03520010.pdf

5/24/2018 03520010.pdf

1/107

PENGARUH PEMBERIAN TEH HIJAU (Camellia sinensis L.)

TERHADAP AKTIVITAS RADIKAL BEBAS PADA HEPAR

MENCIT (Mus musculus) DIABETES

SKRIPSI

Oleh:

NUR AYLINDANIANIM: 03520010

JURUSAN BIOLOGIFAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MALANG

2007

5/24/2018 03520010.pdf

2/107




SKRIPSI

Oleh:NUR AYLIN DANIA

NIM: 03520010

Telah disetujui oleh:

Dosen Pembimbing

Dra. Retno Susilowati, M.Si

NIP. 132 083 910

Tanggal: 28 September 2007

Mengetahui,Ketua Jurusan Biologi

Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah, M.Si

NIP. 150 229 505

5/24/2018 03520010.pdf

3/107




SKRIPSI

Oleh:

NUR AYLINDANIA

NIM: 03520010

Telah Dipertahankan di Depan Dewan Penguji Skripsi dan

Dinyatakan Diterima Sebagai Salah Satu PersyaratanUntuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)

Tanggal : 05 Oktober 2007

Susunan Dewan Penguji :

1. Penguji Utama : Dr. drh. Bayyinatul M., M. Si

NIP. 150 229 505

2. Ketua : Evika Sandi Savitri, M.P

NIP. 150 327 253

3. Sekretaris : Dra. Retno Susilowati, M. Si

NIP. 132 083 910

4.Pembimbing Agama : Munirul Abidin, M.Ag

NIP. 150 321 634

Tanda Tangan

(..)

(..)

(..)

(..)

Mengetahui dan MengesahkanDekan Fakultas Sains dan Teknologi

Prof. Drs. Sutiman B. S., SU, DSc.

NIP: 130 809 123

5/24/2018 03520010.pdf

4/107

i

Motto

))))!!!!$$$$####iiiitttt$$$$ttttBBBBssss))))////4444LLLLyyyymmmm((((####iiiitttt$$$$tttt rrrr''''////

Sesungguhnya Allah tidak merubah keadaan sesuatu

kaum sehingga mereka merubah keadaan yang ada pada

diri mereka sendiri (Ar-rad: 11).

Kita tidak dapatmengubah struktur genetik

kita. Namun, kita dapat

memodifikasi ekspresi

gen-gen kita.

5/24/2018 03520010.pdf

5/107

ii

LEMBAR PERSEMBAHAN

Karya ini didedikasikan untuk semua orang

yang mencintai ilmu pengetahuan dan untuk

semua orang yang tak kenal lelah dalam

mencari kebenaran.

5/24/2018 03520010.pdf

6/107

iii

KATA PENGANTAR

Assalamualaikum Wr. Wb.

Puji dan syukur dengan hati dan pikiran yang tulus penulis panjatkan

kehadirat Allah SWT, karena berkat nikmat, maunah, dan hidayah-Nya, penulis

dapat dapat menyelesaikan penulisan skripsi ini.

Shalawat serta salam semoga tetap terlimpahkan kepada junjungan kita

Nabi Muhammad SAW beserta keluarga dan sahabatnya yang setia

mengorbankan jiwa raga dan lainnya untuk tegaknya syiar Islam, yang pengaruh

dan manfaatnya hingga kini masih terasa.

Penulis menyadari skripsi ini tidak akan selesai tanpa adanya bantuan dari

berbagai pihak yang secara langsung maupun tidak langsung telah membantu

penulis dalam menyelesaikan tugas akhir ini. Untuk itu, ucapan syukur dan doa

tulus penulis panjatkan, semoga Allah senantiasa memberikan rahmat, anugerah,

dan hidayah-Nya bagi mereka semua. Ucapan terima kasih khusus penulis

persembahkan kepada:

1. Prof. Dr. H. Imam Suprayogo, selaku Rektor Universitas Islam Negeri(UIN) Malang.

2. Prof. Drs. Sutiman Bambang Sumitro, S.U., D.Sc Selaku Dekan FakultasSains dan Teknologi UIN Malang.

5/24/2018 03520010.pdf

7/107

iv

3. Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah, M.Si, selaku Ketua Jurusan BiologiFakultas Sains dan Teknologi UIN Malang.

4. Dra. Retno Susilowati, M.Si, yang telah sabar dan ikhlas kehilanganbanyak waktunya untuk membimbing proses penyelesaian skripsi ini.

5. Munirul Abidin, M.Ag, yang telah mengajarkan bagaimana memandangsegala realitas ilmiah dengan menggunakan kaca mata kebenaran Islam.

6. Kedua orang tuaku, Abah Achmad Fauzi, Ibu Nur Halimatus Sadiyah,dan ketiga adikku; yang doa, motivasi, dan harapannya telah menyatu

dalam denyut nadiku, sehingga menjadikanku seorang manusia yang

utuh.

7. Semua guru-guruku dari kecil sampai sekarang, yang telah memberikankuilmu yangInsyaAllahbermanfaat.

8. Rekan-rekan kerja di Laboratorium BIOMOL Universitas BrawijayaMalang, yang telah membantu proses penelitian.

9. Adizda, yang telah bersedia menjadi kakak, rekan kerja, sahabat, danmotivatorku; dan yang telah menjadikanku berusaha bagaimana menjadi

muslimah yang baik dan tangguh.

10.Teman-teman Biologi, khususnya angkatan 2003, yang telah menjadipatner terbaikku dalam menggali ilmu di Universitas ini.

11.Semua kawan-kawan terbaikku, terima kasih telah memberiku hangatnyapersahabatan.

12.Sahabat-sahabat PMII Komisariat Sunan Ampel umumnya, dan RayonGalileo khususnya, yang telah membentuk identitasku.

5/24/2018 03520010.pdf

8/107

v

13.Gus dan Ning LKP2M, yang telah memberi semangat untuk terusmenggali dan memberdayakan potensi diri.

14.Semua pihak yang telah membantu dan memberikan dukungan, yangtidak bisa penulis sebutkan satu persatu.

Semoga Allah melindungi mereka semua. Akhirnya, penulis berharap

semoga skripsi ini bermanfaat dan menambah khasanah ilmu pengetahuan. Amin.

Wassalamualaikum Wr. Wb

Malang, 28 September 2007

Penulis

5/24/2018 03520010.pdf

9/107

vi

DAFTAR ISI

HALAMAN MOTTO ......................................................................................... i

HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................................... ii

KATA PENGANTAR......................................................................................... iii

DAFTAR ISI........................................................................................................vi

DAFTAR TABEL ............................................................................................. viii

DAFTAR GAMBAR......................................................................................... ix

DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................x

ABSTRAK ............................................................................................................ xi

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah............................................................................1

1.2 Rumusan Masalah.....................................................................................7

1.3 Tujuan Penelitian ......................................................................................7

1.4 Manfaat Penelitian ....................................................................................7

1.5 Batasan Masalah .......................................................................................8

1.6 Hipotesis Penelitian ..................................................................................8

BAB II KAJIAN PUSTAKA

2.1 Diabetes Mellitus .....................................................................................9

2.1.1 Pengertian Diabetes Mellitus ........................................................... 92.1.2 Gejala Diabetes Mellitus..................................................................10

2.1.3 Klasifikasi dan Kriteria Diabetes Mellitus.......................................10

2.1.3.1 Klasifikasi Diabetes mellitus ...............................................10

2.1.3.2 Kriteria Diagnosis Diabetes mellitus ...................................10

2.2 Patofisiologi Diabetes Mellitus.................................................................12

2.2.1 Pengendalian Glukosa oleh Insulin..................................................12

2.2.2 Dampak Penyimpangan Homeostasis Glukosa ............................... 14

2.2.3 Glukosa Produk Hati........................................................................15

2.2.4 Patogenik Radikal Bebas pada Diabetes Mellitus...................16

2.2.4.1 Radikal Bebas ............................................................. 16

2.2.4.2 Hubungan Diabetes Mellitus dengan Radikal Bebas.. 26

2.3 Pengobatan Diabetes Mellitus ..................................................................312.4 Teh Hijau (Camellia sinensis L.) .............................................................. 33

2.4.1 Pengertian dan sejarah teh hijau .....................................................33

2.4.2 Kandungan teh hijau .......................................................................34

2.4.3 Pengaruh teh hijau terhadap kesehatan ...........................................34

2.5 Streptozotocin sebagai Bahan Diabetogenik ............................................37

2.6 Pengukuran Kadar Radikal Bebas ........................................................... 39

2.7 Kajian Al-Quran dan As-Sunnah Tentang Kesehatan ............................ 40

5/24/2018 03520010.pdf

10/107

vii

BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Rancangan Penelitian................................................................................453.2 Waktu dan Tempat Penelitian ..................................................................45

3.3 Variabel Penelitian ...................................................................................45

3.4 Populasi dan Sampel.................................................................................46

3.5 Alat dan Bahan.......................................................................................... 46

3.5.1 Alat...................................................................................................46

3.5.2 Bahan ...............................................................................................46

3.6 Prosedur Kerja .......................................................................................... 46

3.6.1 Persiapan Hewan Coba ..........................................................................46

3.6.2 Persiapan Perlakuan...............................................................................46

3.6.2.1 Pengukuran Kadar Glukosa Darah.......................................47

3.6.2.2 Pembagian Kelompok Sampel.............................................47

3.6.2.3 Penghitungan Dosis Teh Hijau ............................................483.6.3 Kegiatan Penelitian ................................................................................48

3.6.3.1 Perlakuan Pemberian Teh Hijau ..........................................48

3.6.3.2 Pengukuran Kadar Radikal Bebas .......................................49

3.6.3.2.1 Pembuatan Kurva Standart MDA.........................49

3.6.3.2.2 Pengukuran Kadar MDA Hepar............................49

3.7 Analisis Data .............................................................................................50

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian ......................................................................................... 51

4.2 Pembahasan...............................................................................................54

4.3 Kajian Islam Terkait Hasil Penelitian .......................................................68

BAB V PENUTUP

5.1 Kesimpulan ...............................................................................................73

5.2 Saran .........................................................................................................73

DAFTAR PUSTAKA.......................................................................................... 75

LAMPIRAN.........................................................................................................81

5/24/2018 03520010.pdf

11/107

viii

DAFTAR TABEL

No Judul Halaman

1. Kadar MDA pada hepar mecit (Mus musculus) diabetes sesudah perlakuanpemberian teh hijau (Camellia sinensis L.) ....................................................51

2. Ringkasan ANOVA Pengaruh Pemberian Pemberian Teh Hijau TerhadapKadar MDA Pada Hepar Mencit (Mus musculus) Diabetes ........................... 53

3. Ringkasan Uji BNJ 1% Dari Penurunan Kadar Radikal Bebas Pada HeparMencit (Mus musculus) Diabetes Yang Diberi teh hijau................................53

5/24/2018 03520010.pdf

12/107

ix

DAFTAR GAMBAR

No Gambar Halaman

4. Mekanisme peroksidasi lipid ..........................................................................235. Struktur kimia MDA.......................................................................................246. Mekanisme pengrusakan sel pankreas yang dikarenakan stress oksidatif

dalam proses autoimun ...................................................................................28

7. Struktur kimia Streptozotocin .........................................................................378. Reaksi pembentukan kromogen MDA-TBA ..................................................399. Grafik kadar radikal bebas hepar mencit setelah perlakuan ........................... 5210.Hipotesis terbaru tentang pembentukan reactive oxygen intermediate ..........5711.Mekanisme Pengaktifan NF-kB......................................................................58

5/24/2018 03520010.pdf

13/107

x

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Judul Halaman

Lampiran 1. Penghitungan Dosis Streptozotocin...............................................81

Lampiran 2. Pembuatan Larutan untuk Uji TBA...............................................82

Lampiran 3. Kurva Pemeriksaan MDA Hepar................................................... 83

Lampiran 4. Penyuntikan STZ...........................................................................84

Lampiran 5. Data Kadar Glukosa Darah Mencit (Mus musculus) Sebelum dan

Sesudah Pemberian Teh Hijau......................................................85

Lampiran 6. Kurva Standart MDA....................................................................86

Lampiran 7. Perhitungan Analisis Variansi (ANOVA) dalam Rancangan Acak

Lengkap (RAK) ............................................................................87

Lampiran 8. Gambar Alat-alat dan Bahan-bahan penelitian ............................. 89

Lampiran 10 Gambar pelaksanaan penelitian....................................................92

5/24/2018 03520010.pdf

14/107

xi

ABSTRAK

Aylindania, Nur. 2007. Pengaruh Pemberian Teh Hijau (Camellia sinensis L.)Terhadap Aktivitas Radikal Bebas Pada Hepar Mencit (Mus

musculus) Diabetes. Skripsi, Jurusan Biologi Fakultas Sains dan

Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Malang. Pembimbing : Dra.

