INSTITUTO EVANDRO CHAGAS INSTITUTO EVANDRO CHAGAS ––

IEC/SVS / MSIEC/SVS / MS

anacecilia@iec.pa.gov.branacecilia@iec.pa.gov.br

ReuniReunióón de los Centros Colaboradores de la OPS/OMS y Laboratorios n de los Centros Colaboradores de la OPS/OMS y Laboratorios Nacionales de Referencia para Dengue en la RegiNacionales de Referencia para Dengue en la Regióón de las Amn de las Amééricasricas

10 al 12 de junio de 200810 al 12 de junio de 2008Ciudad del Saber, PanamCiudad del Saber, Panamáá

Ana Cecilia Ribeiro CruzAna Cecilia Ribeiro Cruz

Diretor

Recepción, Registro y

Distribuiciónde la muestra

biológicas

Laboratóriocultivo decélulas y

Aislamiento

LaboratórioAislamiento

enanimales

Serología I(IH, FC NT)

Producción de

Sueros yantígenos

Serología II(ELISA)

Producción de

antígenos

Biologia MolecularRT-PCR,Clonagem

secueciación

Entomologia

Administración Biotério

Area de Desinfección,

lavado yesterilización

Centro Colaborador de la OPS/OMS para Investigación, Diagnóstico, Referencia y Entrenamiento en Arbovirus.

Las Investigaciones de ARBOVIRUS en BRASIL Las Investigaciones de ARBOVIRUS en BRASIL

1954/2007: 1954/2007: 11.00011.000 aislamientos/ aislamientos/ 196196 tipos de tipos de

vvíírus/ rus/ 161161 aislados por primeira vez en Brasil/ aislados por primeira vez en Brasil/

100100 nuevos para la ciência/ nuevos para la ciência/ 3434 asociados con asociados con

las enfermadades en los seres humanos.las enfermadades en los seres humanos.

0º

10º S

70º W 50º W60º W

Região Norte

Atlant

ic Oce

an

Oceano Atlântico

0 500 1,000Kilometers

Brasil

América do Sul

DEN1 e 4; Alto Alegre,Cantá

Rio Preto, Balbina e Uatuma

Iaco, Moriche,

Purus, Sena Madureira, Xiburema Minaçu

Serra do Navio, Araguari, Amapari,

Ieri, Cupixi 176 diferentes arbovírus (DEN 2 e3, Ilheus, SLE, FA, Grupo C, Oropouche, Mayaro, Una, EEE, WEE, etc.)

AM

PA

AP

RO

AC

RR

TO

ARBOVÍRUS AISLADOS EN IEC

Ariquemes

Fonte: IEC, SEARBFonte: IEC, SEARB

1954 – A partir de los estudios: 30 arbovírus se describe ao mundo;

Hoy: 534 diferentes arbovírus registrados, 196 aislados en IEC (34%)

Bunyaviridae

Reoviridae

Rhabdoviridae

Togaviridae

Flaviviridae

Arenaviridae

P icornaviridae

Herpesviridae

Poxviridae

Orthomyxoviridae

Paramyxoviridae

Coronaviridae

Unclassified

Family ( nº )(70)

(65)(15)

(09)(08)

(03)

(03)(02)

(01)

(01)(01)

(01)

(01)

Sorotipos Circulantes no Brasil, 2008

Fonte: SVS/MS

RR AP

AMPA MA

PI

TO

BA

CERN

SE

ES

RJ

MG

SPPR

MS

GO

MT

ROAC

PB

SC

RS

ALPE

Fonte: MS/SVS/DEVEP/CGDT/COVEV

1997 2001 2007

EndemicaTransición

Áreas de riesgo de FA en Brasil

Libre, con riesgo potencialLibre

Evolución de las areas de Riesgo de Fiebre Amarilla en Brasil, 1997-2007

Distribución de municipios con registros de muertes de monos, epizootias por fiebre amarilla selvática y casos humanos (dez/07 a mar/08)

América do Sul

Sout

hAtla

ntic

OceanSo

uth

Paci

fic O

cean

0 500 1,000Kilometers

Para

Roraima

Amazonas

Amapa

Mato Grosso

Acre

Rondonia Tocantins

Maranhao

Brasil

Panamá

Peru

Iquitos

(1992-93-94-95-97-98)

Puerto Maldonado (1993)

Bejuco (1989)

Oriximina (1996)Barcelos (1980)

Novo Airao (1996)

Manaus (1980-81)

Ariquemes ,

Ouro Preto do Oeste (1991)

Mazagão (1980)

Vitória do Xingu, Brasil Novo (1996)

