کنترل کيفی در سيتولوژی سرويکوواژينال

کيفی کنترلسرويکوواژينال سيتولوژی در

کيفی کنترلسرويکوواژينال سيتولوژی در

بيماريابي هاي روش مؤثرترين از يكيپزشكي تاريخچه در

كيفيت حفظ شرط !به

برای استاندارد روش يک تثبيتکيفيت کنترل

!! ؟ سرويکوواژينال سيتولوژی

Implementation ofQuality Assurance program

Implementation ofQuality Assurance program

Pre-analyticalQuality of smear

AnalyticalInterpretation & Quality of Performance

Post- AnalyticalReporting

Proper Sampling

Fixation

Preparation of patient

Sampling Device

Proper spreading Quality of Smear

Staining

روز گیری نمونه انجام زمان 14بهتریناست سیکل

کرم انواع از نباید بیمار قبل هفته یک ازباشد نموده استفاده واژینال های

انواع 48از از استفاده قبل ساعتو بارداری از جلوگيری واژینال روشهای

. گردد نمی توصیه واژینال دوش از گیری 24مقاربت نمونه از قبل ساعت

. گیرد صورت نباید

گیری نمونه از قبل ضروری نکات رعایت

صحيح برداری صحيح نمونه برداری نمونه

با سرويکس معاينه نبايد برداری نمونه از قبلشود انجام انگشت

سرويکس به استيک اسيد نبايد برداری نمونه از قبلشود محتوای) ماليده کاهش و سلول پذيری رنگ کاهشسلولی (

سالين با سرويکس نبايد برداری نمونه از قبلشود شسته

شود استفاده مناسب اندازه با استريل اسپکولوم از شود روان سالين يا آب کمی با فقط اسپکولوم

کنند () می مختل را سلولها پذيری رنگ ها لوبريکانت

مشاهدهمشاهده

هرگونه نظر از سرويکس بررسیضايعه

محل به) T zoneارزيابی واژن PHوابسته– - يائسگی - - حاملگی هورمونال وضعيت

فرد - ( آناتومی قبلی های درمان - ترشحات يا موکوس خون کردن پاک

سرويکس سطح از حد از بيش

برداری نمونه وسايل برداری انواع نمونه وسايل انواع

Plastic spatulaExtended tip spatulaCervical brushCervical broomCotton swabUnicum

….

گيری نمونه وسيله گيری انتخاب نمونه وسيله انتخاب

گيری نمونه تکنيک و وسيله انتخابشرايط گرفتن نظر در با فرد هر در

محل و . T zoneفرد شود می انجام

NCCLS :توصیه سيتوبراش و اسپاچوال از م توا استفاده

برداری نمونه برداری نحوه نمونه نحوه

نمونه وسيله از نمونه انتقالای شيشه اساليد روی بر برداری

ابعاد /CM5/2 x 57 بهmm 1وضخامت

نمونه وسيله از نمونه انتقالای شيشه اساليد روی بر برداری

ابعاد CM5/2 x 5/7 بهmm 1وضخامت

نمونه انتقال محلو اندوسرويکس

اساليد روی بر اکتوسرويکسای شيشه

نمونه انتقال محلو اندوسرويکس

اساليد روی بر اکتوسرويکسای شيشه

هدف :

روی بر نازک اليه يک صورت به سلولها يکنواخت کردن پخشای شيشه اساليد

نازک : خيلی اسميرهوا معرض در شدن خشک از ناشی آرتيفکت

پراکنده و کم سلولها تعداد

ضخيم : اسميرکند نمی نفوذ آن به فيکساتيو

کند نمی نفوذ آن به رنگ

گيری نمونه خاص های گيری روش نمونه خاص های روش

: هورمونی بررسی

تليوم اپی از اسـپاچوال توسط نمونهثلث

واژن طرفی های دیواره فوقانی. شود می گرفته

از : vaginal poolنمونه

تر پهن انتهای توسط نمونهفورنیکس از اسپاچوال

. شود می گرفته واژن خلفی

معرض در که زنانی بيماريابی جهت نمونهDES

: اند بوده – ثلث از واژن ربع چهار از اسپاچوال توسط نمونه

فوقانی . شود – می گرفته ها دیواره

ويا آدنوز شناسايmی است.ca clear cellهدف ربع محل آن برچسب روی که اساليد چهار تهيه

مربوطه . باشد شده نوشته

واژینال سرويکو اسمیر گرفتنشود نمی توصيه فرد خود توسط

کفايت فاقد نمونه اغلب چوناست.

مناسب مناسب فیکساسيون فیکساسيون

چند ظرف فیکساسيون اسمير تهیه از پسثانيه

می انجام است خيس هنوز نمونه حالیکه درشود.