Retno Susilowati, M.Si.

Kata Kunci : Teh Hijau, Radikal Bebas, Diabetes

Kesehatan merupakan salah satu kenikmatan dari Allah SWT yang harus

senantiasa dijaga. Pola hidup yang kurang baik saat ini menimbulkan berbagai

penyakit, seperti diabetes mellitus (DM). DM merupakan penyakit yang

menyebabkan meningkatnya aktivitas radikal bebas yang pada akhirnya

menimbulkan berbagai penyakit komplikasi yang mengikutinya. Aktivitas radikal

bebas tersebut hanya bisa dihambat dengan adanya antioksidan. Pada saat ini

banyak ilmuwan yang menggunakan bahan alam sebagai antioksidan. Salah satu

tanaman yang telah terbukti banyak mengandung antioksidan adalah teh hijau.

Kandungan teh yang telah dipercaya dapat membantu sistem antioksidan dalam

tubuh adalah flavonoid, vitamin, mineral, dan enzim. Melihat potensi antioksidan

di dalam teh hijau tersebut, maka dalam penelitian ini akan di uji potensi teh hijau

dalam menurunkan aktivitas radikal bebas yang diakibatkan penyakit diabetes.

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan

Rancangan Acak Kelompok (RAK) dalam empat ulangan. Sedangkan perlakuan

yang digunakan adalah pemberian teh hijau (Camelia sinensis) dengan tiga dosis,

yaitu dosis 1 (14,56 mg/oral/hari), dosis 2 (29,12 mg/oral/hari), dan dosis 3 (58,24mg/oral/hari). Untuk mengukur aktivitas radikal bebas, parameter yang digunakan

adalah kadar MDA (Malondialdehyde). Pelaksanaan penelitian pada bulan Juni

2007 Agustus 2007, yang bertempat di Laboratorium Fisiologi Hewan dan

Laboratorium Biologi Sel dan Molekuler, Jurusan Biologi, Universitas Brawijaya

Malang. Analisis yang digunakan dalam penelitian ini adalah Analisis Variansi

(ANOVA) dengan taraf signifikansi 99%.

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian teh hijau (Camelia

sinensis) memberikan pengaruh terhadap penurunan aktivitas radikal bebas pada

hepar mencit (Mus musculus) diabetes. Dari ketiga dosis teh hijau yang diberikan,

dosis 2 (29,12 mg/oral/hari) merupakan dosis yang paling tinggi dalam

menurunkan kadar MDA (3,400 mg MDA/ml) hingga mendekati kadar normal

(3,450 mg MDA/ml). Tetapi, secara statistik diantara ketiga dosis pemberian tehhijau yang diberikan, tidak mempunyai perbedaan secara nyata. Hal ini

menunjukkan bahwa ketiga dosis tersebut memiliki efektitas yang sama dalam

menurunkan aktivitas radikal bebas pada hepar mencit (Mus musculus) diabetes.

5/24/2018 03520010.pdf

15/107

xii

BAB I

PENDAHULUAN

1.1Latar BelakangAllah SWT sesungguhnya telah menciptakan segala sesuatu dalam

kondisi yang seimbang, begitu juga dalam menciptakan tubuh manusia, hal ini

sebagaimana yang tercakup dalam surat Al-Infithaar ayat 6-8 yang berbunyi:

$pr't|M}$#$tx8xy7n/t/x69$#%!$#y7s)n=yzy71|sy7s9yysdr&;u$u!$xt7.u

Hai manusia, apakah yang telah memperdayakan kamu terhadap

Tuhanmu Yang Maha Pemurah. Yang telah menciptakan kamu lalu

menyempurnakan kejadianmu dan menjadikan mu seimbang, dalam

bentuk apa saja yang Dia kehendaki, Dia menyusun tubuhmu

(Abdushshamad, 2003).

Dalam ilmu Fisiologi Hewan, keseimbangan tersebut dinamakan kondisi

Homeostasis, yaitu kondisi yang seimbang dan mantap pada tubuh (Campbell,

2004). Jika keseimbangan tubuh terganggu, maka tubuh akan sakit.

Manusia hendaknya selalu menjaga keseimbangan tersebut agar tubuhnya

selalu dalam keadaan sehat, karena kesehatan merupakan salah satu nikmat dari

Allah SWT yang sangat berharga. Bahkan, Imam Bukhari dalam kitab shahihnya

meriwayatkan dari Ibnu Abbas yang berkata:

: ) )Dua nikmat yang sering tidak diperhatikan oleh kebanyakan

manusia, yaitu kesehatan dan waktu luang (Al-Qardhawy, 1999).

5/24/2018 03520010.pdf

16/107

xiii

Oleh karena itu, sebagai orang yang bersyukur terhadap nikmat yang telah

diberikan Allah, manusia seharusnya selalu menjaga kesehatan tubuhnya. Banyak

cara yang bisa digunakan manusia untuk menjaga kesehatan, seperti berolah raga,

selalu menjaga kebersihan, dan senantiasa mengatur pola makan yang sehat dan

seimbang.

Di dalam Islam, pemeliharaan kesehatan yang paling utama yaitu

meninggalkan israf (berlebih-lebihan) dan manjaga pola makan (Qardhawi, 1998).

Di Indonesia, terutama di kota-kota besar, dengan adanya perubahan gaya hidup

yang menjurus ke westernismeberakibat pada perubahan pola makan dan hidup

masyarakat. Makanan tinggi kalori, tinggi lemak dan kolesterol, merupakan

makanan yang banyak digemari masyarakat, yang berdampak meningkatkan

risiko berbagai penyakit (Hidayati, 2006). Salah satu penyakit yang disebabkan

oleh pola makan dan pola hidup yang kurang sehat tersebut adalah penyakit

diabetes mellitus (DM).

Diprediksikan dalam 20-30 tahun mendatang akan terjadi lonjakan

jumlah penderita diabetes ini di seluruh dunia. Bila diabetes selama ini banyak

menyerang orang lanjut usia di atas 50 tahun, maka dalam 2 dekade mendatang

juga akan menyerang banyak orang dewasa, anak-anak, dan wanita (Iskadarwati,

2006). Susanto (2006) menambahkan, Studi populasi yang dilakukan World

Health Organization(WHO) tahun 2005 menemukan, jumlah pengidap diabetes

melitus (DM) tipe II di Indonesia mencapai peringkat keempat setelah India

(31,77 juta), Cina (20,8 juta), dan Amerika Serikat (17,7 juta). Di Indonesia,

penderita diabetes terhitung sekitar 8,6 juta orang.

5/24/2018 03520010.pdf

17/107

xiv

Menurut Widijanti (2005) Diabetes Melitus (DM) adalah kelainan

metabolisme karbohidrat, di mana glukosa darah tidak dapat digunakan dengan

baik, sehingga menyebabkan keadaan hiperglikemia. Penderita DM mempunyai

risiko untuk menderita komplikasi yang spesifik akibat perjalanan penyakit ini.

Komplikasi tersebut diantaranya retinopati (bisa menyebabkan kebutaan), gagal

ginjal, neuropati, aterosklerosis (bisa menyebabkan stroke), dan penyakit arteria

koronaria (Coronary artery disease).

Adanya komplikasi penyakit DM dengan penyakit lainnya terkait erat

dengan adanya radikal bebas pada tubuh penderita. Menurut Jung (2006) DM

berhubungan dengan meningkatnya aktifitasReactive Oxygen Spesies (ROS) atau

radikal bebas, yang menyebabkan berbagai kerusakan jaringan. Sofia (2003)

menambahkan, radikal bebas berperan dalam terjadinya berbagai penyakit, hal ini

dikarenakan radikal bebas adalah molekul kimia yang memiliki pasangan elektron

bebas dikulit terluarnya, sehingga sangat reaktif dan mampu bereaksi dengan

protein, lipid, karbohidrat, atau DNA.

Untuk mengatasi serangan radikal bebas dalam tubuh diperlukan unsur

yang bisa memerangi radikal bebas tersebut, unsur ini biasa disebut antioksidan

(Gsianturi, 2006). Pemahaman ilmiah tentang hubungan radikal bebas dengan

antioksidan baru muncul pada tiga hingga empat dekade terakhir ini. Hingga kini,

berbagai uji kimiawi, biokimia, klinis, dan epidemiologi banyak mendukung efek

protektif antioksidan terhadap penyakit akibat stress oksidatif (Saurisari, 2006).

Sebenarnya, semua sel dalam tubuh mempunyai enzim yang berperan

sebagai antioksidan, seperti enzim SOD (Superoxide dismutase) dan glutation

5/24/2018 03520010.pdf

18/107

xv

peroksidase. Tetapi, dengan meningkatnya usia, terjadilah penurunan jumlah

antioksidan tersebut. Sehingga radikal bebas tidak dapat sepenuhnya

dimusnahkan. Belum lagi adanya peningkatan radikal bebas yang disebabkan oleh

suatu penyakit dan adanya penyusupan radikal bebas dari luar akan mempersulit

kerja diperlukan adanya antioksidan yang berasal dari luar tubuh (Sibuea, 2006).

Ketika manusia terkena suatu penyakit, maka orang tersebut tidak

diperbolehkan untuk berputus asa, karena sesungguhnya semua penyakit pasti ada

obatnya. Hal tersebut sebagaimana hadist yang diriwayatkan oleh Imam Al-

Bukhori dari Usamah bin Syuraik yang berbunyi:

, )(Sesungguhnya Allah tidak menurunkan penyakit, melainkan telah

pula menurunkan obatnya(Al-Qardhawy, 1999).

Oleh karena itu, ketika ada suatu penyakit, manusia hendaknya berusaha untuk

mencari obat untuk penyakit tersebut.

Pada saat ini, para ilmuwan banyak yang meneliti berbagai bahan alam

untuk dijadikan obat untuk suatu penyakit, salah satu bahan alam yang digunakan

tersebut adalah tumbuhan. Di dalam Al-quran surat Asy-Syuaraa ayat 07

disebutkan bahwa Allah SWT telah menciptakan berbagai macam tumbuhan

yang baik, ayat tersebut berbunyi:

s9u r&(#ttn

5/24/2018 03520010.pdf

19/107

xvi

Ayat di atas memberitahukan kepada manusia bahwasanya Allah telah

menumbuhkan berbagai macam tumbuh-tumbuhan yang baik, dan manusia

diperintahkan untuk memperhatikan hal itu. Tumbuhan-tumbuhkan yang baik

tidak hanya bisa diartikan bahwa tumbuh-tumbuhan itu sehat atau bagus, tetapi,

juga bisa diartikan tanaman itu mengandung suatu zat yang bermanfaat bagi

kehidupan manusia.

Tanaman obat banyak digunakan masyarakat menengah kebawah terutama

dalam upaya pencegahan dan pengobatan suatu penyakit. Hal ini dikarenakan,

banyak orang beranggapan bahwa penggunaan tanaman obat relatif lebih aman

dibandingkan obat sintetis (Maheshwari, 2002). Jika dikaitkan dengan keberadaan

radikal bebas sebagai pemicu adanya berbagai penyakit di atas, maka diperlukan

adanya tanaman yang mengadung antioksidan.