Serra Pelada (1994)

Porto Franco (1988)

Goias

EPIDEMIAS DE FEBRE DO OROPOUCHE, 1980 - 2006

Tocantinópolis (1988)

Xapuri, 1996 Parauapebas (2003)

Mag. Barata, Ig. Açú, Maracanã e

Vizeu(2006)

Porto de Moz (2004)

Aucayacu (1995)

South America

Sout

hAtla

ntic

OceanSo

uth

Paci

fic O

cean

0 500 1,000Kilometers

Brazil

Para

Roraima

Amazonas

Mato Grosso

AcreTocantins

Maranhao

Peru

Goias

Amapa

Guama (1955)c

Belterra (1978)

Benevides (1991)

c

Conceicao do Araguaia (1981)

Itaruma (1987)

Peixe (1991)

MAYARO BROTES EN REGIÓN AMAZONIA

1955-2008

Huanuco(1995)

Tumbes(1995)

Santa Barbara (2008)

Flujo del diagnóstico

Avaliação clínica

Sorologia Isolamento /RT-PCR0-5 dias i.s.>5 dias i.s.

HI (Ig total);IgG ELISA

MAC-ELISA(IgM)

FC

NT

Detecção de

antígenosvirais

HI +;IgG + HI -IgG

IgM + IgM -

NS1 IF ImunoHistoquímica

Sequenciamento

Análise

Avaliação Laboratorial

Avaliação epidemiológica

Diagnóstico finalseguro

2007 2008Amostras Inoculadas 4613 2987

Positivos 677 337

DEN-1 62 26

DEN-2 320 190

DEN-3 295 110

Febre Amarela - 11

2007 2008

Amostras testadas 694 515Positividade 148 48DEN-1 14 3DEN-2 45 45DEN-3 89 0

408

337

265,5

206

461

160

10720

0

100

200

300

400

500

600

700

800

VDEN1 VDEN2 VDEN3 VFA

Antígenos (mL) Producidos Antígenos (mL) Distribuído

Produción y Distribución de Antigenos (mL)/2007

La Capacidade Técnica

Personal Permanente (37)

Estudantes (15)

Contratados e 

Terceirizados (10)

Total: 62

Termos de referências

Entrenamiento en pruebas serológicas y aislamientos para arbovirus.

Brasil: • 27 personas de los estados en serología (MAC ELISA

para Dengue y Fiebre amarilla);

Otros países de las América:• Bolivia, Venezuela, Francés Guayana y Colombia, se

ofrecieron formación en serología. Colombia fue tan bien capacitados en otras pruebas como producción de los antígenos e inhibición de la hemaglutinación.

• Pruebas de neutralización mediante la reducción de placas (PRNT).

Entrenamiento en RT-PCR, secuenciación y estudios moleculares

Brasil:• 1 profesional do Estado de Pernambuco (RT-PCR);• 1 investigadora da universidade do Maranhão (RT-PCR

y secuenciación);• 4 estudiantes da universidade do Pará (RT-PCR y

secuenciación);• 4 profesionales da Fiocruz e Adolfo Lutz (RT-PCR y

secuenciación – FNO)

Investigación de brotes y epidemias

Fiebre Amarilla : • Región Amazonia;• Centro Brasil (Góias y Distrito Federal);

Virus Dengue:• Región Amazonia (Pará, Amazonas, Amapá, Tocantins

y Roraima); • Nordeste Brasil (Maranhão, Piauí, Bahia e Rio Grande

do Norte);• Centro Brasil (Goiás y Distrito Federal);

Vírus Oropouche:• Norte de Brasil (Pará)

Otras investigaciones (Pará e Rio Grande do Norte).

Caracterizacione de nuevas cepas de arbovirus

Brasil:• 8 cepas fueran caracterizadas:

Breu Branco - Reoviriade Curionópolis – RhabdoviridaeTacaiúnas – RhabdoviridaeMinaçú – ReoviridaeJuruaçá, Alto Alegre y Canta ( en investigaciónes).

Caracterizacione biológica, físico-químico e molecular. Se hicieron estudios experimentales con algunos virus antes mencionado.

Brasil:• Varios entomologista de los diferentes Estados de Brasil (Tocantins,

Goiás, Mato Grosso y Distrito Federal);•Francés Guayana:• Uno entomólogo ( Colaboracione com INPA) .