: فيکساتيوها انواعسطح پوشانندهء .coating surface F))فيکساتيوهای

% 95اتانول

پوشاننده فیکساتيوهایCoating Surface Fixative

پوشاننده فیکساتيوهایCoating Surface Fixative

گليکول اتيلن پلی و الکل ترکیب) کربوواکس)

پاشيده اسمير سطح به اسپری توسط. شوند می

ريخته اساليد روی چکان قطره توسط. شود می

: اساليد تا اسپری فاصله � سازنده 30حدودا دستور طبق يا متر سانتی : اساليد به اسپری بودن نزديک

آرتيفکت ايجاد مايع جاری الم سطح در فيکساتيو شدن

سلولها شدن شسته سلولها شدن پرتاب و کنده

اساليد از اسپری بودن دور :نامناسب فيکساسيون و اساليد شدن خشک

اساليد سطح در فيکساتيو نامنظم پخش

شود نمی توصيه مو فيکساتورهای از استفاده

) ( و آلوده را هماتوکسيلين الکل بجز ها فيکساتيوکنند می خراب

اسمير سطح از کربوواکس بايد ، آميزی رنگ از قبل درالکل ) شود برداشته اسميرها 10بمدت 95قراردادن

دقيقه (

مشخص، نا و کدر ها هسته کمرنگ، آبی پالسم سيتو صورت اين غير در

شود می نامنظم پذيری رنگ و

% 95 اتانلWET FIXATION

% 95 اتانلWET FIXATION

ريخته مناسب محفظه يک در به سريعا شده تهيه میشود،اسمير

گردد می ور غوطه آن داخل

دقیقه 30تا5 ظرف فيکساسيون ميشود انجام

قبول قابل غير اساليدهای قبول قابل غير اساليدهای

ترميم قابل غير شکسته اساليدهایبه مربوط شماره يا مشخصات که اساليدی

نشده ثبت آن روی بيمارآن همراه درخواست برگه که اساليدی

کافی بالينی اطالعات يا و مشخصات فاقد مشخصات با آن روی مشخصات يا باشدندارد همخوانی اساليد روی شده ثبت

ندارد همراه درخواست برگه که اساليدی

صحيح آميزی رنگ صحيح آميزی رنگ

نيکوالئو پاپا آميزی رنگ

های نمونه برای قبول مورد آميزی رنگ سيتولوژی بويژه و سيتولوژی

، دنيا تمام در سرويکوواژينالهسته، برای رنگ يک

حاوی

برای متقابل رنگ دو و باشد می سيتوپالسم

پاپانيکوالئو آميزی رنگ پاپانيکوالئو آميزی رنگ : استفاده مورد های رنگ

هسته آميزی رنگ برای :هماتوکسيلين OG-6 رنگ از متشکل .سيتوپالسم آميزی رنگ برای

orange-G95 اتانل در اسید فسفوتنگستيک بعالوه% آنرا باشد موجود سنگفرشی سلولهای در اگر کراتين.آورد می در نارنجی برنگ

: EA سیتوپالسم آميزی رنگ برای زرد به مايل سبز SFاز ترکيبی و کروم پلی رنگ يک

EOSINE-Y وSFدر موجود EAرا فعالند متابوليک نظر از که سلولهايی

و اينترمديت سلولهای شامل ( آورد می در سبز رنگ به )بدخيم وسلولهای ،لکوسيتها ،هيستيوسيتها پارابازال

بايد EA، شود می رنگ کم سبز رنگ اسمير در که هنگامی.شود عوض

آميزی رنگ مراحل آميزی رنگ مراحل

قرار(شود پاک است اسمير سطح روی که فيکساتيو بايد اول1.%(95 درالکل اسمير دادن

آماده پذيری رنگ برای سلولها که هيدراتاسيون مرحله2. هسته غلظت با الکل متوالی ظروف در اسميرها دادن قرار(شوند می ) کاهش به رو

هماتوکسيلين در اسميرها دادن قرار (هسته آمیزی رنگ مرحله3. )کند می تثبيت را هماتوکسيلين رنگ که کننده آبی محلول و

آميزی رنگ برای اسميرها کردن ،آماده دهيدراتاسيون مرحله4. با الکل متوالی ظروف در اسميرها دادن قرار (سيتوپالسم

)افزایش به رو غلظت ،آبOGدر اسميرها دادن قرار (سيتوپالسم آميزی رنگ مرحله5.

)الکل در کشی ،آبEA، الکل در کشی مرحله برای اسميرها کردن ،آماده دهيدراتاسيون نهايی مرحله6.

)مطلق الکل در اسميرها قراردادن (سازی شفاف ظرف در اسميرها دادن قرار (اسمير سازی شفاف مرحله7.

