2.4 inokulasi & isolasi.ppt
TRANSCRIPT
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
1/24
Teknologi Dan Rekayasa
Kompetensi Keahlian
Analisis Kimia
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
2/24
Analisis DasarMikrobiologi
By :Aam Siti Nur Rochmah,ST
SMK Negeri 13 Bandung
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
3/24
Analisis Dasar Mikrobiologi
Teknologi dan Rekayasa
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
4/24
S!"AS MKR!BA
Teknologi dan Rekayasa
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
5/24
TEORI DASAR Populasi mikroba tidak terpisah sendiri menurut jenisnya, tetapi terdiri dari
campuran berbagai macam sel
Populasi bakteri dapat diisolasi menjadi kultur murni yang terdiri dari satu jenis yangdapat dipelajari morfologi, sifat dan kemampuan biokimiawinya.
Isolasi adalah proses pengambilan/pemisahan mikroba dari suatusumber(populasi)/Sampel
Sumber ikroba ! tanah,air dan udara
etoda sampling tergantung dari tujuan analisis
Suatu lingkungan tercemar jika terkandung "akteri indikator pencemar
"akteri indikator pencemaran adalah ! E. coli, Streptococcus faecal dan Clostridiumperfringens
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
6/24
Syarat bakteri Indikator :
Bakteri terdapat dalam usus manusia danhe#an $erdarah panas
%apat hidup le$ih lama dari pada $akteripatogen enterik lainnya
Ke$eradaannya dapat menun&ukkantingkat polusi
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
7/24
Alat dan Bahan
Agar kaldu 'Nutrien agar( didalamca#an )etri
TSA dalam ca#an )etri
Agar diri*lurus dari nutrient agar Agar miring dari nutrient agar*TSA TSB dalam ta$ung Biakan murni
+arum ose mata,lengkung*sudut danose lurus Rak ta$ung "ampu spirtus atau Bunsen
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
8/24
Langkah Kerja ISOLASI
#. $I% Sampling air tergantung dari sumbernya, dilakukan secaraaseptis
&ntuk melakukan isolasi mikroba, #ml sampel air dituangkankedalam cawan petri kemudian ditambahkan media umum dandibiarkan padat
'i inkubasi selama *+ jam pada suhu -. 0anah
Sampling dilakukan tergantung tujuan
Sampel ditimbang # gram dilarutkan dalam 1 ml a2uades steril
'ipipet # ml dan dimasukkan kedalam cawan petri
'itambahkan media umum dan dibiarkan padat. 'i inkubasi selama *+ jam pada suhu -
.&dara
Sampling dilakukan menggunakan media yang sesuai dengantujuan analisis,di inkubasi selama *+ jam pada suhu -
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
9/24
N!K"AS MKR!BA
Teknologi dan Rekayasa
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
10/24
Inokulasi Mikroba
N!K"AS adalah Proses pemindahan biakan murnisecara aseptik.jika tekniknya benar maka yang tumbuh pada hasilpemindahan hanyalah organisme yang diinginkan saja dengan kata lain tidaktercemar.
Biakan murni adalah biakan yang terdiri dari satuspecies saja.Tu&uan nokulasi : 1. Untuk pembenihan atau regenerasi mikroorganisme.
2. Untuk isolasi dengan maksud memperoleh biakan murni.
3. Untuk menyimpan guna keperluan sehari-hari atau dalam waktu lama 4. Untuk mempelajari sifat-sifat pertumbuhan suatu mikroba.
TE!" #$%$!
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
11/24
TEORI DASAR
3arum 4se merupakan alatbantu utama pada prosesInokulasi yaitu suatujarum yang panjangnya
#5 cm pada bag &jungnyaberbentuk lingkaran mmdan terbuat dari kawat 6ihrome.
$da bentuk jarum oseyaitu bermata, lurus, sikudan kotak
7ambar jarum 4Se
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
12/24
Metode Inokulasi
&ada 'awan &etri (
#engan )oresan *etode garis lurus+
,ig,ag pada metoda %ektor#engan )oresan metoda "solasi
#engan apusan %putel #igalsky#engan metode 'awan Tuang
Pada edia $gar iring !#engan )oresan ig,ag
#engan )oresan ig,ag tusuk
Pada media air.
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
13/24
Tahaan ersiaan Media
-ara menuangkan Media pada ca#an )etri
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
14/24
I!OK"LASI #ADA $A%A! #ETRI
.oresan se&a&ar 'metode sektor(se dibakar sampai steril/
dinginkan.
#engan ose steril diambil biakan
bakteri/ dipulaskan pada salah
satu sisi+tepi media/ janganmenyentuh dinding &etri dish.
#engan ose steril yang lain/
pulasan itu digoreskan sejajar
sampai memenuhi permukaan
media+ menurut sektornya
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
15/24
)oresan sejajar melingkar0*etode isolasi
se dibakar sampai steril/dinginkan.
#engan ose steril/ biakan bakteridipulaskan pada satu sisi dari mediaseara berulang/ jangan sampaimenyentuh dinding awan.