En junio de 2008 un programa de capacitación está prevista en dos actividades: la entomología y captura de los monos. Esto será coordinado por el Ministerio de Salud de Brasil

La formación en entomología (A fin de apoyar las actividades epidemiológicas. Identificación

epidemiológica de la fauna, los métodos de captura, identificación de insectos capturados y los intentos de establecer colonias de insectos hematófagos principal)

• Distribución para toda la red brasileño• Laboratório Central de Paraguay: Contra el flavivirus Conjugado 6B6C-1;

peroxidasa sustrato; antígenos de dengue 1, dengue 2, dengue 3 y dengue 4, y los anticuerpos monoclonales a los cuatro serotipos de virus dengue

• Laboratorio central de Colombia: Normal antígeno para ser utilizados en pruebas de ELISA; antígenos de dengue 1, dengue 2, dengue 3 y dengue 4, y un conjunto de anticuerpos monoclonales a los cuatro serotipos de dengue virus, antígenos de virus de la fiebre amarilla. El protocolo de IgM ELISA para la fiebre amarilla también fue el envío.

• Laboratorio central de Costa Rica: anticuerpos monoclonales y policlonales para la fiebre amarilla, y también antígenos de la fiebre amarilla. El protocolo de IgM ELISA para la fiebre amarilla es también fue el envío.

La producción de antisuero y antígenos para arbovirus de importancia para la salud pública (Actividad para el desarrollo de arbovirus estudios en diferentes laboratories.To mejorar la capacidad de cada laboratorio en la identificación de arbovirus enfermedades producidas por el más común arbovirus especies en la región)

Fiebre AmarillaRed de Laboratórios

FLUXO DE AMOSTRAS:Isolamento ViralExames HistopatológicoImunohistoquímicaControle de Qualidade

Instituto Adolfo Lutz - IAL/SPLaboratório Colaborador.

Instituto Oswaldo Cruz - FIOCRUZ-RJLaboratório Colaborador.

Instituto Evandro Chagas - IEC/PALaboratório de Referência Nacional

Centro Colaborador da OMSRN

AM

RR

AC

PA

AP

RO

MT

TO

GO

DF

MA

PI

CE

PE

ALSE

BA

ES

RJ

MG

MSSP

PR

SC

RS

PBRN

• 15 cepas de VDEN1 (Genotipo IV)

• 11 cepas de VDEN2 (Genotipo III)

• 10 cepas de VDEN3 (Genotipo III)

• 20 cepas de Oropouche (Genotipos I, II y III)•• 3 cepas los virus Breu Branco

• 2 cepas los virus Melao

Biología molecular caracterización de arbovirus (Para mejorar la capacidad de arbovirus-IEC para la secuenciación

de las cepas de varios arbovirus)

• Fiebre Amarilla: Hamster• Virus Melao: Hamster y Raton• Virus Minaçu: Hamster y Raton• Virus Itacaiunas: Raton • Virus Curionopólis: Raton• Virus Breu Branco: Hamster

Todos fueron analizados por: Biologia Molecular, Histopatologia, Mircroscopia Eletronica de transmición.

Estudios experimentales sobre la patogénesis de algunos arbovirus (Para comprender el potencial de virulencia y patogenicidad de algunos arbovirus)

Conclusione y Perspectivas

1) Intensificación de la cooperación con los laboratorios nacionales de las Américas

2) Continúe colaborando con las actividades desarrolladas por la OPS y OMS

3) Ayudar a los países que necesiten asistencia durante los brotes y epidemias causadas por arbovirus

4) El aumento de ayuda financiera para los centro colaboradores

Colaboración• NACIONALES:

Fiocruz, FMT-TO, UFBA, Univ. de São Paulo, UFPA.

• INTERNACIONALES: • UTMB• CDC/Fort Collin-USA

• INEVH (Pergamino, Argentina)• Instituto Pasteur de Cayenne (Cayenne, French Guyana) y Paris

(France)

El apoyo financiero de las actividades: El apoyo financiero a las actividades de la OMS CC en IEC se ha obtenido del Ministerio de Salud y el Instituto Evandro Chagas, así como de proyectos específicos de investigación.

Laboratory Staff

Dr. Pedro F.C. Vasconcelos (Diretor)

Dra. Sueli G. Rodrigues

Dra. Elizabeth Salbé

Dr. Márcio Nunes

Dra. Nazaré Segura

Dra. Daniele Medeiros

Dra. Livia Caricio Martins

Dra Lívia Casseb

Dra. Eliana Silva

Dra. Tarciana

Dra. Raimunda do Socorro

Dr. José Antonio P. Diniz

FinanciadoresSVS - MS

CNPqFAPESPA –PaUTMB – NIH

Comunidade Européia

Campus Belém

IEC- 1936

Campus Ananindeua (Nuevo)

www.iec.pa.gov.br