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Aspectos históricos

•• 1690 1690 –– VanVan LeuwenhoekLeuwenhoek: : ““animanimááculosculos”” existindo na ausência de arexistindo na ausência de ar•• 1861 1861 –– Pasteur Pasteur –– bacilo que apbacilo que apóós contacto com o ar cessava o movimentos contacto com o ar cessava o movimento•• 1908 1908 –– VonVon HiblerHibler: : BacillusBacillus oedemaoedema malignimaligni

•• 11ªª Guerra Mundial (1914Guerra Mundial (1914--18) 18) –– ““gangrena / tgangrena / téétanotano””•• 1916 1916 –– MclntoshMclntosh e e FieldField: : ““jarra de anaerobiosejarra de anaerobiose””

•• AltmeierAltmeier (1938): importância dos anaer(1938): importância dos anaeróóbios não bios não ClostridiaClostridia

•• atatéé anos 60: bactanos 60: bactéérias do Grias do Géénero nero ClostridiumClostridium são a principal preocupasão a principal preocupaççãoão•• apapóós anos 60: anaers anos 60: anaeróóbios não bios não ClostridiaClostridia –– agentes agentes ““terrterrííficosficos””

•• TTéétano: tano: AreteuAreteu da Capadda Capadóócia; Hipcia; Hipóócratescrates•• Gangrena gasosa: HipGangrena gasosa: Hipóócratescrates•• BotulismoBotulismo: surtos v: surtos váários no srios no sééculo XIXculo XIX

ANAERÓBIO: definição

•• BactBactéérias que exigem O2 como aceitador terminal de electrões: aerrias que exigem O2 como aceitador terminal de electrões: aeróóbio bio obrigatobrigatóóriorio

•• BactBactéérias que crescem em rias que crescem em aerobioseaerobiose e são capazes de obter energia e são capazes de obter energia pela fermentapela fermentaçção de compostos orgânicos: ão de compostos orgânicos: aeraeróóbio facultativobio facultativo

•• BactBactéérias incapazes de usar O2 e que são por ele inibidas: rias incapazes de usar O2 e que são por ele inibidas: anaeranaeróóbiobioobrigatobrigatóório/estritorio/estrito

AnaerAnaeróóbio obrigatbio obrigatóório/estritorio/estrito

a)a) extremamente sensextremamente sensíível: não tolera concentravel: não tolera concentraçção O2 > 0.5%ão O2 > 0.5%b)b) moderadamente sensmoderadamente sensíível: tolera concentravel: tolera concentraçção O2 atão O2 atéé 22--8%8%

a)a) são tipicamente membros de populasão tipicamente membros de populaçções microbianas autões microbianas autóóctonesctoneshumanashumanas

b)b) são os principais agentes de infecsão os principais agentes de infecçção humanaão humana

Porque motivo o O2 Porque motivo o O2 éé ttóóxico para estas bactxico para estas bactéérias ?rias ?

•• Do normal metabolismo bacteriano, na presenDo normal metabolismo bacteriano, na presençça de O2a de O2-- perperóóxido de hidrogxido de hidrogéénionio-- radiciasradicias hidroxilohidroxilo-- radicais livres de O2radicais livres de O2-- O2O2-- O2O222-- (anião (anião supersuper--óóxidoxido))

•• Anião Anião supersuper--óóxidoxido –– agressivo para a cagressivo para a céélula bacteriana:lula bacteriana:-- oxida oxida liplipíídeosdeos intraintra--celularescelulares e da paredee da parede-- provoca provoca ““quebraquebra”” DNADNA-- inactiva enzimas bacterianasinactiva enzimas bacterianas

•• BactBactéérias aerrias aeróóbias e aerbias e aeróóbias facultativas bias facultativas –– produproduçção de enzimas:ão de enzimas:-- dismutasedismutase do do supersuper--óóxidoxido-- catcatáálaselase-- peroxperoxíídasedase

Conceito clConceito cláássicossico:: toxicidade do O2 para os anaertoxicidade do O2 para os anaeróóbios por falta destas enzimasbios por falta destas enzimas

McCordMcCord (1971): bact(1971): bactéérias anaerrias anaeróóbias estritas geralmente não produzem bias estritas geralmente não produzem catcatáálaselasee nunca produzem e nunca produzem supersuper--óóxidoxido dismutasedismutase

Conhecimento actualConhecimento actual

CatalaseCatalase•• demonstrada a produdemonstrada a produçção de ão de catcatáálaselase em espem espéécies de cies de BacterBacteróóidesides, , PeptoestreptococcusPeptoestreptococcus e e PropionibacteriumPropionibacterium; não se correlaciona com a tolerância ao O; não se correlaciona com a tolerância ao O22

PeroxidasePeroxidase•• não foi definitivamente demonstrada a produnão foi definitivamente demonstrada a produçção de ão de peroxidaseperoxidase em bactem bactéérias rias anaeranaeróóbias estritasbias estritas

DismutaseDismutase supersuper --óóxidoxido•• produproduçção induzida por exposião induzida por exposiçção ao Oão ao O22 (ex. (ex. BacteroidesBacteroides))•• EubacteriumEubacterium limosumlimosum e e ClostridiumClostridium oroticumoroticum -- quantidades significativas desta quantidades significativas desta enzima; incapazes de sobreviverem em enzima; incapazes de sobreviverem em aerobioseaerobiose

�� de um modo geral, o teor da enzima de um modo geral, o teor da enzima éé maior em bactmaior em bactéérias rias gramgram negativo que negativo que gramgrampositivopositivo�� correlacorrelaçção com o grau de tolerância ao O2 nas anaerão com o grau de tolerância ao O2 nas anaeróóbias obrigatbias obrigatóórias moderadasrias moderadas

Potencial de Potencial de oxioxi --reduredu ççãoão do meio (Eh)do meio (Eh) :: factor muito importante, masfactor muito importante, mas……

•• adiadiçção de agentes redutores não permite crescimento de todas as estião de agentes redutores não permite crescimento de todas as estirpes bacterianas rpes bacterianas anaeranaeróóbiasbias

DistribuiDistribuiçção de bactão de bactéérias anaerrias anaeróóbias no corpo humanobias no corpo humano

3-5:1108-109endocolo

3-5:1108-109vagina

Aparelho genital feminino

1000:11011-1012colon

1:1104 -107delgado distal1:1102 -104delgado proximal

1:1102 -105estômago

Tubo digestivo

3-5:1103 -104Fossas nasais

1000:11011-1012suco gengival

1:11010 -1011superfície dentária

1:1108 -109saliva

Boca

anaerob/aerobTotal (por ml ou g)Local

Incidência de diferentes estirpes anaerIncidência de diferentes estirpes anaer óóbias bias nas populanas popula çções microbianas autões microbianas aut óóctonesctones

0: raro/ não isolado; ±: irregularmente presente;1: usualmente presente; 2: usualmente presente, em grande número

10±12Propionibacterium

2±110Lactobacillus

±0210Eubacterium

±0210Bifidobacterium±0110Actinomyces±±2±±Clostridium1±221Petostreptococcus

bactérias gram+

10120Veillonela

±1120Fusobacterium

11220Bacteroides

bactérias gram-

VaginaUretraIntestinoAp. respiratórioPeleGénero

AnaerAnaeróóbios e Populabios e Populaçção Microbiana Autão Microbiana Autóóctone (ctone (PMA)PMA)