Salah satu tanaman yang telah terbukti banyak mengandung antioksidan

adalah teh (Camellia sinensis L.). Teh merupakan salah satu minuman yang

paling populer di dunia setelah air biasa, selain itu teh merupakanfunctional food

yang mempunyai berbagai khasiat dalam kesehatan dan harganya relatif murah

(Pambudi, 2003). Daun teh mengandung tiga komponen penting yang

mempengaruhi mutu minuman, yaitu kafein yang memberikan efek simultan,

tanin memberi kekuatan rasa dan polifenol yang memiliki khasiat kesehatan

(Khomsan, 2007).

Kandungan teh yang telah dipercaya dapat membantu sistem antioksidan

dalam tubuh adalah flavonoid, vitamin, -carotene, mineral, cafein, enzim, dan

lain sebagainya (Pambudi, 2003). Di antara berbagai zat yang terkadung dalam

5/24/2018 03520010.pdf

20/107

xvii

teh tersebut, flavonoid merupakan antioksidan yang kekuatannya 100 kali lebih

efektif dibandingkan vitamin C dan 25 kali lebih tinggi dibandingkan vitamin E

(Khomsan, 2007). Salah satu jenis flavonoid dalam teh adalah katekin, dari

berbagai penelitian (Smith, 2006; Peran, 2005; dan Tsuneki, 2004) disebutkan

bahwa katekin merupakan antioksidan terkuat dalam teh.

Berdasarkan cara atau proses pengolahannya, teh dapat diklasifikasikan

menjadi tiga jenis, yaitu teh hijau, teh oolong, dan teh hitam. Dalam penelitian ini

digunakan teh hijau, karena teh hijau merupakan salah satu jenis teh yang

mempunyai kandungan katekin lebih tinggi dibandingkan teh hitam maupun teh

oolong (Pambudi, 2003). Teh hijau dibuat dengan cara menginaktifasi enzim

oksidase yang ada dalam pucuk daun teh segar, dengan cara pemanasan atau

penguapan sehingga oksidasi enzimatik terhadap katekin dapat dicegah (Hartoyo,

2003).

Melihat potensi antioksidan di dalam teh hijau tersebut, maka dalam

penelitian ini akan di uji potensi antioksidan teh hijau tersebut dalam menghambat

kerja radikal bebas yang diakibatkan penyakit diabetes. Dosis teh yang digunakan

dalam penelitian ini adalah tiga dosis yang diperoleh dari perlipatan dosis

konsumsi teh manusia sehari-hari. Untuk mengukur aktivitas radikal bebas bisa

digunakan berbagai cara. Tetapi, pada umumnya pengukuran aktivitas radikal

bebas menggunakan uji TBA (Thiobarbituric acid test), yaitu dengan mengukur

kadar malondialdehyde (MDA) dalam jaringan atau organ. Pada penelitian ini

MDA yang diukur adalah MDA yang terdapat dalam hepar, hal ini dikarenakan

selain hepar merupakan organ yang berfungsi sebagai detoksifikasi racun, pada

5/24/2018 03520010.pdf

21/107

xviii

keadaan diabetes di dalam hati terjadi peningkatan metabolisme lemak, yang

menurut Wresdiyati (2004) metabolisme tersebut menghasilkan radikal bebas

sebagai hasil sampingannya.

1.2Rumusan MasalahBerdasarkan latar belakang di atas, dapat dirumuskan masalah sebagai

berikut: Bagaimanakah pengaruh pemberian teh hijau (Camellia sinensis L.)

terhadap aktivitas radikal bebas pada hepar mencit (Mus musculus) diabetes?

1.3TujuanAdapun tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui bagaimana

pengaruh pemberian teh hijau (Camellia sinensis L.) terhadap aktivitas radikal

bebas pada hepar mencit (Mus musculus) diabetes.

1.4Manfaat PenelitianHasil penelitian yang diperoleh, diharapkan memiliki nilai guna atau

manfaat baik dari aspek pengembangan ilmu maupun aspek aplikasinya di

masyarakat. Berkaitan dengan aspek pengembangan ilmu, studi ini berguna untuk

mengetahui prinsip dasar kerja antioksidan, khususnya yang terdapat dalam teh

hijau

Dalam aspek aplikasi di masyarakat, hasil studi ini diharapkan berguna

untuk membantu masyarakat dalam upaya menanggulangi komplikasi penyakit

yang disebabkan oleh penyakit diabetes.

5/24/2018 03520010.pdf

22/107

xix

1.5Batasan MasalahPenelitian ini mempunyai batasan masalah sebagai berikut:

a. Mencit yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit jantan daristrain Balb/c yang berumur dua bulan dengan berat badan rata-rata 20

gram.

b. Bahan yang digunakan untuk menginduksi DM adalah Streptozotocindengan caraMultiple Low Doze(MLD) atau dosis rendah berulang, yaitu

sebesar 30 mg/kg BB setiap hari selama lima hari.

c. Parameter yang digunakan untuk mengukur aktivitas radikal bebas adalahkadar malondialdehyde (MDA) yang terdapat dalam hepar mencit.

1.6HipotesisHipotesis dari penelitian ini adalah pemberian teh hijau (Camellia

sinensis L.) berpengaruh pada aktivitas radikal bebas pada hepar mencit (Mus

musculus) diabetes.

5/24/2018 03520010.pdf

23/107

xx

BAB II

KAJIAN PUSTAKA

2.1 Diabetes Mellitus

2.1.1 Pengertian Diabetes Mellitus

Sejak tahun 1552 sebelum Masehi, di Mesir telah dikenal suatu penyakit

yang mempunyai gejala, antara lain, sering kencing dalam jumlah yang banyak

(poliuria) dan penurunan berat badan yang cepat tanpa disertai rasa nyeri. Pada

tahun 400 SM, seorang penulis dari India bernama Sushartha memberi nama

penyakit tersebut sebagai penyakit kencing madu (Honey Urine Disease).

Namun, kemudian penyakit ini diberi nama Diabetes, yang berarti mengalir

terus dan mellitusyang berarti manis. Disebut diabetes karena selalu minum

dalam jumlah banyak (polydipsia) yang kemudian mengalir terus berupa urine,

dan disebut mellitus karena urin penderita tersebut mengandung glukosa

(Misnadiarly, 2006).

Subroto (2006) mendefinisikan diabetes mellitus sebagai suatu kelainan

metabolik kronis serius di mana konsentrasi glukosa dalam darah secara kronis

lebih tinggi dari pada nilai normal (hiperglikemia) akibat tubuh kekurangan

insulin atau fungsi insulin tidak efektif. Adam (1999) menambahkan, keadaan

hiperglikemiyang kronik pada penderita diabetes mellitus dapat mengakibatkan

komplikasi kronik beberapa organ tubuh, terutama mata, ginjal, syaraf, jantung,

dan pembuluh darah.

5/24/2018 03520010.pdf

24/107

xxi

2.1.2 Gejala Diabetes Mellitus

Penderita Diabetes mellitus menunjukkan gejala-gejala seperti berat badan

menurun, kelelahan, penglihatan kabur, sering buang air kecil, terus menerus lapar

dan haus, dan meningkatnya kadar gula dalam darah dan air seni (Susilowati,

2005). Misnadiarly (2006) menambahkan, selain gejala-gejala di atas kadang

penderita diabetes mellitus mengalami gejala-gejala seperti sering kesemutan,

kulit terasa panas, kram, mudah mengantuk, gatal di sekitar kemaluan (khususnya

wanita), mata kabur, gigi mudah goyah, dan kemampuan seksual menurun.

2.1.3 Klasifikasi dan Kriteria Diabetes Mellitus

2.1.3.1 Klasifikasi Diabetes mellitus

Subroto (2002) menyebutkan bahwa American Diabetes Association

(ADA) mengklasifikasikan diabetes mellitus sebagai berikut:

a. Diabetes mellitus tipe 1 (IDDM)Tipe ini disebabkan oleh kerusakan sel beta pankreas sehingga terjadi

kekurangan insulin absolut. Penyebab IDDM diduga kuat disebabkan oleh

infeksi yang menimbulkan auto-imun yang berlebihan, sehingga menyerang

dan merusak juga sel-sel langerhans.

b. Diabetes mellitus tipe 2 (NIDDM)Tipe ini disebabkan oleh gangguan sekresi insulin yang progresif karena

resistensi insulin. NIDDM diduga disebabkan oleh penurunan sensifitas sel

target terhadap insulin.

c. Diabetes mellitus kehamilan

5/24/2018 03520010.pdf

25/107

xxii

Dalam hal ini diabetes hanya akan diderita oleh wanita selama masa

kehamilan dan pada umumnya akan kembali normal setelah melahirkan.

d. Diabetes mellitus tipe lainTipe ini disebabkan faktor-faktor lain seperti efek genetis pada fungsi sel

beta pankreas pada kerja insulin, penyakit pankreas eksokrin dan akibat

penggunaan obat-obatan.

Klasifikasi ADA di atas menurut Adam (2002) menitikberatkan Diabetes

mellitus pada etiologi dari Diabetes mellitus. Klasifikasi ADA ini pada dasarnya

sama dengan klasifikasi yang dikeluarkan WHO di tahun 1999. kalisifikasi ini

berbeda dengan klasifikasi WHO sebelumnya (tahun 1985) yang menitikberatkan

pada gambaran klinis dan tujuan pengobatan.

2.1.3.2 Kriteria Diagnosis Diabetes mellitus

Mulai akhir tahun 1997 ADA memperkenalkan kriteria diagnosis diabetes

mellitus, yang pada saat ini banyak digunakan. WHO tahun 1999 juga

mengeluarkan kriteria diagnosis diabetes mellitus yang sama dengan yang telah di

keluarkan ADA tersebut. Ada tiga kriteria diabetes mellitus yaitu berdasarkan:

a. Glukosa darah sewaktu, yaitu >200 mg/dlb. Glukosa darah puasa, yaitu 126 mg/dlc. Dua jam setelah dilakukan tes toleransi glukosa dengan beban glukosa 75

gram, yaitu 200 mg/dl (Adam, 2002).

5/24/2018 03520010.pdf

26/107

xxiii

2.2 Patofisiologi Diabetes Mellitus

2.2.1 Pengendalian Glukosa oleh Insulin

Diabetes mellitus terkait erat dengan proses pengaturan glukosa dalam

darah. Hormon insulin memiliki peran yang penting dalam pengaturan kadar

glukosa darah tersebut. Untuk memahami hal tersebut, maka berikut ini akan

diuraikan tentang glukosa, hormon insulin, dan hubungan di antara keduanya.

Glukosa adalah suatu karbohidrat yang termasuk monosakarida atau

karbohidrat yang molekulnya hanya terdiri atas beberapa atom karbon saja.

Glukosa di alam dihasilkan dari reaksi antara karbondioksida dan air dengan

bantuan sinar matahari dan klorofil dalam daun (Poedjiadi, 1994). Glukosa setelah

masuk ke dalam tubuh akan diserap melalui dinding usus halus, kemudian

dialirkan oleh darah menuju hati. Di dalam hati, glukosa mengalami proses

sintesis menghasilkan glikogen, oksidasi menjadi CO2dan H2O, atau dilepaskan

untuk dibawa dengan aliran darah kebagian tubuh yang memerlukannya

(Wirahadikusumah, 1985).

Campbell (2002) menjelaskan, glukosa (C6H12O6) merupakan

monosakarida paling umum yang memiliki peran penting dalam proses kimia

kehidupan, karena glukosa merupakan nutrien utama sel. Dalam proses yang

dikenal sebagai respirasi seluler, sel-sel mengekstraksi energi yang tersimpan

dalam molekul glukosa, molekul glukosa yang tidak segera digunakan pada

umumnya disimpan sebagai monomer yang bergabung membentuk disakarida

atau polisakarida (seperti pati dan glikogen).

Metabolisme glukosa di dalam tubuh dipengaruhi oleh hormon insulin.

