UNIVERSIDAD NACIONALSANTIAGO ANTNEZ DE MAYOLO

FACULTAD DE CIENCIAS DEL AMBIENTE

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL

INFORME DE LA PRCTICA N1 BIOENSAYOS CON CEBOLLAS

CURSO: BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL

DOCENTE: PALOMINO CARDENAS EDWIN

ALUMNOS:CAMILO MAURICIO ABRAHAMCOSME COVEAS OMARTITO HUERTA ESTIF

HUARAZ ANCASH PER

2014

INDICE

1. INTRODUCCION

2. OBJETIVOS

3. MARCO TEORICO3.1. BIOINDICADOR3.2. TOXICIDAD3.3. CEBOLLA3.4. ASPECTOS GENERALES DE LA CEBOLLA3.5. EFECTOS DEL CONTAMINANTE SOBRE EL BIOINDICADOR3.5.1. EFECTOS DE LOS DETERGENTES3.5.2. EFECTOS DEL BICLORURO DE MERCURIO3.5.3. EFECTOS DEL DESIFECTANTE (SAPOLIO)

4. MATERIALES

5. METODOLOGIA Y PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL5.1. PREPARACION DE LOS CONTAMINANTES EN DISOLUCION CON AGUA5.2. BIOENSAYOS CON CEBOLLA

6. RESULTADOS6.1. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y DETERGENTE6.2. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y DESINFECTANTE SAPOLIO6.3. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y AGUA DE MESA6.4. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS PINESOL6.5. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y ETANOL6.6. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y LEJIA6.7. RESULTADOS DEL BIOENSAYO CON CEBOLLAS Y RELAVE MINERO

7. DISCUSIN DE RESULTADOS

8. CONCLUSIONES

9. BIBLIOGRAFIA

10. ANEXOS

I. INTRODUCCION

Los bioensayos son mtodos estandarizados empleados para la calidad el agua, sobre todo para confirmar y evidenciar la toxicidad de diferentes aguas contaminadas por diferentes sustancias dainas para la vida; por tal razn en esta prctica se utiliz la cebolla ( Allium Cepa) sustancia muy sensible a cualquier indicacin de contaminacin ambiental, que afecta a sus diversas funciones vitales. Y en el caso de la Allium Cepa ;el grado de prejuicio de estas sustancias dainas, se determin segn el nmero y el tamao de meristemos que se pudieron desarrollar en el transcurso del tiempo ( 7 das ) al que fueron expuestas las cebollas( Allium Cepa)

Es por ello que la presente practica busca determinar la toxicidad de diferentes tipos de aguas contaminadas, para ello realizamos bioensayos que son pruebas basadas en organismos vivos, que nos proporcionaran informacin sobre lo que deseamos investigar. En este caso, los organismos que vamos a usar son la cebolla (Allium Cepa) y la anterior practica realizada la trucha (OncorhynchusMikiss).

Los cuales nos indicaran si el agua est contaminada o no. Esto se podr determinar debido a que la cebolla al desarrollar sus races es muy sensible a la presencia de contaminantes. En otras palabras, las races no pueden crecer (o crecen mucho menos) en un ambiente contaminado, y esto lo determinaremos al medir la longitud de las races jvenes de cebollas que crecieron en los diversos ambiente como son agua destilada, leja, detergente, HgCl2, pinesol, etanol y agua de relave.

II. OBJETIVO

Utilizar la cebolla como bioindicador para determinar la toxicidad de diferentes tipos de contaminantes.

III. MARCO TEORICO

3.1. Bioindicador:

El concepto de organismo indicador se refiere a especies seleccionadas por su sensibilidad o tolerancia (normalmente es la sensibilidad) a varios parmetros. Usualmente los bilogos emplean bioindicadores de contaminacin debido a su especificidad y fcil monitoreo.

La denominacin de una especie como indicadora requiere de conocimiento previo respecto a su composicin comunitaria bajo condiciones normales, incluyendo el ciclo de vida de las especies, su estacionalidad y sus variaciones naturales, de manera que sea posible comparar las condiciones antes y despus de una perturbacin ambiental

3.2. Toxicidad:

La toxicidad es la capacidad de cualquier sustancia qumica de producir efectos perjudiciales sobre un ser vivo, al entrar en contacto con el. Txico es cualquier sustancia, artificial o natural, que posea toxicidad (es decir, cualquier sustancia que produzca un efecto daino sobre los seres vivos al entrar en contacto con ellos). El estudio de los txicos se conoce como toxicologa. Ninguna sustancia qumica puede ser considerada no txica, puesto que cualquier sustancia (agua, oxgeno) es capaz de producir un efecto txico si se administra la dosis suficiente. Esto queda representado en la famosa frase de Paracelso "slo la dosis hace al veneno". Todas las sustancias poseen toxicidad, sin embargo unas tienen mayor toxicidad que otras. La intoxicacin es el estado de un ser vivo en el que se encuentra bajo los efectos perjudiciales de un txico.