)گزيلن.اساليدها کردن مونته8.

پاپانيکوالئو آميزی رنگ در HYDRATIONهسته جذب برای را سلولها DEHYDRATIONسيتوپالسم در جذب برای را سلولها

.کند می آماده

متد : دو به پاپانيکوالئو آميزی رنگ REGRESSIVEوPROGRESSIVEشود می انجام.

با هسته آميزی رنگ مرحله در روش دو اين تفاوت .است هماتوکسيلين

متد هماتوکسيلين Regressiveدر توسط هسته ) رنگ ) حد از بيش هاريس هماتوکسيلين غيراسيدی

با اضافه رنگ ، بعد مرحله در و شود رقيق Hclمیشسته جاری آب در نمونه سپس و گردد می رنگبری

. شود می متد هماتوکسيلين Progressiveدر در زمانی تا اسمير

برسد مطلوب بحد هسته رنگ شدت که ماند میبا) Hclرنگبری

بعد، ( مرحله در نيست الزم جاری شستشودرآب وکننده ) آبی ماده يک درون مثل ( Blueing agentاسمير

را هسته رنگ که گيرد قرارمی آمونيوم هيدروکسيد. نمايد می تثبيت

NCCLS متد PROGRESSIVE کند می توصيه را.کنترل قابل آسانتر هسته رنگ شدت چون

شود می سبب را بهتری پذيری تکرار و است از باعث که جاری آب با کشی آب ومرحله

ندارد شود می سلولها رفتن دست . را

ممکن مختصری تغييرات آزمايشگاه هر در های در است زمان و داده آميزی رنگ تکنيک اينست مهم بيايد، بدست آل ايده رنگ تا شود

ذکر با کار انجام روش يشگاه آزما هر در که، هر جزئيات و مکتوب مرحله مجاور شده

. گردد نصب آمیزی رنگ محل

پاپانيکوالئو مزايای پاپانيکوالئو مزايای

به کروماتين. است مشخص هسته جزئيات گيرد می رنگ خوبی

روی سلولها وقتی حتی سيتوپالسم شفافيت شود می حفظ افتند،بخوبی می هم

افتراقند قابل يکديگر از سلولها انواعمختلف سلولهای سيتوپالسم رنگ در تفاوت

آنهاست متابوليک فعاليت و بلوغ ميزان نشانگرنتايج و ماند می ثابت طوالنی مدت برای رنگ

دهد می تکرارپذير

آميزی رنگ مورد در نکاتیپاپانيکوالئو

آميزی رنگ مورد در نکاتیپاپانيکوالئو

نور معرض در رنگها شدن اکسيدرنگها تبخيررنگها کردن فيلتررنگها تعويضمقطر آب جای به کشی لوله آب از استفادهکشی لوله آب کلر به توجهآميزی رنگ های زمان به توجه نحوه DIP نمونه کردن بعدی ظرف به ظرف يک از نمونه انتقالصورت در(سيتوپالسم رنگ بردن بين از در الکل اثر

آميزی رنگ مرحله از پس مدت طوالنی شدن مجاور)سيتوپالسم

ن حاوی الکل از استفاده عدمmبنزجيوه حاوی هماتوکسيلين از استفاده عدم

اسمير کردن شفاف اسمير کردن شفاف

سلولها آميزی، رنگ مراحل اتمام از بعد درونشان از الکل و شوند دهيدراته بايد

شفاف عامل يک با سپس و شود خارج سلول سيتوپالسم تا گردند مجاور کننده

شود شفاف

باشد رنگ بی بايد کننده شفاف عاملانکسار ضريب بايد کننده شفاف عامل

باشد کننده مونته ماده و المل الم، مشابه

عامل ترين رايج) بنزن متيل دی (گزيلن . شود می استفاده که است کننده شفاف

شود فيلتر بار يک روزی بايد گزيلن .

يا شيری حبابدار گزيلن محلول درصورتيکه . گردد تعويض بايد شود، صورتی

گزيلن بار کار ايمنی نکات گزيلن بار کار ايمنی نکات

گزيلن با کار . است توکسيک گزيلن بخار _ . شود انجام مناسب تهويه زير بايد

. شود اجتناب پوست با گزيلن تماس از _

خالی دستشويی در نبايد را گزيلن _که بخار شدن متصاعد بدليل (کرد آن

است اشتعال قابل و )توکسيک

با کار محل . است اشتعال قابل گزيلن _ . باشد آتش شعله نزديک نبايد گزيلن

الم کردن مونته الم کردن مونته

استفاده کردن مونته برای که ای ماده های ويژگی :شود می

. باشد امتزاج قابل ) گزيلن (کننده شفاف عامل با بايد _. باشد پارنت ترانس بايد _ . باشد المل و الم انکسار ضريب مساوی آن انکسار ضريب _ ميدان در آشفتگی ايجاد که باشد طوری آن انکسار ضريب_