�� As bactAs bactéérias anaerrias anaeróóbias predominam no nosso corpo, bias predominam no nosso corpo, em relaem relaçção ão ààs aers aeróóbiasbias

�� A maioria das infecA maioria das infecçções por anaerões por anaeróóbios tem ponto de bios tem ponto de partida endpartida endóógenogeno

�� a a ““identidadeidentidade”” das estirpes envolvidas numa determinada das estirpes envolvidas numa determinada infecinfecçção pode ser ão pode ser ““previsprevisíívelvel””

BactBactéérias anaerrias anaeróóbias e doenbias e doençça humanaa humana

Incidência relativa de bactérias anaeróbias

<1++++++100

737492

>55

>5090-95

768594

85-90

94-100100

30-605038

rara1089

5-20Incidência (%)

Aparelho urináriofasciite necrotizantecelulite crepitantegangrena gasosa

Tecidos molesabortamento sépticoabcesso vulvo-vaginalabcesso tubo-ováricosalpingite, peritonite pélvica

Aparelho genital femininoabcesso hepáticoperitonite/ abcesso

Intra-abdominalempiemapneumonia necrotizanteabcesso pulmonarpneumonia aspiração

Pleuropulmonaroutras infecções oraisabcesso periodontalotite média crónicasinusite crónicaocular

Cabeça e pescoçomeningiteempiema subduralabcesso cerebral

SNCBacteriemiaTipo de infecção

““ PistasPistas ”” para uma infecpara uma infec çção por bactão por bact éérias anaerrias anaer óóbiasbias

•• odor podor púútrido da lesão ou descargatrido da lesão ou descarga•• localizalocalizaçção foco infeccioso prão foco infeccioso próóximo a superfximo a superfíície mucosacie mucosa•• necrose necrose tecidulartecidular•• formaformaçção abcessoão abcesso•• infecinfecçção secundão secundáária a mordedura humana ou animalria a mordedura humana ou animal•• ggáás nos tecidos ou no exsudados nos tecidos ou no exsudado•• tromboflebitetromboflebite sséépticaptica•• ““quadro clquadro cláássicossico”” –– gangrena gasosagangrena gasosa•• terapêutica com terapêutica com aminoglicosaminoglicosíídeosdeos / / antimicrobianosantimicrobianos de largo de largo

espectroespectro•• fluorescência avermelhada com luz U.V. (fluorescência avermelhada com luz U.V. (BacteroidesBacteroides ou ou

PorphyromonasPorphyromonas))•• presenpresençça de a de ““grãos de enxofregrãos de enxofre”” no exsudado (no exsudado (ActinomycesActinomyces))•• culturas negativas em culturas negativas em aerobioseaerobiose/pr/préévia observavia observaçção de ão de

microrganismosmicrorganismos

Procedimentos recomendados para a colheita de amost rasProcedimentos recomendados para a colheita de amost ras

Regras geraisRegras gerais

��por aspirapor aspiraçção com agulha e seringaão com agulha e seringa��amostra de tecido por amostra de tecido por bibióópsiapsia

••zaragatoaszaragatoas –– devem ser, sempre que possdevem ser, sempre que possíível, rejeitadasvel, rejeitadas

•• são mais susceptsão mais susceptííveis de serem contaminadasveis de serem contaminadas•• ficam mais expostas ao O2 ambiente e ficam mais expostas ao O2 ambiente e àà dissecadissecaççãoão•• colhem um pequeno volume de produto para amostracolhem um pequeno volume de produto para amostra•• não permitem a preparanão permitem a preparaçção de um bom ão de um bom esfregaesfregaççoo

Amostras Amostras inaceitinaceit ááveisveis para cultura em anaerobiosepara cultura em anaerobiose

•• zaragatoaszaragatoas nasais ou da nasais ou da orofaringeorofaringe•• zaragatoaszaragatoas gengivaisgengivais•• expectoraexpectoraçção ão ““expectoradaexpectorada””•• expectoraexpectoraçção colhida por aspiraão colhida por aspiraçção oro ou ão oro ou nasotraquealnasotraqueal•• amostras colhidas por amostras colhidas por broncoscopiabroncoscopia, colhidas sem cateter de ponta , colhidas sem cateter de ponta

protegidaprotegida•• conteconteúúdo gdo gáástrico ou do intestino delgado (excepto strico ou do intestino delgado (excepto sdrssdrs. em . em ““ansa ansa

cegacega””))•• conteconteúúdo intestino grosso, de do intestino grosso, de ileostomiasileostomias, de , de colostomiascolostomias ou fezesou fezes

(excepto suspeita de (excepto suspeita de C. C. difficiledifficile ou ou C. C. botulinumbotulinum))•• urina colhida por micurina colhida por micçção ou por sonda de ão ou por sonda de FolleyFolley•• zaragatoaszaragatoas vaginais ou cervicaisvaginais ou cervicais•• amostras colhidas da superfamostras colhidas da superfíície de cie de úúlceras de declceras de decúúbito, de feridas, bito, de feridas,

escarasescaras ou fou fíístulas stulas •• amostras colhidas em zonas adjacentes amostras colhidas em zonas adjacentes àà pele ou a membranas pele ou a membranas

mucosas que não tenham sido devidamente descontaminadasmucosas que não tenham sido devidamente descontaminadas

Transporte da amostraTransporte da amostra

Regras geraisRegras gerais

�� as amostras, durante o transporte atas amostras, durante o transporte atéé ao laboratao laboratóório, rio,

devem ser mantidas a 37devem ser mantidas a 37ººCC

�� evitar a refrigeraevitar a refrigeraçção das amostras ão das amostras

>>> diminui>>> diminuiçção do não do nºº de microrganismos vide microrganismos viááveisveis

Do rDo r áápido e adequado transporte depende pido e adequado transporte depende o sucesso do isolamento correcto doso sucesso do isolamento correcto dosanaeranaer óóbios presentes na amostrabios presentes na amostra

Transporte da amostraTransporte da amostra

Em condiEm condiçções ideais, a amostra serões ideais, a amostra seráá enviada ao laboratenviada ao laboratóório numa atmosfera rio numa atmosfera anaeranaeróóbia, hbia, húúmida e mida e àà temperatura ambientetemperatura ambiente

RecorreRecorre--se a um dispositivo e/ou meio de transporte, quando se prevê um se a um dispositivo e/ou meio de transporte, quando se prevê um atraso atraso superior a 15superior a 15--20 minutos entre a colheita e o processamento ou quando se utili20 minutos entre a colheita e o processamento ou quando se utilizou zou uma uma zaragatoazaragatoa

Na prNa pr áática ditica di ááriaria

•• um volume de 2 ml ou mais, em seringa com agulha um volume de 2 ml ou mais, em seringa com agulha ““ocluidaocluida””, tolera 1 ou 2 horas, , tolera 1 ou 2 horas, masmas……

dependendo do agente implicado dependendo do agente implicado versusversus risco de picada acidental !!!risco de picada acidental !!!

