras colectadas del campo, fueron llevadas al laboratorio y observadas en el estereoscopio, para extraer los puparios, se utilizaron estiletes finos, los puparios extrados fueron conservados en frascos de vidrio, con alcohol al 75 % previa rotulacin en papel canson indicando el lugar de colecta, fecha de colecta, colector y hospedero. Preparado permanente Se emple el Protocolo de Malumphy (s/f), proporcionado por el del Museo de Entomologa de la UNALM:1) Se colocaron los especmenes dentro del tubo de ensayo con alcohol al 75 %, calentndolos por 20 minutos a 80 C. as mismo se repiti el procedimiento anterior, remplazndolo al alcohol por KOH al 10%. Luego se colocaron en una placa escavada.2) Blanqueamiento parcial, para lo cual se sumergi a los especmenes en etanol al 95 %, seguido se aadi gotas de amonaco y agua oxigenada, solo para puparios negros.3) Se decantaron los especmenes en agua destilada fra, luego en cido actico glacial fro, despus aadir el carbol xileno. Para la tincin adicionar gotitas de fucsina cida, y4) Finalmente se aadi algunas gotas de aceite del clavo.

Montaje Consisti en la transferencia del pupario a una lmina portaobjetos, seguido se coloc el pupario con la superficie dorsal hacia arriba. Luego se cubri con la lmina cubreobjetos adicionando, mediante una bagueta, una gota de Blsamo de Canad.

Etiquetado Se realiz terminado el montaje, con etiquetas adhesivas y un lapicero de tinta N 0.1 registrndose el lugar de colecta, colector, fecha y hospedero, luego fueron transferidas las lminas en una bandeja metlica al horno secador por 2 semanas.

3.3.1.2. Otras actividades Terminado de realizar los montajes se prosigui a la identificacin de algunas muestras con el uso de claves de Hodges & Evans (2005), para ello se emple un microscopio compuesto, donde se identific a Aleurodicus cocois en palto, molle costeo, eucalipto, guayabo y ficus; Siphoninus sp en granado; Bemisia sp en camote y algodn; y Aleurotrixus floccosus en ctricos y lcumo.

3.3.2. Valle de Hunuco3.3.2.1. Trabajo de campo ColectaConsisti en visitas a los campos de cultivo presentes en las localidades de Cayhuayna (Instituto de Investigacin Frutcola Olercola - UNHEVAL), Marabamba, Colpa Baja y Colpa Alta, donde se hizo un recorrido en zig zag para tener una muestra representativa. En cada punto se colectaron insectos adultos empleando la red entomolgica y el aspirador, cuando se trataban de insectos pequeos, seguido se procedi a la muerte de los insectos usando la cmara letal y para luego ser trasladados en frascos de vidrio.Cuando se colectaron adultos de lepidpteros, fueron almacenados en sobres entomolgicos (papel doblado en diagonal cerrado por la parte sobrante), los estados larvarios se colocaron en bolsas papel con hojas de la planta, tratando de no malograr el material. La colecta en rboles frutales consisti solamente en el recojo de hojas con daos de insectos, slo del tercio inferior de los rboles, seguidamente se almacen el material vegetal en bolsas de papel.

3.3.2.2. Trabajo de laboratorioSe realiz en el Laboratorio de Entomologa de la Universidad Nacional Hermilio Valdizn UNHEVAL, donde se procedi a lo siguiente: Seleccin del material colectado Con las muestras de insectos adultos colectadas, fueron sacados de los envases de vidrio y de los sobres entomolgicos, para seleccionar los insectos que se encontraban en buenas condiciones; las larvas colectadas se separaron por familia taxonmica (con ayuda del asesor), las mismas que fueron sometidas a crianza, al igual que los fidos parasitados y el material vegetal daado por insectos. CrianzaLas larvas colectadas fueron de la Familia Noctuidae, Pyralidae, y Psychidae, colocadas en placas petri, brindando alimento constante, humedad (fragmento de papel higinico humedecido) y limpiando el medio de crianza, para la obtencin del estado adulto.Los fidos parasitados, tambin fueron colocados en placas petri, con un pedazo de papel higinico hmedo, para la recuperacin de los parasitoides.El material vegetal con daos de insectos fue colocado en envases de plstico previamente acondicionados, para la recuperacin del estado adulto.En cada caso fueron etiquetados registrando con un lpiz y papel el lugar de colecta, la fecha y el hospedero. Preservacin Las queresas y fidos colectados fueron extradas con la ayuda del microscopio y de estiletes, las mismas que fueron preservados en tubos de anestesia con alcohol al 70 %, para realizar el montaje en otra oportunidad. Lo mismo se hizo con los parasitoides emergidos de los fidos.Los insectos que no podan ser montados ese mismo da se tuvo que hacer una cmara hmeda, que consisti en la adicin de arena hmeda desinfectada con formol en una campana extractora, para que los insectos permanezcan suaves y as evitar que se endurezcan. Se mantuvo a los insectos en la cmara hmeda por espacio de 1 a 3 das.