Hormon insulin merupakan protein kecil dengan berat molekul 5700, yang terdiri

5/24/2018 03520010.pdf

27/107

xxiv

atas dua rantai polipeptida, A dan B yang saling berhubungan melalui dua

jembatan disulfide. Insulin disintesis oleh sel-sel B atau pada penkreas dalam

bentuk prekusor yang tidak aktif (yang disebut proinsulin). Zat ini disimpan dalam

granula sel-sel dari jaringan pulau langerhans sampai datangnya isyarat untuk

sekresi, yang kemudian proinsulin diubah menjadi insulin aktif (Lehninger, 1982).

Smith (2006) menambahkan, mitokondria dari sel pankreas memainkan peran

dalam menstimulai sekresi insulin. Konsep terakhir menyebutkan bahwa oksidasi

mitokondria memperluas potensial fosfat sel yang diakibatkan oleh kenaikan rasio

ATP4-

atau MgADP2-

. Hal ini menyebabkan saluran KATPpada membran menutup,

dan saluran Ca2+ membuka, yang pada akhirnya Ca2+ pada sitoplasma kadarnya

meningkat, dan ini berperan penting untuk proses oksitosis insulin.

Insulin dan glikogen adalah hormon yang bekerja secara antagonis dalam

mengatur konsentrasi glukosa dalam darah. Hal ini merupakan suatu fungsi

bioenergetik dan homeostasis yang sangat penting. Karena glukosa merupakan

bahan bakar utama untuk respirasi seluler dan sumber kunci kerangka karbon

untuk sintesis senyawa organik lainnya. Keseimbangan metabolisma tergantung

pada pemeliharaan glukosa darah pada konsentrasi yang dekat dengan titik

pasang, yaitu sekitar 90 mg/ 100mL pada manusia (Campbell, 2004).

Menurut Lehninger (1982) laju sekresi insulin dipengaruhi oleh

konsentrasi glukosa dalam darah. Ketika gula darah naik, laju sekresi insulin

meningkat. Peningkatan kadar insulin mempercepat masuknya glukosa dari darah

ke dalam hati dan otot, di mana glukosa tersebut sebagian besar diubah menjadi

glikogen. Hal ini menyebabkan konsentrasi glukosa darah menurun ke tingkat

5/24/2018 03520010.pdf

28/107

xxv

normalnya, dan berikutnya menyebabkan sekresi insulin menurun kecepatanya

sampai ke tingkat normalnya.

Soewolo (2000) menambahkan, insulin meningkatkan masuknya glukosa

ke dalam sel dengan meningkatkan laju transport terbantu dari glukosa melintasi

membran sel. Begitu glukosa telah masuk sel, segera difosforilasi untuk

menjaganya keluar tanpa kontrol. Dalam otot, glukosa dimetabolisasi atau diubah

menjadi glikogen untuk disimpan. Dalam sel hati, insulin meningkatkan

penyimpanan energi melalui stimulasi glikogenesis dan lipogenesis.

2.2.2 Dampak Penyimpangan Homeostasis Glukosa

Ketika mekanisme homeostasis glukosa agak menyimpang, terdapat

konsekuensi yang serius. Diabetes mellitus, merupakan gangguan endokrin yang

menyebabkan gangguan homeostasis glukosa. Penyakit ini disebabkan oleh

defisiensi insulin atau hilangnya respon terhadap insulin pada jaringan target.

Hasilnya, adalah glukosa darah yang tinggi, sehingga ginjal penderita diabetes

mensekresikan glukosa. Karena glukosa menjadi tidak tersedia bagi sebagian

besar sel tubuh sebagai sumber bahan bakar utama, maka lemak harus berfungsi

sebagai substrat utama respirasi seluler. Pada kasus diabetes yang serius,

metabolit bersifat asam yang terbentuk selama perombakan lemak akan

menumpuk dalam darah, yang mengancam jiwa karena menurunkan pH darah

(Campbell, 2004).

Selain itu, menurut Soewolo (2000) defisiensi insulin dapat menyebabkan

hiperglikemia yang berbahaya, glikosuria (glukosa keluar bersama kencing),

mengurangi kemampuan metabolisme karbohidrat atau konversi karbohidrat

5/24/2018 03520010.pdf

29/107

xxvi

menjadi lemak, dan kehilangan protein yang dibongkar untuk energi pengganti

glukosa.

2.2.3 Glukosa Produk Hati

Hati berfungsi sebagai suatu sistem penyangga glukosa darah yang sangat

penting. Saat glukosa darah meningkat hingga konsentrasi yang tinggi, yaitu

sesudah makan, dan kecepatan sekresi insulin juga meningkat, sebanyak dua

pertiga dari seluruh glukosa yang diabsorbsi dari usus dalam waktu singkat akan

disimpan dalam hati dalam bentuk glikogen. Lalu, selama beberapa jam

berikutnya, bila konsentrasi glukosa darah dan kecepatan insulin berkurang, maka

hati melepaskan glukosa kembali dalam darah (Guyton, 1997).

Hati merupakan jaringan yang sensitif terhadap insulin. Pada keadaan

normal, insulin dan glukosa akan menghambat pemecahan glikogen dan

menurunkan glukosa produk hati. Tetapi, pada keadaan diabetes terjadi

peningkatan glukosa produk hati yang diperoleh dari pemecahan glikogen

(glikogenolisis) dan glukoneogenesis. Glukagon merupakan hormon yang sangat

berpengaruh terhadap proses glukoneogenesis dan merupakan regulator utama

berlangsungnya proses tersebut. Aktifitas glukagon berupa penyediaan energi

yang dibutuhkan oleh sel ketika kebutuhan yang biasanya disediakan oleh glukosa

tidak tecukupi. Glukagon akan meningkatkan proses pemecahan glikogen yang

teesimpan di jaringan dan juga meningkatkan proses produksi glukosa oleh hepar

(Rudijanto, 1997).

Susilowati (2006) menambahkan, kadar glukagon yang tinggi dan kadar

insulin yang rendah menyebabkan terjadi penguraian protein otot, hingga

5/24/2018 03520010.pdf

30/107

xxvii

dihasilkan asam amino yang digunakan oleh hati untuk glukoneogenesis. Untuk

menfasilitasi penggunaan asam amino oleh sel hati, glukagon menstimulasi

penyerapan asam amino dan sintesis urea dalam hati. Dalam jaringan adipose,

proses lipolis lebih besar dibandingkan sintesis lipid. Dengan demikian, pelepasan

asam lemak dari jaringan adipose meningkat, sehingga meningkatkan kadar asam

lemak dalam darah. Asam lemak akan digunakan sel otot sebagai sumber energi

alternatif selain glukosa. Glikogen yang tersimpan dalam hati dan otot dibongkar,

protein otot diurai dan asam amino digunakan untuk glukoneogenesis dalam hati,

dan simpanan trigliserida dalam jaringan adipose diurai.

2.2.4 Patogenik Radikal Bebas pada Diabetes Mellitus

Diabetes adalah penyakit yang dihubungkan dengan meningkatnya

Reactive Oksygen Spesies (ROS) dan kerusakan oksidatif berbagai jaringan.

Meskipun mekanisme yang mendasari berkembangnya komplikasi pada penyakit

diabetes masih belum jelas, tetapi dapat diketahui adanya peran stress oksidatif

terhadap munculnya berbagai penyakit tersebut (Jung, 2006).

2.2.4.1 Radikal Bebas

Untuk lebih memahami tentang radikal bebas, maka di bawah ini akan

dijelaskan lebih lanjut tentang radikal bebas, yang meliputi:

A. Pengertian Radikal BebasRadikal bebas ialah atom atau gugus kimia yang memiliki satu atau lebih

elektron tidak berpasangan. Biasanya radikal bebas mempunyai jumlah elektron

5/24/2018 03520010.pdf

31/107

xxviii

ganjil, meskipun ada beberapa yang mempunyai jumlah elektron yang genap

(Pine, 1988).

Sejak abad 20 istilah radikal bebas diartikan sebagai molekul yang relatif

tidak stabil yang mempunyai satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan di

orbital luarnya. Oleh karena elektron yang tidak berpasangan itu mengitari orbit

mereka, di dalam molekul mereka membentuk semacam efek magnet yang

menyebabkan radikal bebas berikatan dengan molekul-molekul di dekatnya

(Sumampouw, 2003).

Sebenarnya radikal bebas penting artinya bagi kesehatan dan fungsi tubuh

yang normal dalam memerangi peradangan, membunuh bakteri, dan

mengendalikan tonus otot polos pembuluh darah dan organ-organ dalam tubuh,

namun bila dihasilkan melebihi batas kemampuan proteksi antioksidan seluler,

maka dia akan menyerang sel itu sendiri, sehingga struktur dan fungsi sel berubah

yang menyebabkan munculnya berbagai penyakit (Saurisari, 2006).

Menurut Hariyatmi (2004) radikal bebas juga merupakan produk normal

dari proses metabolisme. Selama makanan dioksidasi untuk menghasilkan energi,

sejumlah radikal bebas juga terbentuk. Radikal bebas berfungsi untuk

memberikan perlindungan tubuh terhadap serangan bakteri dan parasit, namun ia

tidak menyerang secara spesifik, sehingga ia juga menyerang asam lemak tidak

jenuh ganda dari membran sel, struktur sel, dan DNA.

B. Sumber Radikal BebasMenurut Arief (2006) radikal bebas yang ada ditubuh berasal dari dua

sumber, yaitu:

5/24/2018 03520010.pdf

32/107

xxix

1) Sumber endogen, yang meliputi:a. Autoksidasi

Merupakan produk dari proses metabolisme aerobik. Molekul yang

mengalami autoksidasi berasal dari katekolamin. Hemoglobin, mioglobin,

sitokrom-C yang tereduksi, dan thiol. Autoksidasi dari molekul-molekul

tersebut menghasilkan reduksi dari oksigen diradikal dan pembentukan

kelompok reaktif oksigen. Superoksida merupakan bentukan awal radikal.

Ion ferrous (Fe II) juga dapat kehilangan elektronnya melalui oksigen

untuk membuat superoksida dan Fe III melalui proses autoksidasi.

b. Oksidasi enzimatikBeberapa jenis sistem enzim mampu menghasilkan radikal bebas

dalam jumlah yang cukup bermakna, meliputi xanthine oxidase (activated

in ischemia-reperfusion), prostaglandin synthase, lipoxygenase, aldehyde

oxidase, dan amino acid oxidase

c. Respiratory burstMerupakan terminologi yang digunakan untuk menggambarkan

proses dimana sel fagositik menggunakan oksigen dalam jumlah yang

besar selama fagositosis. Lebih kurang 70-90% penggunaan oksigen

tersebut dapat diperhitungkan dalam produksi superoksida.

2) Sumber Eksogen, yang meliputi:a. Obat-obatan

5/24/2018 03520010.pdf

33/107

xxx

Beberapa macam obat dapat meningkatkan produksi radikal bebas

dalam bentuk peningkatan tekanan oksigen. Bahan-bahan tersebut bereaksi

bersama hiperoksia dapat mempercepat tingkat kerusakan sel.

b. RadiasiRadioterapi memungkinkan terjadinya kerusakan jaringan yang

disebabkan oleh radikal bebas. Radiasi elektromagnetik dan radiasi

partikel menghasilkan radikal primer dengan cara memindahkan energinya

pada komponen seluler seperti air. Radikal primer tersebut dapat

mengalami reaksi sekunder bersama oksigen yang terurai atau bersama

cairan seluler.

c. Asap rokokOksidan dalam rokok mempunyai jumlah yang cukup untuk

memainkan peran yang besar terjadinya kerusakan saluran pernafasan.

Diperkirakan bahwa tiap hisapan rokok mempunyai bahan oksidan dalam

jumlah yang sangat besar, meliputi aldehida, epoxida, peroxida, dan

radikal bebas yang lain. Bahan lain seperti nitrit oksida, radikal peroksil,

dan radikal yang mengandung karbon ada dalam fase gas.