•• uma uma ““grandegrande”” amostra de tecido mantamostra de tecido mantéém os microrganismos vim os microrganismos viááveis durante veis durante ““algumas horasalgumas horas””

��recorrer a dispositivos e meios de transporterecorrer a dispositivos e meios de transporte

* muitos são incompat* muitos são incompatííveis com certas amostras, principalmente veis com certas amostras, principalmente bibióópsiaspsias* a maioria foi concebido para transporte de * a maioria foi concebido para transporte de zaragatoaszaragatoas

Exame directo da amostraExame directo da amostra

1.1. Exame macroscExame macrosc óópicopico

�� InspecInspecçção visual: ão visual: ““pistaspistas”” sobre a sobre a naturezanatureza e a e a qualidade qualidade da amostrada amostra

Sugerem a presenSugerem a presençça de bacta de bactéérias anaerrias anaeróóbias:bias:

purulênciapurulênciaodor podor púútridotridotecidos tecidos necrosadosnecrosadosppúúss com com ““grãos de enxofregrãos de enxofre””

�� Exame com luz U.V. (360 Exame com luz U.V. (360 nmnm): pesquisa de fluorescência): pesquisa de fluorescência-- vermelho tijolo: vermelho tijolo: BacteroidesBacteroides pigmentadospigmentados


2. Exame microsc2. Exame microsc óópicopico

�� EsfregaEsfregaççoo corado pelo corado pelo gramgram

�� em conjunem conjunçção com os dados clão com os dados clíínicos, nicos, éé o exame laboratorial mais o exame laboratorial mais úútiltil�� permite a observapermite a observaçção da morfologia tão da morfologia tíípica de muitas pica de muitas bactbactéérias,comorias,como::

�� BacteroidesBacteroides: bacilo : bacilo gramgram--, , ““ppáálidolido””, , pleompleomóórficorfico�� FusobacteriumFusobacterium: bacilo fino, : bacilo fino, gramgram--, , fusiformefusiforme�� VeillonellaVeillonella: : diplococodiplococo pequeno, pequeno, gramgram--�� ActinomycesActinomyces: bacilo : bacilo gramgram+, em grupos, +, em grupos, ““ramificaramificaççõesões””

�� ImunofluorescênciaImunofluorescência (IF) com (IF) com atcsatcs monoclonaismonoclonais

�� Apenas em laboratApenas em laboratóórios de referência/investigarios de referência/investigaççãoão�� Custos elevadosCustos elevados�� Muitos falsos + e Muitos falsos + e -- >>>não substitui a cultura>>>não substitui a cultura


3. Outros procedimentos3. Outros procedimentos

�� AnAnáálise directa lise directa áácc. gordos cadeia curta por cromatografia . gordos cadeia curta por cromatografia ggááss--llííquidaquida (GLC)(GLC)��Sangue: com algum valor; não utilizado por rotinaSangue: com algum valor; não utilizado por rotina��Material purulento: pouco sensMaterial purulento: pouco sensíível; pouco especvel; pouco especíífico; dispendiosofico; dispendioso

�� Sondas DNA/PCRSondas DNA/PCR��DisponDisponííveis para um nveis para um nºº limitado de agentes, não comercialmentelimitado de agentes, não comercialmente

�� Microscopia campo escuro/ contraste faseMicroscopia campo escuro/ contraste fase��DemontraDemontraççãoão de de espiroquetasespiroquetas; pouco interesse pr; pouco interesse prááticotico

�� Testes serolTestes serolóógicosgicos��Uso limitado; controverso. ex.: aglutinaUso limitado; controverso. ex.: aglutinaçção ão latexlatex ((C. C. difficiledifficile))

�� EIA (mEIA (méétodos todos imunoenzimimunoenzimááticosticos))��DetecDetecçção toxina A e B do ão toxina A e B do C. C. difficiledifficile

Processamento laboratorial das amostrasProcessamento laboratorial das amostras

1. Selec1. Selec çção dos meios de culturaão dos meios de cultura

�� Maioria das infecMaioria das infecçções são ões são polimicrobianaspolimicrobianas >>>> meios >>>> meios selectivosselectivos e e não selectivosnão selectivos

�� ““selecselecççãoão”” pretendida vai depender de: tipo de amostrapretendida vai depender de: tipo de amostravolume da amostravolume da amostrarecursos econrecursos econóómicos do laboratmicos do laboratóóriorio

�� Como mComo míínimo:nimo:��Meio não selectivo; incubar em Meio não selectivo; incubar em aerobioseaerobiose e anaerobiosee anaerobiose��Meio selectivo para microrganismos como por ex. grupo do Meio selectivo para microrganismos como por ex. grupo do BacteroidesBacteroides fragilisfragilis

ImportanteImportante: os meios devem ser frescos ou terem sido : os meios devem ser frescos ou terem sido prpréé--reduzidosreduzidos


2. Prepara2. Prepara çção das amostras para a sementeiraão das amostras para a sementeira

�� Grande volume lGrande volume lííquido: concentrar por centrifugaquido: concentrar por centrifugaçção; semear o sedimentoão; semear o sedimento

�� ZaragatoaZaragatoa: extrac: extracçção suave, em pequeno volume (0.5 a 1 ml) de caldo ão suave, em pequeno volume (0.5 a 1 ml) de caldo

tioglicolatotioglicolato

�� Tecidos: homogeneizaTecidos: homogeneizaçção em 1 ml caldo ão em 1 ml caldo tioglicolatotioglicolato; suave e r; suave e ráápidapida

�� Evitar exposiEvitar exposiçção prolongada ao ar !!!ão prolongada ao ar !!!


3. Incuba3. Incuba çção em anaerobioseão em anaerobiose

�� PretendePretende--se uma incubase uma incubaçção em atmosfera sem Oão em atmosfera sem O22 livrelivre

�� ComposiComposiçção habitual: 5% Hão habitual: 5% H22, 5% CO, 5% CO22, 80% N, 80% N22

�� Escolha entre os diferentes sistemas de produEscolha entre os diferentes sistemas de produçção de anaerobiose ão de anaerobiose condicionada por diversos parâmetros: o principal são os recursocondicionada por diversos parâmetros: o principal são os recursos s econeconóómicosmicos

�� Qualquer um deles Qualquer um deles éé satisfatsatisfatóório para o isolamento dos anaerrio para o isolamento dos anaeróóbios bios mais frequentemente implicados em doenmais frequentemente implicados em doençça humanaa humana

�� Jarra anaerobioseJarra anaerobiose

�� Saco anaerobioseSaco anaerobiose

�� Câmara anaerobioseCâmara anaerobiose

�� RollRoll tubetube/tubo /tubo HungateHungate

Jarra de anaerobioseJarra de anaerobiose

�� Custo inicial moderado/ elevadoCusto inicial moderado/ elevado

�� Custo manutenCusto manutençção moderadoão moderado

-- Sistema GAS PAKSistema GAS PAK-- Sistema Sistema evacuaevacuaççãoão--substituisubstituiççãoão: anaerobiose mais r: anaerobiose mais ráápidapida