Montaje Se realizaron dos tipos de montaje directo, con agujas entomolgicas y en punta. Para el montaje con agujas entomolgicas se tuvo en cuenta el tamao y el Orden taxonmico de los insectos. Consisti en introducir la aguja en el mesotrax de los insectos tratando que el cuerpo quede en forma perpendicular con la aguja, enseguida se puso en la gradilla para que queden a una misma altura toda la coleccin. Para el montaje en punta se realiz slo para insectos pequeos. Consisti en la introduccin de la aguja entomolgica en un pequeo plstico de forma triangular, enseguida se gradu la altura con la gradilla, luego se doblo la punta con una pinza, en el que se adicion esmalte de uas transparente, para fijar el insecto por el lado derecho del trax. El montaje de lepidpteros se efectu el mismo procedimiento del montaje con agujas entomolgicas, con la diferencia que se emple un extensor de alas, y con la ayuda de alfileres finos se extendieron las alas anteriores. Seguidamente las alas se fijaron con la ayuda de tiras de papel y alfileres comunes.

EtiquetadoSe elaboraron etiquetas de 12 mm de largo por 8 mm de ancho a base de cartulina simple de color blanco. En cada ejemplar se colocaron dos etiquetas registrndose los datos con un lapicero de tinta N 0.1, luego fueron pinchados por el medio de ellas y para que queden a una misma altura se coloc sobre una gradilla. En la primera etiqueta se registraron, el lugar de la colecta, nombre del colector y la fecha de coleccin, en la segunda etiqueta se anot el hospedero sobre el cual se colectaron.Finalmente los insectos montados se ordenaron en rdenes taxonmicos y se almacenaron en una caja entomolgica.

3.3.2.3. Otras actividadesAdems se realiz la clasificacin del rden Hemptera en Familias taxonmicas del Laboratorio de Entomologa de la UNHEVAL, donde se encontraron la Familia Belostomatidae, Reduviidae, Coreidae, Lygaidae, Pentatomidae, Aradidae y Pyrrocoridae. Tambin se desarrollo el ablandamiento de insectos con el fin de reacondicionar las muestras.

3.4. MATERIALES, EQUIPOS Y HERRAMIENTAS 3.4.1 Materiales Frascos de vidrio. Lpiz comn. Lapicero de tinta N 0.1. Etiquetas. Placas petri. Bolsas de papel. Agujas entomolgicas N 1. Tubo de ensayo. Gradilla. Vaso de precipitados. Estiletes. Placa escavada. Goteros de punta fina. Baguetas. Pinzas. Papel bond y cansoom.3.4.2. Herramientas Lupa 10 X. Cmara letal. Red entomolgica. Aspirador.

3.4.3. Insumos Acido glacial actico. Aceite del clavo. Carbol xileno. Alcohol al 70 %, 75 % y 96 %. Agua oxigenada. Amoniaco. KOH al 10 %. Blsamo de Canad.