C. Tipe Radikal Bebas dalam TubuhMenurut Halliwell dan Guttiredge (1994), radikal bebas terdiri dari

berbagai jenis, yaitu:

1) Senyawa radikal oksigen (Oxygen-centered, R-O*)2) Senyawa karbon (Carbon-centered, carbonyl, R-C=C-C*-R)3) Senyawa radikal sulfur (Sulphur-centered, thiyl, R-S*)

5/24/2018 03520010.pdf

34/107

xxxi

Nurdiana dan Umi (2003) menambahkan, oksigen (O2) merupakan diradikal

yang stabil, oleh karena itu O2merupakan pereaksi radikal bebas yang selektif.

Tetapi melalui sistem enzim di dalam tubuh, O2 dapat berubah menjadi spesi

oksigen yang reaktif (ROS). Tipe dari radikal bebas ini antara lain:

1) Superoxide (O2-), merupakan spesi hasil dari penambahan satu elektron padaO2.

2) Hydroperokside (H2O2), sebenarnya bukan radikal bebas, tetapi dapatmenjadi inisiator terbentuknya radikal bebas.

3) Hydroxyl radical (OH*), dapat terbentuk melalui radiasi pada sel, radiasipada H2O2, reaksi Fenton, dan reaksi Weiss.

D. Reaksi Radikal Bebas dalam Tubuh ManusiaReaksi radikal bebas meliputi reaksi: substitusi (dengan menggantikan

suatu atom hidrogen), fragmentasi (dengan memecah radikal bebas yang sudah

terbentuk), adisi (dengan menambah atom), oksidasi (dengan menarik elektron

dari atom lain), dan reduksi (dengan memberi elektron pada atom lain) (Pine,

1988).

Selain reaksi-reaksi tersebut, menurut Harjanto (2006) radikal bebas juga

bereaksi dengan cara abstraksi (menarik atom H), dismutasi (satu molekul

mengalami oksidasi, satu lagi mengalami reduksi), dan propagasi (penyebaran).

Menurut Halliwell dan Guttiredge (1994), reaksi radikal bebas dalam

tubuh manusia menyebabkan akumulasi radikal bebas di dalam sel yang dapat

menyebabkan rusaknya komponen-komponen sel, komponen-komponen tersebut

antara lain:

5/24/2018 03520010.pdf

35/107

xxxii

1) LemakTerjadi oksidasi PUFA dari membran sel yang akan menyebabkan

gangguan pada fluiditas membran, fungsi barier membran sel dan inaktivasi

dari enzim maupun reseptor yang tergantung pada membran fosfolipid,

misalnya Na-K-ATP ase, cytochrome oxidase, dan lain-lain.

2) ProteinOksidasi enzym yang mengandung sulphydril akan mengakibatkan

inaktivasi Ca++

ATP-ase sehingga Ca++

intra sel meningkat. Peningkatan ini

dapat mengaktifkan enzim-enzim seperti protease, sehingga dapat

menyebabkan rusaknya DNA, polyribosom meningkat, sehingga terjadi

pengosongan NAD+ (Nocotinamide adenine nucleutide). Dengan demikian

produksi ATP terhambat, keadaan ini dapat menyebabkan kematian sel.

3) KarbohidratRadikal bebas menyebabkan depolimerasi dari polisakarida, misalnya

polimer asam hyaloronide.

4) Asam NukleatRadikal bebas (terutama OH*) dapat menyebabkan dehidroksilasi

basa-basa dan pecahnya untaian DNA (DNA strand). Keadaan ini dapat

menyebabkan sel mati atau berubah menjadi sel ganas. Rusaknya dan

lisisnya sel menyebabkan juga terlepasnya metal ion.

5/24/2018 03520010.pdf

36/107

xxxiii

E. Peranan Radikal Bebas pada Proses Peroksidasi LipidRadikal bebas dapat menimbulkan kerusakan sel karena radikal bebas

mampu menyerang hampir semua komponen biologik. Lipid, protein, dan asam

nukleat merupakan target utama dari reaksi radikal bebas. Pada umumnya radikal

bebas bereaksi dengan struktur utama dari komponen molekul biologik tersebut

pada saat pertama kali bertemu, yang paling sering adalah komponen molekul

lipid dari sel atau organella. Salah satu contoh dari reaksi ini adalah reaksi rantai

dari peroksidasi lipid (Ceska, 2000).

Menurut Siagian (2002), peroksidasi lipid terdiri dari tiga tahap utama,

yaitu:

1. Inisiasi, karena adanya radikal bebas awal yang mampu mengekstraksi atomhidrogen dari gugus asam lemak tak jenuh membentuk radikal asam lemak,

yaitu suatu senyawa turunan asam lemak yang bersifat tidak stabil dan sangat

reaktif akibat dari hilangnya satu atom hidrogen (LH L* + H*).

2. Propagasi, radikal asam lemak akan bereaksi dengan oksigen membentukradikal peroksi (L* + O2 LOO*). Radikal peroksi lebih lanjut akan

menyerang asam lemak menghasilkan lipid hidroperoksida dan radikal asam

lemak baru (LOO* + LH LOOH + L*). Lipid hidroperoksida

yang terbentuk bersifat tidak stabil dan akan terdegradasi lebih lanjut

menghasilkan senyawa-senyawa karbonil rantai pendek seperti aldehida

3. Terminasi, reaksi ini akan terjadi jika lipid hidroperoksida bertemu denganantioksidan, sehingga reaksi berantai peroksidasi lipid tersebut akan selesai.

5/24/2018 03520010.pdf

37/107

xxxiv

Gambar 2.1. Mekanisme peroksidasi lipid (Wikipedia, 2007)

Menurut Sargowo (1998) sebagaimana yang telah dikutip oleh Ceska

(2000), adanya peroksidasi lipid yang terlalu berlebihan akan menyebabkan

berbagai efek biologis yang merugikan, seperti pengambilan lemak yang tidak

teratur oleh fagosit; bersifat sitotoksik terhadap fibroblas, sel endotel, dan sel otot

polos; dan lain sebagainya.

F. Malondialdehyde (MDA) sebagai Produk Peroksidasi LipidOksidasi lipid lebih mudah untuk diukur, turunan dari peroksidasi lemak

merupakan marker yang paling populer untuk mendiagnosa adanya oksidan. Hasil

dari peroksidasi lipid yang berupa asam lemak radikal distabilkan dengan

merubah bentuk kembali menjadi hidroperoksida, alkohol, aldehida, dan alkaline.

Aldehida memiliki produk yang bervariasi termasuk hexanal, MDA, 5-

hydroxynonenal, dan lain sebagainya. MDA dipakai secara luas sebagai indikator

adanya zat oksidan (Setijowati, 1998).

5/24/2018 03520010.pdf

38/107

xxxv

Malondialdehyde (MDA) merupakan senyawa toksik yang merupakan

salah satu hasil akhir dari terputusnya rantai karbon asam lemak pada proses

peroksidasi lipid. Lipid hidroperoksida yang terbentuk pada proses propagasi

peroksidasi lipid bersifat stabil, tetapi jika ada transisi metal misalnya Fe, maka

substitusi tersebut akan dikatalisa menjadi radikal peroksi (L-O*) yang pada

akhirnya membentuk produk akhir yaitu malondialdehyde (MDA). Kadar MDA

yang terbentuk dianggap identik dengan kadar peroksidasi lipid (Hancock, 1999).

Gambar 2. Struktur kimia MDA

(Wikipedia, 2007)

G. Peran Antioksidan dalam Memerangi Radikal BebasAktivitas radikal bebas yang berlebihan dalam tubuh akan menimbulkan

kerusakan pada sel maupun jaringan tubuh, maka untuk menetralisir radikal bebas

tersebut diperlukan zat pembasmi radikal bebas yang dikenal sebagai antioksidan

(Sumampouw, 2003). Antioksidan sebenarnya didefinisikan sebagai inhibitor

yang bekerja menghambat oksidasi dengan cara bereaksi dengan radikal bebas

reaktif membentuk radikal bebas tak reaktif yang relatif stabil (Sofia, 2003).

Ketidakseimbangan antara produksi radikal bebas dengan pertahanan

antioksidan menyebabkan satu keadaan yang disebut stress oksidatif. Stress

oksidatif dapat merusak sel atau sel dapat beradaptasi terhadap keadaan tersebut.

Sel dapat bertoleransi terhadap stress oksidatif yang bersifat ringan melalui

5/24/2018 03520010.pdf

39/107

xxxvi

pengaturan kembali sintesis antioksidan untuk mempertahankan keseimbangan

antara radikal bebas dengan antioksidan (Kurniasih dan Andi, 2002).

Menurut Setijowati (1998) sistem antioksidan tubuh melindungi jaringan

dari efek negatif radikal bebas. Terdapat tiga kelompok antioksidan dalam tubuh,

yaitu:

a. Antioksidan primer, yang bekerja dengan cara mencegah pembentukan radikalbebas baru, misalnya: Superoksida Dismutase(SOD), Glutation Peroksidase

(Gpx) dan protein pengikat meta.

b. Antioksidan Sekunder, yang berfungsi menangkap radikal bebas danmencegah terjadinya reaksi berantai, contohnya: Vitamin E (-tokoferol),

vitamin C (askorbat), -karoten, asam urat, bilirubin, dan albumin.

c. Antioksidan tersier, yang bekerja dengan cara memperbaiki kerusakanbiomolekuler yang disebabkan oleh radikal bebas, contoh enzim-enzim yang

memperbaiki DNA dan metionin.

Mekanisme kerja antioksidan selluler dijelaskan oleh Ong (1995) yang

telah dikutip Hariyatmi (2004), yaitu sebagai berikut:

a. Berinteraksi langsung dengan oksidan, radikal bebas atau oksigen tunggal.b. Mencegah pembentukan jenis oksigen reaktif.c. Mengubah jenis oksigen reaktif menjadi kurang reaktif.d. Mencegah kemampuan oksigen reaktife. Memperbaiki kerusakan yang timbul.

5/24/2018 03520010.pdf

40/107

xxxvii

Sofia (2003) menggolongkan antioksidan menjadi dua, yaitu antioksidan

enzim dan vitamin. Antioksidan enzim meliputi Superoksida Dismutase (SOD),

Glutation Peroksidase (Gpx), dan katalase. Sedangkan antioksidan vitamin

meliputi vitamin E (-tokoferol), vitamin C (askorbat), dan -karoten. Tetapi

selain itu terdapat senyawa yang dimasukkan ke dalam senyawa antioksidan, yaitu

flavonoid. Senyawa flavonoid merupakan senyawa polifenol yang terdapat pada

teh, buah-buahan, sayuran, anggur, bir, dan kecap. Aktivitas antioksidan flavonoid

tergantung pada struktur molekulnya terutama gugus prenil (CH3)2C=CH-CH2-.

Dalam beberapa penelitian menunjukkan bahwa gugus prenil flavonoid

dikembangkan untuk pencegahan atau terapi terhadap penyakit-penyakit yang

diasosiasikan dengan radikal bebas.

2.2.4.2 Hubungan Diabetes Mellitus dengan Radikal Bebas

Ada dua jenis hubungan antara diabetes mellitus dengan radikal bebas,

yaitu:

A. Radikal Bebas sebagai Penyebab Diabetes MellitusMenurut Pieper (1999), diabetes tipe satu merupakan penyakit

metabolisme kronik yang tandai dengan rusaknya pankreas. Meskipun

mekanisme pathogenik penyakit tersebut belum seluruhnya diketahui, tetapi dapat

dilihat kerusakan tersebut dikarenakan berkembangnya oksigen radikal sejak masa

prediabetik yang menyebabkan radang pada islet pankreas.

Sasaran utama reaksi radikal bebas di dalam sel adalah ikatan-ikatan

rangkap dari lipida yang terdapat di dalam membran sel. Akibatnya fluiditas

membran akan berkurang dan sederetan reseptor selular akan berkurang. Serangan

5/24/2018 03520010.pdf

41/107

xxxviii

radikal bebas juga dapat menimbulkan penumpukan kalsium dan lipofusin.

