APPLICAZIONI CLINICHE DEI PRINCIPALI MARCATORI TISSUTALI DI NEOPLASIE

Dr. Enrico D’AmbrosioAnatomia Patologica Osp. Vito Fazzi

Lecce, 12 ottobre 2013

MARKERS TISSUTALI DI NEOPLASIESecondo un’accezione ampia

Si intendono una serie di caratteristiche riscontrabili nelle cellule o nei tessuti studiati con indagine cito-istologica che sono utili per diverse finalità:

• Utilità Diagnostica (per l’anatomo-patologo)• Utilità Prognostica (per il clinico)• Utilità Predittiva o Farmacodiagnostica (per

il clinico)

Markers Oncologici Circolanti di più comune dosaggio serico

• AFP• CEA, CA15.3, CA125, CA19.19 • Calcitonina, PTH, TG• Calcitonina, PTH, TG• hCG• NSE, Cromogranina A • PSA• TPA

MARKERS TISSUTALI DI NEOPLASIETipologia e Tecniche di Indagine

• Markers Proteici di membrana, citoplasmatici e nucleari valutabili con tecniche immunoistochimiche

• Markers genetici nucleari (DNA/RNA) o citoplasmatici (RNA) valutabili con:

- Ibridazione in situ: varie tecniche (FISH, SICH,CISH)

- PCR, Sequenziamento, varie tecniche

MARKERS IMMUNOISTOCHIMICIDiagnostici

• Diagnosi di istotipo- Carcinoma/Sarcoma/Linfoma/Melanoma- Carcinoma squamoso/adenocarcinoma- Carcinoma/mesotelioma- Carcinoma/mesotelioma- Neoplasia gliale/neuronale/mista- Linfoma di Hodgkin/non Hodgkin

• Diagnosi di origine (primitività)• Diagnosi maligno/benigno (prostata)• Diagnosi ca in situ/invasivo (mammella)• Diagnosi differenziazione neuroendocrina

Razionale della colorazione Immunoistochimica

Colorazione immunoistochimicaE.E. S-100

Differenziazione NeuroendocrinaSinaptofisina, Cromogranina A, NSE

Pancreas

Altro Markers Neuroendocrino-CD56

Microcitoma polmone

MelanomaS100, HMB45, Melan-A

Prostatap63, Ck 34-Beta-E12

Per valutareinvasione

PSA

Per individuarel’origine prostatica di metastasi

invasione

NEOPLASIE CEREBRALINeurofilamenti, GFAP

Altri markers - Sinaptofisina per neoplasie neuronali- S100 per neoplasie gliali

Carcinoma mammario Mammaglobin (10 kD) is a breast-associated glycoprotein distantly related to secretoglobin family that includes human uteroglobin andlipophilin. Mammaglobin mRNA is present in high levels in human breast cancer cell lines, which has been shown to be a sensitive markerof breast cancer. When combined with other breast-restricted markers such as GCDFP-15, an overall sensitivity for breast GCDFP-15, an overall sensitivity for breast carcinoma of84% has been achieved. Anti-Mammaglobin can also be used to determine breast origin in the setting of metastatic carcinoma.

Recettori Estrogenici

CITOCHERATINECK20 CK 7

This antibody may be used to aid in theidentification of normal and neoplastic cells of ovary, lung and breast epithelial origin which express Cytokeratin 7, and those of colonicand those of colonicand prostate epithelial lineage which lack Cytokeratin 7 production.

PANCITOCHERATINE AE1/AE3

Adenocarcinoma del colon CEA, CDX2, CK20

CK7 negativa

PolmoneTTF1

Adenocarcinoma

p63 -Negativo in adenoca-Positivo in ca squamoso

Napsina A

Microcitoma

Tiroide

TTF1

Tireoglobulina

Utili per identificare metastasidi ca tiroideo

TTF1Adenoma

Markers ormonali

Calcitonina Carcinoma midollare tiroide

ParatormoneTumori paratiroide

Markers in linfopatologia CD30, CD15 (Sternberg), ALK-1

CD20, CD3, Ki67

Linfociti T CD3/CD4/CD8/Granzyme B

Utili per identificare linfomi non Hodkinderivanti da sottopopolazioni di linfociti Tche hanno diversa prognosi e decorso clinico

ACTINA MUSCOLO LISCIO

CD117 (c-kit) DOG-1

GIST

Ewing SARCOMACD99

HHV-8 Kaposi

Hepatocyte Specific AntigenFegato

Kidney specific CadherinHe found a membranous pattern of staining in 96% of 30 chromophobe carcinomas, and in only 6% of 31oncocytomas leading them to conclude that this is a useful antibody in differentiating these two lesions. Shen, et al., on the other hand,found KSP-Cadherin positivity in 100% of 13 chromophobe RCCs, and 95% of 20 oncocytomas.

Renal Cell Ca Antigen (RCCA)

Ca 125 Ovaio

Attenzione! Non è del tutto specificoEspresso da mesotelio irritato da flogosi o altri t umorie da tumori del Pancreas

Uso di pannellidi markers immunoistochimici

per problemi diagnostici difficili

REGOLALa predittività di un pannello è superiore alla predittività di

un solo test • Risultato probante di un test A > 50% di probabilità• Risultato probante di un test A > 50% di probabilità• Risultato falsificante A1 < 50% di probabilità

Predittività di un test = A/A + A1

Predittività di un pannello ABCAxBxC/(AxBxC) + (A1xB1xC1)

MesoteliomaHBME-1, CK 5/6, Calretinina, GLUT-1

WT1 positivo

CEA negativoBer-e-P4 negativo

MARKERS IMMUNOISTOCHIMICIPrognostici e Predittivi (Farmacodiagnostici)

• Indice proliferativo (ki67)

• Markers Recettoriali (Ca mammella)• Markers Recettoriali (Ca mammella)

• Markers di espressione enzimatica

• Markers di iperespressione di agenti del ciclo cellulare (p53)

Ca Mammella Recettori Estrogenici, Progestinici, Ki67

HER-2

FATTORI PREDITTITIVI SENSIBILITA’ CISPLATINO/GENCITABINA

Espressione IIC geni enzimatici implicatinel metabolismo nucleotidico/DNA-repair

• Excision repair cross-complementation group 1 gene (Cobo, 2007)

ERCC1 Sensibilità al Platino

• Ribonucleotide reduttasi M1 (Siniore, 2007)

RRM1 Sensibilità alla Gencitabina

p53 adenoca colonhowever, a mutation in one of its 393 amino acids can eliminate the surveillancecapability of the protein and allow expression of malignant phenotype. Approximately 50% of all human cancers contain a mutation in p53.The wild type molecule has a short half life, is present in low concentrations, and cannot usually be detected by IHC. Many of the mutationsin p53 increase its half life and cause intranuclear accumulation of the mutant protein. Thus in many malignancies of the colon, stomach,bladder, breast, lung, and testes and in melanomas and soft tissue sarcomas,

MARKERS CITOGENETICI E BIOMOLECOLARI

• Utilità diagnostica Per diversi tumori individuate specifiche alterazioni citogenetiche e biomolecolarialterazioni citogenetiche e biomolecolari

• Utilità terapeuticaCapacità predittiva di sensibilità ai nuovi farmaci biologici (farmacodiagnostica)