3.4.4 Equipos Cmara fotogrfica digital. Microscopio compuesto. Estereoscopio.

3.3. I. II. III. IV. RESULTADOS

4.1. UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA4.1.1. Colecta de puparios de mosca blancaHOSPEDEROSPUPARIOSS

BlancosNegros

Palto (Persea americana L)1525

Ctricos (Citrus sp)20

Lcumo (Pouteria lucuma)20

Pltano (Musa sp)20

Mango (Mangifera indica L)20

Eucalipto (Eucalytus globulus)15

Pacae (Inga edulis)30

Guayabo (Psidium guayaba)15

Ficus (Ficus benjamina)20

Granado (Punica granatum)1515

Molle costeo (Schinus terebinthifolius)20

Algodn (Solanum gossypi)2010

Camote (Ipomea batata)1510

TOTAL21590

De los 13 hospederos donde se hicieron las colectas, se obtuvieron 90 puparios negros y 215 puparios blancos, almacenndose en 17 frascos de vidrio de 10 ml (Cuadro N 1), encontrndose puparios blancos y negros en 4 hospederos (palto, granado, algodn y camote).

Cuadro N 1. Nmero de puparios de mosca blanca colectados por hospedero

4.1.2. Preparado de muestras permanentes Se realizaron 70 preparados permanentes (52 para puparios blancos y 18 para puparios negros), emplendose de 3 a 5 puparios por preparado (Cuadro N 2), de la siguiente manera:a) Tanto para puparios blancos y negros fueron puestos en un tubo de ensayo en alcohol al 75 %, calentndolos en un vaso de precipitados alrededor de 20 minutos. b) Luego se quit el alcohol usando una pipeta fina. Enseguida se realiz el mismo procedimiento anterior solo que se remplaz el alcohol por KOH al 10%, c) Seguido se colocaron en una placa petri con agua destilada, donde fueron examinados en el estereoscopio para quitar la cera y las partculas de polvo del cuerpo de los puparios, el cual se retiraba usando estiletes finos. A continuacin se describen los procedimientos para el caso de puparios blancos y negros:Puparios blancos1) Los puparios fueron puestos en una placa escavada, con etanol al 75 % por 10 minutos con la finalidad de enjuagar al KOH al 10%.2) Para neutralizar el remanente de KOH, a los puparios se les aadi acido glacial actico. 3) Luego se adicion algunas gotas de carbol xileno para quitar los excedentes de cera de los puparios y se les dejaba reposar las muestras por 10 minutos. 4) Igualmente, para neutralizar el excedente de carbol xileno y deshidratar por completo a los puparios se verti 2 gotas de acido glacial actico 5) Para la tincin: se adicion gotitas de cido actico glacial y algunas gotas de fucsina cida, y6) Finalmente se aadi algunas gotas de aceite del clavo, dejndolos hasta el da siguiente.Puparios negrosSe tuvo que realizar un procedimiento adicional denominado blanqueamiento parcial que consisti en:1) Se sumergi los puparios en alcohol al 95 % por 5 minutos.2) Se aadi 2 gotas de amonaco, seguido se agreg un nmero igual de gotas de agua oxigenada, dejndose reposar el tiempo necesario hasta que los puparios se pongan plidos.

Cuadro N 2. Nmero de puparios de mosca blanca preparados por hospederoLuego se repetan procedimientos del 1 al 6 empleados para el preparado permanente de puparios blancos. HOSPEDEROSPUPARIOS

Blancos Negros

Palto (Persea americana L)34

Ctricos (Citrus sp)5

Lcumo (Pouteria lucuma)5

Pltano (Musa sp)5

Mango (Mangifera indica L)5

Eucalipto (Eucalytus globulus)4

Pacae (Inga edulis)5

Guayabo (Psidium guayaba)4

Ficus (Ficus benjamina)4

Granado (Punica granatum)43

Molle costeo (Schinus terebinthifolius)5

Algodn (Solanum gossypi)53

Camote (Ipomea batata)33

TOTAL5218

4.1.3. Montaje de muestras en lminas En total se realizaron 70 montajes de las diferentes muestras practicadas en lminas porta y cubreobjetos, los mismos que fueron etiquetados y transferidos al horno secador. 4.1.4. Otras actividades Se logr identificar a Aleurodicus cocois en palto, molle costeo, eucalipto, guayabo y ficus; Siphoninus sp en granado; Bemisia sp en camote y algodn; y Aleurotrixus floccosus en ctricos y lcumo.