#engan ose yang sama/ ujungpulasan tadi digoreskan sejajar padasisi yang lain setelah medianya
diputar 5.
)oresan di ulang pada tiap sisinyasampai memenuhi permukaan media/penggoresan dilakukan setelah medianyadiputar 5.
I!OK"LASI #ADA $A%A! #ETRI
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
16/24
etoda sebar!%ample air atau kulturbakteri didalam mediaair diambil dengan pipetsteril sebanyak /1 ml
dimasukan padapermukaan media platetepat ditengah-tengahnya.
#engan menggunakanspatel terbuat darikaa+kawat yang sudahsteril dan dingin/ tetesanitu diratakan ke seluruh
permukaan media plate.
I!OK"LASI #ADA $A%A! #ETRI
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
17/24
I!OK"LASI #ADA $A%A! #ETRI
Metoda -a#an Tuang:%uspensi bakteri+sample diteteskan
kedalam awan petri steril
sebanyak /1 atau 1 ml seara
aseptis.
Tuangkan media padat steril yang
telah diairkan sampai menutupi
semua permukaan dasar awan
petri .
'ampur dengan memutar awan 36
kekiri 36 kekanan tunggu sampai
agarnya membeku.
&osisi awan dibalik/ inkubasi pada
suhu 375' selama 48 jam.
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
18/24
I!OK"LASI #ADA
MEDIA A&AR MIRI!&
Tu&uan :
Untuk memperbanyak koloni bakteriUntuk keperluan sehari-hari
Untuk menyimpan bakteri dalam waktu lama
Teknologi dan Rekayasa
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
19/24
I!OK"LASI #ADA
MEDIA A&AR MIRI!&
A. Goresan zigzag#. 'engan ose yang sudah steril
dan dingin, diambil kolonibakteri.
. 0utup tabung media dibukadengan menjepit menggunakanjari kelingking kanan, mulut
tabung dibakar dengan nyalaapi tidak berjelaga.
. 4se yang sudah berisi kolonibakteri digoreskan 8ig8ag padapermukaan media, ditengah.
. ulut tabung dibakar lagi,segera ditutup dengantutupnya.
9. 4se dibakar lagi sampai steril
B. Goresan zigzag danditusuk :
Pelaksanaan penanamannyaseperti bagian $ denganperbedaan sebagai berikut !
&rutan setelah digoreskan8ig8ag kemudian ditusukkanditengah*tengahnya # kali
ontoh !
Inokulasi pada media 0ripelSugar Iron $gar.
Teknologi dan Rekayasa
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
20/24
I!OK"LASI #ADA MEDIA
SEMI SOLID
Tu&uan:untuk identifikasi gerak bakteri
untuk menyimpan bakteri
"angkah ker&a :
!se &arum disterilkan /dinginkan0
%engan ose itu diam$ilkoloni $akteri secara aseptis
Mulut ta$ung dile#atkan
pada api, ose &arum yangada koloni $akterinyaditusukkan tegak lurus pada$agian tengah sampai dasarta$ung0
"akukan secara aseptis
Teknologi dan Rekayasa
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
21/24
I!OK"LASI
#ADA MEDIA $AIR
Tu&uan :untuk memperbanyak bakteri
untuk identifikasi
"angkah Ker&a :
4se dibakar sampai steril,dinginkan.
'engan ose yang sudah steril,diambil koloni bakteri secaraaseptis.
4se yang sudah berisi koloni
bakteri digoreskan pada dindingtabung bagian dalam sebelahatas posisi media dimiringkan.
edia ditegakkan, goresanbakteri akan teremdam cairanmedia.
:akukan secara aseptis
Teknologi dan Rekayasa
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
22/24
)engamatan:
&ada 'awan &etri9oloni bakteri diamati berdasarkan halsbb(
: ukuran ( diukurdiameternyadgn satuan mm
: ;arna ( putih/ kuning/ hijau/merah dsb.
: bentuk ( bulat/ serabut/ ry,oiddsb.
: permukaan ( datar/embung/ekung/ kasar/ halus
: sifatnya ( keruh/jernih/ kering/berlendir/ menjalar/
haemolyti/ anhaemolyti
"nokulasi dengan tujuan
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
23/24
Su'ber Belajar
Bi$iana 0 "ay, 124,Analisis Mikrobiologi diLaboratorium, +akarta : )0T0 Ra&a .ra5indo )ersada
)elc6ar / -han, 124,Dasar-Dasar Mikrobiologi,+akarta : )ress0
Ratna Siri 7, 123, Mikrobiologi dalam Praktek, Bogor :8akultas M)A )B0
nus Suria#iria01290Pengantar Mikrobiologi Umum0Bandung : Angkasa0
Modul Analisis Mikro$iologi Secara Mikroskopis
+o$sheet Analisis Mikro$iologi Secara Mikroskopis
Teknologi dan Rekayasa
-
5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt
24/24
Sekian
%ampai jumpa pada materi lain
Teknologi dan Rekayasa