+ catalisador + catalisador paladiumpaladium: caro: caro+ indicador de anaerobiose+ indicador de anaerobiose

vantagemvantagem simples e convenientesimples e convenientepouco espapouco espaççoopermite uso de tpermite uso de téécnicas convencionaiscnicas convencionais

desvantagemdesvantagem exposiexposiçção prolongada ao ar durante inspecão prolongada ao ar durante inspecçção/ ão/ subculturassubculturasanaerobiose anaerobiose ““lentalenta””

Saco de anaerobiose (Saco de anaerobiose ( anaerobicanaerobic bagbag ))

�� Custo inicial baixoCusto inicial baixo

�� Custo manutenCusto manutençção elevado: ão elevado: disposabledisposable

vantagemvantagem simples; permite uso de tsimples; permite uso de téécnicas convencionaiscnicas convencionaispouco espapouco espaççoopermite inspecpermite inspecçção sem quebrar anaerobioseão sem quebrar anaerobiose

desvantagemdesvantagem exposiexposiçção prolongada ao ar durante ão prolongada ao ar durante subculturassubculturasanaerobiose anaerobiose ““lentalenta””ssóó permite incubapermite incubaçção de 2 placas ão de 2 placas PetriPetri >>> >>> sistsist. maiores. maiores

Câmara de anaerobioseCâmara de anaerobiose

�� Custo inicial elevadoCusto inicial elevado

�� Custo manutenCusto manutençção moderado/ elevadoão moderado/ elevado

vantagemvantagem anaerobiose anaerobiose ““imediataimediata””processamento de amostras em anaerobioseprocessamento de amostras em anaerobioseinspecinspecçção sem quebrar anaerobioseão sem quebrar anaerobioseisolamento segundo tisolamento segundo téécnicas convencionaiscnicas convencionais

desvantagemdesvantagem prepreçço muito elevadoo muito elevadoocupa muito espaocupa muito espaççoo““timetime consumingconsuming””manutenmanutençção difão difíícil cil -- ““avariasavarias””

RollRoll tubetube (tubo de (tubo de HungateHungate ; VPI; VPI--AL)AL)

�� Tecnicamente Tecnicamente ““bizarrobizarro””

�� Custo inicial moderadoCusto inicial moderado

�� Custo manutenCusto manutençção moderadoão moderado

vantagemvantagem permite inspecpermite inspecçção tubos sem quebrar anaerobiose ão tubos sem quebrar anaerobiose

desvantagemdesvantagem tecnicamente diftecnicamente difíícil (exige muito treino)cil (exige muito treino)difdifíícil isolamento estirpes em cultura puracil isolamento estirpes em cultura puranão permite observanão permite observaçção morfologia tão morfologia tíípica colpica colóóniasnias

ControlControl de anaerobiosede anaerobiose

�� QuQuíímico:mico: indicadoresindicadores�� BiolBiol óógico:gico: anaeranaeróóbios estritosbios estritos ▫▫ FusobacteriumFusobacterium

▫▫ PorphyromonasPorphyromonas

aeraeróóbios estritosbios estritos ▫▫ PseudomonasPseudomonas aeruginosaaeruginosa

IdentificaIdentifica çção de bactão de bact éérias anaerrias anaer óóbiasbias

a.a. PresuntivaPresuntiva

�� SensSens. . antimicrobianosantimicrobianos colistinacolistinavancomicinavancomicinakanamicinakanamicinametronidazolmetronidazol

�� Provas bioquProvas bioquíímicasmicas catalasecatalaseproduproduçção ão indolindolredureduçção nitratosão nitratospolianetolpolianetol sulfonatosulfonato ssóódiodiocrescimento em meio com sais biliarescrescimento em meio com sais biliaresalaninaalanina peptidasepeptidaseureaseureaselecitinaselecitinase/ / lipaselipase

�� Testes Testes cromogcromogéénicosnicos: kits de identifica: kits de identificaçção rão ráápida (4 a 24 h)pida (4 a 24 h)ßß glicosidaseglicosidaseßß galactosidasegalactosidasealfa alfa glicosidaseglicosidasealfa alfa fucosidasefucosidase

IdentificaIdentifica çção de bactão de bact éérias anaerrias anaer óóbiasbiasb. Definitivab. Definitiva

�� muito demoradamuito demorada�� muito trabalhosamuito trabalhosa�� muito caramuito cara

O O ““goldgold standardstandard”” resulta da combinaresulta da combinaçção dos vão dos váários mrios méétodostodos

�� Cromatografia Cromatografia ggááss--ll ííquidaquida (GLC)(GLC)�� ananáálise dos produtos finais do metabolismo (lise dos produtos finais do metabolismo (áácc. gordos cadeia curta). gordos cadeia curta)

�� áácc. . butbutííricorico, , valvalééricorico, , isovalisovalééricorico: marcadores prim: marcadores primááriosrios�� áácc. l. lááctico, ctico, succsuccííniconico, , fumfumááricorico, f, fóórmicormico

�� Sistemas rSistemas r áápidos de identificapidos de identifica ççãoão�� bateria bateria miniaturizadaminiaturizada de provas bioqude provas bioquíímicasmicas

�� API 20A (API 20A (BioMBioMéérieuxrieux): 16 ): 16 carbohidratoscarbohidratos; ; indolindol, , ureaseurease, , gelatinasegelatinase, , esculinaesculina, , catcatáálaselase –– leitura visual, leitura visual, ààs 24s 24--48 horas48 horas

�� ATB 32A (ATB 32A (BioMBioMéérieuxrieux): automatizado; 4): automatizado; 4--12 horas12 horas�� MinitekMinitek (BBL)(BBL)�� AnAn--IdentIdent ((AnalitabAnalitab))�� ANI ANI CardCard ((VitekVitek): computorizado): computorizado�� API API ZymZym ((BioMBioMéérieuxrieux): 50 provas): 50 provas

�� MMéétodos alternativostodos alternativos�� Cromatografia Cromatografia áácc. gordos cadeia longa da parede celular. gordos cadeia longa da parede celular�� Sondas DNASondas DNA�� PCRPCR

Teste de Sensibilidade aos Teste de Sensibilidade aos AntimicrobianosAntimicrobianos

�� AtAt éé hháá alguns anos:alguns anos:““ padrões de susceptibilidade das bactpadrões de susceptibilidade das bact éérias anaerrias anaer óóbiasbiassão previssão previs ííveis e estveis e est ááveisveis ””

�� Presentemente:Presentemente:antibimicrobianosantibimicrobianos de largo espectrode largo espectroantibioterapiaantibioterapia mal conduzidamal conduzida““ novosnovos ”” antibacterianosantibacterianos

O TSA tornouO TSA tornou --se se mandatmandat óóriorio


MMéétodostodos

�� DiluiDiluiçção em ão em agaragar -- permite testar a maioria dos agentespermite testar a maioria dos agentes-- complicado e morosocomplicado e moroso-- uso em laboratuso em laboratóórios de referênciarios de referência

�� MicrodiluiMicrodiluiççãoão -- não adequado a estirpes de crescimento lentonão adequado a estirpes de crescimento lento-- não permite testar não permite testar metronidazolmetronidazol

�� MacrodiluiMacrodiluiççãoão -- permite determinar MBCpermite determinar MBC-- bastante morosobastante moroso

�� Outros mOutros méétodostodos -- EE--testtest ((gradientgradient endend pointpoint))