4.2. VALLE DE HUNUCO4.2.1. Colecta Se colectaron 193 insectos, agrupndose en rdenes taxonmicos que correspondieron a plagas y controladores biolgicos, agrupndose en rdenes y Familias taxonmicas (Cuadro N 3 y 4).4.2.2. Preservacin Los pulgones y queresas colectados slo fueron preservados en alcohol al 70 % en tubos de anestesia, al igual que los parasitoides emergidas de las placas petri.4.2.3. Montaje Los montajes practicados fueron de forma directa y en punta, de los cuales 163 directos (36 de lepidpteros, 127 de otras rdenes) y 37 en punta. Todos los insectos de importancia agrcola fueron almacenados en una caja entomolgica, ordenados en rdenes taxonmicos.

4.2.4. Otras actividades Se logr la identificacin de 7 Familias taxonmicas del rden Hemptera del Laboratorio de Entomologa de la UNHEVAL, las cuales fueron Belostomatidae, Reduviidae, Coreidae, Pyrrocoridae, Aradidae, Pentatomidae y Lygaidae. El ablandamiento de insectos fue hecho a 54 ejemplares, las mismas que fueron reacondicionadas.Lugares de coleccinrdenesFamiliasControladores biolgicos

V. VI. VII. PredatoresParasitoides

HuertoMarabambaColpa AltaColpa BajaHempteraReduviidaeX

VIII. IX. NabidaeX

X. XI. PentatomidaeX

XII. HimenpteraVespidadeX

XIII. XIV. BraconidaeX

XV. ColepteraCoccinelidaeX

XVI. DpteraTachinidaeX

XVII. XVIII. SarcophagidaeX

XIX. XX. SyrphidaeX

XXI. NeurpteraChrysopidaeX

Cuadro N 3. Familias de controladores biolgicos colectados colectados

ORDENESINSECTOS DE IMPORTANCIAFrijolMazAlfalfaAlgodnCamoteColGuayaboChirimoyoPaltoMangoTara

LepidpteraSpodoptera frugiperdaX

Plutella xylostellaX

Phyllocnistis sp.X

Oiketicus kirbyi*X

Diaphania spX

Heliothis zea*

Polilla de la taraX

Pseudoplusia includens*X

Pieris brassicaex

ColepteraCarpophilus sp.X

Diabrotica sp.X

PicudosX

DpteraAnastrepha fraterculusX

Euxesta sp.X

Tipula sp.X

HompteraPulgones **X***XX

Rhopalosiphum maidisX

Acyrthosiphon pisumX

Peregrinus maidisX

Empoasca sp. XX

Protopulvinaria spX

Ceroplastessp,X

Lepidosaphes beckiiX

HimenpteraBephratelloides spX

Familia XylocopidaeXXXX

Familia ApidaeXXXXXXX

HempteraChince de encaje (Tingidae)X***XX

Cuadro N 4. Insectos colectados en el Instituto de Investigacin Frutcola Olercola UNHEVAL, Marabamba, Colpa Alta y Colpa Baja(*) Contina en crianza(**)No se lograron identificar(***) Frijol lantreja

IV. CONCLUSIONES

Las prcticas pre profesionales permiti obtener experiencia en la colecta y montaje de insectos de importancia agrcola en la Universidad Nacional Agraria La Molina y en el Valle de Hunuco. Las experiencias adquiridas en la colecta y montaje de insectos de importancia agrcola, constituyen parte de la formacin profesional del ingeniero agrnomo. Se colectaron 90 puparios negros y 210 puparios blancos de mosca blanca en 13 hospederos, los mismos que fueron preservadas en frascos de vidrio de tapa hermtica, montadas en lminas y secadas en un horno. Las especies de mosca blanca que se lograron identificar fueron de la Sub familia Aleurodicinae: Aleurodicus cocois y de la Sub familia Aleurodinae Siphoninus sp, Bemisia sp y Aleurotrixus floccosu.s Se colectaron 193 insectos, agrupndose en rdenes taxonmicos que correspondieron a plagas y controladores biolgicos, agrupndose en rdenes y Familias taxonmicas. Los montajes practicados fueron de forma directa y en punta, de los cuales 163 directos (36 de lepidpteros, 127 de otras rdenes) y 37 en punta.