3.3. Cebolla:

Allium cepa, comnmente conocida como cebolla, es una planta herbcea bienal perteneciente a la familia de las amarilidceas. Es la especie ms ampliamente cultivada del gnero Allium, el cual contiene varias especies ms que se denominan cebollas y que se cultivan como alimento. Ejemplos de las mismas son la cebolla de verdeo (Allium fistulosum), la cebolla escaloena (Allium ascalonicum) y la cebolla de hoja o ciboulette (Allium schoenoprasum).

La gran mayora de los cultivares de A. cepa pertenece al "grupo de la cebolla comn" (grupo typicum) y se les conoce comnmente como cebollas. El grupo aggregatum de cultivares comprende a la cebolla multiplicadora, que se distingue por los bulbos que aparecen y quedan envueltos por las escamas exteriores, y al chalote que forma un racimo o grupo de bulbos laterales unidos por la base. El grupo viviparum, finalmente, est compuesto por las cebollas que forman conjuntamente bulbillos y flores en las inflorescencias; este tipo de cebolla se conoce como cebolla perenne o egipcia.

3.3.1. Aspectos Generales de la Cebolla:

En cuanto su morfologa, la cebolla presenta un sistema radicular formado por numerosas raicillas fasciculadas, de color blanquecino, poco profundas, que salen a partir de un tallo a modo de disco, o disco caulinar. Este disco caulinar presenta numerosos nudos y entrenudos (muy cortos), y a partir de ste salen las hojas. Las hojas tienen dos partes claramente diferenciadas: una basal, formada por las vainas foliares engrosadas como consecuencia de la acumulacin de sustancias de reserva, y otra terminal, formada por el "filodio", que es la parte verde y fotosintticamente activa de la planta. Las vainas foliares engrosadas forman las "tnicas" del bulbo, siendo las ms exteriores de naturaleza apergaminada y con una funcin protectora, dando al bulbo el color caracterstico de la variedad. Los filodios presentan los mrgenes foliares soldados, dando una apariencia de hoja hueca. Las hojas se disponen de manera alterna.

En el primer ao de cultivo tiene lugar la "bulbificacin" o formacin del bulbo. Dicha bulbificacin tiene lugar como consecuencia de un aumento del fotoperiodo (periodo de iluminacin diurna) acompaado de un ascenso de las temperaturas, ya que la cebolla es una planta de da largo.

El segundo ao, al producirse unas condiciones ambientales favorables, tiene lugar la fase reproductiva. Esto se traduce en la emisin de un tallo o escapo floral que alcanza en torno a 1 m de altura, hueco en su interior y abombado en su parte basal. Este escapo culmina en un "capuchn" formado por tres brcteas que, en el momento de la floracin, se abren dejando al descubierto la inflorescencia. sta es de tipo umbela y presenta numerosas flores monoclamdeas de color blanco-verdoso. Las flores estn formadas por 6 tpalos, 6 estambres y un gineceo tricarpelar sincrpico con ovario spero y trilocular, con dos primordios seminales por cada lculo. La polinizacin es entomfila. El fruto es de tipo cpsula, conteniendo semillas pequeas (1 g = 250 semillas), de color negro, que presentan una cara plana y la otra convexa. Su viabilidad desciende un 30% el segundo ao, y un 100% el tercero.

3.4. Efectos del Contaminante sobre el Bioindicador:

3.4.1. Efectos de los detergentes:

Debido a su gran utilidad tanto en la industria como en los hogares, se usan en gran cantidad constituyendo una fuente contaminante del agua muy importante.Los problemas ambientales que causan los detergentes radican, fundamentalmente, en los aditivos que contienen como los blanqueadores, abrillantadores pticos, perfumes, bactericidas y agentes espumantes. Los aditivos que contienen en mayor proporcin son los sulfatos (tripolifosfato de sodio).

3.4.2. Efectos del bicloruro de mercurio:

La sustancia es muy txica para los organismos acuticos. Puede producirse una bioacumulacin de esta sustancia a lo largo de la cadena alimentaria, por ejemplo en los organismos acuticos. La sustancia puede causar efectos prolongados en el medio acutico.