Problemas prProblemas pr ááticosticos

�� Variabilidade entre as diferentes tVariabilidade entre as diferentes téécnicascnicas

�� O resultado TSA pode ser O resultado TSA pode ser ““errerróóneoneo”” (infec(infecçção ão polimicrobianapolimicrobiana))

Deve Deve obrigatoriamenteobrigatoriamente ser executado em isolados de:ser executado em isolados de:

-- hemoculturashemoculturas-- SNC (ex. abcesso)SNC (ex. abcesso)-- infecinfecçções graves (ex. ões graves (ex. endocarditeendocardite))-- em cultura puraem cultura pura-- que não responderam a terapêutica que não responderam a terapêutica antibacterianaantibacteriana prprééviavia-- de infecde infecçções requerendo terapêutica prolongadaões requerendo terapêutica prolongada

-- periodicamente num dado Hospital/ Departamentoperiodicamente num dado Hospital/ Departamento

SinteseSintese (1)(1)

�� são as bactsão as bactéérias que mais frequentemente colonizam o corpo rias que mais frequentemente colonizam o corpo humanohumano

�� muitos dos agentes implicados em infecmuitos dos agentes implicados em infecçção fazem parte das ão fazem parte das populapopulaçções microbianas autões microbianas autóóctonesctones

�� o laborato laboratóório serrio seráá incapaz de conseguir o seu isolamento a menos incapaz de conseguir o seu isolamento a menos que:que:

��colheita da amostra seja adequadacolheita da amostra seja adequada��transporte da amostra nas conditransporte da amostra nas condiçções ões óóptimasptimas

�� maioria das infecmaioria das infecçções são ões são polimicrobianaspolimicrobianas, envolvendo estirpes , envolvendo estirpes aeraeróóbias e anaerbias e anaeróóbias >>>> dificulta o isolamento laboratorial e a bias >>>> dificulta o isolamento laboratorial e a sua valorizasua valorizaççãoão

SinteseSintese (2)(2)

�� o isolamento e identificao isolamento e identificaçção dos anaerão dos anaeróóbios bios éé um processo lento, trabalhoso e um processo lento, trabalhoso e dispendiosodispendioso

�� o microbiologista deve fornecer informao microbiologista deve fornecer informaçções dentro de um tempo ões dentro de um tempo úútiltil

O processamento de anaerO processamento de anaeróóbios oscila entre uma bios oscila entre uma ““bacteriologia exaustivabacteriologia exaustiva”” e um e um ““relato presuntivorelato presuntivo””

�� a escolha ta escolha téécnica deve resultar de uma discussão scnica deve resultar de uma discussão sééria e aturada entre ria e aturada entre microbiologistas e clmicrobiologistas e clíínicos, fortemente condicionada pelos recursos financeiros nicos, fortemente condicionada pelos recursos financeiros dispondisponííveisveis

�� os laboratos laboratóórios devem ser escalonados em nrios devem ser escalonados em nííveis (I, II, III), em funveis (I, II, III), em funçção do não do níível de vel de identificaidentificaçção que são capazes de atingirão que são capazes de atingir

��NNíível Ivel I •• morfologia colmorfologia colóóniasnias•• morfologia ao morfologia ao gramgram dos isolados em cultura purados isolados em cultura pura

��NNíível IIvel II •• susceptibilidade a susceptibilidade a antimicrobianosantimicrobianos (discos)(discos)•• provas bioquprovas bioquíímicas simplesmicas simples

��NNíível IIIvel III •• provas bioquprovas bioquíímicasmicas•• cromatografia cromatografia ggááss--llííquidaquida•• outras provas complexasoutras provas complexas

Bacilos anaerBacilos anaer óóbios bios gramgram positivo, positivo, esporuladosesporulados

GGéénero nero ClostridiumClostridium

�� habitathabitat •• solosolo•• vegetaisvegetais•• tubo digestivo (Homem e animais)tubo digestivo (Homem e animais)•• nascentes nascentes ááguagua•• sedimento marinho sedimento marinho

�� a grande maioria das espa grande maioria das espéécies são cies são mesmesóófilasfilas; ; psicrpsicróófilasfilas; ; termtermóófilasfilas

�� a maioria são comensais, não provocando doena maioria são comensais, não provocando doenççaa

�� principal mecanismo de principal mecanismo de patogenicidadepatogenicidade: toxinas (: toxinas (exotoxinasexotoxinas; natureza proteica), ; natureza proteica), transformtransformááveis em veis em anatoxinasanatoxinas (vacinas)(vacinas)

�� tradicionalmente provocam infectradicionalmente provocam infecçções exões exóógenasgenas•• botulismobotulismo•• gangrena gasosa, gangrena gasosa, ppóóss--traumtraumááticatica•• ttéétanotano•• toxitoxi--infecinfecççõesões alimentaresalimentares

�� actualmente as infecactualmente as infecçções endões endóógenas são muito mais comunsgenas são muito mais comuns

�� importância de factores predisponentesimportância de factores predisponentes

ClostridiumClostridium perfringensperfringens (e outros das gangrenas gasosas)(e outros das gangrenas gasosas)

�� a maioria das espa maioria das espéécies de cies de ClostridiumClostridium pode ser causa de gangrenapode ser causa de gangrena

�� habitantes intestino humano e de animaishabitantes intestino humano e de animais

�� 5 tipos (A a E)5 tipos (A a E) •• tipo A: principal agente de doentipo A: principal agente de doençça humanaa humana•• tipo C: agente da enterite tipo C: agente da enterite necrotizantenecrotizante

�� produz vproduz váários tipos de toxinasrios tipos de toxinas••toxinatoxina responsresponsáável pela vel pela liselise de de hemhemááciascias••enterotoxinaenterotoxina -- toxitoxi--infecinfecççãoão alimentaralimentar••toxinatoxina activa contra PMN, plaquetas, cactiva contra PMN, plaquetas, céélula muscularlula muscular••colagenasecolagenase, , hialuronidasehialuronidase, , ……

�� as estirpes que causam doenas estirpes que causam doençça humana são as que existem no solo ou tubo a humana são as que existem no solo ou tubo digestivodigestivo

�� a infeca infecçção ocorre geralmente por contaminaão ocorre geralmente por contaminaçção traumão traumáática ou cirtica ou cirúúrgicargica

�� pode ainda ser pode ainda ser reponsreponsáávelvel porpor•• infecinfecçções intra abdominaisões intra abdominais•• abortamento sabortamento séépticoptico•• septicemia psepticemia póós abortamentos abortamento•• infecinfecçções uterinasões uterinas

Gangrena gasosaGangrena gasosa

Factores predisponentesFactores predisponentes��anaerobioseanaerobiose�� isquemiaisquemia��pH pH áácidocido

�� favorecem a proliferafavorecem a proliferaçção de microrganismosão de microrganismos

�� toxinas e enzimas >>> libertatoxinas e enzimas >>> libertaçção de gão de gáás s -- crepitacrepitaçção tão tíípicapica