Radikal bebas dapat pula menjadikan enzim dan protein thiol (-SH) tidak aktif

dengan cara pembentukan ikatan silang, maupun denaturasi. Akibatnya sintesis

dan degradasi protein terganggu. Jika radikal bebas menyerang asam-asam

nukleat, akan menimbulkan gangguan terhadap molekul DNA yang berakibat

terbentuknya mutasi basa-basa nitrogen serta berakhir dengan pembentukan

karsinogenesis. Beberapa pembahasan mutahir tentang mekanisme terjadinya

penyakit, mensinyalir bahwa stres oksidatif dan radikal bebas sangat berpengaruh

keberadaannya (Harliansyah, 2005).

Sauriasari (2006) menambahkan keadaan stress oksidatif yang disebabkan

oleh aktivitas radikal bebas membawa pada kerusakan oksidatif mulai dari tingkat

sel, jaringan hingga ke organ tubuh, menyebabkan terjadinya percepatan proses

penuaan dan munculnya penyakit. Berbagai penyakit yang telah diteliti dan

diduga kuat berkaitan dengan aktivitas radikal bebas mencakup lebih dari 50

penyakit, di antaranya adalah stroke, asma, diabetes mellitus, berbagai penyakit

radang usus, penyumbatan kronis pembuluh darah di jantung, parkinson, hingga

AIDS.

Diabetes tipe satu disebabkan oleh rusaknya sel pankreas dikarenakan

mekanisme autoimun. Di mana perstiwa autoimun menghasilkan radikal bebas

yang kemudian menyerang sel pankreas. Hal tersebut bisa diketahui dari

penelitian dengan menggunakan hewan coba, yaitu dengan memberikan agen

penghasil ROS, seperti streptozotocin dan alloksan. Di mana produksi radikal

5/24/2018 03520010.pdf

42/107

xxxix

bebas tersebut tidak diimbangi dengan produksi antioksidan, sehingga sel

pankreas mengalami kematian (Packer, 2000)

Gambar 3. Mekanisme pengrusakan sel pankreas yang dikarenakanoksidatif sres dalam proses autoimun (Packer, 2000).

B. Diabetes Mellitus sebagai Penyebab Meningkatnya Aktifitas RadikalBebas

Selama ini belum diketahui secara pasti bagaimana mekanisme Diabetes

Mellitus mempengaruhi aktivitas radikal bebas. Namun, demikian beberapa bukti

menunjukkan bahwa stress oksidatif meningkat pada pasien DM. Dalam

penelitianya Mahdi (2003) sebagaimana dikutip Kusumowardhani (2005), kadar

radikal bebas pada serum tikus diabetes akan meningkat tiga kali lipat dari 2,98

nmol/ml dalam kondisi normal menjadi 8,79 nmol/ml.

Kadar glukosa pada darah penderita diabetes meningkat melebihi kadar

normal, padahal glukosa merupakan bahan berenergi tinggi, yang jika tidak

digunakan sebagai energi, dapat menjadi sumber utama radikal bebas yang

berbahaya karena dapat merusak jaringan tubuh. Beberapa dari radikal bebas ini

dapat mengoksidasi sejumlah besar kolesterol LDL pada orang yang terserang

Pankreatic

cell

Cell Death

ImmonocytesT cell, B cell, NK cell

CytokinesIL-1, IFN-, TNF-

ROS

NO, O2-, H2O2, etc

STZ

Alloksan

5/24/2018 03520010.pdf

43/107

xl

diabetes. Selain itu, kadar glukosa darah yang tinggi dapat menyebabkan glukosa

berikatan dengan protein seperti hemoglobin (glikasi) (Slaga, 2005).

Mekanisme meningkatnya pembentukan radikal bebas pada penderita

diabetes mellitus belum dimengerti seluruhnya. Akan tetapi, saat ini banyak

hipotesis yang berkembang tentangnya. Menurut Packer (2000), tingginya glukosa

mengaktifkan NADPH-oxidase endotel yang mengakibatkan pelepasan

superoxide anion. Superoxide anion tersebut dapat bereaksi dengan nitric oxide

(NO), kemudian menimbulkan pembentukan peroxynitrit yang merupakan radikal

bebas kuat. NO ini jika bereaksi dengan superoxide anions akan menyebabkan

gangguan pada siklus regulasi endotelium.

SOD

2ONOO-

2 O2-

H2O2+ O2

2NO 2H+

Menurut Klaus Kusterer dalam Packer (2000), pada kondisi hiperglikemia

sorbitol pathwaymeningkat aktivitasnya, sorbitol pathwaymerupakan mekanisme

yang mereduksi glukosa menjadi sorbitol yang melibatkan enzim

Aldosereduktase, kemudian sorbitol dioksidasi menjadi fruktosa dengan perantara

enzim Sorbitoldehydrogenase, reaksi ini dilengkapi dengan proses reduksi dari

NAD+menjadi NADH.

Aldosereduktase Sorbitoldehydrogenase

D-Glukose Sorbitol D-Fruktose

NADPH NADP+ NAD

- NADH

Peningkatan NADH/NAD+ mempertinggi sintesis prostaglandins yang

menghasilkan radikal bebas. Lebih lanjut, oksidasi NADH menjadi NAD pada

5/24/2018 03520010.pdf

44/107

xli

rantai transport elektron di mitokondria menimbulkan produksi radikal superoxida

meningkat (Packer, 2000).

Hyperglikemia

Aktifitassorbitol pathway

NADH/NAD+

Sintesis Prostaglandin Oksidasi dimitokondria

O2-

Pada penderita diabetes, proses glikogenolisis dan glikoneogenesis

meningkat. Pada proses tersebut, glikogen dalam hati dan otot akan dirombak

untuk memenuhi kebutuhan glukosa, jika glikogen tersebut habis maka akan

dirombak juga cadangan lemak dan protein. Pemecahan glikogen menjadi glukosa

akan menjadi piruvat yang berfungsi sebagai prekusor untuk oksidasi lemak

melalui siklus asam sitrat. Proses metabolisme lemak tersebut selain

menghasilkan asam lemak juga menghasilkan sejumlah besar radikal bebas

sebagai hasil sampingannya (Wresdiyati, 2004).

Kurniasih (2002) menambahkan, peningkatan degradasi glikogen dan

glikolisis akan menyebabkan produksi asam laktat meningkat dan terjadinya

asidosis. Kadar ATP mulai menurun dan AMP mengalami degradasi,

mengakibatkan adanya akumulasi hipoxantin disertai dengan peningkatan kadar

Ca2+

intraselular. Ca2+

yang teraktivasi akan menstimulasi protease, fosfolipase,

NOS (Nitric Oxide Synthase).

5/24/2018 03520010.pdf

45/107

xlii

2.3 Pengobatan Diabetes Mellitus

Ada beberapa alternatif yang bisa digunakan untuk mengobati diabetes

mellitus, diantaranya adalah:

a. Suntik insulin

Insulin mutlak diperlukan oleh penderita diabetes tipe 1. Dosis yang

diperlukan umumnya berkisar antara 0,6-0,9 UI/kg/hari. Untuk penderita

diabetes tipe 2, suntikan insulin sering kali diperlukan bila obat antidiabetika

oral sudah tidak memberikan efek yang diinginkan atau menunjukkan resistensi

(Subroto, 2006).

b. Obat Hipoglemik Oral (OHO)

Pengobatan ini digunakan untuk diabetes tipe 2. berdasarkan cara kerjanya

OHO dibagi menjadi tiga golongan, yaitu: Pemicu sekresi insulin (contohnya

Sulfonilurea dan Glinid), Penambah sensitivitas terhadap insulin (contohnya

Metformin dan tiazolidindion), dan penghambat absorpsi glukosa (penghambat

alfa glukosidase) (Misnadiarly, 2006).

c. Pola hidup

Manajemen diabetes tipe 2 berkenaan dengan manajemen pola hidup.

Mengatur pola makan yang baik dan sehat merupakan kunci sukses manajemen

diabetes. Sampai saat ini belum ada perencanaan makanan yang sesuai untuk

semua penderita. Perencanaan makanan harus disesuaikan menutut kebiasaan

masing-masing individu. Standar yang dianjurkan adalah makanan dengan

5/24/2018 03520010.pdf

46/107

xliii

komposisi: Karbohidrat 60-70%, Protein 10-15%, dan Lemak 20-25%

(Misnadiarly, 2006).

Selain perencanaan makanan, menurut Subroto (2006) olahraga secara

teratur dapat mengurangi resistensi insulin sehingga insulin dapat digunakan

lebih baik oleh sel-sel tubuh dan dosisnya dapat diturunkan. Olahraga harus

dilakukan secara teratur, sebaiknya 5-6 kali per minggu untuk mengurangi berat

badan bagi yang gemuk.

d. Terapi Alternatif

Pengobatan komplementer dan alternatif (complementary and alternative

medicine, CAM) saat ini banyak digunakan oleh masyarakat luas, hal ini

dikarenakan CAM lebih murah dan mudah diperoleh. Selain itu, bukti-bukti

empiris dan dukungan ilmiah yang semakin banyak membuat CAM semakin

populer. Salah satu jenis CAM adalah penggunaan herbal (Subroto, 2006).

Beberapa tanaman yang digunakan secara empirik untuk terapi penyakit

diabetes antara lain: lidah buaya (Aloe vera L. ), bawang merah (Allium cepa

L.), sambiloto (Andrographis paniculata Nees.), belimbing wuluh (Averhoa

bilimbi L.), sembung (Blumea balsamifera D. C.), tapak dara (Catharanthus

roseus (L.) G. Don), randu (Ceiba pentandra Gatrn.), kangkung (1pomoea

aquatica Forst.), ubi jalar (/pomoea batatas Poir.), bungur (Lagerstroemia

speciosa Pers.), petai cina (Leucaena leucocephala de Wit.), bidara upas

(Merremia mammosa (Lour) Hall,f.), mengkudu (Morinda citrifolia L.), lampas

(Ocimum sanctum L.), kumis kucing (Orthosiphon aristatus (BL) Miq.), ginseng

(Panax ginseng C.A. Meyer), petai (Parkia speciosa Hort.), kemukus (Piper

5/24/2018 03520010.pdf

47/107

xliv

cubeba L),acang polong (Pisum sativum L), jambu biji (Psidium guajava L.),

terung ngor (Solanum indicum L.), keji beling (Strobilanthus crispa Bl.), mahoni

(Swietenia macrophylla King.), duwet (Syzygium cumini (L.) Druce), tapak dara

(Vinca rosea L.)(Widowati, 1997). Selain itu, teh hijau (Camellia sinensis L.)

juga dipercaya sebagai tanaman antidiabetik (Syah, 2006).

2.4 Teh Hijau

2.4.1 Pengertian dan sejarah teh hijau

Teh (Camellia sinensis L.) berasal dari bahasa Cina tay. Bangsa Cina

mengenal teh sejak 2700 SM, kemudian orang Jepang mulai mengembangkan

penanaman teh sejak 800 M serta menjadikannya sebagai bagian tradisi sosial dan

agama. Tanaman teh dapat tumbuh di daerah tropis dan subtropis dengan curah

hujan tidak kurang dari 1.500 mm. Tanaman teh memerlukan kelembaban tinggi

dengan temperatur udara 13-29,5 derajat C sehingga tanaman ini tumbuh baik di

dataran tinggi dan pegunungan yang berhawa sejuk (Khomsan, 2007).

Secara umum berdasarkan cara atau proses pengolahannya, teh dapat

diklasifikasikan menjadi tiga jenis, yaitu teh hijau, teh oolong, dan teh hitam. Teh

hijau dibuat dengan cara menginaktifikasi enzim oksidase atau fenolase yang ada

dalam pucuk daun teh segar, dengan cara pemanasan atau penguapan

menggunakan uap panas, sehingga oksidasi enzimatik terhadap katekin dapat

dicegah (Hartoyo, 2003).