3.4.3. Efectos del Desinfectante (Sapolio):

El desinfectante posee sustancias quimicas capaces de neutralizar y destruir la formacin de grmenes que causan el mal olor.

El uso prolongado de este producto en estado puro, produce irritacin sobre la piel y mucosas.

IV. MATERIALES

Vasos de plstico rotulados Cebollas Pinesol Leja Sapolio (desinfectante) Etanol Bicloruro de Mercurio (HgCl2) Relave Minero Detergente Agua Probeta Matraz Enlermeyer Balanza Analtica

V. METODOLOGIA Y PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

5.1. Preparacin de los contaminantes en disolucin con agua:

a) Detergente:

Se disolvi 5 gr de detergente para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin del detergente en la muestra ser de 0.5%

b) Relave Minero:

Se disolvi 20 gr de relave minero para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin del relave en la muestra ser de 2%

c) Lejia:

Se disolvi 48 ml de leja para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin de la leja en la muestra ser de 4.8%

d) Bicloruro de Mercurio (HgCl2):

Se disolvi 1 gr de HgCl2 para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin de HgCl2 en la muestra ser de 0.1%

e) Pinesol:

Se disolvi 15,6 ml de pinesol para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin de pinesol en la muestra ser de 1.56%

f) Etanol:

Se disolvi 72 ml de pinesol para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin del etanol en la muestra ser de 7.2%

g) Sapolio (desinfectante):

Se disolvi 15 ml de sapolio para 1000ml de agua, por lo tanto la concentracin de pinesol en la muestra ser de 1.5%

5.2. Bioensayos con Cebolla:

Se preparan las disoluciones de los contaminantes en 6 matraces.

Cada una de los 6 matraces contena muestras en disolucin relave minero, etanol, leja, desinfectante sapolio, detergente y bicloruro de mercurio.

Vaciar las disoluciones de los contaminantes en vasos de plstico (3 vasos por cada contaminante).

Luego incrustar mondadientes a travs de las cebollas.

Despus se coloca las cebollas encima de los vasos que contiene los contaminantes (3 cebollas por cada contaminante).

Observar y anotar los resultados despus de 7 das de realizada la prctica.

VI. RESULTADOS

Despus de 7 das de realizado el bioensayo se procedi a observar los resultados, adems de realizarse tambin el conteo de races.