DiagnDiagn óóstico microbiolstico microbiol óógicogico��sangue: sangue: hemoculturashemoculturas��ppúúss�� fragmentos tecidosfragmentos tecidos��gramgram: numerosos bacilos : numerosos bacilos gramgram+, em +, em ppúúss com fraca reaccom fraca reacççãoão

leucocitleucocitááriaria >>> >>> desbridamentodesbridamento circirúúrgico imediatorgico imediato

PrevenPreven ççãoão��evitar contaminaevitar contaminaçção de feridas com terraão de feridas com terra

��cirurgia: evitar contaminacirurgia: evitar contaminaçção fecalão fecal

ClostridiumClostridium tetanitetani

�� agente do tagente do téétanotano

�� isolado a isolado a aprtiraprtir intestino equintestino equíídeos e bovinosdeos e bovinos

�� capacidade de capacidade de esporularesporular no solo, permanecendo vino solo, permanecendo viáável por muito tempovel por muito tempo

�� produz produz exotoxinaexotoxina proteica proteica -- tetanospasminatetanospasmina -- antigantigéénicanica

�� transformtransformáável em vel em anatoxinaanatoxina (vacina)(vacina)

�� capaz de dar origem a capaz de dar origem a antitoxinasantitoxinas : soro antitetânico: soro antitetânico

TTéétanotano

�� quadro clquadro clíínico surge habitualmente apnico surge habitualmente apóós contaminas contaminaçção feridaão ferida�� úúlceras varicosaslceras varicosas�� cordão umbilicalcordão umbilical�� focos dentfocos dentááriosrios�� ““traumatismostraumatismos”” puerppuerpéériorio ou pou póós abortamentos abortamento

�� importância dos factores profissionaisimportância dos factores profissionais��agricultoresagricultores�� jardineirosjardineiros

�� penetrapenetraçção e multiplicaão e multiplicaçção no local >>> libertaão no local >>> libertaçção toxinaão toxina��difusão difusão retroretro--axonalaxonal atatéé sinapses medularessinapses medulares�� inibe os neurinibe os neuróónios inibitnios inibitóórios >>> rios >>> paralisia paralisia espespáásticastica

Quadro Quadro ““ tt íípicopico ””incubaincubaçção 6 a 15 diasão 6 a 15 dias11ºº sintoma: sintoma: trismustrismus ((mmúúscsc. mastiga. mastigaçção)ão)outras outras contracturascontracturasmorte rmorte ráápida: espasmo da laringepida: espasmo da laringe

ImunidadeImunidade : vacina: vacinaçção ão -- muito eficiente, se bem aplicadamuito eficiente, se bem aplicada

ClostridiumClostridium botulinumbotulinum

�� habitat: intestino animais; contamina terrenos >>> contamina habitat: intestino animais; contamina terrenos >>> contamina áágua, vegetais gua, vegetais ……

�� agente do agente do botulismobotulismo : : toxitoxi--infecinfecççãoão alimentar, de halimentar, de háá longa data conhecidalonga data conhecida

�� actualmente consideramactualmente consideram--se 4 tipos de se 4 tipos de botulismobotulismo

�� alimentaralimentar

�� feridas (muito raro)feridas (muito raro)

�� recrecéémm--nascidonascido

�� indind. >12 meses, sem outras causas. >12 meses, sem outras causas

�� 7 tipos de toxinas (7 tipos de toxinas (antigantigéénicasnicas): A a G): A a G

�� tipo A, B, E e F: as mais frequentemente implicadas em doentipo A, B, E e F: as mais frequentemente implicadas em doençça humanaa humana

�� a toxina a toxina éé produzida na fase de crescimento exponencial >>> libertadaproduzida na fase de crescimento exponencial >>> libertada

�� inibe a libertainibe a libertaçção de ão de acetilcolinaacetilcolina nas sinapses >>> nas sinapses >>> paralisia flparalisia fl áácidacida

BotulismoBotulismo

Quadro Quadro ““ tt íípicopico ”” (em Portugal) (em Portugal) �� alimento: presunto caseiroalimento: presunto caseiro

�� anaerobiose, temperatura estanaerobiose, temperatura estáávelvel�� abate porco durante perabate porco durante perííodo digestivoodo digestivo

�� toxina toxina éé absorvida pelo tubo digestivoabsorvida pelo tubo digestivo�� incubaincubaçção: 24 a 36 horasão: 24 a 36 horas�� invasão: vinvasão: vóómitos; sinais mitos; sinais inespecinespecííficosficos�� estado: paralisias; cestado: paralisias; cóólicas; licas; altalt. secre. secreççõesões

�� outros alimentos implicadosoutros alimentos implicados�� enlatadosenlatados�� mariscos mariscos �� vegetaisvegetais�� peixepeixe

DiagnDiagn óóstico microbiolstico microbiol óógicogico : pesquisa da toxina no alimento: pesquisa da toxina no alimento

ClostridiumClostridium difficilledifficille

�� habitat no intestino humano e de animaishabitat no intestino humano e de animais

�� isolado a partir do solo, feno, areiaisolado a partir do solo, feno, areia

�� isolado a partir do intestino de recisolado a partir do intestino de recéémm--nascidos, em 50% dos casosnascidos, em 50% dos casos�� em crianem criançças com mais de 2 anos: 4%as com mais de 2 anos: 4%�� adultos que receberam adultos que receberam antibioterapiaantibioterapia: at: atéé 46%46%

�� causa principal de:causa principal de: diarreia diarreia ppóóss--antibioterapiaantibioterapiacolite colite pseudomembranosapseudomembranosa

�� mais frequente com mais frequente com clindamicinaclindamicina, , ampicilinaampicilina, , cefalosporinascefalosporinas�� tratadacomtratadacom vancomicinavancomicina

�� factores virulênciafactores virulência :: toxina A (toxina A (enterotoxinaenterotoxina))toxina B (toxina B (citopcitopááticatica))inibidor da inibidor da motilidademotilidade intestinalintestinal

�� DiagnDiagn óósticostico :: isolamento do agenteisolamento do agenteteste de aglutinateste de aglutinaçção pelo ão pelo latexlatexdetecdetecçção toxina (aglutinaão toxina (aglutinaçção; EIA)ão; EIA)

Bacilos anaerBacilos anaer óóbios bios gramgram positivo, não positivo, não esporuladosesporulados

�� grupo que inclui os ggrupo que inclui os géénerosneros�� BifidobacteriumBifidobacterium�� EubacteriumEubacterium�� PropionibacteriumPropionibacterium�� ActinomycesActinomyces�� ArachniaArachnia�� RothiaRothia�� LactobacillusLactobacillus

�� membros PMA pele e superfmembros PMA pele e superfíícies mucosas (boca, intestino, genitais) cies mucosas (boca, intestino, genitais) do Homem e animaisdo Homem e animais

�� muitas espmuitas espéécies são consideradas oportunistascies são consideradas oportunistas

�� podem causar infecpodem causar infecçções graves, com risco de vidaões graves, com risco de vida

�� crescimento lento: 3 ou + dias; crescimento lento: 3 ou + dias; ActinomycesActinomyces (2 ou mais semanas)(2 ou mais semanas)

ActinomycesActinomyces

�� GGéénero que inclui innero que inclui inúúmeras espmeras espééciescies�� membros de PMA da boca e mucosas do Homem e outros animaismembros de PMA da boca e mucosas do Homem e outros animais