5/24/2018 03520010.pdf

48/107

xlv

2.4.2 Kandungan teh hijau

Menurut Pambudi (2003) komponen aktif yang terkandung dalam teh

adalah sebagai berikut: polyphenols (10_25%), methylxanthines, asam amino,

peptida, komponen organik lain, tannic acids (9_20%), vitamin C (150_250

mg%), vitamin E (25_70 mg%), vitamin K (300_500 IU/g), -carotene (13_20%),

kalium (1795 mg%), magnesium (192 mg%), mangan (300_600 ug/ml), fluor

(0,1_4,2 mg/L), zinc (5,4 mg%), selenium (1,0_1,8 ppm%), copper (0,01 mg%),

iron (33 mg%), calcium (7 mg%),dan caffein (45_50 mg%).

Bahan-bahan kimia dalam daun teh dapat digolongkan menjadi empat

kelompok besar, yaitu:

a. Substansi fenol, yang meliputi katekin (polifenol) yang merupakan kelompokutama dari substansi teh hijau (yang dapat membentuk beberapa kompleks

dalam reaksi dengan kafein, protein, peptida, dan ion tembaga); dan flavonol,

yang mempunyai kemampuan mengikat logam.

b. Substansi bukan fenol, yang meliputi karbohidrat, subtansi pektin, alkaloid,klorofil, protein, asam organik, resin, vitamin, dan mineral.

c. Substansi penyebab aroma, yang meliputi fraksi karboksilat, fenolat, karbonil,dan fraksi netral bebas karbonil.

d. Enzim, yang meliputi ezim invertase, amilase, -glukosidase, oximetilase,protease, dan peroksidase (Syah, 2006).

2.4.3 Pengaruh teh hijau terhadap kesehatan

Aktivitas antioksidan teh hijau diketahui berhubungan dengan kandungan

polifenolnya. Polifenol teh secara luas digunakan sebagai antioksidan alami yang

5/24/2018 03520010.pdf

49/107

xlvi

mempunyai aktivitas biokimia, seperti menghambat mutasi bakteri, menghambat

aktivitas HIV, antikarang gigi, antivirus, mencegah kanker, menagkap radikal

bebas, dan menghambat oksidasi kolesterol jahat (Syah, 2006).

Menurut Pambudi (2003), berbagai hasil studi menunjukan konsumsi teh

berperan dalam:

a. Menurunkan risiko penyakit kankerSenyawa polyphenol dalam teh mampu memberikan perlindungan

terhadap zat karsinogenik. EGCg yang terdapat dalam teh hijau merupakan

senyawa aktif yang berperan dalam mencegah terjadinya kanker. Berikut ini

adalah teori yang berkembang bahwa teh memiliki kemampuan sebagai

pencegah penyakit kanker:

1) Senyawa antioksidan dalam teh mencegah terjadinya kerusakan DNA olehradikal bebas.

2)

Polyphenol mencegah terjadinya pertumbuhan sel yang tidak terkendali

sehingga mampu memperlambat perkembangan kanker.

3) Polyphenol tertentu mungkin menghancurkan sel-sel kanker dengan tanpamerusak sel-sel sehat di sekitarnya.

b. Menurunkan risiko terjadinya penyakit kardiovaskularPenyakit kardiovaskular antara lain terkait dengan kadar lipida darah,

tekanan darah, faktor homestatik, oksidatif stress, dan lain-lain. Beberapa

studi menunjukkan bahwa teh memiliki khasiat menurunkan risiko penyakit

kardiovaskular dengan menurunkan kadar kolesterol darah dan tekanan darah.

Mekanisme pencegahan teh terhadap penyakit kardiovaskular terdapat pada

5/24/2018 03520010.pdf

50/107

xlvii

kemampuannya menghambat penyerapan kolesterol dan menghambat

penggumpalan sel-sel platelet sehingga mencegah terjadinya penyumbatan

pembuluh darah. Polyphenol teh (catechin dan theaflavin) juga merupakan

antioksidan kuat yang mampu melindungi oksidasi LDL-kolesterol oleh

radikal bebas. Teroksidasinya kolesterol tersebut diduga berperan penting

dalam proses atherogenesis yaitu proses awal pembentukan plaque pada

dinding arteri.

c. Menurunkan berat badanTeh hijau diketahui mempunyai potensi sebagai thermogenesis

sehingga mampu meningkatkan pembakaran kalori dan lemak yang

berimplikasi terhadap penurunan berat badan.

d. Mencegah osteoporosisSenyawa aktif yang terkandung di dalam teh berperan menyerupai

hormon esterogen lemah yang membantu melindungi tulang terhadap proses

kerapuhan (osteoporosis).

e. Sumber mineralTeh menyimpan potensi sebagai sumber mineral tubuh yang penting

dalam berbagai proses metabolisme. Kandungan mineral tersebut muncul baik

berupa makro maupun trace mineral.

f. Sumber VitaminKandungan vitamin pada teh tidak begitu banyak dibandingkan dengan

mineral. Proses pengolahan teh menyebabkan sebagian besar vitamin hilang

akibat teroksidasi.

5/24/2018 03520010.pdf

51/107

xlviii

Pemberian katekin teh bermanfaat bagi penderita diabetes mellitus. Selain

dapat menurunkan kadar gula darah, zat bioaktif ini juga mencegah terjadinya

agregasi trombosit. Seperti diketahui, pada penderita diabetes cenderung terjadi

agregasi platelet dan trombosis yang menyebabkan penyempitan pembuluh darah

(Hartoyo, 2003). Syah (2006) menambahkan, zat Mangan (Mn) yang terkandung

dalam teh membantu menguraikan gula menjadi energi, sehingga teh bisa

membantu menjaga kadar gula dalam darah.

2.5 Streptozotocin sebagai Bahan Diabetogenik

Sterptozotocin merupakan suatu antibiotik yang berspektrum luas dari

grup nitrosurea. Sterptozotocin pertama kali diisolasi oleh Vavra dkk. Tahun

1960 dari kultur bakteri streptomyces achromogenes. Zat ini pada mulanya

digunakan untuk mengobati sel-sel tumor dari pulau-pulau langerhans pankreas

karena Sterptozotocin mampu bekerja secara spesifik pada sel target. Selain itu

Sterptozotocin juga memiliki efek diabetogenik yang potensial (Elias, 1994 dalam

Damayanthi, 2006).

Gambar 2. Struktur kimia Streptozotocin

(Wikipedia, 2007)

Sterptozotocin terdiri dari 1-methyl-1 nitrosureayang terikat pada C ke-2

dari D-glukosa. Sterptozotocin memiliki ciri-ciri: berat molekul sebesar 265, tidak

5/24/2018 03520010.pdf

52/107

xlix

bewarna, mengalami degradasi pada suhu 1150

C membentuk gas, tidak stabil

pada suhu kamar dan temperatur lemari es (Nurdiana, 1998).

Mekanisme streptozotocin dala merusak sel pankreas dan menyebabkan

hiperglikemia masih belum jelas. Salah satu aksi yang telah ditunjukkan

streptozotocin adalah pengosongan Nicotinamide Dinucleotide (NAD) intraseluler

pada sel islet. Streptozotocin menyebabkan kerusakan pita DNA dan metilasi pada

sel islet pankreas. Bahan kimia yang mengandung antioksidan dapat melindungi

islet pankreas melawan efek sitotoksik dari streptozotocin maupun agen lain yang

menyebabkan diabetes (Coskun, 2004 dalam Kusumowardhani, 2006).

Sterptozotocin memproduksi oksigen radikal di dalam tubuh yang

menyebabkan luka pada pankreas, dan ini menyebabkan kadar glukosa darah

meningkat (Jung, 2006). Menurut Nurdiana (1998), mekanisme kerja

Sterptozotocin pada sel pankreas belum dimengerti seluruhnya, tetapi telah

diketahui penyebab hiperglikemia yang kronik sesudah pemberian Sterptozotocin

adalah karena nekrosis sel pankreas. Nurdiana juga mengutip penjelasan Kolb

dan Kroncke (1993) tentang mekanisme nekrosis sel oleh Sterptozotocin, yaitu

dengan cara:

a. Menggagalkan penggunaan glukosa disebabkan alkilasi terhadap proteinyang berperan dalam uptakedan metabolisme glukosa

b. Merusak mitokondria sehingga menggagalkan proses oksidasic. Merusak DNA.

5/24/2018 03520010.pdf

53/107

l

2.6Pengukuran Kadar Radikal BebasBanyak cara yang bisa digunakan untuk mengukur radikal bebas dalam

tubuh, baik secara kimia maupun fisika. Tetapi, uji TBA (Thiobarbituric acid test)

merupakan metode pengukuran radikal bebas yang paling umum digunakan untuk

mengukur produk peroksidasi lemak pada membran lipid atau asam lemak

(Fajarwati, 2001). Prinsip dari metode ini adalah karena pengaruh panas dan asam

akan menyebabkan dekomposisi lipid peroksida membentuk malonaldehyda

(MDA) yang direaksikan dengan TBA akan terjadi perubahan warna yang diukur

melalui pemeriksaan spektrofotometer pada panjang gelombang 532nm (Nurdiana

dan Umi, 2003).

Harnita (2006) jumlah kromogen MDA-TBA yang terbentuk sangat

tergantung dari jumlah deoksiribosa yang didegradasi. Semakin tinggi konsentrasi

deoksiribosa yang ditambahkan akan menyebabkan peningkatan absorbansi

kromogen MDA-TBA Pengukuran operating time kromogen MDA-TBA yang

dihasilkan dari larutan kontrol dengan konsentrasi deoksiribosa absorbansi

kromogen MDA-TBA telah stabil sejak menit ke nol sampai menit ke-60 dengan

absorbansi 0,511 pada panjang gelombang teoritis 532 nm.

Gambar 3. Reaksi pembentukan kromogen MDA-TBA (Harnita, 2006)

5/24/2018 03520010.pdf

54/107

li

2.7Kajian Al-Quran dan As-Sunnah Tentang KesehatanAllah SWT menciptakan manusia dengan berbagai kelebihan

dibandingkan dengan makhluk ciptaannya yang lain, hal ini terdapat dalam surat

At-Tin ayat 4, yang berbunyi:

s)s9$u)n=y{z|M}$#|mr&5)s?sesungguhnya Kami telah menciptakan manusia dalam bentuk yang

sebaik-baiknya

Dalam surat Al-Baqoroh ayat 30, disebutkan Allah juga menjadikan

manusia sebagai Khalifah(pemimpin) di muka bumi, ayat tersebut berbunyi:

)ut$s%/us3n=y=9o)%yF{$#Zx=yz((#9$s%ygrB r&$pt$p7ouu!$te$!$#twuxm7|x8pt2

ds) uy7s9(t$s%o)n=r&$ttn=s?Ingatlah ketika Tuhanmu berfirman kepada para malaikat:

"Sesungguhnya Aku hendak menjadikan seorang khalifah di muka

bumi." mereka berkata: "Mengapa Engkau hendak menjadikan

(khalifah) di bumi itu orang yang akan membuat kerusakan padanya

dan menumpahkan darah, padahal kami senantiasa bertasbih dengan

memuji Engkau dan mensucikan Engkau?" Tuhan berfirman:

"Sesungguhnya Aku mengetahui apa yang tidak kamu ketahui."

Oleh karena itu, kita sebagai manusia mengemban amanah besar, yaitu

menjadi pemimpin kebaikan di muka bumi ini. Menurut Qardhawi (1998),

manusia sebelum memenuhi kewajiban memenuhi hak-hak orang lain dan

menjaga lingkungannya, manusia wajib terlebih dahulu memenuhi menjaga hak-

hak tubuh diri sendiri. Termasuk hak tubuh adalah, hendaknya manusia makan

5/24/2018 03520010.pdf

55/107

lii

ketika lapar, istirahat apabila lelah, membersihkannya ketika kotor, dan

mengobatinya ketika sakit.

Kesehatan merupakan salah satu nikmat dari Allah SWT yang sangat

besar. Di dalam Musnad Ahmad, juga di dalam kitab hadist lain menceritakan,

Abu Bakar As-Shiddiq berkata, Aku mendengar Rasulullah SAW bersabda:

,

)(

Mintalah (kalian) keyakinan dan kesehatan kepada Allah, karena

tidak ada (nikmat) yang diberikan Allah kepada seseorang yang lebihbaik dari kesehatan setelah keyakinan

Bahkan, dalam riwayat Tirmidzi, dari hadist Abu Hurairah, dari Nabi SAW;

bahwasanya beliau bersabda:

, :

,)(

Perkara yang pertama kali ditanyakan kepada seorang hamba pada

hari kiamat adalah tentang nikmat. Dia akan ditanya bukankah Kamimemberikan kesehatan pada tubuhmu dan menyegarkanmu dengan

air dingin?