. نکند ديد .نکند گير المل زير هوا حباب تا باشد کم آن ويسکوزيتی _

PH_ باشد خنثی آن . اکسيدان ماده حاوی _ زرد اسمير زمان مرور به تا باشد آنتی

.نشود محو يا

الم کردن مونته :

باشد مرطوب الم سطح کردن مونته هنگام_ شدن خشک از ناشی ای قهوه آرتيفکتهای تا

. نشوند ايجاد

خارج بايد شوند می ايجاد که هوا های حباب _. شوند

الملcover ship

الملcover ship

ضخامت با يک درجه شفاف شيشه بايد المل _0.13-0.17mm باشد .

�( بپوشاند را اسمير سطح تمام بايد _ 24 )معموالX 60 mm

. باشد نداشته ناصافی و باشد مسطح بايد _

. باشد مقاوم باید _

الم و کننده مونته ماده مساوی آن انکسار ضريب . باشد

Analytical Phase

Personnel requirementPersonnel requirement

Education

Skills

Training

Number of Specimen processed in a lab.

Per Year

Number of Specimen processed in a lab.

Per Year

WHO Consensus panel Recommended:

at least 20,000 specimens yearly

to maintain acceptable skills

CAP review : Screening Error Rate is greatest in labs processing less than 5000 specimen / Yr

Workload assessmentWorkload assessment

CLIA : 12 slides / hr 100 Slides / Day

Australia : 10 slides / hr 70 Slides / Day

U.K : Maximum 4 hr 30 Slides / Day

Consensus : 60 Slides / Day

Post-Analytical Phase

ReportingReporting

Should be Standard & Clear

Quality AssuranceQuality Assurance

انجام روند سيستماتيک مانيتورينگ،کنترل شناسايی منظور به کار

خطا بروز از وپيشگيرینمونه آوری جمع بيمارو سازی آماده از

پزشک توسط نتيجه دريافت مرحله تا

Staining Quality CheckStaining Quality Check

Random checking of

staining quality of smear

Seeding of known abnormal smear

in to the daily workload

Seeding of known abnormal smear

in to the daily workload

Evaluation of screener competence

Specimen Adequacy Monitor

Specimen Adequacy Monitor

Between 0.5% to 5% of all smears may reported as unsatisfactory

Review Of Positive Slides

Review Of Positive Slides

Hierarchic Review

all of reactive changes & epithelial abnormalities

&evaluating the discrepancies (CLIA Recommendation )

Not more than 14% of slides reported as abnormal

Not less than 0.5% of slides reported as HSIL

Rescreening of negative slidesDetection of FN results & Performance Sensitivity

Rescreening of negative slidesDetection of FN results & Performance Sensitivity

Various Method: 1-Random Rescreening of 10% of negative slides

2-Selective Rescreening of high risk cases

3 -100% Rescreening of negative slides

4-Rapid Rescreening (30 sec obj. 10 )

Not more than 96% of slides reported as negative

Causes of false negativeresults:

Causes of false negative results:

Sampling error : Sampling or Spreading of the cells

Screening error : Detection or Interpretation

Slide preparation error : Fixation, Staining, mounting

false Neg. proportionfalse Neg. proportion

FNP =

FNP Ideally less than 5-10%

FN

FN + TP

Estimation of false Neg. RateScreening Sensitivity

Estimation of false Neg. RateScreening Sensitivity

FNR=

FNR = FNP

+ FN due to sampling error + FN due to Slide preparation error

FNR usually more than 20%

Sensitivity of pap test usually 60-80%

FN

All of Screened Smear

Cytologic - Histologic Correlation

Cytologic - Histologic Correlation

Evaluating Specificity of Screening

Discrepancies may be due to:

Surgical Sampling

Regression of lesion

At least 65% of High grade Epithelial AbnormalitiesShould confirm on Histology

Retrospective ReviewRetrospective Review

When a new High grade epithelial abnormality detected by cytology or pathology:

All negative cytology obtained within last 5 yrs

Should be reviewed

Not more than 20% of cases should have cells consistent with High grade epithelial abnormality

On review of negative previous slides

Monitoring of the performance

Monitoring of the performance

Number of epithelial abnormality

ASC , LSIL , HSIL , Carcinoma

ASC / SIL ratio = 2-3

Proper Archiving of the slides & Reports

Proper Archiving of the slides & Reports

All Slides ( Neg. & Pos. ) : 5 yrs

All Reports : 10 yrs

Requisition Form : 2 yrs

Turn around timeTurn around time

At least 90% of smears

should be reported

within 5 working days