ActinomycesActinomyces israelliisraelli�� o mais o mais ““importanteimportante””�� agente da agente da actinomicoseactinomicose

�� ActinomicoseActinomicose�� 60% 60% cervicofacialcervicofacial�� 15% tor15% toráácicacica�� 20% abdominal20% abdominal�� 5% outros tipos ex. DIU5% outros tipos ex. DIU

�� tipicamente tipicamente polimicrobianapolimicrobiana�� raramente o raramente o ActinomycesActinomyces éé isolado em cultura puraisolado em cultura pura

�� crescimento muito lentocrescimento muito lento�� morfologia tmorfologia tíípica semelhante fungos (filamentos pica semelhante fungos (filamentos ““ramificadosramificados””))�� ttíípicos picos ““grãos de enxofregrãos de enxofre”” na descarga da lesão: na descarga da lesão: ““colcolóóniasnias”” macroscmacroscóópicaspicas�� causa importante de zoonosescausa importante de zoonoses

PropionibacteriumPropionibacterium acnesacnes

��habitante da pelehabitante da pele�� implicado em quadros deimplicado em quadros de

�� endocarditeendocardite ((protesesproteses valvulares)valvulares)�� septicemiassepticemias

��papel importante, talvez não como papel importante, talvez não como patogpatogééneoneo primprimáário, no acnerio, no acne

BifidobacteriumBifidobacterium

B. B. denticumdenticum ((A.eriksoniiA.eriksonii, B. , B. eriksoniieriksonii))�� parece ser o parece ser o úúnico com potencial patognico com potencial patogééniconico

�� isolado de:isolado de:

�� ccáárie dentrie dentááriaria�� fezesfezes�� exsudado vaginalexsudado vaginal�� pneumoniaspneumonias

�� caractercaracteríística a produstica a produçção de ão de áácc. ac. acéético/ tico/ áácc. l. lááctico na razão 3:2ctico na razão 3:2

B. B. longumlongumB. breveB. breve

�� raramente isoladosraramente isolados

EubacteriumEubacterium

�� habitante cavidade oral Homem e animaishabitante cavidade oral Homem e animais�� isolado frequentemente a partir das fezes e soloisolado frequentemente a partir das fezes e solo�� isolado em cultura mista:isolado em cultura mista:

�� abcessos e feridas (cabeabcessos e feridas (cabeçça, osso, pele, pelve) a, osso, pele, pelve) �� bacteriemiasbacteriemias, , endocarditesendocardites (+ raramente)(+ raramente)

E. E. lentumlentum : esp: espéécie mais frequentecie mais frequenteB. breve (B. breve ( sppspp . . nov.nov. ), E. ), E. timidumtimidum , E. , E. brachybrachy : : infecinfecçção ão periodontalperiodontal

DiagnDiagn óóstico microbiolstico microbiol óógicogico�� cromatografia cromatografia ggááss--llííquidaquida�� ananáálise DNA: grupo heteroglise DNA: grupo heterogééneo (G+C)neo (G+C)

ArachniaArachnia

A. A. propionicapropionica : : semelhansemelhançças comas com PropionibacteriumPropionibacterium

�� Actualmente Actualmente PropionibacteriumPropionibacterium propionicuspropionicus ((sppsppnovnov.).)

�� infecinfecçção ão periodontalperiodontal

Bacilos anaerBacilos anaer óóbios bios gramgram negativonegativo

�� Inclui membros dos GInclui membros dos Géénerosneros

�� BacteroidesBacteroides ((PorphyromonasPorphyromonas e e PrevotellaPrevotella))�� FusobacteriumFusobacterium�� WolinellaWolinella�� LeptotrichiaLeptotrichia�� DesulfomonasDesulfomonas�� ButyrivibrioButyrivibrio�� succinivibriosuccinivibrio�� AnaerovibrioAnaerovibrio�� AnaerobiospirillumAnaerobiospirillum�� SelenomonasSelenomonas

�� membros de PMA de animais e humanosmembros de PMA de animais e humanos

�� bocaboca�� tracto respirattracto respiratóório superiorrio superior�� intestinointestino�� aparelho genitalaparelho genital

�� encontrados em mais de 50% das amostras clencontrados em mais de 50% das amostras clíínicas que contêm anaernicas que contêm anaeróóbiosbios

�� BacteroidesBacteroides e e FusobacteriumFusobacterium: isolados anaer: isolados anaeróóbios mais frequentesbios mais frequentes

BacteroidesBacteroides

Grupo dos Grupo dos BacteroidesBacteroides pigmentados e pigmentados e PorphyromonasPorphyromonas�� inclui, entre outros:inclui, entre outros: P. P. asaccharolyticaasaccharolytica

B. B. corporiscorporis P. P. gingivalisgingivalisB. B. denticoladenticola P. P. endodontalisendodontalis

�� ““pigmentadospigmentados”” –– produzem colproduzem colóónias pigmentadas (castanho ou negro)nias pigmentadas (castanho ou negro)–– geralmente sgeralmente sóó bem evidente ao fim de alguns dias bem evidente ao fim de alguns dias

�� fazem parte da PMA da boca, aparelho intestinal e fazem parte da PMA da boca, aparelho intestinal e urogenitalurogenital

�� são agentes frequentes de infecsão agentes frequentes de infecççõesões•• dentdentááriasrias•• pescopescoçço e cabeo e cabeççaa•• apapóós mordeduras mordedura


Grupo dos Grupo dos BacteroidesBacteroides não pigmentados (não pigmentados ( bilebile senssens ííveis)veis)�� antigamente designados como antigamente designados como sacarolsacarolííticosticos

�� Actualmente Actualmente PrevotellaPrevotella (inclui esp(inclui espéécies pigmentadas: cies pigmentadas: P. P. melaninogenicamelaninogenica))

�� inclui, entre outros:inclui, entre outros: -- B. B. biviusbivius-- B. B. disiensdisiens-- B. B. orisoris-- B. B. buccaebuccae-- B. B. oralisoralis

�� implicados em situaimplicados em situaçções idênticas ões idênticas ààs referidas para os s referidas para os BacteroidesBacteroidespigmentadospigmentados


Grupo do Grupo do BacteroidesBacteroides fragilisfragilis ((bilebile resistentes)resistentes)�� inclui, entre outros:inclui, entre outros: -- B. B. fragilisfragilis

-- B. B. tethaiotaomicrontethaiotaomicron-- B. B. distasonisdistasonis

�� implicados em situaimplicados em situaçções de infecões de infecçções e ões e sséépsispsis com ponto de partida com ponto de partida abdominalabdominal

FusobacteriumFusobacterium

�� bacilos anaerbacilos anaeróóbios, bios, gramgram negativo, longos, finos, de pontas afiladasnegativo, longos, finos, de pontas afiladas

FusobacteriumFusobacterium nucleatumnucleatum�� membro da PMA da boca, tracto respiratmembro da PMA da boca, tracto respiratóório superior, intestino e aparelho genitalrio superior, intestino e aparelho genital�� implicado no mesmo tipo de infecimplicado no mesmo tipo de infecçção que os ão que os BacteroidesBacteroides pigmentadospigmentados