Dari sinilah banyak ulama salaf yang mengatakan bahwa yang dimaksud dengan

nikmat pada firman Allah SWT surat At-Takasur ayat 8 yang artinya Kemudian

sungguh kalian akan ditanyai hari itu tentang kenikmatan adalah kesehatan

(Qardhawi, 1998).

Salah satu cara menunaikan hak-hak tubuh adalah mengobatinya ketika

tubuh sakit. Ada sejumlah hadist Nabi SAW yang menyebutkan beberapa macam

jenis obat-obatan untuk beberapa macam penyakit. Sehingga ada sebagian ulama

yang menyangka bahwa semua itu merupakan sebagian dari agama dan wahyu

5/24/2018 03520010.pdf

56/107

liii

Illahi. Akan tetapi pada kenyatannya, ada sebagian dari hal itu yang hanya

merupakan keahlian suatu kaum tertentu dan merupakan hasil-hasil yang

dihasilkan oleh kaum tersebut. Hasil-hasil keahlian tersebut sesuai dengan kondisi

suatu lingkungan tertentu dalam hal suhunya, iklimnya, dan keadaannya

(Qardhawi, 1998).

Oleh karena itu, jika ada suatu penyakit, manusia hendaknya berobat.

Apabila penyakit tersebut belum ada obatnya, maka manusia hendaknya mencari

sesuatu yang bisa mengobati penyakitnya. Manusia haruslah yakin bahwa semua

penyakit pasti ada obatnya, ini seperti hadist Rasulullah SAW, yang berbunyi:

) ) Setiap penyakit ada obatnya. Apabila obat suatu penyakit telah tepat,

sembuhlah dia dengan izin Allah Azza wa Jalla

Hadist di atas merupakan hadist riwayat Jabir r.a yang terdapat dalam kitab shahih

Imam Bukhari (Al-Din, 2002).

Sesungguhnya Nabi SAW merupakan contoh teladan yang baik dalam

memberikan petunjuk menuju kedokteran yang benar yang berdiri di atas ilmu

dan uji coba, bukan di atas khayalan dan omong kosong (Qardhawi, 1998). Oleh

karena itu, hendaknya manusia selalu berusaha mencari obat suatu penyakit

dengan ilmu yang dia miliki, dalam hal ini ilmu yang dimaksud adalah ilmu yang

berkaitan dengan kesehatan.

Pada saat ini, para ilmuwan banyak yang meneliti berbagai bahan alam

untuk dijadikan obat untuk suatu penyakit, salah satu bahan alam yang digunakan

tersebut adalah tumbuhan. Tanaman obat banyak digunakan masyarakat

5/24/2018 03520010.pdf

57/107

liv

menengah kebawah terutama dalam upaya pencegahan dan pengobatan suatu

penyakit. Hal ini dikarenakan, banyak orang beranggapan bahwa penggunaan

tanaman obat relatif lebih aman dibandingkan obat sintesis (Maheshwari, 2002).

Dalam perkembangan ilmu pengetahuan seperti saat ini, ternyata memang

banyak tumbuhan yang terbukti secara ilmiah bisa mengobati berbagai penyakit.

Dalam kisah nabi Yunus AS, juga dikisahkan bahwasanya Nabi Yunus pada

waktu dalam keadaan sakit (setelah ditelan ikan) diperintahkan oleh Allah untuk

memulihkan kondisi tubuhnya dengan memakan tumbuhan dari sejenis labu.

Kisah ini terdapat dalan surat Ash-Shaaffaat ayat 145-146 yang berbunyi:

*tt6us!#ty9$$/uu)y$uFu;/ r&un=tZtyfxi&)tKemudian Kami lemparkan dia ke daerah yang tandus, sedang ia

dalam keadaan sakit. Dan Kami tumbuhkan untuk dia sebatang pohon

dari jenis labu.

Dari ayat tersebut, manusia bisa mengambil suatu pelajaran bahwasanya di dalam

suatu tumbuhan selain mengandung sifat estetika juga terdapat manfaat tertentu.

Selain itu, antara tumbuhan yang satu dengan yang lainnya tidaklah mempunyai

manfaat yang sama (Jauhari, 1984). Hal ini sebagaimana firman Allah yang

terdapat dalam surat Ar-Rad ayat 4 yang berbunyi:

uF{$#s%N uyftGMy_ui5=ur&yuwu

#ux u5#u4s+&!$y/7nuex u$p|t/4n?t

5/24/2018 03520010.pdf

58/107

lv

bercabang dan yang tidak bercabang, disirami dengan air yang sama.

Kami melebihkan sebahagian tanam-tanaman itu atas sebahagian

yang lain tentang rasanya (dan bentuknya). Sesungguhnya pada yang

demikian itu terdapat tanda-tanda bagi kaum yang berfikir.

Salah satu tumbuhan yang telah terbukti banyak mengandung zat

bermanfaat adalah teh hijau (Camellia sinensis L.). Oleh karena itu, pada

penelitian ini digunakan teh hijau sebagai bahan alam dalam upaya pengobatan

penyakit diabetes mellitus dengan cara menurunkan aktivitas radikal bebas.

5/24/2018 03520010.pdf

59/107

lvi

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Rancangan Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang termasuk ke dalam

penelitian deskriptif kuantitatif. Rancangan penelitian yang digunakan dalam

penelitian ini adalah Rancangan Acak Kelompok (RAK) dengan lima kelompok

perlakuan dan empat ulangan.

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini akan dilakukan pada bulan Juni sampai Agustus 2007 di

Laboratorium Fisiologi Hewan dan Laboratorium Biologi Sel dan Molekuler,

Jurusan Biologi, Universitas Brawijaya Malang.

3.3 Variabel Penelitian

Variabel-variabel yang diamati adalah sebagai berikut :

a. Variabel bebas : Pemberian teh hijau (Camellia sinensis L.) dengan tiga

dosis yang berbeda.

b. Variabel terikat : Aktivitas radikal bebas pada mencit yang diabetes, yaitu

dengan mengukur kadar malondialdehyde (MDA) pada

hepar.

c. Variabel kendali : Jenis mencit yang digunakan merupakan mencit jantan

dari strain Balb/c, yang dikondisikan menjadi diabetes

dengan menginduksikan streptozotocin, diberi pakan pellet

5/24/2018 03520010.pdf

60/107

lvii

Turbo 521 produksi PT. Central Proteinaprima Surabaya

dan diberi minum air PDAM.

3.4 Populasi dan Sampel

Mencit yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit jantan dari

strain Balb/c yang berumur dua bulan dengan berat badan rata-rata 20 gram,

dengan jumlah 20 ekor.

3.5 Alat dan Bahan

3.5.1 Alat

Pada penelitian ini menggunakan alat-alat sebagai berikut: kandang hewan

coba, Glukometer (Accu Ceck Active), alat pencekok oral (gavage), Disposible

syrenge 1 ml, mortar, sentrifuge, water bath, tabung reaksi, timbangan analitik,

tabung eppendorf, mikropipet, dan satu set spektrofotometer.

3.5.2 Bahan

Pada penelitian ini menggunakan bahan-bahan sebagai berikut: Mencit

(Mus musculus), Streptozotocin, Teh hijau, Aquadest, TCA, Thiobarbiturat,

NaOH, PBS, NaCL, dan HCL.

3.6 Prosedur Kerja

3.6.1 Persiapan Hewan Coba

Sebelum diberi perlakuan, mencit terlebih dahulu diaklimatisasikan selama

satu minggu, diberi pakan pelet, dan diberi minum air yang bersumber dari

PDAM. Kemudian mencit dibagi menjadi 2 kelompok yaitu kelompok kontrol

mencit normal dan mencit diabetes. Untuk menginduksi diabetes, mencit diinjeksi

5/24/2018 03520010.pdf

61/107

lviii

STZ dengan menggunakanMultiple Low Dosis,yaitu sebesar 30 mg/kg BB yang

diinjeksikan sekali sehari selama 5 hari melalui intraperitonial. Sebelum

diinjeksikan, STZ dilarutkan dalam buffer sitrat pada pH 4,5 dan dihomogenkan

dengan menggunakan stirer (Damayanthi, 2006). Kemudian larutan STZ

diinjeksikan melalui intraperitoneal sebanyak 0,05 ml tiap ekor, dengan

konsentrasi STZ sebanyak 1.2 % (yaitu setiap 0.05 ml larutan mengandung STZ

0.6 mg).

3.6.2 Persiapan Perlakuan

3.6.2.1 Pengukuran Kadar Glukosa Darah

Sebelum perlakuan pemberian teh hijau, dilakukan pengukuran kadar

glukosa darah untuk memastikan bahwa 20 mencit telah mengidap diabetes.

Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan dengan cara mengambil darah mencit

melalui ekor yang terlebih dahulu dibersihkan dengan alkohol. Kemudian darah

diteteskan pada strip glukometer lalu dimasukkan ke dalam glukometer dan

dibaca kadar glukosanya.

3.6.2.2 Pembagian Kelompok Sampel

Setelah 20 mencit positif diabetes, mencit dibagi menjadi lima kelompok,

yang terdiri dari:

a. Kelompok kontrol negatif : mencit normal tanpa perlakuan

b. Kelompok kontrol positif : mencit diabetes tanpa diberi teh hijau.

c. Kelompok I : mencit diabetes, dan diberi teh hijau dosis I selama

14 hari.

5/24/2018 03520010.pdf

62/107

lix

d. Kelompok II : mencit diabetes, dan diberi teh hijau dosis II

selama 14 hari.

e. Kelompok III : mencit diabetes, dan diberi teh hijau dosis III

selama 14 hari.

3.6.2.3 Penghitungan Dosis Teh Hijau

Untuk mengetahui dosis teh hijau dengan cara mengkonversikan dosis

manusia ke dosis mencit, menurut Haqqi (2005) dosis teh hijau untuk manusia

(dengan BB rata-rata: 50 kg) adalah 4 cangkir perhari, sedangkan 1 cangkir

sebanding dengan 1 gram teh hijau. Jika dosis tersebut digunakan pada manusia

dengan BB 70 kg, maka dosis teh dapat dihitung menjadi (70/50) x 4 g = 5,6 g.

Menurut Kusumowati (2004), faktor konversi dari manusia (BB 70 kg) ke mencit

(BB 20 g) adalah 0,0026, maka dapat dihitung dosis mencit menjadi 0,0026 x 5,6

= 0,0145 g atau 14,56 mg.

Pada penelitian ini menggunakan tiga dosis, yaitu dengan menaikkan dosis

efektif dengan menggunakan deret hitung, maka diperoleh tiga dosis di bawah ini:

a. Dosis I : 14,56 mg/oral/hari.

b. Dosis II : 29,12 mg/oral/hari.

c. Dosis III : 58,24 mg/oral/hari.

3.6.3 Kegiatan Penelitian

3.6.3.1 Perlakuan Pemberian Teh Hijau

Teh hijau kering (yang didapat dari Perkebunan Teh di Lawang) dibuat

serbuk dengan cara diblender. Kemudian teh dicampur dengan aquadest menurut

5/24/2018 03520010.pdf

63/107

lx

dosis yang telah ditentukan dengan volume yang tidak melebihi kapasitas

intragastrik mencit (1 ml). Teh hijau diberikan pada mencit kelompok I,II, dan III

selama 14 hari dengan dosis yang telah ditentukan.

3.6.3.2 Pengukuran Kadar Radikal Bebas

3.6.3.2.1 Pembuatan Kurva Standart MDA

Ki

03520010.pdf

Documents

untuk tegaknya syiar

penulis menyadari skripsi

teknologi uin malang