6.1. Resultados del bioensayo con cebolla y detergente:

N de meristemos

cebolla 131

cebolla 249

cebolla 30

Promedio26.66666667

Desv. Estand.24.78574859

C1C2C1C2

0.30.40.20.5

0.30.60.150.4

0.20.30.20.5

0.40.50.10.5

0.20.50.20.5

0.40.30.5

0.40.30.5

0.50.20.6

0.50.20.4

0.40.30.4

0.20.50.2

0.50.30.3

0.30.40.2

0.30.30.4

0.30.20.3

0.20.20.25

0.30.20.2

0.40.50.2

0.30.20.25

0.30.40.5

0.20.20.2

0.20.20.5

0.10.40.3

0.30.5

0.30.5

0.10.4

6.2. Resultado del bioensayo con cebollas y sapolio (desinfectante):

N de meristemos

cebolla 140

cebolla 230

cebolla 310

Promedio26.66666667

Desv. Estand.15.27525232

meristemos c.1tamao mmmeristemos c.1tamao mm

13320.6

22.5331

32340.7

42351

52361.2

63371.3

72.5380.6

82390.8

92400.7

102.8prom1.496774194

112.5desvt0.806839047

121.5

131.5

142

152

161

171.1

180.5

190.5

200.5

210.6

221

231.2

241.3

251

260.9

270.5

281

290.8

300.7

310.5

meristemos c.2tamao mm

13

23

31.5

41.5

52.5

61.5

71.2

81.2

92

101

111.2

122

131.5

142

151

161

171

181

191

201.2

210.8

220.7

231.1

240.7

251

261.3

271

280.9

291

301.2

prom1.36666667

devest0.60874848

meristemos c.3tamao mm

13.5

24

33

43

52

62

72

82.5

93

102

prom2.7

devest0.71492035

6.3. Resultado del bioensayo con cebollas y Agua de Mesa

C1C2C3

# de Meristemas10.029.054.0

Prom1.42.93.6

Desv. Estan.0.51.81.6

C1C2C3C3

2.10.41.91.0

1.22.93.71.0

1.93.23.23.5

1.54.72.43.1

1.46.04.73.4

0.92.64.44.1

1.93.01.64.8

1.64.03.54.7

1.14.93.65.7

0.75.34.25.0

1.40.85.56.0

4.32.25.5

0.95.23.4

0.54.91.0

3.04.40.5

5.54.05.9

2.50.54.5

1.10.64.0

0.44.14.6

2.55.45.3

0.94.93.4

2.45.2

6.04.5

2.83.2

5.32.6

0.54.4

1.53.0

4.04.5

2.94.8

4.7

2.0

2.2

0.7

0.2

6.4. Resultado del bioensayo con cebollas y pinesol

N de meristemos

cebolla 10

cebolla 25

cebolla 320

Promedio8.333333333

Desv. Estand.10.40833

Columna1M1 (longitud mm)

0

promedio0

desviacion estandar0

Columna1M2 (longitud mm)

2

3

promedio2.5

desviacion Estandar0.71

Columna1M3(longitud mm)

4

3

4

3

3

2

5

5

4

5

4

5

4

3

5

4

3

5

3

5

promedio3.95

desviacion estandar0.94

6.5. Resultados del Bioensayo con cebollas y etanol

No se observo crecimiento de races en ninguna de las 3 cebollas

6.6. Resultados del bioensayo con cebollas y leja

No se observo crecimiento de races en ninguna de las 3 cebollas

6.7. Resultados del bioensayo con cebollas y relave minero

No se observo crecimiento de races en ninguna de las 3 cebollas

VII. DISCUSIN DE RESULTADOS

Crecimiento de las races (medicin en mm):

En los resultados se puede observar que la sustancia que ms inhibe el crecimiento de races es el agua de relave, por con siguiente etanol al 70%, luego la leja, luego el HgCl2, luego el pinesol y al final el agua de mesa (san Carlos).

Para que un tejido funcione normalmente requiere estar saturado con agua, manteniendo las clulas turgentes. Todas las sustancias que penetran en las clulas vegetales deben estar disueltas, ya que en las soluciones se efecta el intercambio de sustancias nutritivas entre clulas, rganos y tejidos lo que contribuye al desarrollo vital.

En el caso de el etanol y el agua de relave .Fueron los que ms inhibieron el crecimiento de las meristemos de la ( allium Cepa) esto se debi a la razn , porque el etanol es un solvente y extractor de pigmentos coloreados ,en compuestos inorgnicos insolubles en el agua. El agua de relave lo volvi negro ya que este es capaz de destruir todo tipo de vida (animales y plantas) lo cual gnero que la parte de la allium Cepa expuesta a esta agua se haya llenado de mucosidad.

VIII. CONCLUCIONES

Se pudo observar que todos los contaminantes tuvieron diversos efectos en el crecimiento de las cebollas. En algunos casos inhibiendo de manera leve el crecimiento de races y en otros inhibiendo totalmente el crecimiento de races. Esto nos indica que estos contaminante poseen efectos completamente nocivos que impactaran de gran manera si llegan a afectar algn ecosistema.

La cebolla es un buen bioindicador de contaminacin ambiental, ya que es muy sensible a los cambios efectuados en su medio, adems de ser bastante econmica y tambin de que sus resultados se pueden obtener en relativamente un periodo corto de tiempo.

IX. BIBLIOGRAFIA

http://es.wikipedia.org/wiki/Allium_cepa

http://es.wikipedia.org/wiki/Bioindicador

http://www.cricyt.edu.ar/enciclopedia/terminos/Bioindic.htm

Universidad Nacional Autnoma de Mxico. 2005. Manual de prcticas de gentica y cuaderno de trabajo. Mxico. Facultad de ciencias.

http://books.google.com.pe/books?id=N23NDS2E7gC&pg=PA144&lpg=PA144&dq=bulbos+de+cebolla,+inhibicion+del+crecimiento+de+raices&source=bl&ots=Ie0UdQwWh&sig=Edcuw3gV76ZAxWeMyycMSlrYSC4&hl=es&sa=X&ei=2k5iUJHAIYGi9QSrpoBA&ved=0CDYQ6AEwAg#v=onepage&q&f=true

X. ANEXOS

Bioensayo de cebollas con pinesol

Bioensayo de cebolla con etanol

Bioensayo de cebolla con detergente

Bioensayo de cebolla con agua de mesa

Bioensayo de cebolla con relave minero

Grafico del crecimiento de meristemos en el bioensayo de cebollas con agua de mesa

Grafico del crecimiento de meristemos en el bioensayo de cebollas con pinesol