FusobacteriumFusobacterium necrophorumnecrophorum�� altamente virulentoaltamente virulento�� em crianem criançças e jovens: pode causar as e jovens: pode causar faringoamigdalitefaringoamigdalite (antiga angina (antiga angina VincentVincent))

complicacomplicaçções locais:ões locais: abcesso abcesso periamigdalinoperiamigdalinoabcesso abcesso periperi apicalapicaltromboflebitetromboflebite ssééptica veia jugularptica veia jugular

complicacomplicaçções ões àà distância:distância: abcessos abcessos metastmetastááticosticos, p, póós s bacteriemiabacteriemiapulmãopulmãopleurapleuraffíígadogadoarticulaarticulaççõesões

�� pode ser causa de infecpode ser causa de infecçções disseminadas gravesões disseminadas graves

�� actualmente actualmente éé menos frequente que na era prmenos frequente que na era préé antibiantibióóticatica

FusobacteriumFusobacterium ulceransulcerans�� espespéécie nova (1988)cie nova (1988)�� isolado a partir de lesões ulceradas, em regiões tropicaisisolado a partir de lesões ulceradas, em regiões tropicais

Bacilos anaerBacilos anaer óóbios bios gramgram negativonegativo

Aspectos prAspectos pr ááticosticos

�� cuidados na colheita e transporte são fundamentaiscuidados na colheita e transporte são fundamentais�� exame directo, corado pelo exame directo, corado pelo gramgram evita espera de vevita espera de váários diasrios dias

(pigmenta(pigmentaçção tão tíípica colpica colóónias aparece tardiamente)nias aparece tardiamente)

�� identificaidentificaçção do Gão do Géénero nero éé em geral possem geral possíível com as provas vel com as provas habituaishabituais

�� classificaclassificaçção: fão: fáácil atcil atéé certo ponto; depois scerto ponto; depois sóó em laboratem laboratóórios de rios de referênciareferência

�� pouco interesse na prpouco interesse na práática cltica clíínica a determinanica a determinaçção da ão da espespééciecie

�� importante determinar Gimportante determinar Géénero e gruponero e grupo�� importante realizaimportante realizaçção TSQão TSQ

Cocos anaerCocos anaer óóbios bios gramgram positivopositivo

�� membros da PMA da:membros da PMA da:�� bocaboca�� aparelho respirataparelho respiratóóriorio�� intestino grossointestino grosso�� aparelho genitalaparelho genital

�� correspondem a correspondem a ±± 30% de 30% de todostodos osos isolamentosisolamentos de de anaeranaeróóbiosbios

�� isolados principalmente a partir de infecisolados principalmente a partir de infecçções de:ões de:�� tecidos molestecidos moles�� seisoseiso perinasaisperinasais�� abcessos cerebraisabcessos cerebrais�� apap. respirat. respiratóóriorio�� apap. genital feminino. genital feminino�� feridas cirferidas cirúúrgicasrgicas

Cocos anaerCocos anaer óóbios bios gramgram positivopositivo

GGééneronero EspEspééciecie

PeptococcusPeptococcus P. P. nigerniger

PeptostreptococcusPeptostreptococcus P. P. anaerobiusanaerobiusP. P. asaccharolyticusasaccharolyticusP. P. indolicusindolicusP. P. magnusmagnusP. microsP. microsP. P. prevotilprevotilP. P. productusproductusP. P. tetradiustetradius

Devem ainda ser considerados dentro deste grupo:Devem ainda ser considerados dentro deste grupo:

StaphylococcusStaphylococcus saccharolyticussaccharolyticus

StreptococcusStreptococcus hanseniihanseniiaa

StreptococcusStreptococcus pleomorphuspleomorphusaa aaanaeranaeróóbiosbios estritosestritosStreptococcusStreptococcus parvulusparvulusaa

StreptococcusStreptococcus intermediusintermediusbb

StreptococcusStreptococcus constellatusconstellatusbb bbanaeranaeróóbiosbios facultativosfacultativosStreptococcusStreptococcus morbillorummorbillorumbb -- GemellaGemella morbillorummorbillorum

Cocos anaerCocos anaer óóbios bios gramgram positivo positivo –– actualmente...actualmente...

GGééneronero

AnaerococcusAnaerococcus

FinegoldiaFinegoldia

MicromonasMicromonas

PeptostreptococcusPeptostreptococcus

SchleiferellaSchleiferella

PeptostreptococcusPeptostreptococcus magnusmagnus

�� causa de 13% de todas as infeccausa de 13% de todas as infec çções por anaerões por anaer óóbiosbios

�� isolado principalmente de isolado principalmente de dede infecinfecçções:ões:•• óósseassseas•• articulares (prarticulares (próóteses)teses)•• tecidos molestecidos moles

IdentificaIdentifica ççãoão

•• caracterizacaracterizaçção definitiva por vezes ão definitiva por vezes éé difdifíícilcil•• sistemas sistemas miniaturizadosminiaturizados não resolvem todas as dificuldades >>> GLCnão resolvem todas as dificuldades >>> GLC

•• TSQ: 96% são susceptTSQ: 96% são susceptííveis a agentes veis a agentes ßß lactâmicoslactâmicos e e cefalosporinascefalosporinas

masmas ……

•• hháá resistênciasresistências aoao metronidazolmetronidazol•• hháá resistênciasresistências àà clindamicinaclindamicina

�� éé mandatmandatóóriaria a a suasua realizarealizaççãoão

Cocos anaerCocos anaer óóbios bios gramgram negativonegativo

�� raramente implicados directamente em doenraramente implicados directamente em doen çça humanaa humana�� membros de algumas PMAmembros de algumas PMA�� minoria dos isolados de minoria dos isolados de especimensespecimens humanoshumanos

⇒⇒ VeillonellaVeillonella parvulaparvula⇒⇒ VeillonellaVeillonella dispardispar⇒⇒ VeillonellaVeillonella atypicaatypica

⇒⇒ AcidaminococcusAcidaminococcus fermentansfermentans⇒⇒ MegaspheraMegasphera elsdeniiielsdeniii

IdentificaIdentifica çção presuntivaão presuntiva�� morfologia colmorfologia colóóniania�� morfologia bacteriana morfologia bacteriana gramgram�� fluorescência UVfluorescência UV�� discos antibidiscos antibióóticosticos�� provas bioquprovas bioquíímicas rmicas ráápidaspidas

IdentificaIdentifica çção definitivaão definitiva�� GLCGLC�� testes fermentatestes fermentaçção ão carbohidratoscarbohidratos

MobiluncusMobiluncus (bacilos curvos anaer(bacilos curvos anaer óóbios)bios)

�� coram de modo varicoram de modo vari áável pelo vel pelo gramgram�� 2 2 subsub --tipostipos morfolmorfol óógicos:gicos:

⇒⇒ SCR (SCR (gramgram negativo)negativo)

⇒⇒ LCR (LCR (gramgram varivari áável)vel)

�� 2 esp2 esp ééciesciesM. M. CurtisiiCurtisii ,, subespsubesp éécie cie curtisiicurtisiiM. M. curtisiicurtisii , subesp, subesp éécie cie holmesiiholmesii

M. M. mulierismulieris

aspectos históricos - fmup - faculdade de medicina da...

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