XXII. RECOMENDACIONES

Para la colecta de mosca blanca se sugiere colectar del tercio inferior de las plantas y en cuanto al montaje, emplear el cuarto estadio ninfal (pupario) o exuvias. A los estudiantes de la Escuela Acadmico Profesional de Agronoma, se recomienda realizar sus Prcticas Pre Profesionales en la colecta y montaje de insectos, ya que se obtiene mucha experiencia al estar en contacto directo con ellos, permitindonos a nosotros conocer los hbitos y daos que ocasionan.

XXIII. LITERATURA CITADA

1. Banegas, J. 2012. Consideraciones importantes para el mantenimiento de colecciones. (En lnea). (Consultado el 07 de enero de 2012). Disponible en: http://entomologiacurla.files.wordpress.com/2010/11/ consideraciones-sobre-colecciones-de-insectos.pdf2. Evans. 2008. Curso taller de Identificacin de Especies de Escamas (Coccoidea) y Mosca Blanca (Aleyrodidae) Importantes en Frutales y sus Parasitoides en Sudamrica. Lima.3. Gallo et al. 1978. Manual de entomologa agrcola. Ed Agronmica Ceres. Sao Paulo. 531 pag. 4. Hodges & Evans G. 2005. An identification guide to the whiteflies (Hemiptera: Aleyrodidae) of the southeastern United States. Estados Unidos. (En lnea). (Consultado el 27 de febrero de 2012). Disponible en http://www.fcla.edu/FlaEnt/fe88p518.pdf5. Insectos de Chile. 2012. Materiales y mtodos de colecta. (En lnea). (Consultado 15 de mayo de 2012). Disponible en http://www.insectos.cl/colecta/colecta02.php6. Lorea, L. 2004. Gua para la captura y conservacin de insectos. (En lnea). (Consultado el 05 de enero de 2012). Disponible en: http://criminalistic.org/DescargablesPDF/Guia-captura-y-conserv-insectos.pdf7. Malumphy, C. s/f. Protocolo para el Diagnstico de Organismo de Cuarentena de Bemisia tabaci (Gennadius). (En lnea). (Consultado el 02 de febrero de 2012). Disponible en: http://www.fera.defra.gov. uk/plants/plantHealth/pestsDiseases/documents/protocols/ECBemisiatabaci.pdf8. Mrquez, J. 2005. Tcnicas de colecta y preservacin de insectos. (En lnea). (Consultado el 05 de enero de 2012). Disponible en: http://www.sea-entomologia.org/PDF/GeneraInsectorum/GE-0056.pdf9. Medina, S. 1977. Manual de procedimientos para colectar, preservar y montar insectos y otros artrpodos. (En lnea). (Consultado el 06 de enero de 2012). Disponible en: http://academic.uprm.edu/ ofarrill/HTMLobj-233/Manualcolectarinsectos.pdf10. Servn, R. 2004. Especies de mosquita blanca en agroecosistemas desrticos de Baja California Sur, Mxico, y fenologa de sus hospederos. (En lnea). (Consultado el 17 de enero de 2010). Disponible en: http://207.248.177.30/mir/uploadtests/18431.66.59.1. Art.%20t%C3%A9c.%20B.%20argentifolii.pdf11. Voegtlin et al. 2003. Gua de los fidos alados (Homptera) de Costa Rica. (En lnea). (Consultado el 03 de junio de 2012). Disponible en:12. Zapata, A. 2009. Tcnicas generales de recoleccin y conservacin de invertebrados. (En lnea). (Consultado el 10 de enero de 2012). Disponible en: http://www.efn.uncor.edu/departamentos/divbioeco/ DivAni1/archivos%20guia/M%E9todos%20para%20la%20colecta%20y%20conservaci%F3n%20de%20invertebrados.pdf.

ANEXOS

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADESACTIVIDADES UNALM

ENEFEB

341234

1.Colectaxxx

2. Extraccin de pupariosxx

3.Preservacinxx

4.Preparado permanentexxxx

5. Montajexxxx

6.Etiquetadoxxxxxx

7.Otras actividadesx

ACTIVIDADES VALLE DE HUNUCO

MARABRMAY

3412341234

1.Colectaxxxxx

2.Seleccin del material colectadoxxxxx

3.Crianzaxxxxxx

4. Preservacinxxxxx

5.Montajexxxxxx

6.Etiquetadoxxxx

7.Otras actividadesxx